中国农业科学 2010,43(23):
Scientia Agricultura Sinica
广西柑橘黄龙病植株韧皮部内生细菌多样性分析
王爱华1，殷幼平1，熊红利2，李颜方1，李 佳1，贤家旭3，王中康1
（1重庆大学生物工程学院基因工程研究中心，重庆 400030；2农业部全国农业技术推广服务中心，北京 100126；3广西利添生物科技发展（合浦）
有限公司，广西北海 536128）
摘要：【目的】对柑橘健康植株和感染黄龙病植株的韧皮部内生细菌的多样性进行比较分析，为研究柑橘植株韧皮部内生细菌与黄龙病菌之间的相互关系奠定基础。【方法】采用常规分离培养与分子鉴定的方法和基于16S rDNA基因的限制性酶切长度多态性（restriction fragment length polymorphism，RFLP）分析的方法。【结果】用常规分离与分子鉴定方法获得10个属细菌类群，其中芽孢杆菌属（Bacillus sp.）、假单胞菌属（Pseudomonas sp.）、考克氏菌属（Kocuria sp.）为无症健株的优势菌群；微杆菌属（Microbacterium sp.）、芽孢杆菌属、假单胞菌属和考克氏菌属. 为黄龙病罹病植株的优势菌群。PCR-RFLP方法得到29种酶切图谱，共鉴定出10属可培养细菌以及11种不可培养细菌。健株与病株中Dyella sp.、Pseudomonas sp.、Serratia sp.和未培养细菌所占比例均大于5%。柑橘健株与病株中细菌的种群密度和菌群种类存在明显差异。【结论】研究结果表明柑橘健株和病株韧皮部组织中的内生细菌优势菌群存在明显差异，而伴生细菌的优势菌群与黄龙病菌的相互关系正在深入分析研究。
关键词：黄龙病；内生细菌；16S rDNA；RFLP；种群多样性
Endophytic Bacterial Diversity Analysis of Huanglongbing Pathogen-Infected Citrus Phloem Tissue in Guangxi
WANG Ai-hua1, YIN You-ping1, XIONG Hong-li2, LI Yan-fan1, LI Jia1, XIAN Jia-xu3, WANG Zhong-kang1 (1Bioengineering College, Chongqing University, Chongqing 400030; 2Ministry of Agriculture, Agricultural Technique Extension and Service Center, Beijing 100126; 3Lucky Team Biotech Development (Hepu) Ltd., Co. Hepu, Beihai 536128, Guangxi)
Abstract：【Objective】 The endophytic bacterial diversity in the Huanglongbing pathogen-infected and healthy citrus phloem tissue in Guangxi were investigated in order to decipher the interactions of Huanglongbing pathogen with companion microbe. 【Method】Both classical morphological, physiological, chemotaxonomic characteristics methodology and 16S rRNA, and PCR-RFLP analysis methods were applied. 【Result】By the traditional isolation and identification and 16S rDNA amplificons methods, 10 genera of bacteria were identified from 21 culturable bacterial populations. The sequences aligned with NCBI GenBank database and showed that they belonged to 10 different genera of bacterium. The dominant bacterial population in healthy citrus belonged to Bacillus sp., Pseudomonas sp., and Kocuria sp.. While in phloem tissue of infected citrus plant over ten years were Bacillus sp., Pseudomonas sp., Kocuria halotolerans, and Microbacterium sp.. By the PCR-RFLP methods, two 16S rDNA clone libraries of endophytic bacteria were constructed and 29 restriction endonuclease types were detected, 10 genera of bacteria and 11 genera of uncultured bacteria were identified. The dominant bacterium population in libraries belonged to Dyella sp., Pseudomonas sp., Serratia sp.and uncultured bacterium. The density and species of endophytic bacteria were observed in remarkable difference compared disease tree to healthy one. 【Conclusion】By traditional cultivation and 16S rDNA sequencing, PCR-RFLP analysis, the diversity of population and species of endophytic bacteria mainly in citrus phloem tissue are has difference among infected and healthy citrus plant, while those dominant bacterial populations if related to Huanglongbing pathogen currently still under investigation.
