CLSI 主要更新摘要
葡萄球菌
苯唑西林:
1、删除苯唑西林对凝固酶阴性葡萄球菌纸片扩散法折点
对凝固酶阴性葡萄球菌头孢西丁与苯唑西林纸片试验之间敏感性相同，但特异性高于苯唑西林
2、检测mecA介导的耐药试验：
头孢西丁纸片扩散法或MIC法试验结果可用于预报金黄色葡萄球菌和路登葡萄球菌分离株是否存在mecA介导的苯唑西林耐药性。对于凝固酶阴性葡萄球菌（路登葡萄球菌除外），检测mecA介导的苯唑西林耐药性，首选方法是头孢西丁纸片扩散法。头孢西丁可被用于检测苯唑西林耐药性替代品；根据头孢西丁结果来报告其敏感或耐药
青霉素：
当葡萄球菌分离株对青霉素MICs≤0.12或抑菌环直径≥29mm，在报告青霉素结果为敏感前，应进行诱导β-内酰胺酶试验，β-内酰胺酶试验阳性表明对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林、替卡西林、美洛西林和哌拉西林耐药。
对苯唑西林耐药葡萄球菌，报告青霉素耐药或不报告。
万古霉素：
1、删除万古霉素对葡萄球菌纸片扩散法的折点
2、测定所有葡萄球菌分离株对万古霉素敏感性执行MIC试验。纸片扩散试验既不能将万古霉素敏感金黄色葡萄球菌与中介菌株区别开来，也不能区别万古霉素敏感、中介和药敏凝固酶阴性葡萄球菌
3、万古霉素纸片试验可检测VRSA（含VanA耐药基因）。上述菌株纸片周围表现无抑菌环（直径=6mm），应重复确定鉴定结果。凡万古霉素抑菌环直径≥7mm葡萄球菌分离株，应测定万古霉素MIC
替考拉宁：
在最近研究期间，替考拉宁制片扩散法折点值没有与万古霉素一起被重新评估。因此，替考拉宁折点值区分替考拉宁中介、耐药与敏感葡萄球菌的能力还未知
肠杆菌科
头霉素类：
在B组中增加头孢替坦
喹诺酮、氟喹诺酮类：
删除有关粪便中沙门菌或志贺菌分离株报告“喹诺酮”的建议，保留“氟喹诺酮”
碳青霉烯类：
改良Hodge试验测试肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶注释：
对于三代头孢菌素耐药的肠杆菌科细菌可能产碳青霉烯酶，导致对于碳青霉烯类抗生素MIC 值的升高，或抑菌环直径的降低。但其MIC值或抑菌环直径仍可落在敏感范围内，需要根据MIC值或抑菌环直径判断是否需要使用改良Hodge试验作为筛选试验。
肉汤微量稀释法测定结果：亚胺培南2-4μg/ml，美罗培南2-4μg/ml，厄他培南2μg/ml 纸片扩散法测定结果：美罗培南16-21mm，厄他培南19-21mm
当筛选试验结果在以上范围时，应进行改良Hodge试验作为确证试验，该方法检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的敏感性和特异性大于90%
苛养菌
肺炎链球菌：
1、对左氧氟沙星敏感的肺炎链球菌分离株，可预报其对吉米沙星和莫西沙星也敏感。然而，对吉米沙星和莫西沙星敏感分离株，不能推定其对左氧氟沙星敏感
2、对非脑膜炎肺炎链珠菌分离株，青霉素MIC能预报对其他β-内酰胺类敏感性：青霉素MIC≤0.16μg/ml（或苯唑西林的抑菌环≥20mm）提示分离株对氨苄西林（口服或注射）、氨苄西林/舒巴坦、头孢克罗、头孢地尼、头孢托仑、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢唑肟、头孢呋辛、亚胺培南、氯碳头孢和美罗培南等敏感
青霉素MIC≤2μg/ml提示对阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢比肟、头孢噻肟、头孢曲松和厄他培南等敏感
3、对脑膜炎肺炎链球菌分离株应常规报告MIC值，青霉素、头孢噻肟或头孢曲松、美罗培
草绿色溶血链球菌：
纸片扩散法检测青霉素、达托霉素和氨苄西林不可靠
流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌：
哌拉西林/他做巴坦纸片扩散法敏感折点值≤1/4μg/ml
淋病奈瑟菌：
用体外试验产生“中介”结果的头孢美唑、头孢替坦、头孢西丁和壮观霉素治疗淋病奈瑟菌感染的临床疗效是未知的
其他
举例说明由“或”连接的一种抗菌药物可预报另一种抗菌药物的药敏结果，明确的在表格的同一栏内无“或”连接的抗菌药物，一种抗菌药物的药敏结果不能预测另一种的药敏结果
例如：对头孢噻肟敏感的非产ESBLs的肠杆菌科菌株，被认为对头孢曲松也敏感。报告头孢噻肟试验结果时，应在报告中加上“分离菌对头孢曲松也敏感”的注释。由于存在差异或缺乏足够数据，无“或”相连的抗菌药物，其一种抗菌药物试验结果不能用于预报其他药物
（生物科技行业）CLSI临床微生物实验室标准解读
