高尔基体 高尔基体以Camillo Golgi的名字命名。他最早于1888年用络酸盐银染色法发现的一种网状结构的一种器官，存在于许多细胞的细胞质中。它是由许多扁平膜囊和大小不等的囊泡组成。随着电子显微技术的发展，高尔基体的结构越来越被人们所了解。表明高尔基体是一种从内质网运输新产生的分泌物和膜蛋白的细胞器或者是细胞的其它膜结合复合物，现在还测出了高尔基体的聚糖结构，高尔基体通过这个结构而吸附内质网中的蛋白质。 形态特点 不同物种的高尔基体的形态结构不一样。有些物种细胞没有明显的高尔基体结构，比如说真菌，还有微孢子虫。然而，在这些真菌中也发现有高尔基体液泡的存在，但是很快就消失。也有更加极端的例子，像微孢子虫就仅仅只有一簇微管和囊泡。图2展示了哺乳动物和酵母细胞高尔基体的免疫荧光图像，显示了高尔基体的不同排列方式。目前普遍认为所有的真核生物都有高尔基体尽管其存在的形态是多种多样的，因此，高尔基体可以作为最原始真核生物祖先的一个特征。高尔基体的功能 基本功能：将内质网合成的蛋白质进行加工、分类与包装，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。 其它功能：第一，产生特殊的分泌结构，比如说胰腺组织中的胰腺包含颗粒。第二，高尔基体对从内质网运来的“货物”蛋白质进行后修饰调控。最显著的例子就是修剪和延伸吸附在ER上的多聚糖的核心结构，还有硫酸盐化作用、磷酸化作用、蛋白质水解作用等。第三，参与脂质代谢。高尔基体含有一些酶能将ER 产生的神经酰胺转换成鞘脂类。 目前蛋白质是如何从高尔基体的一面移向另一面仍然有争论，以及高尔基体是如何将携带的运输物从其反面运送到质膜的。 高尔基体的缺失或功能受损会导致疾病的产生 更出乎意料的是,越来越多的罕见的基因疾病被发现是由于编码高尔基的蛋白质的等位基因失效而引起的。
Cell biology 细胞生物学 第七章真核细胞内膜系统、蛋白质分选与膜泡运输 细胞内被膜区分类：细胞质基质、细胞内膜系统、有膜包被的细胞器 第一节细胞质基质的含义和功能 一、细胞质基质的含义 （1）含义：在真核细胞的细胞质中，除去可分辨的细胞器以外的胶状物质 主要含有： （1）与代谢有关的许多酶 （2）与维持细胞形态和物质运输有关的细胞质骨架结构
细胞质基质是一个高度有序的体系，细胞质骨架纤维贯穿在粘稠的蛋白质胶体中，多数的蛋白质直接或间接地与骨架结合，或与生物膜结合，从而完成特定的功能。细胞质基质主要是由微管、微丝和中间丝等相互联系形成的结构体系，蛋白质和其他分子以凝聚或暂时的凝聚状态存在，与周围溶液的分子处于动态平衡。 差速离心获得的胞质溶胶的组分和细胞质基质溶液成分很大不同。胞质溶胶中的多数蛋白质可能通过弱键结合在基质的骨架纤维上。 二、细胞质基质的功能 （1）蛋白质分选和转运 N端有信号序列的蛋白质合成之后转移到内质网上，通过膜泡运输的方式再转运到高尔基体。其他蛋白质的合成都在细胞质基质完成，并根据自身信号转运到线粒体、叶绿体、细胞核中，也有些蛋白驻留在细胞质基质中。
（2）锚定细胞质骨架 （3）蛋白的修饰、选择性降解 1 蛋白质的修饰 辅基、辅酶与蛋白的结合 磷酸化和去磷酸化 糖基化 N端甲基化（防止水解） 酰基化 2 控制蛋白质寿命 N端第一个氨基酸残基决定寿命 细胞质基质能够识别N端不稳定的氨基酸信号将其降解，依赖于泛素降解途径 3 降解变性和错误折叠的蛋白质 4 修复变性和错误折叠的蛋白
热休克蛋白的作用 第二节细胞内膜系统及其功能 细胞内膜系统是指在结构、功能乃至发生上相互关联、由膜包被的细胞器或细胞结构。 研究方法：电镜技术免疫标记和放射自显影离心技术和遗传突变体分析 一、内质网的形态结构和功能 内质网是由封闭的管状或扁平囊状膜系统及其包被的腔形成的互相沟通的三维网络结构。 （一）内质网的两种基本类型 糙面内质网和光面内质网。 糙面内质网：扁囊状整齐附着有大量核糖体 功能：合成分泌性蛋白和膜蛋白光面内质网：分支管状，小
?论著? 《中国肝脏病杂志（电子版）》2014年 第6卷 第4期 68AFP 和高尔基体糖蛋白-73联合检测诊断原发性肝癌临床评价 邓广博（山东省济宁市任城区妇幼保健院 检验科，山东 济宁 272025）DOI: 10.3969/j.issn.1674-7380.2014.04.018 通讯作者：邓广博 Email: deng14071973@https://www.doczj.com/doc/a73509645.html, PHC 是我国常见恶性肿瘤之一，病死率高，在引起死亡的恶性肿瘤中仅次于胃癌、食管癌居第三位，在部份地区的农村中则仅次于胃癌居第二位[1]。在PHC 中发病率最高的是HCC ，约占PHC 的90%～95%。HCC 在全球癌症病死率中居第三位。由于地域环境等原因，我国HCC 的发病率约是欧美地区的10倍以上[2]。由于HCC 治愈率低，早期临 床表现不典型，现有的常用肿瘤标记物AFP 在早期诊断中特异性及敏感度不够理想，而其他检查亦是有创性的，故临床上迫切需要特异性及敏感度较高的无创性检查。近期有研究[3]发现，高尔基体糖蛋白-73（GP73）虽然在多种疾病中表达异常，但是同PHC 关系尤为密切，且GP73敏感性特异性均优于AFP 。本研究通过对PHC 患者血清中AFP 和GP73含量的检测，分析其联合检测在HCC 早期诊断的意 摘要：目的 探讨甲胎蛋白（AFP ）和高尔基体糖蛋白-73（GP73）在PHC 诊断中的指导意义。