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转铁蛋白相关知识

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转铁蛋白

转铁蛋白又名运铁蛋白 transferrin,TRF,siderophilin)是血浆中主要的含铁蛋白质,负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以TRF-Fe3+的复合物形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。

目录

1简介

TRF分子量约7.7万,为单链糖蛋白,含糖量约6%。TRF可逆地结合多价离子,包括铁、铜、锌、钴等。每一分子TRF可结合两个三价铁原子。TRF主要由肝细胞合成,半衰期为7天。血浆中TRF的浓度受铁供应的调节,在缺铁状态时,血浆TRF浓度上升,经铁有效治疗后恢复到正常水平。

血浆中TRF水平可用于贫血的诊断和对治疗的监测。在缺铁性的低血色素贫血中TRF的水平增高(由于其合成增加),但其铁的饱和度很低(正常值在30%-38%)。相反,如果贫血是由于红细胞对铁的利用障碍(如再生障碍性贫血),则血浆中TRF正常或低下,但铁的饱和度增高。在铁负荷过量时,TRF水平正常,但饱和度可超过50%,甚至达90%。

TRF在急性时相反应中往往降低。因此在炎症、恶性病变时常随着白蛋白、前白蛋白同时下降。在慢性肝疾病及营养不良时亦下降,因此可以作为营养状态的一项指标。

妊娠及口服避孕药或雌激素注射可使血浆TRF升高。

有免疫试剂盒供应抗体级标准品。用免疫扩散或浊度法检测。正常成人参考值为2200-4000mg/L。新生儿为1300-2750mg/L。临床评价时常同时测定血清铁含量及TRF的铁结合容量(TIBC),并可计算出的TRF铁饱和度(%)。TRF亦可通过测定而间接计算估得,其计算方程式如下:

1.《医疗器械监督管理条例》(中华人民共和国国务院令第276号第十三条)

2.《医疗器械注册管理办法》(国家食品药品监督管理局令第16号第三十八条至第四十一条)

3.《医疗器械说明书、标签和包装标识管理规定》(国家食品药品监督管理局令第10号)

4.《医疗器械标准管理办法》(国家药品监督管理局令第31号)

5.关于印发《体外诊断试剂注册管理办法(试行)》的通知(国食药监械[2007]229号)

6.关于印发《体外诊断试剂质量管理体系考核实施规定(试行》、

《体外诊断试剂生产实施细则(试行》、

《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准(试行)》的通知(国食药监械[2007]239号)

《南京医科大学学报(自然科学版)》2012年08期

粪转铁蛋白检测的临床应用

杨瑞霞凌芸马蔡昀蒋理

【摘要】:目的:评价免疫法测粪转铁蛋白和粪血红蛋白的临床应用价值,为临床正确诊断消化道出血提供较为便捷、准确的方法。方法:对148例本院消化科和胃肠外科经内窥镜确诊为消化道出血患者的粪便标本分别使用单克隆血红蛋白法和单克隆转铁蛋白法进行隐血试验,并对结果进行分析。结果:单克隆血红蛋白法的阳性率为60.8%,单克隆转铁蛋白法的阳性率为64.9%;在上消化道出血的患者中,单克隆血红蛋白法的阳性率低于单克隆转铁蛋白法,在下消化道出血的患者中,单克隆血红蛋白法的阳性率高于单克隆转铁蛋白法。结论:单克隆血红蛋白法和单克隆转铁蛋白法的特异性均较好,但均有一定的假阴性;且单克隆转铁蛋白法更有助于上消化道出血的诊断。二者联合使用更有助于协助临床诊断消化道出血。

【作者单位】:南京医科大学第一附属医院医学检验学部;

【关键词】:粪便隐血试验血红蛋白转铁蛋白单克隆抗体

【分类号】:R446.13

【正文快照】:

隐血是指消化道出血量很少,肉眼不见血色,而且少量红细胞又被消化分解,以致显微镜下也无从发现的出血状况。粪便隐血试验(fecal occult bloodtest,FOBT)对诊断消化道出血、筛查消化道恶性肿瘤有重要的参考价值。隐血试验主要有化学法和免疫法,过去一直沿用化学法检测粪便隐血

《临床检验杂志》2004年02期

3种粪便隐血试验试剂实验效果观察

李林海黄晓燕张云虎徐德兴

【摘要】:

【作者单位】:广州军区广州总医院检验科广州军区广州总医院检验科广州军区广州总医院检验科广州军区广州总医院检验科

【关键词】:粪便隐血试验方法评价

【分类号】:R446.13

【正文快照】:

粪便隐血试验(fecaloccultbloodtest ,FOBT )对消化道出血的诊断及消化道恶性肿瘤的筛查有重要的参考价值。目前仍在基层医疗机构中普遍应用的仍是传统的化学法,有关胶体金试条法国内已有文献评价[1 3] ,本文以胶体金试纸条法的检测结果为标准,分别对联苯胺法、贝索试纸法

《临床检验杂志》2004年01期

免疫法与化学法测定隐血的比较

高茂馗束国防

【摘要】:

【作者单位】:东南大学附属中大医院检验科东南大学附属中大医院检验科

【关键词】:单克隆胶体金隐血试验

【分类号】:R446.6;R446.1

【正文快照】:

我院从1998年开始应用胶体金试纸测定隐血[1] 并取得了较满意的结果,同时发现在某些特殊标本胶体金法检测结果常与临床不符。为此,对胶体金法与邻联甲苯胺法及尿隐血试纸进行比较,报告如下。1材料与方法1.1标本38例临床确诊为上消化道出血患者的“柏油”样粪便:1

转铁蛋白试验(长征医院)

