微生物学教学组
(二00三年八月二十七日）
一、本课程的性质和任务
本课程为生物学各专业本科生的必修基础课。
通过学习微生物的形态结构、生理生化、生长繁殖、遗传变异、生态分布、传染免疫、分类鉴定以及微生物与其他生物的相互关系及其多样性，在工、农、医等方面的应用，了解该学科的发展前沿、热点和问题,使学生牢固掌握微生物学的基本理论和基础知识，了解微生物的基本特性及其生命活动规律，为学生今后的学习及工作实践打下宽厚的基础.
二、教学要求与教学方法
1．以现代观点审视和重新组织教学内容,使课程的内容和结构、概念的提法、名词的解释和语言运用等都适合现代生物学迅速发展的要求，建立新的、优化的微生物学课堂教学体系。
2．在课堂教学中以“打开窗口"、“安装接口"的方法反映当代微生物学科的成就，使学生在学习基础知识的同时，通过一定的“窗口”看到学科发展的前沿，通过“接口”看到目前学的基础知识与前沿的接轨，看到基础知识的延伸及与其他相关学科的密切联系,使学生在学习基础知识的同时获得一定量的最新信息,满足和激发学生的求知欲和主动学习的兴趣。
3．采用多媒体等现代化教学手段辅助教学，丰富教学内容，提高教学质量。
4．课堂教学与学生的课后复习、讨论及专题讲座相接合，并注意通过各种渠道保持与学生的联系，随时了解他们对教学的意见和要求,不断改进教学方法和教学手段。
三、教学学时分配和安排：
本课程讲授按每周4学时安排，全学时共54学时。
教学内容及具体学时分配如下:
一、绪论（4）
二、纯培养和显微技术(3)
三、微生物类群与形态（10）
四、微生物的营养（3)
五、微生物的代谢（4）
六、微生物的生长繁殖及其控制(4)
七、病毒(4)
八、微生物遗传(8）
九、微生物与基因工程(2）
十、微生物的生态（4）
十一、微生物的进化、系统发育与分类鉴定（4)
十二、感染与免疫(4)
四、教学内容和要求：
第1章：绪论
〖目的要求〗
通过本章的课堂教学，引导学生走进微生物世界,了解微生物是什么？做什么？以及它们与人类的特殊关系；明确微生物学作为一门独立学科在生命科学发展中的重要作用和地位；展望未来，激发学生的学习兴趣和明确肩负的重任。〖教学内容〗
1、武汉大学“微生物学"课程的建设与发展
2、本学期的教学安排
3、微生物与我们
4、微生物的发现和微生物学的建立与发展
5、微生物的类群及特点
思考题：
试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人,更是人类的朋友。
第2章：纯培养和显微技术
〖目的要求〗
通过本章的课堂教学，向学生介绍进行微生物学研究的基本技术,即无菌技术、纯种分离技术、培养技术和显微技术，使他们了解微生物学的基本研究方法和研究手段,为后面介绍其他微生物学相关知识打下基础。
〖教学内容〗
1、微生物的分离和纯培养
1.1无菌技术
1。2用固体培养基分离纯培养
武汉大学 2001年攻读硕士学位研究生入学考试试题 科目名称:分子生物学 科目代码: 477 一、解释概念(20分,每个4分) 卫星DNA 复制体逆转座子反式激活因子衰减子与衰减作用 二、填空(30分,每空1分,请将答案写在答卷上) 1. 从病毒到高等生物的研究表明,遗传物质是。 2. 冈崎片段的发现证实了双链DNA的复制,在复制过程中,一条新生链的合成 是的,称为链;而另一条链的合成是的,称为链。 3. 大肠菌中有三种DNA聚合酶,其中的pol I的作用是,而pol III的作用是。pol I和pol III都有的三种活性是、、。 4. 由于真核细胞染色体DNA的复制要有一段RNA为引物,因此线状的DNA复制后必须存在着5’端缩短的问题。已发现有一种端粒蛋白称为,它由构成,可以使单链DNA的5’延长。 5. 对DNA损伤有几种修复系统,其中只有修复系统可以造成DNA变异,与这一系统有关的一套基因平时受到一称为的抑制蛋白所抑制,它发挥抑制作用是结合在一段约20bp 长的称为的DNA序列上,当DNA损伤时,另一种蛋白质称为把这种抑制蛋白水解后,修复系统的基因才会被激活。 6. 真核细胞中有三种依赖于DNA的RNA聚合酶分别合成不同的RNA,RNA pol I负责合成,RNA pol II负责合成,RNA pol III负责合成。 7. 大分子互相作用是分子生物学的重要内容,包括蛋白质之间、蛋白质与DNA或RNA之间的互相作用,蛋白质有四种重要的结构花式与大分子互相作用有关,这些结构花式是, , 。 8. NO是气体小分子信号,它可由脱氨产生,它的作用方式是直接与酶作用使产生cGMP(环式GMP)。 9. 真核mRNA的5’端通常有帽子结构,3’端有polyA。在polyA上游有一保守序列称为polyA信号,其序列为。polyA能提高mRNA的翻译水平是由于: (1) (2) 。 10. G-蛋白关联受体是一类重要的细胞表面受体,它的结构特色是,它发挥信号传递作用的两条途径是途径和途径。 三、问答题(50分) 1. 说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分) 2. 简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分) 3. 简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分) 4. DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分) 武汉大学
（生物科技行业）考研武汉大学分子生物学名词
