组织病理学技术 组织病理学技术 一. 实验综述 组织病理学切片技术是融解剖学、组织胚胎学及技术、病理学及技术和临床于一体的综合性课程。是一门新兴的学科。在当今不断发展、变革的社会中，在学科相互融合，知识相互渗透，技术不断发展、概念不断更新的时代，在时代要求综合素质人才辈出的今天，组织病理学切片技术的兴起尤为必要和重要。主要任务是：使学生获得和掌握学会观察人体重要器官的解剖学特征、组织学结构、病理学变化并联系相关功能，从而在形态上观察、机能上分析、综合上判断和科学上研究疾病。同时联系病变器官的代谢和机能的改变，探讨疾病的病因、发病机制以及病理变化与临床表现的内在联系和相互的关系。为由基础走向临床打下坚实的基础。 二. 实验目的 1. 掌握病理组织切片的基本制作过程步骤 2. 掌握病变器官的代谢和机能的改变 3. 明白病理组织切片制作过程中的注意事项 4. 了解病理切片的制作程序及仪器的操作和注意事项 二.实验材料 1. 实验材料：手术盘、镊子、手术刀、石蜡、小鼠病理组织、纱布、烧杯、脱水机、塑料包埋盒、水浴锅、切片机、染色机、载玻片、盖玻片、铅笔、标签 2. 实验试剂：福尔马林、酒精（50% 55% 70% 75% 80% 85% 95% 无水浓度）、二甲苯、苏木素、盐酸酒精、伊红染液、树胶 四.实验步骤 （一）取材 从尸体解剖材料或临床手术切除的待检材料上选取供作切片标本的病理组织切块，称为取材。 1. 取材要全面具有代表性，能显示病变的发展过程。为此要选取病变显著的区域和可疑 灶，在统一组织块中最好包括病灶及其周围的健康组织，并应包含该器官的主要结构部分。较大而重要的病变可从病灶中心到外周的不同部位取材，以反映病变各阶段的形态学变化。
组织病理切片以及HE染色 （一）实验原理：苏木素-伊红染色（hematoxylin-eosin staining ，HE染色）能较好地显示组织结构和细胞形态，可 用于观察、描述正常和病变组织的形态学，而且HE切片可较长时间保存，被称为常规染色方法。 （二）实验步骤： 一、制作切片 1、取材、固定：取小鼠肾脏组织适当大小，并且放入盛有固定液的小瓶中保存。 2、组织的脱水、透明、浸蜡与包埋 组织固定后还需经过脱水、透明、浸蜡等过程才能制成蜡块，进行石蜡切片。脱水是指用某些溶媒置换组织内水分的过程。组织脱水后，必须经过一种既能与酒精相混合又能溶解石蜡的溶剂，通过这种溶剂的媒介作用，使石蜡浸入组织块。在此过程中，因组织块中的水分被溶剂所取代，组织块变得透亮，因此称之为透明。组织染色后也要进行透明。最常用的透明剂为二甲苯，处理时间为30min左右。 组织经透明后在溶化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。用其他浸
透剂（如火棉胶、碳蜡和明胶等）渗入组织内部的过程 称为浸透或透入。为使石蜡充分渗入组织块中，常需经过3小时的浸渍，期间需更换3次石蜡。一般用于浸蜡的石蜡熔点为52- 56Co 组织块经过浸蜡或浸透，用包埋剂（石蜡、火棉胶、碳蜡和树脂等）包起的过程称包埋，包埋后便制成含组织的块。这种包埋块可使组织达到一定的硬度和韧度，有利于切成薄片。石蜡包埋是病理日常工作中最常用的包埋方法。用于包埋的石蜡熔点一般为60C左右。但在有些情况下，如某些酶染色时，则需采用低温石蜡包埋，以保存组织内酶的活性。 3、切片、制片 石蜡切片常用的切片机有轮转式切片机和平推式切片 机，以前者为多用。切片厚度一般为3-5卩m切片时先将组 织片平摊于一块玻璃上，迅速滴加30%的酒精水溶液使组织片完全展开，再移入40C恒温热水器中。也可直接将组织切片移入40C的恒温热水器中，待组织片完全展开后将其贴附于载玻片上，经56-60C烤片30-60min后即可进行染色。 二、HE染色 1. 二甲苯脱蜡2X 10 min ;
病理组织切片的制作过程 1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm 即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法：比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
组织病理切片的制作过程 1．取材组织取材的法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法：比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。 3．脱水透明标本经过固定和冲洗后，组织中含有较多的水分，必须将组织块的水分置换出来，这一过程叫做脱水。无论是用蜡切片，还是用火棉胶切片，都必须除去组织中所含水分，因含水组织与蜡、火棉胶等包埋材料不相容，常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。 脱水的步骤是：80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时，此过程可用脱水机自控完成。 丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂，但因其脱水能力很强，对组织有剧烈收缩作用，在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于蜡，还要经过一个能溶于蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水酸甲酯等。 4．浸蜡、包埋
