注：所有注明同第三篇第一章的内容均指HJ-482-2009标准。
实验三盐酸副玫瑰苯胺比色法测大气中的二氧化硫 一﹑实验目的 1．学习大气采样机使用方法。 2．掌握盐酸副玫瑰苯胺比色法测大气中二氧化硫的方法。 二﹑实验原理 二氧化硫被四氯汞钾吸收后，生成稳定的二氯亚硫酸盐络合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用，生成紫红色络合物，比色测定。 主要干扰物质为：氮氧化物、臭氧、锰、铁、铬等。加入氨基磺酸铵可消除氮氧化物的干扰；采样后放置一段时间可使臭氧自行分解；加入磷酸和乙二胺四乙酸二纳盐，可以消除或减少某些重金属的干扰，如在用10 mL吸收液时，60 μg铁﹑10 μg锰﹑10 μg铬﹑10 μg铜﹑22 μg钒没有明显干扰；环境大气中的微量氨﹑硫化物及醛类不干扰。 三﹑实验仪器 1．吸收管：多孔玻板吸收管﹑小型冲击式吸收管或大型气泡式吸收管，用于30 min~60 min采样；125 mL多孔玻板吸收瓶或125mL洗气瓶，用于24 hr采样。 2．大气采样器：流量范围0~1L/min。 3．721分光光度计。 四﹑试剂 所用水为除去氧化剂的重蒸水。 1．0.04 mol/L四氯汞钾吸收液：称取10.9 g氯化汞(HgCl2)，6.0 g氯化钾(KCl)和0.066 g乙二胺四乙酸二纳盐(Na-EDTA)，溶于水中，稀释至1 L。此溶液pH约为4，在酸度计上用0.01 mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至5.2左右。此试剂可以稳定6个月。 2．0.6%的氨基磺酸铵溶液：称取0.6g氨基磺酸铵(H2NSO3NH4)溶于水中，稀释至100 mL，用时现配。 3．0.2%甲醛溶液：量取1.4 mL 36~38%甲醛，溶于水中，稀释至250 mL，与冰箱中保存，可稳定一个半月。 10．二氧化硫标准溶液：称取0.200 g亚硫酸钠(Na2SO3)及0.010 g乙二胺四乙酸二钠盐，溶于200 mL新煮沸但已冷却的水中，轻轻摇匀。 将上述溶液取5mL稀释至1000mL，即可得每毫升含2.0 μg二氧化硫的标准溶液。此溶液储于冰箱中，一周内浓度不变。 12．0.016%对品红使用液：称取0.20g对品红，溶解于100mL浓度为1.0mol/L的盐酸中，可得0.2%对品红溶液。然后吸取20.00 mL 0.2%对品红储备液于250 mL容量瓶中，加25 mL 3 mol/L的磷酸溶液，用水稀释至刻线，至少放置24 hr方可使用。此溶液稳定9个月以上。
目录 1. 检测原理 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理 在碱性条件下，样品中的镁离子与二甲苯胺兰生成有色络合物，此产物在546nm波长有最大吸收，其吸收强度与血清中镁的含量成正比，再通过与同样处理的标准镁比较，经计算可求出血清镁的含量
2．标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。。 2.3 抗凝剂： 血浆使用肝素或EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。 2.4 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。 3．试剂 3.1 试剂： 本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司Mg试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下： 3.2 校准血清： 使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。 校准频次： 空白定标：每日需做试剂空白定标。 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围，需要全点定标。 3.3 试剂与校准血清的稳定性： 原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。
甲醛缓冲溶液吸收—副玫瑰苯胺分光光度法 1.原理 二氧化硫被甲醛缓冲溶液吸收后，生成稳定的羟基甲磺酸加成倾化合物。在样品溶液中加入氢氧化钠使加成化合物分解，释放出的二氧化硫与盐酸副玫瑰苯胺、甲醛作用，生成紫红色化合物，根据颜色深浅，用分光光度计在577nm处进行测定。 本方法的主要干扰物为氮氧化物、臭氧及某些重金属元素。加入氨磺酸钠可消除氮氧化物的干扰；采样后放置一段时间可使臭氧自行分解；加入磷酸及环己二胺四乙酸二钠盐可以消除或减少某些金属离子的干扰。在10ml样品中存在50ugCa、Mg、Fe、Ni、Mn、Cu等离子及5ug二价锰离子时不干扰测定。 本方法适宜测定浓度范围为0.003～1.07mg/m3。最低检出限为0.2ug/10ml。当用10ml吸收液采气样10L时，最低检出浓度为0.02mg/m3；当用50 ml吸收液，24h采气样300L取出10ml样品测定时，最低检出尝试为0.03mg/m3。 2.仪器 ①空气采样器：用于短时间采样的空气采样器，流量范围0~1L/min；用于24h连续采样的空气采样器应具有恒温、恒流、计时、自动控制仪器开关的功能，流量范围0.2~0.3L/min。各类采样器均应定期在采样前进行气密性检查和流量校准。吸收瓶的阻力和吸收效率应满足相应的技术要求。 ②分光光度计：可见光波长范围380~780nm。 ③多孔玻板吸收管：10ml的多孔玻板吸收管用于短时间采样；50ml的多孔玻板吸收管用于24h连续采样。 ④恒温水浴器：广口冷藏瓶内放置圆形比色管架，插一支长约150nm，0~40℃的酒精温度计，其误差应不大于0.5℃. ⑤具塞比色管：10ml。 3.试剂 ?试验用蒸馏水及其制备：水质应符合实验室用水质量二级水（或三级水）
