HPLC法测定枳壳、香园、柚皮中柚皮苷含量
【摘要】目的：比较枳壳、香园、柚皮中柚皮苷的含量差异。方法：采用高效液相色谱法测定枳壳、香园、柚皮中柚皮苷的含量。色谱柱为Hypersil C18（5μm，150mm×4.0mm），流动相为甲醇-水-乙酸（35：61：4），流速为0.8ml/min，检测波长为283nm。结果：枳壳中柚皮苷的含量为12.41%，香园中柚皮苷的含量为8.72%，柚皮中柚皮苷的含量为2.74%。结论：通过比较得出柚皮苷含量为枳壳>香园>柚皮。
【关键词】HPLC；枳壳；香园；柚皮；柚皮苷
【Abstract】Objective：To compare the content of naringin in Fructus Aurantii and Citrus wilsonii Tanaka and pummelo pericarp. Methods：the content of naringin in Fructus Aurantii and Citrus wilsonii Tanaka and pummelo pericarp were measured by the method of HPLC. The chromatographic conditions were：Hypersil column （C18，5μm，150mm×4.0mm），methel-water-acetic acid（35：61：4）as mobile phase，the detection wavelength at 283 nm and the flow rate being 0.8ml/min. Results：The contents of naringin in Frutus Aurantii is 12.41%，the contents of Citrus wilsonii Tanaka is 8.72%，the content of naringin in pummelo pericarp is 2.74%. Conclusion：By conparison，the content of naringin in Fructus Aurantii is the highest，follow by the Citrus wilsonii Tanaka，and pummelo pericarp at least.
【Key words】HPLC；Fructus aurantii；Citrus wilsonii tanaka；Pummelo pericarp；Naringin
枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实。性微寒，味苦、辛、酸。入肺、脾、大肠经。功能理气宽中，行滞消胀。主治胸肋气滞、胀满疼痛、食积不化、痰饮内停、胃下垂等[1]。香圆（Citrus wilsonii Tanaka）来源于芸香科（Rutaceae）柑桔属（Citrus），是中药枸橼的两大植物来源之一。具有理气和中、化痰止咳的功效，中医用于缓解胃腹胀痛、呕吐、止咳嗽等症[2]。柚是柑橘中的一大类，是人们喜爱的水果之一。枳壳、香园、柚皮中都含有柚皮苷，柚皮苷是一种二氢黄酮类化合物，具有抗氧化、抗病毒、抗癌、抑菌以及增加其他药物利用度等重要生物活性[3-5]。本实验主要是采用高效液相色谱法分别测定枳壳、香园、柚皮中柚皮苷的含量，然后对三种供试品中的柚皮苷含量进行比较分析。为柚皮苷活性成分提取原料的选择提供理论依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
美国Aglient 1100 高效液相色谱仪，VWD紫外检测器，Aglient 化学工作站，Millipore Simplicity-185 超纯水器，BT224S电子天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司）。
柑橘皮中柚皮苷的研究价值及发展前景 【摘要】：我国是柑橘的重要原产地之一，柑橘资源丰富，优良品种繁多柚皮苷是一种二氢黄酮类化合物，具有抗癌、抑菌、抑酶、抗氧化、降血胆固醇、降低毛细血管脆性，改善微循环，治疗非典型性肺炎等生理活性，在医药和食品等领域具有极大的应用价值。 【关键词】：柑橘；柚皮苷；种植 1 柑橘的种植及产量 柑橘主要分布在北纬35°以南的区域，性喜温暖湿润，有大水体增温的地域可向北推进到北纬45°。世界有135个国家生产柑橘，年产量10282.2万吨，面积10730万亩，均居百果之首，产量第一位的数巴西，2425.26万吨，第二位数美国，1633.52万吨，中国第三，1078万吨，再后是墨西哥、西班牙、伊朗、印度、意大利等国。2005年，美国柑橘的产量有16亿箱，巴西即达到1,346.4万吨至1,387.2万吨。 2 柚皮苷的药用价值 柚皮苷是一种广泛存在十芸香科植物相桔，类水果中的一种双氢黄酮类化合物。纯柚皮苷是一种自色粉末状固体。据报道柚皮苷是一种二氢黄酮类化合物，具有抗癌、抑菌、抑酶、抗氧化、降血胆固醇、降低毛细血管脆性，改善微循环，治疗非典型性肺炎等生理活性，在医药和食品等领域具有极大的应用价值。在食品工业上，柚皮苷既可作为大然色素、风味改良剂和苦味剂用于食品、饮料的生产，又可作为合成新型甜味剂柚苷二氢查耳酮和新橙皮苷二氢查耳酮的原料。这两种甜味剂不仅甜度高，分别为蔗糖的300倍和1000倍，甜味持久，而且安全性高，是新一代无毒、低能量、防龋齿的高甜度的甜味剂。在医药工业上，柚皮苷可用于生产防治心脑血管疾病、镇痛、清热及消炎药物。此外，柚皮苷还能用于制备多种高附加值的有机物如鼠李糖、柠檬索( citrin )酸性偶氮染料以及具有更高生物活性和药用价值的半合成黄酮类化合物。 3 柚皮苷的提取 柚皮苷大部分存在于柑橘加工的废弃物中，如果皮、果囊中，其中成熟的果皮和组织中柚皮苷的含量最高(内果皮30%—50%，桔络、核、果肉中30%—50%，外果皮10%—20% ，汁液和桔囊中含量较低1 %—5%。柑橘皮中柚皮苷含量丰富，每个柑桔中大约含lg左右的柚皮苷，大量的柑橘皮资源成为柚皮苷的很有前途的来源，在食品工业中柚皮苷可作为天然色素、风味改良剂和苦味剂等用于食品和饮料的生产。通过用碱提酸沉法：用饱和Ca(OH)2溶液浸提，用HCL溶液沉淀的方法提取柚皮苷。
