《水产微生物学》
课程论文
系部：水产系
专业：水族科学与技术
班级：2011级二班
姓名：陈娟
学号：222011602093065
2013年1月4日
微生物与水产养殖的关系
陈娟
西南大学水产系重庆市荣昌402460
摘要：随着水产养殖业的发展,养殖对象逐渐多样化,养殖规模日益扩大,集约化程度也
不断提高。然而养殖区水质却不断恶化,养殖生态系统严重失衡,导致细菌性、病毒性等病害的感染机率也随之增大,使水产养殖业的健康发展受到影响。微生物能够直接或间接的作用于水产养殖业中的作用日益受到重视,这方面的研究也在不断的深入并应用到实践当中。本文将从五个方面系统阐明《水产微生物》这门学科在水产行业中的重要作用。
关键词:水产养殖; 微生物; 应用
1利用微生态制剂代替抗生素防治疾病
目前养殖业中主要使用广谱抗生素来控制病害的发生,但由此产生的副作用以及引起病原菌产生抗药性、毒性、“三致”(致畸、致癌、致突变)等弊端也逐渐显露出来。随着动物微生态制剂在畜牧等方面上的广泛应用,在水产业上的应用也越来越引起人们的重视,其良好的效果也已被大量的试验和生产实践所证实。微生态制剂具有多功能性、广泛的适应性和高度的安全性等特点。实际应用的微生态制品应包括活菌体、灭活菌体、菌体成分、代谢产物及活性生长促进物质[1]。
1986年,Kozasa[2]首次将益生菌应用于水产养殖,用1 株从土壤中分离的芽孢杆菌( B aci l l us toy2oi )处理日本鳗鲡( A n g ui l l a j a ponical ) ,降低了由爱德华氏菌( Edw ardsiel l a)引起的死亡率。此后,微生物制剂在水产养殖中的应用研究迅速发展。据国外的研究报道,一些微生物制剂有抗病毒的作用。Direkbusarakom 等[3]由一种黑色虎虾( Ti gerp raw ns)卵中分离出 2 个溶血性弧菌(V ibrio) NI2CA1030 和NICA1031 ,这些菌株对IHNV 和大马哈鱼表皮病毒有着抗病毒活性抑制作用; Austin等[4]用分离的溶藻弧菌(V . al gi nol y t icus)注射或浸浴大西洋鲑( S almo sals r)时,可抵抗致病性杀鲑气单胞菌( A eromonas salmonici da ) 、鳗弧菌(V .ang ui l l arum)和病毒鱼弧菌(V . pisci um) 等的感染;Bogut 等[5],用微生态制剂溶藻胶弧菌的去细胞上清液冷冻干燥粉能有效抑制病原菌杀鲑气单胞菌、鳗弧菌和病毒鱼弧菌; Gatesoupe[6]研究表明,使用1 株产生铁载体( Siderop hore)的弧菌强化的轮虫可增加大菱鲆( S cop ht hatmus max imus )仔鱼被一致病弧菌感染后的成活率;Ol sson[7]从大菱鲆幼鱼排泄物中提取的肉杆菌( Carnobacteri um)细胞可抑制鳗弧菌的生长,研究认为,大菱鲆肠道和粪便为鳗弧菌生长提供了丰富场所,使用肠道菌的抑制活性可能会降低大菱鲆育苗场鱼类致病性弧菌的生长; Gullian[8]从虾( Penaeus v annamei )的肝胰脏中分离到3 株细菌,分别确认为副溶血性弧菌(V . p arahemol y t icus) p62、p63 和芽孢杆菌p64 ,它们可抑制虾体内的哈维氏弧菌(V . harev y i) S2 ,其死亡率分别可达83 %、60 %和58 % ,而对宿主无致病作用。国内方面,对微生态制剂的研究起步较晚,但发展迅速。桂远明等[9-10 ]用从健康鲤鱼( Cy p ri nus carpio)的肠道中分离出的无毒正常菌群J Y10、J Y31 制成的微生态制品喂饲鲤鱼,其质量增长率、能量同化率、生态生长效率、组织生长效率均高于对照组,后来再将它们制成益生素并添加到饲料中,以该饲料投喂鲤鱼,增加了抗病能力;杨思芹等[11]在人工养殖中国明对虾( Fenneropenaeuschi nensis)时,摄取益生剂组的对虾的活力及抗
病性均好于对照组;吴垠等[12-13 ]应用微生态制品饲养中国明对虾的结果表明,微生态制品能明显提高中国明对虾感染爆发性流行病后的成活率,且对仔虾的生长也有一定的促进作用;潘康成等[14]将 2 株有益芽孢杆菌制成的微生物添加剂放在饲料中饲喂鲤鱼,结果发现可显著促进鲤鱼生长,提高了鲤鱼肠道消化酶的活性;孙舰军等[15 ]将光合细菌拌入饵料投喂中国明对虾后发现,血细胞数目、PO、SOD溶e 菌和抗菌活力均比对照组高;张明等[16 ]利用光合细菌的稀释液治疗鲫鱼( Carassi us aurat us ) 、鲤鱼、红鲤等发生的“穿孔病”,得到良好的治疗效果;薛恒平等[17-18 ]分离选育的蛭弧菌( B del lovibrio)菌株Bd1 对鱼虾幼苗的育成效果特别显著;刘克林等[19 ]采用有益芽孢杆菌制成的微生态添加剂饲喂鲤鱼苗后发现,胸腺、脾脏生长发育比对照组迅速,电镜观察免疫器官内T、B 淋巴细胞较对照组成熟快、数量增多,产生抗体增多,免疫功能增强;李平等[20 ]将有益微生物群( EM)应用到罗氏沼虾( Ma2cy obrachi un rosebergi i ) 的健康养殖中,结果发现EM 能抑制和消灭病原微生物,改善养殖环境。另外,作为一种新型治疗剂的噬菌体,近年来在水产养殖业中引起了重视。李太武等[21 ]利用噬菌体对皱纹盘鲍( Hal ios discus hanna)脓疱病引起的鲍死亡进行治疗,取得良好的效果;2000 年日本广岛大学鱼病实验室分离到变形假单胞菌( Pseu domonasplecoglossici da)的2 株噬菌体PPpW23 和PPpW24 ,用它们来治疗感染了变形假单胞菌的鱼苗后发现大大的降低了鱼苗的死亡率,并且池塘中的变形假单胞菌数量明显降低[22 ];近年来,蔺红苹等[23-24 ]对用噬菌体防治对虾弧菌病进行了研究,发现水体中加入噬菌体能对其宿主裂解,使虾体内器官的副溶血弧菌被明显清除,同时使感染副溶血弧菌的对虾体内的血细胞含量保持相对稳定。
目前,在水产养殖业中应用得比较广泛的微生态制剂包括乳杆菌属、双歧杆菌属、弧菌属、假单胞菌属、硝化菌、光合菌等[25 ]。有关其在水产疾病防治中的作用机制可简要概括为[ 26 ]: (1)微生态制剂可以成为非特异性免疫因子,增强吞噬细胞的吞噬能力和B 细胞产生抗体的能力,还可抑制腐败微生物的过度生长和毒性物质产生; (2)肠道内正常微生物不仅有助于食物的消化,而且还可合成蛋白质和维生素,从而提高机体的抗病能力; (3)利用微生态制剂建立机体内正常的微生物,竞争性的排斥体内病原菌; (4)微生态制剂可补充或恢复种群优势,使失调的微生态达到新的平衡; (5)微生态制剂中的有益耗氧微生物在体内的生长繁殖,降低了局部氧分子的浓度,促进了肠道内厌氧菌的繁殖,从而使微生态恢复平衡。
据报导,微生态制剂已由实验室转向了工厂化生产,此类商品在市场上越来越多,它将在发展健康养殖、绿色养殖中发挥更大的作用。
2 微生物做水产饲料的添加剂
微生物体内含有丰富的营养物质,有益微生物可以产生各种酶如水解酶、发酵酶和呼吸酶,这些酶有利于降解饲料中蛋白质、脂肪和较复杂的碳水化合物;同时能合成 B 族维生素及维生素K,促进水产动物对营养物质的消化吸收;而且微生物细胞还可以提供额外的核酸、蛋白质、各种矿物质,是供给能源的良好来源且具有安全性[ 27 ]。
人们很早就开始探索用微生物作为养殖对象的营养来源。而现代微生物学和发酵工艺也使这种微生物来源的饵料的大批生产成为可能[28 ]。Ringo 等[29 ]发现一些微生物如农杆菌、假单胞菌、葡萄球菌、短藻都可能有助于北极红点鲑( S . al pi2nus)对营养的吸收; Samucl 等[30 ]的研究显示,复合微生物制剂作为饲料添加剂, 既可促进动物的生长, 又可改善养殖环境; Ziaei 等[31 ]在饲料中添加复合微生物制剂能显著提高印度明对虾( F. i n di2cus)肠蛋白酶、脂肪酶、淀粉的活性;李维炯等[ 32 ]将一定比例的有益微生物原液加糖