实验四病理组织切片制作 一、实验目的 组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。通过实验，能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一，即石蜡包埋的组织切片法。 二、实验原理 根据病变及检查的要求，合理采集病料，经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片，在进行染色得到结果。固定是用化学药品把组织原来的结构保存下来，以便观察。脱水是除去组织中的水分，以利于透明和浸蜡。组织的透明是便于透蜡包埋。包埋的是使石蜡透入组织内部，把软组织变为适当硬度的包埋块，以便切成薄片。最后使用切片机，将包埋块中组织切成薄片。 三、主要仪器及试材 已固定好病料，石蜡，手术刀，手术剪，镊子，脱水框，染色缸，梯度脱水酒精和透明剂一套，烘箱，切片机，毛笔，玻片，蛋白甘油，染色架，酒精灯，三角架，大烧杯，温度计，火柴，切片刀，记号笔或铅笔。 四、实验方法与步骤。 （一）固定 采取的病理材料必须立即放入10％福尔马林固定液中。 （二）脱水 组织经固定后，尚含有多量水分，而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。必须先把组织中的水分除去。但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体，脱水剂常兼有硬化组织的作用。最常用的脱水剂为酒精、丙酮等。 1．酒精沸点78．4℃，为最常用的脱水剂。脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相混合。最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。脱水的程序为70％一80％一95％一100％。各级酒精2—4小时，视材料的大小、厚薄而定。100％酒精有硬化组织的作用，时间不宜太长，一般不超过3小时。脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织，脱水时间要适当延长。 2．丙酮沸点为56℃。脱水作用比乙醇强，但对组织块的收缩较大，主要用于快速脱水或固定兼脱水。脱水时间l一3小时左右。 （三）透明 透明对组织有脱酒精及透明两种作用。当组织中全部为透明剂占有时， 光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此种现象称为透明，具有这种作用的试剂称为透明剂。常用的透明剂有： 1．二甲苯是最常用的良好透明剂，不影响各种染色。二甲苯易溶于酒精，能溶解石蜡，也是封固剂，不吸收水，透明能力强，易使组织收缩、变脆，故组织块在二甲苯中不宜久留，特别对小动物组织材料必须严格控制好(各种器官的透明差异很大)，通常为半小时到1小时左右。 当二甲苯透明时必须持组织放在专用二甲苯皿器中，这样可减少透明时间，有利于组织透明彻底，在换组织块透明时候，所用的镊子等器具必须干燥，不得将水滴混入二甲苯中，因水滴易被组织吸收而影响透明程度，潮湿天气更应引起注意。2．冬青油（水杨酸甲酯）为无色油样液体，易溶于醇、醚及冰醋酸，难溶于水。透明速度较慢，数小时或数天。一般经无水乙醇脱水后再入冬青油。 （四）浸蜡（透蜡） 组织经脱水透明后要用石蜡等支持剂透入内部，并除去组织中的透明剂，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成切片。
1.7.1 修整组织 将手术切取的乳腺肿瘤切成一个平整面，各组织块不宜太大，以便固定剂穿透和组织脱水等操作，通常以10 mm×10 mm×3mm或5mm×5mm×3mm为宜。找到不同的部位切取2块，以备后用。 1.7.2 组织洗涤 组织经修整后，组织中的福尔马林等必须冲洗干净，尤其是含有重金属的物质存在。因为残留在组织中的福尔马林，有的不利于染色，有的产生沉淀或结晶影响观察，所以组织修整后应冲洗12h左右。 1.7.3 组织脱水 组织经洗涤后，组织中含有大量水分，由于水与石蜡不能互溶，所以必须将组织中的水分除去。 80%乙醇溶液：2h 95%乙醇溶液:1h 95%乙醇溶液:1h 100%乙醇溶液:30min 100%乙醇溶液:30min 1.7.4 组织透明 由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时，光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。 二甲苯Ⅰ：30min 二甲苯Ⅱ：10min 1.7.5 组织浸蜡 浸蜡的目的是除去组织中的透明剂（如二甲苯等），使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以便组织包埋。浸蜡时间根据组织的透蜡时间较长，需3h左右。浸蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在55℃左右，注意温度不要过高，以免组织发脆。 石蜡Ⅰ：1h