柚皮苷 【产品名称】柚皮苷、柚甙、柑橘甙、异橙皮甙 【英文名】naringin 【植物来源】柚皮苷主要存在于芸香科植物柚(Citrus grandis)果实，葡萄柚(Citrus paradisi)、橘、橙的果皮和果肉中 【提取部位】柚、橘、橙的果皮和果肉 【活性成分】柚皮甙、柚皮苷 【CAS 】10236-47-2 【规格】98% 【检测方法】HPLC 【外观】柚皮苷为淡黄色粉末或类白色粉末。属于黄酮类化合物 【分子式】C27H32O14
【分子量】580.53 【功能】柚皮苷具有抗炎、抗病毒、抗癌、抗突变、抗过敏、抗溃疡、镇痛、降血压活性，能降血胆固醇、减少血栓的形成，改善局部微循环和营养供给，可用于生产防治心脑血管疾病。 【用途】 （1）柚皮苷抗菌：对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒杆菌的作用较其甙元为弱。 （2）柚皮苷抗炎：小鼠腹腔注射100mg/kg，可降低甲荃性足踝浮肿。大鼠皮下注射100mg/kg亦有显著的抗炎作用，这与降低毛细血管通透性有关。 （3）柚皮苷抗病毒：200μg/ml浓度对水疱性口炎病毒有很强的抑制作用。对小鼠病毒感染有保护作用，给药组存活时间较对照组显著为长。 （4）柚皮苷抑制眼醛糖还原酶的作用：在大鼠体内，
10-4mol/L浓度的熔液抑制作用为80%。这种作用可能对治疗糖尿病白内障有用。 （5）柚皮苷作苦味剂：其苦度相当于奎宁（金鸡纳碱）苦度的1/5。但柚（甙）配基7-芸香糖则无苦味。柚子和酸橙苦味即为含本品所致。此外，尚有抗过氧化作用。也是柑桔属中可刺激蓝凤蝶（Pupilio protenor）产卵的类黄酮类物质之一。 （6）柚皮苷可用作合成新橙皮甙和新橙皮甙二氢查尔酮的原料。在碱性条件下，吡喃酮环开裂，经氢化处理，可制备二氢查尔酮甜味剂。 （7）柚皮苷少量应用时，可使会阴部肿胀，刺激脊髓勃起中枢而使性功能亢进。 【保质期】2年 【贮藏】阴凉、干燥、避光保存 【包装】25千克/纸板桶，内衬双层塑料袋。
布洛芬片质量标准 含布洛芬（C13H18O2）为标示量的98.0%-105.0% 【性状】白色或粉红色圆形双面微凸包衣片 【鉴别】 （1）取细粉适量（约相当于布洛芬0.5g），加丙酮20ml提取，滤过，滤液蒸发使自然干燥（不加热用普通空气挥干），残渣红外吸收图谱（附录）与布洛芬参考图谱一致（RS186）。 （2）取1项下的残渣适量，用石油醚（40-60℃）重结晶后测定其熔点约为75℃。【检查】 溶出度：取本品1片，照溶出度测定法（第二法），以磷酸盐缓冲液pH7.2溶液900ml为溶出介质，转速每分钟50转，经45分钟时取溶液10ml，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液适量（400mg量取2ml;600mg、800mg量取1ml）置100ml 量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取布洛芬对照品10mg置50ml量瓶中，用溶出介质溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml 置另一50ml量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，作为对照品品溶液，照紫外－可见分光光度法在221nm的波长处测定吸光度，计算每片的溶出量，限度为标示量的70%，应符合规定。 有关物质：高效液相色谱法测定。 色谱条件： 色谱柱：填料为常规色谱分析柱ODS2不锈钢色谱柱（15cm×4.6mm），用十八烷基硅胶（Spherisorb ODS2）为填充剂封端（5微米）。 流速：2ml/分钟；检测波长：214nm；进样量：20μl。 流动相：磷酸：乙腈：水（0.5：340：600）混匀后，用水稀释至1000ml,过滤脱气即得。 溶液制备： 溶液（1）：取本品的细粉适量（约相当于布洛芬0.2g），加30ml甲醇，振摇30分钟，再加入30ml甲醇，用水定容至100ml，混匀，用超细玻璃纤维过滤纸过滤（GF/C是合适的）。 溶液（2）：取溶液（1）1ml用流动相定容至100ml，即得。 溶液（3）：取布洛芬对照品50mg置25ml量瓶中，加0.006%的2-（4-丁基苯基）丙酸对照品溶液〔2-（4-丁基苯基）丙酸对照品溶液制备：吸取1体积2-（4-丁基苯基）丙酸对照品，用甲醇定容至10体积〕甲醇溶液2.5ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀即得。 检测： 在开始试验前，用流动相平衡柱子45分钟，调节灵敏度使溶液（2）峰高为满量程的70-90%，记录色谱图至主峰（布洛芬峰）保留时间的1.5倍。 按上述试验条件进样，布洛芬（主峰）保留时间约为20分钟，在溶液（3）色谱图中，测量2-（4-丁苯基）丙酸的峰高为（a）,布洛芬峰低点的峰高为（b）, 若a大于1.5b，则符合分析要求，如果不符合，可用乙腈调流动相使之符合要求。结果判定： 溶液（1）色谱图中，若有2-（4-丁苯基）丙酸峰，其峰面积不得大于溶液（3）中2-（4-丁苯基）丙酸峰的峰面积（0.3%）；其他单个杂质峰面积不得大于溶液（2）中主峰面积的0.3倍（0.3%）；其他杂质峰峰面积的总和不得大于溶液（2）中主峰面积的0.7倍（0.7%）；杂质峰面积小于溶液（2）中主峰面积的0.1倍（0.1%）
2004,517(2):53 63. [7]朱志宏,梁胜华.高效液相色谱法测定地红霉素肠溶片中地红 霉素的含量[J].中南药学,2007,5(2):89 90. [8]M ar a J os Gon z lez de la H ueb ra,Ursula Vin cent,Guy Bor din,et a1.C haracterisation of dirith romycin an d spiramycin u sing high perform an ce liquid ch rom atography and direct infus ion mass spectrometry[J].Analytica Chimica Acta,2004,503 (2):247 256. [9]关荣才,周志凌.反相高效液相色谱法测定地红霉素的含量 [J].安徽医药,2001,12(3):54 56. [10]张玉,马力,张驰.地红霉素肠溶微丸胶囊的生物等效性 [J].