ModificationofDNAorRNA(DNA或RNA修饰)：在最初合成聚核苷酸链之后核苷酸上所做的任何改变。 Modifiedbases(修饰碱基)：除通常在DNA(T、C、G、A)和RNA(U、C、G、A)四种碱基以外的碱基，通常是在核酸合成后发生改变。Molecularchaperone(分子伴侣)：协助壹些蛋白质装配或者恰当折叠所需的蛋白质，但这种蛋白质且不是靶复合物的成分。 MonocistronicmRNA(单顺反子mRNA)：编码壹个蛋白质的mRNA。Monolayer(单细胞层)：指真核细胞在培养基上生长，只能形成壹个细胞深度的壹层。 Morphogen(形态发生因子)：诱导特别细胞型以依赖其浓度形式发育的因子。MPF(促成熟因子)：是二聚体激酶，包括p34催化亚基和周期蛋白调控亚基，其激活能引发有丝分裂进行。 MtDNA：线粒体DNA。 MTOC：见微管组织中心。 Multicopyplasmids(多拷贝质粒)：以大于壹个拷贝出当下细菌中的质粒。Multiforkedchromosome(多叉染色体)：在细菌中，有壹个之上复制叉，因为在第壹个复制循环结束之前第二个就已开始。 Multimericprotein(多亚基蛋白质)：由壹个之上亚基组成的蛋白质。
Mutagens(诱变剂)：通过诱导DNA上的突变增加突变率的物质。 Mutation(突变)：指基因组DNA序列上的任何改变。Mutationfrequency(突变频率)：在种群中某个突变被发现的频率。Mutationrate(突变率)：某个突变发生的速率，通常用每个基因每代出现的次数表示。 Myeloma(骨髓瘤细胞)：起源淋于巴细胞的壹个肿瘤细胞株，通常产生壹种免疫球蛋白质。 N Negativecomplementation(负互补)：当等位基因间互补允许多亚基蛋白质中突变亚基抑制野生型亚基的活性时发生。 Negativeregulators(负调控物)：通过关闭转录或者翻译来行使功能。Negativesupercoiling(负超螺旋)：双链DNA在空间以双螺旋链旋转方向相反的方向形成的扭曲。 Neutralsubstitution(中性置换)：蛋白质中不改变活性氨基酸的变化。 Nick(切口)：指双链DNA中壹条链上俩个相邻核苷酸间缺少磷酸二脂键。Nicktranslation(切口平移)：指大肠杆菌中DNA聚合酶I能够将切口作为壹个起点，将双链DNA中的壹条链分解且用新物质重新合成新链代之。可用来在体外
一.解释概念(20分,每个4分) 卫星DNA 复制体逆转座子反式激活因子衰减子与衰减作用 三、问答题(50分) 1. 说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分) 2. 简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分) 3. 简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分) 4. DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌 (E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分) 武汉大学2002分子生物学 三.问答: 1.简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分) 2.简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3.在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4. 你正在进行Southern blot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA 从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分)
一、下列名词翻译成中文，并简要解释 1、Domains and motifs 2、Alternative splicing 3、Reporter genes 4、The PCR cycle 5、Restriction mapping 6、Multiple cloning sites 7、DNA libraries 8、Proteomics 9、Replicon 10、Semi-conservative replication 二、简答题(共5题,每题8分,共40分) 1、请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。 2、简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。 3、简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物学上的重要性。 4、简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5、简述cDNA文库的构建过程。 三、论述题(共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分) 1、人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 2、什么是操纵子(operon)？试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。 3、请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。 4、试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面？ 5、限制性核酸内切酶有哪几种类型？哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么？请简要说明其理由。
第一章绪论 一、武汉大学“微生物学” 课程的建设与发展 二、本学期的教学安排 三、微生物与我们 四、微生物的发现和微生物学的建立与发展 （一）微生物的发现 （二）微生物学的奠基 1.巴斯德 2.柯赫 （三）微生物学发展过程中的重大事件 （四）20世纪的微生物学 （五）微生物学在生命科学发展中的重要地位 1、微生物是生物学基本理论研究中的理想实验对象 2．对生命科学研究技术的贡献 3．微生物与“人类基因组计划” （五)我国微生物学的发展 （六）21世纪微生物学展望 五、微生物的类群及特点 思考题：