便隐血转铁蛋白临床实验应用体会 宓庆梅上海市长征医院 粪便隐血试验是检测消化道出血的一个重要指标,检测方法选择的不同会直接影响判断消化道是否出血和出血的程度。目前,常规的检测方法有化学法(邻甲联苯胺法)和血红蛋白法(单克隆免疫法)。化学检测法中,易产生假阳性,并且敏感性偏底,对于消化道内的微量出血不易测出;血红蛋白法中,敏感性强,可以检测出很微量的出血情况,但是,消化道内大量出血反而会导致假阴性的结果。便隐血检测是美国最常使用的结肠癌和直肠癌普查初筛试验,也是目前唯一通过随机临床试验证实的,可以降低结肠癌和直肠癌所致死亡的检查,实施每年粪便隐血检测可以早期发现结肠癌和直肠癌的发生,可以降低30%的结肠癌和直肠癌患者的死亡率。本文对化学法、血红蛋白法和转铁蛋白法三种便潜血检测方法抗体法进行了比对试验。用单克隆胶体金显色技术,以试纸条一步法检测粪便中血红蛋白,有较高的敏感性和特异性。转铁蛋白单克隆抗体法试纸是由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、抗转铁蛋白单抗金标垫、玻璃纤维样品吸液层组成,底板中部为硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜上有一条转铁蛋白单抗反应线和一条羊抗鼠多克隆抗体控制线,在底板一端端头为吸水板,另一端端头为玻璃纤维样品吸液层,硝酸纤维素膜两端分别与吸水板和抗转铁蛋白单抗金标垫相互交叠连接,在抗转铁蛋白单抗金标垫上压有玻璃纤维样品吸液层。当人尿液、粪便中带有转铁蛋白抗原时,样品中转铁蛋白抗原可与抗转铁蛋白单克隆抗体金标探针发生特异结合而被抗转铁蛋白单克隆抗体识别,即发生双抗夹心特异结合,因而可测定尿液、粪便中的转铁蛋白含量。 1.材料和方法 1.1试剂: 1.1.1邻甲联苯胺试剂:邻甲联苯胺1g,溶于50ml冰醋酸和50ml无水乙醇的混合液中,置于4℃冰箱中,避光保存;3%过氧化氢液。 1.1.2粪便血红蛋白胶体金试剂盒(简称WH试纸条):万华普曼生物工程有限公司提供的万华牌“消康保”试纸条。 1.1.3转铁蛋白单克隆抗体法试剂盒:万华普曼生物工程有限公司提供的万华牌“消康保”试纸条。 1.2标本来源:本院2008年1月至3月的住院患者随机132例粪便,男81例,女51例,年龄为27岁至71岁。 1.3方法:

重组铁蛋白的活性研究[设计+开题+综述]

开题报告 食品质量与安全 重组铁蛋白的活性研究 一、选题的背景与意义 铁是人体生理代谢必需元素之一,也是不可缺少的营养元素。缺铁对儿童的智力、身体发育,免疫功能,消化吸收功能均有较大影响。缺铁性贫血是世界上最普遍的营养缺乏症,会损坏免疫系统,降低人的生理和心理机能,也会阻碍大脑认识能力的发育。据估计,全球约有30%的人口受缺铁的痛苦。在以稻米等植物性食物为主食的发展中国家,缺铁的影响程度更大,有近半数的5岁以下儿童和超过一半的孕妇患有铁缺乏症。 铁蛋白是一种广泛存在于动物、植物和微生物中的铁储存蛋白,是动植物生长发育的储存铁的共同来源。当细胞内二价铁离子含量高时,铁蛋白通过它的亚铁氧化还原中心,在氧气的帮助下,将其催化氧化生成无毒的三价铁储藏在它的内部,1分子铁蛋白最多可储存4500个三价铁,这个特点是铁蛋白与其它酶最大的不同之处;当细胞需要铁时,铁蛋白在还原剂的帮助下,将三价铁还原为二价铁离子从其内部释放出来,以供其它蛋白质合成利用,所以铁蛋白在细胞内具有去除二价铁离子的毒性以及调节铁代谢平衡的双重作用,同时它还参与细胞RNA代谢的调节。有研究认为该蛋白是解决动物和人类全球饮食缺铁的有效方法。 纽虫是一类生活在浅海潮间带的无脊椎动物,在世界各地都有分布,它具有柔软、能伸展、无分节的身体,以及一个极具特征性的捕食器——能够翻转的吻。研究表明其铁蛋白有较强的结合铁的能力,因此通过基因工程技术导入铁结合蛋白基因来提高食品铁含量以改良其营养品质将具有十分重要的意义。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题: 基本内容: 1、重组铁蛋白的获取 (1)IPTG诱导重组蛋白的表达,SDS—PAGE检测表达的情况; (2)大量表达蛋白并检测该蛋白为可溶性还是包涵体形式存在;

血清铁总铁结合力测定的临床意义

血清铁(IRON)、总铁结合力(TIBC)测定的临床意义 人体内含铁量为4克左右,其中三分之二存在于红血球的血红蛋白当中,其余三分之一储备在肝、脾和骨髓中。血清中的铁离子全部与转铁蛋白结合,是铁离子的运输形式,称为血清铁(IRON或Fe)。通常血清中内有三分之一转铁蛋白结合,其余转铁蛋白结合铁的潜力称为不饱和铁结合力(UIBC)。血清转铁蛋白结合最大铁量称为总铁结合力(TIBC)它等于血清铁与不饱和铁结合之和。 一、血清铁(IRON或Fe) 正常参考值:-μmol/l 成人男子-μmol/l 成人女子-μmol/l 儿童-μmol/l 老人-μmol/l 临床意义: 1、血清铁增高:红细胞破坏增多,如溶血性贫血;红细胞再生成熟障碍性疾病,如再生障 碍性贫血,巨幼红细胞性贫血等;铁的利用率减低,如铅中毒或维生素B6缺乏引起的造血功能减退;贮存铁释放增加,如急性肝细胞损害、坏死性肝炎等;铁的吸收率增加,如血色素沉着症、含铁血黄素沉着症、反复输血或铁剂治疗。 2、血清铁降低:机体摄取不足,如营养不良、胃肠道病、慢性腹泻等;失铁增加,如失血; 生理成长所需补充不足,如妊娠、婴儿生长期;铁释放减少,如急性玫慢性感染、尿毒症等;某些药物治疗所致。 二、血清总铁结合力(TIBC)正常参考值:—μmol/l 临床意义: 1、血清总铁结合力增高:转铁蛋白合成增加,如缺铁性贫血;转铁蛋白释放增加,如肝细 胞坏死。 2、血清总铁结合力降低:转铁蛋白丢失,如肾病、尿毒症等;转铁蛋白合成不足,如遗传 性转铁蛋白缺乏症。 三、未饱和铁结合力(UIBC) 正常参考值:-μmol/l 参考下图可助说明:

人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)1000ng 中文说明书

人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)定量检测试剂盒(ELISA) 使用说明书 仅供科研使用,不得用于医学诊断。 使用前仔细阅读本说明书。 用途:用于定量检测人血清、血浆及相关液体样本中可溶性转铁蛋白受体(sTfR)的含量。 工作原理 本试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法(ELISA),测定样品中人可溶性 转铁蛋白受体(sTfR)的水平。向预先包被人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)抗体的酶 标孔中加入标准品、待测样本和HRP标记的可溶性转铁蛋白受体(sTfR)抗体, 经过温育和洗涤,去除未结合的组分,然后再加入底物A、B,产生蓝色,并在 酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)的浓度呈正相关。 试剂盒组成 1标准品(1000ng/ml)0.5ml7显色剂A液6ml 2标准品稀释液6mL8显色剂B液6ml 3酶标包被板12孔×8条9终止液6ml 4酶标试剂6ml10说明书1份520×浓缩洗涤液25ml11封板膜2张6样品稀释液6ml12密封袋1个注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:1000、500、250、125、62.5、0ng/ml 需要而未提供的试剂和器材 1.37℃恒温箱。 2.标准规格酶标仪。 3.精密移液器及一次性吸头 4.蒸馏水, 5.一次性试管 6.吸水纸 注意事项 1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差 3.建议所有标准品、样本都做双份检测。 4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。 6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。 洗板方法 手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中 标本要求 1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 操作程序 1.分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl;在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。轻轻晃动混匀,37℃温育60分钟。 2.弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。 3.每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 4.取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 5.测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。 6.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的,其实际浓度应该乘以总稀释倍数。 操作程序总结:

人乳铁蛋白转基因研究进展

*基金项目:国家高技术研究与发展计划(863)重大专项(2002AA206111)资助。 赵春江,男,1970年生,中国农业大学生物学院博士后。E-mail:.**通迅作者。Author for correspondence.E-mail:.收稿日期:2003-05-19接受日期:2003-09-17 农业生物技术学报Journal of Agricultural Biotechnology 2004,12(4):470~475 ·综述 ·人乳铁蛋白转基因研究进展* 赵春江刘兆良 樊宝良李 宁** (中国农业大学农业生物技术国家重点实验室, 北京100094)摘要:人乳铁蛋白是一种具有多种生理功能的糖基化蛋白,可可逆性地结合两个铁离子。概述了人乳铁蛋白的结构和理化性质,以及乳铁蛋白基因的结构,并着重论述了人乳铁蛋白转基因研究的状况和主要研究成果。在此基础上,提出了尚未解决的问题,并展望了人乳铁蛋白转基因研究的前景。 关键词:人乳铁蛋白;人乳铁蛋白基因;重组人乳铁蛋白 Study Progress of Human Lactoferrin Transgene ZHAO Chun-Jiang LIU Zhao-Liang FAN Bao-Liang LI Ning** (State Key Laboratory for Agrobiotechnology,China Agricultural University,Beijing 100094,China) The human lactoferrin (hLF)is an iron-binding glycoprotein with muti-functions,including broad spectrum antimicro-bial activity and anti-inflammatory and immunoregulatory activities.In the review,the protein and gene structures and their physical and chemical properties of hLF were briefed.The main achievements of hLF transgenic study were assessed in detail.On the basis of the assessment,the aspects in the study which need more efforts to be investigated were presented. human lactoferrin;human lactoferrin gene;recombinant human lactoferrin 人乳铁蛋白(human lactoferrin ,hLF )是一种属 于铁结合蛋白家族的糖基化蛋白[1],由Sorensen 和 Heremans [2]首次发现, 并由Blanc 和Isliker 命名。乳铁蛋白可以可逆性地结合两个铁离子,其离子结合强度是运铁蛋白(在体内对铁起运输作用的主要蛋白)的300倍[3]。人乳铁蛋白由692个氨基酸组成,分子量约为80kD [4]。在乳铁蛋白内有2个具有铁离子结合能力的叶状结构,一个是氨基端区,即 N-lobe ,另一个为羧基端区, 即C-lobe [5]。两区间有40%的同源氨基酸序列。每个区能结合一个铁离子,同时结合1个二价炭酸根阴离子。人乳铁蛋白为N 端连接的糖基所修饰。经酶促反应,一个寡聚糖苷链以共价键结合在以Asn-Xaa-Thr/Ser 顺序排列的天冬酰胺酸残基上[6]。人乳铁蛋白有3个可能被糖基 化的位点, 分别位于C 叶的第138的天冬酰胺酸残基、N 叶的第479、624天冬酰胺酸残基上[4]。在3个位点中,位于138、479的天冬酰胺酸残基优先被糖 基化,第624的天冬酰胺酸残基的糖基化受第479 位天冬酰胺酸残基糖基化的限制[7]。乳铁蛋白广泛存在于哺乳动物的体液和嗜中性粒细胞的次级颗粒中,乳铁蛋白具有的生理功能主要包括:广谱的抗菌功能、抗炎症功能和免疫生理调节功能[8]。这些功能是通过乳铁蛋白直接获取铁离子或结合在细胞表面而使菌体细胞通透性增加实现的[9]。乳铁蛋白可结合发生炎症区域的铁离子,从而阻止游离的铁离子参与催化有害的氧化反应。乳铁蛋白同时也能影响T 细胞的扩增反应[10]。一些研究表明,乳铁蛋白在体内的抗菌作用远比体外强。这可能是由于乳铁蛋白上存在着抑菌和潜在的免疫调节功能区。在体内,乳铁蛋白通过与体内的细胞结合而发挥抗菌和免疫调节作用[11]。人乳铁蛋白的许多生理功能的发挥有赖于与特异性细胞受体的结合[12]。现已发现人乳铁蛋白受体存在于多种细胞,如肠细胞、血小板、哺乳动 物上皮细胞、 淋巴细胞等[13,14]。其它人乳铁蛋白潜在

血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书

货号:MS2811 规格:100管/96样血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: 血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力,其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。 测定原理: Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物,在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下,血清转铁蛋白可以与Fe3+结合,剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+,此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关;酸化后,转铁蛋白结合的Fe3+释放,并且进一步被还原 Fe2+,此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。 自备实验用品及仪器: 天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 试剂组成和配制: 试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存。 试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。 试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。(临用前根据用量将A液和B液按1:1混合) 试剂四:液体 7mL×1 瓶,4℃保存。 测定操作表: 1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至562nm。 血清总铁结合力计算公式: 总铁结合能力定义:37℃条件下,每升血清结合Fe3+的μmol数。 a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准曲线:y=0.5478x+0.0281,R2=0.9981 总铁结合能力TIBC(μmol/L)=(ΔA-0.0281)÷0.5478×V反总÷V样=20.99×(ΔA-0.0281)b. 用 96 孔板测定的计算公式如下 第1页,共2页

