卫生微生物
1绪论
2微生物生态学
3卫生微生物学研究和检测方法
4消毒与灭菌
5实验室生物安全
7水微生物
8土壤微生物
9空气微生物
10食品微生物
11药品微生物
12化妆品微生物
13医疗与生活卫生用品微生物
15公共场所微生物
重点：
名词解释：
卫生微生物学sanitary microbiology :研究微生物与环境相互作用的规律，对人类健康的影响以及应对方略的科学
微生物生态学：研究微生物与生存环境，微生物群体之间相互关系相互作用的科学
生境habitat :微生物能够在其中生存并执行特定功能的微小环境
龛niche :物种在生态系统中的位置和作用
种群population :具有相似特性和生活在一定空间内的同种个体群
群落community :—定区域内或一定生境中各种微生物种群相互松散结合的一种结构和功能单位
指示微生物：常规卫生监测中，用来指示样品卫生状况及安全性的微生物
P4实验室：生物安全实验室等级最高的实验室
菌落总数：被检样品中单位重量，容积，表面积，体积内的能在某种培养基上经一定条件，一定时间培养后长出的菌落数量
大肠菌群：一群能在35-37C, 24小时内发酵乳糖产酸产气的，需氧或兼性厌氧的，革兰阴性的无芽孢杆菌
基因芯片：DNA芯片，一种将大量已知核酸片段有序地高密度地固定在同一载体上，通过杂交后对杂交信号的检测来测定未知序列的组成，含量及功能的技术
蛋白质芯片：将各种蛋白质有序地固定在载体上成为检测用的芯片，再用标记了特定荧光素的蛋白质或其他成分与芯片作用，清洗掉未能互补结合的成分，利用荧光扫描仪等通过荧光强度分析蛋白质间相互作用的关系，测定各种蛋白质功能。
免疫磁珠法：将微生物相应的抗体连接于磁珠，用磁分离技术分离和浓集待测微生物的方法。
消毒：杀灭或清除传播媒介上病原微生物，达到无害化的处理
灭菌：杀灭或清除传播媒介上一切微生物处理
灭菌保证水平：灭菌处理后单位产品上存活微生物的概率
疫源地消毒：对存在或曾经存在过传染源的场所进行的消毒
随时消毒：疫源地内有传染源存在时进行的消毒
终末消毒：传染源离开疫源地后进行的彻底消毒
医院消毒：杀灭或清除医院环境和物体上污染的病原微生物的过程
水体自净：天然水体受到污染后，在无人为处理的条件下，通过水体自身的净化能力得到净化的过程
污水处理：大量非天然污水排入自然水体后不能通过自净作用降解为无害，为保护人群健康和生态环境，讲水体进行无害化处理的过程
需氧处理法：水中的有机物在微生物群作用下，由大分子逐步降解，最终通过有氧呼吸生成二氧化碳和水
厌氧处理法：利用厌氧细菌在无氧条件下将有机物降解并最终还原成甲烷的处理
空气微生物气溶胶：以固体或液体微小颗粒分散于空气中的分散体系
水分活度值：溶液中水的蒸气分压与纯水蒸气压的比值
食品变败food spoilage :食品在以微生物为主的各种因素作用下，食品的成分被分解，破坏，失去或降低食用价值的一切变化
腐败：食品的蛋白质成分在厌氧条件下被微生物分解，产生以恶臭为主的变化
酸败：食品的脂肪成分被微生物分解成脂肪酸和甘油的变化
发酵：食品的碳水化合物成分被微生物分解成酸，醇和气体的变化
:以涂抹，喷洒或其他方法，作用在人体表面，达到清洁，护肤，美容等目的的 简答:
1对象多2来源多3标本中致病微生物的数量有限：指示微生物
4定量测定和分型鉴定：传染源,
途径和流行5遵循一定的标准
1数量大
2人或动物粪便污染样品中可以检出，未被污染样品无此菌
3外环境中稳定
4外环境中存活时间长
5抗氯性
6易检验
1对样品的卫生安全性做出评价时，难以检测样品中的每一种微生物
2分离鉴定致病微生物时间长，不能满足实际需要
3分离鉴定费用高，技术要求高
4受到检测量的影响，可能导致假阴性结果
4简述倾注平板和表面涂布计数法的优缺点
倾注平板计数法：10倍梯度准确稀释待测样品，准确将稀释样品加入平板，倾注适当种类和温度 的培养及培养规定的时间。步骤复杂但更为准确。
表面涂布法：可以使用不透明培养基对细菌技术；计数的菌落需再进行正式实验的采取表面涂布 法，便于挑取菌落；可避免因倾注熔化的热琼脂对待检菌的损伤；但计数结果偏差大。
血清学分型，噬菌体分型，细菌素分型，耐药谱分型，质粒图谱分型
化妆品cosmetic 化学工业品。
6样品浓缩的方法有哪些
沉淀法，过滤法，吸附法，免疫磁珠法
热力，紫外线(240-280nm,253.7nm )，电离辐射，微波，过滤作用
8物理消毒灭菌方法的主要灭菌机制及优点
优点：效果可靠，不残留有害物质
灭菌机制：利用各种物理因子对传播媒介进行处理，清除或杀灭传播媒介上微生物
9常用液体消毒剂有哪些含氯消毒剂，过氧化物类消毒剂，碘消毒剂，醇类消毒剂，醛类消毒剂，季铵盐类消毒剂，胍类消毒剂，酚类消毒剂
机制：1使微生物体内蛋白质变形或凝固2干扰微生物的酶系统和代谢3改变微生物细胞膜通透性4破坏微生物核酸优点：1广谱，对所有病原微生物都有杀灭效力2性质稳定，不易挥发，使用时间持久3有效浓度低，作用时间短，易溶于水4毒性低，无刺激性腐蚀性或引起过敏反应5与肥皂，酒精，血液等接触不降低或失去作用6用法简便，价格低廉
11简要说明水微生物检验过程中水样采集的注意事项
1采样瓶必须洗净，瓶口包扎进行灭菌，并保证不受污染
2米自来水水样时，先灼烧消毒，开水龙头5-10分钟后再米水样。米水量为瓶容量的80%
3收集含余氯水样时，需中和水样中的余氯，终止余氯的后续杀菌作用
4取江河等水样时，选择有代表性地点，距水面10-15cm取样
5记录水样名称，地点，时间，从速检验，采样到检验不应超过
2小时。
检测项目：菌落总数，大肠菌群，产气荚膜梭菌，土壤中的致病菌和病毒
指标：细菌总数，总大肠菌群，粪大肠菌群
意义：1细菌总数是评价水质清洁和净化效果的一项指标。细菌总数说明水质被有机物污染的程度，细菌总数增多说明水被污染
2总大肠菌群是评价水质的重要指标
3粪大肠菌群是判断水质是否被粪便污染的重要指标，根据水中大肠菌群的数目判断水源是否被粪便所污染，并间接推测水源受肠道病原菌污染的可能性。
经尘埃传播，经飞沫传播，经飞沫核传播
限制因子定律，耐受性定律，综合作用定律
适应性，变异性，选择性
互生，寄生，拮抗，捕食，竞争，共生
土壤，水体，空气，工农业产品，正常人体及动物体，极端环境 注意：土壤中微生物种类多数量大，是人类最丰富的菌种资源库 水体中的微生物是卫生评定的中心环节。
19WH0根据生物因子对人群的危害程度，将生物因子分为那几级 生物因子是实验室中操作的一切微生物和生物活性物质 4个等级：危险度1级：低个体危害，低群体危害
危险度2级：中等个体危害，有限群体危害
危险度3级：高个体危害，低群体危害
危险度4级：高个体危害，高群体危害
医疗用品分类: 1高度危险性物品：关键性物品，被微生物污染后可造成严重危害的诊疗器材和用品
2中度危险性物品：半关键性物品，受微生物污染后可造成中等程度危害的诊疗用品