Key words: Huanglongbing; endophytic bacteria; 16S rDNA; RFLP; bio-diversity
收稿日期：2010-04-06；接受日期：2010-09-12
基金项目：国家自然科学基金项目（30971875）
作者简介：王爱华，硕士。E-mail：wah200367@https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,。通信作者王中康，教授。E-mail：zkwang646@https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,
23期王爱华等：广西柑橘黄龙病植株韧皮部内生细菌多样性分析
0 引言
【研究意义】中国是重要经济水果柑橘的主要原产地之一，面积与产量已位居全球第一。柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing，CHLB）是严重影响全世界柑橘生产的一种毁灭性病害，该病分布在中国南方柑橘产区的11个省区，其中广东、福建、广西等省区最为严重。发病面积占种植面积的10%—25％。国外主要病害分布于非洲南部、巴西、美国、以及东南亚各国、印度洋地区。【前人研究进展】柑橘黄龙病是由难以人工培养的韧皮杆菌所引起，目前已报道有Candidatus Liberibacter asiaticus，Ca. L. africanus，Ca. L. americanus [1-3]，中国的柑橘黄龙病病原菌为亚洲种（Ca. L. asiaticus）[4]。Kim等[5]研究发现，黄龙病菌能够影响寄主韧皮部物质的转运。Wang等[6]，Tatineni 等[7]研究结果表明，黄龙病菌存在于罹病植株的不同部位，且分布不均匀。分析微生物多样性的常规方法为传统的分离培养，通过一系列形态学与生理生化鉴定能将细菌鉴定到属，甚至到种的水平。但由于传统培养条件的限制，可培养的内生细菌在总内生细菌中所占的比率很小，因此对于揭示内生细菌区系的多样性存在局限性[8]。16S rDNA[9]存在于所有的原核生物细胞中，是细菌种类鉴定的一个重要指标，特别是利用核糖体16S rDNA作为分子标记的RFLP为不可培养微生物的菌群结构分析提供了有力的手段，避免了因为培养条件不合适而导致的细菌多样性的信息不全面。基于16S rDNA的PCR-RFLP方法已经广泛地应用到环境微生物和动植物微生物的研究中[10-11]。因此，采用常规分离培养与分子鉴定的方法、基于16S rDNA基因的RFLP分析的方法相结合，能够更有效地分析比较柑橘健株与病株的微生物的多样性[8]。【本研究切入点】迄今为止，国内外公认的人工培养成功的研究报道较少，最近的分子鉴定结果表明黄龙病罹病组织内除存在韧皮杆菌外，还存在与其伴生的微生物[12-14]，并认为可能是黄龙病植株症状复杂多样的可能原因之一。【拟解决的关键问题】传统分离培养方法已经初步证实柑橘植株内含有丰富的微生物[15]，本研究采用分子生物学方法和常规传统方法相结合，旨在利用中国黄龙病多年生病树组织为分离材料，分析罹病与健康柑橘植株韧皮部内生细菌种群多样性并找寻优势菌群，探讨伴生细菌与黄龙病菌的互作关系，为柑橘黄龙病菌的共培养和病原学研究奠定基础。1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物 试验用感染黄龙病柑橘植株与健康柑橘植株均采自广西乌家柑橘种植基地。采样植株为10年生奥林达夏橙，主要采集病、健植株的枝条、叶片、树皮和根等不同部位的新鲜材料，带回室内后一周内分离培养。
1.1.2 主要试剂和仪器细菌生化鉴定管（杭州天和微生物试剂有限公司，中国）；Axygen细菌DNA提取试剂盒（Axygen Biosciences，USA）；DNA纯化试剂盒（Axygen Biosciences，USA）、LA Taq酶试剂盒（Bioflux，Japan）；pMD-19T（TaKaRa，Japan）；引物合成（上海生工，中国）；PCR仪（Bio-Rad，USA），核酸蛋白检测仪（Beckman，Germany）。
1.2 内生细菌的分离与纯化
将从各地采集到的新鲜柑橘植株的根和枝条刮去表皮并去除白色的木质部、叶片中脉维管束组织作为供试样品。分别将样品用流水冲洗多次，滤纸吸干水分，75%酒精浸泡1 min，无菌水冲洗5—6次，2% NaClO浸泡1—25 min，再用无菌水冲洗韧皮部5—6次，最后一次清洗的水涂胰蛋白胨大豆培养基（Trypticase Soy Agar，TSA）平板检查灭菌效果。表面灭菌干净的柑桔韧皮部组织样品用灭菌剪刀剪碎放于无菌离心管中，并用枪头充分捣碎后，取0.1 g加入装有2 mL无菌水，混匀后梯度稀释3次，取0.05 mL 涂布到营养琼脂培养基和TSA培养基上，每个梯度每种培养基3个重复，28℃培养2—3 d后计数平板的菌落数。根据菌落形态（大小、形状、颜色、表面光泽、透明度和质地等），菌体形态（形状，革兰氏染色反应等）分别挑取培养基表面不同种类的细菌菌落，在相应培养基平板上纯化，纯化内生细菌接种于LB培养基斜面上，4℃保存备用。
对微生物培养平板上出现的微生物菌落进行计数，根据稀释倍数计算柑橘不同部位所含菌数。数据分析采用DPS v3.01软件数据处理系统，显著性分析采用Duncan新复极差法。
内生菌菌落丰富度（cfu·g-1鲜重）=平板菌落数×稀释倍数×2×102。
1.3 内生细菌的生理生化鉴定
根据《伯杰氏细菌鉴定手册》第九版[16]及《常见细菌系统鉴定手册》[17]对所得的优势菌群进行形态和生理生化鉴定。
1.4 内生细菌的分子生物学鉴定
1.4.1 内生细菌DNA制备将1.2所述方法得到的内生细菌取2 mL培养好的菌液于EP管中离心收集菌体，10 000 r/min离心5 min，去上清，沉淀用Axygen 细菌DNA提取试剂盒提取DNA。DNA浓度用核酸蛋白检测仪测定。