1. 用具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物既是人类的敌人，更是我们的朋友？ 2. 为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”? 3. 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人? 第二章纯培养和显微技术 第一节微生物的分离和纯培养 一、无菌技术 1. 微生物培养的常用器具及其灭菌 2. 接种操作 二、用固体培养基分离纯培养 1. 稀释倒平板法 2. 涂布平板法 3. 平板划线法 4. 厌氧微生物的分离 三、用液体培养基分离纯培养 四、单细胞（孢子）分离 五、选择培养分离 1. 利用选择平板进行直接分离 2. 富集培养 六、二元培养物
第二节显微镜和显微技术 一、显微镜的种类及原理 1. 普通光学显微镜 2. 暗视野显微镜 3. 相差显微镜 4. 荧光显微镜 5. 透射电子显微镜 6. 扫描电子显微镜 7. 扫描隧道显微镜 二，显微观察样品的制备（略） 思考题： 1、为什么说Koch等建立的微生物纯培养技术是微生物学建立与发展的基石？一般可用哪些方法获得微生物的纯培养？ 2、微生物的最显著特征就是个体微小，通常只能通过显微镜进行观察。试列举在显微观察（光镜和电镜）中通过改变样品的反差以改善观察效果的技术及方法。 3、试利用表格形式对各类显微镜在原理、样品制备和观察方面的异、同进行概括、比较。 4、试找到一篇使用微生物照片的文献，分析该文为什么要使用微生物照片，采用的是何种显微观察技术？依你之见，该文作者的这张照片还可以用哪些技术获得？
考试复习重点资料（最新版） 资料见第二页 封 面 第1页
分子生物复习题及答案 一、填空题 1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA。 2．AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。 3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为3.4nm。 4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）的亲和力 5．天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。 二、选择题（单选或多选） 1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（C）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B．DNA突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 2．1953年Watson和Crick提出（A）。
A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述？（C、D）A．哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．DNA的变性（A、C、E）。 A．包括双螺旋的解链B．可以由低温产生 C．是可逆的D．是磷酸二酯键的断裂 E．包括氢键的断裂
武汉大学 2001 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、解释概念(20 分,每个4分) 1. Satellite DNA-卫星DNA,又称串联重复序列，由2~6个核苷酸组成的重复单位组成的串联重复。 2. Replisome-复制体,是指由多种复制相关蛋白组成的复合物。 3.逆转座子，指另一类能够通过逆转酶和整合酶共同作用介导转座的转座子 4. 反式激活因子，一类能结合到顺式作用元件上形式激活作用的蛋白质 5. 衰减子，原核生物操纵子上一段能够显著减弱或终止转录作用的核苷酸序列 衰减作用，指原核生物中根据底物浓度变化来调控基因转录进程的中断与否的一种调控机制。 三、问答题(50 分) 1.说出双链DNA 复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15 分) 2.简述增强子的特点和性质及作用机制。(10 分) 3.简述真核RNA 聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15 分) 4.DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII 等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA段克隆到pUC 质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R
菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10 分) 武汉大学 2002 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 三、问答: 1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA 聚合酶II 转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15 分) 2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4、你正在进行Southern blot 分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH 溶液中使DNA 变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA 从胶上转到硝酸纤维