与饲料均匀混合,装入密封缸中,经各种有益微生物菌群的厌氧发酵,改善了原有饲料的品质结构,提高营养含量;杨健康等[ 33 ]在饲料中添加光合细菌喂养欧洲鳗鲡( A ng ui l l a ang ui l l a) 三类苗发现:试验组成活率、质量增长率、饵料效率均较对照组有所提高;张淑华等[34 ]的研究结果表明,在饲料中添加0. 10 %、0. 15 %的微生态制剂可促进对虾的生长,提高成活率;许国焕等[35 ]在基础饲料中分别添加相同剂量(活菌含量为3. 0 ×1011cf u/ kg)的汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hanseni ) 、枯草芽孢杆菌( B aci l l ussubt i l is)和凝结芽孢杆菌( B. coag ul ans) ,结果显示,饲料中添加剂量为 3. 0 ×1011cf u/ kg 的枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌能显著促进奥尼罗非鱼(Oreochromis ni lot icus x o ×O. aureus)的生长和其对饲料营养物质的利用,汉逊德巴利酵母对生长性能和饲料表观消化率无影响。
水产动物饲料中常用的有益微生物菌主要有以下几种:乳酸菌、芽孢菌、酵母菌及丝状真菌、弧菌、光合细菌。其中光合细菌的研究在国内有着长足的发展。光合细菌菌体营养丰富,蛋白质含量高达60 %以上,且富含各种 B 族维生素、辅酶Q、叶酸、生物素及其他未知的多种生理活性物质,此外还含有丰富的类胡萝卜素,作为饵料添加剂具有明显的增产效果[36 ]。安树升等[37 ]利用光合细菌与单胞藻混合投喂海湾扇贝( A rgopecten i r radi ans )幼体的效果明显优于单投喂胞藻;俞吉安等[38 ]以2 %的光合细菌添加到饲料中投喂草鱼( Ctenop hary n2godon i del l us) 、鳙鱼( A rist icht hys mobi l is )和鲢鱼( H y pop ht halmicht hys mol i t ri x ) ,成活率、单产均有所提高,饵料系数下降;张明等[ 39-40 ]用光合细菌培养的枝角类数量是用干酵母、小球藻培养的2～4倍培养出的水蚤和轮虫的氨基酸含量明显提高,品质也更加接近于天然生长的浮游动物。
3 微生物在改良水质上的作用
良好的水质对水产动物的正常生长极其重要,水质的恶化是影响水产养殖生物存活率和产量的主要原因,因此水产养殖环境的净化已成为养殖业发展的关键技术和研究热点,目前采用的换水、利用药物等物理化学方法,已无法从根本上解决养殖水质污染的问题,净水微生物的研究就在这个基础上逐渐发展起来。
净水微生物能通过氧化、氨化、硝化、反硝化、解磷、硫化及固氮等作用将有害物质分解为二氧化碳、硝酸盐、硫酸盐等,同时又分解池塘底部腐败的沉积物,并能在较短时间内大量繁殖成优势种群而抑制病原微生物[41 ]。净水微生物主要有两大类:(1)单一型制剂,如光合细菌、乳酸菌类、芽孢杆菌和硝化细菌等。伊玉华等[42 ]在对虾养殖池中施用光和细菌,结果使水中溶氧大大提高,N H32N 降低,对虾产量提高;李秀珠[43 ]在对虾池中施用紫色非硫光和细菌,结果低泥H2 S含量平均减少60 %;丁雷等[44 ]发现芽孢杆菌不能起到分解水体中小分子有机物、同化氨氮的作用,但有明显的降低亚硝酸盐的作用;林亮等[45 ]对施用芽孢杆菌制剂后虾池底泥细菌群落进行了研究,结果表明,芽孢杆菌制剂改变了虾池底泥细菌类群组成,增加了底泥好氧细菌的数量;仇丽[46 ]用枯草芽孢杆菌养殖凡纳滨对虾(L i topenaeus v annamei ) ,与常规虾池对照,氨氮含量、亚硝酸含量都有明显下降,还达到了增产的效果;曹煜成等[47 ]在草鱼养殖过程中施用地衣芽孢杆菌( B. l icheni f ormis) De 可使水体中的N H32N及NO22N 在养殖中后期始终保持在较低水平。(2)复合型制剂,由多株单一菌株组合而成。近年来,复合型微生物净水剂在改善养殖水体生态环境中的作用引起了人们的重视,在我国的研究也越来越深入。李勤生等[48 ]发现光合细菌不同菌株之间、光合细菌和异养细菌菌株间混合培养可促进其生长,光合细菌不同菌株之间混合培养时的生长量均高于单株培养0. 36 %～17. 4 % ,多数增长11 %以上,光和细菌和异养细菌间混合培养效果更为显著,增长量为单种培养的 1. 34～5. 6 倍,混合培养中许多方面都表现出优点;
李卓佳等[49 ]通过试验证实乳酸杆菌(L actobaci l l us spp . ) L H 能有效地降低养殖废水和饲料中的NO22N、NO32N、PO42P , 而使N H32N的浓度升高, 对COD 无明显作用,因此建议在实际应用上, 应将乳酸杆菌和芽孢杆菌、光合细菌等有益菌联用, 以发挥各个菌株的不同功能;王彦波[50 ]在养殖鲫鱼的试验中发现光合细菌降解氨氮的能力较强,而芽孢杆菌将NO22N 的能力较强,而将2 种菌混合使用时,不仅起到了互补的作用,COD 的降解率大大提高了;叶奕佐等[ 51 ]将光合细菌和放菌施用于温室无砂养鳖池,结果COD去除率超过90 %;张玲华等[ 52 ]用由假单胞菌、芽孢杆菌和硝化细菌混合制成的复合制剂投放到池塘中,发现其能有效地降解养殖池中残余的饵料,同时促进了硅、绿藻的繁殖,间接增加了水中的溶氧。
另外,值得一提的是,微生物絮凝剂的应用也逐渐为人们所注意。微生物絮凝剂是由微生物产生的具有絮凝活性的代谢产物,能使水体中的胶体和悬浮颗粒物相互聚集,形成絮状沉淀,从而由反应体系中分离出来。微生物絮凝剂在处理废水方面效果已被证实,但目前将微生物絮凝剂用于水产养殖废水处理的报道却很少,根据微生物絮凝剂的特性和初步应用可以预测,将其用于处理养殖池水在经济、技术上都是可行的[ 53 ]。
4 微生物肥料在水产养殖中的应用
施肥养殖在我国有悠久的历史,传统的施肥养殖主要是施加无机肥料、无机复合肥、有机肥,以提高养殖的单位产量。然而这种传统的施肥方式不仅会导致水质恶化,肥料营养元素也很单一,因此探索新的肥料迫在眉睫。微生物肥料就是在这个基础上发展起来。微生物肥料是指采用畜禽粪便和其他有机物为主要原料,经接种微生物复合菌剂,利用生化工艺和微生物技术,彻底杀灭病原菌、寄生虫卵,利用微生物分解有机质,将大分子物质变成小分子,然后达到除臭、腐熟、脱水、干燥的目的,制成具有优良物理性状、碳氮比适中,肥效优异的生物肥料。它能为水生动植物直接或间接提供营养元素或通过有益微生物的生命活动一直病原菌的生长繁殖,直接或间接促进和改善生物生长,并使其品质得到改善[ 54 ]。邹勇等[55 ]对水产养殖专用微生物肥料生产工艺已有详细的报道;金满洋等[56 ]在池塘养殖中施用EM 活性微生物水产专用肥,结果单位面积净产量鱼种池提高17. 8 % ,成鱼池提高14. 4 %。但微生物肥料尚有很多问题亟待解决,目前在我国仍然不易推广。首先,微生物肥料的生产和使用均需要一定适宜的条件;其次是微生物肥料有效期非常严格,刚生产出来的活菌量很高,随着保存时间和条件的变化,产品中有效微生物就会逐渐减少直至失效;最后还要注意到适用作物和地区,这是目前微生物肥料应用的最大难题。
5 微生物在水产养殖中的其他应用
5. 1有益微生物群能在水体污染中起指示作用
在环境监测中,可以选用一些微生物作为指示物,来判断水体污染程度。大量试验证实,微生物的数量与其所相应化合物含量之间有一致性,故可用来作为某类或某种污染物的指示菌,一般情况下,如果其他条件相对稳定时,有益微生物数量多,水质就好,动物不会生病,反之就会爆发疾病[57 ]。
5. 2 微生物多糖可刺激水产动物免疫系统,提高免疫力,改善肉质
鱼类的防御系统与哺乳动物相似,而虾类不具有特异性免疫,一旦病原入侵机体,则要依靠其内部的防御系统。来自微生物细胞壁的葡聚糖、脂多糖、肽聚糖等可诱导生物体,提高
自身免疫力[58 ]。Rengpipat 等[59 ]利用芽孢杆菌S11 养殖斑节对虾( Penaeus monodon) ,结果S11 能有效地激活白细胞吞噬作用,增加吞噬能力,其处理组的酚氧化酶和抗菌活性更高。这表明S11 能通过激活虾的细胞和体液免疫以及通过肠道中益生菌竞争排斥而防疾病;张庆等[60 ]以芽孢杆菌为主导菌的复合制剂投喂斑节对虾,对虾肉质和体质得到改善,虾体水分降低,粗蛋白含量升高,呈味氨基酸明显增加;许国焕等[61 ]在基础饲料中分别添加酵母细胞壁和β2葡聚糖,两者均能显著提高凡纳滨对虾溶菌活力、超氧化歧化酶和酚氧化酶活性,提高机体抗病能力。
