一、单项选择题
1. 生物工程的上游技术是( )
A. 基因工程及分离工程
B. 基因工程及发酵工程
C. 基因工程及酶工程
D. 基因工程及细胞工程
2. 基因工程的单元操作顺序是( )
A. 增，转，检，切，接
B. 切，接，转，增，检
C. 接，转，增，检，切
D. 切，接，增，转，检
3. 下列哪种克隆载体对外源DNA 的容载量最大?( )
A. 质粒
B. 黏粒
C. 酵母人工染色体(YAC)
D. λ噬菌体
E. cDNA 表达载体
4. 同一种质粒DNA以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是()
A. OC DNA>SC DNA>L DNA
B. SC DNA>L DNA>OC DNA
C. L DNA>OC DNA>SC DNA
D. SC DNA>OC DNA>L DNA
5. 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是( )
A. 修复自身的遗传缺陷
B. 促进自身的基因重组
C. 强化自身的核酸代谢
D. 提高自身的防御能力
6. 基因工程的三大理论基石是（）
A. 经典遗传学、细胞生物学、微生物学
B. 分子遗传学、分子生物学、生化工程学
C. 动物学、植物学、微生物学
D. 生物化学、生化工程学、化学工程学
E. 生理学、仿生学、免疫学
7. 基因工程作为一种技术诞生于（）
A. 上世纪 50 年代初
B. 上世纪 60 年代初
C. 上世纪 70 年代初
D. 上世纪 80 年代初
E. 上世纪 90 年代初
8. 下述对DNA聚合酶的描述哪些是错误的（）。
A. 具有5’→3’外切酶活性
B. 具有3’→5’外切酶活性
C. 具有5’→3’聚合酶活性
D. 具有3’→5’内切酶活性
9. 下列关于酵母和哺乳动物的陈述错误的是（）
A．大多数酵母基因没有内含子，而大多数哺乳动物基因有许多内含子
B．酵母基因组的大部分基因比哺乳动物基因组的大部分基因小
C．大多数酵母蛋白比哺乳动物相应的蛋白小
D．尽管酵母基因比哺乳动物基因小，但大多数酵母蛋白与哺乳动物相应的蛋白大致相同
10. 下列哪一种不是产生星号活性的主要原因？( )
A. 甘油含量过高
B. 反应体系中含有有机溶剂
C. 含有非镁离子的二价阳离子
D. 酶切反应时酶浓度过低
11. 下面关于细菌人工染色体(BAC)的特征描述，除了( )外都是正确的。
A. 电激法可将大质粒转化大肠杆菌比酵母的转化率提高10—100倍
B. BAC载体在细菌中以环形超螺旋状态存在，分离操作相对容易
C. BAC载体在大肠杆菌宿主保持高拷贝
D. 克隆到BAC载体上的外源片段可以直接进行测序以获得末端序列
12. 下列哪一种酶作用时需要引物? ( )
A. 限制酶
B. 末端转移酶
C. 反转录酶
D. DNA连接酶
13. 下列关于酵母和哺乳动物的陈述错误的是（）
A．大多数酵母基因没有内含子，而大多数哺乳动物基因有许多内含子
B．酵母基因组的大部分基因比哺乳动物基因组的大部分基因小
C．大多数酵母蛋白比哺乳动物相应的蛋白小
D．尽管酵母基因比哺乳动物基因小，但大多数酵母蛋白与哺乳动物相应的蛋白大致相同
14. 下列四个 DNA 片段中含有回文结构的是( )
A. GAAACTGCTTTGAC
B. GAAACTGGAAACTG
C. GAAACTGGTCAAAG
D. GAAACTGCAGTTTC
15. 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是 ( )
A. 质粒DNA
B. 噬菌体DNA
C. 病毒DNA
D. 线粒体DNA
16. DNA的结构对转化的影响很大，一般说来，转化效率最高的是
A. 完整的线性双链DNA
B. 单链线性DNA
C. 完整的环状双链DNA
D. 开口的双链环状DNA
17. 限制性内切核酸酶可以特异性地识别：( )
A. 双链DNA 的特定碱基对
B. 双链DNA 的特定碱基序列
C. 特定的三联密码
D. 以上都正确
18. 双链DNA 中一段自我互补的序列被称为回文序列，这种序列一般不具有的特征为( )
A. 有对称轴
B. 两条链的5’ 3’方向的序列相同
C. 是Ⅱ类酶的识别序列
D. 可增强基因的表达
19. 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是 ( )
A. 质粒DNA
B. 噬菌体DNA
C. 病毒DNA
D. 线粒体DNA
20. 在下列酶中，催化反应不需要ATP 的是( )
A. EcoK
B. EcoB
C. T4DNA 连接酶
D. BamHl
21. 包涵体是一种 ( )
A. 受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒
B. 大肠杆菌的亚细胞结构
C. 噬菌体或病毒 DNA 的体外包装颗粒
D. 外源基因表达产物的混合物
22. T4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物
的关键基团是（）
A. 2' -OH 和 5' –P
B. 3' -OH 和5' –P
C. 3' -OH 和 2' –P
D. 5' -OH 和 3' –P
23. 在利用lacZ 失活的显色反应筛选法中，起诱导作用的是
A. IPTG
B. X-gal
C. α受体
D. EDTA
24．黏粒(cosmid)是一种人工建造的载体( )
A. 它具有 COS 位点，因而可进行体外包装
B. 它具有质粒 DNA 的复制特性
C. 进入受体细胞后，可引起裂解反应
D. 进入受体细胞后，可引起溶源化反应
25. 在基因工程操作中，转化是指（）
A．把重组质粒导入受体细胞 B．把DNA重组体导入受体细胞
C．把DNA重组体导入原核细胞 D．把DNA重组体倒入真核细胞
26. 关于回文序列，下列各项中，( )是不正确的
A. 是限制性内切核酸酶的识别序列
B. 是某些蛋白的识别序列
C. 是基因的旁侧序列
D. 是高度重复序列
27. 关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确? ( )
A. 具有可诱导性
B. 具有可转移性
C. 细菌生长的任何时期都可以出现
D. 不同细菌出现感受态的比例是不同的
28. 关于质粒的相容性，下面哪一种说法不正确? ( )
A. 不同相容群的质粒能够共存于同一个细胞
B. 质粒可以分成若干个不相容群，但不能分成若干个相容群
