第四章酶习题
一、名词解释
1. 酶：生物体内一类具有催化活性和特定空间构象的生物大分子，包括蛋白质和核酸；
2. 单纯酶：由简单蛋白质构成的酶，活性仅由其蛋白质结构决定（如水解酶类：淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、脲酶等）；
3. 结合酶：酶结构中除含有蛋白质还有非蛋白质部分，这些酶属于结合蛋白质即结合酶（如绝大多数氧化还原酶）；
4. 单体酶：只有一条多肽链，大多是催化水解反应的酶，分子量较小，有核糖核酸酶、胰蛋白酶、溶菌酶等；
5. 寡聚酶：由两个或两个以上亚基组成，亚基相同或不同，亚基间非共价结合，彼此易分开，己糖激酶、3-磷酸甘油醛脱氢酶等；
6. 多酶复合体：由几种酶通过非共价键彼此嵌合形成的复合体，该复合体的形成可导致相关酶促反应依次连接，有利于一系列反应的连续进行，提高反应效率；
7. 酶的活性中心：酶与底物结合并发挥其催化作用的部位；
8. 必需基团：酶发挥催化作用与底物直接作用的有效基团，即活性中心内的必需基团；
9. 辅酶：与酶蛋白结合比较疏松（一般为非共价结合）并可用透析方法除去的辅助因子；
10. 辅基：与酶蛋白结合牢固（一般为共价键结合），不能用透析方法除去的辅助因子；
11. 酶原：某些酶（绝大多数蛋白酶是）在细胞内合成或初分泌时没有活性，这些无活性的酶的前身称为酶原；
12. 酶原激活：使酶原转化为有活性酶的作用称为酶原激活；
13. 酶的最适温度：酶催化的化学反应速度受温度影响呈倒U形曲线，到达曲线顶点所代表的温度时，反应速度最大，称为酶的最适温度；
14. 酶的最适pH：大多数酶活性受pH影响较大，酶表现最大活性时的pH称为酶的最适pH；
15. 米氏常数（Km）:酶促反应速度达到最大反应速度的一半时底物浓度；
16. 酶的激活剂：凡是能提高酶的活性，加速酶促反应进行的物质；
17. 酶的抑制剂：能对酶起抑制作用的物质；
18. 酶的自杀底物：自杀底物是一类酶的天然底物的衍生物或类似物，在它们的结构中含有一种化学活性基团，当酶把他们作为底物结合时，其潜在的化学基团能被解开或激活，并与酶的活性部位发生共价结合，使结合物停留在某种状态，从而不能分解成产物，酶因而致“死”，此过程称为酶的自杀，这类底物称为自杀底物；
19. 酶活性：酶催化化学反应的能力；
20. 比活性：每毫克蛋白质的生物活性单位；
21. 核酶：具有酶活性的RNA分子；
22. 抗体酶：专一作用于抗体分子的、有催化活性和特殊生物功能的蛋白质；
23. 同工酶：能催化相同的化学反应，但分子结构不同的一类酶；
24. 诱导酶：当细胞中加入特定诱导物质时诱导产生的酶；
25. 变构酶：又名别构酶，是寡聚蛋白，含两个或多个亚基，调节物能与酶分子的变构中心结合引起酶结构的变化，使酶活性改变，从而影响酶促反应的速度；
26. 调节酶：对代谢调节起特殊作用的酶类，分子中有活性区和调节区，其催化活性可因与调节剂结合而发生改变，有调节代谢反应的功能，一般可分为共价调节酶及变构酶两类。
二、填空题
1．酶是生物细胞产生的，具有催化活性的生物大分子，包括蛋白质和核酸。
2．T.Cech从自我剪切的RNA中发现了具有催化活性的RNA 分子，称之为核酶，这是对酶概念的重要发展。
3．结合酶（全酶）是由酶蛋白和辅助因子（辅酶或辅基）
两部分组成，其中任何一部分都无催化活性，只有全酶才有催化活性。
4．有一种化合物为Ａ－Ｂ，某一酶对化合物的Ａ，Ｂ基团及其连接的键都有严格的要求，称为绝对专一性，若对Ａ基团和键有要求称为基团专一性，若对Ａ，Ｂ之间的键合方式有要求则称为键专一性。
5．酶发生催化作用过程可表示为Ｅ＋Ｓ→ＥＳ→Ｅ＋Ｐ，当底物浓度足够大时，酶都转变为ES，此时酶促反应速成度为最大。
6．争性抑制剂使酶促反应的km增大而Vmax不变，非竞争性抑制剂使酶促反应的km不变而Vmax减小，反竞争性抑制剂使酶促反应的km减小而Vmax减小。
7．磺胺类药物能抑制细菌生长，因为它与对氨基苯甲酸结构类似，能竞争性地抑制二氢叶酸合成酶酶活性，使细菌核酸合成受阻。
8．当[S]和Km相比如果小得多时，酶促反应速度与成正比，反应为一级反应，当[S]和Km相比如果大得多时，酶促反应速度V= Vmax[S]/(Km+[S])，反应为零级反应。
9. PH对酶活力的影响，主要是由于它影响酶和底物的解离和影响分子构象。
10.温度对酶作用的影响是双重的：①温度增加，速度加快
②温度增加，变性加快。
11．同工酶是一类能催化相同化学反应但结构不同的酶，乳酸脱氢酶是由两种亚基组成的四聚体，有五种同工酶。12．酶作用的机制有底物的“趋近”和“定向”效应、底物变形与张力作用、共价键催化作用、酸碱催化作用。13．对于某些调节酶来说，Ｖ对[Ｓ]作图是Ｓ形曲线是因为底物结合到酶分子上产生的一种正协同效应而引起的。14．测定酶活力时要求在特定的pH和温度条件下，而且酶浓度必须远远小于底物浓度。
15．酶在被翻译后要进行共价修饰以调节其活性。酶的共价修饰类型有6种，即磷酸化与脱磷酸化、乙酰化与脱乙酰化、甲基化与脱甲基化、酰苷化与脱酰苷化、－SH与－S－S－的互变、聚合与解聚。16．能催化多种底物进行化学反应的酶有多个Km值，该酶最适底物的Km值最小。
17. 与化学催化剂相比，酶具有高效性、温和性、专一性、调节性、特异性等催化特性。
18．在某一酶溶液中加入Ｇ-ＳＨ能提出高此酶活力，那么可以推测巯基（-SH）基可能是酶活性中心的必需基团。19．影响酶促反应速度的因素有pH、温度、激活剂、抑制剂、[S]、[E]。
20．从酶蛋白结构看，仅具有三级结构的酶为单体酶，具有四级结构的酶寡聚酶，而在系列反应中催化一系列反应的一
组酶为多聚体系。
21. 依据国际酶学委员会的规定，按催化反应的类型将酶分为六大类，即氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂和酶类、异构酶类、合成酶类。
22. 酶的必需基团包括活性中心或活性部位和活性中心外的必需的基团。
三、选择题
1．有四种辅因子(1)NAD，(2)FAD，（3）磷酸吡哆醛，（4）生物素，属于转移基团的辅酶因子为：（ C ）
A、(1)(3)
B、(2)(4)
C、(3)(4)
D、(1)(4) 2．哪一种维生素具有可逆的氧化还原特性：（ B ） A、硫胺素 B、核黄素 C、生物素 D、泛酸3．含B族维生素的辅酶在酶促反应中的作用是：（ A ） A、传递电子、质子和化学基团 B、稳定酶蛋白的构象 C、提高酶的催化性质 D、决定酶的专一性4．有机磷农药作为酶的抑制剂是作用于酶活性中心的：（ B ）
A、巯基
B、羟基
C、羧基
D、咪唑基5．从组织中提取酶时，最理想的结果是：（ D ）
A、蛋白产量最高
B、转换系数最高
C、酶活力单位数值很大
D、比活力最高
6．同工酶鉴定最常用的电泳方法是：（ D ）
A、纸电泳
B、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳
C、醋酸纤维薄膜电泳
D、聚丙烯酰胺凝胶电泳7．酶催化底物时将产生哪种效应：（ B ）
A、提高产物能量水平
B、降低反应的活化能
C、提高反应所需活化能
D、降低反应物的能量水平8．下列不属于酶催化高效率的因素为：（ A ）
A、对环境变化敏感
B、共价催化
C、靠近及定向
D、微环境影响
9．米氏常数：（ D ）
A、随酶浓度的增加而增加
B、随酶浓度的增加而减小
C、随底物浓度的增加而增大
D、是酶的特征常数10．下列哪种辅酶结构中不含腺苷酸残基：（ C ） A、FAD B、NADP+ C、辅酶Q D、辅酶A 11．下列那一项符合“诱导契合”学说：（ B ）