3低度危险性物品：非关键性物品，虽有微生物污染，但在一般情况下无害，只有当受到一定量 的病原微生物污染时才造成危害的物品
检测指标：细菌总数，大肠菌群，真菌，致病菌，无菌检验，需氧菌 原核细胞
真核细胞 非细胞型
分化程度低，仅有 核质，无细胞核， 核膜，核仁，细胞
器仅有核糖体 分化程度高，又细 胞核，核膜和核仁
蛋白质外壳，核酸,
不具有细胞结构 衣原体，支原体， 细菌，放线菌，立 克次体，螺旋体 真菌，藻类，原生 动物 病毒
无菌检查，微生物限度检查，细菌内毒素检查，热原质检查
1药品生境的多样性和复杂性
2微生物数量少，分布不均
3多数为亚致死状态的损伤菌
4微生物消长的多变性
1低温保藏：冷藏，冷冻
2咼温火菌保藏
3非加热杀菌保藏
4防腐剂保藏
5脱水防腐
6提高渗透压防腐
24食品微生物的卫生学意义
1评价产品卫生质量
2制定防治措施
3提咼工艺水平
特征：1潜伏期短，短时间内很多人同时发病，病情急剧2与饮食有明确关系
3临床症状以急性胃肠炎为主要表现，症状基本相同
1.微生物：微生物是肉眼难以看清需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物的总称。 2.微生物的特点 （1）体积大、面积大（比面积大）。 （2）种类多，目前已知的微生物种类有10万多种而且这一类数目还在不断增加。 （3）分布广。广泛分布于土壤、空气和水等自然环境以及高温、高盐等极端环境。 （4）生长旺，繁殖快。大多数微生物在几十分钟内可繁殖一代，即由一个分裂为两个。如果条件适宜，10h就可以繁殖为数亿个。 （5）适应强，易变异。这一特点使微生物较适应外界环境条件的变化。 3.水中常见微生物种类:细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、病毒。 4.原核微生物：是一类细胞核无核膜包裹只存在称为核区的裸露的DNA，无细胞器的原始单细胞生物。 5.革兰氏染色：丹麦医生（革兰）于1884年发明了一类不同类型细菌的染色方法，根据此染色法，细菌可以分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。 6.菌落：单个细胞在固体培养基生长繁殖时产生大量细胞排序便以此母细胞为中心而聚集到一起形成一个肉眼可见的具有一定形态结构的子细胞群。 7.菌胶团：有些细菌由于其遗传特性决定，细菌之间按一定的排列方式互相粘集在一起，被一个公共荚膜包围形成一定形状的细菌基团。 8.芽孢：某些细菌（特别是杆菌）在生活史中的一个阶段，细胞内会形成一个圆型或椭圆型的对不良环境条件具有较强抗性的休眠体。 9.酵母菌：单细胞出芽生殖的真菌总称。 10.真核微生物：是一类细胞核具有核膜与核仁分化的较高等的微生物，细胞质中有线粒体等多种细胞器的生物。 11.硝化作用：由氨氧化成硝酸的过程。 12.生物监测：利用水生生物个体，种群，群落对水体污染或变化所产生的状况的一种监测方法。 13.体内积累速率=吸收速率-（体内分解速率+排泄速率） 14.余氯：氯加入水中后，一部分被能与氯结合的杂质消耗掉，剩余的部分称为余氯。 15.培养基：由人工配制的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合营养物。 16.生物浓缩系数（富集因子）：BCF=物质在生物体内的浓度/物质在环境介质中的浓度。 17.烈性噬菌体:大多数噬菌体感染细菌细胞后产生大量的子噬菌体并能使细菌细胞裂解。1.试述微生物在给排水工程的应用。 （1）污染水体。了解水中的致病菌并设法去除，防止传染病的蔓延使水生色或者产生气味。（2）阻塞作用。影响水厂的正常运行：冷却器、凝结器阻塞。 （3）利用微生物处理废水：利用有益微生物分解污水中的有机污染物。 （4）利用微生物进行自净：自然生态系统利用细菌和藻类互生的原理让细菌分解有机污染物，即氧化塘法。
一、名词解释： 1.温和噬菌体(temperate phage)：噬菌体基因与宿主染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬 菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代。 2.溶原性：温和噬菌体这种产生成熟噬菌体颗粒（前噬菌体偶尔可自发地或在某些理化和生 物因素的诱导下脱离宿主菌基因组而进入溶菌周期，产生成熟噬菌体，导致细菌 裂解）和溶解宿主菌的潜在能力，称为溶原性。 3.溶原性细菌：带有前噬菌体基因组的细菌称为溶原性细菌。 4.荚膜：荚膜是一些细菌在其细胞表面分泌的一种黏性物质，把细胞壁完全包围封住，这层 黏性物质就叫荚膜。 5.菌胶团：有些细菌由于其遗传特性决定，细菌之间按一定的排列方式互相黏集在一起，被 一个公共荚膜包围形成一定形状的细菌集团，叫做菌胶团。 6. 芽孢:某些细菌遇到不良环境时，在其细胞内形成一个内生孢子叫芽孢。 7.酶的活性中心：是指酶的活性部位，是酶蛋白分子直接参与和底物结合，并与酶的催化 作用直接有关的部位。 8.生长因子：是一类调节微生物正常生长代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的 有机物。 9.培养基：根据各种微生物对营养的需要（如水，碳源，能源，氮源，无机盐及生长因子等）， 按一定的比例配制而成的，用以培养微生物的基质，称为培养基。
10.选择培养基：根据某微生物的特殊营养要求，或对各种化学物质敏感程度的差异而设计、 配制的培养基，称为选择培养基。 11.鉴别培养基：几种细菌由于对培养基中某一成分的分解能力不同，其菌落通过指示剂显 示出不同的颜色而被区分开，这种起鉴别和区分不同细菌作用的培养基， 叫鉴别培养基。 12.发酵：是指在无外在电子受体时，底物脱氢后所产生的还原力[H]不经呼吸链传递而直接 交给某一内源性中间产物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧 化反应。 13.好氧呼吸：是有外在最终电子受体（O2）存在时，对底物（能源）的氧化过程。 14.无氧呼吸*：无氧呼吸又称厌氧呼吸，是一类电子传递体系末端的受氢体为外源无机氧化 物的生物氧化。 15.土壤自净：土壤对施入一定负荷的有机物或有机污染物具有吸附和生物降解的能力，通 过各种物理、化学过程自动分解污染物使土壤恢复到原有水平的净化过程， 称土壤净化。 16.水体自净：天然水体受到污染后，在没有人为的干预条件下，借助水体自身的能力使之 得到净化，这种现象成为水体自净，其中包括生物学和生物化学的作用。17：水体富营养化（环化有） 18.硝化作用：氨基酸脱下的氨，在有氧的条件下，经亚硝酸细菌和硝酸细菌的作用转化为 硝酸的过程。