方法 采用电化学发光法分别对64例肝癌组和72例对照组进行血清AFP 及GP73的含量检测，分析AFP 、GP73及AFP 和GP73联合检测时在PHC 诊断时的敏感性和特异性。结果 64例PHC 癌患者中，57例（89.01%）为肝细胞癌。AFP 和GP73在肝癌组患者血清中的含量分别为（318.27 ± 169.32）ng/ml 和（262.74 ± 168.98）ng/ml ，明显高于对照组血清中的（14.16 ± 8.45）ng/ml 和（37.04 ± 20.56）ng/ml ，P 均＜ 0.01。AFP 和GP73联合检测敏感性及特异性可达88.39%和86.36%，与单项检测相比，可明显提高诊断的准确性。结论 血清中AFP 及GP73是PHC 发生、发展的重要检测指标，两者联合检测对肝癌患者诊断及预后具有重要。 关键词：肝肿瘤；甲胎蛋白类；高尔基体；糖蛋白类 Combined diagnosis value of Golgi protein 73 and alpha-fetoprotein in primary hepatic cancer DENG Guang-bo (Department of Clinical Laboratory, The Women and Children’s Hospital of Rencheng District of Jining City, Jining City 272025, China) Abstract: Objective To investigate the effect and diagnostic signi ? cance of alpha-fetoprotein (AFP) and Golgi protein 73 (GP73) in the serum of primary hepatic cancer (PHC) patients. Methods We retrospectively analyze 64 cases of liver cancer and 72 healthy people respectively by electrochemiluminescence determination of serum AFP and GP73. The sensitivity and speci ? city of serum AFP, GP73, and AFP ＋ GP73 in the diagnosis of PHC were analyzed. Results The 89.01% (57/64) of PHC patients were HCC patients and AFP ＋ GP73. The serum levels of AFP and GP73 in PHC patients [(318.27 ± 169.32) ng/ml, (262.74 ± 168.98) ng/ml] were signi ? cantly higher than in healthy people [(14.16 ± 8.45) ng/ml, (37.04 ± 20.56) ng/ml] (P ＜ 0.01). The sensitivity and speci ? city value of AFP combined with GP73 were 88.39% and 86.36%, respectively. Compared with single detection, AFP and GP73 combined detection had an higher diagnosis accuracy in PHC. Conclusions Serum levels of AFP and GP73 are important factors of PHC occurrence and development indicators. The AFP and GP73 combined detection has important significance for PHC diagnosis and prognosis estimation. Key words: Liver Neoplasms; Alpha-fetoproteins; Golgi apparatus; Glycoproteins
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 人（Human Human））高尔基体蛋白7373（（GP73 GP73））ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被高尔基体蛋白73（GP73）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的高尔基体蛋白73（GP73）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