铁蛋白和转铁蛋白的区别

铁蛋白和转铁蛋白的区别 铁蛋白与转铁蛋白都是人体中的蛋白质,两者在名字上虽有一字之差,但两者的区别 却是非常大的,因此并不能将两者混为一谈,很多人都不太了解铁蛋白与转铁蛋白有什么区别,为了方便大家了解这两种蛋白,本文就为大家详细分析两者的区别。 铁蛋白与转铁蛋白的区别介绍 铁蛋白与转铁蛋白的区别分析 一般人体内既含有铁蛋白,又含有转铁蛋白,但两者并不冲突,都属于肝功能检查中 的指标,铁蛋白和转铁蛋白的正常与否能直接影响到人体的健康,对人体都十分重要,但两者也存有区别,具体如下: 1、作用区别 铁蛋白是一种贮存铁的可溶组织蛋白,其主要作用是调节人体内的铁元素平衡,同时 也能将铁运输给红细胞来合成血红蛋白;而转铁蛋白又被称为运铁蛋白,其作用是运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。 转铁蛋白是转运体的蛋白成分,铁蛋白是和铁结合的存储写的蛋白成分,两者作用发挥不同,所以从铁蛋白与转铁蛋白的作用上来看,他们是不一样的。 铁蛋白和转铁蛋白的作用不同 2、临床意义 铁蛋白铁蛋白的临床意义是反映人体的铁贮备情况及机体营养状态,并判断人体是否 存在缺铁性贫血以及肝脏功能的状况;而转铁蛋白检查则是用于贫血的诊断和对治疗的监测,以及是否存在某些疾病。 在两者的临床意义上,铁蛋白检查是用于判断人体是否存在肝脏方面的疾病,比如肝癌、肾炎以及胰腺瘤等;转铁蛋白检查则是为了判断人体是否存在再生障碍性贫血、肝细胞坏死、感染性疾病、风湿性关节炎、慢性溶血性贫血以及系统性红斑狼疮等。

铁蛋白与转铁蛋白在临床意义上有区别值得一提的是,人体中的铁蛋白和转铁蛋白都可能出现异常的情况,比如偏高或偏低,就拿转铁蛋白为例,偏高容易出现缺铁性贫血、急性病毒性肝炎以及干细胞坏死。 不管是转铁蛋白偏高的危害,还是转铁蛋白偏低的危害,都不能被忽视,一旦大家遇到自身转铁蛋白出现异常,应立即就医诊治。 Tips: 无论是转铁蛋白异常还是铁蛋白异常,导致的病因并不少,在没有完全确诊的情况下不能盲目治疗,需在医院进行详查后,再经过医生的指导进行正确的治疗。

血清铁总铁结合力未饱和铁结合力铁饱和度

血清铁总铁结合力未饱 和铁结合力铁饱和度 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#

血清铁、总铁结合力、未饱和铁结合力、铁饱和度 1.原理:血清铁离子在酸性溶液中与显色剂反应生成红色络合物,其颜色的深浅与铁含量成正比,与标准铁比较可求得血清铁的含量。测铁结合力时,在被检血中加入过量的铁,使血清中的铁蛋白饱和,过剩的铁用碱性碳酸镁吸附,去除,然后用血清铁方法测定。 2.试剂:试剂RⅠ抗坏血酸,试剂RⅡ缓冲液,试剂RⅢ显色剂。 结合力试剂盒内RⅠ铁溶液,RⅡ碱性碳酸镁。 3.操作:工作液配制:取一定量RⅡ复溶一瓶RⅠ即为工作液。 血清铁测定: 再次混匀,分别读取吸光度为终末吸光度。 4.计算:R、S、B管分别减自已的试剂空白,其结果用下公式计算 Fe=(R-B/S-B)标准液浓度。 总铁结合力测定: 血清测定前要作如下处理:血清加铁溶液1ml混匀1分钟,置室温5-30分钟再加入2/3量匙的碳酸镁,混匀1分钟,放室温30-60分钟,其间振摇5次,然后3000转/分离心5分钟,取上清液按血清铁法进行铁测定。 计算:总铁结合力=(R-B/S-B)×标准液浓度×3 未饱和铁结合力=总铁结合力-血清铁 铁饱和度=(血清铁/总铁结合力)×100% 5.正常参考值: SI脐血:~L,出生时:~L;6个月~2岁:~L,2~6岁:~L,6~12岁:~/L; SI 男:~/L。女:~L。 TIBC男:~L。女~L。 UIBC男:~L。女:~L ISAT男:~。女:~。 6.注意事项:标本新鲜无溶血,所有的用器不能含有铁,每次需作试剂空白。 7.临床意义:血清铁及总铁结合力的高低受铁的吸收、贮存及利用因素的影响,在不同疾病有相应的变化。血清铁水平代表铁进入和离开循环之间的平衡,总铁结合力于铁贮存减少时开始增高。 7.1血清铁增加:见于HA、AA、MA、SA等。 7.2血清铁降低:见于IDA、肾病综合症、慢性贫血、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。