《环境微生物学》复习重点 1、微生物是如何分类的？答：各种微生物按其客观存在 的生物属性（如个体形态及大小、染色反应、菌落特征、细胞结构、生理生化反应、与氧的关系、血清学反应等）及它们的亲缘关系，由次序地分门别类排列成一个系统，从大到小，按界、门、纲、目、科、属、种等分类。种是分类的最小单位，“株”不是分类单位。 2、微生物有哪些特点？答：（一）个体极小。微生物的个体极小，有几纳米到几微米，要通过光学显微镜才能看见，病毒小于0.2微米，在光学显微镜可视范围外，还需要通过电子显微镜才可看见。（二）分布广，种类繁多。环境的多样性如极端高温、高盐度和极端pH造就了微生物的种类繁多和数量庞大。（三）繁殖快。大多数微生物以裂殖的方式繁殖后代，在适宜的环境条件下，十几分钟至二十分钟就可繁殖一代。在物种竞争上取得优势，这是生存竞争的保证。（四）易变异。多数微生物为单细胞，结构简单，整个细胞直接与环境接触，易受外界环境因素影响，引起遗传物质DNA的改变而发生变异。或者变异为优良菌种，或使菌种退化。 3 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有什么异同？各有哪些化学组成？答：革兰氏阳性菌细胞壁厚约20-80nm，结构较简单，含肽聚糖，革兰氏阴性菌细胞壁厚约10nm，结
构复杂，分外壁层和内壁层，外壁层又分三层：最外层是脂多糖，中间是磷脂层，内层是脂蛋白。内壁含肽聚糖，不含磷壁酸。化学组成：革兰氏阳性菌含大量肽聚糖，含独磷壁酸，不含脂多糖。革兰氏阴性菌含极少肽聚糖，含独脂多糖，不含磷酸壁。 4、叙述革兰氏染色的机制和步骤。答：将一大类细菌染上色，而另一类染不上色，一边将两大类细菌分开，作为分类鉴定重要的第一步。其染色步骤如下：1在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，固定。2用草酸铵结晶紫染色1min，水洗去掉浮色。3用碘—碘化钾溶液媒染1min，倾去多余溶液。4用中型脱色剂如乙醇或丙酮酸脱色，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色。革兰氏阴性菌被褪色而成无色5用蕃红染液复染1min，格兰仕阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和格兰仕阴性菌即被区分开。 5、何谓放线菌？革兰氏染色是何种反应？答:在固体培养基上呈辐射状生长的菌种，成为放线菌。除枝动菌属革兰氏阴性菌，革兰氏染色呈红色外，其余全部放线菌均为革兰氏阳性菌，革兰氏染色呈紫色。 6、什么叫培养基？按物质的不同，培养基可分为哪几类？按试验目的和用途的不同，可分为哪几类？答：根据各种微生物的营养要求，将水、碳源、氮源、无机盐及生长因子等
牙菌斑生物膜 掌握：牙菌斑的定义、牙菌斑的基本结构、牙菌斑的形成和发育。 了解：牙菌斑的分类、牙菌斑的组成、牙菌斑的物质代谢、牙菌斑的致病性牙菌斑(dental plaque)：存在于牙面或牙周袋内的一个细菌生态环境，细菌在其中生长、发育和衰亡，并进行着复杂的物质代谢活动，在一定条件下，细菌及其代谢产物将会对牙齿和牙周组织产生破坏。 生物膜（biofilm）：各种细菌嵌于来自其自身和/或外界环境的胞外基质内，而在固相界面上结成的有着三维立体结构的微生态环境，牙菌斑就是一种经典的生物膜。 牙菌斑生物膜：牙菌斑生物膜是牙面上或牙周袋内的多种菌丛构成的生态系。细菌在内生长、发育和衰亡。其复杂的结构使它能包涵对氧不同敏感性的细菌，这些细菌嵌入在由多糖、蛋白质和矿物质组成的基质中。细菌在其中的代谢活动，影响着细菌与宿主之间或细菌菌属之间的动态平衡 生物膜的作用 ①节制细菌代谢活性和保护菌丛抵抗口腔苛刻环境，使细菌在不适合的条件中仍能存留。 ②膜内的多聚物基质起约束网络作用，摄取和收藏食物，控制基质成分的移动速度。 ③膜内高水平的巯基能中和氧基，保护菌细胞勉受氧化损伤。 ④浓缩从环境中来的营养物质和其它元素，保留一些细胞内遗漏出来的溶解物质（如eDNA）。 ⑤细菌耐药性
二、分类 （一）根据所在部位分类 龈缘为界: 龈上菌斑、龈下菌斑：附着菌斑，非附着菌斑。 1．龈上菌斑（supragingival plaque） 位于牙颈部龈缘以上牙面上的菌斑。包括窝沟菌斑、光滑面菌斑、邻面菌斑、颈缘菌斑。这种菌斑的结构比较完整，主要细菌是革兰阳性球菌、杆菌。随着菌斑成熟，革兰阴性球菌、杆菌和丝状菌的数量增多。 2．龈下菌斑(subgingival plaque) 位于龈缘以下，分布在龈沟或牙周袋内，分为附着龈下菌斑和非附着龈下菌斑。附着龈下菌斑 由龈上菌斑延伸到牙周袋内，附着于牙根面，其结构、成分与龈上菌斑相似，细菌种类增多，主要为格兰阳性球菌及杆菌、丝状菌，还可见少量格兰阴性短杆菌和螺旋体 非附着龈下菌斑 位于附着龈下菌斑的表面，为结构较松散的菌群，直接与龈沟上皮和袋内上皮接触，主要为格兰阴性厌氧菌，还包括许多能动菌和螺旋体。 龈上、龈下菌斑的主要特征： 生长环境：有氧、兼性厌氧；兼性、专性厌氧。 优势菌：G+需氧菌和兼性菌；G-厌氧菌和能动菌。 唾液清洁：+；-。 食物摩擦：+；-。 代谢底物：糖类；血清蛋白、氨基酸、糖。
巴斯德效应：在有氧条件下。兼性厌氧微生物终止发酵，进行有氧呼吸，这种呼吸抑制发酵的现象称为巴斯德效应。即呼吸抑制作用。 巴斯德的贡献：1.证实了微生物活动和否定了微生物自然发生学说；2开创了免疫学——预防接种。3.发酵的研究 ；4.巴斯德消毒法，观察丁醇发酵时发现厌氧生命，提出好氧厌氧属于。 柯赫的贡献：1设计了分离和纯化细菌的方法：划线法、混合平板法。2.设计了培养细菌用的肉汁胨培养液和营养琼脂培养基。3.设计了细菌染色技术。4.提出柯赫法则：（证明某种生物是否为某种疾病的病原的基本原则）i.病原体微生物一定伴随着病害而存在; ii; 必须能自原寄主分理处这种微生物，并培养成为纯培养; iii. 分离培养出的病原体比能在实验动物身上产生相同的症状 iiii 必须自人工接种发病的寄主内，能重新分离出同一病原微生物并培养成纯培养。 3．试述染色法的机制并说明此法的重要性。 答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，在加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，在经沙黄等红色染料复染，就使 G-细菌呈红色，而 G+细菌则仍保留最初的紫色。 此法证明了 G+和 G-主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同，是一种积极重要的鉴别染色法，不仅可以用与鉴别真细菌，也可鉴别古生菌。 5. 试述几种细菌细胞壁缺损型的形成，特点和实际意义。 自发缺壁突变：L 型细菌 实验室中形成 彻底除尽：原生质体 人工方法去壁 部分去除：原生质球 自然界长期进化中形成：支原体 实际意义：原生质体和原生质球比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质，故是遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。 L 型细菌：细菌在某种环境条件下（如低浓度青霉素）因基因突变而产生的缺乏细胞壁的遗传性能稳定的变异类型。