一）内质网的作用：进行蛋白质的修饰与加工，主要包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等，其中最主要的是糖基化，几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。糖基化的作用是：①使蛋白质能够抵抗消化酶的作用；②赋予蛋白质传导信号的功能；③某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠。 （二）高尔基体的主要功能：将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。 1、蛋白质的糖基化 N-连接的糖链合成起始于内质网，完成与高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链，由Cis面进入高尔基体后，在各膜囊之间的转运过程中，发生了一系列有序的加工和修饰，原来糖链中的大部分甘露糖被切除，但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子，形成了结构各异的寡糖链。糖蛋白的空间结构决定了它可以和那一种糖基转移酶结合，发生特定的糖基化修饰。 许多糖蛋白同时具有N-连接的糖链和O-连接的糖链。O-连接的糖基化在高尔基体中进行，通常的一个连接上去的糖单元是N-乙酰半乳糖，连接的部位为Ser、Thr和Hyp的OH基团，然后逐次将糖基转移到上去形成寡糖链，糖的供体同样为核苷糖，如UDP-半乳糖。糖基化的结果使不同的蛋白质打上不同的标记，改变多肽的构象和增加蛋白质的稳定性。 在高尔基体上还可以将一至多个氨基聚糖链通过木糖安装在核心蛋白的丝氨酸残基上，形成蛋白聚糖。这类蛋白有些被分泌到细胞外形成细胞外基质或粘液层，有些锚定在膜上。 2、参与细胞分泌活动 负责对细胞合成的蛋白质进行加工，分类，并运出，其过程是SER上合成蛋白质→进入ER腔→以出芽形成囊泡→进入CGN→在medial Gdgi中加工→在TGN形成囊泡→囊泡与质膜融合、排出。 高尔基体对蛋白质的分类，依据的是蛋白质上的信号肽或信号斑。 3、进行膜的转化功能 高尔基体的膜无论是厚度还是在化学组成上都处于内质网和质膜之间，因此高尔基体在进行着膜转化的功能，在内质网上合成的新膜转移至高尔基体后，经过修饰和加工，形成运输泡与质膜融合，使新形成的膜整合到质膜上。 4、将蛋白水解为活性物质 如将蛋白质N端或C端切除，成为有活性的物质（胰岛素C端）或将含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽，如神经肽。 5、参与形成溶酶体。 6、参与植物细胞壁的形成。 7、合成植物细胞壁中的纤维素和果胶质。 内质网对分泌蛋白有初步加工、运输的作用，高尔基体对分泌蛋白有加工的作用，经高尔基体最后加工后的分泌蛋白才能运出细胞外 递质神经冲动在突触间的传递，是借助于神经递质来完成的。当神经冲动到达轴突末梢时，有些突触小泡突然破裂，并通过突触前膜的张口处将存储的神经递质释放出来。当这种神经递质经过突触间隙后，就迅速作用于突触后膜，并激发突触后神经元内的分子受体(另一种化学物质)，从而打开或关掉膜内的某些离子通道，改变了膜的通透性，并引起突触后神经元的电位变化．实现神经兴奋的传递。这种以化学物质为媒介的突触传递，是脑内神经元信号传递的主要方式。 神经递质在使用之后，并未被破坏。它借助离子泵从受体中排出，又回到轴突末梢，重新包装成突触小泡．再重复得到利用。 突触分兴奋性突触和抑制性突触两种。兴奋性突触是指突触前神经元兴奋时，由突触小泡释放出具有兴奋作用的神经递质．如乙酰胆碱、去甲肾上腺素、5羟色胺。这些递质可使突触后神经元产生兴奋。某些障碍乙酷胆碱释放的药物能引起致命性的肌肉瘫痪。例如，南美印第安人使用的箭毒，由于占据了受体的位置，妨碍乙酷胆碱的活动，因而能使人瘫痪。抑制性突触是指突触前神经元兴奋时，由突触小泡联放出具有抑制作用的神经递质，如多巴胺、甘氨酸等。这些递质使突触后膜“超极化”，从而显示抑制性的效应。
一、肝脏蛋白质组学 1 细胞整体水平上的蛋白组学分析 以肝为整体．对大鼠肝细胞进行全面的蛋白质分析。研究分别对大鼠和小鼠肝的整体蛋白质组进行检测和分析。为提高蛋白的检出率，应用pH值不同的胶条，在l3个二维凝胶每上共切取约5000个点，鉴定约3000个蛋白点，归纳为273种的基因产物。其中，60%大鼠肝蛋白为酶和酶的亚基，7%为结构蛋白，细胞因子约6%，14种热休克蛋白占5%，转运蛋白为3%，核糖体蛋白为l%，其余的各种蛋白为19%。 肝星形细胞在肝的生理、病理过程中发挥了重要的作用。针对星形细胞也进行蛋白质组学研究门，实验鉴定了153种肝星形细胞蛋白。分别对比体外培养的静止期细胞复苏9d后和对大鼠注射四氯化碳8周后的星形细胞，43种表达水平改变的蛋白质或多肽得到鉴定。其中27种蛋白在体内和体外表达均有改变，包括钙周期蛋白、calgizzarin、galectin—1等表达上调的蛋白和肝酯酶10、丝氨酸蛋白酶抑制子等表达下调的蛋白。其中6种蛋白在体内和体外激活后有不同的蛋白质表达。随后通过Northern blots的验证，确认在mRNA 的水平上，mRNA控制着复苏后的培养细胞的钙周期蛋白、calgizzarin galectin等的表达。 2 细胞器水平上的蛋白组学分析 整个细胞溶解后蛋白质的二维电泳的分析，结果大部分是细胞溶质性蛋白，与各种细胞器上蛋白并不相同，执行的功能也不相同。细胞器的特异蛋白，决定细胞器的功能状态。