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水稻种植专业合作社简介

水稻种植专业合作社简介
水稻种植专业合作社简介

水稻种植专业合作社简

Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】

湘潭县春静水稻种植专业合作社

二0一二年八月

一.合作社简介:

1.合作社简介:湘潭县春静水稻种植专业合作社成立于2009年,2010年在县工商局正式注册。合作社办公楼现建在河口镇板桥村。它位于湘潭县西大门,与湘潭市和县城易俗河仅一河之隔,紧临潭花公路,潭衡西线高速、107和320国道连接线。选址合理,交通便利。

湘潭县春静水稻种植专业合作社,现有工作人员77人,拥有固定资产300万,流动资金350万,流转到合作社的水田5596亩。种植双季水稻5300亩,百合296亩,开展农资经营全市布点350个终端服务站,年经营服务总收入达到1580万元。其中粮食480万元,农业生产资料1100万元,实现纯利102.5万元。合作社带动和服务农户数量多达4000余户。

合作社基地分布在我县排头、锦石、河口、石潭四个乡镇12个村近2000农户,成为了全县流转经营土地最多的专业合作社。

2.机构健全:春静水稻种植合作社2009年成立之初,就制定了规范的专业合作社章程,建立健全了完善的成员代表大会、理事会、监事会等制度,成立了监督机构,保障了合作社成员的知情权、决策权、监督权等民主权利,

实行独立的会计核算,严格落实财务会计制度,会计账簿,财务管理和盈余分配等规范科学完善,很好的保障了成员的经济利益。

3.人力资源保障。春静水稻种植合作社聘请的技术人员从事过多年农业技术研究。特别是有县政府、县农办、农业局、农机局的各专业技术人员的扶助,指导。他们拥有较高的理论水平和丰富的实践经验。使我社在水稻种植和农机推广上,取得突出成绩。

4.技术支撑。通过市县农业部门的大力扶持,在粮油站、植保站、土肥站的支持和培训,合作社已经全面掌握了农田土地结构的监测分析技术。制定了一套具体可行的土地监测办法及化肥、农药比例的配置、使用原则。以及双季种子种植搭配安排有较为规范的技术标准和科学的操作流程。

5.机械设备配套齐全。合作社自身投资180万元,购买插秧机5台(其中高速插秧机二台)、大型拖拉机3台、施肥机3台,平整机3台,收割机5台,手扶拖拉机34台、中型机滚船5台、收割机4台、育秧流水线1台(套),货运农用车4台、抬架式喷雾器34台、电动喷雾器300台、其他农机具112台、有近800台各类机械加入合作社。并有效的利用当地农机资源和当地农机大户签订了长期合作合同。实现了合作社生产的机械化和专业化。

6.成效显着。春静水稻种植合作社实施标准化生产,建立了五个统一的生产操作规程。即“统一品种、统一技术、统一防治、统一操作、统一指导”2009年3月至2012年,通过在石潭镇、河口镇、排头乡、锦石乡等四个乡镇5000多亩地的实施项目技术,实现年产水稻3975吨,总产值1080万元,农户人均增收400元,实现了优质双季水稻种植与农业机械化技术推广的预期目标,并打造了这四个乡镇区域内的生产示范基地,有较强的市场竞争力和市场信誉度。

二.合作社主要推广的品种和推广规模

1.优质双季稻种植的推广

早稻主要推广的品种为优质早稻湘早籼45号和早稻超级稻中嘉早17号。晚稻主要推广的品种为湘晚籼13号,湘晚籼12号,玉针香和农香18等“湘米”系列。坚持统一配种,统一浸种、催芽,集中育秧。合作社建有自己的自动恒温催芽破胸室,育秧大棚。依靠科学与创新从根源上杜绝了直播,实现了优质稻的增产增收。

2.推广规模

优质水稻种植以合作社为龙头,以土地流转为主,合作社2012年土地流转面积应达到5300亩,2013年预计达到10000亩,再进一步联络每个村组的种田大户一起扩大优质稻种植。尽量完成目标量30000亩优质稻种植。

2012年合作社继续加强和深圳诺普信农化公司、山东史丹利化肥公司、中央储备粮、省农科研究院的合作,做到产销一体化,继续为推广“湘米”品牌而努力。

三、社会的反响的认可:

合作社从成立至今,受到了各级政府的支持与认可。得到了村民的拥护。

2010年与中央储备粮湘潭直属库签订了长期产销合作合同。解决了合作社的稻谷哄干的后顾之忧。

2011年8月县农机局为了表彰合作社在农机机械的推广上作出的贡献特奖励了一套育秧自动流水线设备。

2011年10月省农科研究院领导来合作社考察,签订了12年的“湘米”品牌种子供应合约。

2011年10月山东史丹利化肥公司与合作社签订了总经销的代理合同。

四、合作社的主要困难。

(1)融资难,合作社在当地任何一银信部门都不能享有借款的优惠政策,这势必在一定程度上阻碍了合作社的进一步发展。

(2)技术短缺,合作社种植规模大,起步晚,自身工作人员正在培训提高之中,还急需专职技术人员全程指导。

实验室常用器材使用方法及注意事项

实验室常用器材使用方法及注意事项

实验室常见仪器使用方法及注意事项 一、常见的仪器 (一)初中化学实验常见仪器 反应容器可直接受热的:试管、蒸发皿、燃烧匙、坩埚等能间接受热的:烧杯、烧瓶、锥形瓶(加热时,需加石棉网) 常存放药品的仪器:广口瓶(固体)、细口瓶(液体)、滴瓶 (少量液体)、集气瓶(气体) 用加热仪器:酒精灯 计量仪器:托盘天平(称固体质量)、量筒(量液体体积) 仪分离仪器:漏斗 取用仪器:药匙(粉末或小晶粒状)、镊子(块状或较大颗粒)、胶头滴管(少量液体) 器夹持仪器:试管夹、铁架台(带铁夹、铁圈)、坩埚钳其它仪器:长颈漏斗、石棉网、玻璃棒、试管刷、水槽 不能加热:量筒、集气瓶、漏斗、温度计、滴瓶、表面皿、广口瓶、细口瓶等 1、试管 (1)、用途: a、在常温或加热时,用作少量试剂的反应容器。 b、溶解少量固体。 c、收集少量气体的容器 d、用于装置成小型气体的发生