微生物学总结 绪论： 一、名词解释： 微生物：一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它们都是一些个体微小，构造简单的低等生物。 二、简答、论述： 1、微生物的五大共性： ⑴体积小，面积大；⑵吸收多，转化快；⑶生长旺，繁殖快；⑷适应强，易变异；⑸分布广，种类多。 2、巴斯德和科赫对微生物学的贡献： 巴斯德： ⑴彻底否定了“自生说”。（曲颈瓶实验） ⑵免疫学——预防接种。（鸡霍乱病） ⑶证明发酵是由微生物引起的。 ⑷发明巴氏消毒法。 科赫： ⑴证实炭疽病菌是炭疽病的病原菌。 ⑵发现了肺结核病的病原菌。 ⑷用固体培养基分离纯化微生物。 ⑸配制培养基。 原核生物： 根据外表特征把原核生物粗分为6种类型：细菌、蓝藻（蓝细菌）、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体 一、名词解释： 原核生物：指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物。 细菌：是一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂繁殖和水生性较强的原核生物。 糖被：是包被与某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。分为荚膜、微荚膜、粘液层和菌胶团。 芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造，称为芽孢。 伴孢晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体。是毒性蛋白，苏云金芽孢杆菌可作为消灭昆虫的菌剂，就是利用了该性质。
菌落：将单个微生物细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时在内层），当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时，该 细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，即菌落。 放线菌：一类主要呈丝状生长和以孢子繁殖的革兰氏阳性细菌。 蓝细菌：一类进化历史悠久、革兰氏染色阴性、无鞭毛、含叶绿素a、藻胆素、类胡萝卜素（但不形成叶绿体）、能进行产氧性光合作用的 大型原核生物。 细菌L—型: 是细菌在某些环境条件下所形成的变异型，是遗传性稳定的细胞壁缺损细菌，在固体培养基上形成“油煎蛋”似的小菌 落。 细菌形成L型大多染成革兰阴性。 古生菌的细胞壁：古生菌如产甲烷杆菌、极端嗜盐菌、极端嗜热菌其细胞 壁含假肽聚糖。 中介体：是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于革兰阳性菌。其功能类似于真核细胞的线粒体，故亦称为拟线粒体 菌毛：许多革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面存在着一种比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物，与细菌的运动无关。 产生芽胞的都是革兰阳性菌。芽胞不是细菌的繁殖方式 支原体：一类无细胞壁、能独立生活的最小型原核生物。 支原体特点： 细胞很小，多数直径为250nm,故光镜下勉强可见，能通过细菌滤器。 无细胞壁，G-,形态易变，对渗透压敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。 细胞膜含甾醇，比其它原核生物的细胞膜坚韧。 菌落小，在固体培养基上呈特有的“油煎蛋”状。 以二分裂和出芽等方式繁殖 能在含血清、酵母膏和甾醇等营养丰富的加富培养基上生长。 对抑制蛋白质合成的抗生素（四环素、红霉素等）和破坏含甾体的细胞膜结构的抗生素（两性菌素、制霉菌素等）都很敏感。 衣原体：有细胞壁，但缺肽聚糖，对作用于肽聚糖的青霉素、溶菌酶等不敏感。G- 有核糖体。以二分裂方式繁殖 缺乏产生能量的酶系，须严格细胞内寄生，称“能量寄生物”。 不能用普通培养基培养，须在培养基中加入活的鸡胚等进行活体培养。 立克次氏体：细胞较大，光镜下清晰可见，不能通过细菌滤器。 有细胞壁，G-
食品微生物学检验GB 4789 系列知识点汇总 GB 4789.1-2016 食品卫生学检验总则 一、2016版总则变更内容 1.删除了标准中的英文名称、起草单位变更为中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局。 2.删除了规范性引用文件。 3.修改了实验室基本要求： 微生物专业教育或培训经历（如生物学、植 物学、医学、食品科学与工程、食品质量与安全等与微 生物有关的相关专业），具备相应的资质（应有岗位上岗 证、生物安全上岗证和压力容器上岗证），能够理解并正 确实施检验。 ①人员修改为检验人员实验室生物安全操作和消毒知识（相关标准及培训， 如GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求、消毒技术 规范（2002））。 品。 确保自身安全。
有颜色视觉障碍的人员不能从事涉及辨色的实验（即无颜 色视觉障碍）。 ②环境与设施--突出温度、湿度和洁净度。 生物危害程度应与实验室生物防护水平相适应: 灭的微生物，如天花病毒。 间传播如霍乱弧菌。 病原微生物分类 沙门氏菌、单增李斯特氏菌。 第四类：通常不会引起人或动物疾病的微生物。 BSL-1）：操作第四类病原微生物（属于正压，适用 ） 实验室生物安全级别BSL-2）：操作第三类病原微生物（属于负压，适用 II级生物安全 ） BSL-3）：操作第二类病原微生物
四级（BSL-4）：操作第一类病原微生物 消毒：是杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其中的孢子。 灭菌：是杀死和去除所有微生物及其中孢子的过程。 蒸法消毒） 消毒剂表面消毒 微生物实验 高压灭菌 干热灭菌（180℃1h或170℃2h） 培养基和试剂灭菌 过滤除菌 紫外线消毒法：紫外灯管放射一定波长，破坏细菌或病毒的DNA和RNA，使他们丧失生存能力和繁殖能力，从而达到灭菌目的。紫外线的特点是对芽孢和营养细胞都能起作用，但细菌芽孢和霉菌芽孢对其抵抗力大，且紫外线穿透力极低，所以只能用于表面灭菌，对固体物质灭菌不彻底。