高等真核细胞的蛋白组成复杂，高丰度蛋白质常掩盖低丰度蛋白质，一些细胞器上的蛋白由于丰度较低，不易检出。因此，由此提出亚细胞结构的蛋白质组的研究。 线粒体是真核细胞内的能量代谢中心，参与多种重要的细胞生理、病理过程。对线粒体蛋白质进行相应的蛋白组学分析，在6张不同pH凝胶上的1800个点中，共鉴别192种基因产物，其中8种基因产物是在线粒体上首次发现。鉴定的蛋白质中，69%为酶或酶的亚基，具有广谱催化活性。结构蛋白占9%，热休克蛋白占4%，其余的各种蛋白占18%。平均每10-15个凝胶上的点对应1个基因产物。 高尔基体是真核细胞中内膜系统的组成之一。在细胞生命活动中起重要作用，据估计高尔基体中大约有1000—3000种蛋白质。对鼠肝蛋白进行蛋白组学分析，以了解高尔基体的蛋白组成状况。当细胞处于稳定状态时，高尔基氏体内大约50%蛋白质处于转运状态。使得判定哪些蛋白是高尔基氏体固有蛋白，哪些为生产出的蛋白发生困难。改进实验技术后，应用环己酰亚胺清除转运中的蛋白，获得高度富集高尔基体片段。蛋白合成被抑制后，虽转运动力学明显降低，分泌蛋白和跨膜蛋白通过高尔基体移动到最终目的地。这种预处理方法使转运中的蛋白脱离高尔基体，而富集的高尔基体则聚集在储存槽中。通过改进后的分离技术，富增高尔基体蛋白，经过三重氢核X一114提取后，再用阴离子交换色谱技术获得最好分离，在二维凝胶上得到了588个蛋白点，并用质谱分析了其中丰度最高的99种蛋白。其中47种蛋白得到鉴定，25种为高尔基体蛋白，5种为内质网蛋白，5种为另外的细胞器蛋白，5种为血清蛋白。6种为细胞溶质蛋白，6种细胞溶质蛋白与高尔基体有无相互作用尚不清楚。 二、蛋白质组学的研究方法 1 二维凝胶电泳 二维凝胶电泳(two—dimensional gel eleetrophoresis，2DE)是1975年由Klose和O’Farre在各自的实验室单独发明的。利用这项技术他们成功地分离了大肠杆菌(Escherichia
2016上饶二模试题 1、元素和化合物是细胞结构和功能的物质基础，下列关于细胞化学组成的叙述，正确的是 ①ATP脱氧核苷酸线粒体外膜共有的组成元素是CHONP ②细胞合成的糖蛋白均位于细胞膜的外表面，与细胞间相互识别有关 ③酶激素ATP和神经递质等都是细胞中的微量高效物质，作用后都立即被分解 ④蛋白质遇高温变性时，其空间结构被破坏，肽键数不变 ⑤叶肉细胞内的[H]都在光反应阶段产生，用于暗反应 A、①② B、②③ C、①④ D、③⑤ 答案：C 解析： 细胞合成的糖蛋白不全分布在细胞膜的外表面，组织液及血浆中也有糖蛋白，酶作用后不是立即被分解的，叶肉细胞内的【H】有叶绿体光反应阶段产生的，也有氧呼吸过程中在细胞质基质及线粒体基质中产生的。 链接： 1、糖蛋白是广泛存在于生物体内的由肽链和糖链通过共价键结合而形成的大分子。糖蛋白包括酶、激素、载体、凝集素、抗体、糖被等。糖蛋白通常分泌到体液中或定位于细胞膜外。人血清的各类蛋白质中，50％是糖蛋白；鸡蛋蛋清的各类蛋白质中，95％以上是糖蛋白。各类细胞表面上，大多存在着糖蛋白。动、植物的分泌物和体液中有较多的糖蛋白。顶体中也含糖蛋白。 2、组织液中也有糖蛋白。组织液存在于组织间隙，绝大部分组织液呈凝胶状态，不能自由流动，因此不会因重力作用流到身体的低垂部位。组织液包括基质和从毛细血管渗出的不含大分子的物质的黏性液体，基质是一种无色透明的胶状物质，化学成分主要是蛋白多糖、糖蛋白和水。蛋白多糖是基质的主要成分，由少量蛋白质和大量氨基已糖多糖结合成的大分子复物，每个蛋白亚单位以蛋白质分子为轴心，共价地结合上许多多糖侧链。 3、处于细胞表面最外层的糖蛋白（糖被）的糖链储存着大量的生物识别信息，在细胞识别与粘合上有非常重要的作用。细胞表面的糖链依细胞类型、分化阶段、功能状态及行为特点而发生变化。细胞在发生恶性转化后，其表面的糖链亦发生显著变化，而这一变化在高转移性癌细胞中是有一定特点的。在很多肿瘤中，细胞表面的多聚氨基乳糖结构的含量有明显增加。同样重要的是看到多聚氨基乳糖的增加伴随着细胞从良性型向恶性型转化。 4、《实验生物学报》 1985年02期《大鼠精子细胞的糖蛋白合成——电镜放射自显影研究》·汤雪明·上海第二医学院 动物细胞的糖蛋白主要分布于细胞膜、溶酶体（细胞器）和各种分泌产物中，它们在细胞的有关功能活动中起着重要作用。 高尔基体是精子细胞中一种活跃的细胞器，它是联系各种细胞器的一个中心环节，在精子形成过程中起重要作用。早在二十年代初期，光学显微镜观察己经发现精子细胞的高尔基体能“分泌”顶体。后来使用糖蛋白染色技术，进一步描述了高尔基体形成顶体和顶帽的过程。放射自显影技术是研究细胞内糖蛋白合成过程的一种很好的方法，注射放射性同位素标记的各种糖蛋白前体(如氨基酸、单糖)，用自显影技术可以动态地示踪前体在细胞内掺入糖蛋白的部位。 实验： 本实验借助电镜放射自显影技术，用“3H—岩藻糖示踪大鼠精子细胞中的糖蛋白合成过程，