器。 (2)、注意事项: a、加热时外壁必须干燥,不能骤热骤冷,一般要先均匀受热,然后才能集中受热, 防止试管受热不均而破裂。 b、加热时,试管要先用铁夹夹持固定在铁架台上(短时间加热也可用试管夹夹持)。 试管夹应夹在的中上部(或铁夹应夹在离试管口的1/3处)。c、加热固体时,试管口要略向下倾斜,且未冷前试管不能直立,避免管口冷凝水倒流 使试管炸裂。 d、加热液体时,盛液量一般不超过试管容积的1/3(防止液体受热溢出),使试管与桌面 约成45°的角度(增大受热面积,防止暴沸),管口不能对着自己或别人(防止液体喷出伤人)。反应时试管内的液体不超过试管容积的1/2。 2、烧杯用途:①溶解固体物质、配制溶液,以及溶液的稀释、浓缩 ②也可用做较大量的物质间的反应 注意事项:受热时外壁要干燥,并放在石棉网上使其受热均匀(防止受热不均使烧杯炸裂), 加液量一般不超过容积的1/3(防止加热沸腾使液体外溢)。

野外试验方案

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试验方案 一、试验目的 近年来,有关利用合理的水稻种植模式,尤其是水稻品种间栽或混作来增加稻田的生物多样性,从而控制水稻病虫害的研究报道不断增多,这方面的研究已成为国内外的一个热点,本次实验就是为了探究增加稻田生物多样性对害虫飞虱的影响,通过观察稻田生物多样性对飞虱繁殖力、抗药性、致害型、天敌数量、对水稻病虫害的等影响,从而去研究其中的相关影响机制。以期能减少化学农药的施用,减少环境污染,更好地去发展生态农业。 二、试验材料 由广东田联种业有限公司提供水稻种子,选取以下两种: 植优523:感温型三系杂交稻组合。早造平均全生育期130~132天。科高~106.3厘米,株型中散,分蘖力中强,穗大粒多。中抗稻瘟病,全群抗性频率%~%,对中B群、中C群的抗性频率分别为%~75%和85%~%;中抗白叶枯病(IV型菌3级、V型菌7级)。丰产性较好,中抗稻瘟病和白叶枯病,耐寒性中弱。 特优816:感温型三系杂交稻组合。早造平均全生育期131~132天。科高~115.6厘米,植株较高,株型中集,分蘖力和抗倒力中弱,剑叶较宽、长,穗大粒多,后期熟色好。高抗稻瘟病,全群抗性频率%,对中C群、中B群的抗性频率分别为%和%,田间监测结果表现抗叶瘟、高抗穗瘟;感白叶枯病,对C4菌群、C5菌群分别表现感和中感。 田间均无抗飞虱抗性表现。 三、试验设计 试验设三个处理,分别为A:单作植优523、B:单作特优816、混作植优523和特优816,其比例A:B=5:1设三次重复,每小区面积200 m2,总面积大概3亩左右。如下图所示

XX县XX水稻种植专业合作社典型材料

生产在家服务在社 大力创新农民合作社组织形式 ——XX县XX水稻种植专业合作社典型材料 一、基本情况 XX县XX水稻种植专业合作社位于XX县绥东镇大兴村XX 屯,于2013年7月9日注册登记,现拥有28名成员,其中理事长为村干部,其余27人为农民,合作社采取资金入股的方式,入股资金总额为253.5万元,现合作社水稻种植面积为5850亩。 二、运行情况 本合作社自2013年7月成立至今一直运行良好。全村拥有耕地面积6750亩,合作社入股土地覆盖率达86.7%。目前本合作社依照成员原来种植水稻作物的特点,现在主打水稻的种植与销售。我们通过合作社这种形式,真正的让这些种地大户合作起来,实现互惠共赢。本合作社采取统购统销、统分结合的生产经营管理方式。在统购统销方面,做到“五统一”、即统一购置生产资料、统一播种技术规程、统一管理、同一收割、统一进行销售。统一购置生产资料。即合作社负责联系并购进质优价廉的种子、化肥、农药等生产资料,变分散为集中。改变以往农户购入的种子、化肥、农药品种五花八门,因为每个品种的习性都是不一样的,通过合作社的管理,统一了种子的品种,这样既便于管理、收获和销售,又能增收节支,提高利润。今年合作社水稻种植的品种是龙粳29,之所以选择该品种,是因为龙粳29是全省

推广品种,这个品种的优点就是高产,平年产量在8-9吨之间,而且抗倒伏能力强,能最大程度的保证成员多产出,增加收入。截止目前合作社已经统一购入种子33150公斤,化肥234000公斤,农药16700公斤。统一播种技术规程,即从浸种、撒种到插秧,合作社统一时间,统一进行技术指导,帮助成员联系短缺的农机具,争取时间决不延误农时,在育苗期就把好关,把基础打好。统一管理,即在田间管理阶段,合作社指派管理和技术人员或外聘专业人员对成员进行培训和指导,采取统一的管理模式,比如说撒肥、飞机喷药等都统一进行,生长期和成熟期都有哪些注意事项,出现自然灾害的应急措施等等,都让成员掌握相关的知识。统一收获,即水稻成熟收获时,合作社成员必须将粮食送到合作社统一进行存储,并承诺本社员交付到的水稻将高于市场价格收购。统一销售,即合作社成员将水稻交付到社里后,就不用管了,合作社看市场行情,在价格较高时陆续将水稻销售出去。合作社成员交付到社里的水稻都会登记在册,计入成员账户,按照交易量和合作社水稻溢价收入分别按照法规结合成员大会决议,返还给成员。 所谓统分结合就是合作社与成员之间有分有合,分的方面体现在成员各自承担自己水稻种植等生产管理的事宜,繁杂的生产流程不适合该合作社面面俱到,发挥成员灵活多样的生产管理方式,尽可能地降低生产投入;合的方面就是合作社提供相应的服务,以提高水稻产能和竞争力。