微生物与发酵工程 13101002 朱梦雪发酵工程是生物工程的重要组成部分,也是现代微生物学的核心内容;任何产品的发酵生产都必须通过微生物发酵或细胞扩大培养才能实现。因此,微生物与发酵是紧紧联系在一起的。微生物发酵工程是加快发酵工程研究成果转化为生产力,取得最佳效益的重要手段。微生物科学工作者应不失时机地积极而科学地运用这种手段为社会社会主义市场经济服务。 根据文献的调查，微生物的发酵工程主要应用于以下几点： 首先是在农业生产上，巴西全国土壤生物研究中心的研究人员发现一种新固氮菌,即固氮醋杆菌(Aeetobaeterdiazotrophyeus)。这是人类发现的第一个有固氮能力的醋杆菌,生活在甘蔗根部,具有很强的抗酸性。由于它的高效固氮能力,可使甘蔗年产量提高2倍(由60吨/公顷提高到180吨/公顷)。在固氮菌的研究方面,我国作物茎瘤固氮根瘤菌的高效固氮活性,以及小麦、玉米、陆生水稻固氮根瘤菌研究取得重要进展;英国诺丁汉大学一个研究小组也获得田著根瘤菌进入小麦、水稻、玉米和油菜等非豆科植物侧根中形成小根瘤,且有固氮作用的类似结果。今年拟在埃及、印度、墨西哥分别进行小麦、水稻、玉米的田间试验。这些非豆科专性共生固氮菌尚处在试验研究阶段。而我国联合固氮微生物早已产业化生产,其产品推广应用于农业生产实践,获得了增产的效果。近又发现一些新的联合固氮菌如产酸克氏杆菌、植皮克氏杆菌(Klebsiellaplantieola)等,为扩大联合固
氮菌AIJ新品种的研制做出了新贡献。 其次是在生物材料方面。有很多生物材料都是应用微生物发酵来生产的。我了解到的有生物可降塑料、建筑用生物材料和壳聚糖材料。 生物可降解塑料:微生物合成塑料物质:加拿大蒙特利尔生物技 术研究所以甲醇为原料利用从土壤中选育的嗜甲基细菌生产聚件轻 基丁酸(PHB),在我国,武汉大学生物工程研究中心用圆褐固氮菌发酵生产PHB;中国科学院微生物研究所用真养产碱杆菌生产PHB,在培养基中累积的量达细胞干重的63%(W/W);山东大学微生物研究所用该菌生产PHB的研究取得类似结果。 建筑用生物材料：某些微生物及其代谢产物如橡胶物质、弹力纤维、高分子多糖等作为混凝土添加剂,制造富有弹性的牢固的生物混凝土材料是有可能的,提供生物建筑材料的另一种可能性是某些微生物—蓝细菌或微型藻类,它们有分泌石灰石(碳酸钙)能力。 多用途的壳聚糖材料：壳聚糖又叫脱乙酞基多糖,用途极其广泛,几乎各个行业都用得着它。从微生物发酵生产,如真菌细胞壁含几丁质成分20%一22%,毛霉细胞壁中几丁质含量高达30写一40%,利用黑曲霉或其他真菌来生产壳聚糖是完全可能的。 还有就是利用微生物发酵生产两类重要有机酸这里着重介绍两 类重要有机酸,都有可能通过微生物发酵途径索取。 衣康酸(itaconicac记)进人规模生产:衣康酸又称甲叉丁二酸,系一种不饱和的二梭酸,用途广、需求量大,它是制造合成树脂、合成纤维、塑料、橡胶、表面活性剂、去垢剂、润滑油添加剂等的原料,
2002年 三、问答： 1、简述（或绘图说明）真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程（15分） 2、简述（或绘图说明）色氨酸操纵子弱化的机制（15分） 3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质，这些述语是指什么现象？可用什么术语来描述这一类基因家族（5分） 4、你正在进行Southern blot分析，并刚刚完成凝胶电泳部分，下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链，为了节约时间，你跳过这一步，直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上，你将标记好的探针与膜杂交，却发现放射自显影结果是一片空白，哪里错了呢？（5分） 2001年 三、问答题（50分） 1．说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。（15分） 2．简述增强子的特点和性质及作用机制。（10分） 3．简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始（15分） 4． DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶，它是在大肠杆菌（E.coli）R株中发现的，它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一，它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA片段克隆到pUC质粒中，并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增，已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶，你设计如何做才能确保成功？为什么？（10分）