C. 如果a、b 两种质粒不相容，说明它们的复制机制相同
D. 属于同一个不相容群中的质粒，不仅复制机制相同，而且拷贝数和分子量
也相同
29. 关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确?( )
A. 在不同的宿主中具有不同的复制机制
B. 在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点
C. 在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶
D. 在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率
30. 关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确? ( )
A. 噬菌斑颜色变化
B. cⅠ基因失活造成的噬菌斑的变化
C. 对IPTG 的分解能力
D. 对X-gal 的分解与否
31. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（）
A. I类限制酶
B. Ⅱ类限制酶
C. Ⅲ类限制酶
D. 核酸内切酶
32. 下列哪种克隆载体对外源DNA 的容载量最大?( )
A. 质粒
B. 黏粒
C. 酵母人工染色体(YAC)
D. λ噬菌体
33. 粘末端连接的优点是操作简便且（）
A. 可产生新的酶切位点
B. 载体易自身环化
C. 易于回收片段
D. 具有方向性
34. T4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物
的关键基团是（）
A. 2' -OH 和 5' –P
B. 3' -OH 和5' –P
C. 3' -OH 和 2' –P
D. 5' -OH 和 3' –P
35. 根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，在识别序列中含量较高的是（）
A. GA
B. TG
C. GC
D. TC
36. 大肠杆菌出现感受态的生理期是（）
A. 潜伏期
B. 对数期
C. 对数后期
D. 平衡期
37.分子杂交的化学原理是形成（）
A.共价键
B.离子键
C.疏水键
D.氢键
38. II类限制酶反应中必须的阳离子是（）
A. Na +
B. Ca2+
C. Mg2+
D. Zn2+
E. Mn2+
39.多克隆位点( )
A. 含有许多拷贝的克隆化基因
B. 使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性
C. 含有许多拷贝的同一种限制酶位点
D. 使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性
40.在利用lacZ 失活的显色反应筛选法中，起诱导作用的是( )
A. IPTG
B. X-gal
C. α受体
D. EDTA
二、是非判断题
1. 迄今发现的质粒DNA 都是环状的。
2. 同一种限制性内切酶切割靶DNA，得到的片段两个末端都是相同的。
3. 人工染色体载体是利用染色体的复制元件来驱动外源DNA片段复制的。
4. 基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲
基化酶的活性。
5. 外源基因插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。
6. 迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA，又能作用于单链DNA。
7. 在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他的
限制性酶就不能切割了。
8. 以λ噬菌体为载体的筛选方法比较简便，凡能形成噬菌斑的就一定是重组体。
9. 所有真核生物mRNA都具有poly(A)尾巴。
10. 不匹配的黏性末端是不能通过黏性末端连接的。
11. 迄今为止，发现的质粒DNA都是环状的。
12. 如果PCR 的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA 增加了一倍，那么，10 个循环就扩增了1000 倍，20 个循环就扩增了100 万倍，30 个循环就扩增了10 亿倍。
13. 大肠杆菌连接酶能催化平末端和粘性末端的连接。
14. 重组体就是掺入或导入外源 DNA 后获得了新遗传标志的细菌细胞或其他受体细胞。
15. 载体就是指携带靶DNA片段进入受体细胞进行扩增或表达的质粒。
三、名词解释
1. 重组率
2. cDNA文库
3. 基因组文库
4. 同裂酶
5.感受态
6. 同尾酶
7. 穿梭质粒
8. 接头
9. 转化
10. 星号活性
四、填空题
1.基因工程的三大要素是指、、。
2. DNA 连接酶的功能是催化 DNA 中相邻的 5′磷酸基和 3′羟基末端之间形
成，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。
3. λ噬菌体载体分为和两种主要类型。
4. 人工诱导的感受态大肠杆菌细胞在温度为时吸附DNA，在时摄入
DNA。
5.限制性核酸内切酶在条件下，能切割一些与其特异识别顺序类似的序
列，降低特异性的现象称为酶的星活性。
6. 基因工程的单元操作顺序是、、、、。
7. DNA 连接酶的功能是催化 DNA 中相邻的 5′磷酸基和 3′羟基末端之间形成，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。
8. 实验室中，对克隆片段序列进行筛选与鉴定的常用方法是。
9. 人工诱导的感受态大肠杆菌细胞在温度为时吸附DNA，在时摄入DNA。
10.标记基因按其用途可分为和，其中前者用于鉴别目的载体的存在，而后者则是主要用来区别重组质粒与非重组质粒。
11. 绝大多数质粒DNA是，具有3种不同的构型： DNA分子、线形DNA分子、开环DNA分子。
12. EDTA是____________离子螯合剂。
13. 为了防止DNA的自身环化，可用脱去双链DNA 。
14.重组率是指在连接反应结束后，含有的重组分子数与所投入的之比。
15.有一些来源不同的限制性核酸内切酶识别的靶序列也各不相同，但都产生相同的粘性末端，这类酶称为。
五、问答题
1.在基因工程操作过程中，使用的克隆载体需要具备哪些条件？
2．限制性内切核酸酶的星号活性受哪些因素影响?