血清可溶性转铁蛋白受体(sTfR)检测的临床意义

血清可溶性转铁蛋白受体(sTfR)检测的临床意义 发布时间:2009-3-9 被阅览数:40 次作者:检验科免疫室 血清可溶性转铁蛋白受体(sTfR)检测的临床意义 功能性缺铁的最灵敏的标志物 大多数的化验室如今用血清中的铁来评价铁的状态,包括总铁结合能力、转铁蛋白饱和度和铁蛋白。然而,这些参数有一些局限性:在紧张状态或受感染的情况下,血清中铁的水平就会降低。并且血清中铁的波动也非常大,在几天间,甚至一天之内的差别也会很大,这会影响总铁结合力和转铁蛋白饱和度的值。总铁结合力的特异性较高,但是灵敏度较差。转铁蛋白饱和度不能区分缺铁性贫血和其他慢性疾病引起的贫血。测定铁蛋白的主要缺点是,在炎症状态下铁蛋白的量也会升高。因此,在这样的情况下,即使缺铁,铁蛋白水平也会表现为正常,甚至稍高于正常。所有的这些局限性都可以在改用测定可溶性转铁蛋白受体来评价铁水平时被克服。 转铁蛋白受体是一穿膜的糖蛋白,它倾向于结合已经结合了2价铁的转铁蛋白,并且通过受体介导的内吞作用进入细胞。所有的体细胞都在其表面表达转铁蛋白受体,但75-80%的转铁蛋白受体存在于骨髓的红细胞样细胞的前体中。肝和胎盘的组织中转铁蛋白受体的密度也很高。转铁蛋白受体的细胞外部分经剪切后成为可溶性转铁蛋白受体,它与细胞上的受体的浓度成一定的比例。 测定可溶性转铁蛋白受体的主要目的是诊断是否缺铁。由于它是一个极为灵敏的标志物,诊断结果可与慢性疾病引起的贫血相区别。又由于它与红细胞生成的量有关,因此它可作为监测红细胞生成治疗效果的最早的标志物。 在缺铁性贫血发生时(此时的临床症状还不明显),铁的消耗尽首先表现为铁蛋白水平的降低,但此时可溶性转铁蛋白受体的水平仍然正常。在第二阶段,缺铁造成了血红蛋白生成障碍,此时的贫血就伴有小红细胞和血红蛋白的量不足。随着这些参与正常生理功能的铁的缺乏,可溶性转铁蛋白受体在血清中的浓度就增加了。用铁蛋白水平诊断贫血有一定的局限性,是因为它只能用来表征贫血初期短时间内的行为,不能区分缺铁性贫血和其他慢性疾病引起的贫血。另外,缺铁性贫血和其他慢性疾病引起的贫血可同时存在(复合性贫血)。区分缺铁性贫血和慢性贫血的金标准是测定骨髓中的可染铁。但这是一项创伤性检查,会令病人感到紧张。如果改为测定可溶性转铁蛋白受体就可很方便地区分缺铁性贫血和慢性贫血。 患有由慢性疾病引起的贫血的病人不一定缺铁。贫血是一个伴随性的症状,尤其在慢性炎症疾病中,例如风湿病和恶性肿瘤。慢性疾病引起的贫血的机制还未完全搞清,可能是将铁从储存地运出不足(铁分配不足),减少了红细胞生成素的刺激作用,同时缩短了红细胞的半衰期。由慢性疾病引起的贫血的患者,铁蛋白的水平不成比例地增加,引起的血红蛋白量不足和形成小红细胞的症状与缺铁性贫血的症状相似。相反,可溶性转铁蛋白受体的浓度只在缺铁的情况下才会变化,其他的因素不会影响它。在1997年发表的在Punnonen进行的一项血液诊

纳米凝胶的研究进展

纳米凝胶的研究进展 摘要:纳米凝胶是由亲水性或两亲性高分子链组成的三维网状结构,它能显著的溶胀于水但是不溶解于水,由于水和凝胶网络的亲和性,水可能以键合水、束缚水和自由水等形式存在于高分子网络中而失去流动性,因此纳米凝胶能够保持一定的形状。它们可以作为一种药物载体,而且也可以通过盐键,氢键或者疏水作用自发的结合一些生物活性分子。高分子电解质的纳米凝胶可以稳定地结合带相反电荷的小分子药物和生物大分子,比如寡或多聚核苷酸(siDNA,DNA)和蛋白质。目前的研究表明纳米凝胶在生物医药方面有很广阔的应用前景。关键词:纳米凝胶药物载体 前言 纳米凝胶通常指的是由物理或者化学交联的聚合物网络组成的水凝胶颗粒, 它是一种纳米尺度的水分散体。按形成的化学键,凝胶分为两种:一种是化学凝胶(聚合物凝胶),这种凝胶是由交联的共价键而形成的三维网络结构,比如PEG-cl-PEI。另一种是物理凝胶,是由非共价键形成的三维网络结构,比如甘露糖类,右旋糖酐等。按溶剂分,则一般分为有机凝胶和水凝胶。 纳米凝胶可以很好的作为药物运输载体是因为它们有很高的负载能力,高的稳定性,更重要的是相对于普通的药物纳米载体,它们对环境敏感,比如离子强度,pH和温度。至从2002年第一篇关于纳米凝胶的合成与应用的综述发表后,这类新颖的纳米结构材料在药物,大分子和显影剂运输方面受到人们越来越大的关注。这篇综述简单介绍了纳米凝胶的合成与

应用,尤其是药剂学方面的应用。 没有负载的纳米凝胶含有大量的水而处于一种溶胀的状态。纳米凝胶可以通过生物活性因子与其多聚链基质之间的静电作用,范德华力或者疏水作用自发的负载这些因子。因此,纳米凝胶塌陷而形成稳定的纳米粒子,生物活性因子负载其中。可以在其结构中加入分散的亲水性聚合物比如聚乙二醇来阻止纳米凝胶的聚集。在负载药物的纳米凝胶络合物塌陷的过程中,这类聚合物可以暴露在其表面并形成一个亲水的保护层从而阻止了相分离。纳米凝胶表面的官能团可以进一步的用各种不同的靶向基团修饰以达到靶向输送特定部位的目的。研究表明纳米凝胶可以将其负载送到细胞里面并穿过生物膜。这种纳米凝胶有很好的稳定性并且可以保护生物活性因子不被细胞内代谢系统降解。纳米凝胶在全身性药物输送及提高口服和脑部位的生物利用度方面表现出很大的潜能。 1 纳米凝胶的制备 目前报道的制备纳米凝胶的方法有以下几种:(1)聚合物之间的物理自组装;(2)均相或微小非均相环境下的单体聚合;(3)形成了的聚合物交联;(4)模板辅助。下面详细介绍这几种方法。 许多研究团队用聚合物之间的物理自组装制备了各种不同的纳米凝胶。这种方法通常包括控制亲水性聚合物之间通过疏水作用或者静电作用或者氢键导致的聚集。这种制备纳米凝胶的方法在温和条件和水介质中进行。亲水性聚合物相互作用将生物大分子包裹其中,并且对于制备负载蛋白质的纳米凝胶非常有用。比如Akiyoshi等人通过胆固醇修饰的淀粉之间的疏水作用制备了负载胰岛素的纳米凝胶(如图1a)【1】。这种纳米凝胶在一个窄的胆固醇∕糖比例(1:40-1:100)

人转铁蛋白(TF)

