西吉县美家特砼业有限公司粉煤灰检验原始记录
试验编号：MJT
容量法测定蛋白质原始记录 页检测项目蛋白质检测开始时间年月日 检测依据GB 5009.5-2016第一法检测结束时间年月日 检测方法凯氏定氮法温度及相对湿度℃% 仪器名称及型号 ME204E 电子天平 仪器编号 ××/××-004 SKD-2082 红外智能消化炉××/××-033 SKD-800 自动定氮仪××/××-032滴定管××-086 检出限/ 标准滴定溶液浓度C HCL= mol/L 空白消耗量V2= mL 标准滴定溶液来源附BZRY: GB/T601-2016 4.2 盐酸标准滴定溶液 1.取9.00mLGR盐酸加入预先放有100mL纯水的250mL烧杯中，放置室温后用纯水定容于1000.0容量瓶。 2.标定：称取于290℃高温炉中灼烧至恒量的工作基准试剂无水碳酸钠0.2000g,溶于50.00mL水中,加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液,用配制的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸2.00min,加盖具钠石灰管的橡胶塞,冷却,继续滴定至溶液再呈暗红色即为终点。同时做空白试验。 样品处理情况称取充分混匀试样1g左右精确至0.0001g，加浓硫酸(GR)10ml，加硫酸铜与硫酸钾比例为：1:9的混合试剂5克左右，于消化炉进行消化（依SKD-2082红外智能消化炉操作规程）。当消化炉温度达到420℃之后,继续消化1h,此时消化管中的液体呈绿色透明状,取出冷却后,于自动凯氏定氮仪（依SKD-800 自动定氮仪操作规程）进行测定。同时做试剂空白。 计算公式 检测人：校核人：审核人：
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任务： 1、请设计检验样品抽样单，并抽样，填写相关记录； 2、食品中蛋白质种类及含量是标志食品营养价值的重要指标，查阅资料，了解并下载国家标准测定蛋白质的方法。 3、凯氏定氮法测定食品中蛋白质方法原理是什么？ 凯氏定氮法测定食品中蛋白质的原理是样品与浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜一同加热消化, 使蛋白质分解, 其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出, 而样品中的有机氮转化为氨和硫酸结合成硫酸铵, 然后加碱蒸馏, 使氨蒸出,用硼酸吸收后再以标准盐酸溶液滴定, 根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。 4、对照国家标准，列出实验所需仪器与试剂 所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水。 硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸；40％氢氧化钠溶液：称取40g 氢氧化钠溶于60ml 蒸馏水中；4％硼酸溶液：称取4g 硼酸溶于蒸馏水中稀释至100ml；0.050mol/l 盐酸标准滴定溶液；甲基红次甲基蓝混合指示液：将次甲基蓝乙醇溶液（1g/l）与甲基红乙醇溶液（1g/l）按1∶2 体积比混合。 实验室常规仪器及下列各项： 凯氏烧瓶：500ml；可调式电炉；蒸汽蒸馏装置；绞肉机：篦孔径不超过4nm；组织捣碎机；粉碎机；研钵：玻璃或瓷质；化学消化器；凯氏定氮仪；空气滤过器 5.样品在消化过程中，应加入浓硫酸、硫酸钾及硫酸铜，试分别说清他们各自的作用。 加硫酸作用：硫酸及催化剂与样品加热消化, 使蛋白质分解, 其中C、H 形 成CO 2和H 2 O 逸出, 而蛋白质中的氮则转化成( NH4 ) 2 SO4 加硫酸钾作用：在消化过程中添加硫酸钾可以提高温度加快有机物分解,它与硫酸反应生成硫酸氢钾,可提高反应温度,一般纯硫酸加热沸点330 ℃,而添加硫酸钾后,温度可达400 ℃,加速了整个反应过程。此外,也可以加入硫酸钠,氢化钾盐类来提高沸点。其理由随着消化过程硫酸的不断地被分解,水分的逸出而使硫酸钾的浓度增大,沸点增加。加速了有机的分解。但硫酸钾加入量不能太大,否则温度太高,生成的硫酸氢铵也会分解,放出氨而造成损失。 加硫酸铜作用：为了加速反应过程,还加入硫酸铜,氧化汞或硒粉作为催化剂以及加入少量过氧化氢,次氯酸钾作为氧化剂。但为了防止污染通常使用硫酸铜。所以有机物全部消化后,出现硫酸铜的兰绿色,它具有催化功能,还可以作为碱性反应指示剂。 6、消化过程中应注意哪些问题？如何判断样品消化达到终点。 （1）消化过程中不要用强火,特别是样品脂肪或糖含量较高时,消化过程中易产生大量泡沫,强火会使样品溢出瓶外或溅起粘附在凯氏烧瓶壁上无法消化完全而造成氮损失,因此应在开始消化时用小火加热,保持和缓沸腾,使火力集中在凯氏烧瓶底部。 （2）消化过程中要不时转动凯氏烧瓶,以便利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下并促进其消化完全。 （3）样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量,因消化时脂肪消耗硫酸量大,使硫酸缺少不能生成硫酸铵造成氮损失。
蛋白质含量测定 本方法适用于原料乳和乳制品中蛋白质的检测，方法结合国标GB5009.12-2010中凯氏定氮法。 1、原理：蛋白质是含氮的有机化合物。样品与硫酸和催化剂一同加热消化，使氮分解，分解的氮与硫酸结合生产硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收，再用已知摩尔浓度盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数。 2、试剂与材料同国标GB5009.12-2010，水为GB/T6682规定的一级水。 仪器名称：定氮仪全自动蒸馏装置、智能消化炉；仪器型号KND-812、HPY-314； 检定有效期年月日；检验日期：年月日 样品名称：样品批号：称样量及编号：样品来源： 样品名称：样品批号：称样量及编号：样品来源： 样品名称：样品批号：称样量及编号：样品来源：3样品前处理： （1）称取1~2g样品于样品管内并编号。 （2）将样品管放到消化炉上，并设置【01】阶段温度为250℃，时间为60min，烘干放冷。 （3）每个样品加入6.4-7g催化剂（注：催化剂是硫酸铜和硫酸钾按1:15比率混而成）。 （4）每个样品再加入15ml硫酸。 （5）消化：【01】（25010）-【02】（2805） 【03】（31010）-【04】（35010） 【05】（3905）-【06】（42090） （6）蒸馏：样品管放冷后，加20ml水混匀，三角瓶加入20ml硼酸和3-5滴指示剂；系统设置加碱15s，蒸馏420s，吸废液10s，清洗45s，如果是手动加硼酸，加酸时间为0s，结束后仪器自动停止，将三角瓶取下。 （7）同时做两分空白。 4标准溶液的配制： 0.05mol/L的盐酸：4.2ml盐酸容于1000ml蒸馏水，并用碳酸钠发标定。 标定后盐酸浓度 5结果分析 蛋白%=(V1-V2)×C×0.0893×100 m C：盐酸浓度（mol/L）；m：试样质量； V1：样品所消耗盐酸体积（ml）V2：空白所消耗盐酸体积（ml） 生鲜奶： 巴氏奶： 酸牛奶： 检验结论： 试验人：复核人：