A、酶与底物的关系如锁钥关系
B、酶活性中心有可变性，在底物的影响下其空间构象发生一定的改变，才能与底物进行反应。
C、底物的结构朝着适应活性中心方向改变而酶的构象不发生改变。
D、底物类似物不能诱导酶分子构象的改变
12.下列各图属于非竞争性抑制动力学曲线是: （ B ）
13．关于米氏常数Km的说法，哪个是正确的？（ D ） A、饱和底物浓度时的速度 B、在一定酶浓度下，最大速度的一半 C、饱和底物浓度的一半D、速度达最大速度一半时的底物浓度
14．酶的竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应：（ A ） A、Vm不变，Km增大 B、Vm不变，Km减小
C、Vm增大，Km不变
D、Vm减小，K m不变15．下面关于酶的描述，哪一项不正确：（ A ）
A、所有的酶都是蛋白质
B、酶是生物催化剂
C、酶具有专一性
D、酶是在细胞内合成的，但也可以在细胞外发挥催化功能
16．催化下列反应的酶属于哪一大类：（ B ）
1，6—二磷酸果糖→3-磷酸甘油醛+磷酸二羟丙酮
A、水解酶
B、裂解酶
C、氧化还原酶
D、转移酶17．下列哪一项不是辅酶的功能：（ C ）
A、传递氢
B、转移基团
C、决定酶的专一性
D、某些物质分解代谢时的载体
18．下列关于酶活性中心的描述，哪一项是错误的：（ D ）
A、活性中心是酶分子中直接与底物结合，并发挥催化功能的部位
B、活性中心的基团按功能可分为两类，一类是结合基团，一类是催化基团
C、酶活性中心的基团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的基团
D、不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性中心19．下列哪一种抑制剂不是瑚珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂：（ D ）
A、乙二酸
B、丙二酸
C、丁二酸
D、碘乙酸20．酶原激活的实质是：（ C ）
A、激活剂与酶结合使酶激活
B、酶蛋白的别构效应
C、酶原分子空间构象发生了变化而一级结构不变
D、酶原分子一级结构发生改变从而形成或暴露出活性中心21．酶原激活的生理意义是：（ C ）
A、加速代谢
B、恢复酶活性
C、生物自我保护的方式
D、保护酶的方式
22．一个简单的米氏酶催化反应，当[S]< 23．下列哪一项不能加速酶促反应速度：（ C ） A、底物浓集在酶活性中心 B、使底物的化学键有适当方向 C、升高反应的活化能 D、提供酸性或碱性侧链基团作为质子供体或受体 24．关于酶的抑制剂的叙述正确的是：（ C ） A、酶的抑制剂中一部分是酶的变性剂 B、酶的抑制剂只与活性中心上的基团结合 C、酶的抑制剂均能使酶促反应速度下降 D、酶的抑制剂一般是大分子物质 25．胰蛋白酶原经肠激酶作用后切下六肽，使其形成有活性的酶，这一步骤是: （ B ） A、诱导契合 B、酶原激活 C、反馈调节 D、同促效应26．酶的比活力是指：（ B ） A、任何纯酶的活力与其粗酶的活力比 B、每毫克蛋白的酶或RNA活力单位数 C、每毫升反应混合液的活力单位 D、以某种酶的活力作为1来表示其他酶的相对活力27．泛酸是下列哪一过程的辅酶组成成分：（ B ） A、脱羧作用 B、乙酰化作用 C、脱氢作用 D、氧化作用 28．下列哪一种维生素是辅酶A的前体：（ B ） A、核黄素 B、泛酸 C、钴胺素 D、吡哆胺 29．下列那种维生素衍生出了TPP: （ A ） A、维生素B1 B、维生素B2 C、维生素B5 D、生物素30．某一酶的动力学资料如下图，它的Km为：（ C ） A、2 B、3 C、0.33 D、0.5 四、问答题 1. 简述酶对底物的专一性方式。 答：①立体化学专一性：立体异构专一性、几何异构专一性（针对顺反异构）②非立体异构化学专一性：键专一性、基团专一性、绝对专一性 2. 简述酶作为生物催化剂的特点。 答：①要求条件温和，主要成分是蛋白质，对热敏感，易变性失活；②高效，酶促反应相对于非酶促反应快10?（n=6~12）；③高度专一性，一种酶往往只能催化一种或一类化学反应，作用于某一类或某一种特定物质；④酶的催化活性是受到调节和控制的；⑤酶可催化某些特异的化学反应，体内某些物质的合成只能由酶促反应合成。 3. 简述无机离子在酶分子中的作用。 答：①维持酶分子活性构象，甚至参与活性中心的形成，如羧肽酶A中的Zn2+； ②在酶分子中通过自身氧氧化还原而传递电子，如各种细胞色素中的Cu2+和Fe3+； ③在酶与底物之间起桥梁作用，将酶与底物连接起来，如绝大多数激酶依赖Mg2+与ATP结合，再发挥作用； ④利用离子的电荷影响酶活性，如中和电荷等，α﹣淀粉酶利用Cl﹣中和电荷，有利于与淀粉的结合，发挥催化活性。 5. 简述底物对酶促反应速度的影响。 答：酶浓度恒定条件下，底物浓度很小时，酶未被底物饱和，此时酶促反应速度取决于底物浓度，底物浓度越大，反应速度增加；底物浓度加大，酶逐渐被底物饱和，反应速度的增加与底物浓度不成正比，继而底物增加至反应速度最大值，所有酶分子被底物饱和；尔后继续增加底物浓度，反应速度不再增加。 6. 简述温度对酶活性的影响。 答：在温度较低时，反应速度随温度升高而加快，温度达到一定数值（最适温度）后，酶受热变性，反应速度随温度的继续上升而减慢。 7. 比较竞争性抑制和非竞争性抑制的异同。 答：从酶动力学图看：竞争性抑制和非竞争性抑制的米氏方程曲线不一样，双倒数曲线也不一样；竞争性抑制的抑制分数与抑制剂浓度成正比，而与底物浓度成反比；非竞争性抑制的抑制分数与抑制剂浓度成正比，与底物浓度无关。 从抑制剂的结构：竞争性抑制的抑制剂一般是底物类似物，从而能结合在酶与底物的结合部位；而非竞争性抑制的抑制剂与酶活性部位以外的基团结合，结构与底物无共同之处。 8. 为什么变构酶的S形动力学关系有利于酶对反应速度的调节？ 答：对于变构酶而言，酶反应速度对底物浓度的变化极为敏感，在完整细胞中，较低浓度下这种S形反应就体现为当底物浓度发生较小变化时，变构酶可以极大程度地控制反应速度。 五、综合分析体 1. 设计一个胰蛋白酶的分离纯化方案。 答：取2g甲壳素加入2mLCHOM水溶液（8.07mg蛋白含量）和0.25mLCHOM水溶液（173.5mg蛋白含量）混匀，加入1.25mL25%戊二醛和12.4mL水，室温下反应45min,加入Tris-HCl缓冲液悬浮，装于固定好的并装有1/4体积的亲和柱平衡液的亲和层析柱中，自然沉淀，调节蠕动泵流速2～4mL/10min,不断加入Tris-HCl缓冲液，保持柱内液面高于吸附剂面，收集出口溶液，并用分光光度计测定A280值小于0.01即可。 2. 举例说明酶在疾病诊断和治疗方面的应用。 答：一般健康人体所含有的某些酶的量是恒定在一定范围的，当患有某种疾病时，由于组织细胞受损或代谢异常会引起体内某种或某些酶的活性或含量发生相应变化，因此通过检查酶的变化，就可以诊断疾病的发生、发展情况，如淀粉酶，胰脏疾病、肾脏疾病时活性升高，肝病时活性下降； 通过补充外源性酶类药物，可以治疗因酶含量不足或酶活力降低引发的疾病，用于治疗疾病的酶类药物主要有以下几类：①助消化酶； ②消炎酶；③防治冠心病用酶；④止血酶和抗血栓酶；⑤抗肿瘤酶； ⑥其他酶类药物，诸如超氧化歧化酶治疗类风湿关节炎和放射病，青霉素酶治疗青霉素过敏等。 一、单项选择题（在备选答案中只有一个是正确的） 1．关于酶的叙述哪项是正确的？ A．所有的酶都含有辅基或辅酶 B．只能在体内起催化作用 C．大多数酶的化学本质是蛋白质 D．能改变化学反应的平衡点加速反应的进行E．