3.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。
4．简述Sanger双脱氧链终止法的基本原理。
5. 说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。
6. 简述PCR技术的基本原理。
7. 大肠杆菌作为基因工程受体菌具有哪些特点？
8. 真核基因在大肠杆菌中表达存在哪些障碍？
9. 说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。
10. 自然界中具备理想条件的质粒载体为数不多，通常需要进行改造，质粒改造
包括哪些基本内容?
11. 简述cDNA文库的概念及构建cDNA文库的基本操作步骤。
12. 酵母菌作为外源真核基因表达系统的优点有哪些？
13.什么是载体？理想的质粒载体应具备哪些条件?
14．简述构建基因组文库的技术要点。
六、论述题：
1.什么是基因组文库(genomic library)? 构建基因组文库，涉及哪些基本过程?它同遗传学上的基因库有什么不同?
2.什么是cDNA 文库(complement DNA library)?同基因组文库有何差别?
3.在基因工程操作过程中，选择受体细胞时需要具备哪些基本原则？
4.在基因工程操作过程中，使用的克隆载体需要具备哪些条件？
人教版高中生物选修三专题一基因工程测试题 一．选择题（共20小题，每题2分，共20分） 1．基因型为AaBbDd的二倍体生物，其体内某精原细胞减数分裂时同源染色体变化示意图如图．叙述正确的是（） A．三对等位基因的分离均发生在次级精母细胞中 B．该细胞能产生AbD、ABD、abd、aBd四种精子 C．B（b）与D（d）间发生重组，遵循基因自由组合定律 D．非姐妹染色单体发生交换导致了染色体结构变异 2．为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中． 下列操作与实验目的不符的是（） A．用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒 B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞 C．在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞 D．用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上 3．一对夫妇所生子女中，性状上的差异较多，这种变异主要来源于（） A．基因重组B．基因突变C．染色体丢失D．环境变化 4．不属于基因操作工具的是（） A．DNA连接酶B．限制酶C．目的基因D．基因运载体 5．下列哪一项不是基因工程工具（） A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶 C．运载体D．目的基因 6．下列关于基因重组和染色体畸变的叙述，正确的是（） A．不同配子的随机组合体现了基因重组 B．染色体倒位和易位不改变基因数量，对个体性状不会产生影响 C．通过诱导多倍体的方法可克服远缘杂交不育，培育出作物新类型
D．孟德尔一对相对性状杂交实验中，F1紫花植株自交后代发生性状分离的现象体现了基因重组 7．通常情况下，下列变异仅发生在减数分裂过程中的是（） A．非同源染色体之间发生自由组合，导致基因重组 B．非同源染色体之间交换一部分片段，导致染色体结构变异 C．DNA复制时发生碱基对的增添、缺失或改变，导致基因突变 D．着丝粒分开后形成的两条染色体不能移向两极，导致染色体数目变异 8．下列关于基因突变和基因重组的说法中，正确的是（） A．mRNA分子中碱基对的替换、增添、缺失现象都可称为基因突变 B．基因重组只发生有丝分裂过程中 C．非同源染色体上的非等位基因发生自由组合属于基因重组 D．基因型为DdEE的个体自交，子代中一定会出现基因突变的个体 9．基因工程的正确操作步骤是（） ①目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达④提取目的基因． A．③④②①B．②④①③C．④①②③D．③④①② 10．如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（） A．DNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶 B．限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶 D．限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶 11．科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义．下列有关叙述错误的是（） A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性 B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达 C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用 D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代 12．用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1 000bp（1bp即1个碱基对）的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如下图所示．该DNA分子的酶切图谱（单位：bp）正确的是（）
高中生物《基因工程》练习题 题号一二总分 得分 一、单选题（本大题共20小题，共20.0分） 1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（） A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（） A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快 D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 3.如图为基因表达载体的模式图。下列有关基因工程的说法错误的 是（） A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建 B. 任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别 C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子 D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体 4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避 限制酶的降解。下列在动物体内发生的过程中，与上述细菌行为相似的是（） A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体 B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子
C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合 D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫 5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒 作为载体（） A. B. C. D. 6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。下列相关 叙述正确的是（） A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键 B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞 C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测 D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术 7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（） A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列 B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合 C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因 D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制 8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确 的是（）