石蜡Ⅱ：1h。 石蜡Ⅲ：1h 1.7.6 组织包埋 将经过透蜡的组织连同熔化的石蜡，一起倒入容器内，然后立即投入冷水中，使其立刻凝固成蜡块的过程。包埋时，将纸盒放在温箱旁边，用镊子夹取组织平放于纸盒底部，，再用温镊子轻轻拨动组织，从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，沿壁倒入包埋用的纸盒中，速度要慢。待石蜡凝固（约30min）后放入冰箱保鲜层内以备后用。包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素，选择不同熔点的石蜡，新的石蜡一般要熬顿几次，以免石蜡固定后有气泡，影响切片。用于包埋的石蜡的熔点在50~60℃之间。 1.7.7 组织切片 （1）从冰箱里拿出蜡块，进行修快 （2）将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。 （3）将切片刀固定在刀夹上，刀口向上。 （4）摇动推动螺旋，使石蜡块与刀口贴近，但不可超过刀口。 （5）调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约成15度左右。 （6）调整厚度调节器到所需的切片厚度，先调约为25um，待切平后改为5um。 （7）一切调整好后方可以开始切片。此时右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度不可太急，通常以40-60r/min。 （8）切成的蜡带到10-20cm长时，右手用另一支毛笔轻轻地将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上，靠刀面的一面较光滑，朝下，较皱的一面朝上。 （9）感觉效果较好的蜡片一小段，用单面刀片切取，再放入约43℃的水浴锅中展片，观察切片是否良好。 （10）切片工作结束后，应将切片刀取下用氯仿擦去刀上沾着的石蜡，把切片机擦拭干净妥为保存。 1.7.8 贴片
病理组织切片的制作 卢文丽吴中华方肇勤 （2007/01/04） 一、器材（按一小组，约4-6人） 眼科镊：直无勾10cm 、弯无勾10cm各5把； 组织镊；12.5cm 2把； 眼科剪：直尖10cm 4把； 解剖剪：cr/14，4把； 普通双面刀片：10片/盒×1盒； 染色架：5个； 染色缸：1000ml，14-15个； 切片盒：50片/盒×3盒或100片/盒×2盒； 37度、60度恒温箱：各1个； 磨砂载玻片：50片/盒×3盒； 盖玻片：100片/盒×2盒； 广口瓶：30ml或60ml×20个； 滴管及配套吸头：4个； 玻璃漏斗：φ90 3个；玻璃搅棒：2支 普通粗孔大张滤纸：20张； φ90mm玻璃培养皿：4个； 中号普通毛笔：2支； 烧杯：500ml 、1000ml 各1个； 量筒：100ml、500 ml、1000 ml各1个； 组织切片机及配套刀片：4台； 摊片用水浴锅：2台； 生物切片石蜡：5盒，熔点：56-58℃； 电子天平：1台； 酒精灯：150ml，4台； 脱水篮：1-2个； 打火机、标签纸、铅笔各一，卷筒纸、乳胶手套、口罩、医用纱布足量。 二．试剂 苦味酸（2.4.6-三硝基苯酚）：30g/瓶×1瓶； 37%~40%福尔马林液：500ml/瓶×1瓶； 冰醋酸：AR，500ml/瓶×1瓶； 无水乙醇：AR，500ml/瓶×10瓶； 二甲苯：AR，500ml/瓶×10瓶； hematoxylin苏木色素（苏木精）：10g/瓶×1瓶； 酸性品红（曙红丫水溶）：25g/瓶×1瓶； 碘酸钠：AR，500g/瓶×1瓶；柠檬酸：AR，500g/瓶×1瓶; 水合氯醛：AR，250g/瓶×1瓶;铵矾（ALNH4(SO4)2·12H2O）或钾矾（ALK(SO4)2·12H2O）：500g/瓶×1瓶 蛋白甘油（甘油/鸡蛋清=1/1）：50ml 中性树胶：100g/瓶×2瓶。若中性树胶过于粘稠，可与二甲苯按7/3的比例稀释。 蒸馏水：5000ml