苯胺类化合物的测定 N-(1-萘基)乙二胺偶氮分光光度法 1 主题内容与适用范围 本方法规定了测定水中苯胺类化合物的N-(1-萘基)乙二胺重氮偶合比色法。本方法适用于地面水、染料、制药等废水中芳香族伯胺类化合物的测定。试料体积为25ml，使用光程为10mm的比色皿，本方法的最低检出浓度为含苯胺0.03mg/L，测定上限浓度为1.6mg/L。 在酸性条件下测定，苯酚含量高于200mg/L时，对本方法有正干扰。 2 原理 苯胺类化合物在酸性条件下(pHl.5—2.0)与亚硝酸盐重氮化，再与N—(1-萘基)乙二胺盐酸盐偶合，生成紫红色染料，进行分光光度法测定，测量波长为545nm。 3 试剂 分析中只使用公认的分析纯试剂和蒸馏水或纯度与之相当的水。 3.1 蒸馏水。 3.2 硫酸氢钾(4KHSO)。 3.3 无水碳酸钠(32CONa)。 3.4 亚硝酸钠(2NaNO)，50g/L：称取5g亚硝酸钠，溶于少量水中，稀释至100ml(应配少量，贮于棕色瓶中，置冰箱内保存)。 3.5 氨基磺酸铵(234NHSONH)，25g/L：称取2.5g氨基硝酸铵，溶于少量水中，稀释至100ml(贮于棕色瓶中，置冰箱内保存)。 3.6 N-(1-萘基)乙二胺盐酸盐，20g/L：称取2gN-(1-萘基)乙二胺盐酸盐，溶于水中，稀释至100ml(详见附录A)。 3.7 硫酸标准溶液，浓度c(1/242SOH)＝0.05mol/L。 3.8 精密pH试纸0.5～5.0。 3.9 苯胺(C6H5NH2)标准贮备液：于25ml容量瓶中加入0.05mol/L硫酸溶液(3.7)10ml，称量(称准至0.0001g)，加入3～5滴苯胺试剂，再称量，用0.05mol/L硫酸溶液(3.7)稀释至标线，摇匀。计算出每毫升溶液中所含苯胺的量，此为贮备液，置冰箱内保存(可用两个月)。 3.10 苯胺标准使用溶液：将标准贮备液(3.9)用0.05mol/L硫酸溶液(3.7)稀释成浓度为1.00ml 溶液含苯胺10.0μg的标准使用溶液(临用时配)。 注：如果苯胺试剂为无色透明液，可直接称量配制。若试剂颜色发黄，应重新蒸馏或标定苯胺含量后使用(详见GB 691《化学试剂苯胺》)。 4 仪器 4.1 分光光度计：能在波长545nm处操作，配有光程为10mm的比色皿。 4.2 25ml具塞刻度试管。 5 采样与样品 5.1 采样 采集500ml水样于硬质玻璃瓶中(保存不得超过24h)，若取样后不能及时进行测定，需置4℃下保存(不得超过两周)。 5.2 试料制备 将水样(5.1)用经水冲洗过的中速滤纸过滤，弃去初滤液20ml，用硫酸氢钾(3.2)或无水碳酸钠(3.3)调节pH值为6，作为试料。 注：若水样颜色深，可用聚已内酰胺粉末脱色(6.4.1)。颜色不深的水样可不脱色，而以样品溶液(不加显色剂)为参比溶液。 6 分析步骤 6.1 校准曲线的绘制 取7个25ml具塞刻度试管(4.2)，分别加入苯胺标准使用溶液(3.10)0.0，0.25，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00ml，各加水(3.1)至10ml。然后按照测定的步骤(6.2)进行操作。
实验项目编号：实验二 实验名称：盐酸副玫瑰苯胺比色法测定食品中的亚硫酸盐 实验学时：4 实验日期：先不写 实验地点：先不写 实验二盐酸副玫瑰苯胺比色法测定食品中的亚硫酸盐 一、实验目的 l．学习盐酸副玫瑰苯胺显色比色法测定食品中亚硫酸盐的实验原理。 2. 掌握实验的操作要点及测定方法。 二、实验原理 二氧化硫被甲醛缓冲溶液吸收后，生成稳定的羟基甲基磺酸，化学反应式如下： 加入氢氧化钠后，与盐酸副玫瑰苯胺作用，生成紫红色化合物，此络合物于波长560nm 处有最大吸收峰，且在一定范围内其颜色的深浅与亚硫酸盐的浓度成正比，可以比色定量。结果以试样中二氧化硫的含量表示。 三、仪器与试剂 1. 仪器 可见分光光度计；25 mL 带塞比色管；恒温水浴槽。 2. 试剂 （1）0.05mol/L EDTA-2Na 溶液：称取1.8612g EDTA-2Na溶于新煮沸后已冷却的水中，定容至100mL。 （2）甲醛吸收贮备液：称取 2.040 g 邻苯二甲酸氢钾和0.372 g 乙二胺四乙酸钠（简称EDTA-2Na）溶于水中，再加入 5.5 mL37％甲醛溶液，用水稀释至100mL。贮于冰箱，可保存一年； （3）甲醛吸收工作液：临用时，将上述吸收贮备液用水稀释100倍； （4）2mol/L 氢氧化钠溶液； （5）0.3%氨基磺酸铵溶液：称取0.3g 氨基磺酸铵，用少量水溶解，加入1 mol/L 氢氧化钠溶液3.0 mL，用水稀释至100 mL；