中国医院药学杂志,2007,27(6):1440 1442. [11]张树清,崔文奇,王东凯,等.H PLC测定地红霉素肠溶微 丸的有关物质[J].中国实用医药,2008,1(6):57 59. [12]许卫.高效液相色谱法测定红霉素的含量[J].海峡药学, 2004,16(5):147 149. (收稿日期:2010 10 08;修回日期:2010 10 23) 高效液相色谱法测定不同大小柚果中柚皮苷的含量 张婷1,毛新亮1*,郭晓蕾1,温玉婷2,余巧2,罗爱勤2(1.无限极(中国)有限公司,广州 510665; 2.中山大学药学院,广州 510080) 摘要:目的 测定不同大小柚果中柚皮苷的含量。方法 采用H P LC法,以甲醇 醋酸 水(35 4 61)为流动相,流速为1 5mL min-1,检测波长为283nm。结果 柚皮苷的线性范围为2 0~20 0 g(r=0 9990),柚果中柚皮苷平均含量为169 8mg g-1,RSD1 6%,加样回收率为97 4%,R SD为2 0%,柚皮苷含量随柚果果径增大而下降。结论 柚果果径大小可作为控制药材质量的标准之一。 关键词:柚果;柚皮苷;高效液相色谱 中图分类号:R927 2,R284 1 文献标识码:A 文章编号:1672 2981(2010)11 0839 03 do i:10 3969/j issn 1672 2981 2010 11 013 Determination of naringin from different sizes of Citrus grandis(L )Osbeck by HPLC ZH A NG T ing1,M A O Xin liang1*,G U O Xiao lei1,W EN Y u ting2,YU Q iao2,L U O A i qin2(1.I nif initus(Chi na)Comp any Ltd,Guangz hou510665;2.Schoo l of Phar maceutical Sciences,S un Y at sen Univer sity,Guangz hou 510080) Abstract:Objective T o det ermine the nar ingin from differ ent sizes the Citr us gr andis(L )O sbeck.Methods H PL C method w as used.M ethano l acetic acid water(35 4 61)w as used as the mobile phase.T he flow rat e was 1 5mL min-1,and the deter minatio n wav elength was283nm.Results T he linear r ang e of nar ingin was 2 0-20 0 g(r=0 9990).T he av erag e co ntent of nar ingin in Citr us g randis(L )O sbeck was169 8mg g-1w ith RSD of 1 6%.T he recov ery w as97 4%w ith RSD of2 0%.T he nar ingin content declined w ith the incr ease of the diameter of Citr us gr andis(L )O sbeck.Conclusion T he size o f Citr us gr and is(L )Osbeck can be used as a quality contro l crit erio n fo r medicinal herbs. Key words:Citr us g r andis;nar ing in;H PL C 中国药典2010版一部化橘红为芸香科化州柚Citr us gr and is!T o mento sa?或柚Citr us gr and is(L )Osbeck的未成熟的或近成熟的干燥外层果皮。芸香科植物柚作为化橘红药材正宗来源的一种,与化州柚相比,具有分布广泛,产量大等优点。而柚变种甚多,其著名品种有文旦柚、沙田柚、坪山柚、四季抛、大红抛等。本研究柚果是广东梅州金柚的幼果,即芸香科植物柚Citr us gr and is(L )O sbeck的幼果为原料切片干燥而成。性味辛苦温,归肺、脾经,具有理气 作者简介:张婷,女,硕士,主要从事产品质量控制及中药保健品开发,T el:(020)38167249,E mail:tinca_zh ang@infin tu s com cn *通讯作者:毛新亮,男,硕士,主要从事保健食品开发及质量监控等研究工作,T el:(020)38167252,E mail:en ginemao@yahoo com cn 中南药学2010年11月第8卷第11期 Cen tral South Pharmacy.November2010,Vol 8No 11 839
HPLC法测定枳壳、香园、柚皮中柚皮苷含量 【摘要】目的：比较枳壳、香园、柚皮中柚皮苷的含量差异。方法：采用高效液相色谱法测定枳壳、香园、柚皮中柚皮苷的含量。色谱柱为Hypersil C18（5μm，150mm×4.0mm），流动相为甲醇-水-乙酸（35：61：4），流速为0.8ml/min，检测波长为283nm。结果：枳壳中柚皮苷的含量为12.41%，香园中柚皮苷的含量为8.72%，柚皮中柚皮苷的含量为2.74%。结论：通过比较得出柚皮苷含量为枳壳>香园>柚皮。 