5. 3 微生物对有害藻类的防治
目前,有害藻类对水产养殖业的危害深远,虽然有害藻类并未象害虫那样引起人们足够的警惕和重视,但它却已经成为水产养殖中不可忽视的一个问题。防治有害藻类的方法除了去除磷氮等营养物质,施用杀藻剂和引进鱼类、贝类或漂浮被子植物等方法外,微生物防治有害藻类也正在研究中。有报道显示,中性柠檬酸菌、粘细菌、Micro2Bac 发酵液、光合细菌、硝化细菌、玉垒菌组合等能通过释放毒藻素或激发食藻生物的繁殖达到良好的杀藻或抑藻效果[62 ]。现已发现多种溶藻细菌、蓝藻嗜菌体和真菌能裂解藻类营养细胞或破坏细胞的某一特定结构,有人通过试验证实了自然水体中细菌等生物种属降解藻毒素的可能性,但自然降解较慢[64 ]。
5. 4 微生物可以诱导贝类附着变态
在海洋无脊椎动物变态发育过程中,附着期是其生活史中的重要阶段,附着基上的微生物对海洋无脊椎动物幼虫的附着具有重要作用。许多试验证明,一些细菌能分泌吸引藤壶、牡蛎等幼虫附着的物质。徐怀恕等[ 65 ]从海湾扇贝幼虫附着基表面分离到99 株分属9 个属的附着菌,试验表明,有的细菌促进幼体附着,有的则起抑制作用;李筠等[ 66 ]从海湾扇贝附着基上分离出61 株异样细菌,并鉴定出扇贝幼虫附着前附着的细菌主要为芽孢杆菌与假单胞菌,扇贝幼虫附着后气单胞菌成为优势菌,弧菌数量明显增加,与假单胞菌数量相当。现阶段水产养殖中主要使用的单一菌种微生物有光合细菌、硝化细菌、芽孢杆菌、蛭弧菌、乳酸菌、枯草芽孢杆菌、反硝化细菌等;而复合微生态制剂主要有益生素、EM 菌、益水宝、生物抗菌肽等。但仍不能满足多种养殖对象和养殖环境的要求,在今后的研究开发中,应筛选性状优良的多种菌株,开发出多种效果优良的微生态制剂,以适应不同的需要。随着分子生物学、代谢工程学和微生物工程技术的发展,在细胞水平研究微生物之间的相互作用已成为可能,这将有利于建立特定微生物物种降解具体污染的资料库,以用于指导具体水产养殖者针对具体养殖水域和水体情况,选择适宜地微生物产品。尽管水产养殖用微生态制剂在水产养殖业上的应用日益广泛,但无论在管理体制上,还是基础理论研究等方面都存在着一些问题,例如,水产养殖用微生态制剂似药非药,是被边缘化了的水产养殖投入品之一,管理机构和管理办法不明,致使整个产业一片混乱,基础理论研究薄弱,到目前为止,我国的水产养殖用微生物的研究仍然缺乏系统性和深层次的研究,在菌种选择、施用条件、施用方法和施用量、菌种间相互作用、配伍的和谐性、作用机理、对环境的影响形式和影响程度、菌体保活技术、菌体回收和消除技术等方面的研究严重滞后。现今水中微生物生态情况与水产养殖之间的关系和规律还不清楚,还需要进一步探索。对于不同水型中不同微生物种的配伍、用法与用量等技术内容还不完善,因此,亟需健全相关的管理体系,明确水产养殖用微生态制剂的质量认证、企业生产和经营资格认定、产品市场准入、质量监管等管理办法,逐步规范企业行为,加强相关基础理论的研究,开展联合科研攻关。
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《水产微生物学》 课程论文 系部：水产系 专业：水族科学与技术 班级：2011级二班 姓名：陈娟 学号：222011602093065 2013年1月4日
微生物与水产养殖的关系 陈娟 西南大学水产系重庆市荣昌402460 摘要：随着水产养殖业的发展,养殖对象逐渐多样化,养殖规模日益扩大,集约化程度也 不断提高。然而养殖区水质却不断恶化,养殖生态系统严重失衡,导致细菌性、病毒性等病害的感染机率也随之增大,使水产养殖业的健康发展受到影响。微生物能够直接或间接的作用于水产养殖业中的作用日益受到重视,这方面的研究也在不断的深入并应用到实践当中。本文将从五个方面系统阐明《水产微生物》这门学科在水产行业中的重要作用。 关键词:水产养殖; 微生物; 应用 1利用微生态制剂代替抗生素防治疾病 目前养殖业中主要使用广谱抗生素来控制病害的发生,但由此产生的副作用以及引起病原菌产生抗药性、毒性、“三致”(致畸、致癌、致突变)等弊端也逐渐显露出来。随着动物微生态制剂在畜牧等方面上的广泛应用,在水产业上的应用也越来越引起人们的重视,其良好的效果也已被大量的试验和生产实践所证实。微生态制剂具有多功能性、广泛的适应性和高度的安全性等特点。实际应用的微生态制品应包括活菌体、灭活菌体、菌体成分、代谢产物及活性生长促进物质[1]。 1986年,Kozasa[2]首次将益生菌应用于水产养殖,用1 株从土壤中分离的芽孢杆菌( B aci l l us toy2oi )处理日本鳗鲡( A n g ui l l a j a ponical ) ,降低了由爱德华氏菌( Edw ardsiel l a)引起的死亡率。此后,微生物制剂在水产养殖中的应用研究迅速发展。据国外的研究报道,一些微生物制剂有抗病毒的作用。Direkbusarakom 等[3]由一种黑色虎虾( Ti gerp raw ns)卵中分离出 2 个溶血性弧菌(V ibrio) NI2CA1030 和NICA1031 ,这些菌株对IHNV 和大马哈鱼表皮病毒有着抗病毒活性抑制作用; Austin等[4]用分离的溶藻弧菌(V . al gi nol y t icus)注射或浸浴大西洋鲑( S almo sals r)时,可抵抗致病性杀鲑气单胞菌( A eromonas salmonici da ) 、鳗弧菌(V .ang ui l l arum)和病毒鱼弧菌(V . pisci um) 等的感染;Bogut 等[5],用微生态制剂溶藻胶弧菌的去细胞上清液冷冻干燥粉能有效抑制病原菌杀鲑气单胞菌、鳗弧菌和病毒鱼弧菌; Gatesoupe[6]研究表明,使用1 株产生铁载体( Siderop hore)的弧菌强化的轮虫可增加大菱鲆( S cop ht hatmus max imus )仔鱼被一致病弧菌感染后的成活率;Ol sson[7]从大菱鲆幼鱼排泄物中提取的肉杆菌( Carnobacteri um)细胞可抑制鳗弧菌的生长,研究认为,大菱鲆肠道和粪便为鳗弧菌生长提供了丰富场所,使用肠道菌的抑制活性可能会降低大菱鲆育苗场鱼类致病性弧菌的生长; Gullian[8]从虾( Penaeus v annamei )的肝胰脏中分离到3 株细菌,分别确认为副溶血性弧菌(V . p arahemol y t icus) p62、p63 和芽孢杆菌p64 ,它们可抑制虾体内的哈维氏弧菌(V . harev y i) S2 ,其死亡率分别可达83 %、60 %和58 % ,而对宿主无致病作用。国内方面,对微生态制剂的研究起步较晚,但发展迅速。桂远明等[9-10 ]用从健康鲤鱼( Cy p ri nus carpio)的肠道中分离出的无毒正常菌群J Y10、J Y31 制成的微生态制品喂饲鲤鱼,其质量增长率、能量同化率、生态生长效率、组织生长效率均高于对照组,后来再将它们制成益生素并添加到饲料中,以该饲料投喂鲤鱼,增加了抗病能力;杨思芹等[11]在人工养殖中国明对虾( Fenneropenaeuschi nensis)时,摄取益生剂组的对虾的活力及抗
福建农林大学2018年硕士自命题考试说明 001作物科学学院 《作物生理学》考察考生对作物生理学的基本概念、基本原理，作物生长发育过程中涉及的相关生理过程，特别是在逆境条件下作物产量品质形成生理机制的掌握程度，以及如何运用学习的知识分析作物在生产过程中生理现象的能力。 《遗传学》考查考生对遗传学基本概念的理解程度，对遗传学基本知识和分析方法的掌握程度，以及对遗传学历史和发展现状的了解。内容涵盖孟德尔遗传、细胞遗传、分子遗传、群体遗传以及新发展的基因组学等。 《农业知识综合一（作物）》考查内容主要包括植物学基础、生态学基础和气象学基础三部分。 《农学概论》考查内容主要包括农学与作物生产、作物的起源与分类、作物生长发育规律、作物品种改良、作物栽培技术、作物种植制度、现代农业等。 002植物保护学院 《植物生理学与生物化学》考试内容范围说明：植物的水分代谢，矿物质营养的基本原理，呼吸作用与光合作用，植物生长物质，植物生长、生殖与逆境生理；核酸、蛋白质、酶及维生素等生命基本物质的分子组成、结构、性质和功能，生物氧化，糖、脂类、蛋白质、核酸等的代谢。 《植物保护概论》考试内容范围说明：农业有害生物及其发生发展的基本知识，农业有害生物防治的原理与方法。 《植物保护学》考试内容范围说明：植物病理学、昆虫学、农药学的基本知识，农作物主要病虫害的发生与防治。 《农业综合知识一(植物保护)》考试内容范围说明：植物学基础知识、植物生理学基础知识、遗传学基础知识。