种植业合作社简介

××××种植农民专业合作社简介 一、合作社基本情况 ×××成材种植农民专业合作社位于××××××村,该村位于×××东部,西与×××中兴村接壤,南与×××东方红村相连,北与×××镇毗邻,东与×××隔河相望。全村300户,人口693人,辖1个自然村,土地总面积4350亩。成材种植农民专业合作社是由×××××村委会组织,村民自愿参社,自愿入股组建而成。合作社于2014年12月组建成立,法人代表为×××,所有制形式为集体股份制,启动资金60万元,主要来源社员自筹,合作社办公室四间,社员培训班一处四间,农机具库房一处300平方米,现有社员16户,约占全村总户数50%,社员分布在全村各村民组,分布范围约为20平方公里。制定了各种管理制度,并公示上墙。经营范围以林果种植、管理为主。共有果林1300亩,主要有黄太平、金红123苹果、东宇五号等品种。 二、机构设置和工作人员情况 合作社组织健全,制度规范,责任分明,以“诚信、发展、合作、共赢”为目标,人员构成合理,有理事会和监事会,理事会设有理事长1人,常务理事2人,理事2人;监事会设有执行监事1人,监事2人。由理事长和理事会直接管理合作社的具体生产经营活动,下设财务部和生产经营部,由理事长聘任技术人员和财务人员。现合作社有工作人员5名,其中管理人员2人,

技术人员3人,管理人员均是高中学历。 三、合作社主要管理机制 合作社社员以果树株数作价出资的形式入股,基础设施建设社员自筹,以保护社员利益为己任,实行运作规范、分配合理、共同利益的管理体制和运行机制,民管、民办、民受益。在管理上对已经入社但人不在的社员进行全力扶持,在社员有资金短缺的情况,合作社理事会自筹资金为社员垫付,做到共同投入、共同发展的目的,等到社员资金回笼后再还给合作社,这就充分发挥了合作社的“诚信、发展、合作、共赢”的目标。 四、合作社发挥的主要作用 ××村林果业以合作社为支撑,以农户管理为主要管理模式,努力把合作社建设成为经济林科普实验、示范基地,为提高农民经济收入建造平台,更是合作社带动农民学习、实践、培训的主战场。合作社本着“八个统一”、“三个不放松”来管理社员,为进一步提高社员的经济收入打基础。 “八个统一”即: 统一整地,春季造林前合作社邀请林业技术人员指导社员对项目区进行规划,做到路相通、水相连,保证造林时苗木到地头,水能进树坑。 统一种植,苗木调运到位后,合作社组织社员统一对苗木进行假植,尽快补充苗木运输途中流失的水分,假植3-5天后再分段、分农户栽植苗木,栽植过程中随指导、随栽植、随浇水,力

分子生物学实验室常用仪器及使用方法

实验指导 目录 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取-碱裂解法 实验三琼脂糖凝胶电泳 实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定 实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 实验六动物组织细胞基因组 DNA提取 实验七 DNA的定量 实验八 PCR基因扩增 实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA 实验十 DNA重组 实验十一动物组织细胞总RNA的提取 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用

事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。配有角式转头:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。 1. 安装与调试 离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在0~30℃之间,相对湿度小于80%。试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。 2. 操作程序 (1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。 (2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。 (3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。 (4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。 (5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间),离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。 (6)按控制面板上的停止键,数码管显示dedT,数秒钟后即显示闪烁的转速值,这时机器已准备好下一次工作。 3. 注意事项 (1)离心机应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线,机器不使用,要拔掉电源插头。

广西水稻品种试验实施方案

年广西水稻品种实验实施方案 广西区种子管理局 广西农科院水稻研究所 一、实验目的 为了鉴定评价新选育的水稻品种(组合,下同)在我区的丰产性、稳产性、适应性、抗逆性、品质及其它重要特征特性表现,为我区品种审定、推荐参加全国南方区试等提供科学依据,根据《广西壮族自治区农作物品种管理实施办法》有关规定,特制定年广西水稻品种区域实验、生产实验和预备实验实施方案。 二、参试品种 (一)区域实验和生产实验 年开展早稻桂中、桂北早熟组(以金优和株两优为对照)、中熟组(以优和五丰优为对照)、桂南迟熟组(以特优为对照)、常规优质稻组(以柳沙油占为对照);晚稻设桂中、桂北中熟组(以优和五丰优为对照)、桂中中迟熟组(以天优华占为对照)、桂南感光组(以博优为对照);高寒山区一季中稻组(以中浙优号为对照); (二)预备(筛选)实验 开展早稻桂中、桂北早熟组(以株两优为对照)、中熟组(以五丰优为对照)、桂南迟熟组(以特优为对照);晚稻设桂中、桂北中迟熟组(以天优华占为对照)、桂南感光组(以博优为对照)、常规优质稻组(以柳沙油占为对照); 各熟组参试品种安排详见附件表~、表~。附件上没有参试品种安排的,请不要寄种子,否则当废种处理。 实验方案在“广西种业信息网()”上公布,不再印发。 三、供试种子要求 年所有参试品种(包括对照品种)在实验过程中实行实验编号管理,要求供种单位统一把参试品种的种子提供给广西农科院水稻所,进行编号后再分发到各承试点(包括抗性鉴定点)。分组编号情况报广西区种子管理局备案,对实验点和供种单位一概保密。各实验点不需再重新编号,以免发生错误。 (一)供种量 区域实验公斤个,生产实验早稻中熟组、晚稻中熟组和中迟熟组公斤个,其它熟组公斤个,预备(筛选)实验公斤个。

水稻栽培技术

水稻高产栽培技术 摘要:水稻有多种栽培方式,如:直播栽培等。水稻直播栽培技术具有省工,省力,生育期短,高产高效等优点。大面积推广直播栽培技术对于提高水稻产量和质量具有重要意义。本文介绍了水稻的价值,发展状况,以及直播稻的良种选择标准、栽培技术、田间管理配套措施,以及适时收获等技术。 关键词:水稻高产栽培技术 前言 水稻是我国栽培历史悠久的主要粮食作物之一。稻米营养价值高,适口性好,容易消化,不仅是我国的主要食粮,世界上也约有一半人口以稻米为主食。稻谷副产品用途广泛,其米糠既是家畜的精饲料,也是医药原料,谷壳可作为工业原料,稻草除可做家畜饲料和食用菌生产原料以及有机肥料外,还是造纸工业等的原料。因此,发展水稻生产,提高稻谷的产量稻米的品质,对我国国民经济的发展具有十分重要的意义。