都具有立体异构专一性（特异性） 2．酶原所以没有活性是因为： A．酶蛋白肽链合成不完全 B．活性中心未形成或未暴露 C．酶原是普通的蛋白质 D．缺乏辅酶或辅基 E．是已经变性的蛋白质 4．关于酶活性中心的叙述，哪项不正确？ A．酶与底物接触只限于酶分子上与酶活性密切有关的较小区域B．必需基团可位于活性中心之内，也可位于活性中心之外C．一般来说，总是多肽链的一级结构上相邻的几个氨基酸的残基相对集中，形成酶的活性中心D．酶原激活实际上就是完整的活性中心形成的过程E．当底物分子与酶分子相接触时，可引起酶活性中心的构象改变 5．辅酶NADP+分子中含有哪种B族维生素？ A．磷酸吡哆醛B．核黄素C．叶酸D．尼克酰胺E．硫胺素 6．下列关于酶蛋白和辅助因子的叙述，哪一点不正确？A．酶蛋白或辅助因子单独存在时均无催化作用B．一种酶蛋白只与一种辅助因子结合成一种全酶C．一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合成一种全酶D．酶蛋白决定结合酶蛋白反应的专一性E．辅助因子直接参加反应 8．有机磷杀虫剂对胆碱酯酶的抑制作用属于： A．可逆性抑制作用B．竞争性抑制作用C．非竞争性抑制作用D．反竞争性抑制作用E．不可逆性抑制作用 9．关于pH对酶活性的影响，以下哪项不对？ A．影响必需基团解离状态B．也能影响底物的解离状态C．酶在一定的pH范围内发挥最高活性D．破坏酶蛋白的一级结构E．pH改变能影响酶的Km值 10．丙二酸对于琥珀酸脱氢酶的影响属于： A．反馈抑制B．底物抑制C．竞争性抑制D．非竞争性抑制E．变构调节 二、多项选择题（在备选答案中有二个或二个以上是正确的，错选或未选全的均不给分） 1．关于酶的竞争性抑制作用的说法哪些是正确的？ 第七章酶化学 一、填空题 1.全酶由________________和________________组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中________________决定酶的专一性和高效率，________________起传递电子、原子或化学基团的作用。 2.酶是由________________产生的，具有催化能力的________________。 3.酶的活性中心包括________________和________________两个功能部位，其中________________直接与底物结合，决定酶的专一性，________________是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。 4.常用的化学修饰剂DFP可以修饰________________残基，TPCK常用于修饰________________残基。 5.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法)，得到的直线在横轴上的截距为________________，纵轴上的截距为________________。 6.磺胺类药物可以抑制________________酶，从而抑制细菌生长繁殖。 7.谷氨酰胺合成酶的活性可以被________________共价修饰调节；糖原合成酶、糖原磷酸化酶等则可以被________________共价修饰调节。 二、是非题 1.[ ]对于可逆反应而言，酶既可以改变正反应速度，也可以改变逆反应速度。 2.[ ]酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。 3.[ ]酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。 4.[ ]Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。 5.[ ]当[S]>> Km时，v 趋向于Vmax，此时只有通过增加[E]来增加v。 6.[ ]酶的最适温度与酶的作用时间有关，作用时间长，则最适温度高，作用时间短，则最适温度低。 7.[ ]增加不可逆抑制剂的浓度，可以实现酶活性的完全抑制。 8.[ ]正协同效应使酶促反应速度增加。 9.[ ]竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。 10.[ ]酶反应的最适pH只取决于酶蛋白本身的结构。 三、选择题 1.[ ]利用恒态法推导米氏方程时，引入了除哪个外的三个假设？ A.在反应的初速度阶段，E+P→ES可以忽略 B.假设［S］>>［E］，则［S］-［ES］≈［S］ C.假设E+S→ES反应处于平衡状态 D.反应处于动态平衡时，即ES的生成速度与分解速度相等 2.[ ]用动力学的方法可以区分可逆、不可逆抑制作用，在一反应系统中，加入过量S和一定量的I，然后改变［E］，测v，得v～［E］曲线，则哪一条曲线代表加入了一定量的可逆抑制剂？ A.1 B.2 C.3 D.不可确定 第三章酶. 三、典型试题分析 1．一个酶作用于多种底物时，其天然底物的Km值应该是(1995年生 化考题) A．最大B．与其他底物相同C．最小 D．居中E．与K3相同 [答案] C 2. 下列关于酶的活性中心的叙述哪些是正确的（1996年生化考题） A.所有的酶都有活性中心 B. 所有的酶活性中心都含有辅酶 C. 酶的必需基团都位于活性中心之内 D. 所有抑制剂都作用于酶的活性中心 E. 所有酶的活性中心都含有金属离子 [答案] A 3. 乳酸脱氢酶经透析后，催化能力显著降低，其原因是（1997年生化考题） A. 酶蛋白变形 B. 失去辅酶 C. 酶含量减少 D. 环境PH值发生了改变 E. 以上都不是 [答案] B 4. 关于酶的化学修饰，错误的是 A. 酶以有活性（高活性），无活性（低活性）两种形式存在 B. 变构调节是快速调节，化学修饰不是快速调节 B.两种形式的转变有酶催化 D. 两种形式的转变由共价变化 E. 有放大效应 [答案] B 5. ．测定酶活性时，在反应体系中，哪项叙述是正确的 A．作用物的浓度越高越好B．温育的时间越长越好 C．pH必须中性D．反应温度宜以3713为佳 E．有的酶需要加入激活剂 [答案] E 6．下列关于酶活性中心的叙述哪些是正确的(1999年生化试题) A．是由一条多肽链中若干相邻的氨基酸残基以线状排列而成 B．对于整个酶分子来说，只是酶的一小部分 C. 仅通过共价键与作用物结合D．多具三维结构 (答案] B和D 7．酶的变构调节 A．无共价键变化B．构象变化 C．作用物或代谢产物常是变构剂 D．酶动力学遵守米式方程 (答案) A、B和C 第六章酶化学（一）名词解释 1．米氏常数； 2 ．寡聚酶； 6.酶活力 7. 不可逆抑制作用； 3．活性中心； 4. 竞争性抑制作用； 8. 可逆抑制作用。 5. 非竞争抑制作用； （二）填充题 3.对于符合米氏方程的酶，v-[S] 曲线的双倒数作图（Lineweaver-Burk作图法）得到的 直线，在横轴的截距为___________，纵轴上的截距为 ____________。 4.若同一种酶有n 个底物就有 ________个 K m值，其中 K m值最 ________的底物，一般为 该酶的最适底物。 6.当底物浓度等于0.25K m时，反应初速度与最大反应速度的比值是_________。 7.酶催化反应的实质在于降低反应的______，使底物分子在较低的能量状态下达到______态，从而使反应速度______。 8.___________ 抑制剂不改变酶促反应V max， ___________抑制剂不改变酶促反应K m。 9. 