术前化疗对进展期胃癌细胞凋亡的影响
梁
辉1,陈国玉1,俞学明1,冯振卿
2
(1.南京医科大学第一附属医院,江苏南京210029;2.南京医科大学病理教研室,江苏南京210029)
摘要:[目的]研究术前化疗对进展期胃癌细胞凋亡的影响。[方法]21例胃癌患者术前静脉滴注52氟尿嘧啶150m g /k g ?d ,术中取胃癌组织标本,应用3′2OH 末端标记法(T UNE L )检测细胞的凋亡率(AI ),与非化疗组比较。[结果]术前应用52Fu 组总的T UNE L 指数为(8.6±3.8)%,对照组总的标记指数为(5.4±2.6)%,差异有显著性(P <0.05);52Fu 诱导作用与细胞分化有关。52Fu 诱导胃癌细胞凋亡有剂量依赖性。[结论]术前应用52Fu 辅助化疗可明显诱导进展期胃癌细胞凋亡,具有一定的临床应用价值。
关键词:胃肿瘤;细胞凋亡;药物疗法;氟尿嘧啶中图分类号:R735.2文献标识码:A 文章编号:1671-170X (2001)04-0231-02
T he E ffect of Preo p erative Chem othera py on Cell A p o p tosis in Advanced G astric Carcinoma
LIANG Hui ,CHEN G uo 2y u ,Y U Xue 2m in g ,et al.
(The Fir st A ff iliated H os p ital o f Nan j in g M edical Univ er sit y ,Nan j in g 210029,China )
收稿日期:2001-03-27
目前临床胃癌仍以中晚期为主,为提高胃癌的
切除率,改善预后,临床上倡导以手术为基础的综合治疗,其中术前化疗受到广泛关注,术前化疗主要用于中晚期胃癌,而化疗药物对于肿瘤细胞的作用主要是通过诱导癌细胞凋亡的途径。体外细胞培养验证了多种药物和理化因素可诱导胃癌细胞凋亡,术前应用52氟尿嘧啶(52Fu )诱导进展期胃癌细胞凋亡国内未见报道。本研究探讨其诱导凋亡的规律,报道如下。
1
材料与方法
1.1
一般资料
2000年1月～2000年12月收治的胃癌患者,随机进入术前化疗组(术前化疗+根治术)21例。化疗组中男性15例,女性6例,平均年龄54.6岁。对于肝肾功能异常,恶液质,未能根治以及重度贫血,年龄>70岁的患者不入组。
所有病人术前均经病理确诊,术后有病理诊断,
临床资料完整,均为腺癌。
52Fu 应用方法:按150m g /k g ?d 计算用量,以0.25g 为最小剂量单位,静脉滴注至术前一天,病人最长滴注5天。
1.2DNA 原位末端标记法(T UNE L )
[1]
术中标本切下后即取癌组织,以10%中性甲醛固定,石蜡包埋,切片厚度4μm 。试剂盒购自博士德公司,严格按说明操作。1.3凋亡指数计算(AI )
随机记数5个高倍镜的肿瘤细胞共500个,计算每100个细胞中阳性细胞数即凋亡指数(AI )。1.4统计学方法
各组数值以均数±标准差(x ±s )表示,显著性检验采用t 检验。
2
结果
2.1
胃癌组织细胞凋亡的观察
HE 染色下,凋亡细胞散在分布于胃腺上皮内,表现核固缩、碎裂。末端标记后,凋亡细胞核呈棕色或棕褐色,多位于核膜上,或形成凋亡小体,部分胞
Abstract :[Pur p ose ]T o stud y the effect of p reo p erative chem othera py on cell a p o p tosis in advanced g astric carcinom a.[M ethods]52Fu 150m g /k g ?d w as adm inistered intravenoul y p reo p eration 21p atients.T he a p o p tosis index of g astric carcinom a cells w as evaluated b y in situ T UNE L and com p ared betw een p re -and non 2chem othera py g rou p .[Results]T he AI w as (8.6±3.8)%in p re 2chem othera py g rou p and (5.4±2.6)%in control
g rou p .T here w as si g nificant difference betw een tw
o g rou p s (P <0.05).T he induction of a p o p tosis b y 52Fu w as associated w ith dosa g e and g rade.[C onclusions]T his stud y su gg ests that the a p o p tosis m a y be induced b y p reo p erative adm inistration 5
2Fu in advanced g astric carcinom a which has the value of clinical a pp lication.