（6）0.2%盐酸副玫瑰苯胺贮备液：称取0.2g盐酸副玫瑰苯胺，用1mol/L 盐酸溶液溶解并稀释至100 mL，吸取25.00mL上述溶液于100mL容量瓶中，加入30 mL浓磷酸，用水稀释至刻度;； （7）1. 00 mg /mL 二氧化硫贮备液：准确称取0. 1625 gNaHSO3 (SO2的纯度为0.62g/g)于100mL容量瓶中，用0.05mol/L EDTA-2Na 溶液溶解，缓缓摇匀以防充氧，使其溶解并用EDTA-2Na 溶液稀释至刻度。 （8）2.5μg/mL 二氧化硫标准工作液：取贮备液0.5mL于200mL容量中，用甲醛吸收工作液定容至刻度。 四、实验步骤 1. 二氧化硫标准曲线绘制：按照表1加入各种溶液，用1 cm 比色杯，以零管调节零点，于波长560 nm 处测定吸光度，以二氧化硫含量对吸光度绘制标准曲线。 管号0 1 2 3 4 5 样品管二氧化硫标准溶液/mL 0 1 2 3 5 10 甲醛缓冲吸收液/mL 10.0 9 8 7 5 0 氨基磺酸铵/mL 0.5，混匀 氢氧化钠溶液/mL 0.5，混匀 盐酸副玫瑰羟胺/mL 迅速加入1.00，立即加塞混匀，25°C恒温10min 二氧化硫含量/μg0 2.5 5.0 7.5 12.5 25 吸光值（A） 2. 样品处理： 称取经均匀捣碎的样品5-10g(试样量可视含量高低而定)于100mL容量瓶中，加入20mL 甲醛吸收液，超声50min，超声功率240W，超声温度25℃，去离子水定容，取滤液备用。 3. 测定： 吸取0.5~ 10.0mL上述试样处理液于20 mL具塞比色管中, 按标准曲线加入试剂并测定，按国标方法计算公式计算结果。 式中：X—试样中二氧化硫的含量（g/kg）； A—测定用样液中二氧化硫的质量（μg）； m—试样质量（g）； V—测定用样液的体积(mL)。 五、注意事项 1. 实验使用氨磺酸钠是为了消除氮氧化合物（如NO3-等）的干扰； 2. 甲醛法测定二氧化硫的显色反应要求在酸性溶液中进行，因此要将含有标准溶液(样品溶液)、吸收液、氨磺酸钠溶液、氢氧化钠溶液的溶液迅速加入强酸性盐酸副玫瑰苯胺
实验一大气中二氧化硫的测定（盐酸副玫瑰苯胺分光光度法）一、实验目的 1．掌握二氧化硫测定的基本方法； 2．熟练大气采样器和分光光度计的使用。 二、实验原理 大气中的二氧化硫被四氯汞钾溶液吸收后，生成稳定的二氯亚硫酸盐络合物，此络合物再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺发生反应，生成紫红色的络合物，据其颜色深浅，用分光光度法测定。按照所用的盐酸副玫瑰苯胺使用液含磷酸多少，分为两种操作方法。方法一：含磷酸量少，最后溶液的pH值为1.6±0.1；方法二：含磷酸量多，最后溶液的pH值为1.2±0.1，是我国暂选为环境监测系统的标准方法。本实验采用方法二测定。 三、仪器 1.多孔玻板吸收管（用于短时间采样）；多孔玻板吸收瓶（用于24h采样）。 2.空气采样器：流量0—1L/min。 3.分光光度计。 四。、试剂 1.蒸馏水 25℃时电导率小于1.0μΩ/cm。pH值为6.0—7.2。检验方法为在具塞锥形瓶中加500mL蒸馏水，加1mL浓硫酸和0.2mL高锰酸钾溶液（0.316g/L），室温下放置1h，若高锰酸钾不褪色，则蒸馏水符合要求，否则应重新蒸馏（1000mL蒸馏水中加1gKMnO7及1gBa(OH)2,在全玻璃蒸馏器中蒸馏）。 2.甲醛吸收液（甲醛缓冲溶液） (1)环已二胺四乙酸二钠溶液C（CDTA-2Na）=0.050mol/L:称取1.82g反应-1，2-环已二胺四乙酸[（trans-1,2-Cyclohexylenedinitrilo）tetracetic acid简称CDTA]，溶解于1.50mol/LNaOH 溶液6.5mL，用水稀释至100ml。 (2)吸收储备液：量取36%--38%甲醛溶液 5.5mL，加入 2.0g邻苯二甲酸氢钾及0.050mol/LCDTA-2Na20.0mL溶液，用水稀释至100mL,贮于冰箱中，可保存一年。 (3)甲醛吸收液：使用时，将吸收贮备液用水稀释100倍。此溶液每毫升含0.2mg甲醛。 3.0.60%（m/v）氨磺酸钠溶液 称取0.60g氨磺酸（H2NSO3H）,加入1.50mol/L氢氧化钠溶液4.0mL,用水稀释至100mL密
余氯测定方法余氯是指水经加氯消毒，接触一定时间后，余留在水中的氯。 余氯有三种形式： ●总余氯：包括HOCl，NH2Cl，NHCl2等。 ●化合余氯：包括NH2Cl，NHCl2及其他氯胺类化合物。 ●游离余氯：包括HOCl及OCl-等。 余氯可用邻联甲苯胺比色法、邻联甲苯胺－亚砷酸盐比色法、N，N-乙基对苯胺-硫酸亚铁胺容量法测定。下面介绍较简单方便的邻联甲苯胺比色法，可测定总余氯及游离余氯。 邻联甲苯胺比色法 一、应用范围 ●本法适用于测定生活饮用水及其水源水的总余氯及游离余氯。 ●水中含有悬浮性物质时干扰测定，可用离心法去除。干扰物质的最高允许含量如下：高 铁：0.2mg/l；四价锰：0.01mg/l；亚硝酸盐： 0.2mg/l。 ●本法最低检测浓度为0.01mg/l余氯。 二、原理 在pH值小于1.8的酸性溶液中，余氯与邻联甲苯胺反应，生成黄色的醌式化合物，用目视法进行比色定量：还可用重铬酸钾－铬酸钾溶液配制的永久性余氯标准溶液进行目视比色。 三、永久性余氯比色溶液的配制 磷酸盐缓冲贮备溶液：将无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）和无水磷酸二氢钾(KH2PO4)置于105℃烘箱内2h，冷却后，分别称取22.86g和46.14g。将此两种试剂共溶于纯水中，并稀释至1000ml。至少静置4天，使其中胶状杂质凝聚沉淀，过滤。 磷酸盐缓冲溶液(pH6.45)：吸取200.0ml磷酸盐缓冲贮备溶液，加纯水稀释至1000ml。 重铬酸钾-铬酸钾溶液：称取0.1550g干燥的重铬酸钾(K2Cr2O 7)及0.4650g铬酸钾(K2CrO4)，溶于磷酸盐缓冲溶液中，并定容至1000ml。此溶液所产生的颜色相当于1mg／L余氯与邻联甲苯