2020年普通高等学校招生全国统一考试（山东卷） 生物 一、选择题 1.经内质网加工的蛋白质进入高尔基体后，S酶会在其中的某些蛋白质上形成M6P标志。具有该标志的蛋白质能被高尔基体膜上的M6P受体识别，经高尔基体膜包裹形成囊泡，在囊泡逐渐转化为溶酶体的过程中，带有M6P标志的蛋白质转化为溶酶体酶；不能发生此识别过程的蛋白质经囊泡运往细胞膜。下列说法错误的是（） A. M6P标志的形成过程体现了S酶的专一性 B. 附着在内质网上的核糖体参与溶酶体酶的合成 C. S酶功能丧失的细胞中，衰老和损伤的细胞器会在细胞内积累 D. M6P受体基因缺陷的细胞中，带有M6P标志的蛋白质会聚集在高尔基体内 【答案】D 【解析】 【分析】 1、分泌蛋白的合成与分泌过程：附着在内质网上的核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量。 2、分析题干信息可知，经内质网加工的蛋白质，只有在S酶的作用下形成M6P标志，才能被高尔基体膜上的M6P受体识别，最终转化为溶酶体酶，无识别过程的蛋白质则被运往细胞膜分泌到细胞外。 【详解】A、酶具有专一性的特点，S酶在某些蛋白质上形成M6P标志，体现了S酶的专一性，A正确； B、由分析可知，部分经内质网加工的蛋白质，在S酶的作用下会转变为溶酶体酶，该蛋白质是由附着在内质网上的核糖体合成的，B正确； C、由分析可知，在S酶的作用下形成溶酶体酶，而S酶功能丧失的细胞中，溶酶体的合成会受阻，则衰老和损伤的细胞器会在细胞内积累，C正确；
D、M6P受体基因缺陷的细胞中，带有M6P标志的蛋白质不能被识别，最终会被分泌到细胞外，D错误。 故选D。 【点睛】本题考查溶酶体的形成过程及作用等知识，旨在考查考生获取题干信息的能力，并能结合所学知识准确判断各选项。 2.癌细胞即使在氧气供应充足的条件下也主要依赖无氧呼吸产生ATP，这种现象称为“瓦堡效应”。下列说法错误的是（） A. “瓦堡效应”导致癌细胞需要大量吸收葡萄糖 B. 癌细胞中丙酮酸转化为乳酸的过程会生成少量ATP C. 癌细胞呼吸作用过程中丙酮酸主要在细胞质基质中被利用 D. 消耗等量的葡萄糖，癌细胞呼吸作用产生的NADH比正常细胞少 【答案】B 【解析】 【分析】 1、无氧呼吸两个阶段的反应： 第一阶段：反应场所：细胞质基质；反应式C6H12O6酶→2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量第一阶段：反应场所：细胞质基质；反应式2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]酶→2C3H6O3（乳酸）2、有氧呼吸三个阶段的反应： 第一阶段：反应场所：细胞质基质；反应式C6H12O6酶→2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量第二阶段：反应场所：线粒体基质；反应式2C3H4O3(丙酮酸)+6H2O酶→20[H]+6CO2+少量能量 第三阶段：反应场所：线粒体内膜；反应式24[H]+6O2酶→12H2O+大量能量(34ATP) 【详解】A、由于葡萄糖无氧呼吸时只能释放少量的能量，故“瓦堡效应”导致癌细胞需要吸收大量的葡萄糖来为生命活动供能，A正确； B、无氧呼吸只在第一阶段产生少量ATP，癌细胞中进行无氧呼吸时，第二阶段由丙酮酸转化为乳酸的过程不会生成ATP，B错误； C、由题干信息和分析可知，癌细胞主要进行无氧呼吸，故丙酮酸主要在细胞质基质中被利
寒假作业(七)关注“生物膜”，网尽常考点 [主题勾联·循图忆知] 1．(2019·宝鸡九校联考)结构与功能相统一是生物学的基本观点之一。下列叙述不能说明这一观点的是() A．叶绿体内类囊体膜堆叠使膜面积增大，利于光能充分利用 B．神经细胞轴突末梢有大量突起，有利于附着更多的神经递质受体蛋白 C．低等植物细胞中心体的存在，利于其有丝分裂的正常进行 D．线粒体内膜向内突起形成嵴，有利于附着更多的有氧呼吸酶 解析：选B叶绿体内类囊体膜堆叠使膜面积增大，利于光能充分利用；神经细胞轴突末梢为突触前膜，突触前膜释放神经递质，而没有受体蛋白，神经细胞树突或胞体有受体蛋白；中心体在有丝分裂中形成纺锤体，故低等植物细胞中心体的存在，利于其有丝分裂的正常进行；线粒体内膜向内突起形成嵴，增加膜面积，有利于附着更多的有氧呼吸酶。 2．下列关于细胞结构与功能的叙述，正确的是() A．溶酶体能合成水解酶用于分解抗原或衰老的细胞器 B．核膜可转化为内质网膜，也可以直接转化为细胞膜 C．蛋白质合成分泌旺盛的细胞内高尔基体的数量较多 D．膜蛋白具有识别信息、运输氧气和催化反应等功能 解析：选C溶酶体不能合成水解酶，溶酶体中的水解酶均是由核糖体合成的；核膜与内质网膜直接相连，故核膜可以转化为内质网膜，但核膜不能直接转化为细胞膜；分泌蛋白的加工分泌需要高尔基体的参与，因此蛋白质合成分泌旺盛的细胞内高尔基体的数量较多；膜蛋白具有识别信息、运输物质和催化反应的作用，但氧气进出细胞为自由扩散，不需要载体蛋白的协助。 3．(2019·黄冈质检)如图为胰岛B细胞内胰岛素合成与分泌过程示意图，a、b、c、d、e表示细胞结构。下列说法正确的是() A．有分泌功能的细胞才有a、b、c、d结构 B．胰岛素在b和c内加工形成一定的空间结构