2003年分子生物学 一。下列名词翻译成中文，并简要解释4*10 1.Domains and motifs 2. Alternative splicing 3.Reporter genes 4. The PCR cycle 5.Restriction mapping 6.Multiple cloning sites 7.DNA libraries 8.Proteomics 9.Replicon 10. semi-conservative replication 二。简答题8*5 总计40分 1. 请列举三种以上的蛋白质纯化技术，并说明不同技术的简单原理。 2. 说说DNA损伤与DNA突变之间的区别和相互关系。 3. 简述密码的简并性（degeneracy）和同义密码子（synonymous codon）及其在生物上的重要性。 4. 简述原核生物转录起始与转录终止过程中涉及到的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5. 简述cDNA文库的构建过程。 三。问答题（1-4每题15，5题10，总计70） 1. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 2. 什么是操纵子（operon）?试说明色氨酸操纵子（Trp operon）在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。 3. 简要解释顺式作用元件与反式作用因子，并举二例说明他们的相互作用方式。 4. 试说明真核细胞与原核细胞在基因转录，翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异，表现在哪些方面？ 5. 限制性核酸内切酶有哪几种类型？哪一种类型的限制酶最适合于基因工程，为什么？请简要说明理由。 2004年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷 一名词翻译与解释 1synonymous codons 2RNA editing 3Spliceosome 4Microarray 5Plaque hybridization 6Open reading frame 7Ribozyme 8RFLP
分子生物学名词解释 1、gel electrophoresis(凝胶电泳) 2、restriction endonuclease(限制性内切酶) 3、hybridization(杂交) 4、probe（探针） 5、Autoradiogram（放射自显影） 6、DNA cloning 7、DNA ligase（DNA连接酶） 10、transformants（转化子） 11、copy DNA（cDNA） 12、DNA library 13、colony hybridization（菌落杂交） 14、oligonucleotide（寡聚核苷酸） 15、site-directed mutagenesis（定位突变） 16、shotgun sequencing（鸟枪法测序） 17、contig（叠连群） 18、annotation（注释） 19、transcriptome（转录组） 20、BLAST（基本局部比对搜索工具） （11.7.2015） 21、tandem mass spectrometry（MS-串联质谱） 22、interactome（互作组） 23、DNA foot printing（DNA足迹） 24、insulator（绝缘子） 25、homeodomain（同源结构域） 26、mediator（中介蛋白） 27、bromodomain（同源调节域） 28、chromodomain（染色质结构域） 29、locus control region-LCR（位点控制区域） 30、heterochromatin（异染色质） （11.10.2015） 31、euchromatin（常染色质） 32、epigenetic regulation（表观遗传调控） 33、constitutive expression（组成型表达） 34、operator（操作子） 35、operon（操纵子） 36、CTD（c端结构域） 37、lysogenically（溶源生长） 38、lytically（裂解） 39、prophage（原噬菌体） 40、antitermination（抗终止作用） 41、retroregulation（逆向调控）
武汉大学 2004年攻读硕士学位研究生入学考试试题 科目名称：分子生物学科目代码：813 注意：所有的答题内容必须答在答题纸上，凡答在试题或草稿纸上的一律无效。 一、下列名词解释翻译成中文，并简要解释（共10小题，每小题4分，共40 分） 1. Synonoymous codons 2. RNA editing 3. Spliceosome 4. Microarray 5. Plaque hybridization 6. Open reading frame 7. Ribozyme 8. RFLP 9. Site specific recombination 10. RNA interference 二、简答题（共5题，每题10分，共50分） 1.简述真核生物rRNA基因、tRNA基因和mRNA基因的转录机制。 2.原核生物和真核生物中存在哪些类型的转座子？其转座机理有哪些？ 3.简述真核生物DNA复制中，端粒复制与染色体其它部分DNA复制的异同和生物 学意义。 4.原核生物的蛋白质合成可分为哪些阶段？简述各阶段的主要事件。 5.列举4种可用来检测、鉴定转基因动植物的分子生物学技术和方法，简述选择这些 技术的理由。 三、论述题（共4题，每题15分，共60分） 1.试述环境因素对DNA的损伤以及生物体中存在的DNA损伤修复系统。如果DNA 损伤没有被修复会造成什么后果？ 2.试比较真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动 子的结构特点，各结构单元的功能是什么？为什么原核生物一种RNA聚合酶能识 别不同的结构基因？ 3.在进行基因工程时，载体是携带靶DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具， 请问一个载体应具有哪些基本特性和结构特点？ 4.人类基因组计划基本完成表明：人类基因组约有3x109bp（而大肠杆菌的基因组约 为4.6x106bp），其中仅有1%的基因组DNA直接编码蛋白质，约有24%的基因组 DNA为内含子，而75%的基因组DNA为其它非编码序列。试从（1）传代中遗传 信息的保持；（2）基因表达调控的角度来论述人类基因组如此排列的可能生物学意 义。