CLSI临床微生物实验室标准解读 CLSI2010更新 CLSI临床微生物实验室标准解读第三辑 2010年CLSI药敏试验的更新 中国医学科学院北京协和医学院杨启文王辉 美国临床和实验室标准化研究所(TheClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)是壹个国际性、跨学科、非营利的、致力于发展操作标准的教育组织。其抗菌药物敏感性试验小组委员会(SubcommitteeonAntimicrobialSusceptibilitytesting)每年组织该领域专家和药厂代表等对药敏相关文件M100进行壹次修订。目前我国的临床微生物实验室均以CLSI文件作为药敏指导文件进行试验操作和报告，本文将CLSIM100-S20(2010年)的主要更新点总结如下： 壹、主要格式的更新： 下表显示了壹些在M100-S19(2009年)中位于最后的附录在M100-S20(2010年)文件中新的命名、编号和位置。表1.M100-S20的格式更新 (1)修订了“非敏感”的定义：M100-S20中对“非敏感”的定义是由于耐药菌株缺失或稀少因而仅确立了敏感性解释标准。当药物对菌株的MIC高于或抑菌圈直径低于此折点时需报告为非敏感。非敏感且不意味着菌株携带某种耐药机制。有可能MIC高于敏感折点的菌株缺乏耐药机制且且属于野生菌株，只不过其出现于敏感性折点确立后。对于“非敏感”的菌株，菌株鉴定和药敏结果需被再次确认。 (2)对“使用头孢噻吩的折点仅用于预测对其他头孢菌素的敏感性”增加注释：在M100-S20中，头孢噻吩的折点仅可用于预测菌株对口服药物，包括孢羟氨苄，头孢泊肟，头孢氨苄和氯碳头孢的敏感性。旧的数据认为头孢噻吩的结果能够预测某些其他头孢菌素的敏感性可能仍然正确，但目前的数据尚不能支持此论点。 (3)在M100-S20的第26页增加第VII部分来描述筛选试验且总结他们的局限性以及对应的确证试验。该部分总结了 肠杆菌科菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌和肺炎链球菌的耐药表型初筛试验和对应的确证试验。 (4)在表1和1A的警告框内，M100-S20将头霉素类药物加入脑脊液分离菌株中不能常规报告的抗菌药物列表中。在M100-S19中，口服抗菌药物、第壹代和第二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、克林霉素、大环内酯类、四环素类和氟喹诺酮类被列为脑脊液分离菌株中不能常规报告的抗菌药物，因为这些药物不是脑脊髓感染的选择药物，在M100-S20中，头霉素类药物(如头孢西丁、头孢美唑和头孢替坦)也被纳入此类药物。 三、肠杆菌科菌相关的更新 (1)修订了头孢唑啉、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑肟、头孢曲松和氨曲南的折点，且在折点后增加了对应 的用药方案。
GB/T 18204 4-2000 前言 为贯彻执行《公共场所卫生管理条例》和GB 9663～9673- 1996、GB 16153-1996《公共场所卫生标 准》，加强对公共场所卫生监督管理，特制定本标准。 本标准中的方法是与GB 9663—9673-1996，GB 16153-1996相配套的监测检验方法。 本标准第一法为xx。 本标准为首次发布。 本标准由xx卫生部提出。 本标准起草单位： 江苏省卫生防疫站、广东省卫生防疫站、天津市卫生防疫站、辽宁省卫生防疫站。 本标准主要起草人： xxxx： xx、xx、xx万双、xx玟、张淑兰； 戳印法： 姜淑荣、xx、xx、付亚书。 xx国家标准 公共场所xx、床上卧具微生物检验方法 细菌总数测定
Methods of microbiological examination for towel and bedclothes in public places -Determination of aerobic bacterial count GB/T 18204.4-2000 1范围 本标准规定了公共场所毛巾、床上卧具细菌总数的测定方法。 本标准适用于公共场所内公用毛巾、床上卧具细菌总数的测定． 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T 18204. 2-2000公共场所茶具微生物检验方法细菌总数测定 3定义 本标准采用下列定义。 细菌总数aerobic bacterial count 指被检物品经过采样处理，在一定条件下培养后（培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性 质等）．25cm^2表面上所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上 生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。 细菌总数主要作为判定公用毛巾，床上卧具被污染程度的标志，检测细菌总数，为公用毛巾、床上卧具清洗消毒效果的判定和评价提供依据。
常见的微生物检测 方法
摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同
时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：