实验报告 课程名称：环境监测实验 指导老师：王凤平 成绩：___________ 实验名称：环境空气二氧化硫的测定--甲醛吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法及空气中颗粒物的测定 实验类型：同组学生姓名： 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、主要仪器设备（必填） 四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析（必填） 七、讨论、心得 一、实验目的 1、了解并掌握环境空气二氧化硫的测定--甲醛吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法的原理和操作。 2、了解并掌握空气中颗粒物的测定的原理及方法。 二、实验原理 1、环境空气二氧化硫的测定--甲醛吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法： 本标准适用于环境空气中二氧化硫的测定。当用10 ml 吸收液采样30 L 时，本法测定下限为0.007 mg ／m 3；当用50 ml 吸收液连续24 h 采样300 L 时，空气中二氧化硫的测定下限为0.003 mg ／m 3。 测定中主要干扰物为氮氧化物、臭氧及某些重金属元素。样品放置一段时间可使臭氧自动分解；加入氨磺酸钠溶液可消除氮氧化物的干扰；加入CDTA 可以消除或减少某些金属离子的干扰。在10 ml 样品中存在50μg 钙、镁、铁、镍、镉、铜等离子及5μg 二价锰离子时，不干扰测定。 二氧化硫被甲醛缓冲溶液吸收后，生成稳定的羟甲基磺酸加成化合物。在样品溶液中加入氢氧化钠使加成化合物分解，释放出二氧化硫与副玫瑰苯胺、 专业：环境工程 姓名： 学号： 日期： 地点： 装 订 线
甲醛作用，生成紫红色化合物，用分光光度计在577 nm处进行测定。 结果表示 计算空气中二氧化硫的浓度按下式计算： 式中：A——样品溶液的吸光度； A0——试剂空白溶液的吸光度； Bs——校正因子，μg·SO2／12mL／A； Vt——样品溶液总体积，mL； Va——测定时所取样品溶液体积，mL； Vs——换算成标准状况下(0℃，101.325kPa)的采样体积，L。 二氧化硫浓度计算结果应准确到小数点后第三位。 2、空气中颗粒物的测定： 本方法适合于用大流量或中流量总悬浮颗粒物采样器进行空气中总悬浮颗粒物的测定。本方法的检测限为0.001mg/m3。总悬浮颗粒物含量过高或雾天采样使滤膜阻力大于10kPa时，本方法不适用。 通过具有一定切割特征的采样器，以恒速抽取定量体积的空气，空气中粒径小于100μm的悬浮颗粒物被阻留在已恒重的滤膜上。根据采样前后滤膜重量之差及采样体积，计算总悬浮颗粒物的浓度。滤膜经处理后，进行组分分析。 结果计算 总悬浮颗粒物含量
水中余氯的测定邻联甲苯胺比色法 〈原理〉邻联甲苯胺与水中的余氯作用生成黄色化合物，根据颜色深度与永久性余氯标准色列比色。〈器材〉50ML比色管、六孔比色架 〈试剂〉1、永久性余氯比色溶液的配制 a、磷酸盐缓冲贮备溶液将无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）和无水磷酸二氢钾（KH2PO4）置于是105摄氏度烘箱2小时，冷却后分别称取22.86和6.14g,将此两种试剂共溶于蒸馏水中并稀释至于1000ml至少静置4天。使其中胶状杂质凝聚沉淀，过滤； b、磷酸盐缓冲使用溶液吸取200ml磷酸盐缓冲贮备溶液，加蒸馏水稀释至1000ml。此溶ph值为6.45； c、重铬酸钾—铬酸钾溶液称取干燥的0.1550g重铬酸钾及0.4650g铬酸钾溶液于磷酸盐缓冲使用权用溶液中并稀释至1000ml此溶液所产生的颜色相当于1mg/L余氯与邻邦联甲苯胺所产生的颜色； d、0.01—1.0mg/L永久性余氯标准比色管的配制方法按下列表格所列数量吸取重铬酸钾—铬酸钾溶液，分别注入50ml具塞比色管中，用磷酸盐缓冲溶液稀释至50ml 避日光照射，可保存6个月。
2、邻联甲苯胺溶液 称取1g邻联甲苯胺（C14H16N2）、溶于5ml 20%（容积/容积）盐酸中，将其调成糊状，加150-200ml蒸馏水使用权其完全溶解，置于量筒中，补加水至505ml，最后加入20%（V/V）盐酸495ml,放于棕色瓶内，在室温下保存6个月； [操作]A、取50ml比色管1支，先放入2.5ml邻联甲苯胺溶液，再加入水样50ml，混合均匀，水样的温度最好为15-20低于此值可放于温水浴中提高到期5-20； B、置于暗处在5分钟内将其与永久性余氯标准色列进行比色； C、如余氯浓度过高会产生桔黄色；若水样碱度过高而余氯浓度较低时，将产生淡绿色或淡蓝色，此时可多加1ml 邻联甲苯胺溶液可产生正常的淡黄色； D、如水样浑浊或色度较高则应另取3支比色管一管加蒸馏水其它二管加水样（但不加邻邦联甲苯胺溶液）用六孔比色架进行比色；
副玫瑰苯胺提纯及检验方法 A1 试剂 1、正丁醇。 2、冰醋酸。 3、盐酸溶液：c（HCl）= 1mol/L。 4、乙酸-乙酸钠溶液：c（CH3COONa）=1.0mol/L。 称取 13.6g 乙酸钠（CH3COONa·3H2O）溶于水，移入 100ml 容量瓶中，加 5.7ml 冰醋酸，用水稀释至标线，摇匀。此溶液pH 为 4.7。 A2 试剂提纯方法 取正丁醇和 1mol/L 盐酸溶液各 500mL，放入 1000ml 分液漏斗中盖塞振摇 3min，使其互溶达到平衡，静置 15min，待完全分层后，将下层水相（盐酸溶液）和上层有机相（正丁醇）分别转入试剂瓶中备用。称取 0.100g 副玫瑰苯胺放入小烧杯中，加入平衡过的 1mol/L 盐酸溶液 40ml，用玻璃棒搅拌至完全溶解后，转入 250ml 分液漏斗中，再用平衡过