【关键词】HPLC；枳壳；香园；柚皮；柚皮苷 【Abstract】Objective：To compare the content of naringin in Fructus Aurantii and Citrus wilsonii Tanaka and pummelo pericarp. Methods：the content of naringin in Fructus Aurantii and Citrus wilsonii Tanaka and pummelo pericarp were measured by the method of HPLC. The chromatographic conditions were：Hypersil column （C18，5μm，150mm×4.0mm），methel-water-acetic acid（35：61：4）as mobile phase，the detection wavelength at 283 nm and the flow rate being 0.8ml/min. Results：The contents of naringin in Frutus Aurantii is 12.41%，the contents of Citrus wilsonii Tanaka is 8.72%，the content of naringin in pummelo pericarp is 2.74%. Conclusion：By conparison，the content of naringin in Fructus Aurantii is the highest，follow by the Citrus wilsonii Tanaka，and pummelo pericarp at least. 【Key words】HPLC；Fructus aurantii；Citrus wilsonii tanaka；Pummelo pericarp；Naringin 枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实。性微寒，味苦、辛、酸。入肺、脾、大肠经。功能理气宽中，行滞消胀。主治胸肋气滞、胀满疼痛、食积不化、痰饮内停、胃下垂等[1]。香圆（Citrus wilsonii Tanaka）来源于芸香科（Rutaceae）柑桔属（Citrus），是中药枸橼的两大植物来源之一。具有理气和中、化痰止咳的功效，中医用于缓解胃腹胀痛、呕吐、止咳嗽等症[2]。柚是柑橘中的一大类，是人们喜爱的水果之一。枳壳、香园、柚皮中都含有柚皮苷，柚皮苷是一种二氢黄酮类化合物，具有抗氧化、抗病毒、抗癌、抑菌以及增加其他药物利用度等重要生物活性[3-5]。本实验主要是采用高效液相色谱法分别测定枳壳、香园、柚皮中柚皮苷的含量，然后对三种供试品中的柚皮苷含量进行比较分析。为柚皮苷活性成分提取原料的选择提供理论依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器 美国Aglient 1100 高效液相色谱仪，VWD紫外检测器，Aglient 化学工作站，Millipore Simplicity-185 超纯水器，BT224S电子天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司）。
布洛芬含量测定方法综述 布洛芬的概况 布洛芬（I b u p r o f e n，简称I B），是一种非甾体抗炎药，具有镇痛、抗炎、解热等作用，其作用机制主要通过对环氧酶的抑制而减少前列腺素的合成，从而降低神经痛觉的敏感性，同时通过下体温调节而起解热作用。该药适用于多种关节炎、非关节性的各种软组织疼痛、急性轻中度疼痛等。其分子式：C13H18O2分子量：206.28 化学名：2-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸 结构式： 布洛芬的存在形式有多种多样，如：布洛芬胶囊、布洛芬片、布洛芬缓释胶囊、布洛芬缓释片、布洛芬混悬液、布洛芬颗粒、布洛芬软胶囊等。 布洛芬现有的测定方法 目前已有检测方法：分光光度法，高效液相色谱法，原子吸收法等。 本文就以布洛芬片为例对布洛芬含量测定方法做一个简单的综述。 1.紫外分光光度法 布洛芬片含量测定方法，《中国药典》2005年版采用的中性乙醇作溶剂，用氢氧化钠保准溶液进行滴定。此用紫外分光光度法对布洛芬片进行含量测定，方法简洁，结果精确。效果也较为理想。 1.1仪器、试剂与药品 日本岛津U V—2100紫外分光光度仪，M E T T L E R A E-240型电子天平；布洛芬原料（经滴定法测定含量为100.6%）；布洛芬片（湖北亨迪药业有限公司）；试剂为分析纯。 1.2方法与结果 1.2.1测定波长的选择 取布洛芬原料药25m g，置100m l量瓶中，加0.4%的氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，制成0.25m g/m l的溶液。滤液在紫外分光光度计下235n m～300n m扫描,在265n m与273n m波长处有最大吸收，在245n m与271n m波长处有最小吸收，259n m的波长处有肩峰，与《中国药典》2005版描述一致。本方法在265n m波长处测定吸收度。 1.2.2标准曲线的制备 精密称布洛芬原料约500m g置100m l量瓶中，加0.4%的氢氧化钠溶液并稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液2、4、6、8、10m l分别置100m l量瓶中，加0.4%的氢氧化钠溶液稀释至刻度摇匀，照分光光度法分别在265n m波长处测定吸收度，并绘制标准曲线。见图1：
《现代食品科技》 Modern Food Science and Technology Vol.22 No.2(总88) 160 文章篇号:1007-2764(2006)02-0160-053 柑橘类柚皮苷提取工艺研究 游见明1，兰江涛 2 (1.四川理工学院,四川自贡643000)(2.自贡市第三中学校,四川自贡643020) 摘要：采用正交试验与单因素实验相结合方法，对影响柚皮苷提取率的主要因素进行研究。结果表明，从柚皮中提取柚皮苷的较佳条件为：用饱和Ca(OH)2溶液作溶剂，料液比1：10，温度60℃，提取时问3h 。 