K e y w ords :g astric neo p lasms ;a p o p tosis ;dru g thera py ;fluorouracil
[1]
[2][3]
[4]
[5]
浆散在阳性。胃癌术前化疗组总标记指数为(8.6±3.8)%。
细胞分化程度与诱导凋亡的关系,52Fu 用量与凋亡率的关系以及肿瘤浸润与诱导的关系见表1、2、3。
3讨论
52Fu 具有抑制肿瘤细胞胸腺嘧啶,破坏DNA 稳定性的作用,52Fu 抗肿瘤作用主要通过改变凋亡相关基因表达,诱导程序性死亡而实现,探索52Fu 诱导在胃癌凋亡的规律,有助于指导术前化疗。
本研究显示52Fu 术前应用可明显提高进展期胃癌细胞凋亡率,而且52Fu 对分化较好的细胞诱导作用较强,对于分化差的低分化腺癌及粘液腺癌的诱导与非化疗组比较无明显增强(P >0.05),体外细胞培养证实[2]52Fu 诱导作用与凋亡基因bax 激活有关,在胃癌组织中,癌细胞分化越差bax 表达越弱,bax 表达阴性则化疗耐药明显[3],本组标本仍较少,但也表现出明显的趋势,与临床实际情况相符,
即恶性度越高化疗效果越差。本组有淋巴结转移与无淋巴结转移之间的诱导作用不同,但两者无显著性差异(P >0.05),是否与化疗持续的时间有关,尚需进一步研究。
52Fu 诱导凋亡具有剂量依赖性,本组当52Fu 总量>3.0g 时与低剂量组有显著性差异(P <0.05),低剂
量组与非化疗组之间无显著性差异,Inadan [4]就裸鼠内移植胃癌细胞株进行52Fu 诱导,发现时间延长,凋亡细胞数增加,至48小时达38%凋亡率,不仅有总剂量依赖性也有时间依赖性。提示临床应用52Fu 诱导凋亡应持续给药,而且达到一定的剂量才能达到目的。52Fu 半衰期10～20分钟,持续24小时滴注可能获事半功倍效果,是否有总量的上限有待进一步研究。
众所周知肿瘤负荷与化疗效果负相关,即肿瘤越小,效果越好。本组化疗显示肿瘤侵犯越深广,52Fu 诱导作用越弱,肿瘤细胞群是由敏感的和耐药的克隆混合组成,晚期肿瘤凋亡率低,考虑是否与耐药克隆增强有关;同时也说明肿瘤细胞自然凋亡可能是肿瘤发生的早期事件,晚期由于肿瘤细胞自身凋亡基因的改变,外在表现为耐药基因表达改变,而早期化疗介入可能更有利于诱导凋亡,术前化疗可能阻断耐药克隆的发展,增加化疗敏感性。也证实术前化疗对于残存的微小病灶诱导作用更强,有助于减少胃癌的腹腔转移与复发。
化疗中联合用药可获得相加或协同作用[5],不同药物在基因的不同表达阶段发挥作用,或者由蛋白至基因的反馈途径而相互影响,但多种药物术前化疗可能副反应增加,而对如期安全进行手术造成影响。本组病人均能耐受化疗,胃肠道反应和白细胞降低是主要的副反应,短期即可控制和恢复,手术并发症无明显增加。因此术前应用52Fu 是安全有效的。
术前化疗与术后化疗的作用和机理可能不相同,术前诱导癌细胞凋亡过程中,如何提高术前化疗的诱导作用,以及凋亡基因在凋亡过程中的改变,尚有待进一步深入研究。
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142.
近几年，胃癌疾病的发病率在逐渐增高，在日常的生活稍微不注意饮食上的规律，就很容易患者胃癌，因此大家一定要注意饮食，养成良好的饮食习惯。手术是胃癌患者首选的治疗方法，手术后可以辅助化疗治疗，有利于患者恢复健康，那么胃癌手术后患者做化疗的注意事项有哪些? 现在社会竞争较大，人们工作压力很重，长期不良情绪淤积，导致身体不适，尤其是胃部，发生胃胀、胃痛、胃酸等，长期如此，诱发胃癌。所以，保持精神的愉悦有助于身体的健康。 化疗患者大都存在不同程度的心理障碍，特别是首次化疗者，会出现恐惧，疑虑，紧张等心理。对次，我们应与患者及其家属建立相互信任关系，给病人以诚挚的安慰，鼓励。向病人家属介绍化疗知识。使他们了解可能出现的副作用，同时介绍一些同类病患的经验与认识，消除他们的顾虑，有信心的接受治疗，积极解答病人及家属提出的问题，帮助病人建立与疾病斗争的信心，积极配合治疗。 胃癌手术后做化疗的患者要注意饮食。从营养供给角度看，应满足高蛋白、维生素丰富、热量充足的要求。化疗期病人食欲都较差，又有恶心、呕吐等反应，饮食以稀软易消化、少量多餐为好，如果进食量不够，可通过输液补充葡萄糖、维生素、氨基酸，必要时给予白蛋白。 胃癌化疗后患者可进行适当的体育锻炼，特别是适当的有氧锻炼，如散步、打太极拳等，卧床患者可进行腹部按摩，可以自己主动按摩，也可以由家人或护理人员操作：将一手掌放在肚脐正上方，用拇指及四指指腹从右至左沿结肠走向按摩以促进肠蠕动及排便。 化疗可有效的控制症状，杀死术后残余的癌细胞，防止术后复发转移，但多数是短期效果好。而且化疗也有其毒副作用，在治疗的同时会给患者造成二次伤害，患者常会出现恶心呕吐，甚至骨髓抑制等严重并发症。为了降低化疗的副作用，保证胃癌治疗顺利进行，可在胃癌术后护理的同时配合中医中药进行综合治疗，来减轻化疗的副作用的同时，还能够增强疗效。 以上是对胃癌化疗的相关介绍，希望对胃癌患者有所帮助，胃癌患者化疗之后在生活上需要注意的细节有很多，希望患者在平时的生活中要对了解有关癌症方面的知识，做好预防工作。当发现了胃癌的时候，一定要及时的去医院检查和治疗，以免病情继续加重。最后祝愿早日康复!