的正丁醇 80ml 分数次洗涤小烧杯，洗液并入分液漏斗中。盖塞，振摇 3min，静止 15min，待完全分层后，将下层水相转入另一个 250ml 分液漏斗中，再加 80mL 平衡过的正丁醇，按上述操作萃取。按此操作每次用 40ml平衡过的正丁醇重复萃取 9～10 次后，将下层水相滤入 50ml 容量瓶中，并用 1mol/L 盐酸溶液稀释至标线，摇匀。此 PRA 贮备液约为 0.20%，呈桔黄色。 A3 副玫瑰苯胺贮备液的检验方法 吸取 1.00ml 副玫瑰苯胺贮备液于 100ml 容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。取稀释液 5.00ml于 50ml 容量瓶中，加 5.00ml 乙酸-乙酸钠溶液用水稀释至标线，摇匀，1h 后测量光谱吸收曲线，在波长 540nm 处有最大吸收峰。
余氯测定方法 余氯是指水经加氯消毒，接触一定时间后，余留在水中的氯。 余氯有三种形式： ●总余氯：包括HOCl，NH2Cl，NHCl2等。 ●化合余氯：包括NH2Cl，NHCl2及其他氯胺类化合物。 ●游离余氯：包括HOCl及OCl-等。 余氯可用邻联甲苯胺比色法、邻联甲苯胺－亚砷酸盐比色法、N，N-乙基对 苯胺-硫酸亚铁胺容量法测定。下面介绍较简单方便的邻联甲苯胺比色法，可测定总余氯及游离余氯。 邻联甲苯胺比色法 一、应用范围 ●本法适用于测定生活饮用水及其水源水的总余氯及游离余氯。 ●水中含有悬浮性物质时干扰测定，可用离心法去除。干扰物质的最高 允许含量如下：高铁：0.2mg/l；四价锰：0.01mg/l；亚硝酸盐： 0.2mg/l。 ●本法最低检测浓度为0.01mg/l余氯。 二、原理 在pH值小于1.8的酸性溶液中，余氯与邻联甲苯胺反应，生成黄色的醌 式化合物，用目视法进行比色定量：还可用重铬酸钾－铬酸钾溶液配制的永久性余氯标准溶液进行目视比色。 三、永久性余氯比色溶液的配制 磷酸盐缓冲贮备溶液：将无水磷酸氢二钠（Na 2HPO 4 ）和无水磷酸二氢钾 (KH 2PO 4 )置于105℃烘箱内2h，冷却后，分别称取22.86g和46.14g。将此两种 试剂共溶于纯水中，并稀释至1000ml。至少静置4天，使其中胶状杂质凝聚沉淀，过滤。 磷酸盐缓冲溶液(pH6.45)：吸取200.0ml磷酸盐缓冲贮备溶液，加纯水稀释至1000ml。 重铬酸钾-铬酸钾溶液：称取0.1550g干燥的重铬酸钾(K 2Cr 2 O 7 )及0.4650g 铬酸钾(K 2CrO 4 )，溶于磷酸盐缓冲溶液中，并定容至1000ml。此溶液所产生的
(续表) 项目结果项目结果项目结果塔格糖-菊根粉+苯乙醇酸+葡萄糖+核糖-竹桃霉素-肌醇+苹果酸+乙酸钠+半乳糖-海藻糖+阿糖醇-阿拉伯糖+腭糖-植病活菌素+木糖+山梨醇+萘啶酸-甘露醇+N-乙酰酰葡萄糖胺+七叶苷+棉子糖+支链淀粉+ 3 讨论 一般来说,高温高压灭菌法是较理想的灭菌方法之一,但是该方法有一定的适用范围,第一要求被灭菌物品能够耐高温,第二要求被灭菌物品内部的温度能够很快达到平衡。对于番茄红素这一特定的产品,在121 及以上时,随着时间的延长,被破坏的越来越明显,其破坏程度使生产厂家不能接受;其次,由于其脂溶特性和高粘滞性,很难达到热平衡,因而对耐热芽胞菌的灭菌效果很差,即使128 灭菌15min,灭菌后的番茄红素中细菌数仍然有530CFU/g,而此时有效成分的破坏率已达50%。 钴60照射灭菌也是很好的方法,但因包装等因素的影响,也很难彻底杀灭这种污染的芽胞菌(即使能够彻底杀灭,该灭菌方法在某些国家也是禁止应用于食品的消毒灭菌)。残留的芽胞在适当的条件下(如30 14d)出芽、繁殖,结果还会超出卫生许可界限。 从本检测结果可知,耐高温的污染菌是枯草芽胞杆菌,该菌在水、土壤、空气等自然环境中分布极广,特别容易对有关物品造成污染,严重妨碍食品、药品等的生产、加工,一旦污染很难用现有的方法将之清除,而应用我们研制的热酒精浸泡法则可彻底清除。从实验结果来看,热酒精浸泡法是杀灭番茄红素中耐热芽胞菌的唯一实用、有效的方法,值得推广应用。 [参考文献] [1] 刘晓军,蔡东联.番茄红素抑制脂质氧化损伤的研究进展[J]. 国外医学,卫生学分册.2006,33(6):366-369. [2] 王能才,王双双.番茄红素与肿瘤[J].医学文选,2006,25(3): 553-555. [3] GB4789 2003,食品中细菌菌落总数计数方法[S].北京:中 国标准出版社,2003. 毒理与检验 四氯汞钾-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定空气中二氧化硫的有关问题探讨 陈振为,尹华 (常熟市疾病预防控制中心, 江苏常熟 215500) 文献标识码 B 中图分类号 R-331 文章编号 1006-9070(2009)04-0062-02 关键词 空气;二氧化硫;盐酸副玫瑰苯胺;分光光度法 在工作场所空气中硫化物的测定方法中以四氯汞钾为吸收液,盐酸副玫瑰苯胺为显色剂测定空气中的二氧化硫是常用的方法,但在实际工作中发现了一些问题,为此进行了实验探讨,现将结果报告如下。 DOI:10.3969/j.issn.1006-9070.2009.03.038 收稿日期:2009-06-20 作者简介:陈振为(1976 ),男,江苏常熟人,检验师。