基因工程 一名词解释 DNA，1、限制与修饰系统：限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染，可讲解外 来 从而阻止其复制和整合到细胞中。一般来说，与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶，或者说是甲基化酶，能保护 自身的 DNA不被讲解。限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。 2、各种限制与修饰系统的比较 Ⅱ型Ⅰ型Ⅲ型 识别位点4~6bp，大多为回文序列二分非对称5~7bp 非对称 切割位点在识别位点中或靠近识别位点无特异性，至少在识别位点外100bp 识别位点下游 24~26bp 简答 1. 何谓 Star activity？简述Star activity的影响因素及克服方法？ 答：在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特征称为星星活性。 pH 引起星星活性的的因素：①高甘油浓度（>5%）；②酶过量（ >100U/μl ）；③低离子强度（ <25mmol/L）；④高(> ；⑤有机溶剂如DMSO （二甲基亚砜）、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等；⑥用其它二价阳离子 星星活性的抑制措施：①减少酶的用量，避免过量酶切，减少甘油浓度；②保证反应体系中无有机溶剂或乙醇；③提高离子强度到100 ～ 150mM（在不抑制酶活性的前提下）；④降低反应pH至；⑤使用Mg2+作为二价阳离子。 2. 试回答影响限制性内切核酸酶切割效率的因素？（影响酶活性的因素？） 答：外因：反应条件、底物纯度（是否有杂质、是否有盐离子和苯酚的污染）、何时加酶、操作是否恰当，反应体系的选择、反应时间的长短 内因：星星活性、底物甲基化、底物的构象 3、 DNA末端长度对酶切割的影响 答：限制酶切割 DNA 时，对识别序列两端的非识别序列有长度要求，也就是说在识别序列两端必须要有一定数量的 核苷酸，否则限制酶将难以发挥切割活性。在设计PCR引物时，如果要在末端引入一个酶切位点，为保证能够顺利切 割扩增的 PCR产物，应在设计的引物末端加上能够满足要求的碱基数目。一般需加 3 ～4 个碱基对。 4、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？ 答：将外源 DNA 或目的基因携带入宿主细胞的工具称为载体。载体应具备：①在宿主细胞内必须能够自主复制（具 备复制原点）；②必须具备合适的酶切位点，供外源DNA 片段插入，同时不影响其复制；③有一定的选择标记，用于 筛选；④其它：有一定的拷贝数，便于制备。 5 抗性基因（ Resistant gene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几种？并举两例说明其原理？ 答：氨苄青霉素抗性基因（ ampr）、四环素抗性基因（tetr ）、氯霉素抗性基因（ Cmr）、卡那霉素和新霉素抗性基因（ kanr , neor ）以及琥珀突变抑制基因supF 。 ⑴青霉素抑制细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结合，抑制转肽反应并抑制其活性。氨苄青霉素抗性Ampr 编码一个酶，可分泌进入细胞的周质区，并催化β - 内酰胺环水解，从而解除氨苄青霉素的毒性。 ⑵四环素与核糖体 30S 亚基的一种蛋白质结合，从而抑制核糖体的转位。 Tetr 编码一个由 399 个氨基酸组成的膜 结合蛋白，可阻止四环素进入细胞。 6. 何为α - 互补？如何利用α - 互补来筛选插入了外源DNA 的重组质粒？ 答：α - 互补指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β - 半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补。α - 互补是基于在两个不同的缺陷β－半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。实现α- 互补主要有两部分组成：LacZ △ M15 ，放在 F 质粒或染色体上，随宿主传代；LacZ' ，放在载体上，作为筛选标记，当在 LacZ' 中插入一个片断后，将不可避免地导致产生无α- 互补能力的β－半乳糖苷酶片断。在诱导物IPTG 和底物 X-gal （同时可作为生色剂）的作用下，含重组质粒的菌落不能产生有活性的β－半乳糖苷酶，不能分解 X-gal ，呈现白色，而含非重组质粒的菌落则呈现兰色。以此达到筛选的目的。 7、试简述λ噬菌体的裂解生长状态Lytic growth 和溶原状态 Lysogenic state 两种循环的分化及其调节过程？ 答：裂解生长状态是λ噬菌体在宿主中大量复制并组装成子代λ噬菌体颗粒，导致宿主细胞裂 解。溶原状态为λ噬菌体基因组 DNA 通过位点专一性重组整合到宿主染色体DNA 中随宿主的繁殖传到子代细胞。调节过程：由感染复数
基因工程练习题 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( ) A、繁殖速度快 B、遗传物质相对较少 C、多为单细胞，操作简便 D、DNA为单链，变异少 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因可以用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有( ) A、抗虫基因 B、抗虫基因产物 C、新的细胞核 D、相应性状 5、转基因动物转基因时的受体细胞是( ) A、受精卵 B、精细胞 C、卵细胞 D、体细胞 6、基因工程中常见的载体是( ) A、质体 B、染色体 C、质粒 D、线粒体 7、水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( ) A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制 C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达 8、运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是( ) A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质 C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因 D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 9、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A、大肠杆菌 B、酵母菌 C、T 噬菌体 D、质粒DNA 4 10、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（） A．能复制 B.有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA
基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。 4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。 5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。7．第一个分离的限制性切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性切核酸酶是_____________。 8．限制性切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。11．EGTA是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。 15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。 17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18．琼脂糖凝胶的分辨力与胶浓度的关系是。 19．如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为________________。20．影响限制性切酶活性的因素________________、________________、________________、________________。 21．连接反应的实用温度为________________。 22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。
基因工程测试题 一、选择题： 1.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A.大肠杆菌 B.酵母菌 C.肺炎双球菌 D.乳酸菌 2.下列有关基因工程的叙述，正确的是( ) A．DNA连接酶将碱基对之间的氢键连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大 D．常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等 3.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是( ) A.抗虫基因的提取和运输需要专用的工具酶和载体 B.重组DNA分子中替换一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染 D.转基因抗虫棉是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4.如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kan r)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养
基上生长。下列叙述正确的是( ) A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶 B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株 C.卡那霉素抗性基因(kan r)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶 的识别位点 D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传 5.上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述中正确的是( ) A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物 B.“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C.只有从转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中含有 D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，不能合成人白蛋白 6.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是( )
2018年高考生物专题练习 基因工程与细胞工程 1．(2017东北三省三校一联,38)马铃薯是重要的经济作物,人类在(马铃薯的)基因育种方面取得丰硕成果。（1）马铃薯是双子叶植物,常用__________法将目的基因导入马铃薯体细胞中。构建好的基因表达载体包括目的基因、__________、__________、__________、复制原点五部分。 （2）马铃薯得病会导致产量下降。基因工程中常用的抗病基因为__________(写一种即可)。 （3）科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计： ①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂__________,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢。 ②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前__________。 （4）将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行__________。 2．(2017湖北武汉一模,38)基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下： 第一步,从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”;第二步,构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neo R(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对,所以能像“准星”一样,将表达载体准确地带到靶基因的位置; 第三步,将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内靶基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造; 第四步,基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如图所示。 请根据上述资料,回答下列问题。 （1）实施基因工程的核心步骤是__________,基因表达载体中的__________是位于基因首端的有特殊结构的DNA片段;在构建的过程中所需要的工具酶是__________。 （2）如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是__________,原因是__________。 （3）上述资料中neo R基因的作用最可能是__________。为了鉴定目的基因是否成功表达,有时进行抗原—抗体杂交,目的蛋白相当于__________。 （4）该项技术具有广阔的应用前景,请试举一例：__________。 3．(2017河北衡水中学一模,38)科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题。