微生物取样方法、微生物检测标准 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制 2采样（空气沉降法） 2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 2.1细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 2.2致病菌的检验 沙门氏菌，参照GB4789.4进行 金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验
微生物基础知识试题 部门：____________ 姓名：______________ 成绩：____________ 一、填空题（每空2分，共40分） 1、微生物的形体极度小，必须借助于_____________或______________放大数， 百倍、千倍至数万倍，常用______________、______________作为测量单位。 2、微生物分布广泛，存在于_________、_______、_________、______________ 、______________之表以及______________。 3、原核细胞生物由_____________构成，真核细胞生物多数由_____________组成。 4、利用某种微生物制成_____________或____________为人类预疾病。 5、活性粒子是夹带有大量_____________的粒子，非活性粒子是单纯的_____________粒 子。水是制药企业的____________或____________，由于水的污染，将直接导入污染源。 6、热力灭菌利用高温杀微生物可分为__________________、________________。 二、多项选择题（共15分） 1、来苏（甲酚皂）2%的水溶液用于（）消毒。 A．皮肤B、设备C、容器D、空气 2、常用的消毒剂75%的乙醇用于（）消毒。 A．皮肤工具B、设备C、容器D、空气 3、消毒剂用于表面活性剂0.1-0.2%的新洁尔灭液，用于（）消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、容器 4、37-40%的甲醛液8-9ml/m3( )消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、室内 5、常用的灭菌器主要有（） A．高压蒸汽灭菌器B、烘箱C、紫外线灯
第一模块微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。
第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。 （1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。 （2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。 （3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。 细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。 2. 细菌的繁殖 二分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。 细菌生长速度很快，一般约20min分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。 3. 细菌的菌落 单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。 二. 真菌
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读 张雅薇? ? 王辉（通讯作者） 北京大学人民医院检验科 此文发表在《中华检验医学杂志》 2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。CLSI 制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。 一、常规试验及报告药物的更新 CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。b B组：常规测试，但选择性报告的药物。c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。 二、药敏折点的相关更新 2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，
公共场所试题（微生物部分） 一、填空 1、GB/ T 18204. 1-2000 公共场所空气微生物检验方法中规 定细菌总数测定的方法有撞击法和自然沉降法。 2、茶具细菌总数的计算是经采样处理，一定条件下培养，1cm2 表面积所含的菌落总数。 3、风管内表面微生物采样为每一点采样50cm2面积。 4、微生物检验样品的处理应在洁净区域进行，并有明显标示。 5、病原微生物分离鉴定工作应在二级生物安全实验室进行。 二、单选 1、公共场所饮用水卫生指在一定培养后，1ml水样中所含菌落 的总数 A 1 B 10 C 100 D 1000 2、霉菌和酵母菌的测定指50cm2面积检样中所含霉菌和酵母 菌落数。 A 10 B 25 C 50 D 100 3、耐热大肠菌群的培养温度是44.5℃ A 37 B 37.5 C 44.5 D 50 4、国家消毒技术规范中规定紫外线灯在距离照射1米处，要求 其强度为≥90uw/ cm2 A 80 B 85 C 90 D 99。 5、各类专业人员的基本要求中微生物人员至少2名