大气二氧化硫的测定 甲醛溶液吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法（4学时） 目的：了解和掌握大气中二氧化硫的测定原理和方法 试剂及仪器：吸收液(甲醛-邻苯二甲酸氢钾缓冲液),2 mol/L 氢氧化钠溶液,0.025％PRA 工作液,二氧化硫标准工作液,普通型多孔玻板吸收管,25 ml 具塞比色管,分光光度计,空盒气压计,通风干湿表等。 实验步骤： 1. 采样 用一支内装5ml 四氯汞钠吸收液的棕色U 型多孔玻板吸收管，安装于小流量气体采 样器上，以1升／分流量采气40L，并记录采样现场的气压和气温。 2. 分析步骤 （1）绘制标准曲线：按下列步骤制备标准系列和绘制标准曲线。 管 号 0 1 2 3 4 5 6 7 标准溶液(ml) 0 0.200.60 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 吸收液（ml） 5.0 4.80 4.40 4.00 3.50 3.00 2.50 2.00 SO 2含量（μg） 0.4 1.2 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 向各管中加入0.5ml 1.2%氨基磺酸铵溶液，摇匀，放置10分钟(消除NOx 干扰)，然后 加入0.5ml 0.2%甲醛溶液和0.5ml 0.02%盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置数分钟，使其逐渐显色，并于560nm 波长下测定各管吸光度。以二氧化硫含量(μg)为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。 (2) 样品测定：采样后，将吸收液全部移入比色管中，用少量吸收液冲洗吸收管合并于比色管中，使总体积为5ml。然后，将该样品管与上述各标准系列管同步操作，加入各项试剂，并测定吸光度，查标准曲线得样品管二氧化硫含量(μg)。 (3)计算： V A C 式中：C ——二氧化硫浓度（mg/m3）。 A ——二氧化硫含量（μg）。 V O ——换算成标准状态下的采样体积（L）。 结果：与室内空气质量国家标准进行比较，判断二氧化硫是否超标。 注意事项：1．U 形多孔玻板吸收管与采样器的连接一定不能接反，要将有球的大管一侧连于 采样器上，避免吸收液进入采样器。 2．二氧化硫在吸收液中的稳定性与温度有关，在<5℃时，可保存30天无明显损 失，但在25℃时，吸收液中的二氧化硫每天损失1.5％。随温度升高，损失率增大。故采样应在5-20℃范围内进行。样品应当天分析，如不能当天完成测定，应将样品存放在4℃冰箱中保存。
邻联甲苯胺比色法测定水中余氯 的改进方法 水质中心邸俊英 【摘要】：本文通过对游离余氯检测的三种方法:N,N-二乙基对苯二胺（DPD）分光光度法、3,3′,5,5′-四甲基联苯胺比色法和邻联甲苯胺永久性余氯色列比色法在检测设备、检测时间和检测的难易程度进行了对比，说明了邻联甲苯胺比色法具有操作简单、检测时间短、检测成本低等优点，可完全放弃原有的立式比色器检测游离余氯的方法，适合于各水厂原水、出厂水及管网末梢水的测定。 【关键词】：游离余氯邻联甲苯胺检测 游离余氯是生活饮用水卫生标准中一项非常重要的消毒剂指标，也是各水厂日常必须检测项目之一。现行的《生活饮用水标准检验方法》中游离余氯的检测方法有两种,分别是N，N-二乙基对苯二胺（DPD）分光光度法和3,3′,5,5′-四甲基联苯胺比色法，最低检测浓度分别为0.01 mg/L和0.005 mg/L。 在实际的生产过程中，上述两种方法存在着操作过程繁琐、操作时间长、所需试剂种类多等缺点，不适宜在各水厂车间快速检测。其中邻联甲苯胺比色法测定水中游离余氯的方法具有检测速度快以及所需试剂少、设备简单等优点，下面将邻联甲苯胺比色法测定水中游离余氯的方法进行简单介绍。
1．邻联甲苯胺比色法原理： 在PH值小于1.8的酸性溶液中，余氯与邻联甲苯胺反应，生成黄色的醌式化合物，用目视法比色定量；还可用重铬酸钾-铬酸钾溶液配制的永久性余氯标准溶液色列进行目视比色。 2．邻联甲苯胺比色法应用范围： 1）本法适用于测定生活饮用水及其水源水的总余氯及游离余氯；2）水中含有悬浮物质时干扰测定，可用离心法去除。干扰物的最高允许含量是：三价铁0.2mg/L，四价锰0.01mg/L，亚硝酸盐0.2mg/L；3）本法最低检测浓度为0.01mg/L余氯； 4）适合测定水温在15～20℃的水样。 3．主要器皿：50mL具塞比色管、11空比色架 4．试剂的配置 4.1永久性余氯比色溶液的配置： 磷酸盐缓冲储备液：将无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）和无水磷酸二氢钾（KH2PO4）置于105℃烘箱内2h，冷却后，分别称取22.86g和46.14g。将两种试剂共溶于纯水中，并稀释至1000mL。至少静置4天，使其中胶状杂质凝聚沉淀，过滤。 4.2磷酸盐缓冲溶液（PH 6.45）：吸取200.0mL磷酸盐缓冲储备溶液，加纯水稀释至1000mL。 4.3重铬酸钾-铬酸钾溶液：称取0.1550g干燥的重铬酸钾（K2Cr2O7）及0.4650g铬酸钾（K2CrO4),溶于磷酸盐缓冲溶液中，并定容至
空气中二氧化硫的测定 （盐酸副玫瑰苯胺分光光度法） 一、实验原理 大气中的二氧化硫被四氯汞钾溶液吸收后，生成稳定的二氯亚硫酸盐络合物，此络合物再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺发生反应，生成紫红色的络合物，据其颜色深浅，用分光光度法测定。按照所用的盐酸副玫瑰苯胺使用液含磷酸多少，分为两种操作方法。 方法一：含磷酸量少，最后溶液的pH值为1.6±0.1；方法二：含磷酸多，最后溶液的pH值为1.2±0.1，是我国暂选为环境监测系统的标准方法。本实验采用方法二测定。仪器 1.多孔玻板吸收管（用于短时间采样）；多孔玻板吸收瓶（用于24h采样）。 2.空气采样器：流量0-1L/min。 3.分光光度计。 试剂 )、6.0g氯化钾和0.070g乙二 1.0.04mol/L四氯汞钾吸收液：称取10.9g氯化汞(HgCl 2