003园艺学院 学术型: 《园艺植物生理学》：园艺植物物质代谢、能量转化、生长发育生理、环境生理及其生长发育的调节与控制。 《园艺植物组织培养》：植物组织培养基本设备、基本原理、方法与技术；植物组织培养的应用领域；植物组织培养在园艺植物（果树或蔬菜或花卉或茶树等）上的应用。 专硕： 《园艺植物生物学》：园艺植物的生长发育，环境条件对园艺植物的影响，园艺植物的繁殖，园地选择与建园。 《农业知识综合一（园艺）》：土壤学、植物营养学、现代农业基础知识（节水农业、设施农业、生物防治、园产品安全生产等）。 004林学院 《森林生态学》：森林环境，森林能量环境，森林物质环境，森林环境中的干扰因素，森林种群的结构与动态，森林种群内和种群间的关系，森林生物遗传变异与进化，森林群落结构，森林群落演替，森林生态系统，森林地理分布，森林与全球气候变化。 《林业基础知识综合》导论，森林及其分布，主要森林树种概述，森林的功能，林木良种生产与壮苗培育，森林培育基础及育林技术体系，森林健康，林业生态工程建设，森林资源可持续经营。 《景观生态学》：基本理论和原理、景观形成因素，景观结构和空间格局，景观生态流与景观功能，景观动态变化，景观生态分类与评价，景观生态规划，景观生态数量化方法。 《数理统计》：概率论、参数估计、假设检验、单因素方差分析、回归分析（备注：复试时考《数理统计》考生需带计算器）。 005生命科学学院
《水产养殖专业》淡水养殖方向人才培养方案 一、学制与招生对象 学制：全日制三年专科 招生对象：普通高中、职业高中、中等职业学校毕业生 二、培养目标 本专业培养适应社会主义市场经济需要，德、智、体、美全面发展，具有良好的思想品德和职业道德，掌握水产饲料的营养与饲料加工知识；了解鱼类的品种，掌握鱼类的生理特点及生物学特性；掌握鱼病的预防、诊断与治疗知识；掌握各种鱼类的养殖技术；掌握水生微生物的检测技术；掌握渔业经济管理知识等知识与技能，具备特种水产养殖、鱼类的繁殖操作、鱼类饲料的配制、加工能力；具备鱼病的预防、诊断、治疗能力；具备鱼网的编织与修补能力；鱼的捕捞操作能力；渔业生产经营、管理能力等。获得执业兽医师（水生生物学）、水产养殖工等中级职业技术等级标准，在畜牧水产局、畜牧水产所、水产科技站、水产种苗繁殖基地、饲料公司、鱼药公司、生物科技有限公司等相关企事业单位从事鱼苗繁殖、渔场管理、水质监测、饲料生产及销售、鱼药生产及销售、水产品研发与销售工作的高级技能应用型人才。 三、培养面向岗位或岗位群 职业岗位典型工作任务 1、水产种苗繁育、养殖场1、鱼苗繁育； 2、渔场的管理 2、饲料相关企业 1、饲料生产、研发； 2、饲料的销售； 3、饲料的品控和质检 3、水产养殖相关的事业单位1、畜牧水产局；2、畜牧水产所；3、水产科技站 4、渔药相关企业1、鱼药的生产、研发；2、鱼药的销售 5、水生生物疾病诊断与防治单位1、水产疾病诊断、防治 6、水产品加工企业1、水产品的加工；2、相关保健品的研发 7、自创实体从事与水产养殖相关的生产和经营 四、培养要求 （一）知识要求 1、具有马列主义、毛泽东思想、邓小平理论及本行业法规、法律及规范的基本知识； 2、具有大学专科层次的文化基础知识，有比较合理的复合知识结构；
水产微生物学复习辅导资料 第一章绪论 一.名词解释 1.微生物：指个体微小，结构简单，肉眼看不见，必须借助光镜或电镜才能看到的微小生物。 2.微生物学：研究微生物形态结构、生理代谢、遗传变异、生态分布、分类进化和生命活动基本规律以及微生物与人类、动植物和自然界的相互关系，并将其应用于农牧渔业、工业、环境保护、医药卫生、生物工程等领域的科学。 3.水产微生物学：是微生物学应用于水产养殖业后而形成的微生物学的一个分支学科。它是在研微生物学的—般理论和技术的基础上，研究微生物与水产环境、水生动物疾病、水产品的关系，旨在改善养殖环境、防治水产动物疾病和防止水产品腐败变质。 二、杂题 1.原核细胞型微生物有：细菌、放线菌、霉形菌、立克次体、衣原体、螺旋体、蓝细菌。 2.真核细胞型微生物有：真菌（酵母菌、霉菌）、原生动物等。 3.按结构差异，微生物的类型分为三类：非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物。非细胞型微生物主要是病毒。 4.病原微生物的致病性检测技术有：检样处理、细胞与动物接种、MLD和LD50测定、致病因子分析等。 5.用于微生物的免疫学技术主要是：抗原和抗体的制备、凝集、沉淀和抗体标记技术等。 6.研究病毒大小和形态的方法有：电子显微镜法、超滤膜过滤法、超速离心法和电离辐射与X线衍射法。 三、问（简）答题 1.微生物有那些特性？ 答： ①个体微小，结构简单。 ②种类繁多，分类广泛。 ○3群居混杂，相生相克。 ④生长繁殖快，适应能力强。 ⑤生物遗传性状典型，实验技术体系完善。 2.微生物有哪些作用？ 答：（1）有益方面：①推动自然界能量流动和物质循环。②净化环境，维持生态平衡。 ③维护人和动物健康。④制造加工食品和生物工程。⑤用于生物科学研究和生物工 程。 （2）有害方面：某些微生物能引起人和动植物疾病，毁坏工农业产品，农副产品和生活用品 第二章细菌 一、名词解释 1.细菌：是指个体微小、形态与结构简单、具有细胞壁、原始核质，无核仁和核膜，除核糖 体外无其他细胞器的原核生物。 2.菌落：一般经过18-24小时的培养后，单个细菌在固体培养基上或内部生长分裂繁殖成一
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水产微生物学复习辅导资料第一章绪论 一.名词解释 1.微生物：指个体微小，结构简单，肉眼看不见，必须借助光镜或电镜才能看到的微小生物。 2.微生物学：研究微生物形态结构、生理代谢、遗传变异、生态分布、分类进化和生命活动基本规律以及微生物与人类、动植物和自然界的相互关系，并将其应用于农牧渔业、工业、环境保护、医药卫生、生物工程等领域的科学。 3.水产微生物学：是微生物学应用于水产养殖业后而形成的微生物学的一个分支学科。它是在研微生物学的—般理论和技术的基础上，研究微生物与水产环境、水生动物疾病、水产品的关系，旨在改善养殖环境、防治水产动物疾病和防止水产品腐败变质。 二、杂题 1.原核细胞型微生物有：细菌、放线菌、霉形菌、立克次体、衣原体、螺旋体、蓝细菌。 2.真核细胞型微生物有：真菌（酵母菌、霉菌）、原生动物等。 3.按结构差异，微生物的类型分为三类：非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物。非细胞型微生物主要是病毒。 4.病原微生物的致病性检测技术有：检样处理、细胞与动物接种、MLD和LD50测定、致病因子分析等。
5.用于微生物的免疫学技术主要是：抗原和抗体的制备、凝集、沉淀和抗体标记技术等。 6.研究病毒大小和形态的方法有：电子显微镜法、超滤膜过滤法、超速离心法和电离辐射与X线衍射法。 三、问（简）答题 1.微生物有那些特性 答： ①个体微小，结构简单。 ②种类繁多，分类广泛。 ○3群居混杂，相生相克。 ④生长繁殖快，适应能力强。 ⑤生物遗传性状典型，实验技术体系完善。 2.微生物有哪些作用 答：（1）有益方面：①推动自然界能量流动和物质循环。②净化环境，维持生态平衡。③维护人和动物健康。④制造加工食品和生物工程。⑤用于生物科学研究和生物工程。 （2）有害方面：某些微生物能引起人和动植物疾病，毁坏工农业产品，农副产品和生活用品 第二章细菌 一、名词解释 1.细菌：是指个体微小、形态与结构简单、具有细胞壁、原始核质，无 核仁和核膜，除核糖体外无其他细胞器的原核生物。