1细菌的L型：有些细菌在某些体内外环境及抗生素等作用下，可能部分或全部失去细胞壁，称为L型 2中介体：是细菌细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状结构，多见于革兰阳性细菌。中介体常位于菌体侧面或近中部位，可见一个或多个，参与细菌的分裂 3热原质：即细菌细胞壁的脂多糖，大多数由革兰阴性菌产生，注入人体内或动物体内可引起发热反应，故名热原质。耐高压耐热，除去热原质的最好办法是蒸馏 4细菌素：某些菌株产生的一种具有抗菌作用的蛋白质，仅对产生菌有亲缘关系的细菌具有杀伤作用 5缺陷病毒：因病毒基因组不完整或某一基因位点改变，病毒不能进行正常的增殖，不能复制出完整的有感染性的病毒颗粒，此病毒成为缺陷病毒 6顿挫感染：某些病毒进去宿主细胞后，如细胞不能为病毒提供所需要的酶，能量及必要成份，则病毒不能合成本身的成份，或者虽合成部分或合成全部病毒成份，但是不能组装和释放出有感染性的病毒颗粒 7干扰现象：两种病毒感染同一细胞时，一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象 8感染：是微生物在宿主体内的生活中与宿主相互作用并导致不同程度的病理变化的过程，是微生物与宿主个体、细胞和分子的多层面相互作用的生物学现象 9侵袭力：病原菌突破宿主皮肤、黏膜生理屏障等免疫防御机制，进入机体内定居、繁殖和扩散的能力10毒血症：产生外毒素的病原菌 在局部组织生长繁殖，外毒素进 入血循环，并损伤特定靶器官、 组织所出现的特征性病毒性症 状。如白喉，破伤风 11菌血症：病原菌由局部侵入血 流，并在其中极少量繁殖，引起 轻微症状。如伤寒沙门菌的播散 过程 12败血症：病原菌侵入血液并在 其中大量繁殖、产生的毒性代谢 产物包括外毒素或内毒素等毒 力因子所引起的全身性严重总 督的症状，如高热、皮肤黏膜淤 血，肝脾肿大、脏器衰竭等 13致细胞病变作用：在病毒培养 的体外试验中，通过细胞培养和 接种杀细胞性病毒，经过一定时 间后可在显微镜下观察到细胞 变圆，坏死等现象，称为CPE 14垂直传播：病原体从宿主的亲 代到子代，主要通过胎盘或产道 传播，此种病毒传播方式以病毒 为多见 15水平传播：病原体在人群中不 同个体之间的传播，也包括从动 物再到人的传播 16质粒：细菌染色体以外的遗传 物质，是环状闭合双链DNA， 存在于细胞质中，具有自我复制 的能力，所携带的遗传信息能赋 予宿主菌某些生物学性状 17溶原性转换：当温和噬菌体感 染细菌时，宿主菌染色体中整合 了噬菌体的DNA片断，从而获 得新的遗传性状 18原生质体融合：将两种不同细 菌经溶菌酶或青霉素等处理，失 去细胞壁成为原生质体后进行 彼此融合的过程，融合后的双倍 体细胞可以短期生存，染色体之 间可以发生基因的交换和重组， 获得多种不同表型的重组融合 体 19转导：以温和噬菌体为载体， 将供体菌的一段DNA转移到受 体菌内，使受体菌获得新的性状 20条件致病菌：是来源于人体皮 肤和黏膜聚居的正常菌群只有 在机体免疫力低下，寄居部位改 变或菌群失调等特定条件下才 能引起机体的感染 21转化：供体菌裂解游离的 DNA片断被受体菌直接摄取， 使受体菌或得新的性状 22消毒：杀灭物体上或环境中的 病原微生物，但不一定能杀死细 菌芽孢和非病原微生物的方法 23灭菌：杀灭物体上的所有微生 物，包括病原微生物、非病原微 生物和细菌芽孢的方法 24卡介苗（BCG）：是将有毒力 的牛型结核杆菌在含胆汁、甘油 和马铃薯的培养基中国，经过 230多次的传代，历时13年所获 得的减毒活疫苗。预防接种后可 使人获得对结核分枝杆菌的免 疫力 25荚膜：某些细菌在细胞壁外有 一层较厚、性质稳定的结构，其 化学成分在多数细菌中为多糖， 少数为多肽。功能主要是抗吞噬 作用，黏附作用，抗有害物质损 伤作用。具有抗原性。 26鞭毛：有些细菌包括所有的弧 菌和螺旋菌、占半数的杆菌和极 少数的球菌，由细胞膜长出菌体 外细长的蛋白质丝状体。 27异染颗粒：见于白喉棒状杆 菌、鼠疫杆菌和结核分枝杆菌 等，在细胞质内呈颗粒状，主要 成分为RNA及嗜碱性的多偏磷 酸盐，美蓝染色时不同于菌体的 颜色 28芽孢：某些细菌繁殖体在不利 的外界环境中在菌体内形成有 厚而兼任芽孢壁和外壳圆形的 休眠小体
病原微生物学知识点 重点整理
精品资料 病原生物与免疫学记忆知识点 1.免疫的现代概念。P4 答：生物在生存、发展过程中所形成的识别“自我”与“非己”，以及通过排斥“非己”而保护“自我”维护自身生理平衡与稳定的现象。 2.固有免疫与适应性免疫的特点。 答：（1）固有免疫：非特异性，可遗传性，效应恒定性。 （2）适应性免疫：特异性（针对性），习得性，效应递增性。 3.免疫系统的功能。P5 答：（1）积极意义：免疫防御，免疫自稳，免疫监视。 （2）消极意义：免疫损伤：超敏反应，自身免疫病。 4.人体中枢免疫器官的类型及作用。P6 答：（1）骨髓：①产生所有血细胞； ②淋巴细胞产生发育的器官：B细胞分化、发育的最主要场所； （2）胸腺：T细胞分化、发育、成熟的场所。 5.人体外周免疫器官的类型。P7 答：淋巴结，脾脏，黏膜相关淋巴组织。 6.抗原的定义及双重属性。P12 答：指能与T、B细胞受体结合，启动免疫应答，并能与相应的免疫应答产物产生特异性结合的物质。 双重属性：（1）免疫原性：指抗原能够刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞的能力。 （2）免疫反应性：指抗原与其所诱导的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合的能力。7.半抗原的概念。P12 答：仅具有免疫反应性的物质。 8.表位的概念。P13 答：决定抗原特异性的结构基础或化学集团称为表位，又称抗原决定簇。 9.影响免疫原性的主要因素。P14 答：（1）抗原的结构与生物学特性：“异物”性，分子量，复杂性，易接近性，可提呈性。（2）免疫系统的识别能力。 （3）抗原与免疫系统的接触方式。 10.T细胞依赖性抗原和T细胞非依赖性抗原的概念。P15、16 答：（1）T细胞依赖性抗原：指需在APC及Th细胞参与下才能激活B细胞产生抗体的抗原。（2）T细胞非依赖性抗原：指刺激B细胞产生抗体时不需要Th细胞辅助的抗原。