含有腺苷酸的辅酶主要有、、和。 11. 维生素 A 缺乏可引起症；儿童缺乏维生素D引起；成人缺乏维生素 D 引起；维生素 C 缺乏引起；维生素 PP 缺乏引起；脚气病是由于缺乏———引起的；口角炎是由于缺乏引起的；维生素 B 缺乏引起；叶酸缺乏引 12 起。 12.维生素 B1在体内的活性形式是，维生素 B2在体内的活性形式是和。维生素PP 可形成和两种辅酶。维生素 B 是以和 6 ———形式作为转氨酶的辅酶，以形式作为氨基酸脱羧酶的辅酶。叶酸是的辅酶，叶酸在体内的活性形式是。生物素在体内的作用是。泛酸在体内的活性形式有和。 （三）选择题（在备选答案中选出 1 个或多个正确答案） 1.酶催化作用对能量的影响在于 A ．增加产物能量水平 B ．降低活化能C．降低反应物能量水平 D．降低反应的自由能E．增加活化能 2.下列哪些项是K m值的意义？ A. K m值是酶的特征性物理常数，可用于鉴定不同的酶 B. K m值可以表示酶与底物之间的亲和力，K m值越小，亲和力越大 C.K m值可以预见系列反应中哪一步是限速反应 D.用 K m值可以选择酶的最适底物 E.比较 K m值可以估计不同酶促反应速度 7.酶的比活力是指 A. 以某种酶的活力作为 1 来表示其他酶的相对活力 B. 每毫克蛋白的酶活力单位数 C. 任何纯酶的活力与其粗酶的活力比 D. 每毫升反应混合液的活力单位 E.一种酶与另一种酶的活力比 （四）判断题 1.测定酶活力时，底物浓度不必大于酶浓度。 2.当 [S]>>K m时， v 趋向于 V max，此时只有通过增加[E] 来增加 v。 3.酶的最适温度与酶的作用时间有关，作用时间愈长，则最适温度愈高。 7.在酶的催化反应中，组氨酸残基的咪唑基既可以起碱化作用，也可以起酸化作用。 8.维生素对人体有益，所以摄入的越多越好。 共三套 《酶工程》试题一： 一、是非题（每题1分，共10分） 1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。（） 2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。（） 3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。（） 4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。（） 5、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。（） 6、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。（） 7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。（） 8、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。（） 9、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。（） 10、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。（） 二、填空题（每空1分，共28分） 1、日本称为“酵素”的东西，中文称为__________,英文则为__________,是库尼（Kuhne）于1878年首先使用的。其实它存在于生物体的__________与__________。 2、1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得__________酶结晶，并指出__________是蛋白质。他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。 3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为__________,高产液化酶优良菌株菌号为___________。在微生物分类上，前者属于__________菌，后者属于__________菌。 4、1960年，查柯柏（Jacob）和莫洛德（Monod）提出了操纵子学说，认为DNA分子中，与酶生物合成有关的基因有四种，即操纵基因、调节基因、__________基因和__________基因。 5、1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25oC，PH及底物浓度为最适宜）__________,催化__________的底物转化为产物的__________为一个国际单位，即1IU。 6、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的__________、减少__________，增加__________。 7、酶的生产方法有___________，___________和____________。 8、借助__________使__________发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 9、酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有__________法，__________法和__________法三种。 10、由于各种分子形成结晶条件的不同，也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶，因此酶结晶既是__________，也是__________。 三、名词术语的解释与区别（每组6分，共30分） 1、酶生物合成中的转录与翻译 2、诱导与阻遏 3、酶回收率与酶纯化比（纯度提高比） 4、酶的变性与酶的失活 一、名词解释 1 核酶 答案: 具有催化活性的RNA。 2 酶 答案: 酶是生物体内活细胞合成的一种生物催化剂。 3 酶的竞争性抑制剂 答案: 抑制剂与底物化学结构相似，能与底物竞争占据酶的活性中心，形成EI复合物，而阻止ES复合物的形成从而抑制了酶的活性。 4 辅基 答案: 与酶蛋白结合牢固，催化反应时，不脱离酶蛋白，用透析、超滤等方法不易与酶蛋 白分开。 5 辅酶 答案: 与酶蛋白结合松散，催化反应时，与酶蛋白可逆结合，用透析、超滤等方法易与酶 蛋白分开。 6 酶的活性中心 答案: 酶与底物结合，并参与催化的部位。 7 酶原 答案: 没有催化活性的酶前体 8 米氏常数 答案: 酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 9 酶的激活剂 答案: 能提高酶活性，加速酶促反应进行的物质。 10 酶的抑制剂 答案: 虽不引起蛋白质变性，但能与酶分子结合，使酶活性下降，甚至完全丧失活性，这 种使酶活性受到抑制的特殊物质，称为酶的抑制剂。 11 酶的不可逆抑制剂 答案: 与酶的必需基团共价结合，使酶完全丧失活性，不能用透析、超滤等物理方法解除 的抑制剂。 12 酶的可逆抑制剂 答案: 能与酶非共价结合，但可以用透析、超滤等简单的物理方法解除，而使酶恢复活性的抑制剂。 13 酶的非竞争性抑制剂 答案: 抑制剂与底物化学结构并不相似，不与底物抢占酶的活性中心，但能与酶活性中心 外的必需基团结合，从而抑制酶的活性。 14 酶活力 答案: 指酶加速化学反应的能力，也称酶活性。 15 比活力 答案: 每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数(U/mg)，也称比活性或简称比活。 