“微生物学”教案 绪论 本节由学生自学,不讲授。布置思考题： 1．微生物有哪些共性,其共性的基础是什么? 2．从微生物学科的发展历程，举例阐述微生物学对社会进步的推动作用。 第一章、原核生物的形态、构造和功能 教学目的：细菌是微生物的代表,是生命科学研究和应用的重要基础内容，同时也是学生认识微生物的开始。以细菌作为原核生物的代表,侧重讲述原核生物的亚细胞结构、分子结构与细胞功能的关系。 教学方式：多媒体教学。 教学课时:６学时(细菌细胞构造和功能4学时、放线菌和特殊细菌形态构造2 学时）。 教学内容: 第一节细菌 一、细胞的形态构造及其功能 详细讲授细菌细胞壁肽聚糖、磷壁酸和脂多糖三种功能性大分子的结构、生理功能以及革兰氏染色的机制。引入古细菌概念,详细比较细菌细胞壁与古生菌细胞壁结构的差异，介绍四种缺壁细菌的细胞特征和生理特殊性。 讲授革兰氏阴性菌网外膜的结构特点。通过革兰氏阳性和阴性细
菌细胞壁结构的比较,解释这两类细菌对抗生素(如青霉素、链霉素等)、阴离子去污剂、碱性染料敏感性的不同,侧重阐述细菌结构与功能的关系以及基础研究对应用微生物的意义。 介绍细菌的特殊构造,包括：糖被、鞭毛、菌毛、性毛、芽孢等亚细胞构造及功能,讲授芽孢的结构、生理特点以及在工农业中的研究与应用。 第二节放线菌 侧重讲述放线菌的形态构造以及繁殖方式,比较细菌放线菌细胞结构、形态和培养特征的异同。强调放线菌资源的应用价值，引入稀有放线菌概念并介绍资源研究近年创新性的方法和研究趋势。 第二节蓝细菌(由学生自学） 第三节支原体、立克次氏体和衣原体 这些特殊细菌与人类疾病关系密切,简述。侧重比较这三种特殊细菌的形态差异以及鉴别依据。 思考与作业: 1.试比较革兰氏阳性菌与阴性菌细胞壁结构的差异，并说明这两类细菌对青霉素和阳离子去污剂敏感性不同的原因。 2.生命是缺壁细菌,简述形成原因及实践中的意义。 第二章、真核微生物的形态、构造和功能 教学目的:真核微生物主要包括真菌、微型藻类和原生动物。本章以真菌作为真核微生物的代表，通过丝状真菌、酵母菌以及大型真菌的
水产微生物学 第一章绪论 一.名词解释 1. 微生物：存在于自然界中的一群个体微小、结构简单、必须借助显微镜放大数百倍甚至数万倍才能观察清楚的一类微小生物的总称。 2. 微生物学：是在细胞、分子或群体水平上研究微生物形态结构、生理代谢、遗传变异、生态分布、分类进化和生命活动基本规律以及微生物与人类、动植物和自然界的相互关系，并将其应用于农牧渔业、工业、环境保护、医药卫生、生物工程等领域的科学。 3. 水产微生物学：是微生物学应用于水产养殖业后而形成的微生物学的一个分支学科，其主要任务是在研微生物学的—般理论和技术的基础上，研究微生物与水产养殖环境、水产动物饲料、水产动物疾病和水产品保鲜、贮藏的关系，充分发挥微生物在改善养殖环境、提高抗病力和健康水平、防治水产动物疾病以及防止水产品腐败变质中的作用。 二、杂题 1、原核细胞型微生物：细菌、放线菌、霉形菌、立克次体、衣原体、螺旋体、蓝细菌。 2、真核细胞型微生物：真菌、原生动物等。 3、按结构差异，微生物有三种类型：非细胞型微生物（主要是病毒）、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物。 4、病原微生物的致病性检测技术有：检样处理、细胞与动物接种、MLD口LD50测定、致病因子分析等 5、用于微生物的免疫学技术有：抗原和抗体的制备、凝集、沉淀和抗体标记技术等。 6、研究病毒大小和形态的方法有：电子显微镜法、超滤膜过滤法、超速离心法、电离辐射与X线衍射法。 三.问答题 1、微生物有哪些特性？ ①个体微小，结构简单②种类繁多，分类广泛 ③群居混杂，相生相克④生长繁殖快，适应能力强。 ⑤生物遗传性状典型，实验技术体系完善。 2、微生物的主要作用 1 ）有益方面：①推动自然界物质循环和能量流动②净化环境，维持生态平衡 ③维护人和动物健康④ 制造加工食品和工农业产品⑤用于生物科学研究和生物工程 2 ）有害方面：①某些微生物能引起人和动植物疾病 ②毁坏工农业产品，农副产品和生活用品 第二章细菌 一、名词解释 1 、细菌：是指个体微小、形态与结构简单、具有细胞壁和原始核质，无核仁和核膜，除核糖体外无其他细胞器的原核生物。 2、菌落：某个细菌在适合生长的固体培养基表面或内部，在适宜的条件下，经过一定时间培养，多
实验一光学显微镜的使用及微生物形态的观察、 大小的测定和计数 一、实验目的 １、掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养 2、观察细菌、真菌、原生动物的标本装片,学会绘制生物图 3、掌握使用测微尺测量微生物大小的方法 ４、了解血球计数板的结构，掌握使用和计算方法 二、实验器材 １、显微镜 ２、微生物标本装片 ３、目、物镜测微尺 ４、血球计数板 ５、酵母菌液或霉菌孢子液 6、载波片、盖波片、烧杯、滴管、擦镜纸、香柏油、二甲苯等 三、显微镜的构造、原理及使用方法 1、构造 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微镜,由机械装置和光学系统两大部分组成。机械装置包括镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、调节器;光学系统包括目镜、物镜、聚光器、电光源。显微镜的总放大倍数为目镜和物镜的放大倍数的乘积。 ２、操作 在目镜保持不变的情况下,使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。一般情况下,特别是初学者，进行显微观察时应遵循从低倍镜到高倍镜再到油镜的观察程序,因为低倍数物镜视野相对大,易发现目标及确定检查的位置。 四、微生物大小的测量原理和方法 微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和物镜测微尺。 1、目镜测微尺(图1-1）是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍｍ长度刻成5０等分，或把1０mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上（此处正好与物镜放大的中 --
-- 间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用物镜测微尺校正，以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。 2、物镜测微尺(图１-２）是中央部分刻有精确等分线的载 玻片,一般将lmm 等分为100格,每格长ｌ０μm （即0.0ｌmm), 是专门用来校正目镜测微尺的。校正时，将物镜测微尺放在载 物台上,由于物镜测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经 过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即物镜测微尺随着显 微镜总放大倍数的放大而放大，因此从物镜测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用物镜测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去物镜测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。 3、目镜测微尺的校正 把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把物镜测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清物镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与物镜测微尺的刻度平行，移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“０”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度（图1－３)，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。