1.国内外水稻发展概况 1.1国外水稻发展状况 世界上约有半数人以稻米为主食,特别是亚洲,稻米是主要的营养来源。世界各大洲都有水稻生产,但以亚洲为最多,播种面积为世界的90%.在亚洲,印度是仅次于我国的重要的产稻国家,播种面积居世界第一位,总产量居第二位,日本单产很高,是世界上水稻高产国家之一。 1.2国内水稻发展状况 我国是栽培水稻的主要发源地之一,是稻作历史古国,也是稻谷生产大国。我国还是水稻科技强国。世界矮秆稻育种的“绿色革命”源于我国,我国的杂交水稻更是举世闻名。水稻是我国的主要粮食作物,也是我国重要的商品粮之一,水稻的播种面积和总产量居粮食作物的首位,播种面积在世界产稻国中位居第二,总产量居世界之首。我国水稻播种面积基本上稳定在3000--3100万公顷,总产量2万吨左右,单位面积产量6300--6500千克/公顷。播种面积占谷物总面积的20.2%,产量占谷物总产量的43.4%,由于水稻产量稳定,在我国粮食生产中有举足轻重的地位。 2.水稻产品应用价值及前景 2.1、成品大米: 古人很早就认识到了稻米对人类的重要性。《黄帝内经》是我国医学宝库中现存成书最早的医学经典著作,人类历史上第一次记载稻米对人身心健康的作用,其曰“五谷为养,五果为助,五畜为益,五菜为充”。同一时代另一部著作《周礼》中说“五味、五谷、五药养其病”。 大米本身富含蛋白质、脂肪、碳水化合物,又含有钠、钾、钙、镁、磷、铁、锌、铜、锰等物质及VE、B1、B2、B6、叶酸等维他命元素,是人体必须补充的营养元素,且大米性甘味平,具有健脾养胃、益精强志、聪耳明目之功效,被誉为“五谷之首”。 2.2、米糠的综合利用: 米糠虽然只占稻谷总重的6%~8%,却占有稻谷64%的重要营养成分,除含有丰富的蛋白质、脂肪、糖类、维生素、膳食纤维和矿物质等营养成分外,还含有生育酚、生育三烯酚、脂多糖、r-谷维醇等多种天然抗氧化剂和生物活性物质,对人体健康和现代文明病的预防和治疗具有重要意义。是一种有广泛开发潜力的高附加值资源。 米糠油:在米糠的脂肪酸组成中,不饱和脂肪酸占70%以上,必需脂肪酸(主要指亚油酸)高出糙米和碎米几倍。而且米糠必需脂肪酸的配比含量高于一般植物油,同时也胜于动物油。米糠中亚油酸接近不饱和脂肪酸的一半,对于维持人体正常生长、保持血液动脉血管及神经和大脑的健康有重要作用,同时亚油酸可以防止人体水代谢功能紊乱而产生的皮肤病变。谷维素和谷甾醇等成分,长期食用对于调理人体生理功能、健脑益智、消炎抗菌等都具有显著的作用。 米糠油具有的气味芳香,耐高温煎炸,耐长久贮存和几乎无有害物质生成等优点,是任何一种植物油所无法比拟的。正因为米糠油的性能优越,它已成为继葵花子油、玉米胚芽油之后的又一新型保健食品用油,其脂肪酸最为接近人类的膳食推荐标准。 米糠油衍生物:米糠油副产物中可以提取植酸钙、肌醇、谷维素、植物甾醇、28烷醇等多种衍生物。其中谷维素的应用范围十分广泛,已遍及医药、食品、化妆品等行业。是优良的抗氧化剂。 米糠食品:稳定的米糠是营养浓缩的含有各种维生素、矿物质微量元素以及至今所知的103种抗氧化物的混合物,具有独特的促进消化、降低血脂的作用。目前国内谷物早餐食品多以燕麦或麦麸为主要原料,以米糠或碎米为主要原料的产品几乎没有。米糠的营养价值高

实验室常用实验方法

总RNA的提取(Trizol法提取) 在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用。 1.提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉 淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2.将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟; 3.在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,在手中用力震荡 15秒,在室温下(15℃~30℃)放置2~3分钟后,12000g(2℃~8℃)离心15分钟; 4.取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,在室温下(15℃~30℃) 放置10分钟,12000g(2℃~8℃)离心10分钟; 5.弃上清,按照每1ml TRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤,涡旋混合,7500g(2℃~8℃)离心5分钟, 弃上清; 6.让沉淀的RNA在室温下自然干燥; 7.用Rnase-free water 溶解RNA沉淀。 PCR 实验室常用DNA聚合酶有三种:TaKaRa Taq TM,TaKaRa E X Taq TM和Pyrobest TM DNA Polymerase。TaKaRa Taq TM 是一般的DNA聚合酶,保真性较差,但价钱便宜,一般用于基因表达的检测等。TaKaRa E X Taq TM是具有Proof reading活性的耐热性DNA聚合酶,具有一定的保真性,而且其扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基,如果希望直接将产物克隆到T-vector可以用此酶。Pyrobest TM DNA Polymerase也是具有Proof reading 活性的耐热性DNA聚合酶,其特点是保真性极高,扩增得到的PCR产物为平滑末端。如果进行基因的扩增请使用此酶。 1.按下列组成在PCR反应管中调制反应液: TaKaRa Taq TM或TaKaRa E X Taq TM的配方

最新水稻种植专业合作社简介

湘潭县春静水稻种植专业合作社 简 介 二0一二年八月

一.合作社简介: 1.合作社简介:湘潭县春静水稻种植专业合作社成立于2009年,2010年在县工商局正式注册。合作社办公楼现建在河口镇板桥村。它位于湘潭县西大门,与湘潭市和县城易俗河仅一河之隔,紧临潭花公路,潭衡西线高速、107和320国道连接线。选址合理,交通便利。 湘潭县春静水稻种植专业合作社,现有工作人员77人,拥有固定资产300万,流动资金350万,流转到合作社的水田5596亩。种植双季水稻5300亩,百合296亩,开展农资经营全市布点350个终端服务站,年经营服务总收入达到1580万元。其中粮食480万元,农业生产资料1100万元,实现纯利102.5万元。合作社带动和服务农户数量多达4000余户。 合作社基地分布在我县排头、锦石、河口、石潭四个乡镇12个村近2000农户,成为了全县流转经营土地最多的专业合作社。 2.机构健全:春静水稻种植合作社2009年成立之初,就制定了规范的专业合作社章程,建立健全了完善的成员代表大会、理事会、监事会等制度,成立了监督机构,保障了合作社成员的知情权、决策权、监督权等民主权利,实行独立的会计核算,严格落实财务会计制度,会计账簿,财务管理和盈余分配等规范科学完善,很好的保障了成员的经济利益。 3.人力资源保障。春静水稻种植合作社聘请的技术人员从事过多年农业技术研究。特别是有县政府、县农办、农业局、农机局的各专业技术人员的扶助,指导。他们拥有较高的理论水平和丰富的实践经验。使我社在水稻种植和农机推广上,取得突出成绩。 4.技术支撑。通过市县农业部门的大力扶持,在粮油站、植保站、土肥站的支持和培训,合作社已经全面掌握了农田土地结构的监测分析技术。制