人转铁蛋白(TF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用 检测范围:0.023nmol/L –1.5nmol/L 最低检测限:0.006nmol/L 特异性:本试剂盒可检测人TF,且与其他相关蛋白无交叉反应。 有效期:6 个月 预期应用:ELISA 法定量测定人血清、血浆中TF 含量。 说明 1. 试剂盒保存:2-8℃。 2. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。 3. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗TF 抗体的微孔中加入标本或标准品、HRP 标记的抗TF 抗体,经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TF 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板(Assay plate ):一块(96 孔)。 2. 标准品(Standard):2 瓶(冻干品)。 3. 酶结合物(HRP-conjugate): 1 x 120μl /瓶。 4. 酶结合物稀释液(HRP-conjugate Diluent) : 1×20ml/瓶。 5. 样品稀释液(Sample Diluent):2×20ml/瓶。 6. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 7. 浓洗涤液(Wash Buffer)1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25 倍。 8. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶。 需要而未提供的试剂和器材 1. 标准规格酶标仪 2. 高速离心机 3. 电热恒温培养箱 4. 干净的试管和Eppendof 管 5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器 6. 蒸馏水,容量瓶等 标本的采集及保存 1. 血清:全血标本请于室温放置2 小时或4℃过夜后于1000 x g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2. 血浆:可用EDTA 或肝素作为抗凝剂,标本采集后30 分钟内于2 - 8° C1000 x g 离心15 分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 标本的稀释原则: 血清,血浆样本用样本稀释液进行1:20000 倍稀释后进行检测,具体操作如下:取1μl 样本加入到99μl 的样本稀释液(1:100 稀释)中混匀,再从上述稀释液中取1μl 加入到

血清铁、总铁结合力、未饱和铁结合力、铁饱和度

血清铁、总铁结合力、未饱和铁结合力、铁饱和度 1.?原理:血清铁离子在酸性溶液中与显色剂反应生成红色络合物,其颜色的深浅与铁含量成正比,与标准铁比较可求得血清铁的含量。测铁结合力时,在被检血中加入过量的铁,使血清中的铁蛋白饱和,过剩的铁用碱性碳酸镁吸附,去除,然后用血清铁方法测定。 2.?试剂:试剂RⅠ抗坏血酸,试剂RⅡ缓冲液,试剂RⅢ显色剂。 结合力试剂盒内RⅠ铁溶液,RⅡ碱性碳酸镁。 3.?操作:工作液配制:取一定量RⅡ复溶一瓶RⅠ即为工作液。 ??? 血清铁测定: ? 再次混匀,分别读取吸光度为终末吸光度。 ? 4.计算:R、S、B管分别减自已的试剂空白,其结果用下公式计算 ????? Fe=(R-B/S-B)标准液浓度。 ?? 总铁结合力测定: ?? 血清测定前要作如下处理:血清0.5ml加铁溶液1ml混匀1分钟,置室温5-30分钟再加入2/3量匙的碳酸镁,混匀1分钟,放室温30-60分钟,其间振摇5次,然后3000转/分离心5分钟,取上清液0.5ml按血清铁法进行铁测定。 ?? 计算:总铁结合力=(R-B/S-B)×标准液浓度×3 ???????? 未饱和铁结合力=总铁结合力-血清铁 ???????? 铁饱和度=(血清铁/总铁结合力)×100%? ??? 5.正常参考值: ????? SI? 脐血:12.9~42.4umol/L,出生时:26.9~35.8umol/L;6个月~2岁:2.9~21.5umol/L,2~6岁:3.6~22.1umol/L,6~12岁:4.1~22.0/L; ????? SI 男:14.3~26.9umol/L。女:10.7~25.1umol/L。 ????? TIBC男:40.28~64.44umol/L。女47.44~72.49umol/L。 ????? UIBC男:29.54~53.8umol/L。女:38.49~63.54umol/L ????? ISAT男:0.28~0.5。女:0.25~0.45。 ???? 6.注意事项:标本新鲜无溶血,所有的用器不能含有铁,每次需作试剂空白。 7.临床意义:血清铁及总铁结合力的高低受铁的吸收、贮存及利用因素的影响,在不同疾病有相应的变化。血清铁水平代表铁进入和离开循环之间的平衡,总铁结合力于铁贮存减少时开始增高。 ?7.1血清铁增加:见于HA、AA、MA、SA等。 ?7.2血清铁降低:见于IDA、肾病综合症、慢性贫血、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。 7.3总铁结合力降低:见于AA、MA、HA、慢性贫血、肾病综合症、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。

可溶性转铁蛋白受体sTfR

可溶性转铁蛋白受体(sTfR) 转铁蛋白受体(TfR)介导含铁的铁蛋白从细胞外进入细胞内。TfR存在于许多细胞的表面,通过细胞表面受体的蛋白水解作用衍生过来的。在血清中sTfR 和不同的转铁蛋白以复合物的形式存在,其与组织转铁蛋白受体总量成正比。血清中的sTfR是膜表面受体的酶切形式,膜表面受体主要表达于各阶段骨髓幼红细胞膜表面,以中、晚红细胞和网织红细胞表达最为明显,在调节细胞铁摄取和维持机体铁稳态机制中发挥重要作用。血sTfR水平反映了体内铁状态。 铁蛋白是一种急性期反应物质,sTfR是功能性铁状态的一项特异性检测指标,不受各种干扰因素的影响,例如急性、慢性炎症反应,怀孕等。因此,在炎症、慢性疾病、肿瘤等多种炎性细胞因子活跃的状态,sTfR更能准确反映机体内的铁缺乏状态。 临床意义 可溶性转铁蛋白受体水平升高: 见于溶血性贫血、β-珠蛋白生成障碍性贫血、红细胞增多症; 可溶性转铁蛋白受体水平下降: 慢性肾功能衰竭、再生障碍性贫血、移植后贫血、慢性病贫血。 ?红细胞生成增多时升高. ?不受炎症影响. ?铁过剩时减少. ?区别IDA 和ACD. 图1 转铁蛋白受体(sTfR)介导细胞吸收铁蛋白

图2 Ferritin和sTfR通过铁调素参与机体铁代谢平衡

参考文献: 1、S Kolias, H Nikolaou, P Eleftheriadi, N Sakarelou, A Fortis, M Laskou, N Maguina Crit Care. Measurement of serum transferrin receptor (sTfR) in critically ill patients. 2001; 5(Suppl 1): P108. 2、A Zoli, L Altomonte, L Mirone, M Magaró, B M Ricerca, S Storti, A Candido, M Bizzi. Serum transferrin receptors in rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 1994 October; 53(10): 699–701 3、杨文睿,熊媛媛,张莉等. 血清可溶性转铁蛋白受体在重型再生障碍性贫血免疫抑制治疗早期疗效预测中的意义. 中华血液学杂志2013年8月第34卷第8期