A 1 B 2 C 3 D 4 三、多选 1、风管内表面微生物的采样方法有：AB A刮拭法B擦拭法C撞击法D自然沉降 2、金黄色葡萄球菌ABCD A血平板生长良好B分解甘露醇产酸C血浆凝固酶阳性D革兰氏阳性 3、高压灭菌锅的控制方法有：ABC A生物指示法B化学变色纸片C高压灭菌锅温度计 4、培养基的质量控制包括ABC A物理指标B微生物指标C企业提供资料 5、公共场所毛巾大肠菌群的测定方法有ABC A随机法B发酵法C纸片法D指示法 四、是非 1、公共场所饮用水卫生指在一定培养后，100ml水样中所含 菌落的总数（错） 2、实验室使用的仪器应定期对其进行校核，并保持良好工作状 态。（对） 3、相同的设备可以使用相同的仪器标识来管理。（错） 4、使用50立方以上高压灭菌锅应取得安检部门发放的上岗 证。（对） 5、申报公共场所场所技术服务项目中致病菌检测项目可以不
微生物群落多样性的基本概念 环境中微生物的群落结构及多样性和微生物的功能及代谢机理是微生物生态学的研究热点。长期以来，由于受到技术限 制，对微生物群落结构和多样性的认识还不全面，对微生物功能及代谢机理方面了解的也很少。但随着高通量测序、基因芯片等新技术的不断更新，微生物分子生态学的研究方法和研究途径也在不断变化。第二代高通量测序技术（尤其是Roche454高通量测序技术）的成熟和普及，使我们能够对环境微生物进行深度测序，灵敏地探测出环境微生物群落结构随外界环境的改变而发生的极其微弱的变化，对于我们研究微生物与环境的关系、环境治理和微生物资源的利用以及人类医疗健康有着重要的理论和现实意义。 在国内，微生物多样性的研究涉及农业、土壤、林业、海洋、矿井、人体医学等诸多领域。以在医疗领域的应用为例，通过比较正常和疾病状态下或疾病不同进程中人体微生物群落的结构和功能变化，可以对正常人群与某些疾病患者体内的微生物群体多样性进行比较分析，研究获得人体微生物群落变化同疾病之间的关系；通过深度测序还可以快速地发现 和检测常见病原及新发传染病病原微生物。 研究方法进展 环境微生物多样性的研究方法很多，从国内外目前采用的方法来看大致上包括以下四类：传统的微生物平板纯培养方法、微平板分析方法、磷脂脂肪酸法以及分子生物学方法等等。 近几年，随着分子生物学的发展，尤其是高通量测序技术的研发及应用，为微生物分子生态学的研究策略注入了新的力量。 目前用于研究微生物多样性的分子生物学技术主要包括:DGGE/TGGE/TTGE、T-RFLP、SSCP、FISH、印记杂交、定量PCR、基因芯片等。DGGE等分子指纹图谱技术，在其实验结果中往往只含有数十条条带，只能反映出样品中少数优势菌的信息；另一方面，由于分辨率的误差，部分电泳条带中可能包含不只一种16S rDNA序列，因此要获悉电泳图谱中具体的菌种信息，还需对每一条带构建克隆文库，并筛选克隆进行测序，此实验操作相对繁琐；此外，采用这种方法无法对样品中的微生物做到绝对定量。生物芯片是通过固定在芯片上的探针来获得微生物多样性的信息，“只能验证已知，却无法探索未知”，此方法通过信号强弱判断微生物的丰度也不是非常的准确。 而近年来以454焦磷酸测序为代表的高通量测序技术凭借低成本、高通量、流程自动化的优势为研究微生物群落结构提供了新的技术平台。Roche454高通量测序技术能同时对样品中的优势物种、稀有物种及一些未知的物种进行检测，获得样品中的微生物群落组成，并将其含量进行数字化。最近，美吉生物推出了新的测序平台———MiSeq。MiSeq高通量测序平台集中了Roche454和Illumina HiSeq2500的优点，不仅可实现对多样品的多个可变区同时测序，而且在测序速度和测序通量上都有进一步提升，目前此平台已在微生物多样性群落结构研究方面受到了广大学者的认可。 第二代高通量测序技术
基础微生物整理 绪论 1.微生物的特性：个体小、结构简单、繁殖快、数量大、分布广、种类多 2.巴斯德的贡献：发酵是由微生物引起的；巴斯德消毒法；提出了胚种学说，彻底推翻了自然学说 3.科赫的贡献： ①发明了“细菌纯培养法”； ②发现了肺结核病的病原菌（1905年获诺贝尔奖）； ③证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——著名的柯赫原则（在每一相同病例中都出现这种微生物；要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来；用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生；从试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物来。） ★第一章原核微生物 1.原核微生物包括细菌、古菌、放线菌、蓝细菌等；真核微生物包括酵母菌、霉菌、单细胞藻类、原生动物等；病毒、亚病毒属于非细胞结构微生物。 2.原核生物和真核生物的区别： ▲有无真核，原核没有，真核有。 ▲有无细胞器，原核没有，真核有。 ▲核糖体，原核生物的为70S，而真核生物的为80S。 3.古菌、细菌和真核生物三域特性的比较 三域：三域指的是细菌域、古生菌域和真核生物域。 ★（一）细菌 1.细菌的形态：球形（双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌）、杆形、螺旋形 2.细菌的大小： 球形0.5 ~ 1μm （直径） 杆形0.2~ 1μm （直径）× 1~ 80μm（长度） 螺旋形0.3~ 1μm（直径）× 1~ 50μm（长度）(长度是菌体两端点之间的距离，而非实际长度)