二、填空题 1 酶的化学本质大部分是，因而酶具有蛋白质的性质和结构。 答案: 蛋白质，理化性质，各级结构 2 目前较公认的解释酶作用机制的学说分别是、、和。 生物化学 第四章 酶 1、什么是酶?(酶的定义是什么)?酶的化学本质是什么? (1)酶是由活细胞产生的对特异底物具有高效催化作用的蛋白质和核酸 (2) 化学本质：蛋白质 2、什么是单体酶?寡聚酶?多酶复合体?多功能酶? 单体酶：由一条多肽链构成的酶，溶菌酶； 寡聚酶：由多个相同或不同亚基以非共价键连接的酶，磷酸化酶a ； 多聚复合体：由几种酶靠非共价键彼此嵌合而成。可一次催化连锁反应的复合体，丙酮酸脱氢酶系； 多功能酶：一条多肽链上同时具有多种不同催化活性的酶，生物进化中基因融合的产物，DNA 聚合酶 3、简述酶的分类?单纯酶、结合酶的定义是什么?酶蛋白、辅助因子的作用? 酶的分类：单体酶、寡聚酶、多酶复合体及多功能酶 单纯酶：仅由多肽链组成，如淀粉、脲酶、核糖核酸酶等 结合酶：由蛋白质部分和非蛋白质部分组成，其催化作用依赖于两部分的共同参与，如氨基转移酶、碳酸酐酶、乳酸脱氢酶等。 酶蛋白的作用：决定反应专一性 辅助因子的作用：决定反应的种类与性质 4、辅助因子的分类及分类依据是什么?各自(辅酶、辅基)的作用分别由哪些? 辅助因子的分类：辅酶和辅基。分类依据：按照其与酶蛋白结合的紧密程度及作用特点不同 辅酶的作用：与酶蛋白共价键结合紧密，不可用透析、超滤方法除去 辅基的作用：与酶蛋白非共价键结合不牢固，可用透析、超滤方法除去 5、什么是酶的活性中心?酶的活性中心包括哪些基团?这些基团的功能是什么? 酶的活性中心：酶分子中必需基团相对集中，形成一个与底物特异性结合并催化其反应生成产物的具有特定三维结构的区域。 活性中心的基团 (1)结合基团：可与底物结合 (2)催化基团：催化底物发生化学反应 6、什么是酶原?什么是酶原激活?酶原激活的机制是什么?简述酶原激活的生理意义? 酶原：是细胞内合成或初分泌时处于无活性状态的酶的前体 酶原激活：在一定条件下，酶原向有活性酶转化的过程。 酶原激活的生理意义：(1)酶原是酶的安全转运形式，避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。 (2)酶原是酶的安全储存形式，在需要时，酶原适时地转变成有活性的酶，发挥其催化作用。 7、什么是同工酶?乳酸脱氢酶同工酶有哪几种?血清中同工酶活性改变有何临床意义? 同工酶：催化同一化学反应，但酶蛋白分子结构、理化性质和免疫学性质不同的一组酶。 乳酸脱氢酶同工酶:1LDH 、2LDH 、3LDH 、4LDH 、5LDH 血清中同工酶活性改变的临床意义：疾病诊断 8、根据酶促反应的类型，酶可以分为哪几类? 酶 （一）名词解释 值） 1．米氏常数（K m 2．底物专一性（substrate specificity） 3．辅基（prosthetic group） 4．单体酶（monomeric enzyme） 5．寡聚酶（oligomeric enzyme） 6．多酶体系（multienzyme system） 7．激活剂（activator） 8．抑制剂（inhibitor inhibiton） 9．变构酶（allosteric enzyme） 10．同工酶（isozyme） 11．诱导酶（induced enzyme） 12．酶原（zymogen） 13．酶的比活力（enzymatic compare energy） 14．活性中心（active center） （二）英文缩写符号 1．NAD+（nicotinamide adenine dinucleotide） 2．FAD（flavin adenine dinucleotide） 3．THFA（tetrahydrofolic acid） 4．NADP+（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate）5．FMN（flavin mononucleotide） 6．CoA（coenzyme A） 7．ACP（acyl carrier protein） 8．BCCP（biotin carboxyl carrier protein） 9．PLP（pyridoxal phosphate） （三）填空题 1．酶是产生的，具有催化活性的。2．酶具有、、和等催化特点。3．影响酶促反应速度的因素有、、、、和。 4．胰凝乳蛋白酶的活性中心主要含有、、和基，三者构成一个氢键体系，使其中的上的成为强烈的亲核基团，此系统称为系统或。 5．与酶催化的高效率有关的因素有、、、 、等。 6．丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的抑制剂。 7．变构酶的特点是：（1），（2），它不符合一般的，当以V对[S]作图时，它表现出型曲线，而非曲线。它是酶。 8．转氨酶的辅因子为即维生素。其有三种形式，分别为、、，其中在氨基酸代谢中非常重要，是、和的辅酶。 9．叶酸以其起辅酶的作用，它有和两种还原形式，后者的功能作为载体。 10．一条多肽链Asn-His-Lys-Asp-Phe-Glu-Ile-Arg-Glu-Tyr-Gly-Arg经胰蛋白酶水解可得到个多肽。 11．全酶由和组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中决定酶的专一性和高效率，起传递电子、原子或化学基团的作用。12．辅助因子包括、和等。其中与酶蛋白结合紧密，需要除去，与酶蛋白结合疏松，可以用除去。13．T．R．Cech和S.Alman因各自发现了而共同获得1989年的诺贝尔奖（化学奖）。 14．根据国际系统分类法，所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六类、、、、、和。 .单选题 1．关于酶的叙述哪一个是正确的？ A．酶催化的高效率是因为分子中含有辅酶或辅基 B．所有的酶都能使化学反应的平衡常数向加速反应的方向进行C．酶的活性中心中都含有催化基团 D．所有的酶都含有两个以上的多肽链 E．所有的酶都是调节酶 2．酶作为一种生物催化剂，具有下列哪种能量效应 A．降低反应活化能 B．增加反应活化能 C．增加产物的能量水平 D．降低反应物的能量水平 E．降低反应的自由能变化 3．酶蛋白变性后其活性丧失，这是因为 A．酶蛋白被完全降解为氨基酸 B．酶蛋白的一级结构受破坏 C．酶蛋白的空间结构受到破坏 D．酶蛋白不再溶于水 E．失去了激活剂 4.下列哪一项不是酶促反应的特点？ A．酶有敏感性 B．酶的催化效率极高 C．酶能加速热力学上不可能进行的反应 D．酶活性可调节 E．酶具有高度的特异性 5．酶的辅酶是 A．与酶蛋白结合紧密的金属离子 B．分子结构中不含维生素的小分子有机化合物C．在催化反应中不与酶的活性中心结合 D．在反应中作为底物传递质子、电子或其他基团E．与酶蛋白共价结合成多酶体系 6．下列酶蛋白与辅助因子的论述不正确的是A．酶蛋白与辅助因子单独存在时无催化活性B．一种酶只能与一种辅助因子结合形成酶C．一种辅助因子只能与一种酶结合成全酶D．酶蛋白决定酶促反应的特异性 E．辅助因子可以作用底物直接参加反应 7．含有xxB的辅酶是 A．NAD B．FAD C．TPP, D．CoA E．FMN 8．下列哪种辅酶中不含核苷酸？ A.FAD B．FMN C．FH4D NAD E．CoASH 9．有关金属离子作为辅助因子的作用，论述错误的是 A．作为酶活性中心的催化基团参加反应 C．连接酶与底物的桥梁 D．降低反应中的静电斥力 E．