优质水稻栽培技术

第一章优质水稻高产栽培技术 水稻属于禾本科一年生草本、稻属植物。它是由普通野生稻经长期的自然选择和人工选择共同作用下演变而来的。我国是世界栽培稻的发源地之一,栽培历史悠久(约有5-6千年的栽培历史)。稻米营养价值较高,与其它谷物相比较,它含粗纤维最少,各种营养成分容易消化和吸收,适宜人体需要。尤其是优质稻米深受人们的喜爱,目前市场上供不应求。 第一节优质水稻应具备的特征 水稻分为籼稻和粳稻两个品种,在籼稻和粳稻中按其对光照长短的反应和生育期长短分为晚稻和早、中稻,在晚稻和早、中稻类型中按耐湿性和耐旱性分为水稻和陆稻。优质水稻品种,除了具有一般水稻品种的优良特性(产量高、抗性强和适应范围广)外。还必须具有好看、好吃、营养丰富、卫生达标等四个特征。稻米品质是由遗传因子、生态环境、栽培技术及加工条件共同作用的结果。稻米的内在品质主要是遗传因子决定,同时受气候生态、土壤生态及栽培管理因素的影响,同一品种的品质存在着不同的环境表达,因此,应建立和完善优质稻栽培技术体系,建设优质稻板块基地,提高稻农的经济效益。 第二节目前制约我市优质水稻高产的因素

一、气候条件水稻是喜温和感光作物,生长期要求适温、光足,而我市常出现两头低温,中间光照不足,又有高温热害,有的年份寒露风来得早,对水稻的产量及品质影响较大。即3月下旬至4四月上旬早稻育秧期间有倒春寒,水稻播种后易引起烂种、死苗;6月上旬至7月上旬有些年份梅雨期雨水天气多,光照不足;7月下旬至8月上旬的高温干旱影响中稻扬花灌浆,9月上中旬的寒露风又影响二季晚稻的抽穗扬花。 二、栽培技术有的地方和部分农民,种了优质高产水稻品种而没有采取与之配套的栽培技术,如施肥结构不合理、防治病虫害措施不力,水肥管理不当,结果不能充分发挥品种的优质高产特性,造成单产不高,效益不佳。 三、品种多滥杂全市目前主推品种不明显,早、中、晚稻种植品种多达60多个,该稻谷品质一致性差异较大,很难生产优质稻米。 第三节水稻优质高产的水肥条件和土壤条件 一、水稻优质高产的需肥规律和施肥的基本方法 1. 优质高产水稻的需肥规律 据测定水稻每生产500㎏稻谷的需肥量是需要氮素 8.5—12.5㎏,需要五氧化二磷4—6㎏,需要氧化钾 11—16㎏。而在不同的时期需肥量是不相同的,一般的水稻品种在拨节期以前对氮磷钾的吸收量是全生育期需肥量的 50%以上;拨节至孕穗期间

蔬菜种植专业合作社概况简介

蔬菜种植专业合作社概况简介 开元蔬菜种植专业合作社位于坛山街道中桥居,于2010年12月在工商局注册成立。目前,合作社拥有社员120余人,蔬菜种植核心面积200余亩。2011年开元蔬菜种植专业合作社被评为市级优秀合作社,2012年该基地被国家农业部列为国家级蔬菜标准园,所生产的“中科开元”牌西红柿、辣椒被认定为绿色食品,2011-2012年合作社生产的绿色食品辣椒被枣庄市人民政府评为名优产品,2016年该基地列为为峄城区田间课堂实训基地。2016年取得《山东省农民专业合作社信用互助业务资格认定书》,获批在内部开展信用互助业务。 几年来,在各级领导和上级业务部门的关心支持下,合作社基础设施得到了加强,目前合作社发展蔬菜种植面积260亩,建有蔬菜大棚150多座,设施面积200亩,其中建有高标准蔬菜大棚20座,合作社资产总额800余万元,合作社以蔬菜种植为主导产业,主要种植西红柿、黄瓜、茄子、芹菜等时令鲜蔬20余种,年产各类新鲜绿色蔬菜3000吨,销售额1200多万元,实现纯利润180余万元,合作社常年从事种植业人数120人,带动周边300余户(其中包含周边社居贫困农户40户)从事种植业,带动蔬菜种植面积500余亩. 为保障基地生产的蔬菜安全绿色,让市民能够吃上质优、价廉、绿色的蔬菜,合作社在蔬菜生产过程中严格禁

止高剧毒农药在生产过程中应用,合理的施用农家肥、生物有机肥,科学的利用生物防治技术来防治蔬菜的病虫害,并利用质量安全检测仪器定期不定期的对基地内的蔬菜进行抽检,确保基地内的蔬菜绿色安全。 为了使生产出来的蔬菜更好的适应现代市场经济的需求,实现长足发展,在销售形式上合作社采用统一采购,统一供种,统一采摘,统一销售的方式进行运行。通过近几年的努力,开元蔬菜基地与枣庄贵诚超市、微山百伦超市、杨宁超市建设的15个社区生活超市签订了蔬菜供销合同,实现了农超对接,提高了蔬菜附加值增加了居民收入。 2016年开元合作社在现有基础上投资150余万元,新建300㎡集办公、培训、检测一体的高标准办公用房一座,建设高标准日光温室6座,新建占地1000㎡的蔬菜销售市场一处,硬化田间生产道路2000㎡,整修日光温室20座,并完善了水、电、路等设施配套,并建立了中桥精准扶贫种植基地,实现了“合作社+基地+贫困户”的扶贫模式,通过技术培训、创业孵化、吸纳就业、入股分红等方式进行扶贫。合作社在生产销售过程中利用蔬菜种植基地建立电商平台,并建立“农超对接”、“农企对接”销售网络;引导合作社发展电子商务,建设自己的网站进行产品和形象宣传,创新实践“基地+企业+贫困户”的模式,通过平台发布蔬菜生产销售信息,拓宽产品销路。