关键词： 正交试验；提取；柚皮苷 Extraction Technology of Naringin from Orange Y ou Jian-ming 1, Lan Jiang-tao 2 (1. Department of Bioengineering, Sichuan University of Science ＆ Engineering, Zigong 643000,China) (2.No.3 middle school,Zigong 643020,China) Abstract: Main factors effecting extraction of naringin from orange skin were studied by single factor and orthogonal experiments, and optimized condition for the extraction of naringin were obtained as extraction with saturated Ca(OH)2 at 60 for 3h with a material to solvent ℃ratio of 1:10. Keywords: Orthogonal experiment; Extraction; Naringin 橙皮苷是一种广泛存在于芸香科植物柑桔（Citrus reticulata Blanco ）类水果中的一种双氢黄酮类化合物。纯柚皮苷是一种白色粉末状固体。据报道柚皮苷具有抗氧化功能[1]、抗辐射[2]、抑制肿瘤坏死因子释放[3]、支持性治疗非典型型肺炎[4]等生理活性，因而具有很高的药用价值。柚皮苷大部分存在于柑桔加工的废弃物中，如果皮、果囊中，其中成熟的果皮和组织中橙皮苷的含量最高(内果皮30％~50％，桔络、核、果肉中30％~50％，外果皮10％~20％)，汁液和桔囊中含量 较低l ％~5％[5] 。柑桔皮中柚皮苷含量丰富，每个柑桔中大约含lg 左右的橙皮苷，大量的柑桔皮资源成为橙皮苷的很有前途的来源。采用废桔皮中存在的橙皮苷作为抗氧化剂有很大的利用价值。同时，柚皮苷具有苦味，在蒸馏水中苦味阈值为2×10-5，因而大大影响到柑橘类制品的品质与销售。 橙皮苷的提取方法有多种，其中碱提酸沉法操作简单、成本低，提取率较高。本文用饱和Ca(0H) 溶液浸提，用HCl 溶液沉淀的方法提取柚皮苷。 1 材料方法 1.1 提取原料 收稿日期：2005-11-25 四川省应用基础研究项目（05JY029-065） 作者简介：游见明，教师，从事生物技术教学、科研工作 提取所用原料收集于10月下旬至11月从当地居民家中，包括蜜桔类、柚类果实的皮。收集后，经过60-65℃热风烘干，粉碎机粉碎，过60目筛，备用。 1.2 主要设备 721分光度计；Mettle AE200电子天平；水浴恒温振荡器；真空干燥器；电热恒温水浴锅；旋转蒸发仪。 1.3 主要试剂 无水乙醇；亚硝酸钠；硝酸铝；氢氧化钠；芦丁，生化试剂，上海化学试剂公司；HCl ； 1.4 实验方法 1.4.1 柚皮苷提取方法 柚皮苷提取工艺流程桔皮粉→饱和Ca(OH)2溶液浸提→过滤→10％CHl 调节pH 为4.0左右→静置沉淀→过滤→重结晶→过滤→收集沉淀→干燥→柚皮苷成品 单因素实验：分别进行浸提时间、浸提温度、固液比、沉淀pH 值对提取率的影响。 浸提最优条件选择：在单因数实验的基础上，为寻求合理的条件组合，进行了正交实验，方案见表1。 表1 柚皮苷提取正交实验方案 因子 固液比（A ） 时间（B ） 温度（C ）pH 值（D ） 水平11:10 150min 60℃ 3 水平2 1:20 180min 70℃ 4 1.4.2 检测方法
实验一紫外分光光度法测定布洛芬片含量 一、目的要求 1.掌握紫外－可见分光光度计的原理和使用方法。 2.掌握用紫外分光光度法测定药物含量的基本方法（标准曲线、样品测定和数据处理）。 二、基本原理 具有不饱和结构的有机化合物，如芳香族化合物，在紫外区（200-400nm）有特征的吸收，为有机化合物的鉴定提供了有用的信息。布洛芬分子结构中含有苯环，在264nm和272nm处有最大吸收，因272 nm处吸收度值小，而264nm处吸收度值在0.3－0.7之间，故选264 nm作为测定波长。 布洛芬为消炎镇痛药，主要用于关节痛、肌肉痛、神经痛、头痛、牙痛等。其原料与片剂的含量测定方法在中国药典收载的是以中性乙醇为溶剂的中和滴定法，操作较为繁琐。本实验以氢氧化钠溶液为溶剂，采用紫外分光光度法测定布洛芬片的含量，方法简便，结果准确。 三、仪器与试剂 1. TU-1810型紫外可见分光光度计，1cm带盖石英吸收池。 2.布洛芬对照品 3.布洛芬片剂 4.氢氧化钠分析纯 四、实验方法 1.选择测定波长 精密称取布洛芬对照品适量，加0.4%氢氧化钠溶液适量，制成每lml中含布洛芬0.25m g的溶液，在230一300nm范围内绘制吸收光谱。在264nm和272nm处有最大吸收。 取布洛芬片除去薄膜衣，研细，精密称取适量，加0.4%氢氧化钠溶液适量制成每lm l含布洛芬0.25mg的溶液，在230一300nln范围内绘制吸收光谱。 2. 绘制标准（工作）曲线 精密称取布洛芬对照品适量，加0.4%氢氧化钠溶液，制成0.10，0.20，0.25，0.40，0.50mg·ml-1的溶液，在264nm处测定吸收度A。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，绘制标准曲线。根据标准曲线的斜率计算k。 3.测定样品含量 供试品溶液的制备:取本品20片，除去包衣，精密称定，精密称取适量(相当于布洛芬25mg)，置100 ml量瓶中，加0 .4%氢氧化钠溶液，溶解并稀释至刻度，摇匀滤过。 测定:分别量取对照品及供试品溶液，以0.4%氢氧化钠溶液作空白，在264n m处与标准曲线相同条件下测量吸光度，计算试样中布洛芬的含量(g/mL)。 布洛芬标示量的百分含量=C×D×W÷W×标示量×100% 式中：C为布洛芬浓度（g/ml），W为取样量，W为平均片重，D为稀释倍数。 五、思考题 1.影响紫外分光光度法测定的因素有哪些？ 2.如何确定被测物的测定波长？ 分析测试中心王丽娜 2014-9-26