与稳定酶的分子构象无关 10结合酶在下列哪种情况下才有活性 A.酶蛋白单独存在 B．辅酶单独存在 C．亚基单独存在 D．全酶形式存在 E．有激动剂存在 11.下列哪种辅酶中不含有xx A.CoASH B.FAD C.NAD D.CoQ E.FMN 12酶保持催化活性，必须 A.酶分子完整无缺 B.有酶分子上所有化学基团存 C.有金属离子参加 第三章酶 一、填空题： 1、组成酶的蛋白质叫，其酶蛋白与辅助因子结合后所形成的复合物称为。 2、酶的活性中心有两个功能部位，即___部位和_ __部位。 3、酶分子中具有催化功能的亲核基团主要有：组氨酸的基，丝氨酸的基及半胱 氨酸的。 4、丙二酸是酶的性抑制剂。 5、米氏常数的求法有和方法，其中最常用的 方法是。 6、1／km可近似地表示酶与底物的大小，Km越大，表明。 7、酶活性中心的特点：、、。 8、酶的结合部位决定，而催化部位决定。 9、酶活性中心往往处于酶分子表面的中，形成区，从而使酶与 底物之间的作用加强。 10、同一种酶有几种底物，就有个Km值，其中Km值最的底物，便为该酶 的底物。 11、加入竞争性抑制剂，酶的最大反应速度将，Km值将。 12、表示酶量的多少常用表示。 13、酶原激活的本质是的形成和暴露的过程。 14、酶催化的反应具有两个明显的特征：即和。 15、全酶包括和。 16、在某一酶溶液中加入GSH能提高此酶活力，那么可以推测基团可能是酶活性中心的 必需基团。 17、酶是由产生的，具有催化能力的。 18、L-精氨酸酶只作用于L-精氨酸，而对D-精氨酸无作用，因此此酶具有专一性。 19、抑制剂不改变酶促反应的Vmax，而抑制剂不改变酶促反应Km。 20、同工酶是一类相同、不同的一类酶。 21、维生素B2又叫，做为某些酶的辅基形式为、两种。 22、泛酸在生物体内主要作为、的组成成分存在，其组成物的功能基 因是，可传递。 23、NAD、FAD、COA的相同之处在于三者均有作为其成分。 24、BCCP的中文名称为。 25、人类若缺乏维生素，即产生脚气病。 26、生物素是由噻吩环与尿素结合成的一个化合物，它是辅酶，它 的生化作用是。 27、维生素B6在生物体内的功能形式是_ 和_，它可做为酶的 辅酶。 28、叶酸以作辅酶，有和两种形式，生化功能 是。 －－第三章酶测试题－－ 一、单项选择题（在备选答案中只有一个是正确的） 1．关于酶的叙述哪项是正确的？ A．所有的酶都含有辅基或辅酶B．只能在体内起催化作用C．大多数酶的化学本质是蛋白质 D．能改变化学反应的平衡点加速反应的进行E．都具有立体异构专一性（特异性） 2．酶原所以没有活性是因为： A．酶蛋白肽链合成不完全B．活性中心未形成或未暴露C．酶原是普通的蛋白质 D．缺乏辅酶或辅基E．是已经变性的蛋白质 3．磺胺类药物的类似物是： A．四氢叶酸B．二氢叶酸C．对氨基苯甲酸D．叶酸E．嘧啶 4．关于酶活性中心的叙述，哪项不正确？ A．酶与底物接触只限于酶分子上与酶活性密切有关的较小区域B．必需基团可位于活性中心之内，也可位于活性中心之外C．一般来说，总是多肽链的一级结构上相邻的几个氨基酸的残基相对集中，形成酶的活性中心D．酶原激活实际上就是完整的活性中心形成的过程E．当底物分子与酶分子相接触时，可引起酶活性中心的构象改变 5．辅酶NADP+分子中含有哪种B族维生素？ A．磷酸吡哆醛B．核黄素C．叶酸D．尼克酰胺E．硫胺素 6．下列关于酶蛋白和辅助因子的叙述，哪一点不正确？ A．酶蛋白或辅助因子单独存在时均无催化作用B．一种酶蛋白只与一种辅助因子结合成一种全酶C．一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合成一种全酶D．酶蛋白决定结合酶蛋白反应的专一性E．辅助因子直接参加反应 7．如果有一酶促反应其〔8〕=1/2Km，则v值应等于多少Vmax？ A．0．25 B．0．33 C．0．50 D．0．67 E．0．75 8．有机磷杀虫剂对胆碱酯酶的抑制作用属于： A．可逆性抑制作用B．竞争性抑制作用C．非竞争性抑制作用D．反竞争性抑制作用E．不可逆性抑制作用 9．关于pH对酶活性的影响，以下哪项不对？ A．影响必需基团解离状态B．也能影响底物的解离状态C．酶在一定的pH范围内发挥最高活性D．破坏酶蛋白的一级结构E．pH改变能影响酶的Km值10．丙二酸对于琥珀酸脱氢酶的影响属于： A．反馈抑制B．底物抑制C．竞争性抑制D．非竞争性抑制E．变构调节二、多项选择题（在备选答案中有二个或二个以上是正确的，错选或未选全的均不给分） 1．关于酶的竞争性抑制作用的说法哪些是正确的？ A．抑制剂结构一般与底物结构相似B．Vm不变C．增加底物浓度可减弱抑制剂的影响D．使Km值增大 2．关于酶的非竞争性抑制作用的说法哪些是正确的？ A．增加底物浓度能减少抑制剂的影响B．Vm降低C．抑制剂结构与底物无相似之处D．Km值不变 第三章酶 【测试题】 一、名词解释 1．酶13．最适pH 2．固定化酶14．不可逆性抑制 3．同工酶15．可逆性抑制 4．酶的特异性16．激活剂 5．酶的活性中心17．抑制剂 6．酶原及酶原激活18．核酶 7．抗体酶19．变构酶 8．活化能20．酶的共价修饰 9．诱导契合假说21．酶的Vmax 10．初速度22．结合酶 11．Km值23．酶活力 12．最适温度24．比活力 二、填空题 25．酶是由产生的对特异底物起高效催化作用的。 26．酶加速反应的机制是通过降低反应的，而不改变反应的。 27．结合酶，其蛋白质部分称，非蛋白质部分称，二者结合其复合物称。28．酶活性中心与底物相结合那些基团称，而起催化作用的那些基团称。 29．当Km值近似ES的解离常数KS时，Km值可用来表示酶对底物的。 30．酶的特异性包括特异性，特异性和特异性。 31．米曼二氏根据中间产物学说推导出V与[S]的数学方程式简称为，式中的..为米氏常数，它的值等于酶促反应速度达到一半时的。 32．在其它因素不变的情况下，[S]对酶促反应V作图呈线，双倒数作图呈线，而变构酶的动力学曲线呈型。 33．可逆性抑制是指抑制剂与酶进行结合影响酶的反应速度，抑制剂与酶的活性中心结合，抑制剂与酶的活性中心外的必需基团结合。 34．反竞争性抑制剂使酶对底物表观Km ，Vmax 。 35．无活性状态的酶的前身物称为，在一定条件下转变成有活性酶的过程称。其实质是的形成和暴露过程。 36．丙二酸是酶的抑制剂，增加底物浓度可抑制。 37、同工酶是指催化化学反应，而酶蛋白分子结构、理化性质及免疫学性质的一组酶。38．辅酶与辅基的区别在于前者与酶蛋白，后者与酶蛋白。 39．肌酸激酶的亚基分型和型。 40．最适温度酶的特征性常数，它与反应时间有关，当反应时间延长时，最适温度可以。41．某些酶以形式分泌，不仅可保护本身不受酶的水解破坏，而且可输送到特定的部位与环境转变成发挥其催化作用。 42．不可逆抑制剂常与酶以键相结合使酶失活。 43．当非竞争性抑制剂存在时，酶促反应动力学参数如下Km ，Vmax 。 44．当酶促反应速度为最大反应速度的80%时，底物浓度是Km的倍。 三、选择题 A型题 45．关于酶概念的叙述下列哪项是正确的？ 生物化学第六章酶化学 第一节概述 一、酶的概念 1、酶的概念---酶是生物催化剂 （1）所有酶均由生物体产生 几乎所有的生物都能合成酶，甚至病毒也能合成或含有某些酶。 （2）酶和生命活动密切相关 几乎所有的生命活动或过程都有酶参加 A 执行具体的生理机制，如乙酰胆碱酯酶和神经冲动有关。 B 参与消除药物毒物转化的过程，如限制性核酸内切酶能特异性地水解外源DNA,防止异种生物遗传物质的侵入。 C 协同激素等物质起信号转化、传递与放大作用，如细胞膜上的腺苷酸环化酶。 