胃癌术后放疗与放化疗的作用 对于根治切除术后的胃癌患者是否需加用辅助的放疗或放化疗具有争议。1994年英国胃癌协作组报道了第二次辅助治疗实验结果。436例病人参加了术后前瞻性随机对照试验，该试验对胃癌切除术后采用辅助放疗或化疗的效果进行观察。5年内共有372例病人死亡，其中7例死于手术并发症，327例死于肿瘤复发。遵循随机分层法研究，单纯手术145例，术后放疔153例，术后化疔138例，接受辅助治疗组与单纯手术组比较，生存率并无优势，单纯手术组5年生存率20%，手术+术后放疗组5年生存率12%，手术加术后化疗组5年生存率19%。研究结果否定了术后放疗和放化疗的作用。 但是近年研究的结果充分证实了术后放化疗的作用。2000年，Macdonald等报告了胃癌术后放化疗Ⅲ期临床试验结果。该研究组(INT0116)556例胃癌和贲门腺癌患者均接受了根治性手术切除，患者被随机分成单独手术组和术后放化疗组，术后放化疗组照射区域为瘤床+区域淋巴引流区，照射剂量45Gy，单次照射剂量1.8Gy，；化疗为4周期的5-FU+CF，每月一次。经3年的随访，统计3年的无瘤生存率、总生存率和中位生存期，术后放化疗组和单独手术组分别是48%:31%(P=0.001)；50%:41%(P=0.03)；36个月：27个月。放化疗组较单纯手术组的3年无病生存率、3年总生存率和中位生存期分别提高了52%、35%和33%。术后放化疔组仅有3例(1%)患者出现了致死性毒性反应。 此外，研究者认真分析了英国胃肠协作组上述1994年的报告后发现，全组436例患者中有171例患者术后有肉眼或镜下肿瘤残留，而这些患者并未进行随机分组。术后放化疗组的153例患者，也只有104例(68%)接受了高于40.5Gy的照射，另有36例患者(24%)未接受任何放化疗。由于试验设计未考虑到肿瘤残留、放疗剂量等因素对预后的影响，使实验结果缺乏说服力。 Moetel等报道过一组前瞻性研究报告，共有62例伴有复发高危因素行根治性切除术的胃癌患者，随机分成两组，一组23例单纯手术治疗，另一组39例术后接受了37.5Gy/18f/4~ 5w放射治疗和5-FU+CF化学治疗。实验结果综合治疗组患者，局控率61%，5年总生存率23%；对照组局控率46%，5年总生存率4%；综合治疗组患者，无论是局控率还是5年总生存率均较单纯手术组为佳。该试验提示即使是较低剂量的术后放化疗同样可以提高肿瘤完全切除但有复发高危因素胃癌患者的局控率和生存率。 目前新的放化疗方案的临床试验正在进行，希望进一步提高术后的化疗疗效，降低毒性反应；通过新的放射源、放射技术、放射增敏剂和放射保护剂的应用，提高肿瘤照射剂量，
胃癌细胞凋亡基因 西安国医肿瘤医院研究人员通过大量的研究分析发现，胃癌细胞凋亡是有相关基因控制的，目前发现的有以下三个基因：bcl-2基因、Bax和Fas/FasL。下面来详细介绍： 1.bcl-2基因 bcl-2基因编码26kD的膜蛋白，是第一个被确认有抑制凋亡作用的基因。bcl-2基因激活、过表达可抑制细胞凋亡，从而使细胞增殖和凋亡不平衡，而且会使具有遗传改变又得不到修复的细胞免于死亡而进入细胞循环，多种遗传成分改变可导致肿瘤的发生。因此，bcl-2在肿瘤发生发展中起着重要的作用。 乳腺癌中，高表达的Bcl-2与乳腺癌细胞凋亡指数呈负相关，而且与有丝分裂指数呈正相关，提示在细胞增殖活跃期，Hcl-2阳性细胞凋亡减少，即Bcl-2过表达影响了细胞凋亡。Nakamum检测了肠型胃癌、胃腺瘤、肠化生及非化生胃黏膜，发现在肠化生中Bcl-2蛋白表达量最高(77.1%)，胃腺瘤(37.5%)和肠型胃癌(10.8%)中较低。 因而认为，Bcl-2蛋白的过表达主要是在胃癌的早期阶段起作用，使转化细胞逃避凋亡，以进一步积累其他基因的异常。Lauwers采用单克隆抗体124检测正常、伴有肠化生的萎缩性胃炎及异型增生胃黏膜，发现正常胃黏膜仅在胃小凹与腺体交接处增生的干细胞中有Bcl-2蛋白的微表达，而在肠化生黏膜的过增生区域及胃小凹表面分化不良的细胞中均可检测到Bcl-2，这些分化不良的细胞正是胃癌癌前病变的一个特征。 因此推测，胃黏膜受损后增生加快，导致一些分化不良的细胞出现，这些分化不良的细胞又因Bcl-2蛋白的过表达而逃避凋亡，呈现生长优势，细胞寿命延长，基因变异积累的机会增加，为进一步向恶性细胞转化提供了条件。 2.Bax Bax是第一个被分离到的Bcl-2家族成员之一，与Bcl-2的同源区主要集中在BH1和BH2区。Bax的功能与Bcl-2相对，可促进细胞的凋亡。Bax与Bcl-2在体内的表达呈部位互补形式。Bcl-2倾向于分布在生长细胞、增殖细胞，而Bax倾向于分布在终末分化细胞、退化细胞，在凋亡旺盛的细胞中表达更强。 国外Komatauin报道，在胃黏膜癌变的早期阶段，即已发生Bax的表达异常。
胃癌新辅助化疗的适应证选择 长治医学院附属和济医院普外科胡文庆 对于局部晚期胃癌患者，新辅助化疗有望使肿瘤降期、增加手术切除率、杀灭亚临床转移灶、降低肿瘤细胞活性、预防肿瘤播散、降低术后复发率等；而对于部分远处转移的晚期胃癌患者，新辅助化疗也有可能使转移灶缩小或消失，从而获得切除机会，甚至获得治愈可能。但目前就胃癌新辅助化疗的适宜人群和方案选择等尚未统一，需进一步研究和规范。 胃癌新辅助化疗的适应证目前尚未定论，有以肿瘤（T）为目标的新辅助化疗，也有淋巴结（N）为目标的新辅助化疗。国外正在研究的项目如日本的JCOG0002、JCOG0210和JC0G0501试验主要以4型胃癌和体积大的3型胃癌为对象，JCOG0001和0450试验是以大体积的N2-3期患者为研究对象。JACCRO GC01和ECRIN TC-NAC试验是针对T3的Ⅲ期胃癌。对于可切除胃癌、腹主动脉周围淋巴结阳性、浸润深度为T4者被认为适合进行新辅助化疗。新辅助化疗后，区域转移淋巴结的缩小能够完成肿瘤的R0切除，另外，浸润深度为T4者，新辅助化疗可以尽可能地避免联合脏器切除的可能。虽然胃癌伴有肝转移、腹膜转移和腹腔脱落细胞阳性的姑息手术、减量手术及化疗没有延长生存期的效果，但新辅助化疗后会增加根治切除的概率。谋求改善预后也可成为新辅助化疗的适应证。多数术前新辅助化疗主要还是放在复发和转移风险较高的患者治疗方面。 近年来，国内外开展了许多胃癌新辅助化疗方面的研究。有些正在进行中，从已经完成的一些研究看，结果还是令人鼓舞的，新辅助化疗的有效率可达50%～70%，有的甚至更高。然而，大家知道，胃癌的化疗单药有效率约为20%，联合用药要好于单药使用，但总有效率并不高。近年来胃癌的药物治疗方面并没有突破性进展，这也是多年来困扰胃癌治疗的一个难题。如果设计的胃癌新辅助化疗研究适用对象不加以选择，势必造成部分有可能行根治手术的患者，如果在经过一段时间的化疗后，对化疗或该方案不敏感，反而丧失了根治性手术