实验一动物组织的观察 一、目的要求 了解动物体四类基本组织的形态结构及其功能。 二、实验器具与材料 显微镜、洗耳球，四种组织的玻片标本（小肠、食道、膀胱、甲状腺、皮肤、心肌、骨骼肌、肌腱、疏松结缔组织、软骨、硬骨、脊髓、小脑皮质、大脑皮质等组织切片）。 实验二胚层、体腔和系统的演化的观察 一、目的要求 通过文昌鱼早期胚胎发育的模型和玻片标本观察，了解多细胞动物胚胎发育的一般过程及发育各期的形态结构特点，加深多细胞动物起源于单细胞的认识。 二、实验器具与材料 显微镜，擦镜纸，洗耳球，文昌鱼早期胚胎发育各期----卵裂、囊胚期、原肠胚、神经胚期、2-8体节期的模型和玻片标本。 实验三原生动物的观察 一、目的要求 通过眼虫、变形虫及其他鞭毛虫、肉足虫的观察，了解鞭毛虫纲与肉足虫纲的主要特点，并认识一些有经济价值或常见的种类。对水螅形态结构及生命活动的观察，了解腔肠动物门的主要特征，认识腔肠动物在动物进化过程中的重要地位。通过对水螅形态结构及生命活动的观察，了解腔肠动物门的主要特征，认识腔肠动物在动物进化过程中的重要地位。 学习对运动活泼的微型动物的观察和实验方法。通过实验，进一步认识和理解原生动物的单个细胞是一个完整的能独立生活的动物有机体。认识原生质具有应激性；了解草履虫的科学研究价值。 二、内容 1．眼虫和变形虫的观察。 2．水螅的活体观察与实验。 3．水螅网状神经的显示。 4．水螅玻片标本的观察。 5．草履虫活体观察和实验。 6．生殖装片的观察。
三、材料和用品 （一）材料 利什曼原虫、锥虫、团藻、痢疾内变形虫、表壳虫、砂壳虫、有孔虫和放射虫。活水螅、活水蚤、水螅带芽整体装片、水螅横切面和纵切面玻片标本、水螅过精巢和过卵巢横切面玻片标本。大草履虫培养液，草履虫横分裂及接合生殖的装片。 （二）用品 体视显微镜、显微镜、放大镜、解剖针、镊子、吸管、培养缸、培养皿、载玻片、盖玻片、滤纸片、稻草。1%醋酸、0.03%谷胱甘肽、琼脂、蛋白胨、蛋黄、蛋白、硫酸镁或乌来糖、0.01%亚甲基蓝。秒表、、漏斗架、试管架、毛细滴管、玻棒、烧杯、量筒、1 mL移液管（吸管）、漏斗、滤纸、精密pH试纸（pH值范围0.5~5.0和5.0~7.0）、胃病炎纸、脱脂棉、橡皮吸球。蓝黑墨水、冰醋酸、5%醋酸、洋红粉末（天然品、非化学合成）、1%氯化钠溶液、蒸馏水。 实验四无脊椎动物（河蚌、蚯蚓、蝗虫）的解剖观察 一、目的与内容 （一）目的 1.通过环毛蚓的解剖与观察，了解环节动物门的基本特征。 2.通过蛔虫和环毛蚓的比较，了解环节动物的进步性特性，及动物形态、器官系统结构与机能逐渐演化发展和完善的进化过程。 3．学习解剖观察河蚌内部器官的技术。 4．通过对河蚌外形及内部结构的观察，了解软体动物门的一般特征及其与生活方式相适应的特征。 5．了解变温动物心搏频率与温度的关系。 6.通过对棉蝗的外形观察及内部解剖，了解昆虫的一般特征。 （二）内容 1.环毛蚓的外形观察，内部解剖和横切面玻片标本的观察。 2．蛔虫和环毛蚓外形和内部结构的比较。 3．河蚌活体观察。 4．河蚌外形及内部解剖。 5．心脏搏动与水温的关系。 6．河蚌幼体的观察。 7.棉蝗的外形观察与内部解剖。 二、材料与用品 （一）材料 环毛蚓浸制标本和横切面玻片标本；活河蚌；棉蝗的浸制标本。 （二）用品
组织病理切片的制作流程 1．取材 组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
病理组织切片制作过程详解 -森贝伽生物实验代做中心 公司中心实验室建设有病理学，分子生物学，细胞生物学，免疫学，蛋白质组学，实验动物模型构建，生物芯片，生物信息学等实验技术服务平台。此外，还提供技术咨询培训，课题合作设计与申报，论文翻译润色等实验技术服务。 1．取材 取材的好坏，直接影响切片的质量。取材时，首先要有一把锋利的取材刀，在切割组织时要避免取材刀来回拖拉，切取的组织块厚薄要均匀，一般厚度以0.2 ～0.3cm 为适，较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点，而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些；淋巴结应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织，如碰到不可避免的钙化组织，一定要非常小心。在切取纤维组织、肌肉组织、胃肠道时，应注意纤维及肌肉的走向，取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。 (1）材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2）组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm ×2.0cm ×0.2cm ，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm 即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm ，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 （3）勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 （4）规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 （5）选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 南京森贝伽生物科技有限公司 实验技术服务，代做实验