D 催化代谢反应，在生物体内建立各种代谢途径，形成相应的代谢体系。 ◆酶的组成和分布是生物进化与组织功能分化的基础。 不同生物，有各自相应的酶系和辅酶；即使同类生物，酶的组成与分布也有明显的种属差异,例如精氨酸酶只在排尿素动物的肝脏内，在排尿酸的动物中没有；例如，肝脏是氨基酸代谢与尿素形成的主要场所，因此，精氨酸酶几乎全部集中在肝脏内。 ◆在生物的长期进化过程中，为适应各种生理机能的需要，为适应外界条件的千变万化，还形成了从酶的合成到酶的结构和活性各种水平的调节机制。 2、酶的化学本质---大多数酶都是蛋白质 （1）酶的相对分子质量很大,如胃蛋白酶的相对分子质量为36000. （2）酶由氨基酸组成，将酶制剂水解后可得到氨基酸。 （3）酶具有两性性质 （4）酶的变性失活与水解一切可以使蛋白质失活变性的因素同样可以使酶变性。酶都是蛋白质？核酶不是 二、酶的催化特性 1、高效率酶的催化效率比一般化学剂高106—1013倍 2、专一性 一种酶只能作用于一类或某一种物质的性质称为酶作用的专一性或特异性。 蔗糖酶只能催化蔗糖等。 三、酶的组成及分类 1、酶的组成—根据组成分为单纯酶和结合酶 单纯酶：由简单蛋白质构成，如水解酶（淀粉酶、蛋白酶等） 结合酶：结构中含有蛋白质和非蛋白成分，结合酶分为酶蛋白或脱辅基酶蛋白，非蛋白成分称为辅因子，辅因子又分为辅酶（与酶蛋白结合疏松，可用透析法除去）和辅基（不能用透析法去除）两类。 辅酶及辅基从化学本质来看分为两类：一类为无机金属元素（铜/锌/镁/锰等），另一类为小分子有机物，如维生素。 酶蛋白决定酶的专一性。 2、酶的命名 3、酶的分类—酶按其催化的反应分类 酶工程试题(A) 一名词解释（每题3分，共计30分） 1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。 2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。 3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶 4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶 5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目 6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。 7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶 9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。 4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性； 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。 7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，交联法， 共价键结合法。 9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。 11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？ 解：优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺 （2）可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化（4）提高了酶的稳定性 （5）较能适于多酶反应 （6）酶的使用效率高产率高成本低 缺点 （1）固定化时酶的活力有损失 （2）比较适应于水溶性底物 （3）与完整的细胞相比，不适于多酶反应。 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 解：.方法:透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热变性酸碱变性表面变性等（原理略） 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 解：（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样 （2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶 （3）来源广泛，价格便宜 （4）微生物易得，生长周期短 （5）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高 （6）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种 4 下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数 [S](mol/L) V0(umol/min) 0.5?10-628 4.0?10-640 1.0?10-570 2.0?10-595 4.0?10-5112 1.0?10-4128 2.0?10-4139 1.0?10-2140 解：最大反应速度140 ，Km: 1.0?10-5 酶工程试题（B） 一名词解释 1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶 2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。 3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。 5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH 6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。 7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。 8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km减小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度，PH ，氧气，搅拌，湿度和泡沫等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有控制条件，遗传控制，其它方法。 5.酶生物合成的模式分是同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法，酸碱变性法和表面变性法 7. 通常酶的固定化方法有交联法、包埋法，吸附法、共价结合法 8. 酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的过滤态，从而降低了底物分子的能障，而抗体结合的抗原只是一个基态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？ 一般必须符合下列条件： a)不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关 b)能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高 c)菌种不易变异退化，不易感染噬菌体 d)最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高 在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？ 