因为物镜测微尺的刻度每格长l0μｍ，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。 例如目镜测微尺５小格正好与物镜测微尺5小格重叠，已知物镜测微尺每小格为ｌ0μm ，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/５=1０μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。 由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。 4、细胞大小的测定 移去物镜测微尺,换上待测菌体的装片，先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量菌体的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位数）。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值,即等于该菌的长和宽。 结果计算： 长μm=平均格数×校正值 宽μｍ＝平均格数×校正值 大小表示: 宽μm ×长μｍ 五、微生物细胞数量的测定原理和方法 1、血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区(图1-4），计数区 图1-1 目镜测微尺 图1-2 物镜测微尺 图1-3 目、物镜测微尺的校正 图1-4 血球计数板
微生物习题九 一．填空题： 1、决定传染结局的三大因素：、和。 2、病原体的、和是决定传染结局中的最主要因素。 3．免疫功能包括、、和三个方面。 4、传染的三种可能结局：、和。 5、人体的非特异性免疫主要由、、 以及等4方面组成。 6、免疫应答的3个突出特点：、和。 7、免疫应答的三阶段：、和。 8、免疫应答的类型有和。 9．构成细菌性病原体的毒力可分为和两方面。 二．选择题： 1．下列不属于病原体侵袭力的因素是。 A 具有菌毛 B 分泌毒素 C 产生透明质酸酶 D 具有荚膜 2．下列结构为外周免疫器官的是。 A 骨髓 B 脾脏 C 胸腺 D 法氏囊 3．机体的免疫防御在正常情况下可保护机体，起到抗传染免疫的作用，但在反应过高、过强 的情况下，则可引起：。 A．免疫缺陷病 B，变态反应（过敏反应） C，自身免疫病 4. 机体具有防御病原体的侵害和中和其毒素的能力，这种免疫功能称为：。 A．免疫防御 B、免疫稳定 C、免疫监视 5．机体能不断地清除在新陈代谢中自然衰老或损伤的细胞，以维持体内环境的平衡与稳定。 这种免疫功能称为：。 A．免疫防御
B、免疫稳定 C、免疫监视 6．下列机体的防御活动属于特异性免疫的是。 A 唾液中含溶菌酶 B 通过哺乳获得乙肝抗体 C 白细胞的吞噬作用 D 细菌感染后的炎症反应 7．细菌外毒素经甲醛脱毒处理，可使之失去毒性但仍保留其抗原性，即成为：。 A．外毒素 B、内毒素 C、类毒素 D、抗毒素 8．将类毒素注射机体后，可使机体产生对相应外毒素具有免疫性的抗体，即。 A．外毒素 B、内毒素 C、类毒素 D、抗毒素 9．通过胎盘、乳汁传递而获得的免疫力叫做：。 A．自然自动免疫 B 自然被动免疫 C．人工自动免疫 D 人工被动免疫 10．受病原微生物抗原刺激，发生传染病后而获得的免疫是：。 A．自然自动免疫 B 自然被动免疫 C．人工自动免疫 D 人工被动免疫 11．注射疫苗等预防针而获得的免疫力称为：。 A．自然自动免疫 B 自然被动免疫 C．人工自动免疫 D 人工被动免疫 12，注射抗毒素等抗体而获得的免疫力称为：。 A．自然自动免疫 B 自然被动免疫 C．人工自动免疫 D 人工被动免疫 13．用于治疗由外毒素引起变病的动物免疫血清，注射人体后，有可能引起过敏反应，这是
水产微生物学
水产微生物学 第一章绪论 一.名词解释 1.微生物：存在于自然界中的一群个体微小、结构简单、必须借助显微镜放大数百倍甚至数万倍才能观察清楚的一类微小生物的总称。 2.微生物学：是在细胞、分子或群体水平上研究微生物形态结构、生理代谢、遗传变异、生态分布、分类进化和生命活动基本规律以及微生物与人类、动植物和自然界的相互关系，并将其应用于农牧渔业、工业、环境保护、医药卫生、生物工程等领域的科学。 3.水产微生物学：是微生物学应用于水产养殖业后而形成的微生物学的一个分支学科，其主要任务是在研微生物学的—般理论和技术的基础上，研究微生物与水产养殖环境、水产动物饲料、水产动物疾病和水产品保鲜、贮藏的关系，充分发挥微生物在改善养殖环境、提高抗病力和健康水平、防治水产动物疾病以及防止水产品腐败变质中的作用。 二、杂题 1、原核细胞型微生物：细菌、放线菌、霉形菌、立克次体、衣原体、螺旋体、蓝细菌。 2、真核细胞型微生物：真菌、原生动物等。 3、按结构差异，微生物有三种类型：非细胞型微生物（主要是病毒）、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物。
4、病原微生物的致病性检测技术有：检样处理、细胞与动物接种、MLD和LD50 测定、致病因子分析等 5、用于微生物的免疫学技术有：抗原和抗体的制备、凝集、沉淀和抗体标记技术等。 6、研究病毒大小和形态的方法有：电子显微镜法、超滤膜过滤法、超速离心法、电离辐射与X线衍射法。 三.问答题 1、微生物有哪些特性？ ①个体微小，结构简单②种类繁多，分类广泛 ③群居混杂，相生相克④生长繁殖快，适应能力强。 ⑤生物遗传性状典型，实验技术体系完善。 2、微生物的主要作用 1）有益方面：①推动自然界物质循环和能量流动②净化环境，维持生态平衡③维护人和动物健康④制造加工食品和工农业产品⑤用于生物科学研究和生物工程 2）有害方面：①某些微生物能引起人和动植物疾病 ②毁坏工农业产品，农副产品和生活用品 第二章细菌 一、名词解释
医学微生物学实验课程教案(精)
医学微生物学实验课程教案 主讲教师：宋利琼 （2008年度春季学期） 教学内容：化脓性球菌的分离鉴定（设计性实验） 授课对象：2006级医学专业学生 教学时间及学时：3学时 【实验任务】 请设计一个实验方案：从疑似肠道感染性细菌的患者临床标本中确定病原体。请将你们小组的设计方案与技术路线在讨论完善后记录在实验报告本，并将可行的实验内容在实验课中实施。 生化反应 血液或黏液脓血便肠道选择培养基37℃、18-24小时可疑菌落双糖铁培养基 血清学鉴定增菌培养基 教学目的和要求： 一、掌握细菌对糖的分解试验原理及其结果。 二、掌握细菌对蛋白质、氨基酸和其它含氮有机物的分解试验的原理。 三、掌握大肠杆菌、伤寒杆菌，痢疾杆菌的培养特性。 四、掌握肥达氏反应的原理、方法及结果判断。 教学重点和难点：
一、肠道杆菌的分离鉴定程序 二、掌握肥达氏反应的原理、方法及结果判断 三、IMViC试验 四、五糖发酵试验，铁质双糖试验 教学方法： 1．注重学生综合、分析能力培养，调动学生学习的主观能动性 2．启发式、互动式教学手段，强调学生的协作性和团体精神。 3、对学生严格把关，保证实验课的过程和结果。 4、采用设计性实验，培养学生的科研设计能力。 思考题： 1．怎样从急性腹泻患者粪便中分离与鉴定伤寒杆菌? ． 2．肥达氏反应中为什么要用“O”“H”“A”“B”四种抗原，分析肥达氏反应结果时应注意什么问题? 3．沙门氏菌在铁质双糖培养基中有何特点，如何与痢疾杆菌区别? 参考书目： 1、医学微生物学与免疫学实验指导, 三峡大学医学院微生物与免疫学教研 室编 2、医学微生物学与免疫学实验指导, 河北医科大学微生物与免疫学教研室 编 3、医学微生物学与免疫学实验指导, 同济医科大学微生物与免疫学教研室 编
2012级制药专业 工业微生物学实验报告 姓名: 刘甜甜学号: 2012304090 班级: 制药12-2班指导老师：王健 日期：2014.6.11