转铁蛋白的简介

转铁蛋白的简介 万华普曼自主研制开发的万华牌消康保?便隐血检测试纸(胶体金法),成为早期筛查消化道肿瘤的最好方法。特别是最新推出的万华牌转铁蛋白检测试纸,进一步满足了临床检验对于检测结果的准确性、拓展检测样本范围等方面的需求,能更准确的检测出全消化道出血,并且不受饮食和药物的干扰,具有更好的特异性和灵敏度。上海、北京等多个城市的多家三甲医院临床试用结果表明,该产品不仅能够显著提高上消化道出血的检出率,还可检测呕吐物、胃液和其它体液标本中的隐性出血。对于检验人员和临床医生更全面的诊断消化道出血具有重要的提示作用,开创了全消化道肿瘤过筛检验的新纪元。 转铁蛋白检测试纸(胶体金法) 1.检测原理 转铁蛋白主要存在于血浆当中,在健康人的消化道中几乎不存在。因此只要在粪便、呕吐物或其它体液中检测到转铁蛋白,即说明存在消化道出血。本产品利用免疫学方法,特异性地检测样品中的人转铁蛋白(TRF),敏感度高,结合血红蛋白免疫法检测,对全消化道出血者阳性检出率有显著的提高。 2.适用范围 ⑴.作为血红蛋白法的补充检测手段,能够起到优势互补作用,排除假阴性的干扰,提高全消化道,特别是上消化道出血的阳性检出率。 ⑵.可作为黑便鉴别诊断的常规检测方法。 ⑶.可检测呕吐物、胃液中的出血,检测样本更广泛。 3. 临床意义: ⑴.上消化道大量出血。(常见的病因有消化性溃疡、急性胃粘膜损害、食管胃底静脉曲张 和胃癌等。) ⑵.上消化道少量出血。(常见于急性糜烂性胃炎、上消化道肿瘤、消化道溃疡等) ⑶.下消化道出血。(常见于肠道恶性肿瘤、息肉及炎症性病变引起的最为常见) ⑷.消化道出血性疾病的早期发现和诊断。 ⑸.呕吐物的检查。 ⑹.提高大肠癌检出率,40岁以上健康人群早期大肠癌的筛查。 ⑺.筛查胃肠道恶性肿瘤的主要方法。(主要包括胃癌和结、直肠癌) ⑻.消化道肿瘤高危人群定期体检; 备注:胃肠道出血时,粪便中出现大量转铁蛋白,其稳定性高于血红蛋白,粪便转铁蛋白检

转铁蛋白受体的结构及功能

龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/a28674414.html, 转铁蛋白受体的结构及功能 作者:文雪 来源:《科技视界》2016年第15期 【摘要】人体细胞的正常代谢需要铁,其中转铁蛋白受体(TfR)参与铁的吸收和调节。TfR在所有细胞都呈低表达,在增殖活跃的细胞高表达。与正常组织相比,肿瘤组织TfR的表达显著增高,因此,TfR成为肿瘤靶向治疗的研究热点。 【关键词】转铁蛋白受体;结构;功能 0 前言 铁是人体细胞进行代谢不可缺少的重要元素,在运送氧、传递电子、DNA合成等过程中起着非常重要的作用。细胞内铁的转运主要通过转铁蛋白(Tf)和转铁蛋白受体(TfR)来进行调控。由于转铁蛋白受体在所有细胞都呈低表达,而在增殖活跃的细胞如肿瘤细胞高表达,使得转铁蛋白受体在临床和药物转运上得到越来越广泛的研究。本文主要对转铁蛋白受体的结构及功能进行综述。 1 转铁蛋白受体的结构 转铁蛋白受体是由两个大小约为90KDa的亚单位通过两条二硫键交联而成的一种II型跨膜糖蛋白[1]。每个亚单位包括一个胞外C端区域,一个单跨膜区域和一个N端区域。C端区域也称外功能区,又分为蛋白酶样区、顶区和螺旋区[2],其中包含Tf的结合位点。TfR对不同的Tf均有较高的亲和力。科学家通过X线晶体衍射发现Tf通过其C片段和N片段与TfR 的螺旋区和蛋白酶样区相互作用从而导致Tf和TfR的结合。此外,Tf与铁结合的饱和度对Tf 识别TfR也有明显影响[3]。TfR共有两个家族成员,分别是TfR1和TfR2。与TfR1不同,TfR2没有铁反应元件,其表达不受胞内铁水平的调节,而且对Tf的亲和力很低,起作用还不是很清楚,可能与调节和维持铁在内环境的稳定有关[4]。 2 转铁蛋白受体的表达 TfR在机体的所有细胞中低表达,在增殖活跃的细胞高表达。尤其是肿瘤细胞,由于肿瘤细胞中铁代谢发生了很多改变,导致TfR表达显著增高,尤其是TfR1的表达增高。肿瘤细胞为更加快速的摄取铁因此高表达TfR1,其高表达与肿瘤细胞快速增殖相关。体外实验研究发现使用抗TfR1单克隆抗体可有效抑制血液系统恶性肿瘤细胞增殖[5]。研究证实在人类B淋巴细胞中TfR1是可诱导的癌基因c-myc位于下游区的重要靶位。Lepelletier等人研究发现,非霍奇金淋巴瘤中5例弥漫性大B细胞淋巴瘤全部高度表达TfR1,而滤泡性淋巴瘤和小淋巴细胞性淋巴瘤则低表达TfR1。在对脑肿瘤及正常脑组织TfR1表达研究中发现,TfR1mRNA在海马和延髓中表达最高,在丘脑、皮质及和小脑中的表达明显降低。TfR1在脑肿瘤组织中表达显

可溶性转铁蛋白受体(sTfR)测定标准操作程序SOP文件

可溶性转铁蛋白受体(sTfR)测定 标准操作程序SOP文件 1 测定方法 颗粒增强的免疫比浊法。 2 测定原理 标本中的可溶性转铁蛋白受体(sTfR)与试剂中包被有抗sTfR抗体的胶乳颗粒相遇,发生特异性的抗原-抗体反应,形成抗原-抗体复合物,使溶液的浊度发生改变。该浊度的高低在一定抗体存在时与抗原的含量成正比,待反应完成后测定其浊度,从而使sTfR得以测定。 3 标本 血清及肝素-Li/Na抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。 稳定性:15 - 25℃ 3天 2 - 8℃ 7天 -20℃ 4周(允许冻融1次) 4 试剂 4.1 试剂 来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。 贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末 R1:打开后机上稳定90天 R2:打开后机上稳定90天 准备:直接使用。 4.2 校准物 来源:S1: 0.9%的NaCl S2-6: ROCHE配套sTfR专用校准品 贮存条件:校准物在2-8℃保存至效期末。 准备: 直接使用。 定标频率:A 试剂批号更换 B 由质控结果决定 4.3 质控物 来源:ROCHE sTfR专用质控品