分泌蛋白的合成与运输 1．动物合成的蛋白质可分为分泌性蛋白质和内用性蛋白质，与分泌性蛋白质的合成、分泌密切有关的有直接或间接关系的细胞器和细胞结构有（） A．核糖体、中心体、内质网 B．核糖体、线粒体、高尔基体、细胞膜 C．核糖体、线粒体、质体、高尔基体 D．细胞核、核糖体、内质网、线粒体、高尔基体、细胞膜 2．用放射性同位素标记的某种氨基酸培养胰岛细胞，最后检测出细胞分泌物中有放射性胰岛素，如果检测细胞的膜结构，在哪种膜结构中最先被检测出有放射性（） A．内质网B．核糖体C．高尔基体D．溶酶体 3．在唾液腺细胞中，参与合成并分泌唾液淀粉酶的细胞器有（） A．线粒体、中心体、高尔基体、内质网 B．内质网、核糖体、叶绿体、高尔基体 C．内质网、核糖体、高尔基体、线粒体 D．内质网、核糖体、高尔基体、中心体 4．血清白蛋白合成于肝脏，是人血浆中含量最丰富的蛋白质，血红蛋白合成于未成熟的红细胞，是人成熟红细胞中最丰富的蛋白质。下列与血清白蛋白、血红蛋白有关的叙述，正确的是( ) A．两者的分泌均与高尔基体有关 B．两者均在人体内环境中发挥作用 C．两者的出现说明某些细胞发生了分化 D．人体所有细胞中均有合成两种蛋白的基因 5．詹姆斯·E·罗斯曼等三位科学家因从事“细胞内囊泡运输机制”的研究共同获得2013年诺贝尔生理学或医学奖。下列物质从合成部位运输到作用部位不需要借助囊泡运输的是（） A． DNA聚合酶 B．乙酰胆碱 C．白细胞介素-2 D．甲状腺激素 6．胰岛细胞中和合成胰岛素有关的一组细胞器是（） A．核糖体、内质网、高尔基体、中心体 B．核糖体、内质网、高尔基体、线粒体 C．核糖体、内质网、高尔基体、叶绿体 D．内质网、中心体、高尔基体、线粒体 7．在奶牛的乳腺细胞中，与酪蛋白的合成与分泌有密切关系的细胞结构是（）A．核糖体、线粒体、中心体、染色体 B．线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体
收稿日期：2011-08-15修回日期：2011- 10-20基金项目：国家科技部十一五“重大新药创制”科技重大专项资助项目（2009ZX09103-680）．作者简介：江均昌（1985－），女，生物化学与分子生物学硕士． 通讯作者：周林福（1973－），男，副教授，硕士生导师，从事传染病学研究；Email ：239zlf@zju．edu．cn． http ：∥www．journals．zju．edu．cn /med DOI ：10．3785/j．issn．1008-9292．2012．02．017 高尔基体驻膜糖蛋白73的研究进展及其 与肝癌等疾病的联系 江均昌，周林福 综述 （浙江大学医学院生物化学与遗传学系，浙江杭州310058） ［摘 要］高尔基体驻膜糖蛋白73（GP73）是定位于高尔基体的Ⅱ型跨膜蛋白，在肝癌组织中高表达，并分泌入血。研究表明，GP73作为血清标志物检测肝癌的特异性和灵敏度均优于AFP 。另外，GP73在前列腺肿瘤、肾脏肿瘤、肺癌、食道肿瘤、精原细胞瘤等疾病中的表达也有增高，因此， GP73也可能成为这些疾病辅助诊断的新型指标。但是，目前GP73的生理功能和表达调控机制尚不清楚。文中将从理化性质、细胞内分布、表达调节、与疾病相关性和临床应用等方面对GP73的迄今研究状况作一较为全面的综述。 ［关键词］肝肿瘤/诊断；高尔基体；糖蛋白类/血液；肿瘤标记，生物学；高尔基体驻膜糖蛋白 73；肝癌；血清肿瘤标志物［中图分类号］R 735．7 ［文献标志码］A ［文章编号］1008- 9292（2012）02-0215-07Advances on Golgi glycoprotein 73and its association with diseases JIANG Jun-chang ZHOU Lin-fu （Department of Biochemistry and Genetics ，Zhejiang University School of Medicine ，Hangzhou 310058，China ）［Abstract ］Golgi glycoprotein 73（GP73）is a transmembrane glycoprotein residing in the cis-Golgi complex ，which is strongly expressed in hepatocellular carcinoma （HCC ）and secreted into the blood．It has been regarded as a promising serum tumor marker for the detection of HCC with higher sensitivity and specificity than AFP．GP73is also significantly elevated in kidney cancer ，prostate cancer ，lung adenocarcinoma ， esophageal cancer and seminomas ；therefore ，it would be helpful for the diagnosis of these diseases．However ， the function of GP73and the regulatory mechanism for its expression are unclear．In this article ，the physical-chemical properties ，the regulation of its expression ，the relation with various cancers and the clinical applications of GP73are reviewed．［Key words ］ Liver neoplasms /diag ；Golgi apparatus ；Glycoproteins /blood ；Tumor markers ， biological ；Golgi glycoprotein 73；Hepatocellular carcinoma ；Serum tumor marker ［J Zhejiang Univ （Medical Sci ），2012，41（2）：215-221．］ 第41卷第2期 2012年 浙江大学学报（医学版） JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY （MEDICAL SCIENCES ） Vol 41No 2 2012