D 化疗养生 HEALTHLIFE|养生之道 中需按大剂量MTX加用CF解救法用。该方案曾作为欧洲癌症治疗研究组的“黄金方案”，获得RR为32%～40%之效，这本是基于对FAM(5-FU,ADM,MMC)的改进之制，因FAM曾被美国东部肿瘤协作组(ECOG)推荐为晚期胃癌的标准化疗方案，但经长期应用有效率仅29%～42%，中位生存时间(MST)5.5～9.0个月，近年应用已较少。而FAMTX的进一步研究表明其有效率及副作用方面均尚逊于ECF方案。 化疗产生的副作用会影响患者的身体情况，继而会影响化疗治疗的进度。所以可以服用稀牌胶囊来减轻化疗副作用，提高患者免疫力，让患者能更好的完成化疗。 男人内裤的健康小常识 1、上班以合身的四角型内裤或丁字内裤为宜，此两款比较能与西裤或牛仔裤等上班时最常穿的外裤“匹配”。 2、休闲在家中，宽松的平口裤当为首选，好处是可让平日紧压在裤子内的性器官自由活动。外出闲逛则以丁字型内裤为佳，可以减少较大的活动量（如较长距离行走）对性器官产生的摩擦。 3、运动时以透气性佳的运动短裤，或是近似于泳裤材质，贴身透气的紧身裤为好。目的是将大腿、胯间及性器官间的摩擦减至最低。另外，专为运动员设计的运动时穿的内裤也不错，特点是在性器官部分用一个立体剪裁的三角型罩杯托住，左右各有一条松紧托住臀部，可使你的臀部更阳刚。 4、出差或旅游，一次性的纸质或棉质内裤是最佳 胃癌术后化疗方案有哪些 胃癌化疗方案甚多且在不断变化中，这里仅就当前疗效较好，应用相对较广，有一定代表意义的部分扼要介绍，并酌情叙述其可供临床方案个体化时的药物与用法的变通。 1、ELF方案：足叶乙甙(E.Vp16)120mgΠm2，静脉点滴d1～3，亚叶酸钙(Lv.CF)300mgΠm2，静脉点滴d1～3，氟尿嘧啶(5-FU,F)500mgΠm2，静脉点滴d1～3每3～4周重复，每次Lv于5-FU前先给药。本方案利用3Lv 与5-FU的生化调节作用加强了疗效。有效率在50%左右，毒副作用较小，对不同情况患者适用面较广。 2、PFL方案：顺铂(PDD)33mgΠm2，静脉点滴d1,8,15，5-FU500mgΠm2，静脉点滴 d1,8,15Lv300mgΠm2，静脉点滴d1,8,15，每28d重复。Lv一般需在5-FU前应用。有报告者称晚期胃癌该方案观察22例有效率达59%，其中临床完全缓解率达14%。PFL方案是一个抗瘤谱颇广，实用中略加改良后成非常实用的方案。 3、EEPFL方案：足叶乙甙(E)40mgΠm2，静脉点滴d1，表阿霉素(E)10mgΠm2，静注d1，顺铂(P)25mgΠm2，CIVd1，5-氟尿嘧啶(5-FU)200mgΠm2CIVd1，亚叶酸钙(L)120mgΠm2，CIVd1，每隔7d重复，持续用药达12次。其中PDD5-FU 及Lv溶于生理盐水后，以输液泵持续输注24h。有报告观察42例有效率达71%，临床完全缓解率达26%。本方案为PFL+足叶乙甙、表阿霉素的每周方案，虽报告ⅢΠⅣ级骨髓抑制发生率低于10%,但结合国内情况应审慎应用，并需特别注意造血等方面的强力支持。 4、FAMTX(5-FU、ADM、MTX)方案：甲氨喋呤(MTX)1500mgΠm2，静脉滴注d15-FU1500mgΠm2，静脉注射d1ADM30mgΠm2，静脉注射d1，每28d重复。操作
【一般资料】 患者男性,62岁,因“上腹部隐痛不适1年余”于2018-08-23查胃镜提示贲门、胃体至胃窦见广泛溃烂及肉芽坏死，质硬，触之易出血，皱襞僵硬，活动度差。病理（本院，2018-08-23）：（胃角）低分化恶性肿瘤，倾向低分化腺癌。2018-08-25增强CT提示贲门及胃体部胃壁广泛增厚、腹腔淋巴结肿大、腹腔局部网膜增厚，造影提示考虑为皮革胃可能性大。考虑患者全胃增厚，皮革胃表现，胃周淋巴结多发肿大，考虑转移可能大，故手术可能不能根治性切除，并且长期疗效差，建议行辅助化疗后复查决定何时手术治疗。2018-08-27始反复出现呕血，予输血、止血、生长抑素等治疗，2018-08-31行“经股动脉介入下胃血管栓塞术”，后未再出血，于2018-09-08、2018-10-04行“奥沙利铂0.25D1+卡培他滨2.0bidD1-14”方案化疗2次。2018-10查彩超：甲状腺双侧叶结节,TI-RADS3类,甲状腺右侧叶小囊肿,TI-RADS2类,左侧锁骨上淋巴结稍大。增强CT：1、胃癌化疗后；2、腹腔淋巴结肿大、腹腔局部网膜增厚；3、腹盆腔积液；4、右肾代谢异常；右侧输尿管扩张、下段增厚并异常强化，考虑转移； 5、双肾囊肿；肝血管瘤； 6、肝脏乏血供病变--转移不除外，建议随访； 7、两肺微结节；迷走右锁骨下动脉； 8、甲状腺结节。10-30在B超引导下穿刺抽出250ml洗肉水样液体，腹水常规：单个核细胞比例0.27，多核细胞比例0.73，细胞计数4.100(*10^9/L)，李凡它试验阳性+。腹水生化检查:乳酸脱氢酶269(U/L)↑，腺苷酸脱氨酶13(U/L)，氯103.2(mmol/L)。腹水癌胚抗原159.8(ng/ml)↑。
术前化疗对进展期胃癌细胞凋亡的影响 梁 辉1,陈国玉1,俞学明1,冯振卿 2 (1.南京医科大学第一附属医院,江苏南京210029;2.南京医科大学病理教研室,江苏南京210029) 摘要:[目的]研究术前化疗对进展期胃癌细胞凋亡的影响。[方法]21例胃癌患者术前静脉滴注52氟尿嘧啶150m g /k g ?d ,术中取胃癌组织标本,应用3′2OH 末端标记法(T UNE L )检测细胞的凋亡率(AI ),与非化疗组比较。[结果]术前应用52Fu 组总的T UNE L 指数为(8.6±3.8)%,对照组总的标记指数为(5.4±2.6)%,差异有显著性(P <0.05);52Fu 诱导作用与细胞分化有关。52Fu 诱导胃癌细胞凋亡有剂量依赖性。[结论]术前应用52Fu 辅助化疗可明显诱导进展期胃癌细胞凋亡,具有一定的临床应用价值。 关键词:胃肿瘤;细胞凋亡;药物疗法;氟尿嘧啶中图分类号:R735.2文献标识码:A 文章编号:1671-170X (2001)04-0231-02 T he E ffect of Preo p erative Chem othera py on Cell A p o p tosis in Advanced G astric Carcinoma LIANG Hui ,CHEN G uo 2y u ,Y U Xue 2m in g ,et al. (The Fir st A ff iliated H os p ital o f Nan j in g M edical Univ er sit y ,Nan j in g 210029,China ) 收稿日期:2001-03-27 目前临床胃癌仍以中晚期为主,为提高胃癌的 切除率,改善预后,临床上倡导以手术为基础的综合治疗,其中术前化疗受到广泛关注,术前化疗主要用于中晚期胃癌,而化疗药物对于肿瘤细胞的作用主要是通过诱导癌细胞凋亡的途径。体外细胞培养验证了多种药物和理化因素可诱导胃癌细胞凋亡,术前应用52氟尿嘧啶(52Fu )诱导进展期胃癌细胞凋亡国内未见报道。本研究探讨其诱导凋亡的规律,报道如下。 1 材料与方法 1.1 一般资料 2000年1月～2000年12月收治的胃癌患者,随机进入术前化疗组(术前化疗+根治术)21例。化疗组中男性15例,女性6例,平均年龄54.6岁。对于肝肾功能异常,恶液质,未能根治以及重度贫血,年龄>70岁的患者不入组。 所有病人术前均经病理确诊,术后有病理诊断, 临床资料完整,均为腺癌。 52Fu 应用方法:按150m g /k g ?d 计算用量,以0.25g 为最小剂量单位,静脉滴注至术前一天,病人最长滴注5天。 1.2DNA 原位末端标记法(T UNE L ) [1] 术中标本切下后即取癌组织,以10%中性甲醛固定,石蜡包埋,切片厚度4μm 。试剂盒购自博士德公司,严格按说明操作。