3.细菌细胞的构造 基本构造：细胞壁、细胞膜、细胞质和拟核 特殊构造：荚膜、鞭毛、纤毛、芽孢、饱囊等 4.细胞壁：是细胞膜外面具有一定硬度和韧性的壁套。主要化学成分为肽聚糖 ★5.革兰氏染色：一种鉴别染色法，当用脱色剂处理时，根据保留或失去原始着色剂（结晶紫）与否，细菌被划分为革兰氏阳性或革兰氏阴性。 ①涂片，固定、结晶紫初染 ②碘溶液媒染，其作用是提高染料和细胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固 ③用乙醇或丙酮冲洗进行脱色 ④沙黄或番红复染 结果：菌体呈紫色者为G+（革兰氏阳性细菌） 菌体呈红色者为G-（革兰氏阴性细菌） 6.革兰氏阳性细菌的细胞壁:细胞壁厚为20到80nm，主要由肽聚糖和磷壁酸组成。其中肽聚糖单位包括三部分：双糖单位、四肽链和肽桥 7.革兰氏阴性细菌的细胞壁：分为内壁层和外壁层。内壁层紧贴细胞膜，由肽聚糖组成；外壁层由脂多糖和脂蛋白组成。 8.周质空间又称壁膜间隙。在革兰氏阴性细菌中，一般指其外膜与细胞膜之间的狭窄空间 9.L型细菌：通过自发突变而形成的遗传性稳定的无细胞壁缺陷菌株 10.原生质体：指细菌被溶酶菌或青霉素分子处理后所形成的无壁、只由细胞膜包围，对渗透压敏感的球形细胞。 11.细胞质膜：主要由脂类（磷脂）和蛋白质组成。 12.细胞质内含物：异染粒、聚β-羟基丁酸颗粒、糖原、硫滴等 异染粒：以无机偏磷酸盐聚合为为主要成分的一种无机磷储备物。 聚β-羟基丁酸颗粒：它为细菌所特有的碳源和能源性贮藏物。 13.细胞拟核：细菌细胞的拟核位于细胞之内，无核膜、无核仁。 ★14.荚膜：细菌的细胞壁向外分泌出一层黏性多糖。荚膜可作为外碳源和能源性贮藏物质，并能保护细胞免受干燥影响，同时能增强某些病原菌的致病能力。 ★15.鞭毛：某些细菌细胞表面伸出细长、丝状、螺旋形的附属物。化学组成为蛋白质，仅有少量多糖或脂类。具有推动细菌运动功能，为细菌的“运动器官”。 16.纤毛：很多革兰氏阴性菌及少数阳性菌的细胞表面有一些比鞭毛更细、更短而直硬的丝状体结构。 ★17.芽孢：某些细菌在细胞内形成一个球形或椭球形、壁厚、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。整个生物界中抗逆性最强的生命体，是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标。芽孢是细菌的休眠体，在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞；产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。 18.异形裂殖:裂殖后形成子细胞与母细胞大小不相等，称为异形裂殖。 19.同形裂殖:裂殖后形成子细胞与母细胞大小相等，称为同形裂殖。 20.菌落：细菌在固体培养基上生长发育，几天内即可由1个或几个细菌分裂繁殖聚集而形成肉眼可见的群体。 21.伴孢晶体：某些芽孢杆菌，如苏云金杆菌，在细胞内产生一种晶体状多肽类内含物称之。 22.细菌菌落形态：小而突起，透明或稍透明，颜色多样，边缘一般看不到细胞，表面润湿。（二）放线菌 1.放线菌具有菌丝、以孢子进行繁殖、革兰氏染色阳性的一类原核微生物。少数寄生，多数为腐生菌。弗兰克氏菌能与植物共生，进行固氮。放线菌为单细胞。
公共场所空调风管内表面微生物检验记录 样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：细菌总数、真菌总数检测依据： 样点的布置：□手工擦拭采样在每套空调系统的风管中选择2个代表性采样断面，每个断面在风管的上面、底面和侧面各设置1个采样点。□无法在风管中采样，抽取该套系统全部送风口的3%～5%且不少于3个作为采样点。 一、细菌菌落总数：（平板计数法）：采样方法采样面积36±1℃倒置培养小时 二、真菌菌落总数（平皿计数发）：采样方法采样面积25～28℃倒置培养天 培养箱编号：使用状况试验前：试验后： 检测人：校核人：审核人：