胺四乙酸二钠盐(EDTA-Na 2 )，溶解于水，稀释至1000ml。此溶液在密闭容器中贮存，可稳定6个月。如发现有沉淀，不能再用。 2.2.0g/L甲醛溶液：量取36-38%甲醛溶液1.1ml，用水稀释至200ml，临用现配。 3.6.0g/L氨基磺酸铵溶液：称取0.60g氨基磺酸铵"(H 2NSO 3 NH 4 )，溶解于100ml水中，临用 现配。 0.碘贮备液(C 1/2l 2 =0.1mol/L)：称取12.7g碘于烧杯中，加入40g碘化钾和25ml水，搅拌 至全部溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于棕色试剂瓶中。 1.碘使用液(C 1/2l 2 =0.01mol/L)，量取50ml碘贮备液，用水稀释至500ml，贮于棕色试剂瓶 中。 2.2g/L淀粉指示剂：称取0.20g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，慢慢倒入100ml沸水中， 继续煮沸直至溶液澄清，冷却后贮于试剂瓶中。 3.碘酸钾标准溶液：(C 1/6KlO 3 =0.1000mol/L)称取3.5668g碘酸钾（优质纯，110℃烘干2h）， 溶解于水，移入1000ml容量瓶中用水稀释至标线。 4.盐酸溶液(C HCl =1.2mol/L)：量取100ml浓盐酸，用水稀释至1000ml。 5.硫代硫酸钠贮备液：(CNa 2SO 3 =0.1mol/L)称取25g硫代硫酸钠(Na 2 SO 3 .5H 2 O)，溶解于 1000ml新煮沸并已冷却的水中，加0.20g无水碳酸钠，贮于棕色瓶中，放置一周后标定其浓度。若溶液呈现浑浊时，应该过滤。 标定方法：吸取碘酸钾标准溶液25.00ml，置于250ml的碘量瓶中，加70ml新煮沸并已冷却的水，加1.0g碘化钾，振荡至完全溶解后，再加1.2mol/L盐酸溶液10.0ml，立即盖好瓶塞，混匀。在暗处放置5min后，用硫代硫酸钠溶液滴定至淡黄色，加淀粉指示剂5ml ，继续滴定至亮绿色，按下式计算硫代硫酸钠溶液的浓度： C=25.00×0.1000/V 式中：C---硫代硫酸钠溶液的浓度(mol/L) V----消耗硫代硫酸钠溶液的体积(ml) 6.硫代硫酸钠标准溶液：取50.00ml硫代硫酸钠贮备液于500ml容量瓶中，用新煮沸并已 冷却的水稀释至标线，计算其准确浓度。 7.亚硫酸钠标准溶液：称取0.20g亚硫酸钠及0.010g乙二胺四乙酸二钠，将其溶解于200ml 新煮沸并已冷却的水中，轻轻摇匀（避免振荡，以防充氧）。放置２－３ｈ后标定。此溶液每毫升相当于含320-400μg二氧化硫。 标定方法：取四个250ml碘量瓶A、B、C、D，分别加入0.010mol/L碘溶液50.00ml。在A、B瓶内各加25ml水，在C瓶内加入25.00ml亚硫酸钠标准溶液，盖好瓶塞。立即吸取2.00ml 亚硫酸钠标准溶液于已加有40-50ml四氯汞钾溶液的100 ml容量瓶中，使其生成稳定的二氯亚硫酸盐络合物。再吸取25.00ml亚硫酸钠标准溶液于D瓶内，盖好瓶塞。然后用四氯汞钾吸收液将100ml容量瓶中的溶液稀释至标线。 A、B、C、D四瓶于暗处放置5min后，用0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加5ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝色刚好退去。平行滴定所用硫代硫酸钠标准溶液的体积之差应不大于0.05ml。 所配100ml容量瓶中的亚硫酸钠标准溶液相当于二氧化硫的浓度由下式计算： SO 2(μg/ml)=[(V -V)×C×32.02×1000/25.00]×2.00/100 式中：V ---滴定Ａ瓶时所用硫代硫酸钠标准溶液的体积的平均值(ml)； V---滴定Ｂ瓶时所用硫代硫酸钠标准溶液的体积的平均值(ml)； C----硫代硫酸钠标准溶液的准确浓度(mol/L) 32.02---相当于1mmol/L硫代硫酸钠溶液的二氧化硫(1/2 SO 2 )的质量(mg) 根据以上计算的二氧化硫标准溶液的浓度，再用四氯汞钾吸收液稀释成每毫升含2.0μg
二氧化硫的甲醛缓冲液－盐酸副玫瑰苯胺分光光度法 4.1 原理 空气中二氧化硫用甲醛缓冲液采集，生成稳定的羧甲基磺酸，加氢氧化钠后释放出二氧化硫，与盐酸副玫瑰苯胺反应生成红色化合物，于575nm 波长下测量吸光度，进行定量。 4.2 仪器 4.2.1 多孔玻板吸收管。 4.2.2 空气采样器，流量0～1L/min。 4.2.3 具塞比色管，25ml。 4.2.4 分光光度计。 4.3 试剂 实验用水为蒸馏水。 4.3.1 磷酸，ρ25＝1.68g/ml。 4.3.2 氢氧化钠溶液，40g/L。 4.3.3 吸收液，甲醛缓冲液：称取1.82g 环己二胺四乙酸，溶于10ml 氢氧化钠溶液，用水稀释至100ml，置于冰箱内保存。取20 ml 此液和 5.3ml 甲醛、2.04g 邻苯二甲酸氢钾，用水稀释至100ml，置于冰箱内保存。临用前，再用水稀释100倍。 4.3.4 磷酸溶液：量取82ml 磷酸用水稀释至200ml。 4.3.5 氨基磺酸溶液，3g/L。 4.3.6 盐酸副玫瑰苯胺溶液：精确称取0.2g 盐酸副玫瑰苯胺盐酸盐，溶于100ml 盐酸 (1mol/L)中。吸取20ml 此液于250ml 容量瓶中。加入200ml 磷酸溶液，用水稀释至刻度。放置24h 后使用。可稳定4个月。 4.3.7 标准溶液：称取0.15g 偏亚硫酸钠（Na2S2O5）或0.2g 亚硫酸钠，溶于250ml 吸收液中。标定其准确浓度后，为标准贮备液。标定方法见上法。再用吸收液稀释成4.0μg/ml 二氧化硫标准溶液，置于冰箱内可稳定1 个月。或用国家认可的标准溶液配制。标准溶液：称取0.15g偏亚硫酸钠（Na2S2O5）或0.2g亚硫酸钠，溶于250ml 吸收液中。如有沉淀，需过滤。经标定后，计算出二氧化硫的浓度。再用吸收液稀释成 5.0μ g/ml 二氧化硫标准溶液。置于冰箱内保存可稳定30d。