1.3凋亡指数计算(AI ) 随机记数5个高倍镜的肿瘤细胞共500个,计算每100个细胞中阳性细胞数即凋亡指数(AI )。1.4统计学方法 各组数值以均数±标准差(x ±s )表示,显著性检验采用t 检验。 2 结果 2.1 胃癌组织细胞凋亡的观察 HE 染色下,凋亡细胞散在分布于胃腺上皮内,表现核固缩、碎裂。末端标记后,凋亡细胞核呈棕色或棕褐色,多位于核膜上,或形成凋亡小体,部分胞 Abstract :[Pur p ose ]T o stud y the effect of p reo p erative chem othera py on cell a p o p tosis in advanced g astric carcinom a.[M ethods]52Fu 150m g /k g ?d w as adm inistered intravenoul y p reo p eration 21p atients.T he a p o p tosis index of g astric carcinom a cells w as evaluated b y in situ T UNE L and com p ared betw een p re -and non 2chem othera py g rou p .[Results]T he AI w as (8.6±3.8)%in p re 2chem othera py g rou p and (5.4±2.6)%in control g rou p .T here w as si g nificant difference betw een tw o g rou p s (P <0.05).T he induction of a p o p tosis b y 52Fu w as associated w ith dosa g e and g rade.[C onclusions]T his stud y su gg ests that the a p o p tosis m a y be induced b y p reo p erative adm inistration 5 2Fu in advanced g astric carcinom a which has the value of clinical a pp lication. K e y w ords :g astric neo p lasms ;a p o p tosis ;dru g thera py ;fluorouracil
胃癌围手术前病人的生理准备 （一）胃癌围手术前再诊断要点 详细询问病史，进行全面体格检查和常规化验检查，对诊断、病人的全身状况以及能否耐受手术等作出正确判断。胃镜检查是当前确定胃癌诊断的最主要的手段，可直接观察到胃癌病变的部位、大小、形态及范围。通过胃镜取肿瘤组织行病理检查，可确定肿瘤的病理类型与分化程度。自纤维胃镜临床应用以来，早期胃癌的诊断率有明显提高。上部胃癌通过X线检查可以判断肿瘤向食管浸润的状况，但对于HOIT mannⅣ型胃癌，由于癌细胞多在黏膜下层浸润，黏膜变化很少，即使用内窥镜和X线检查也难以判断。这时采用血管造影和超声内窥镜技术对诊断往往有帮助。采用钡、空气双重对比造影有助于发现胃癌的早期病变。有些部位的胃癌容易向胰腺、肝脏、横结肠等浸润。 CT检查最常用于了解胃壁和胰腺间脂肪层存在与否，作为诊断胰腺有无受侵的依据。血管造影除了对其他脏器浸润的诊断有较高实用价值之外，还可以在术前了解主要血管分支的走行和有何变异，对安全施行Appleby手术是必不可少的检查。术前为掌握淋巴结转移的程度，通常用超声波检查第7、8、9、12、16组淋巴结，CT检查第14、16组淋巴结，对判别无转移的准确率很高．从而能决定是否施行D4手术。B超或CT检查可了解肝脏及其他部位有否转移病灶及淋巴结转移，有助于确定手术方式。女性病人应作妇科检查，男性病人作肛门指诊，以了解盆腔有无肿瘤转移。
明确了胃癌诊断，但尚未发现远处转移者，应积极采取手术治疗，争取根治性切除。对已有转移，但估计尚可切除原发病灶者，亦可行姑息性切除术或先行化疗后再手术。通过检查未明确诊断，但高度怀疑肿瘤者，或位于贲门及胃底部性质不明的病变，应行剖腹探查术，以明确诊断及处理方法。对胃癌穿孔、大出血或幽门梗阻者，应及时行急诊手术。 （二）血液和主要脏器功能的检查和准备 1.血液 (1)末梢血象，红细胞在3xl012/L（300万/mm3）以上，血色素在85—95g/L以上，白细胞总数和分类、血小板均在正常范围内； (2)出凝血时间在正常范围内； (3)血生化检查，血浆总蛋白6.0g／dl，白蛋白30g／dl、A/G0.8以上，血浆电解质（钾、钠、氯）在正常范围内。对低蛋白血症、电解质异常、脱水等均需纠正以提高手术的安全性。 2.心血管疾患的检查 通过测量血压、脉搏和心电图检查便能大致了解胃癌病人的循环系统功能状况，若有异常则请有关专科医师、麻醉医师会诊，制定对策。充血性心力衰竭、急性心肌梗死、活动性心肌炎、心包炎、细菌性心内膜炎、急性阵发性或失控制的心律不齐等均列为手术禁忌。危险性虽较小但需充分纠正治疗后始能手术的相对禁忌证有房室束传导阻滞、不完全性传导阻滞、高血压、代偿充分的心瓣膜病、控制好的心律不齐、不严重的心绞痛、已愈合的心肌梗死等。对既往有冠心
胃癌的3种手术方式： 1、根治性手术： 是以根治为目的的一种手术方式，主要用于胃癌早期肿瘤体积较小、没有出现转移的患者，但是根治性手术治疗并不能保证一定根除，胃癌术后患者需要积极的联合中医等，巩固疗效，防止复发和转移。 2、短路手术： 如果肿瘤不能切除，而有幽门梗阻，可以通过胃空肠吻合术，解除梗阻，保证患者的进食，从而改善胃癌患者的生活质量，以便于接受其他的治疗。 3、姑息性手术切除： 对于胃癌晚期出现转移的患者，而局部肿瘤较大无法完整切除的，可以通过姑息性手术局部切除，进而控制病情、改善体质、延长生存期。胃癌术后需要积极的联合放化疗和中医治疗，从整体上控制病情，保证胃癌晚期治疗的顺利进行。 胃癌切除术后的注意事项有什么： 1、胃癌术后一定时期内要禁食。若为根治性胃大部切除术后，应持续胃肠减压2—3天，禁食3—4天。全胃切除后，应禁食5-7天。 2、胃癌术后可以适量活动。应视患者的具体情况而定，一般若患者状况稳定且无并发症则多鼓励尽早下床活动，以促进患者的恢复。
3、胃癌术后没有巩固治疗。胃癌患者手术后应按医嘱用药，定期检查。还应根据情况进行其他辅助治疗如中医药治疗，放化疗及免疫治疗等，并在辅助化疗期间加强补硒，元素硒可有效的活化患者的免疫机能，提升免疫力，加快患者术后恢复以及刀口的愈合，以及抑制肿瘤细胞DNA、RNA及蛋白质的合成，有效降低复发风险。 注意胃癌患者的吸收能力有所欠缺，补硒最好是补充有机麦芽硒，这个是目前硒发展的最高阶段，吸收转化较为出色，且对肠胃道零刺激。考虑到补充麦芽硒的产品有好有坏，建议大家在选择的时候，可参考目前康复期癌症患者常应用的硒维康片即可。 4、胃癌术后要注意吻合口瘘。全胃切除术后的吻合口瘘的发生率较高。术后几天内，应密切注意观察患者的具体状况。若出现腹痛、发热或腹膜刺激症状，应考虑感染或吻合口瘘的可能。一旦发生吻合口瘘，应禁食，行手术探查并引流的同时给予广谱抗生素以控制感染。 5、胃癌术后注意倾倒症候群。常发生于次全胃与全胃切除的患者。早期表现为，进食后5-30分钟，产生头晕、冒汗、苍白、心悸、腹胀、腹泻及恶心等；晚期症状发生于进食后2至3小时，系胰岛素释放过多所致。预防其发生一般采用以下方法：可以流质类的食物与固体食物分开进食，一般应相隔半个小时到一个小时。进食时宜采取半卧姿势或进食躺下休息15分钟左右。并注意多进食一些可排空的食物如瘦肉、豆腐等高蛋白、高脂肪类食物，少食淀粉等高糖食物。