医学微生物名词解释 绪论 微生物(Microorganism)：自然界中一些个体微小、结构简单、肉眼直接看不到的微小生物。 微生物学(Microbiology)：用以研究微生物的分布、形态结构、生命活动、遗传与变异、在自然界的分布与环境相互作用以及控制它们的一门科学。 医学微生物学（Medical microbiology）：主要研究与人类医学有关的病原微生物的生物学性状、对人体感染和致病的机理、特异性诊断方法以及预防和治疗感染性疾病的措施，以控制甚至消灭此类疾病为目的的一门科学。 病原微生物(pathogenic microbes)：能引起人类和动、植物致病的少数微生物。 细菌学 第一章细菌的形态与结构 肽聚糖（Peptidoglycan）：是原核细胞型微生物细胞壁的特有成分，G+主要由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥构成，G-仅由聚糖骨架和四肽侧链两部分组成。 细菌L型（细菌细胞壁缺陷型bacterial L form）：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，细胞壁受损后仍能在高渗环境下存活的细菌。 专性厌氧菌(obligate aerobe)：缺乏完善的呼吸酶系统，利用氧以外的其他物质作为受氢体，只能在低氧分压或无氧环境中进行发酵的一类细菌。 磷壁酸(teichoic acid):为大多数革兰阳性菌细胞壁的特有成分，约占细菌细胞壁干重的20-40%，有2种，即壁磷壁酸和膜磷壁酸。 脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）：是革兰阴性菌外膜的组成成分，包括脂质A、核心多糖和O特异性多糖三部分，又称为内毒素。 中介体（Mesosome）：细菌部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物。 拟线粒体（Chondroid）:中介体的形成，有效地扩大了细胞膜面积，相应的增加了酶的含量和能量的产生，其功能类似于真核细胞的线粒体，故称为拟线粒体。 异染颗粒（metachromatic granule,又称迂回体volutin、极体polar body）：因嗜碱性较强，用美蓝染色着色深，可染成与细菌其他部位不同的颜色，故称异染颗粒。其主要成分是RNA和多偏磷酸盐。 质粒(plasmid)：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，为闭合环状的双链DNA，可携带遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状。 荚膜(capsule)：某些细菌细胞壁外包绕的一层黏液性物质，多为蛋白质或多糖的多聚体，凡粘液性物质牢固的与细胞壁结合，厚度大于0.2微米，边界明显者称为荚膜。 鞭毛(flagellum)：许多细菌，包括所有弧菌和螺菌，半数杆菌和个别球菌，菌体上附有的细长并呈波状弯曲的丝状物，少仅1~2根，多达数百根。 菌毛(pilus)：许多Gˉ菌和少数G+菌菌体表面存在的一种直的、比鞭毛更细、更短的丝状物，成为菌毛。
高校中微生物学的主要研究方向有：资源与应用微生物学 病原微生物学 微生物发酵与代谢工程 生物防治微生物学 环境微生物学 真菌学
微生物分子遗传与功能基因组学 海洋微生物学 1.资源与应用微生物学 微生物资源是地球上三大生物资源之一，微生物资源开发与利用具有重要的意义。许多高校已经把它作为一个独立的研究方向，并且也形成了各自的研究特色。 中科院微生物所，有微生物资源前期开发国家重点实验室，主要研究方向为微生物资源收集、微生物分类和功能评估、极端环境微生物。该所有中国科学院院士5名，拥有一支具有国际竞争力的研究队伍，仪器装备达到了国际先进水平。该所的微生物菌种保藏中心所保藏的菌种数量在国内首屈一指，真菌标本馆的标本数量则为亚洲之最。 云南大学，有教育部微生物资源研究开发重点实验室，主要研究领域有：放线菌生物学,微生物资源学,菌根生物学, 极端环境微生物学,其中放线菌方面研究处于全国先列，重点开展极端（重点是高温、高盐碱）环境或各种特殊环境(植物内生或海洋)下的放线菌资源收集、保存及分类学、系统学、生态学、生物地理学及其应用价值评估（活性筛选、代谢产物化学及酶学等）研究。 广西大学，有广西亚热带生物资源保护利用重点实验室，主要研究方向是，利用广西省丰富的微生物资源发掘、鉴定和克隆具有特殊用途微生物的功能基因，并对重要功能基因进行改造和利用；发现、分离和克隆农作物抗病虫功能基因、构建抗病虫作物新种质。 中国农业大学，有农业部农业微生物资源及其应用重点实验室，主要研究领域有微生物分类及系统发育、微生物生理及遗传学、发酵工程、药用及食用真菌、环境微生物学、分子病毒学和分子免疫学等，微生物学专业师资力量雄厚，有中国科学院院士李季伦教授等多名著名教授。 四川大学，微生物学为省级重点学科，拥有资源微生物及微生物生物技术四川省重点实验室，主要研究方向：资源微生物，天然产物，生态环境保护。 西北农林科技大学，拥有西北农林科技大学微生物研究中心，主要研究方向之一微生物资源多样性及利用研究，包括极端环境条件微生物的菌种资源、基因资源及多样性研究；根瘤菌为主的固氮微生物多样性及利用。 华南理工大学，主要研究华南地区丰富的微生物资源，包括微生物资源的采集和开发利用，进行微生物菌种筛选和改造，重点应用在工业、农业等领域的研究。 河北大学，有河北省微生物多样性研究与应用实验室。 黑龙江大学，有微生物资源挖掘与利用和微生物产品开发与制备方向的研究。 山西大学微生物资源与生态方面的研究等。