一、实验目的 1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的原理。 2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的试验方法。 3、了解细菌的形态特征、染色特点。 4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的菌落特征。 5、掌握细菌分离划线培养的方法。 6、掌握细菌的初步生化反应。 7、掌握细菌密集划线法，掌握细菌K-B药敏纸片法。 二、实验内容 1 细菌Gram’s stain染色，镜检，观察记录细菌形态和特色特征 1.1 实验原理：染色原理：G+菌与Gˉ菌细胞壁不同，G+菌比Gˉ菌细胞内核糖核酸镁盐含量高，G+菌比Gˉ等电点低。 1.2 实验步骤： 1.2.1.制片：○1涂片：取半滴生理盐水置一洁净玻片上，以无菌操作技术自平板上去菌落少许，与生理盐水混匀，均匀涂布约1cm2大小，自然干燥； ②固定：取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次，使菌膜牢固附于玻片表面； 1.2.2染色：①初染：取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,细流水冲洗，切勿直接冲洗涂片区域； ②媒染：取卢氏碘液1~2滴覆盖菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,用上法细流水冲洗； ③脱色：取95%酒精2~3滴于菌膜表面，轻微摇动，局部接近无色即可, 用上法细流水冲洗； ④复染：取1：10稀释石炭酸复红覆盖涂片区域，轻微摇动，用上法细流水冲洗； ⑤吸水纸初步吸干玻片水分，然后自然干燥； 1.2.3 镜检：于涂片区域加半滴香波油，油镜（100倍目镜）下。 图1：Gram’s stain（1000×）图2：染色试验 三、分离培养 1实验原理：四区划线法是把混杂着在一起的微生物或同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养繁殖后生成个菌落。有时这些单菌落并非由单个细胞繁殖而来，故必须反复分离多次才能得到纯种。其原理是微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。
《水产微生物学》试卷 A卷闭卷适用专业：水产09级、水产（营） 姓名：学号：专业：班级：座位号： 一、名词解释 colony：菌落）：由一个或者数个同种细菌(或其他微生物)在固体培养基上生长繁殖而形成的肉眼可见的，具有一定形态的独立培养物群体，也叫克隆。 1. 2.免疫：生物机体识别自己和异己、排除异己，维持自身稳定和平衡的保护性反应。 3.抗原抗体反应：抗原与相应的抗体无论在体内或者体外相遇，均可发生的各种特异性免 疫反应。 MLD：能使特定的实验动物感染后一定时限内死亡的最小的活的微生物量或者毒素量。 4. 外毒素：外毒素是病原菌在生长繁殖期间分泌到周围环境中的、抗原性强毒性也强的一种蛋白质类代谢产物，主要由革兰氏阳性菌产生，少数革兰氏阴性菌也能产生，其活性不稳定，对热和某些化学物质敏感，容易受到破坏。 5. 病毒：目前个体最微小，，结构最简单的生命形式，仅具有一种核酸，缺少完整酶系不能单独完成物质代谢，不能在人工培养基上生长，只能在特定的动物体内一定部位的活的细胞中依靠核酸复制生长繁殖和遗传变异的非细胞结构微生物。 6. 二、填空 1 微生物的分类：螺旋体真菌放线菌细菌（0. 2 — 800 μm）立克次氏体（0. 3 — 2.0 μm）衣原体（0.2 — 0.3 μm）霉形体（0.2 — 0.25 μm）病毒 2 是微生物学之父，是第一个分离出来的水生细菌。 3 细菌的特殊结构有：A荚膜B微荚膜C黏液层D鞭毛E纤毛F芽孢 4 免疫的功能有; 防御感染,自身稳定,免疫监视. 5：免疫球蛋白有： 6：根据细菌的呼吸类型，可以把细菌分为：
7：免疫的过程为： 三、选择题 1：鱼体内主要的免疫球蛋白是： 四：多选 五：判断题 六：解答题： 1 鱼类抗体产生特点。 2 细菌的分类依据。 3 细菌生长曲线的特点。 4 病毒复制的过程。 四、论述题： 1.临床上有一嗜水气单胞菌疑是病例，请你设计一个实验验证。
微生物学实验 实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒 一、实验目的 了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。 三、试剂与器材 1.器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天 平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。 2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂 四、实验内容 1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒 压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、关键步骤及注意事项 1.要严格按配方配制。 2.调pH不要过头。
3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC 以下放物、取物。 4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零 取物。 5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快， 滤膜要注意清洗保存。 六、思考题 1.培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是 无菌的? 2.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么? 3.培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么? 4.培养基的配制原则是什么? 实验二土壤中微生物分离纯化培养 一、实验目的 掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。 二、实验原理 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法稀释涂布平板法步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落；平板划线法步骤：倒平板－标记培养基名称－划线。 三、试剂与器材 1.器材盛9m1无菌水的试管、盛90m1无菌水并带有玻璃珠的三角 烧瓶、无菌玻璃涂棒、无菌吸管、接种环、酒精灯、无菌培养皿、显微镜、血细胞计数板等。 2.试剂牛肉膏蛋白胨培养基，高氏1号培养基，查氏培养基 四、实验内容