微生物学实验复习 1、培养基的种类及用途: 2 3 ⑴目的要明确（根据微生物的种类、培养目的等），如培养基可由简单的无机物组成，生产用培养基内可加入化学成 分不明确的天然物质，而分类、鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。 （2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细菌、放线菌和真菌的最适pH分别 为：6.5?7.5、7.5?8.5 和 5.0?6.0。 4、灭菌与消毒： 5、细菌培养基的配制过程？ 答：配制培养液T调节PH T分装T包扎T灭菌T搁置斜面(搁置斜面的长度不超过试管总长的1/2) 【问题与探究】 (1)培养基灭菌后，为什么需要冷却到50 C左右时，才能用来搁置斜面或倒平板？你用什么办法来估计培养基的温度？ 【提示】琼脂的凝固点为40 C,温度太高易使培养皿破裂，低于40 C,培养基已凝固，倒不 出，所以培养基灭菌后，需冷却到50 C左右时才能用来倒平板，可以用手触摸盛有培养基的试管，感觉试管的温度下降到刚刚不烫手时就可以进行倒平板了。 (2)为什么需要使试管口通过火焰？ 【提示】通过灼烧灭菌，防止试管口的微生物污染培养基。 (3 )为了能彻底灭菌，在操作过程中应注意哪些事项？ 【提示】使用高压蒸汽灭菌锅时，加压之前一定要把原先的空气排尽，注意恒温灭菌，同时要注 意高压蒸汽灭菌锅的压力(100 kPa)、温度(121 °C )和灭菌时间(20 min)。
6、无菌操作和接种技术 (1) 接种 概念：在_无菌条件下将微生物接入培养基_的操作过程。 工具：玻璃刮铲、接种针和接种环。 方法：穿刺接种、斜面划线接种和平板划线接种、涂抹平板等。 (2 )无菌操作微生物接种技术的关键 ①培养微生物用的试管、培养皿和微生物培养基等，在接种之前都需要灭菌 ②通常接种操作要在一酒精灯火焰一的附近进行。 【想一想】在微生物的培养过程中为什么要进行无菌操作？ 提示：无菌操作的目的是防止受到空气中的杂菌污染。 7、微生物的分离 (1) 原理：根据微生物对「营养成分、氧气、pH等要求的不同，通过只提供目的微生物生长的必需条件，或加入某些抑制剂使非目的微生物不能生长，从而达到选择分离微生物的目的。 (2) 方法 ①据菌落形态特征初步分离 ②常用方法一一平板分离法 涂抹平板法 混合平板法 分类平板划线法 :是常用的平板分离法， 有扇形划线、连续划线、交叉 划线和方格划线等 目的：在培养基上得到目的微生物的单个菌落 【归纳】无菌技术的具体内容 (1) 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 (2) 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3) 实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 ⑷实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触。 (5)在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。 &平板分离法 ①原理：大多数细菌、许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落。平板分离法能将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成便于移植的菌落。 ②常用培养基：最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基。 ③方法：⑴涂抹平板法：分离材料进行10倍系列稀释，取一定稀释度样品倒入预先准备好的琼脂 平板，用无菌玻璃刮铲将样品涂布均匀，细菌菌落常仅在平板表面生长。 (2) 混合平板法：分离材料进行10倍系列稀释，取一定稀释度样品与溶 化的琼脂混合，将 与样品混合的琼脂倒入无菌平皿，细菌菌落出现在平板表面及内部。 ⑶平板划线法：有扇形划线、连续划线、方格划线等。 4?目的：通过采用各种平板分离法在培养基上得到目的微生物的单个菌落。
专题二微生物的培养与应用 课题一微生物的实验室培养 ·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 ·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。 ·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。 ·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。 ·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。 ·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 ·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 ·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件 ·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
医学微生物学 总结得跟教材一样的哦 真的省了不少力气 微生物：存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数 千倍。甚至数万倍才能观察到的微小生物。 3、病原微生物：少数具有致病性，能引起人类、植物病害的微生物。 机会致病性微生物：在正常情况下不致病，只有在特定情况下导致疾病的微生物。 4，郭霍法则：①特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康人中不存在；②该特殊病原菌能被分离培养得纯种；③该纯培养物接种至易感动物，能产生同样病症；④自人工感染的实验动物体内能重新分离得到该病原菌纯培养。 5、免疫学：㈠主动免疫；㈡被动免疫。 # 第一篇 细菌学 第一章 细菌的形态与结构 第一节 细菌的大小与形态 1、观察细菌常采用光学显微镜，一般以微米为单位。 2、按细菌外形可分为： ①球菌（双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌） ②杆菌（链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌） ③螺形菌（弧菌、螺菌、螺杆菌） - 第二节 细菌的结构 1、基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 2、革兰阳性菌（G+）：显紫色；革兰阴性菌（G-）：显红色。 3、 细胞壁结构 革兰阳性菌 G+ @ 革兰阴性菌 G- 肽聚糖组成 由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构 由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构 肽聚糖厚度 20～80nm 10～15nm