解：（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性 （2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 解：（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基 （2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基 （3）半胱氨酸的巯基1分 （7）丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基 （8）苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环 （9）组氨酸上的咪唑基 色氨酸上的吲哚基 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化倍数。 体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml） 初提取液120 200 2.5 硫酸铵沉淀 5 810 1.5 解：（1）起始总活力：200?120＝24000（单位） （2）起始比活力：200÷2.5＝80（单位/毫克蛋白氮） （3）纯化后总活力810?5＝4050（单位）2 （4）纯化后比活力810÷1.5＝540（单位/毫克蛋白氮） （5）产率（百分产量）：4050÷24000＝17％ （6）纯化倍数：540÷80=6.75 习题1: .单选题 1．关于酶的叙述哪一个是正确的？ A．酶催化的高效率是因为分子中含有辅酶或辅基 B．所有的酶都能使化学反应的平衡常数向加速反应的方向进行 C．酶的活性中心中都含有催化基团 D．所有的酶都含有两个以上的多肽链 E．所有的酶都是调节酶 2．酶作为一种生物催化剂，具有下列哪种能量效应 A．降低反应活化能 B．增加反应活化能 C．增加产物的能量水平 D．降低反应物的能量水平 E．降低反应的自由能变化 3．酶蛋白变性后其活性丧失，这是因为 A．酶蛋白被完全降解为氨基酸 B．酶蛋白的一级结构受破坏 C．酶蛋白的空间结构受到破坏 D．酶蛋白不再溶于水 E．失去了激活剂 4.下列哪一项不是酶促反应的特点？ A．酶有敏感性B．酶的催化效率极高C．酶能加速热力学上不可能进行的反应D．酶活性可调节E．酶具有高度的特异性 5．酶的辅酶是 A．与酶蛋白结合紧密的金属离子 B．分子结构中不含维生素的小分子有机化合物 C．在催化反应中不与酶的活性中心结合 D．在反应中作为底物传递质子、电子或其他基团 E．与酶蛋白共价结合成多酶体系 6．下列酶蛋白与辅助因子的论述不正确的是 A．酶蛋白与辅助因子单独存在时无催化活性 B．一种酶只能与一种辅助因子结合形成酶 C．一种辅助因子只能与一种酶结合成全酶 D．酶蛋白决定酶促反应的特异性 E．辅助因子可以作用底物直接参加反应 7．含有维生素B的辅酶是 A．NAD B．FAD C．TPP, D．CoA E．FMN 8．下列哪种辅酶中不含核苷酸？ A.FAD B．FMN C．FH4 D NAD E．CoASH 9．有关金属离子作为辅助因子的作用，论述错误的是 A．作为酶活性中心的催化基团参加反应 第四章 酶 1. 酶作为生物催化剂有什么特点？ 答：酶和化学催化剂一样，能够改变化学反应的速度，但不能改变化学反应的平衡。能够稳定底物形成的过渡态，降低反应的活化能。此外，酶是一类特殊的蛋白质（除酶性核酸之外），它在生物体内不仅作为各种复杂生物化学反应的催化剂，而且也作为生物体内不同能量之间转换的中间体。酶的催化特点表现为： （1）高效性。酶是自然界中催化活性最高的一类催化剂。 （2）高度专一性。酶是具有高度选择性的催化剂。主要表现在：①反应专一性，酶一般只能选择性的催化一类相同类型的化学反应。且酶催化的反应几乎不产生副反应。②底物专一性，一种酶只能作用于某一种或某一类结构性质相似的物质。 （3）需要温和的反应条件。 （4）可调控性。 2. 辅酶和金属离子在酶促反应中有何作用？水溶性维生素与辅酶有什么关系？ 答： (1) 辅酶和金属离子作为结合蛋白酶类的非蛋白部分（又称辅因子），在酶实施催化作用过程中起到非常重要的作用。只有酶蛋白与辅因子结合成的全酶才具有催化性能。 一般来说，与酶蛋白结合松散的有机小分子化合物被称作辅酶。 金属酶中，金属离子与酶蛋白结合紧密；金属激酶中金属离子与酶蛋白结合松散。 辅酶与金属酶中的金属离子在酶促反应中直接参加了反应，起到电子、原子或者某些化学基团转移的作用，决定了酶催化反应类型的专一性；而金属激酶中的金属离子主要起到激活酶的催化活性的作用。 (2) 大部分辅酶的前体都是水溶性B族维生素，许多水溶性维生素的生理功能与辅酶的作用息息相关。 3. 现有1 mL乙醇脱氢酶制剂，用缓冲溶液稀释至100 mL后，从中吸取500 μL测定酶的活力。得知2 min使0.5 mmol乙醇转化为乙醛。请计算每毫升酶制剂每小时能转化多少乙醇？（设：最适条件下，每小时转化1 mmol乙醇所需要的酶量为1个活力单位）。 一、填空题 1．酶是活细胞产生的，具有催化活性的蛋白质。2．从自我剪切的RNA中发现了具有催化活性的，称之为这是对酶概念的重要发展。 3．结合酶是由和两部分组成，其中任何一部分都催化活性，只有才有催化活性。 4．有一种化合物为Ａ－Ｂ，某一酶对化合物的Ａ，Ｂ基团及其连接的键都有严格的要求，称为，若对Ａ基团和键有要求称为，若对Ａ，Ｂ之间的键合方式有要求则称为。 5．酶发生催化作用过程可表示为Ｅ＋Ｓ→ＥＳ→Ｅ＋Ｐ，当底物浓度足够大时，酶都转变为此时酶促反应速成度为。 6．竞争性抑制剂使酶促反应的km 而Vmax 。 7．磺胺类药物能抑制细菌生长，因为它是结构类似物，能性地抑制酶活性。 8．当底物浓度远远大于Km，酶促反应速度与酶浓度。 9．PH对酶活力的影响，主要是由于它和。 10．温度对酶作用的影响是双重的：①②。11．同工酶是一类酶，乳酸脱氢酶是由种亚基组成的四聚体，有种同工酶。 12．与酶高催化效率有关的因素有、、、 和活性中心的。 13．对于某些调节酶来说，、Ｖ对［Ｓ］作图是Ｓ形曲线是因为底物结合到酶分子上产生的一种效应而引起的。 14．测定酶活力时要求在特定的和条件下，而且酶浓度必须底物浓度。 15．解释别构酶变构机理，主要有和两种。 16．能催化多种底物进行化学反应的酶有个Km值，该酶最适底物的Km 值。 17.与化学催化剂相比，酶具有、、和 等催化特性。 18．在某一酶溶液中加入Ｇ-ＳＨ能提出高此酶活力，那么可以推测基可能是酶活性中心的必需基团。 19．影响酶促反应速度的因素有、、、 、、。 20．从酶蛋白结构看，仅具有三级结构的酶为，具有四级结构的酶 ，而在系列反应中催化一系列反应的一组酶为。 二、选择题 1．有四种辅因子(1)NAD，(2)FAD，（3）磷酸吡哆素，（4）生物素，属于转移基团的辅酶因子为： A、(1)(3) B、(2)(4) C、(3)(4) D、(1)(4) 2．哪一种维生素具有可逆的氧化还原特性： A、硫胺素 B、核黄素 C、生物素 D、泛酸 3．含B族维生素的辅酶在酶促反应中的作用是：(完整版)酶_练习题及参考答案
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