大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色 步骤如下： （一）固定与修块 取组织块放入Bouin氏液中，组织块的直径应小于7mm。6小时左右后用双面 刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。 （二）脱水与透明 1. 75%乙醇50分钟 2. 85%乙醇50分钟 3. 95%乙醇(I) 30分钟 4. 95%乙醇(II) 30分钟 5. 100%乙醇(I) 30分钟 6. 100%乙醇(II) 30分钟 7 1/2二甲苯（乙醇与二甲苯等体积）20分钟 &二甲苯（I）20分钟 9 .二甲苯（II）10分钟（可依据透明效果而定） 若脱水不好，二甲苯溶液颜色会变混浊。在每一步骤之后，要充分滤干组织块，一般用筒纸吸干组织块上的液体，以免影响其他液体的浓度，但也要防止组织块干燥。全过程约需要5h。（三）浸蜡、包埋与修蜡块 1.浸蜡：将60C恒温箱打开，使石蜡充分溶解，待脱水与透明结束后，将组织块转入石蜡里，放置于60 C恒温箱120分钟。 2 .包埋：将60 C的石蜡倒入纸盒内，然后用小镊子将各组织块按一定的顺序排列好，使切面朝下。不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中，以保证切片和染色条件相同。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固，可将纸盒置于一玻璃板 上（或大培养皿内），然后将玻璃板置于80-90 C左右热水上，包埋时蜡盒底部要放平，做蜡块的蜡要反复冻融较好。 3 .修蜡块：待纸盒内蜡凝固后，用刀片将其修成梯形，组织块与蜡块边缘之间的距离不得小于2mm。 （四）切片 在载玻片上擦少量甘油蛋白。可滴半滴甘油蛋白于载玻片上，用手指充分抹 匀，呈半干状为佳。切片厚约4-8卩m，将切片在55C左右水浴中展开，展开程度 以带黄颜色的组织完全摊平为准。用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片，放入37C烘箱中过夜。每个组织块捞片2张。过夜后，将载玻片置于玻片架上， 进行下面的实验。 （五）脱蜡、染色与脱水 倾斜玻片架，将玻片架和载玻片下缘的试剂用筒纸吸干，减轻对其他试剂浓 度的影响。全过程约需要60分钟。 1.脱蜡 （1）二甲苯（I）15分钟 （2）二甲苯（II）15分钟 （3）100%乙醇2分钟 （4）95%乙醇（I）1分钟 （5）95%乙醇（II）1分钟 （6）蒸馏水浸洗1分钟 2 .染色
实验1 动物细胞与组织观察 【目的与要求】 1、了解动物细胞、基本组织的结构特点，理解动物体结构与机能的关系。 2、进一步掌握显微镜的正确使用方法。 【材料与用品】 1、材料：神经元细胞涂片、平滑肌切片、人血涂片、单层立方上皮切片、单层柱状上 皮切片。 2、器材：显微镜、擦镜纸。 3、试剂：二甲苯、香柏油。 【操作与观察】 1、人血凃片标本 先在低倍镜找到血细胞，再转高倍镜，最后换油镜观察，辨识各种血细胞和血小板 ①红细胞数量最多，小而圆，无细胞核，其申央部分着色较周围少。 ②白细胞在低倍镜下慢慢移动标本，寻找白细胞。白细胞数量比红细胞少，但胞体大，细胞核明显，一般染成兰紫色，极易与红细胞区别开。发现白细胞后转高倍镜观察。 嗜中性粒细胞数量较多，胞质淡红色，并充满细小分布均匀的淡紫红色的嗜中性颗粒。核紫色，通常分裂成2－5叶，每叶间有细丝相连。如核呈杆状，则为中性粒细胞的幼稚型。 嗜酸性粒细胞数量较少，较中性粒细胞略大，胞质中充满桔红色的大小一致的粗大圆形嗜酸性颗粒。核紫色，通常分为两叶。 嗜碱性粒细胞数量极少，在一般血涂片上不易找到。细胞体积比上述两种白细胞稍小，胞质中分散着许多大小不等的深紫蓝色嗜碱性颗粒。核形状不定，圆形或分叶，也染成紫色，但染色略浅，一般都被颗粒遮盖，形状不清。 淋巴细胞数量较多，可见中、小型淋巴细胞。小淋巴细胞一般略大于红细胞，核球形，占细胞体积的大部分，染成深蓝紫色。胞质极少，只有一薄层，围在核的周围，染成淡蓝色。中淋巴细胞比红细胞大，胞质较小淋巴细胞的稍多，着色较浅。有的细胞质内可见少数细小的紫红色嗜天青颗粒。核圆形或卵圆形，位于细胞中部，也染成深蓝紫色。 单核细胞数量少，是血液有形成分中最大的细胞。胞质淡灰蓝色，有的其中可见分散的细小的嗜天青颗粒。核多呈肾形或马蹄形，常在细胞的一侧，着色比淋巴细胞核浅。 ③血小板 为形状不规则的细胞小体，其周围部分为浅蓝色，中央有细小的紫色颗粒，常聚集成群，分布于红细胞之间。高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒，在油镜下才能看到颗粒周围的浅蓝色胞质部分。 2、平滑肌切片的观察： 低倍镜下可见平滑肌细胞呈长棱形，彼此交错排列。细胞核呈棒状或椭圆形，常位于肌细胞中央。 3、神经元细胞涂片的观察： 神经元细胞形态多种多样，但都分为胞体和突起两部分。胞体周围的突起（轴突和树突）长短不一，细胞核圆形，染色较深。 （1）轴突：形态细长，其表面光滑，粗细均匀，分支较少，行走一定距离后，才以直