2001年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、解释概念（20分，每个4分） 卫星DNA 复制体 逆转座子 反式激活因子 衰减子与衰减作用 二、填空（30分，每空1分，请将答案写在答卷上） 1. 从病毒到高等生物的研究表明，遗传物质是。 2. 冈崎片段的发现证实了双链DNA的复制，在复制过程中，一条新生链的合成是的，称为链；而另一条链的合成是的，称为链。 3. 大肠菌中有三种DNA聚合酶，其中的pol I的作用是，而pol III的作用是。pol I和pol III都有的三种活性是。 4. 由于真核细胞染色体DNA的复制要有一段RNA为引物，因此线状的DNA复制后必须存在着5’端缩短的问题。已发现有一种端粒蛋白称为，它由构成，可以使单链DNA的5’延长。 5. 对DNA损伤有几种修复系统，其中只有修复系统可以造成DNA变异，与这一系统有关的一套基因平时受到一称为的抑制蛋白所抑制，它发挥抑制作用是结合在一段约20bp长的称为的DNA序列上，当DNA损伤时，另一种蛋白质称为把这种抑制蛋白水解后，修复系统的基因才会被激活。 6. 真核细胞中有三种依赖于DNA的RNA聚合酶分别合成不同的RNA，RNA pol I负责合成，RNA pol II负责合成,RNA pol III负责合成。 7. 大分子互相作用是分子生物学的重要内容，包括蛋白质之间、蛋白质与DNA或RNA之间的互相作用，蛋白质有四种重要的结构花式与大分子互相作用有关，这些结构花式是，，，。 8. NO是气体小分子信号，它可由脱氨产生，它的作用方式是直接与酶作用使产生cGMP（环式GMP）。 9. 真核mRNA的5’端通常有帽子结构，3’端有polyA。在polyA上游有一保守序列称为polyA信号，其序列为。polyA能提高mRNA的翻译水平是由于： （1）（2）。 10. G-蛋白关联受体是一类重要的细胞表面受体，它的结构特色是，它发挥信号传递作用的两条途径是途径和途径。 三、问答题（50分） 1．说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。（15分） 2．简述增强子的特点和性质及作用机制。（10分） 3．简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始（15分） 4．DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶，它是在大肠杆菌（E.coli）R株中发现的，它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一，它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA片段克隆到pUC质粒中，并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增，已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶，你设计如何做才能确保成功？为什么？（10分）
1.你认为样品制备和显微观察中（光镜和电镜）应通过哪些方法改变样品的反差以改善观察效果？ 标准答案: 光学显微镜：对样品染色后改善反差；更换聚光器和物镜，使用暗视野显微镜、相差显微镜使用荧光显微镜时针对不同的目标选用不同的荧光染料在相同条件下适当降低照明亮度电子显微镜：扫描电镜在进行样品制备时喷金透射电镜对样品进行负染、正染透射电镜用投影法制样 2.为什么在微生物学奠基后的数十年时间内，人们认为微生物学与普通生物学之间没有关系？二者是怎样实现交叉、融合的？ 微生物学和普通生物学都是在19世纪中叶奠基； 但二者的研究方法和研究兴趣完全不同 由于个体微小，对微生物的研究需要借助显微镜及注重微生物的群体，而以动植物为主要对象的普通生物学在研究时可以不借助显微镜，可以方便地对个体甚至个体的部分结构进行观察和研究 二者的研究兴趣也完全不同： 微生物学：寻找感染疾病的致病因子、免疫及疾病防治；寻找新的化学治疗药物、微生物代谢研究等。也就是更注重微生物对人类生活的影响及应用 普通生物学：高等动植物细胞的结构与功能、动植物的生态学、繁殖和发育、遗传以及进化等。也就是更加注重对生命基本活动规律的理论研究。 由于微生物个体十分微小，人们甚至怀疑动植物的生命活动规律是否适用于结构大大简单的微生物？ 这使得二者之间并无交叉。 20世纪上半叶，下列三个方面的研究进展使人们认识到微生物在生命本质上与动植物并无差别，推动了微生物学和普通生物学的交叉、融合。微生物也由于其结构简单、生长迅速、易于培养等特点逐渐成为研究很多基本生命活动规律的材料，成为生命科学研究的明星 1）肌肉的糖酵解和酵母菌乙醇发酵在本质上具有同一性； 2）动物需要的维生素和某些微生物生长需要的生长因子相同的化学本质上述研究使人们认识到一切生命系统在代谢水平上具有相同的本质，所有的生命形式具有“生物化学的同一性”3）生化突变可以用微生物遗传标记，以及细菌间水平基因转移途径的发现导致了微生物遗传学的建立，进一步的研究证实动植物的遗传规律同样适用于微生物。用微生物为材料进行的肺炎双球菌转化实验、病毒重组实验、噬菌体感染实验证实了核酸是遗传的物质基础，也标志着微生物学与普通生物学的汇合、交叉，微生物学被推到了整个生命科学发展的前沿，获得了迅速的发展，在生命科学的发展中作出了巨大的贡献。 1.培养微生物的常用器具中，（）是专为培养微生物设计的。 A. 平皿 B. 试管 C. 烧瓶 D. 烧杯 标准答案: A 2.（）可用来分离培养出由科学家设计的特定环境中能生长的微生物，尽管我们并不知道什么微生物能在这种特定的环境中生长。 A. 选择平板 B. 富集培养