肽聚糖层数可达50层仅1～2层 占胞壁干重50～80%仅占胞壁干重5～20% 肽聚糖含量 磷壁酸有无 外膜无有 { 4、G-菌的外膜｛脂蛋白、脂多糖（LPS）→【脂质A，核心多糖，特异多糖】、脂质双层、｝ 脂多糖（LPS）：即G-菌的内毒素。LPS是G-菌的重要致病物质，使白细胞增多，直至休克死亡；另一方面，LPS也可增强机体非特异性抵抗力，并有抗肿瘤等有益作用。 ①脂质A：内毒素的毒性和生物学活性的主要成分，无种属特异性，不同细菌的脂质A骨架基本一致，故不同细菌产生的内毒素的毒性作用均相似。 ②核心多糖：有属特异性，位于脂质A的外层。 ③特意多糖：即G-菌的菌体抗原（O抗原），是脂多糖的最外层。 5、细胞壁的功能：维持菌体固有的形态，并保护细菌抵抗低渗环境。 G-菌的外膜是一种有效的屏障结构，使细菌不易受到机体的体液杀菌物质、肠道的胆盐及消化酶等的作用。 6、细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细菌壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型. … ■细菌L型的诱发因素，如：溶菌酶，青霉素，溶葡萄球菌素，胆汁，抗体，补体等。 溶菌酶：能裂解肽聚糖中N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键，破坏聚糖骨架，引起细菌裂解。 青霉素：能与细菌竞争合成肽聚糖过程中所需的转肽酶，抑制四肽侧链上D-丙氨酸与五肽桥间的联结，使细菌不能合成完整的肽聚糖，在一般渗透压环境中科导致细菌死亡。 ■细菌L型需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。 G+菌细胞壁缺损形成的原生体，在普通培养基中很容易胀裂死亡，必须保存在高渗环境中。 7、细胞膜： 细胞膜的主要功能：①物质转运；②呼吸和分泌；③生物合成；④参与细菌分裂：细菌部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，称为中介体。 8、细胞质： } ①核糖体：链霉素（与细菌核糖体的30S亚基结合）和红霉素（与细菌核糖体的50S亚基结合）均能干扰其蛋白质合成，从而杀死细菌，但对人体核糖体无害。 ②质粒：染色体外的遗传物质，为闭合环状的双链DNA ③胞制颗粒：贮藏有营养物质。异染颗粒（也成迂回体，嗜碱性强，用甲基蓝染色时着色较深呈紫色）常见于白喉棒状杆菌。 9、核质：细菌的遗传物质。 10 ⑴荚膜：包绕在细胞壁外的一层粘液性物质，为多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。 ■荚膜的功能：①抗吞噬作用；②粘附作用；③抗有害物质的损伤作用。 ⑵鞭毛：包括：单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌 ~ 鞭毛由基础小体、钩状体、丝状体三部分组成。 ■鞭毛的功能：使细菌能在液体中自由游动，速度迅速。细菌的运动有化学趋向性，常向营养物质处前进，而逃离有害物质。有些细菌的鞭毛与致病性有关。
专题二微生物的培养与应用知识点2.1 微生物的实验室培养 1． 2. 察微生物的运动及菌种保藏等） 的化学物质配制而成，成分种类比例明确，用于微生物的分离鉴定） 生产） 点，加入某种指示剂或化学药品，来鉴别不同类别的微生物）。 3. 源包括CO2、 NaHCO3 N2、NH3、NO3-、NH 4 + 4.培养基还需满足 菌需添加维生素；培养霉菌需将pH调至酸性；培养细菌需将pH调至中性或微碱性；培养厌氧型微生物需提供无氧的条件。 5. 6.消毒与灭菌的区别是： ，包 （酒精、氯气、石炭酸） 7. 。8.制作牛肉膏蛋白胨固体培养基
（1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 （2）倒平板操作的步骤包括： 。③ 再将锥形瓶中的培养基（约 ）倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖。④等待平板冷却凝固然 。 9.倒平板时若不慎将培养基溅在皿盖与皿底上，则这个平板不能用来培 10. ，以达纯化菌种的目的。 11.平板划线操作时第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环的原因 操作结束时，仍然需要灼烧接种环的原因是及时杀死接种环上残留的 12. 取少量菌液，滴加到培养基表面。 8 ～10s 13.4 ℃ 2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.不能直接被植物吸收。 土壤中有一类细菌能 2.实验室中微生物筛选的原理是： （包括营养、温度、PH 等） 3.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他 等。
4. 5.原理是： 当样品的稀 菌。为了保证结果准确，一般选择 6. 落数而不是活菌数来表示。 7. 8.用具和药品， 具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。 9.土壤取样： 铲去表层土，在距地表约 潮湿、pH ≈7的土壤中取样。 104、 105、 106般选用 103、104、 105102、103 、 104）的样品液进行培养，以保证获得菌落数在 11.不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌30-37 ℃ 1-2天；放线菌25-28℃5-7天；霉菌25-28℃3-4天。 12.每隔 24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为说，在一定的培养条件下（相同的培养基、唯独及培养时间），同种微 13. 每克样品中的菌落数（C ：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V ：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml ）；M ： 代表稀释倍数） 14. 后，如果PH 2.3 分解纤维素的微生物的分离 1. 是地球上含量 2. 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 3.它能与培养基中的纤维素