光学显微镜的使用及动物组织切片观察 丁曦钰 141140015 一、实验目的 1、了解显微镜的工作原理，学习光学显微镜的使用。 2、基本组织切片的观察与记录。 3、实验报告的书写要求。 4、生物量级、生物系统及生物类别。 二、实验原理 1.光学显微镜的工作原理：标本经物镜和管镜放大后，形成倒立的实像： 实像经目镜再次放大后，形成放大的虚像。 2.光学显微镜的使用：先将低倍物镜的位置固定好，然后放置标本片，转 动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本，再用细调对准焦距进行观察。除少数显微镜外，聚光镜的位置都要放在最高点。如果视野中出现外界物体的图像，可以将聚光镜稍微下降，图像就可以消失。 聚光镜下的虹彩光圈应调到适当的大小，以控制射入光线的量，整理增加明暗差。 3.生物量级：残基（氨基酸，核苷酸，脂肪酸，甘油）→生物大分子→亚 细胞结构（subcellular structure）→细胞器→细胞→组织（器官）→系统→种群→群落→生态系统→生物圈 物理量级：基本粒子（夸克，轻子）→电子（自旋反平行）→质子→原子→分子（物体：生物量级）→天体→星系→星云→宇宙→宇宙膜 4.各胚层细胞发育走向 1）外胚层：神经系统（脑、脊髓、脊神经、自主神经、视网膜、耳、肾上腺髓质），表皮（毛发、汗腺、油脂腺、乳腺、晶体、口腔黏膜）2）中胚层：肌肉、骨骼、血液、真皮、心脏血管系统、泌尿生殖系统以及结缔组织（固有结缔组织、骨与软骨、血液） 3）胚层：消化系统、呼吸系统的上皮和有关腺体（胰，肝）、膀胱上皮 5．分辨力：能分辨最小间隔的能力，单位距离（人眼距目标物25cm处） R=Kλ nsin(a 2) K是透镜品质，光镜在0.61~1.0之间，λ光波波长或电子波长，n是光镜介质折射率，a是镜口角（样本对物镜的镜口角，一般<180度），sina/2<1。 三、动物与器材 1.实验材料：13组织标本 2.实验设备：光学显微镜（生物显微镜） 四、方法与步骤 1.实验分组 2.实验原理讲解 3.实验报告要求介绍 4.使用显微镜进行操作观察 1）安放显微镜
组织病理切片的制作过 程 标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]
组织病理切片的制作过程 1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
病理实验切片解释 1.肾细胞水肿： 标本为肾脏，先用低倍镜找到肾小球，并在其附近认出近曲小管和远曲小管，重点看近曲小管。 可见近曲小管上皮细胞肿胀，向管腔突出，使管腔缩小，缘参差不齐，再用高倍镜观察，可见曲管上皮细胞浆出现许多红染细小颗粒。 其大小一致，分布均匀。 细胞核正常或浅染 2.肝脂肪变性： 切片为肝组织，低倍镜下见有些肝细胞浆有大小不等的圆形空泡（脂肪滴在制片过程中被二甲苯溶液留下空泡）空泡大者，细胞核被挤到一侧。 4.淋巴结的干酪样坏死： 低倍镜下，可见组织边缘仍有残留的淋巴组织和增厚的被膜，但中央部分结构完全消失，呈一片红染颗粒，细胞核完全消失，坏死区周围可见一些结节状病灶。 5.肉芽组织： 标本取自皮肤溃疡面的肉芽组织有的切片标本一侧仍保留有少许表皮（有的无），大部分表皮均坏死脱落形成溃疡。 溃疡表面附有炎性渗出物，其下为肉芽组织。 肉芽组织由与表皮垂直的新生毛细血管，散在纤维母细胞和数量不等的炎症细胞组成。 新生毛细血管呈裂隙状，增生的皮细胞以双行队列排列，腔大部
分无血细胞，纤维母细胞呈卵圆形、星型或梭形，细胞境界尚清楚，胞浆弱碱性，核卵圆。 炎症细胞以中性白细胞为主，为可见少数淋巴细胞、巨噬细胞等。 其下层肉芽组织出现纤维化。 6.肺淤血： 标本为肺组织，低倍镜肺泡壁明显增宽，其毛细血管高度扩，腔充满红细胞，肺小静脉也扩充血，少数肺泡腔正常，多数含有红细胞及淡红色的均质水肿液，有的肺泡腔可见成堆棕黄色的巨噬细胞也称心衰细胞。 7.肝淤血： 标本为肝组织，可见中央静脉扩充血，其周围肝窦也明显扩，其充满红细胞，该处肝细胞有的体积变小以致消失，有的胞浆可见小空泡，小叶周边肝窦和肝细胞上述改变程度减轻。 8.静脉血栓： 标本为静脉，管腔闭塞。 镜下可见血管腔有红色，粗颗粒状的梁，层状或条纹状排列。 梁间充满纤维素网。 网眼中有大量红细胞和少数白细胞，有的区域红细胞已溶解。 血栓与血管壁相连处可见新生毛细血管和纤维母细胞，其间有少数炎症细胞和含铁血黄素细胞。 9.脾贫血性梗死： 9.脾贫血性梗死：