2010年攻读硕士研究生学位研究生入学考试题分子生物学 科目代码638 一、名解（4*10=40） 1.epigenttic change 2.peptide mass fingerprinting 3.RNA splicing 4.house keeping gene 5.frame-shift mutation 6.DNA binding domain 7.Shine-Dlagarno sequence 8.Gel retardation 9.chromatin immunoprecipitation 10.Rho-dependent transcription termination 二、简答（5*10=50） 1.什么是CPG岛？一段DNA序列中的CPG岛高度甲基化的含义是什么？ 2.说出5种RNA的名称及其功能。 3.什么是enhancer？它有哪些特点？ 4.真枋生物DNA与原核生物DNA复制有哪些差异？ 5.简述突变类型及其遗传效应。 三、论述题（3*20=60） 1.请描述乳糖操纵子的调控机制。 2某科学家发现一种新的野生植物，准备对该植物开展分子生物学研究，请设计实验制备该植物的cDNA文库。 3.2009年三名美国科学家获诺贝尔生理或医学奖，请分析他们为什么获奖，解释他们对分子生物学的贡献。并用他们的发现解释克隆的多莉羊早衰死亡的一个原因。 武汉大学2012年攻读硕士学位研究生入学考试试题分子生物学 一、专业术语翻译与解释 1. base flipping 2. RNase P 3. histon chaperones 4. Viral-like retrotransposon 5. paracodon 6. trans-splicing 7. sliding clamp 8. initial transcribing complex 二、简答题 1、简述保证tRNA和mRNA正确配对的三种机制。 2、简述DNA复制中RNA引物的去除所需要的酶及其作用。 3、简述核糖开关的结构及其作用机制。 4、简述真核生物抑制子的作用方式。 5、简述细菌RNA聚合酶的校正机制。 三、论述题 1、从分子水平和感染条件解释λ噬菌体溶原生长途径的建立过程。
武汉大学2003年分子生物学 一、下列名词翻译成中文，并简要解释（共10小题，每题4分，共40分） 1、Domains and motifs 2、Alternative splicing 3、Reporter genes 4、The PCR cycle 5、Restriction mapping 6、Multiple cloning sites 7、DNA libraries 8、Proteomics 9、Replicon 10、Semi-conservative replication 二、简答题 (共5题,每题8分,共40分) 1、请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。 2、简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。 3、简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物学上的重要性。 4、简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5、简述cDNA文库的构建过程。 三、论述题 (共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分) 1、人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 2、什么是操纵子(operon)？试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。 3、请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。 4、试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面？ 5、限制性核酸内切酶有哪几种类型？哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么？请简要说明其理由。 武汉大学2004年分子生物学 一、名词翻译与解释 1、synonymous codons 2、RNA editing 3、Spliceosome 4、Microarray 5、Plaque hybridization 6、Open reading frame 7、Ribozyme
武汉大学生物工程硕士
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430139生物工程（Biotechnology Engineering） 全日制工程硕士专业学位 研究生培养方案 培养单位：生命科学学院(204) 药学院(306) 一、培养目标 舒红兵培养掌握生物工程领域坚实的基础理论和宽广的专业知识，具有较强的解决实际问题的能力，能够独立承担专业技术或管理工作，具有良好的职业素养的高层次应用型专门人才，具体要求为： 1.拥护党的基本路线和方针政策，热爱祖国，遵纪守法，具有良好的职业道德和敬业精神，具有科学严谨和求真务实的学习态度和工作作风，身心健康。 2.掌握本领域的基础理论、先进技术方法和手段，在领域的某一方向具有独立从事工程设计、工程实施，工程研究、工程开发、工程管理等能力。 3.掌握一门外国语。 二、领域简介 主要涵盖：植物生物技术、动物生物技术、生物技术医药、生态技术、发酵工程、基因工程、蛋白质工程、细胞工程、生化工程等。 三、招生对象与学习年限 具有国民教育序列大学本科学历( 或本科同等学力) 人员。 采用全日制学习方式，学习年限一般为2年。 四、培养方式 采用课程学习、实践教学和学位论文相结合的培养方式。 课程设置体现厚基础理论、重实际应用、博前沿知识，着重突出专业实践类课程和工程实践类课程。实践教学是全日制工程硕士研究生培养中的重要环节，鼓励工程硕士研究生到企业实习，可采用集中实践与分段实践相结合的方式。工程硕士研究生在学期间，必须保证不少于半年的实践教学，应届本科毕业生的实践教学时间原则上不少于1年。 五、课程设置 攻读本领域工程硕士学位的研究生，应获得总学分不少于34学分： （一）学位课程不低于20学分，包括公共课10学分、专业必修课10学分； （二）选修课程不低于8学分； （三）专业实践6学分。 另外，须完成开题报告、论文中期报告两个必修环节。具体课程设置及学分要求见附表。 六、实践环节