甘蔗糖业 2007年第1期 Sugarcane and Canesugar 2007年2月 甲醛溶液吸收—盐酸副玫瑰苯胺分光光度法 测定白砂糖中的二氧化硫 余 娟1 卢家炯1 莫海涛2 闵亚光1 马 利1 （1广西大学轻工与食品工程学院，南宁 530004；2广西大学糖业工程技术研究中心，南宁 530004） 摘 要 本文建立了用甲醛溶液吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定白砂糖中二氧化硫的方法。该法用甲醛代替汞盐,减少了对环境的污染。样品经处理后加入甲醛，样液中二氧化硫与甲醛生成稳定的羟基甲基磺酸，加氢氧化钠后,与盐酸副玫瑰苯胺作用，生成紫红色化合物,在579 nm 处测定其吸光度。白砂糖中二氧化硫浓度在0～60 mg/kg 范围内与吸光度值呈良好的线性关系（r＝0.9998），检出限为0.81 mg/kg。样品测定的相对标准偏差在2.8％～4.1％，回收率在93.8％～98.6％之间。与国标方法测定结果比较，两者无显著性差异，结果令人满意。 关键词 甲醛；盐酸副玫瑰苯胺；白砂糖；二氧化硫 0 导言 二氧化硫含量是白砂糖的一项重要质量指标。最新的白砂糖国家标准GB317-2006对二氧化硫指标[1] 进行了更为严格的修订：一级、二级白砂糖≤30 mg/kg，优级白砂糖≤15 mg/kg，精制白砂糖≤6 mg/kg。 国标GB317－2006中规定，白砂糖中二氧化 硫测定方法参照GB/T5009.34-2003《食品中亚硫 酸盐的测定》，即四氯汞钠－盐酸副玫瑰苯胺比色法[2] 。该方法使用了有毒试剂四氯汞钠，且用量较大，对环境造成汞污染，同时也危害到有关化验人员的身体健康。为消除这一不足，大气中二氧化硫的检测方法为甲醛溶液吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法[3] ，其原理为二氧化硫被甲醛缓冲溶液吸收后，生成稳定的羟基甲基磺酸，化学反应式如下： 加入氢氧化钠后，与盐酸副玫瑰苯胺作用，生成紫红色化合物，以比色定量。 本文采用甲醛溶液吸收-盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定白砂糖中的二氧化硫，并与国标方法进行比较，结果令人满意。 1材料与方法 1.1 仪器和设备 UV2501PC 紫外/可见分光光度计；25 mL 带塞
葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法) 产品简介： 葡萄糖(Glucose,Dextrose，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C 6H 12O 6，分子量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。 Leagene 葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)检测原理是葡萄糖在加热的有机酸中脱水后能与邻甲苯胺缩合呈雪夫氏碱，后者呈蓝绿色，其最高吸收峰为630nm 颜色深浅与葡萄糖含量成正比，经分光光度计与标准品进行对比求得葡萄糖量。本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、样本处理： ①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围(25mmol/L)，用蒸馏水稀释后检测。②细胞样本： a、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，1000g 离心10min，弃上清，留取沉淀。 b、用PBS 或生理盐水清洗1~2次，1000g 离心10min，弃上清，留取沉淀。 c、加入PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔，重复3~5次。 ③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)=的比例，加入生理盐水或PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。离心，取上清待用。 2、制作葡萄糖标准曲线：取离心管5支，依次加入Glu 标准(10mg/ml)0.125ml、0.25ml、 0.5ml、0.75ml、1.0ml，再以蒸馏水稀释至2.5ml。具体见下表：Glu 标准(10mg/ml)(ml)0.1250.250.50.75 1.0蒸馏水(ml) 2.375 2.25 2.0 1.75 1.5葡萄糖浓度(mg/ml) 0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 3、Glu 测定操作:①按下表依次加入试剂： 编号 名称 TC071650T Storage 试剂(A):Glu 标准(10mg/ml)5ml 4℃避光试剂(B):O-Toluidine 显色液100ml 4℃避光使用说明书 1份