实验室常用蒸发浓缩方法

实验室常用蒸发浓缩方法 氮吹仪 原理:将氮气快速、连续、可控地吹向加热样品的表面,使待处理样品中的水分迅速蒸发、分离,实现样品无氧浓缩。 应用:农残分析,药物筛选,液相、气相、质谱分析前处理。 优点: 干燥速度快 缺点: 样品温度高 样品处理量少 存在将样品中物质吹到实验室中的风险,必须在通风橱中操作 需要消耗氮气,增加额外成本 可燃溶剂存在爆炸危险 整个过程需要监控 旋转蒸发仪 原理:基本原理即是减压蒸馏,可降低液体的沸点,那些在常压蒸馏时未达到沸点就会受热分解、氧化或聚合的物质就可以在分解之前蒸馏出来,“旋转”可以使溶剂形成薄膜,增大蒸发面积。另外,在高效冷却器(一般是冷凝管)作用下,可将热蒸汽迅速液化,加快蒸发速率。 应用:萃取液的浓缩,有机物提取,色谱分离接收液的蒸馏。 优点: 蒸发速度相对较快 样品量大 控制水浴温度可控制热量输入 真空度可控制 整个过程可见,好控制 缺点: 只能处理单一样品 需要清洗玻璃装置 密封件寿命有限,需要定期更换 样品会泄露到空气中,造成污染

离心浓缩仪 原理:负压降低溶剂沸点,冷阱捕获蒸发出来的气体,使蒸发过程快速进行,离心力可保证样品沉积在管底,不会产品气泡和交叉污染。 应用:DNA/RNA的浓缩,药物代谢物的浓缩,液相色谱的前后处理,免疫球蛋白的浓缩等。 优点: 安全 样品处理量大 多种离心管可选择 样品沉积在离心管底部,好回收 最大程度减少发泡与交叉污染 可通过红外方式提高加热效率 精确控制真空度 蒸发温度低 可通过编程实现多组分分离 缺点: 速度较慢 蒸发过程可见程度有限 冷冻干燥机 原理:预冻样品中的水分,在真空状态下直接升华,可利用冷阱捕获蒸发出来的气体,使蒸发过程快速进行。 应用:菌种、疫苗、蛋白、核酸、药物等对温度和氧敏感性生物样品的干燥,冻干后的样品易于保存和运输。 优点: 安全 水分去除率非常高

实验室水稻种植方法

一个水培还有就是土培 水培就是放在水里让他们发芽的土培就是种在土里保持土层湿润就好了 种子播在准备好的秧田上,当苗龄为20~25天时移植到周围有堤的水深为5~10公分(2~4吋)的稻田内,在生长季节一直浸在水中。 耕种方式 稻米的种植技术,包括稻田和插秧,是在中国发明的。传说中是神农氏教导人们如何种稻。 目前稻的耕种除传统的人工耕种方式,亦有高度机械化的耕种方式。但仍不失下列步骤: 整地: 种稻之前,必须先将稻田的土壤翻过,使其松软,这个过程分为粗耕、细耕和盖平三个期间。过去使用兽力和犁具,主要是水牛来整地犁田,但现在多用机器整地了。 育苗: 农民先在某块田中培育秧苗,此田往往会被称为秧田,在撒下稻种后,农人多半会在土上洒一层稻壳灰;现代则多由专门的育苗中心使用育苗箱来使稻苗成长,好的稻苗是稻作成功的关键。在秧苗长高约八公分时,就可以进行插秧了。 插秧: 将秧苗仔细的插进稻田中,间格有序。传统的插秧法会使用秧绳、秧标或插秧轮,来在稻田中做记号。手工插秧时,会在左手的大拇指上戴分秧器,帮助农人将秧苗分出,并插进土里。插秧的气候相当重要,如大雨则会将秧苗打坏。现代多有插秧机插秧,但在土地起伏大,形状不是方型的稻田中,还是需要人工插秧。秧苗一般会呈南北走向。还有更为便利的抛秧。 除草除虫: 秧苗成长的时候,得时时照顾,并拔除杂草、有时也需用农药来除掉害虫(如福寿螺)。 施肥: 秧苗在抽高,长出第一节稻茎的时候称为分蘖期,这段期间往往需要施肥,让稻苗成长的健壮,并促进日后结穗米质的饱满和数量。 灌排水: 水稻比较倚赖这个程序,旱稻的话是旱田,灌排水的过程较不一样,但是一般都需在插秧后,幼穗形成时,还有抽穗开花期加强水份灌溉。 收成: 当稻穗垂下,金黄饱满时,就可以开始收成,过去是农民一束一束,用镰刀割下,再扎起,利用打谷机使稻穗分离,现代则有收割机,将稻穗卷入后,直接将稻穗与稻茎分离出来,一粒一粒的稻穗就成为稻谷。 干燥、删选: 收成的稻谷需要干燥,过去多在三合院的前院晒谷,需时时翻动,让稻谷干燥。删选则是将瘪谷等杂质删掉,用电动分谷机、风车或手工抖动分谷,利用风力将饱满有重量的稻谷自动筛选出来。

水稻种植技术操作规程完整

绿色水稻种植技术操作规程 为确保生产出绿色食品优质大米,特制定此技术规程。对水稻生产基地的规管理和技术指导,严格控制各种污染。 一、水稻栽培管理 (一)育秧 1、品种选择 选择适宜地区的优质高产新品种,不带病菌、虫源、无破粒、无秕粒、优质高产新品种。 经两年实验示,选出绥粳4,龙洋16,180,旱香74,旱香52等优质品种。这些品种抗病性强、生产性好、米质优良(一级米)、适口性好。 2、种子处理 晒种 3月25日——3月30日,室外晒种1—2天,增加种子活力。 盐水浸种,浸种4—5天后捞出控干进行催芽,有50%种子露白后方可播种。