传染病防治新知识相关知识讲座 第八讲肾综合征出血热 一、教学目的和教学要求 通过本章学习，重点掌握引起肾综合征出血热病毒种属、结构、型别、特点、主要宿主动物及传染源、传播途径、易感人群、流行特征和疫区分型、疾病的发病机制及病理生理改变、临床表现、诊断标准及鉴别诊断、治疗原则和预防控制措施为准确地判断肾综合征出血热确诊病例打下坚实的基础，为患者能在发病早期及时采取有效的治疗措施，提高治愈率，降低病死率提供理论知识。 二、教学内容和重点知识解析 1.概述：HFRS属自然疫源性疾病，《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病。 2.病原学，HFRS的病原属布尼亚病毒科汉坦病毒属，是一种有包膜分节段的单股负链RNA病毒，汉坦病有20个以上型别，在我国主要以姬鼠型和家鼠型病毒为主。 3.流行病学，鼠类是HFRS主要宿主动物和传染源，传播途径复杂多变，人群普遍易感，以农村青壮年男性为主，一年四季均有发病，春季和秋冬季多发，疫区分姬鼠型、家鼠型和混合型，病后可获持久性免疫。 4.发病机制及病理生理，发病机制至今仍未完全清楚，以病毒感染导致细胞功能和结构的损害为主，其次是人体的变态反应，全身小血管和毛细血管广泛性损害为主要病理生理改变。
5.临床表现及实验室检测，临床具有发热、出血、肾脏损伤三大主症，潜伏期多为7日～14日，典型病例有五期经过。发病早期特异性IgM抗体、病毒核酸阳性，恢复期特异性IgG抗体滴度是早期的四倍及以上增高。 6.诊断及鉴别诊断：诊断主要依据流行病学资料、临床表现及实验室检查结果，在疾病的不同阶段应与流感、休克型肺炎、血小板减少性紫癜、肾炎、急性兰尾炎等多种疾病相鉴别。 7.治疗原则：抓好“三早一就”，把好四关，主要采取以“液体疗法”为基础和对症治疗的综合性治疗措施。 8.预防控制措施：监测人间疫情和宿主动物，采取灭鼠防鼠和疫苗接种的综合性措施。
蛋白质组学 蛋白质是生物体的重要组成部分，参与几乎所有生理和细胞代谢过程。此外，与基因组学和转录组学比较，对一个细胞或组织中表达的所有蛋白质，及其修饰和相互作用的大规模研究称为蛋白质组学。 蛋白质组学通常被认为是在基因组学和转录组学之后，生物系统研究的下一步。然而，蛋白质组的研究远比基因组学复杂，这是由于蛋白质内在的复杂特点，如蛋白质各种各样的翻译后修饰所决定的。并且，研究基因组学的技术要比研究蛋白质组学的技术强得多，虽然在蛋白质组学研究中，质谱技术的研究已取得了一些进展。 尽管存在方法上的挑战，蛋白质组学正在迅速发展，并且对癌症的临床诊断和疾病治疗做出了重要贡献。几项研究鉴定出了一些蛋白质在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和食道癌中表达变化。例如，通过蛋白质组学技术，人们可以在患者血液中明确鉴定出肿瘤标志物。表1列出了更多的蛋白质组学技术用于研究癌症的例子。 另外，高尔基体功能复杂。最新研究表明，它除了参与蛋白加工外，还能参与细胞分化及细胞间信号传导的过程，并在凋亡中扮演重要角色，其功能障碍也许和肿瘤的发生、发展有某种联系。根据人类基因组研究，约1000多种人类高尔基体蛋白质中仅有500~600种得到了鉴定，建立一条关于高尔基体蛋白质组成的技术路线将有助于其功能的深入研究。 蛋白质组学是一种有效的研究方法，特别是随着亚细胞器蛋白质组学技术的迅猛发展，使高尔基体的全面研究变为可能。因此研究人员希望能以胃癌细胞中的高尔基体为研究对象，通过亚细胞器蛋白质组学方法，建立胃癌细胞中高尔基体的蛋白质组方法学。 研究人员采用蔗糖密度梯度的超速离心方法分离纯化高尔基体，双向凝胶电泳（2-DE）分离高尔基体蛋白质，用ImageMaster 2D软件分析所得图谱，基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定蛋白质点等一系列亚细胞器蛋白质组学方法建立了胃癌细胞内高尔基体的蛋白图谱。 最后，人们根据分离出的纯度较高的高尔基体建立了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱，运用质谱技术鉴定出12个蛋白质，包括蛋白合成相关蛋白、膜融合蛋白、调节蛋白、凋亡相关蛋白、运输蛋白和细胞增殖分化相关蛋白。通过亚细胞器分离纯化、双向电泳的蛋白分离及MALDI-TOF MS蛋白鉴定分析，研究人员首次成功建立了胃癌细胞SGC7901中高尔基体的蛋白质组学技术路线。 ? 蛋白质功能预测工具 也许生物信息学方法在癌症研究中最常用的就是基因功能预测方法，但是这些数据库只存储了基因组的大约一半基因的功能。