·论著·2012年12月第9卷第34期 中国医药导报CHINA MEDICAL HERALD 胃癌在我国是最常见的恶性肿瘤之一，手术是其最有效 的治疗方法，对于术后复发失去再次手术机会的及晚期胃癌 患者，化疗仍是最有效的手段之一，但其疗效不尽人意，因为在消灭肿瘤细胞的同时，受其毒副作用影响而表现出较差的预后。因而寻求一种新的治疗方案迫在眉睫。肿瘤的靶向治疗基于分子水平，通过抑制相关蛋白或基因在信号转导通路、血管生成等途径发挥较强的抗肿瘤作用，且细胞毒性作莪术醇对人胃癌细胞凋亡、ＭＭＰ２、ＮＯ影响的初步探讨 徐立春陈海燕文洁陶亚玲 扬州大学医学院肿瘤防治研究中心，江苏扬州225001 [摘要]目的初步探讨莪术醇（Curcumol ）对人胃腺癌细胞（SGC-7901细胞）凋亡、基质金属蛋白酶（MMP2）、一氧化氮（NO ）的影响。方法将莪术醇溶于无水乙醇中，初始浓度为9mg/mL ，设实验1、2、3、4、5组，莪术醇的浓度分别是 7.5、15、30、60、120μg/mL ，并以含1%无水乙醇的培养液为对照组。采用台盼蓝（Trypan blue ）、噻唑蓝（MTT ）法检测SGC-7901细胞的活性及莪术醇对SGC-7901细胞抑制增殖的影响；用流式细胞仪（FACSCalibur ）检测莪术醇对SGC-7901细胞的凋亡率；用蛋白质印迹法检测莪术醇作用于SGC-7901细胞后，其MMP2的表达情况；NO 试剂盒检测莪术醇作用SGC-7901细胞后的细胞培养液上清的NO 含量。结果30μg/mL 的莪术醇在药物浓度与抑制肿瘤生长方面效果较佳，与对照组比较，其抑制肿瘤细胞增殖差异有统计学意义（P <0.05）；莪术醇实验组能促进细胞凋亡，与对照组比较差异有统计学意义（P <0.05）；莪术醇实验组作用细胞后，其MMP2蛋白表达明显下降，与对照组比较差异有统计学意义（P <0.05）；实验研究表明，随着莪术醇实验组浓度的增加，其细胞培养液上清中的NO 含量逐渐降低，与对照组比较差异有统计学意义（P <0.05）。结论30μg/mL 的莪术醇浓度是最佳药效组，它能显著抑制SGC-7901细胞的增殖，明显促进肿瘤的细胞凋亡，显著抑制MMP2的表达，降低细胞培养液上清中的NO 含量，从而发挥系列抗肿瘤作用。本研究从细胞分子水平探讨莪术醇治疗胃癌可能存在的部分机制，为临床应用莪术醇及其衍生物或结构类似物治疗胃癌提供理论与试验依据。 [关键词]莪术醇；SGC-7901；凋亡；基质金属蛋白酶；一氧化氮 [中图分类号]R000[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2012）12（a ）-0018-04 Preliminary discussion on effect of curcumol in apoptosis,MMP2and NO in SGC-7901cells XU Lichun CHEN Haiyan WEN Jie TAO Yaling Cancer Prevention Research Center,Medical College of Yangzhou University,Jiangsu Province,Yangzhou 225001,China [Abstract]Objective To discuss the effects of Curcumol on the apoptosis,MMP2and NO of human gastric cancer cells (SGC-7901cells).Methods Curcumol was dissolved in dehydrate alcohol and the initial concentration of Curcumol was 9mg/mL.Group 1,group 2,group 3,group 4and group 5were set up as experimental groups.The Curcumol concentrations were set as follows:7.5,15,30,60,120μg/mL,control group contained 1%dehydrate alcohol (dissolvent compare).The Trypan blueand method was used to analyze the cytoactive of SGC-7901;MTT assay was performed to study the inhibitory rate of SGC -7901cells proliferation;the metastasis of SGC -7901was described through the scratches experiment;the apoptosis rate were detected by FACSCalibur and the expression of Matrix metalloproteinase 2(MMP2)were detected by Western Blot.The content of NO in cell culture medium was detected by NO kit.Results Curcumol had a good effect on drug concentration and restrain the tumor growth in 30μg/mL,and compared with controls,it had significant difference in restrain the proliferation of tumor cell (P <0.05);Curcumol could promote the apoptosis,it showed significant difference when compared with controls (P <0.05);Curcumol could make the expression of MMP2protein descend to varying de -grees,it had significant difference when compared with controls (P <0.05);this research showed with the increasing of the concentration of curcumol,the content of the NO in the supernate gradually reduced,it had significant difference when compared with controls (P <0.05).Conclusion