3、营养床土配制 根据当地条件选用疏松、肥沃、富含有机质、偏酸、无草籽的腐殖土或旱田土,风干过筛,最好加15-20%草碳土,按照每平方米苗床需要20kg原土,加入适量75%浓硫酸使PH值达到5-6.0,制成营养土。 4、秧床整理 选取无盐碱、土地肥沃、平坦的壤土为育秧地块, 田要泡透使土质松软。秧床设置宽1.5米、长15米,秧沟宽30厘米,将秧床精细整理,达到平整一致,无作物根茬、杂草。 5、播种 4月5日——4月12日,首先在浇透水的置床上铺有孔地膜或软盘,然后铺撒3cm厚的营养土,刮平,浇透水,盘育苗每盘播70克左右,合理密植,稀播育壮秧。 6、秧田管理 温度管理 出苗前密封保温,棚温控制在30℃左右,苗出齐后及时撤去地膜。2叶1心时,温度控制在20—25℃左右,低温大床苗,严防高温烧苗和徒长。降温主要靠通风大小来调节。 水分管理

6、整地 11月上旬,水稻机收后,秸秆全部还田深翻,亩秸秆还田量在600公斤以上。 按照绿色食品优质米要求,四月下旬在耙地时施用em 菌发酵好的农家肥2吨/亩,施底肥磷酸二胺5公斤/亩,农家肥要施均匀,可以增加土壤有机质含量,改进土壤理化性状。 一次性深施,这样不仅节省施肥次数,而且有利于提高有效分蘖率和有效穗数及穗大粒饱,减少垩白率,提高稻米品质。 4月25日——5月1日泡田。 耙地 春季耙地以旱耙为主,泡田后水耙找平为辅,水耙地以寸水不露泥为准。 (二)插秧 5月9日——5月28日,当气温稳定在13℃时,就可开始插秧,插前3—5天整好地耙细耙平,寸水不露泥,沉淀适宜时,就可以插秧,插秧时要保证插秧质量,浅插,插秧

实验室常用标准

1.GB21549-2008实验室玻璃仪器玻璃烧器的安全要求; 2.GB/T21784.2-2008实验室玻璃器皿通用型密度计第2部分:试验方法和使用; 3.GB/T21298-2007实验室玻璃仪器试管; 4.GB/T21297-2007实验室玻璃仪器互换锥形磨砂接头; 5.GB/T11414-2007实验室玻璃仪器瓶; 6.GB/T12804-2011实验室玻璃仪器量筒; 7.GB/T12805-2011实验室玻璃仪器滴定管; 8.GB/T12806-2011实验室玻璃仪器单标线容量瓶; 9.GB/T28211-2011实验室玻璃仪器过滤漏斗; 10.GB/T28212-2011实验室玻璃仪器冷凝管; 11.GB/T28213-2011实验室玻璃仪器培养皿; 12.GB/T22362-2008实验室玻璃仪器烧瓶; 13.GB/T22067-2008实验室玻璃仪器广口烧瓶; 14.GB/T11165-2005实验室pH计; 15.GB/T30431-2013实验室气相色谱仪; 16.GB4793.7-2008测量、控制和实验室用电气设备的安全要求第7部分:实验室用离心机的特殊要求; 17.GB12803-1991实验室玻璃仪器:量杯; 18.GB12807-1991实验室玻璃仪器:分度吸量管; 19.GB12808-1991实验室玻璃仪器:单标线吸量管; 20.GB21549-2008实验室玻璃仪器:玻璃烧器的安全要求; 21.GBT11414-2007实验室玻璃仪器瓶;

22.GBT12804-2011实验室玻璃仪器:量筒; 23.GBT12805-2011实验室玻璃仪器:滴定管; 24.GBT12806-2011实验室玻璃仪器:单标线容量瓶; 25.GB/T12807-1991实验室玻璃仪器:分度吸量管; 26GB/T12808-1991 实验室玻璃仪器:单标线吸量管; 27.GBT12809-1991实验室玻璃仪器:玻璃量器的设计和结构原则; 28.GBT12810-1991实验室玻璃仪器:玻璃量器的容量校准和使用方法; 29.GBT14149-1993实验室玻璃仪器:互换球形磨砂接头; 30.GBT15723-1995实验室玻璃仪器:干燥器; 31.GBT15724-2008实验室玻璃仪器:烧杯; 32.GBT15725.4-1995实验室玻璃仪器:双口、三口球形圆底烧瓶; 33.GBT15725.6-1995实验室玻璃仪器:磨口烧瓶; 34.GBT21297-2007实验室玻璃仪器:互换锥形磨砂接头; 35.GBT21298-2007实验室玻璃仪器:试管; 理化仪器类 1.GBT1914-2007化学分析滤纸; 2.GB24789-2009用水单位水计量器具配备和管理通则; 3.GBT11007-2008电导率仪试验方法;