利用液相色谱法测定中药的柚皮苷含量 摘要】目的建立HPLC法测定常见中药中柚皮苷的方法，测定常见中药中柚皮苷含量。方法 Waters Symmetry C18柱（4.6x150mm,3.5μm），流动相为甲醇:乙腈:磷酸缓冲液（0.01mol/L pH3.5）=9:3:8，检测波长为280nm。结果柚皮苷的出峰时间为2min，柚皮苷1.80～350mg/L范围内具有良好的线性关系，R2值为 0.9999，平均回收率分别为99.5%-102.5%，相对标准偏差小于5%；香橼、枳实和橘红的柚皮苷含量分别为2.89-5.67%、0.21-0.26%、11.97-2.44%，不同产地的香橼、枳实、橘红中柚皮苷含量的相对标准偏差分别为28.88%、10.63%和26.42%;四磨汤、胃痛丸、橘红丸颗粒和抗骨增生丸中柚皮苷的含量分别为5.99mg/g、2.25mg/g、1.71mg/g、0.30mg/g，不同厂家生产的四磨汤、胃痛丸、橘红丸颗粒和抗骨增生丸中柚皮苷浓度的相对标准偏差分别为8.43%、14.72%、9.90%和 3.42%。结论建立了一种简便、准确、适用性广泛地测定中药中柚皮苷的方法，产地对香橼及橘红中柚皮苷含量的影响较大，而不同厂家生产的中成药中柚皮苷的含量偏差相对较小。 【关键词】高效液相色谱法柚皮苷中药原料中成药 Determination of naringin in Chinese medicine byhigh-performance Liquid Chromatographic Method (XUE Bai-yun, DUAN Ci-qun) (People'shospital of Yingtan City, Jiangxi Province, Yingtan, 335000) 【Abstract】Aim: To set up a quantitativehigh-performance liquid chromatographic method for determination of naringin and to investigation naringin content in common Chinese medicine. Method: An RP-HPCL method was set up, using Symmetry C18 column, methyl alcohol: acetonitrile:PBS(containing 0.01mol/L postassium dihydrogan phospate pH=3.5)= 18:3:14 as mobile phase with a flow rate of 1.0ml/min at the detection wavelength of 210nm. Result: retain time was about 2min, naringin well separated with other compositions. The Calibration curve was ofgood linearity in the range of 1.80～350 mg/L with R2 0.999, recoveries were range from 99.5%-102.5%, relative standard derivation was less than 5%. Naringin content in Citron, Citrus aurantium, and orange-red were 2.89-5.67%, 0.21-0.26%, and 11.97-2 .44%, respectively. Relative standard derivation of naringin contents from different origin were 28.88 for citron, 10.63 for citrus aurantium, 26.42 for orange-red. Naringin content in 4 soup, stomach pain pill, orange pill bone particles and anti-proliferative Pill were 5.99 mg /g, 2.25mg /g, 1.71mg /g, and 0.30mg /g repectively. Relative standard derivation of naringin contents from different factory were 8.43 for 4 soup, 14.72 for stomach pain pill, 9.90 for orange pill bone and 3.42 for anti-proliferative pill. Conclusion: This method is accurate, sensitive and convenient for detecting naringin content of Chinese medicine, Origingreatly effects naringin content of the citron and orange-red ,whereas, naringin content of Chinese patent medicine are little affected by origin. 【Key words】High-performance Liquid Chromatographic Method, naringin, Chinese medicine, raw material, Chinese patent medicine 柚皮苷是一种二氢黄酮类化合物，它又称柚苷、柑桔苷、异橙皮苷、柚皮素-7-O-新橙皮糖苷，学名为柚皮素-7-β-D-葡萄糖（2→1）-α-L-鼠李糖，分子式 C27H32O14，分子量580.55[1]。相关研究表明，研究表明，柚皮苷在降血脂[2]、抗氧化[3]、抗菌消炎[4]、抗肿瘤[5]、抗过敏[6]、抗关节炎镇痛[7]、抗心血管疾
关于布洛芬糖衣片含量测定方法的讨论 发表时间：2009-06-23T14:56:00.013Z 来源：《中外健康文摘》2009年3月第6卷第9期供稿作者：王刚[导读] 布洛芬系一消炎镇痛药。在实际生产中，布洛芬一般多为糖衣片。 关于布洛芬糖衣片含量测定方法的讨论王刚 (沈阳重型机械集团有限责任公司职工医院 110025) 【中图分类号】 R927.11 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085(2009)09-0190-01 布洛芬系一消炎镇痛药。在实际生产中，布洛芬一般多为糖衣片。《中国药典》（2000年版）规定，在布洛芬糖衣片的含量测定项下的规定中，要求除去糖衣包衣后进行测定。而在实际实验操作中，布洛芬的糖衣包衣与片芯结合紧密，不易去除，很难保证去除包衣后不残留部分包衣及去除包衣的片芯完整。由此，很容易造成糖衣的残留或药芯片残缺损失；即使增加消衣片数，也难使平均片重趋于恒定数值，致使平均片芯片重不恒定，或者不在一定允许范围内波动，在分析结果中带入计算标示量公式内造成不规律性误差，最终影响分析结果。