Curcumol in 30μg/mL is the best efficacy group,it can significantly inhib -it the proliferation of SGC-7901cell,significantly promote the tumor cell apoptosis,significantly inhibit the expression of MMP2,reduce the content of NO in supernate,and express the series antitumor function.This study discusses the possible mechanism of curcumol cure the stomach cancer from cell and molecular level;provide the basis in theory and experiment for clinical application that Curcumol and its derivatives or structure analogues treat stomach cancer. [Key words]Curcumol;SGC-7901;Apoptosis;MMP2;NO [基金项目]江苏省医学卫生重点基金资助项目（编号：K200511）。 [作者简介]徐立春，研究员，教授，主要从事肿瘤防治基础与临床方面的 研究。18
CHEMORADIOTHERAPY AFTER SURGERY COMPARED WITH SURGERY ALONE FOR ADENOCARCINOMA OF THE STOMACH OR GASTROESOPHAGEAL JUNCTION J OHN S. M ACDONALD , M.D., S TEPHEN R. S MALLEY , M.D., J ACQUELINE B ENEDETTI , P H .D., S COTT A. H UNDAHL , M.D., N ORMAN C. E STES , M.D., G RANT N. S TEMMERMANN , M.D., D ANIEL G. H ALLER , M.D., J AFFER A. A JANI , M.D., L EONARD L. G UNDERSON , M.D., J. M ILBURN J ESSUP , M.D., AND J AMES A. M ARTENSON , M.D. A BSTRACT Background Surgical resection of adenocarcino- ma of the stomach is curative in less than 40 percent of cases. We investigated the effect of surgery plus postoperative (adjuvant) chemoradiotherapy on the survival of patients with resectable adenocarcinoma of the stomach or gastroesophageal junction. Methods A total of 556 patients with resected ad-enocarcinoma of the stomach or gastroesophageal junction were randomly assigned to surgery plus postoperative chemoradiotherapy or surgery alone.The adjuvant treatment consisted of 425 mg of fluor-ouracil per square meter of body-surface area per day, plus 20 mg of leucovorin per square meter per day, for five days, followed by 4500 cGy of radiation at 180 cGy per day, given five days per week for five weeks, with modified doses of fluorouracil and leu-covorin on the first four and the last three days of ra-diotherapy. One month after the completion of radio-therapy, two five-day cycles of fluorouracil (425 mg per square meter per day) plus leucovorin (20 mg per square meter per day) were given one month apart. Results The median overall survival in the surgery-only group was 27 months, as compared with 36months in the chemoradiotherapy group; the hazard ratio for death was 1.35 (95 percent confidence inter-val, 1.09 to 1.66; P=0.005). The hazard ratio for relapse was 1.52 (95 percent confidence interval, 1.23 to 1.86;P<0.001). Three patients (1 percent) died from toxic effects of the chemoradiotherapy; grade 3 toxic effects occurred in 41 percent of the patients in the chemo-radiotherapy group, and grade 4 toxic effects occurred in 32 percent. Conclusions Postoperative chemoradiotherapy should be considered for all patients at high risk for recurrence of adenocarcinoma of the stomach or gas-troesophageal junction who have undergone curative resection. (N Engl J Med 2001;345:725-30.) Copyright ? 