公共场所卫生(空调风管内表面微生物)检验记录 样品编号： 检验开始时间： 年 月 日 样品名称： 检验完成时间： 年 月 日 检测项目： 检测依据： 一、细菌总数：采样方法：（撞击法）36±1℃倒置培养 （48h ） ； 采样速率 L/min ； 采样时间 min 空气中微生物数量（cfu/m 3 ）= 1000) min /(3.28min ??L ）采样时间（所有平皿菌落数 计算及结果：空气中细菌总数（cfu/m 3）: 二、真菌总数：采样方法：（撞击法）25℃—28℃倒置培养 (5天)；采样速率 L/min ； 采样时间 min 空气中微生物数量（cfu/m 3 ）= 1000) min /(3.28min ??L ）采样时间（所有平皿菌落数 计算及结果：空气中真菌总数（cfu/m 3）:
电子天平编号： 使用状况 试验前： 试验后： 培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后： 检测人： 校核人： 审核人： 样品编号： 三、β-溶血性链球菌：采样方法：（撞击法）35℃—37℃培养 (24~48h)；采样速 空气中微生物数量（cfu/m 3 ）= 1000) m in / (3.28m in ??L ）采样时间（所有平皿菌落数 计算及结果：空气中β-溶血性链球菌总数（cfu/m 3）: 四、嗜肺军团菌 样品酸处理：对采样后的吸取液原液各1mL 分别加入盐酸氯化钾溶液充分混合，调节pH 至2.2，放置5min ； 酸处理的两种样品中，分别加入1mol/L 氢氧化钾溶液，中和至pH 为6.9，各取悬液0.2~0.3mL ，分别接种GVPC 平板；将平板置于CO2浓度5%，36℃±1℃CO2培养箱中孵育10d ；挑取可疑菌落接种到BCYE 琼脂平板和L -半胱氨酸缺失BCYE 平板，36℃±1℃，培养2d 。进行生化鉴定和血清学分型。
一、常规试验及报告药物的更新 CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。 注：a A组：常规测试并报告的药物。b B组：常规测试，但选择性报告的药物。c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。 二、药敏折点的相关更新 2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为
1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。 新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。同时也删除了美洛西林和替卡西林对厌氧菌的折点。
三、常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法鉴定抗菌药物的敏感和耐药 M100S（第26版）增加了常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法的说明，见表3～7。 1.常规药敏试验：用于临床常规检测的纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法。 2.补充（非常规）药敏试验：通过常规纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法以外的方法检测某种或某类药物的敏感性或耐药性，且该方法无需额外试验确证药物的敏感性或耐药性。 3.初筛药敏试验：结果用于预测，需要额外的试验确证药物的敏感性或耐药性。 4.替代药物检测法：当目标抗菌药物的药敏无法检测或替代药物的药敏操作优于目标抗菌药物时，该药物可替代目标抗菌药物进行药敏试验。 5.等效药物检测法：可预测与其密切相关的同类药物的药敏结果，并通过减少多种密切相关药物的药敏检测数量以提高检测效率。
SN/T 1897-2007食品中菌落总数的测定也可以用于与食品接触的设备表面的。附录A。 另有自定的 例一： 物体表面采样及检查方法 采样面积 被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。 采样方法 用5×5cm2的标准灭菌规格板；放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次；并随之转动棉拭于。连续采样1～4个规格板面积；剪去手接触部分，将棉拭于放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。培养（略） 例二： 空气及与食品接触面微生物检验方法、检验标准 1、目的： 检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。 2、参照标准： 中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－1995、《HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T 18204.1－2000、中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、出入境检验检疫局二000四年《出入食品微生物检验培训教材》中《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》、日本东京冷冻食品检验方法。 