为了在微阵列资料基础上完成功能性的富集分析，基因簇的功能注解是非常重要的。近几年生物学家研发了一些基因功能预测的方法，这些方法旨在超越传统的BLAST搜索来预测基因的功能。基因功能预测可以以氨基酸序列、三级结构、与之相互作用的配体、相互作用过程或基因的表达方式为基础。其中最重要的是基于氨基酸序列的分析，因为这种方法适合于微阵列分析的全部基因。 在表3中，前三项列举了三种同源搜索方法。FASTA方法虽然应用还不太广泛，但它要优于BLAST，或者至少相当。FASTA程序是第一个使用的数据库相似性搜索程序。为了达到较高的敏感程度，程序引用取代矩阵实行局部比对以获得最佳搜索。美国弗吉尼亚大学可以提供这项程序的地方版本，当然数据库搜索结果依赖于要搜索的数据库序列。如果最近的序列数据库版本在弗吉尼亚大学不能获得，那么就最好试一下京都大学（Kyoto University）的KEGG 站点。PSI-BLAST（位点特异性反复BLAST）是BLAST的转化版本，PSI-BLAST的特色是每次用profile搜索数据库后再利用搜索的结果重新构建profile，然后用新的profile再次搜索数据库，如此反复直至没有新的结果产生为止。PSI-BLAST先用带空位的BLAST搜索数据库，将获得的序列通过多序列比对来构建第一个profile。PSI-BLAST 自然地拓展了BLAST方法，能寻找蛋白质序列中的隐含模式，有研究表明这种方法可以有效地找到很多序列差异较大而结构功能相似的相关蛋白，所以它比BLAST和FASTA有更好的敏感性。PSI-BLAST服务可以在NCBI的BLAST
高尔基体 概述 高尔基体（Golgi apparatus）是由许多扁平的囊泡构成的以分泌为主要功能的细胞器。又称高尔基器或高尔基复合体；在高等植物细胞中称分散高尔基体。最早发现于1855年，1898年由意大利人卡米洛?高尔基（Camillo Golgi，1844-1926）在光学显微镜下研究银盐浸染的猫头鹰神经细胞内观察到了清晰的结构，因此定名为高尔基体。因为这种细胞器的折射率与细胞质基质很相近，所以在活细胞中不易看到。高尔基体从发现至今已有100多年的历史，其中一半以上的时间是进行关于高尔基体的形态甚至是它是否真实存在的争论。细胞学家赋予它几十种不同的名称，也有很多人认为高尔基体是由于固定和染色而产生的人工假像。直到20世纪50年代应用电子显微镜才清晰地看出它的亚显微结构。它不仅存在于动植物细胞中，而且也存在于原生动物和真菌细胞内。 形态与组成 高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形，凸出的一面对着内质网称为形成面（forming face）或顺面（cis face）。凹进的一面对着质膜称为成熟面（mature face）或反面（trans face）。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡，在具有极性的细胞中，高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。 顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡（图6-24），在具有极性的细胞中，高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中（图6-25）。
图6-24高尔基体各部分的名称 图6-25培养的上皮细胞中高尔基体的分布（高尔基体为红色，核为绿色）引自https://www.doczj.com/doc/a73509645.html,/ 因其看上极像滑面内质网，因此有科学家认为它是由滑面内质网进化而来的。 扁平囊的直径为1μm，由单层膜构成，膜厚6~7nm，中间形成囊腔，周缘多呈泡状，4~8个扁平囊在一起，某些藻类可达一二十个，构成高尔基体的主体，称为高尔基堆（Golgi stack）。 高尔基体膜含有大约60%的蛋白和40%的脂类，具有一些和ER共同的蛋白成分。膜脂中磷脂酰胆碱的含量介于ER和质膜之间，中性脂类主要包括胆固醇，胆固醇酯和甘油三酯。高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。 高尔基体由两种膜结构即扁平膜囊和大小不等的液泡组成。其表面看上去极像光面内质网。扁平膜囊是高尔基体最富特征性的结构组分。在一般的动、植物细胞中，3～7个扁平膜囊重叠在一起，略呈弓形。弓形囊泡的凸面称为形成面，或未成熟面；凹面称为分泌面，或成熟面。小液泡散在于扁平膜囊周围，多集中在形成面附近。一般认为小液泡是由临近高尔基体的内质网以芽生方式形成的，起着从内质网到高尔基体运输物质的作用。糙面内质网腔中的蛋白质，经芽生的小泡输送到高尔基体，再从形成面到成熟面的过程中逐步加工。较大的液泡是由扁平膜囊末端或分泌面局部膨胀，然后断离所形成。由于这种液泡内含扁平膜囊的分泌物，所以也称分泌泡。分泌泡逐渐移向细胞表面，与细胞的质膜融合，而后破裂，内含物随之排出。不同细胞中高尔基体的数目和发达程度，既决定于细胞类型、分化程度，也取决于细胞的生理状态。 功能区隔 高尔基体顺面的网络结构（cis Golgi network，CGN），是高尔基体的入口区域，接受