2001 Massachusetts Medical Society. From the St. Vincent’s Comprehensive Cancer Center, New York (J.S.M.); the Kansas City Community Clinical Oncology Program, Kansas City, Mo. (S.R.S.); the Southwest Oncology Group Statistical Center, Se-attle (J.B.); the University of Hawaii, Honolulu (S.A.H.); the University of Illinois College of Medicine, Peoria (N.C.E.); the University of Cincinnati Medical Center, Cincinnati (G.N.S.); the University of Pennsylvania Cancer Center, Philadelphia (D.G.H.); the M.D. Anderson Cancer Center, Houston (J .A.A.); the Mayo Clinic, Rochester, Minn. (L.L.G., J.A.M.); and the Uni-versity of T exas at San Antonio, San Antonio (J.M.J.). Address reprint requests to the Publications Office, Southwest Oncology Group (SWOG-9008), Op-erations Office, 14980 Omicron Dr., San Antonio, TX 78245-3217. HE curative treatment of stomach cancer re-quires gastric resection. 1 However, most pa-tients are not cured by this surgery. A review of data from the National Cancer Data Base on 50,169 patients in the United States who under-went gastrectomy between 1985 and 1996 found a 10-year survival rate of 65 percent among patients with stage IA disease (tumor confined to the gastric mucosa), but the 10-year survival rates among those T with more advanced disease ranged from 3 percent to 42 percent, depending on the extent of disease. 2 The high rate of relapse after resection makes it im-portant to consider adjuvant treatment for patients with stomach cancer. However, adjuvant chemother-apy has not resulted in higher survival rates than sur-gery alone. 3-5 Local or regional recurrence in the gastric or tumor bed, the anastomosis, or regional lymph nodes occurs in 40 to 65 percent of patients after gastric resection with curative intent. 6-9 The frequency of such relaps-es makes regional radiation an attractive possibility for adjuvant therapy. A phase 3 trial 10 found clinically limited but statistically significant improvement (P=0.009) in survival after preoperative regional radio-therapy in patients with cancer of the gastric cardia.Small phase 3 trials have suggested that survival is im-proved after postoperative radiation, with or without fluorouracil, 11 and after intraoperative radiation. 12 Phase 3 trials have found that 12 to 20 percent of patients with residual or locally unresectable gastric cancer are long-term survivors after treatment with radiation plus fluorouracil. 13,14 We undertook a study to determine the efficacy of chemoradiotherapy in pa-tients with resected gastric cancer. The trial was initi-ated in 1991 to compare surgery followed by fluoro-uracil plus irradiation of the gastric bed and regional lymph nodes with surgery alone. METHODS Eligibility The eligibility criteria included histologically confirmed adeno-carcinoma of the stomach or gastroesophageal junction; complete resection of the neoplasm, defined as resection performed with curative intent and resulting in resection of all tumor with the margins of the resection testing negative for carcinoma; a classi-fication of the resected adenocarcinoma of the stomach or gastro-esophageal junction as stage IB through IVM0 according to the 1988 staging criteria of the American Joint Commission on Can-