即使是同一批号药品，一人平行多次及数人重复多次测定其含量，在排除了个人操作误差的情况下，误差仍很大。基于此，我们对布洛芬在去除包衣与不去除包衣两种情形下布洛芬的含量按照药典规定的酸碱中和法进行了比较测定，结果见附表。 从表中可以看出，去除糖衣包衣后所得到的测定结果略低于（＜1.0%）不去除糖衣包衣所得的测定结果。也就是说，按《中国药典》（2000年版）规定的方法进行布洛芬片中布洛芬含量测定，除去糖衣与否，基本上对测定结果没有多大影响。因此，个人认为，对于布洛芬的含量测定可不必除去糖衣包衣，直接取样品20片，研细，按药典规定依次进行后面的步骤处理样品，进行测定，最终获得其标示量的百分含量数据。这样就简单方便多了。附表：布洛芬含量测定结果比较（标示量%）批号去除糖衣不去除糖衣20060501 97.6 98.2 20060702 99.0 99.5 20060101 96.7 97.5 20060429 95.8 96.3 参考文献 [1] 中国药典.化学工业出版社，2000.
HPLC法测定布洛芬片的含量 发表时间：2010-06-02T09:36:53.280Z 来源：《中外健康文摘》2010年第4期供稿作者：李凤兰1 胡新海2 [导读] 布洛芬片为解热镇痛类非处方药，具有解热，镇痛，抗炎作用。 李凤兰1 胡新海2（鹤岗市药品检验所黑龙江鹤岗 154101）【中图分类号】R917 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)04-0031-02 【摘要】目的建立HPLC法测定布洛芬片的含量。方法采用Agilent C18柱（150mm×4.6mm，5um），以乙腈－1%氯乙酸溶液(用氨试液调pH为3.0)（40：60）为流动相，流速为1.0ml/min-，检测波长：254nm。结果布洛芬在 200～1500ug/ml-的浓度范围内线性关系良好，r=0.998（n=7），平均回收率为99.90%（n=9），RSD为0.63%。结论该方法操作简便，结果准确。【关键词】 HPLC 布洛芬片含量测定布洛芬片为解热镇痛类非处方药，具有解热，镇痛，抗炎作用。其含量测定，《中国药典》2005年版二部采用提取、抽滤后酸碱滴定的方法，引入系统误差较大。为此，本文采用HPLC法测定其含量，是对现行《中国药典》布洛芬片含量测定方法的改进。 1 仪器与试药 LC—2010AHT高效液相色谱仪，色谱柱：Agilent C18柱（150mm×4.6mm，5um）；布洛芬对照品（中国药品生物制品检定所,批号100179－200804）；乙腈为色谱纯，氯乙酸为分析纯，水为超纯水；布洛芬片（抽验品）。 2 方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱：Agilent C8柱（150mm×4.6mm，5um）；流动相：以乙腈－1%氯乙酸溶液(用氨试液调pH为3.0)（40：60）为流动相，流速为1.0ml/min-，检测波长：254nm。进样量：20ul。理论板数按布洛芬峰计算应不低于2000。 2.2对照品溶液的制备 取经五氧化二磷干燥器内减压干燥至恒重的布洛芬对照品适量，精密称定，加70%甲醇溶解并稀释制成1ml中约含1mg的溶液，即得。 2.3样品溶液的制备 取本品20片，去糖衣，研细，精密称取细粉适量（约相当布洛芬0.1g），置100ml量瓶中，加70%甲醇40ml超声10min使溶解，加70%甲醇溶液至刻度，摇匀，即得。 2.4空白干扰实验 按处方比例和工艺，制成不含布洛芬的阴性供试品。进行测定，在与样品相同保留时间处为出现色谱峰，对测定无干扰。 2.5 线性关系 精密量取对照品约100mg，精密称定，置50ml量瓶中，加70%甲醇15ml超声10min使溶解，加70%甲醇溶液至刻度，摇匀。精密量取该溶液1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml，6.0ml，7.0ml分别至10ml量瓶中，各用70%甲醇溶液至刻度，摇匀。进样20ul，记录色谱图。以峰面积（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标绘制标准曲线。得回归方程为：A=35866.73C+2400.21,r=0.9996（n=7）结果表明，布洛芬浓度在200~1500 ug/ml﹣范围内线性关系良好。 2.6 精密度试验 精密量取对照品溶液（1.0mg/ml）10ul，按上述色谱条件重复进样5次，结果布洛芬峰面积RSD为0.84%（n=6），表明本法重复性良好。 2.7 重复性试验 取同批样品6份，照“样品测定”项下操作，测得样品中布洛芬含量平均值为99.2%，RSD为 1.08%（n=6），表明本法重复性良好。 2.8 回收率试验 采用加样回收率试验法。取已知含量的样品适量9份，分别加入布洛芬对照品相当于样品中已知含量的80%，100%，120%各3份，照样品测定项下方法测定，计算含量，结果见表1。 2.9 稳定性试验 取同批样品溶液分别于0，2，4，8，10 h后进样测定，测得布洛芬含量为99.1%，RSD 为0.98%。结果表明，布洛芬溶液在10h内稳定。 2.10 样品测定 2.10.1 HPLC法分别精密量取对照品溶液和样品溶液各10ul，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录峰面积，以外标法计算3批样品中布洛芬含量。 2.10.2 UV法取本品20法，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于布洛芬0.5g），加中性乙醇20ml，振摇溶解，用垂熔玻璃漏斗滤过，容器与滤器用中性乙醇，洗涤4次，每次10ml，洗液与滤液合并，加酚酞指示液5滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，测得布洛芬的含量。 3 讨论 3.1 本文HPLC法与酸碱滴定中和法比较，能够排除有关物质及系统误差的干扰，专属性强。 3.2 该方法操作简便，重现性好，实用性强，可作为本品质量控制方法。 参考文献 [1]中国药典[S].2005年版.二部.96. [2]国家药品标准[S]新药转正标准第30册.178.