3、采样与检测方法： 3.1空气的采样与测试方法 3.1.1样品采集： (1)取样频率： a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行采样，以便了解车间卫生清扫消毒情况。 b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。 c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。 d)实验性新产品，按客户规定频率采样检验。 e)正常生产状态的采样，每周一次。 （2）采样方法 在动态下进行，室内面积不超过30 m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1 m；室内面积超过30 m2，设东、西、南、北、中五点，周围4点距墙1 m。采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点(约桌面高度)，并避开空调、门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5 min。采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h。 3.1.2菌落培养： （1）在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置37℃±1℃培养24 h，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。 （2）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，细菌总数于37℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。 （3）菌落计算： a) 记录平均菌落数，用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不可遗漏。 b) 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2 个或2个以上菌落计数。 3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法：
微生物基础知识 1、微生物概述 （1）定义：生物界中存在的一群形体微小的生物。它的大小通常以微米来表示。 （2）范围：细菌、霉菌、酵母菌、放线菌、支原体、病毒等。（3）特点： ①形体微小、结构简单、生长繁殖快、对物质有强烈的转化作用； ②种类繁多； ③易引起变异； ④数量大、分布广、环境适应性强； （4）与人类的生活密切相关。 2、微生物的分类 微生物可分为八大类： 真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌 细菌：肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌 放线菌： 支原体：肺炎支原体 衣原体：沙眼 立克次体：斑疹伤寒 螺旋体：梅毒 病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。
（1）按其结构、化学组成可分为： ①原核类：仅有原始核质，无核仁和核膜，细胞器很不完善。如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体； ②真核类：细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌），原生动物，藻类： ③非细胞类：体积微小，能通过除尘过滤器。如病毒和朊病毒。（2）按其致病性可分为： ①病原性微生物：有致病性； ②非病原性微生物：无致病性； 3、微生物的五大共性 （1）体积小，面积大 （2）吸收多，转化快 （3）生长旺，繁殖快 （4）适应强，易变异 （5）分布广，种类多 4、影响微生物生长的因素 （1）温度：在各种影响微生物生长繁殖的因素中，温度起着最重要的作用，每种微生物都一个最适宜的生长温度，在这种温度下，增代时间最短。一般来讲，高温能杀死微生物，低温可抑制微生物生长；（2）PH值：酸碱环境对微生物的影响；
（3）氧气：真空环境可抑制需氧菌的生长； （4）光线； （5）盐类； （6）水分活性。 5、常见污染药物制剂的微生物 （1）葡萄球菌：可引起局部感染 （2）大肠杆菌：胆道和尿道感染 （3）绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎 （4）枯草杆菌：结膜炎 （5）酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸 （6）霉菌：是制剂霉坏，酸败变质 6、洁净车间内微生物在哪里？ （1）空气 （2）水 （3）人员 （4）器具 灰尘-----“微生物的飞行器” 微生物不是凭空存在的，99%的微生物都附在颗粒上。控制空气中的微粒数，就是控制了微生物数量。 灰尘、微粒具有沉降和粘附的趋势，所以同一区域内，地面是微