种植专业合作社发言稿

种植专业合作社发言稿 尊敬的各位领导,广大社员朋友: 大家上午好! 金龙辞旧千家乐,银蛇迎新万户欢!在这辞旧迎新的喜庆时刻,同时迎来了我们xx种植合作社成立一周年的大喜日子,在此,我代表xxxx种植专业合作社理事会成员并以我个人名义,向各位来宾,向广大社员朋友们致以诚挚的问候与新春的祝福,并献上美好祝愿! 下面我就2011年工作向广大社员做以汇报: 合作社成立以来,以农村改革发展综合试验区建设精神为统领,在区农业局、x店镇党委、政府的领导下,始终本着“为耕者谋利,为食者健康”的宗旨,引领社员进行结构调整,发展高效生态农业,服务三农,为入社社员提供产前、产中、产后服务,引导社员科学种植,规范管理,提高农产品品质,增加经济收入等方面积极开展工作。 一、加大宣传力度,积极引导农民入社 农民入社是提高农民组织化的前提和基础,合作社对农民来说是个新生事物,农民了解合作社需要一个过程,为此,xx种植合作社从多角度、多方面、不辞辛劳地,孜孜不倦地农民宣传合作社法律、法规,一年来发放合作社宣传资料xx多份,大大提高了农民对合作社的认识,农民由引导入社已发展到自愿入社。截止2011年底入社农户xx户。 二、引进新品种,示范种植 1、优质粳稻种植。2011年合作社在全镇x个村示范种植优质粳稻x亩,喜获成功,该稻具有产量高、米质好、抗倒伏能力强的特性,平均亩产x斤,合作社以x元/公斤的价格回收商品稻,每亩可为农户增收x-x元,这一品种的示种成功,结束了我区常期以来稻谷优质不高产,优质不优价的历史,为解决我镇长期以来水稻品种多、乱、杂的局面奠定了坚实的基础,9月份又组织社员、种田大户去公司基地参观学习,增添了社员种植粳稻的信心。合作社计划用三年时间完成籼稻改粳年可为我镇农民增收x万元以上。 2、大力引进特奇丽、金奇丽豇豆高产品种,最高亩产豇豆x万斤,每亩可为社员增收x—x元,同时引导社员使用生物菌、生物农药和高效、低毒、低残留农药,为无公害蔬菜发展,改善蔬菜品质,提高产量奠定了坚实的基础。 3、为提高土地利用率,增加社员收入,2011年秋季,合作社采用标准化耕作,示范种植小麦x亩,为改变我镇农民种植一季的习惯奠定了坚实的基础。 三、依靠科技,引领社员发展生态农业 改革开放三十年来,人们为了追求产量一味追求氮肥使用量,以致土壤板结、污染环境,同时农民投入增加,为改变这一现象,合作社从北京农科院购买了一台第八代智能土壤测土仪,免费为社员检测土壤,制定合理的施肥方案,减少不必要开支,杜绝了浪费,增加收益,引领社员走“发展高效生态农业,生产绿色健康食品”之路。四、拓展领域,提升服务能力 立足优质稻生产的基础上,xx合作社逐步向品牌、流通,加工等经营领域发展,提高产品附加值,实行农资供应,质量标准,生产技术,品牌包装,市场营销,产地以证等统一服务,形成生产、加工、营销服务一体化的合作组织。当2011年的基地特供优质为粳米上市,很受广大消费者欢迎,经过一年的发展,xx种植合作社产、供、销的功能已逐步呈现,入社社员也感受到合作社的带动作用,充分认识到了加入合作社的好处。 以上是我社在籼稻改粳稻,无公害豇豆生产,专业合作社发展中所做的一些工作,这离上级主管部门、镇党委政府领导的要求还有一定的距离,离社员的需求还有很大距离,在2012年工作中我们一定要总结经验,找出不足,知难而上,在上规模,上档次上下功夫,加大科学种植力度,进一步加快我镇农业结构调整,增加入社社员的收入。 1、优质粳稻种植。2012年,本计划推广x亩,合作社想用三年时间完成籼改粳的工作,但由于今年种子奇缺,公司给我镇特别照顾,也不到x斤种子,为达到示范种植,粳稻优先供于社员使用,同时签定回收合同,合作社正在为该米注册商标,向品牌要效益,走无公害生产之路,提升产品品质,增加农产品附加值。 2、生态种植,打造绿色无公害豇豆 随着社会经济的发展和人类活动的加剧,外来环境物资的污染远远超过土壤本身的承受能力,再加上长期以来传统农业大量使用农药、化肥,造成土壤板结,环境污染,残留超标,病虫害猖蕨,我们的土壤开始不生长庄稼了,

法医实验室几种常用DNA提取方法及比较

法医实验室几种常用DNA提取方法及比较(一)Chelex100法 原理:Chelex100是一种螯合树脂,由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成,含有成对的亚氨基 二乙酸盐离子,起着螯合基团作用,对多价金属离子有极强亲和力。在低离子强度、碱性及100℃煮沸条件下,可以使细胞膜裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离。检材基质中一般含有大量金属离子,在低离子强度及加热条件下,金属离子可以辅助脱氧核糖核酸酶降解DNA,也可以抑制PCR反应,所以在提取DNA时,加入Chelex100,螯合了金属离子,防止了DNA降解,提高了PCR扩增成功率。 方法:剪取适量血斑、精斑、汗斑、鼻涕斑、指甲、毛根、软组织等等生物检材,置于 0.5ml离心管内,加入适量纯水,室温浸泡,13,000rpm离心5min,上清丢弃,管底留约20μl左右液体及检材基质,加入100-200μl 5%Chelex100(有时需加适量PK)56℃15min至数10小时不等,100℃8min,13,000rpm离心5mim,上清备用。 评述: 1、Chelex100法已经成为DNA提取的基本方法,Chelex100法是万能的。目前,我们一切 纯化方法都在Chelex100法的基础上进行,Chelex100法又不是万能的。 2、Chelex100法提取前的检材清洗非常重要,因为现场检材往往均较脏,脏东西可以抑制 PCR反应,所以往往不止清洗一次,清洗检材时可能损失部分DNA。所以应平衡清洗抑制剂与损失DNA之间的关系。特别强调清洗时应“把根留住”,很多情况下已知样本DNA检验失败的原因是把根没有留住。DNA检验时还有另外一句名言:“一个萝卜一个坑”,防止混乱检材。肝素抑制PCR反应,血红素抑制PCR反应,所以长时的浸泡、多次清洗往往可能洗除肝素及血红素。在已知样本多次无检验结果疑为肝素抗凝的情况下,多洗是检验成功所必须的。血红素对普通Taq酶的抑制作用是明显的,而目前mtDNA 扩增一般用普通Taq酶,所以同一样品除进行STR检验外尚需进行mtDNA检测时,尽量去除干净血红素,显得尤为重要。现场提取毛发或样本毛发,用毛根进行STR检验时,纯水清洗也非常重要,如果没有清洗干净,毛根DNA本身很少,很易检出为混合型。 因为现场毛发及样本毛发很易粘附另一人成份。毛根清洗的特点为振荡洗涤,不离心,多换水。 3、清洗后检材中加入5%Chelex100量视检材而定。检材参考加入量 0.5×0.5cm血斑150ul-200ul 二步法精斑100ul 毛根10ul 烟头30-50ul 4、对于组织,难溶检材,有疑问检材,均可加入终浓度为100ug/ml左右PK,有时间隔一 段时间,补加适量PK,PK(蛋白水解酶K)作用最佳pH为8.0。 5、加入Chelex100后,56℃浸泡时间,血斑≥15min;组织≥30min,二步法精斑≥1h。 6、PCR扩增前应离心。PCR扩增时不应吸入Chelex100,因为Chelex100为PCR抑制剂。 7、Chelex100使用浓度5%,有些人用10%,有些人用20%,各人爱好。配制好5%Chelex100 pH

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