HPLC法测定布洛芬片中布洛芬的含量 【摘要】采用HPLC法测定布洛芬片中布洛芬的含量。在0.2～3.0μg范围内呈良好的线性关系，相关系数r＝0.9999，平均回收率为99.17 %，RSD值0.69 %，本方法简便、快速、准确,可作为本品的含量测定方法。 【关键词】 HPLC法；布洛芬；含量 ［Abstract］HPLC method was established for the determination of Ibuprofen in Ibuprofen Tablet. The linear range was within 0.2～3.0μg with correlation coefficient of 0.9999. The average recovery rate was 99.17% with RSD 0.69%. The method is simple, rapid and accurate. It can be used as determination method for the product. ［Key words］ HPLC; Ibuprofen; content 布洛芬片的主要成分是布洛芬，属于镇痛药。该制剂现行测定含量的方法为《中国药典》2005年版二部收载［1］，是酸碱滴定法。由于使用垂溶漏斗过滤，耗时较长，误差较大，故本文建立HPLC法测定本制剂中布洛芬的含量。该法简便、快速、准确，可作为本品含量测定方法，现报告如下。
1 仪器与试药 1.1 仪器岛津LC-10Avp高效液相色谱仪（自动进样）、SPD-10Avp紫外检测器、LC-10Atvp高压泵、SiL-HTA系统控制器。 1.2 试药布洛芬片（山西亨瑞达制药有限公司）；布洛芬对照品（100179-200303 中国药品生物制品检定所）供含量测定用；色谱纯乙腈；色谱纯甲醇；磷酸二氢钾、十二烷基磺酸钠、磷酸（分析纯）；高纯水。 2 实验方法与结果 2.1 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：C18柱5μm，4.6×250 Unimicro Technologies,Inc；流速：1.0ml/min；流动相：磷酸盐缓冲液（乙腈250ml与0.02mol/L磷酸二氢钾溶液250ml混合，加十二烷基磺酸钠0.68g使溶解，用磷酸调节pH值至 3.5）-甲醇（1：1）［2］；温度：25℃；压力：1 4.7MPa；检测波长：215nm；理论板数按布洛芬计算不低于3000。 2.2 线性关系考察精密称取对照品5.95mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该对照品溶液各2、4、8、
处方生产工艺 一、产品名称及剂型： 名称：布洛芬片 规格：0.2g 批准文号：国药准字H61020216 剂型：片剂 二、产品概述：本品成份主要为布洛芬，含布洛芬应为标示量的95.0% ~105.0%,本品白色糖衣片，除去包衣后显白色。 包装规格：0.2g×100片 三、质量标准：中华人民共和国药典2010年版标准。 四、处方： 名称投料量 布洛芬20k g 淀粉3k g 干掺淀粉 1.4k g 制浆淀粉0.02k g 硬脂酸镁2k g 共制10万片 五、生产操作过程及工艺条件： 1.生产操作过程： 1.1粉碎、过筛：取布洛芬、淀粉均过100目筛。 1.2称量：按处方规定分别称取布洛芬、淀粉备用。
1.3 配制干燥：取已称量好的布洛芬、淀粉投入湿法制粒机内混合5分钟，加10%的淀粉浆制软材，14目尼龙筛制粒，50~60℃干燥，14目尼龙筛整粒。 1.4总混：干颗粒加入硬脂酸镁和干掺淀粉（80℃干燥8小时）置三维混合机内混合5分钟后，放置于套有塑料袋的不绣钢桶内交中转站。 1.5中间体检验：化验室取样化验合格后，计算片重交压片。 1.6压片、包衣：合格颗粒用Φ9mm深冲压片，每天15分钟检查一次片重差异。包白色糖衣。 1.7包装：用聚乙烯塑料瓶按包装规格0.2mg×100片进行包装。 1.8质量检验：按质量标准进行全检，检验合格后入库。 2、工艺条件： 2.1布洛芬、淀粉、硬脂酸镁质量应符合中国药典2010年版标准。 2.2计量器具经校验，并在使用有效期内，称量准确值达到处方投料量规定。 2.3原铺料必须过100目筛。 2.4淀粉桨使用时温度低于30℃。 2.5片子的重量差异及溶出度应符合规定。 2.6内外包装材料应符合质量标准。 2.7原铺料的粉碎、过筛、配制、干燥、混合、压片、包衣、分装均在30万级区进行，装箱、捆扎在一般生产区进行。