病理组织切片技术是病理实验室最基本的方法病理组织切片技术是病理实验室最基本的方法，是病理学的一项极有使用价值 的专业技能。它包括组织固定、脱水、透明、包埋、切片、漂片、烤片、脱蜡、染色、脱水、透明和封固等程序。HE 染色是既基本又十分重要的工作，HE 染色的好 坏直接影响病理医生的正确诊断，而HE 染色质量好坏与HE 制片的每一步骤关系 都十分密切。只要某一步骤出了问题都直接影响下一步工作，时常会出现个别片子 色调不正、颜色对比不协调、染色不匀、模糊不清等现象，使切片的质量和诊断的 准确性受到影响。本文作者在实验过程中就制作优良动物病理切片的体会阐述如下: 一、取材要及时、规范 (一)要取最新鲜的材料。由于各器官组织坏死变化很快，所以取材要求迅速。 取材时要用锋利的刀片或剪刀，勿用镊子对组织加以压迫，以免组织破裂和变形。 (二)选取组织块的大小、厚薄亦应力求适度。过大、过厚的组织，固定液不宜 渗透，亦可造成固定不佳，过小、过薄的组织又可能在固定或脱水的过程中发生扭 曲变形情况[1]。 (三)应有代表性，能够反映出组织的基本结构，如肝要有肝小叶;肾要有皮质 和髓质;肺要有支气管等。另外，要采取病变部位和健康部位交叉处的组织，这样 才可以通过健康部位的对照，清楚地看到各种病理变化。 二、固定要充分 (一)一般固定液，都以新配为好，配好后应贮存在阴凉处，不宜放在日光下， 以免引起化学变化，失去固定作用。笔者常用的固定液是10,福尔马林溶液。 (二)应及时固定，这样可保持细胞与生活时的形态相似，防止组织自溶而产生 死后变化。将取下的材料立即放在固定液中固定24小时以上，固定液必须充足， 一般为材料块的20~30倍，有些水分多的材料，中间应更换1~2次新液。目的是防
动物组织学与胚胎学复习题及答案 第一章组织学绪论 一、单项选择题 1．光镜下观察组织石蜡包理切片厚度一般是 A.100um B.50um C.5-10um D.1um左右 E.0.1-0.5um 2．透射电镜下观察的组织切片厚度一般是 A.50-80nm B.5-10nm C.1-2nm D.100-500nm E.1um左右 3．组织异染性的含义是 A.染色快速 B.染色困难 C.染色鲜明 D.染色需加还原剂 E.以上都不对 4．观察体外培养细胞首选的显微镜是 A.一般光镜 B.倒置相关显微镜 C.相差显微镜 D.暗视野显微镜 E.偏光显微镜 5．PAS反应是检测组织的 A.核酸 B.脂类 C.蛋白水解酶 D.多糖类 E.抗原 6．细胞的表现型是指 A.细胞结构和功能的特点 B.细胞分布状况 C.细胞功能静止和活动的变化 D.细胞形态结构的变化 E.细胞增殖状态 7．光镜组织切片和电镜组织切片 A.均为超薄切片 B.均用化学染料染色 C.均可制冷冻切片 D.均为固定组织 E.均可摄彩色照片 8．扫描电镜是主要用于观察 A.生物膜部结构 B.细胞器的部结构 C.组织和细胞的表面结构 D.细胞的多糖 E.细胞核的结构 9．组织的分类是根据 A.细胞的数量和密度 B.细胞排列的型式 C.细胞的代谢特点 D.细胞间质的组成 E.以上均不对 10．扫描电镜术不同于透射电镜术的一点是
A.组织勿需固定 B.勿需制备超薄切片 C.是以激光扫描标本 D.不在荧光屏上显像 E.可观察活细胞 二、多项选择题 1．冷冻切片的特点是 A.用树脂快速包埋 B.组织块可不固定 C.制片较迅速 D.细胞酶活性保存较好 E.可制厚0.1um的切片 2．组织固定的意义是 A.使蛋白质迅速溶解 B.防止细胞自溶 C.使组织膨胀 D.使组织坚硬 E.防止组织腐败 3．组织化学术可检测组织的 A.抗原 B.酶 C.脂类 D.糖类 E.核酸 4．现代组织学技术可显示和研究 A.细胞的受体分布 B.细胞Ca2+等的含量测定 C.细胞各种蛋白质的定位和定量 D.细胞某种蛋白质的定位和定量 E.细胞运动,分泌,吞噬等动态过程 5．透射电镜术中的组织块和组织切片 A.组织块大小与光镜术的相近 B.组织块用戊二醛,四氧化锇等固定 C.组织块石蜡包埋 D.切片用重金属电子染色 E.切片置在玻片上于电镜下观察 6．组织培养术 A.取新鲜组织和细胞 B.标本以高温灭菌 C.溶液和用具均需灭菌 D.标本培养于近似体的条件下 E.可直接观察记录活细胞的行为 三、填空题 1．HE的染色法的染料是_______和_______,组织切片中与前者亲和力强的着色结构称_______,与后者亲和力强的着色结构称_______,与两者亲和力均不强者称_______。 2．组织块在包埋前需先经_______，常用的包埋剂是_______、_______和_______。 3．细胞间质是由_______产生的，包括_______和_______。 4．在光学显微镜下观察的固定标本除组织切片外，还有_______、_______和_______。5．银染法中若组织结构直接使硝酸银还原而显示的称为_______，若需加还原剂方能显示的组织结构称_______。 6．光学显微镜的最大分辨率是_______，光镜下所见的结构称为_______；电子显微镜的分辨率可达_______，电镜下所见的结构称_______。