2016年CLSI-M100S(第26版)主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读 张雅薇王辉（通讯作者） 北京大学人民医院检验科 此文发表在《中华检验医学杂志》 2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。CLSI制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。作为CLSI 批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016 年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。 一、常规试验及报告药物的更新 CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。b B组：常规测试，但选择性报告的药物。c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄 食单胞菌）。 二、药敏折点的相关更新 2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，
空气、食品接触面微生物检验方法、检验标准 1、目的： 检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。 2、参照标准： 中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－1995、《HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T 18204.1－2000、中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、出入境检验检疫局二000四年《出入食品微生物检验培训教材》中《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》、日本东京冷冻食品检验方法。 3、采样与检测方法： 3.1空气的采样与测试方法 3.1.1样品采集： (1)取样频率： a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行采样，以便了解车间卫生清扫消毒情况。 b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。 c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。
d)实验性新产品，按客户规定频率采样检验。 e)正常生产状态的采样，每周一次。 （2）采样方法 在动态下进行，室内面积不超过30 m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1 m；室内面积超过30 m2，设东、西、南、北、中五点，周围4点距墙1 m。采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点(约桌面高度)，并避开空调、门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5 min。采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h。 3.1.2菌落培养： （1）在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置37℃±1℃培养24 h，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。 （2）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，细菌总数于37℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。 （3）菌落计算： a) 记录平均菌落数，用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或 在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不可遗漏。 b) 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2 个或2 个以上菌落计数。 3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法： 3.2.1样品采集：
摘要： 微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相
关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法： 可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进