基因工程复习题 题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。 第一章绪论 1.名词解释： 基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。 遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义：基因工程。 克隆：无性(繁殖)系或纯系。指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。 2．什么是基因克隆及基本要点? 3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。 A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。 4.基因工程研究的主要内容是什么？ 基础研究： 基因工程克隆载体的研究 基因工程受体系统的研究 目的基因的研究 基因工程工具酶的研究 基因工程新技术的研究 应用研究： 基因工程药物研究 转基因动植物的研究 在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究 第二章基因克隆的工具酶 1.名词解释： 限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。 回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。 同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。 同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列 黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。 平末端：DNA片段的末端是平齐的。 限制性核酸内切酶的酶活性单位（U）：在酶的最适反应条件下，在50μl容积中，60分钟内完全切割1μg λDNA所需的酶量为1个酶活性单位（unit 或U） 限制性核酸内切酶的星活性：指限制性内切酶在非标准条件下，对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应，导致出现非特异性的DNA片段的现象。
．单选题 1下面是5种限制性内切酶对分子地识别序列和剪切位点图(J表示剪切点、切出地断面为黏性末端): 限制酶1: 限制酶2: 限制酶3: 限制酶4: 限制酶5: 请指出下列哪组表达正确( ) A.限制酶2和4识别地序列都包含4对碱基 B.限制酶3和5识别地序列都包含5对碱基 C.限制酶1和3剪出地黏性末端相同 D.限制酶1和2剪出地黏性末端相同 2、科学家用纳M技术制造出一种“生物导弹”，可以携带分子.把它注射入组织中，可以通过细胞地内吞作用地方式进入细胞内, 被释放出来, 进入到细胞核内, 最终整合到细胞染色体中，成为细胞基因组地一部分，整合到细胞染色体中地过程，属于( ) A.基因突变 B.基因重组 C.基因互换 D.染色体变异 3、某病毒地基因组为双链，其一条链上地局部序列为，以该链地互补链为模板转录出相应地 后者又在宿主细胞中逆转录成单链( 称为). 由这条链为模板复制出地单链上，相应地局部序列应为( ) A.B.C.D. 4、下列关于目地基因导入受体细胞地描述不正确地是( ) A.基因枪法导入植物体细胞地方法比较经济有效 B.显微注射技术是转基因动物中采用最多地方法 C.大肠杆菌最常用地转化方法是：使细胞地生理状态发生改变 D.农杆菌转化法是将目地基因导入植物细胞最常用地方法 5、科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体. 下列相关叙述中正确地是( ) ①该技术将导致定向变异 ②连接酶把目地基因与运载体黏性末端地碱基对连接起来形成氢键 ③蛋白质中地氨基酸序列可为合成目地基因提供资料 ④受精卵是理想地受体细胞 A.①②③④ B.①③④ C.②③④ D.①②④ 6、下面各项中与蛋白质工程没有直接关系地是( ) A.利用各种高科技手段分析蛋白质地分子结构 B.研究并改变某种蛋白质相关基因地碱基序列 C.设计和制造自然界中没有地人工蛋白质 D.用基因替换地方法治疗人地某种遗传病 7、下列关于基因工程技术地叙述，正确地是( ) A.切割质粒地限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B.反应中温度地周期性改变是为了聚合酶催化不同地反应 C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 8、从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强地多肽.目前在地 基础上研发抗菌性强但溶血性弱地多肽药物，首先要做地是( ) A.合成编码目地肽地片段 B. 构建含目地肽片段地表达载体 C.依据氨基酸序列设计多条模拟肽 D.筛选出具有优良活性地模拟肽作为目地肽
第二章 1. 名词解释：核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶、核酸外切酶、末端脱氧核苷酸转移酶 答： 核酸内切酶：是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶。 核酸内切限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。 同裂酶：识别位点的序列相同的限制性内切酶。 同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端。 核酸外切酶：是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶。 末端脱氧核苷酸转移酶：可以不需要模板，在单链DNA或突出的双链DNA 3’-OH端随机 添加dNTPs的酶 2. 限制性内切核酸酶的命名原则是什么？ 答：限制性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的，即：属名+种名+株名+序号； 首字母：取属名的第一个字母，且斜体大写； 第二字母：取种名的第一个字母，斜体小写； 第三字母：(1)取种名的第二个字母，斜体小写； (2)若种名有词头，且已命名过限制酶，则取词头后的第一字母代替。 第四字母：若有株名，株名则作为第四字母，是否大小写，根据原来的情况而定，但用正体。 顺序号：若在同一菌株中分离了几种限制酶，则按先后顺序冠以I、Ⅱ、Ⅲ、…等，用正体。 3．部分酶切可采取的措施有哪些？ 答：1）缩短保温时间 2）降低反应温度 3）减少酶的用量 4. 在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 答：回文序列是：5'-CATA TG-3， 5．什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响? 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松 动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因 条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星 活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种：(1)高甘油含量(>5％, v／v)；(2)限制性 内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)；(3)低离子强度(<25 mmol／L)；(4)高pH(8．0 以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等；(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如 Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 第三章 1．如何将野生型的λ噬菌体改造成为一个理想的载体? 答：①删除λ噬菌体的非必需区，留出插入空间；并在余下的非必须区内制造限制酶切点 ②引进某些突变表型，作为选择标记 ③突变某些基因，使它成为安全载体 ④删除λDNA必须区段上常用的限制酶切点
xxxXXXXX 学校XXXX 年学年度第二学期第二次月考 XXX 年级xx 班级 姓名：_______________班级：_______________考号：_______________ 一、选择题 （每空？ 分，共？ 分） 1、下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是 A ．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的 B ．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质 C ．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作 D ．基因工程完全不同于蛋白质工程 2、PCR 是一种体外迅速扩增DNA 片段的技术，下列有关PCR 过程的叙述，不正确的是 A ．变性过程中破坏的是DNA 分子内碱基对之间的氢键 B ．复性过程中引物与DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C ．延伸过程中需要DNA 聚合酶、ATP 、四种核糖核苷酸 D ．PCR 与细胞内 DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高 3、35．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述，正确的是（ ） A ．人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，小于凝血因子氨基酸数目的3倍 B ．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA 分子导入羊的受精卵 C ．在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D ．人凝血因子基因开始转录后，DNA 连接酶以DNA 分子的一条链为模板合成mRNA