肝脂肪变性 诊断依据： 1.部分肝细胞胞质内出现大小不等的圆形空泡； 2.某些空泡较大，将细胞核挤压变扁且位于细胞边缘，酷似脂肪细胞； 3.细胞核的结构仍属正常。 肾贫血性梗死 诊断依据： 1.梗死区的肾小球、肾小管轮廓隐约可辨，梗死区中心肾小球的细胞核均已溶解消失； 2.近梗死区边缘尚可见浓染、缩小的细胞核(核固缩)； 3.梗死部分呈楔形； 4.梗死区与非梗死区交界处，有大量白细胞浸润及充血现象。 肉芽组织 诊断依据： 1.镜下可见大量新生毛细血管，内皮细胞较大，细胞核着色较淡，管腔大小不一，常含有红细胞，血管多向表面呈垂直方向走行； 2.新生毛细血管周围有较多的成纤维细胞，呈星形或梭形，细胞核为椭圆形、淡染； 3.尚可见一些巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润； 4.表面覆盖少量的纤维素，其中混有少量中性粒细胞。 支气管鳞状上皮化生 诊断依据： 1.部分支气管粘膜被覆的假复层纤毛柱状上皮为复层鳞状上皮所取代，靠近基底膜有柱状多角形细胞，靠近腔面有鳞状上皮； 2.支气管壁有慢性炎性细胞浸润。 急性肺淤血水肿 诊断依据： 1.肺泡间隔的毛细血管以及肺间质内的小静脉均扩张和充盈血液； 2.部分肺泡腔内有均匀红染的水肿液及少量巨噬细胞； 3.高倍镜下，肺泡间隔毛细血管横断面上可见数个并列的红细胞，肺泡间隔因而增宽。 慢性肺淤血 诊断依据： 1.肺泡间隔结缔组织增生，肺泡间隔明显增宽； 2.某些肺泡腔内有多少不等的“心衰竭细胞”，其胞质内含粗大的黄褐色含铁血黄素颗粒； 3.有少量炎性细胞浸润。 慢性肝淤血 诊断依据： 1.肝小叶中央有红色淤血区，淤血区内中央静脉及肝窦均显著扩张，充盈血液，在相邻肝小叶淤血区之间有互相连缀的淤血带； 2.肝细胞索离断，部分肝细胞萎缩乃至消失； 3.淤血区及其附近的部分肝细胞胞质内出现空泡，为脂肪变性。 急性蜂窝织炎性阑尾炎 诊断依据： 1.阑尾组织管壁增厚，管腔变窄；
病理切片特点总结 瘢痕组织：（1）大量平行或交错分布的胶原纤维束（2）纤维素往往呈均质红染的玻璃样变（3）纤维细胞少，核细长深染，小血管稀少 1.肝水样变性：（1）细胞体积变大，肝窦变窄（2）胞浆透明淡染，甚至出现空 泡（3）空泡变性，严重时气球样变性（4）胞浆基质疏松，电子密度降低2.肝脂肪样变性：（1）肝细胞胞浆内可见大小不一的脂肪空泡，将核挤向一边 （2）肝窦变窄 3.肉芽组织：（1）有新生毛细血管平行排列（2）纤维母细胞分布于毛细血管之 间（3）炎性细胞浸润 4.肾浊肿：（1）细胞内可见粉染的颗粒状物（2）肾小管上皮细胞水样变性（3） 近端小管细胞肿胀，腔小甚至闭塞。 5.肺出血性梗死：（1），梗死灶呈凝固性坏死，肺泡轮廓保存（2）肺泡腔、小 支气管腔、肺间质充满红细胞（3）非梗死区呈淤血状态 6.肺弥漫性出血：（1）肺泡腔内有红细胞散在分布（2）有炎细胞浸润（3）间 质充血间质有大量红细胞 7.肝淤血：（1）血窦扩张，充满大量红细胞（2）脂肪变（3）肝细胞受压萎缩、 坏死或崩解 8.慢性肺淤血：（1）肺泡壁增厚纤维化，大量巨噬细胞渗出（2）肺泡间隔扩张， 红细胞充满肺泡间质（3）心力衰竭细胞 9.血栓机化：（1）肉芽组织取代血栓（2）新生毛细血管（2）纤维母细胞（4） 炎性细胞 10.宫颈息肉：（1）粘膜上皮、腺体和间质增生（2）炎性水肿伴慢性炎细胞浸润 （3）组织间毛细血管增生 11.浆细胞：（1）核染色质呈辐轮状（2）核在一侧（3）核周晕 12.巨噬细胞：（1）体积大而不规则（2）胞浆嗜酸性（3）核偏位（4）胞内有吞 噬的其他细胞 13.阑尾炎：（1）病变深达肌层浆膜，大量中性粒细胞浸润（2）肌层充血出血（3） 平滑肌断裂 14.嗜酸性粒细胞：（1）细胞质红染（2）细胞核呈分叶状 15.鳞癌：（1）癌细胞呈团状分布形成癌巢（2）癌细胞间可见细胞间桥，炎细胞 浸润（3）癌巢中间有角化珠 16.乳头状瘤：（1）表面形成乳头状突起（2）乳头表面覆盖鳞状上皮（3）基底 细胞排列整齐，基底膜完整（4）纤维脉管束 17.乳腺纤维腺瘤：（1）腺体及结缔组织增生（2）腺体被纤维结缔组织挤压呈裂 隙状（3）炎细胞浸润（4）间质通常较疏松，玻璃样变或钙化 18.腺癌：（1）癌细胞形成大小不等、形状不一、排列不规则的腺样结构、癌巢 （2）与正常腺体有共壁现象*（3）癌细胞有病理性核分裂象 19.海绵状血管瘤：（1）上皮细胞不连续（2）由扩张的海绵状血窦构成，充满红 细胞 20.淋巴结转移癌：（1）淋巴结内有癌巢（2）淋巴结不同程度破坏（3）癌细胞 有病理性核分裂象 21.髓样癌：（1）低分化腺癌多位于乳腺（2）癌巢呈片状，较多（3）间质纤维 结缔组织相对较少（4）癌细胞异型性明显，核分裂象多见 22.硬癌：（1）癌巢少（2）纤维组织多（3）有病理性分裂象（4）癌组织与正常