《水产微生物学》复习题（10水本）20120606 第一章二、简答题 2、微生物有哪些主要特性？ 1体形微小.结构简单 2 种类繁多，分布广泛 3 群居混杂，相生相克4 生长繁殖快，适应能力强 5 生物遗传性状典型，技术体系完善。 3、微生物有哪些主要作用？ 益处：1推动自然界物质循环和能量流动 2 净化环境，维持生态平衡。3 维护人和动物健康 4 制造加工食品和工农业产品 5 用于生物科学研究和生物工程害处：1某些微生物可以引起人和动植物的疾病 2 毁坏农业产品，农副产品和生活用品。 三、填空题 1、微生物是个体最小的生物，其大小通常用 或表示。 2、单细胞微生物的和多细胞微生物的( )是微生物生长的标志，这一过程能在很短的时间内完成。 四、判断题 1、部分真菌为多细胞，有营养器官和繁殖器官的分化，但绝大部分的微生物（细菌、放线菌和部分真菌）为单细胞构造，病毒则不具备细胞结构，类病毒仅是一个无蛋白质外壳的游离的DNA分子。 第二章 一、名词解释 1、细菌：是一类具有细胞壁与核质的单细胞微生物。细菌个体微小，结构简单，无成形的细胞核，无完整的细胞器 2、衰老型或退化型：细菌在老的培养物中会出现各种与正常形状不一样的个体，重新培养有些可以恢复，有些不可以恢复原来的形状。 3菌落：单细胞接种到固体培养基形成的一个肉眼可见的细胞群体。 4、芽孢：有许多细菌发育到某个阶段，在细胞内形成一个圆形或椭圆形的，对不良环境条件具有抗性的特殊结构称为芽孢，又称内生孢子。 二、填空题 1、细菌的外形比较简单，有、和3种基本类型。 2、细菌细胞均具有、、细胞质、等基本结构。 3、杀死芽孢最可靠的方法是。当进行消毒灭菌时，应以是否被杀死作为判断灭菌效果的指标。 4、鞭毛从细胞膜上长出，游离于细胞外，由、 和3个部分组成。 三、判断题 1、细菌的繁殖方式都是简单的裂殖。 2、在细菌培养中，常将细菌做固体培养基平板表面划线接种，以获得单个菌落。 3、细菌的大小介于动物细胞与病毒之间。 4、各种细菌细胞壁的聚糖骨架均相同。 四、问答题：3.比较革兰氏阳性菌和阴性菌细胞壁的结构及化学组成的差异。
微生物实验教案 实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察 一、实验目的 以染色玻片为例,熟练掌握显微镜油镜的使用方法。 二、实验原理 1 显微镜油镜使用的原理 (1）光学部分：接目镜、接物镜、照明装置（聚光镜、虹彩光圈、反光镜等）。它使检视物放大, 造成物象.（2）机械部分: 镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。它起着支持、调节、固定等作用。2显微镜的放大倍数和分辨率（1）放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 （2）显微镜的分辨率：表示显微镜辨析物体（两端)两点之间距离的能力，可用公式表示为: D=λ/2n·sin（α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离. λ：可见光的波长（平均0。55μm） n: 物镜和被检标本间介质的折射率。 a：镜口角（即入射角）。3油镜使用的原理 油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 三、实验材料 1显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、酒精灯、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水等。 2枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的玻片染色标本。 四、实验方法与步骤 (1）用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。 （2）调节光亮度. (3）低倍镜观察：先粗调再微调至物象清晰。 （4）转入中倍、高倍观察，每一不只需调微调旋纽即可看到清晰的物象。 （5）油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，旋转转换器,在标本中央滴一滴香柏油,使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。 （6)绘出所观察到的细菌形态图像。 （7)、换片:另换新片观察，必须从（3）步开始操作。
实验一实验室和人体表面微生物的检查 一实验目的 1 证明实验室环境与体表存在微生物 2 比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型 3 体会无菌操作的重要性 二实验原理 平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，1-2d内每一菌体能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小、表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑等。因此可通过平板培养基来检查环境中微生物的数量和类型。 三、器材 1、培养基牛肉膏蛋白胨琼脂平板 2、仪器或其他用具无菌水、灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯，记号笔，废物缸。 四、操作步骤 1、写标签 任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号（包括班级、姓名、日期、样品来源等），字尽量小些，写在皿底的一边，不要写在当中，以免影响观察结果。 注：培养皿的记号一般写在皿底上，如果写在皿盖上，同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时容易混淆。 2、实验室细菌检查 （1）空气 将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在实验台上，移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中，将另一块肉膏蛋白胨琼脂平板放在洁净工作台内或无人走动的实验室中，移去皿盖，1h后盖上两个皿盖。 （2）实验台 ①用记号笔在皿底外面中央画一直线，再在此线中间处画一垂直线。 ②取棉签 左手拿含有棉签的试管，在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞，将其取出，将管口很快地通过酒精灯的火焰，烧灼管口；轻轻地倾斜试管，用右手的拇指和食指将棉签小心地取出。放回棉塞，并将空试管放在试管架上。 ③弄湿棉签 左手取灭菌水试管，如上法拔出棉塞并烧灼管口，将棉签插入水中，再提出水面，在管壁上挤压一下以除去过多的水分，小心将棉签取出，烧灼管口，放回棉塞，并将灭菌水试管放在试管架上。 ④取样将湿棉签在实验台面或门旋钮上擦拭约2cm2的范围。 ⑤接种在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿开启成一缝。再将棉签伸入，在琼脂表面顶端接种（滚动一下），立即闭合皿盖。将原放棉签的空试管拔出棉塞，烧灼管口，插入用过的棉签，将试管放回试管架。
水产微生物学试题 一、选择题（每小题2分，共计20分）。 1．微生物是最小生物的总称，但不包括（）。 A 螺旋体 B 立克次氏体 C 衣原体 D 原虫 2．测定细菌大小的常用单位是（）。 A nm B μm C mm D pm 3．一个细菌芽胞重新形成细菌繁殖体的数目是（）。 A 一个 B 二个 C 三个 D 四个 4．芽胞的形成是细菌的（）。 A 休眠结构 B 繁殖形式 C 某一发育阶段 D 保护组织 5．细菌的繁殖方式是（）。 A 有丝分裂 B 二分裂法 C 出芽繁殖 D 复制方式 6．紫外线杀菌作用的机制是（）。 A 破坏蛋白质 B 干扰核酸复制 C 破坏细胞壁 D 改变渗透压7．用于预防免疫的抗原物质包括（）。 A 菌苗 B 疫苗 C 类霉素 D A+B+C 8．噬菌体是寄生于细菌的（）。 A 衣原体 B 真菌 C 病毒 D 支原体 9．细菌在微生物分类系统中属于（）。 A 动物界 B 植物界 C 原生生物界 D 病毒界 10．质粒是细菌染色体外的遗传物质，它是由（）组成。 A 双股闭合环状DNA B 线状DNA C 双股线状RNA
二．填空题（每小题2分，共计16分） 1．细菌、放线菌、螺旋体等在微生物分类学中属于，真菌属于，病毒属于。 2．细菌的基本结构包括，特殊结构包括 。 3．核质也称为，其主要成分为。4．病毒只有在显微镜下才能观察，其大小用 表示。 5．病毒的结构包括和。 6．根据微生物所需的营养来源不同，可将微生物分为两大类型。 7．免疫细胞主要包括等。 8．根据免疫球蛋白的结构不同，可以分为 五类。 三．名词解释（每小题4分，共计24分） 1.质粒 2.原核细胞 3.菌落 4.转化 5.抗体