4、ch1L基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因．为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞．技术路线如图所示，对此描述错误的是（） 5、下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是： A、同种生物的基因组文库大于cDNA文库 B、③表示PCR技术，用来扩增目的基因 C、从基因文库中要得到所需目的基因，可根据目的基因的有关信息来获取 D、只要基因的核苷酸序列已知，就只能通过人工合成的方法获取 6、图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序 列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为：C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列分析中正确的是：
2007-2008学年度东城中学高三生物第十二单元 基因工程练习题 1、基因工程又叫基因拼接技术。 (1)在该技术中，切割DNA 的工具是限制酶，它能识别某一特定核苷酸序列，使两个核苷酸之间的 断开。限制酶切割产生的DNA 片段末端有两种形式，分别是 、 。 (2)基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶，根据酶的来源不同可分为 、 两类，其中前者只可以连接 ，后者既可以连接 也可以连接 。 2.(10分)生物学家通过基因工程培育出了能够通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白。 （1） “分子手术刀” _ _ ， （2） “分子缝合针” ， （3） “分子运输车” 基因进入受体细胞的载体 。 （4）操作步骤：从人的___基因组文库_________获取目的基因；目的基因与 ____________结合构建基因表达载体；在基因表达载体中还应插入___________和 终止子。然后把基因表达载体导入牛的__受精卵__________，通过发育形成的牛 体细胞含人的_________________，成熟的牛产的的奶中含有 ___________________，证明基因操作成功。 （5）人的基因在牛体内能表达,说明人和牛___________ 3、限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G ↓GATCC —，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点 是—↓GATC —。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。 （1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 （2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 （3）在DNA 连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割 后形成的黏性末端能否连接？为什么？ ４、聚合酶链反应（PCR ）是生物学家在实验室以少量 样品制备大量DNA 的生化技术，反应中新合成的DNA 又可以作为下一轮循环反应的模板。其过程如右图所示： （1）反应系统中应加入哪些物质？__少量样品基因、A TP 、DNA 解旋酶等酶4种游 —↓GATC —……—↓GATC — — CTAG ↑—……— CTAG ↑— 用酶Ⅱ切割 目的基因 — GATC —……— GATC — —CTAG —……—CTAG — 目的基因
一、名词解释 1、分子生物学 2、基因工程 3、DNA的变性与复性 4、细胞学说 5、遗传密码的简并性 6、DNA半保留复制、半不连续复制 7、SD序列 8、开放阅读框（ORF） 9、多顺反子 10、蓝白斑筛选 11、中心法则 12、限制修饰系统 13、断裂基因 14、单链结合蛋白 15、核酶 16、密码子家族 17、TA克隆 18、PCR 19、SNP 20、操纵子学说 21、DNA重组技术 22、减色效应-增色效应 23、可变剪接 24、反转录 25、同尾酶 26、加帽反应 27、蓝白斑筛选 28、表观基因组学 29、DNA的溶解温度 30、DNA的大C值 31、重叠基因 32、引物酶 33、逆转录 34、限制性内切酶 35、载体的选择标记 36、DNA甲基化
37、端粒 38、端粒酶 39、前导链 40、启动子 41、反式作用因子 42、同义密码子 43、多克隆位点（MCS） 44、基因组计划 45、C值悖论 46、顺式作用元件 47、胸腺嘧啶二聚体 48、寄主的限制修饰现象 49、拓扑异构酶 50、DNA的溶解 51、拓扑异构体 52、间隔基因 53、假基因 54、同源异型蛋白 55、翻译 56、多重PCR 57、抗终止作用 58、SD序列 59、空载tRNA 60、cDNA RACE 61、分子杂交 62、cDNA文库 63、载体 64、RT-PCR 65、反义RNA 66、延伸tRNA 67、起始tRNA 68、探针 69、反式剪接 70、增强子 71、动物基因工程 72、基因组 73、限制性内切酶 74、单顺反子
75、密码子 76、转录 77、RNA干扰 78、中心法则 79、回环模型 80、TATA box 81、前导链 82、目的基因 83、RFLP 84、RACE 二、判断 1、大肠杆菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。( ) 2、DNA半保留复制时，后随链的总体延伸方向与先导链的延伸方向相反。( ) 3、原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。（） 4、以一条亲代DNA(3’→ 5’)为模板时，子代链合成方向5’→ 3’，以另一条亲代DNA链 5’→ 3’为模板时，子代链合成方向3’→ 5’。（） 5、RNA的生物合成不需要引物。（） 6、大肠杆菌RNA聚合酶全酶由4个亚基（α2ββ’）组成。( ) 7、大肠杆菌在多种碳源同时存在的条件下，优先利用乳糖。 ( ) 8、在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。（） 9、逆转录同转录类似，二者均不需要引物。（） 10、真核生物染色体核心组蛋白的乙酰化、组蛋白H1的磷酸化，都会使基因得以失活。（） 11、在原核细胞中，起始密码子AUG可以在mRNA上的任何位置，但一个mRNA上只有一个起 始位点。( ) 12、蛋白质生物合成过程中，tRNA在阅读密码时起重要作用，他们的反密码子用来识别mRNA上的密码子。( ) 13、表观遗传效应是不可遗传的。( ) 14、cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在有葡萄糖及cAMP较高时。( ) 15、DNA甲基化永久关闭了某些基因的活性，这些基因在去甲基化后，仍不能表达。 （） 16、RNA聚合酶催化的反应无需引物，也无校对功能。( ) 17、基因是存在于所有生命体中的最小遗传单位 18、人类基因组中大部分DNA不编码蛋白质 19、蛋白质生物合成过程中，tRNA在阅读密码时起重要作用，他们的反密码子用来识别 mRNA上的密码子。 ( )