其它适合的质控品 贮存条件:置2-8℃冰箱至有效期。 准备:直接使用。 质控间隔时间及限制:应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内,如果超出范围,实验室应根据情况采取措施。 5 仪器 ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。 6 操作 见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。参数设置见附表。 7 参考范围 男性:2.16-4.54mg/l 女性:1.79-4.63mg/l 8 线性范围 本法线性范围为0.5-40mg/l,不准确度允许范围X±3SD,不精密度CV=3.06%,灵敏度为0.068mg/l。 9 注意事项 9.1 血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。 9.2 换算公式:mg/dl × 10=mg/l 9.3 仅应用于体外诊断。 10抗干扰能力: 10.1 标准:回收率在90%-110%之间。 10.2 黄疸:黄胆指数达到60时不会有明显干扰。(直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl)。 10.3 溶血:溶血指数在1000mg/dl以下时不会有明显干扰。(血红素浓度约为1000mg/dl)。 10.4 乳糜:甘油三酯的浓度在1000mg/dl以下不会受到明显干扰。 10.5 RF < 750Iu/ml时不会受到明显干扰。 10.6 sTfR的浓度低于80mg/l时不会有HOOK效应。 11 临床意义:

植物源性重组人血清转铁蛋白的多功能性介绍

植物源性重组人血清转铁蛋白的多功能性 概述 人血清转铁蛋白(htf)是人血清中主要的结合铁蛋白质,在铁转运中有重要作用。另外,htf还有许多其他的作用,包括抗菌功能和对哺乳动物细胞增殖、分化中的生长因子效用。其多功能性使其在不同疗法和商业应用中有巨大价值。然而,htf的这些成功应用很大程度上取决于大量的高质量的htf的应用。本研究中,我们将植物作为获得重组htf的一种新平台。我们的研究表明转基因植物是一种获得rhtf的有效系统,最大积累量达到了全部可溶蛋白的0.25%(或高达33.5ug/g的叶子鲜重)。此外,植物源性rhtf保持了许多与天然htf相同的生物活性。尤其是rhtf在体外可逆性的结合铁作用,表明了其抑菌活性、在无血清培养基中的支持细胞增值的作用,和在体外内化进入哺乳动物细胞的性质。本研究的成功使得未来多领域应用植物源性rhtf成为可能。植物源性rhtf突出的应用就是作为特定细胞的一种新的载体或者作为蛋白质/肽段药物的口服递送以治疗人类疾病例如糖尿病。为证明此假说,我们在植物中又额外地表达了一种包含胰高血糖素样肽段-1(GLP-1)或其衍生物的htf融合蛋白。在此,我们展示植物源性htf-GLP-1融合蛋白保持了体外培养基中内化进入哺乳动物细胞的能力。 简介 转铁蛋白Tf包含了所有脊椎动物体内发现的一系列同源性的铁结合蛋白糖蛋白(Aisen and Harris, 1989),主要功能是铁的螯合和转运。Tf是一种单分子蛋白,分子量范围为76-81 kDa,取决于糖基化程度。每种TF蛋白包含两种相似的裂片,分别叫做N-末端和C-末端,每一裂片包含单一的铁结合位点(Aisen and Harris, 1989; Baker et al., 2002)。hTf是转铁蛋白Tf家族的主要成员。hTf蛋白由679个氨基酸组成,主要在肝脏合成并分泌入血(MacGillivray et al., 1983)。hTf的主要功能是络合血中的游离铁并将之转运到全身各处(MacGillivray et al., 1983)。放射示踪研究显示至少80%的络合至tHf的铁转运至骨髓并组成新生的红细胞(Finch and Huebers, 1982)。除其众所周知的铁转运功能外,hTf还有许多额外的功能,许多与其携铁能力无关。例如,研究显示HTF可促进体外无血清培养基条件下鼠粒性白细胞和巨噬细胞前体细胞的克隆生长(Iizuka and Murphy, 1986)。另外,HTF的存在对于大多数哺乳动物细胞的培养有重要作用,例如体外受精培养(Holst et al., 1990)和肝细胞群体的维护和扩展(Suzuki et al., 2006)。当增殖细胞高表达HTF受体以允许HTF包裹并可能引发和维持细胞DNA合成时,HTF常常作为一种生长因子(Gomme et al., 2005)。HTF的其他作用包括抵抗细菌、酵母菌、病毒和真菌的抗菌活性((Artis et al., 1983; Salamah and al-Obaidi, 1995),降低细胞粘附的能力(Ardehali et al.,2002)。HTF的多功能性可以作为潜在的治疗和非治疗应用。例如,HTf已被用来治疗人类转铁蛋白缺乏症(一种以贫血、铁超载、生长迟缓和感染发生率增加为特点的状况)(Hayashi et al., 1993),局部贫血-再灌注损伤(促进氧化应激导致炎症、最终因凋亡和坏死而导致细胞死亡的一种情况)(Hayashi et al., 1993)和心血管疾病(Hayashi et al., 1993)。HTF的治疗送递也降低了放射疗法的副作用(Koterov et al., 2003),有助于为骨髓移植患者提供抗微生物活性的作用(von Bonsdorff et al., 2003)。此外,HTF已用来作为一种新的载体系统,在体内运载药物入癌细胞(Laske et al., 1997)。近来,HTF被证实作为一种高效的载体,以送服口服蛋白质和氨基酸药物入内脏以实现全身治疗效果(Widera et al.,2004; Bai et al., 2005)。HTF蛋白也有许多巨大的潜在非治疗应用。例如,许多无血清培养基以HTF作为血清代用品,支持哺乳动物细胞生长(Barnes and Sato, 1980a,b)。为了使HTF的这些商业和治疗应用具备可行性和得到实现,大量HTF的可靠、廉价的供应是很重要的,取决于一种高效、性价比合算的重组生产系统。 迄今为止,已有数种表达系统报道获得重组HTF。描述的RHTF的细菌表达,仅允许生产蛋白质的氨基末端和羧基末端领域(半分子)(Ikeda et al., 1992; Steinlein and Ikeda, 1993;

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