绪论 1.微生物：一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。 2.列文虎克（显微镜，微生物的先驱）巴斯德（微生物学）科赫（细菌学） 3.什么是微生物？习惯上它包括那几大类群？ 答：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它是一些个体微小结构简单的低等生物。包括①原核类的细菌（真细菌和古细菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体；②真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类；③属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和朊病毒）。 4.为什么说微生物的“体积小、面积大”是决定其他四个共性的关键？ 答：“体积小、面积大”是最基本的，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。 第一章原核生物的形态、构造和功能 1.细菌：是一类细胞极短（直径约0.5微米，长度约0.5-5微米），结构简单，胞壁坚韧，多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。 2.试图示肽聚糖单体的模式构造，并指出G+细菌与G-细菌在肽聚糖成分和结构上的差别？ 答：主要区别为；①四肽尾的第3个氨基酸不是L-lys，而是被一种只有在原核微生物细胞壁上的特殊氨基酸——内消旋二氨基庚二酸（m-DAP）所代替；②没有特殊的肽桥，其前后两个单体间的连接仅通过甲四肽尾的第4个氨基酸（D-Ala）的羧基与乙四肽尾的第3个氨基酸（m-DAP）的氨基直接相连，因而只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网套。 3.试述革兰氏染色的机制。 答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色
名词解释 1.真核微生物：真核生物是一大类细胞核具有核膜，能进行有丝分裂，细胞质中含有线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞器的生物。真菌、显微藻菌和原生动物等都是真核生物类的微生物，故称为真核微生物。 2.原生质体：指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞，它们只能在等渗或高渗培养液保存或维持生长。 3.病毒：是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”，其本质是一类含DNA或RNA的特殊遗传因子，病毒是一类能以感染态和非感染态两种形态存在的病原体，它们即可通过感染宿主并借助其代谢系统大量复制自己，又可在离体条件下，以生物大分子状态长期保持其感染活性。 4.霉菌：是丝状真菌的一个俗称，通常指那些菌丝体较发达又不产生大型肉质子实体结构的真菌。在潮湿气候下，它们往往在有机物上大量生长繁殖，从而引起食物、工农业产品的霉变或植物的真菌病害。 5.荚膜：某些细菌表面的特殊结构，是位于细胞壁表面的一层松散的粘液物质，荚膜的成分因不同菌种而异，主要是由葡萄糖与葡萄糖醛酸组成的聚合物，也有含多肽与脂质的。一般在动物体内或含有血清或糖的培养基中容易形成荚膜，在普通培养基上或连续传代则易消失。荚膜不易着色，可用特殊染色法将荚膜染成与菌体不同的颜色。如用墨汁作负染色，则荚膜显现更为清楚,先用染料染菌体，然后用墨汁将背景涂黑，即负染色法。 重点内容 1.产黄青霉 产黄青霉菌（Penicillium chrysogenum）是一种广泛存在于自然界中的霉菌，特别是在食物或者室内环境中最为常见。是生产青霉素的重要工业菌种。 霉菌形态和构造：霉菌营养体的基本单位是菌丝。有无隔菌丝和有隔菌丝两种。通过载片培养可以较清楚的观察菌丝的形态和构造。 菌丝体及其各种分化形态：当霉菌孢子落在适宜的基质上后，就发芽生长并产生菌丝，由许多菌丝相互交织而成的一个菌丝集团称为菌丝体。菌丝体分两类：密布在固体营养基质内部，主要执行吸取营养物功能的菌丝体，称营养菌丝体。伸展到空间的菌丝体，则称气生菌丝体。霉菌的繁殖能力很强，主要产生大量的无性孢子或有性孢子来完成。 霉菌的菌落：宏观上菌落形态较大、质地疏松、外观干燥、不透明，与培养基间的连接紧密，不易挑取，菌落正面与反面的颜色、构造，以及边缘与中心的颜色、构造不一致。霉菌的细胞呈丝状，在固体培养基上生长时又有营养菌丝和气生菌丝的分化。 2.革兰氏阳性细菌、阴性细菌
1.菌体中带寡聚糖（LOS）致病的细菌——脑膜炎奈瑟菌、淋病奈 瑟菌、流感嗜血杆菌 2.诱发细菌L型形成的因素——溶菌酶、葡萄球菌溶素、补体、 抗体、胆汁、破环细胞壁肽聚糖的抗生素 3.荚膜为多肽组分的细菌——炭疽芽孢杆菌、鼠疫杆菌 4.能引起血凝现象的病原体——大肠埃希菌（I菌毛，P菌毛）、 流感病毒（HA） 5.菌毛由染色体编码者——霍乱弧菌，EPEC，淋病奈瑟菌 6.菌毛由质粒编码者——ETEC、性菌毛（F质粒） 7.特殊pH环境生长的的微生物——真菌（4～6）、解脲脲原体 （5.5～6.5）、结核杆菌（6.5～6.8）、布鲁氏菌（6.6-6.8）、百日咳杆菌（6.8-7.0）、幽门螺杆菌（6～8）、支原体（7.6～ 8.0）、霍乱弧菌（8.4～9.2） 8.初次分离需要5-10% CO2 的细菌——脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟 菌、布鲁氏菌、 9.培养需要CO2的细菌：幽门螺杆菌（需CO2方能生长），军团菌 （2.5-5 %CO 2促进生长）、空肠弯曲菌（10%CO 2 ），炭疽芽孢杆 菌（5% CO 2 下培养形成荚膜） 10.人类历史上第一个被发现的细菌——布氏杆菌 11.人类历史上第一个被发现的病原菌——炭疽芽孢杆菌（巴斯德）
12.人类历史上第一个被发现的病毒——烟草花叶病毒 13.人类历史上第一个基因组被完全测序的微生物——流感嗜血杆 菌 14.普通高压蒸汽灭菌法不能灭活的物质——热原质（250度干烤）、 朊病毒（134度>2h） 15.在液体培养基中呈菌膜生长的细菌——结核分枝杆菌、枯草芽 孢杆菌 16.以R型菌落（粗糙型）毒力更强的细菌——炭疽芽孢杆菌、结 核分枝杆菌 17.引起心内膜炎的微生物——甲链、凝固酶阴性葡萄球菌、柯萨 奇病毒、肠球菌 18.以人为唯一宿主的微生物——脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、霍 乱弧菌、梅毒螺旋体、麻疹病毒、腮腺炎病毒、风疹病毒、天花病毒、软疣病毒 19.引起食物中毒的微生物——副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌、产 气荚膜杆菌、肉毒杆菌、沙门氏菌、大肠埃希菌、志贺氏菌、真菌 20.仅在感染局部繁殖，侵袭力较弱的细菌——志贺氏菌、破伤风 杆菌 21.产生尿素酶的微生物——解脲脲原体、变形杆菌、幽门螺杆菌、