基因工程测练题 1、将人的抗病毒干扰基因“嫁接”到烟草的DNA分子中，可使烟草获得抗病毒的能力，形成转基 因产品。试分析回答： (1) 人的基因工程之所以能接到植物体中去，原因是：。(4)不同生物间基因移植成功，说明生物共有一套，从进化的角度看，这些生物具 有。 (3) 烟草具有抗病毒能力，说明烟草体内产生：。 (4) 烟草DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达功能。这说 明。 (5) 有人认为，转基因新产品也是一把双刃剑，有如船能载舟也能覆舟，甚至可能带来灾难性的 后果，你是否支持这一观点？如果支持，请你举出一个可能出现的灾难性后果的实例： 。 2、1990年对一位缺乏腺苷脱氨酶基因，而患先天性体液兔疫缺陷病的美国女孩进行基因治疗， 其方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养，然后用逆转录病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。 （1）在基因治疗过程中，逆转录病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的，此基因工程中的目的基因是，目的基因的受体细胞是。 （2）将转基因白细胞多次回输到患者体内后，兔疫能力趋于正常是由于产生了，产生这种物质的两个基本步骤是、。 3、在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的 T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。 （1）科学家在进行上述基因操作时，要用同一种分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而黏合。 （2）将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的，原因。（3）种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是: 。
一．单选题 1、下面是5种限制性内切酶对分子的识别序列和剪切位点图(↓表示剪切点、切出 的断面为黏性末端): 限制酶1:限制酶2: 限制酶3:限制酶4: 限制酶5:请指出下列哪组表达正确( ) A.限制酶2和4识别的序列都包含4对碱基 B.限制酶3和5识别的序列都包含5对碱基 C.限制酶1和3剪出的黏性末端相同 D.限制酶1和2剪出的黏性末端相同 2、科学家用纳米技术制造出一种“生物导弹”,可以携带分子。把它注射入组织中,可以通过细胞的内吞作用的方式进入细胞内,被释放出来,进入到细胞核内,最终整合到细胞染色体中,成为细胞基因组的一部分,整合到细胞染色体中的过程,属于 ( ) A.基因突变 B.基因重组 C.基因互换 D.染色体变异 3、某病毒的基因组为双链,其一条链上的局部序列为,以该链的互补链为模板转录出相应的,后者又在宿主细胞中逆转录成单链(称为)。由这条链为模板复制出的单链上,相应的局部序列应为 ( ) A. B. C. D. 4、下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是( ) A.基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效 B.显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法 C.大肠杆菌最常用的转化方法是:使细胞的生理状态发生改变 D.农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法 5、科学家已能运用基因工程技术,让羊合成并由乳腺分泌抗体。下列相关叙述中正确的是( ) ①该技术将导致定向变异 ②连接酶把目的基因与运载体黏性末端的碱基对连接起来形成氢键
③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料 ④受精卵是理想的受体细胞 A.①②③④ B.①③④ C.②③④ D.①②④ 6、下面各项中与蛋白质工程没有直接关系的是( ) A.利用各种高科技手段分析蛋白质的分子结构 B.研究并改变某种蛋白质相关基因的碱基序列 C.设计和制造自然界中没有的人工蛋白质 D.用基因替换的方法治疗人的某种遗传病 7、下列关于基因工程技术的叙述,正确的是( ) A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B.反应中温度的周期性改变是为了聚合酶催化不同的反应 C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 8、从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽。目前在的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是( ) A.合成编码目的肽的片段 B.构建含目的肽片段的表达载体 C.依据氨基酸序列设计多条模拟肽 D.筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽 9、如图所示某湖泊的食物网,其中鱼、鱼为两种小型土著鱼,若引入一种以中小型鱼类为食的鲈鱼,将出现的情况是( ) A.鲈鱼的产量不能弥补土著鱼的减少量 B.土著鱼在与鲈鱼的竞争中处于劣势 C.浮游动物总量锐减后再急升 D.浮游植物总量急升后再锐减 10、在1957年,美国的生态学家H.T.Odum对佛罗里达州的银泉进行了生态系统营养级和能量流动的调查,下表是调查结果。表中的①②③④分别表示不同的营养级,⑤为分解者。表中NP=GP-R。下列叙述中不正确的是( )
基因工程复习题分；30个）分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10题型：名 词解释（104分。2个）20个）20分；论述题（简答题（绪论第一章 名词解释：1.基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，
对直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种遗传物质DNA生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义：基因工程。 克隆：无性(繁殖)系或纯系。指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA 分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。 2．什么是基因克隆及基本要点 3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。 A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。 4.基因工程研究的主要内容是什么 基础研究： 基因工程克隆载体的研究 基因工程受体系统的研究 目的基因的研究 基因工程工具酶的研究 基因工程新技术的研究 应用研究： 基因工程药物研究 转基因动植物的研究 在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究 第二章基因克隆的工具酶 1.名词解释： 限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。 回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。 同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。 同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列 黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。 平末端：DNA片段的末端是平齐的。 限制性核酸内切酶的酶活性单位（U）：在酶的最适反应条件下，在50μl容积中，60分钟内完全切割1g DNA所需的酶量为1个酶活性单位（unit 或U） 限制性核酸内切酶的星活性：指限制性内切酶在非标准条件下，对与识别序列相似的其它片段的现象。DNA序列也进行切割反应，导致出现非特异性 的．