1.4.2 内生细菌的16S rDNA的PCR扩增用细菌通用引物：正向引物27F（5′-AGAGTTTGATCCTGG CTCAG-3′）和反向引物1492R（5′-TACGGTT ACCTTGTTACGACTT-3′）[18]。PCR反应体系25 μL，PCR反应条件：95℃变性4 min；94℃，30 s，55℃，30 s，72℃，1.5 min，30 个循环；72℃，7 min。反应结束后，取5 μL PCR产物在1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，纯化后进行T-A克隆，筛选阳性克隆子并委托上海生工进行测序。测序结果进行Blast比对，寻找具有高度同源性的16S rDNA序列。
1.5 RFLP分析柑橘内细菌多样性
1.5.1 16S rDNA特征片段 PCR扩增采用细菌通用引物799f（5′-AACMGGATTAGATACCCKG-3′）和1492r（5′-GGCTACCTTGTTACGACTT-3′）[18]扩增内生细菌16S rDNA中的高变区V5、V6、V7、V8 及V9。PCR 反应体系25 μL，PCR反应条件：95℃变性4 min；94℃，30 s，48℃，30 s，72℃，1 min，30个循环；72℃，8 min。反应结束后，产物在1%琼脂糖凝胶上电泳检测，得到的片段长度约为730 bp，PCR 产物进行纯化。
1.5.2 16S rDNA克隆文库构建和RFLP分析 PCR产物进行T-A克隆，分别建立健康和感病柑橘植株韧皮部内生细菌16S rDNA克隆文库，随机挑取克隆子，进行PCR检测。将阳性克隆子提取质粒。质粒分别用MspⅠ，RsaⅠ，HaeⅢ（Promega）限制性内切酶进行酶切。酶切体系参照Promega protocol，37℃温育4 h。产物用含有溴化乙锭的2%的琼脂糖凝胶电泳检测，鉴别分析各个阳性克隆的酶切图谱类型。根据该图谱分别对每一个文库中的所有克隆进行分型，每一种类型即是分类操作单位（Operational Taxonomic Unit，OTU），属于同一个OTU的克隆选一个代表进行测序。测序结果在GenBank中进行序列同源性比较。
2 结果
2.1 柑橘内生细菌的分离鉴定
2.1.1 柑橘不同部位中内生细菌的分离结果 将采集的健康及感染黄龙病的植株的侧根、枝条、叶片中脉表面消毒后进行组织内部内生细菌的分离。结果发现，在营养琼脂培养基和TSA培养基平板上可见不同的细菌菌落，菌落形态存在明显差异，说明柑橘韧皮部存在丰富的内生细菌。通过对平板上的菌落计数，不同样品之间内生细菌的菌落数量范围为
3.67×104 cfu·g-1鲜重至9.78×104 cfu·g-1鲜重（表1）。
健康柑橘不同组织器官内生细菌种群大小依次为侧根＞枝条＞叶片中脉。内生细菌在感染黄龙病（经qPCR检测的具有典型斑驳症状）的柑橘植株根部、叶片中脉和枝条中的细菌菌落数量和种群数量均存在差异,种群密度最大的是罹病柑橘根部组织，多达9.78×104 cfu·g-1鲜重。
样品的菌落数量与种群数量之间没有必然的线性关系，因为内生细菌的分离平板上虽然菌落数量较多，但种类并不多，有的则相反，菌落数量少而种类丰富。感病柑橘植株内生细菌菌落数量大于健康植株组织，而种群数量也存在一定的差异。分离得到内生细菌经过纯化及镜检，根据菌落形态和菌体形态以及生理生化特性差异，最终共计获得21株可培养的内生细菌。
2.1.2 内生细菌的鉴定对分离培养获得的21株细菌序列测定分析，结果见表2，细菌形态观察和生理生化测定见表3。WJ01，WJ02，WJ03，WJ05，WJ08，WJ12，WJ13，WJ16，WJ17，WJ18，WJ21经形态学鉴定和序列比对为芽孢杆菌属（Bacillus sp.）；菌株WJ04和WJ14为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）；菌株WJ06为葡萄球菌属（Staphylococcus sp.）；菌株WJ07为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）；菌
表1 内生细菌在柑橘植株内的分布情况
Table 1 Distribution of endophytic bacteria in the healthy and Huanglongbing pathogen-infected citrus phloem
分离样品Sample
健根
Health root
健枝
Health stern
健叶中脉
Health midrib
病根
Infected root
病枝
Infected stern
病叶中脉
Infected midrib
内生菌菌落丰富度(cfu·g-1鲜重）
Bacterial colony No.
6.93×104 4.05×104 3.67×104 9.78×104 4.39×104 5.51×104
内生细菌种类
Species of endophytic bacteria
15 19 14 14 19 14
表2 柑橘韧皮部细菌优势种群序列比对结果
Table 2 Sequences alignment of 16S rDNA of recovered from citrus phloem
分离菌株Isolate strain 登录号
Accession No.
片段
Fragment (bp)
比对属种
Alignment genera/species
同源性
Identity (%)
WJ01 HM045825 1516
Bacillaceae bacterium strain SB 3112 (GU191918.1）99 WJ02 HM045826 1488
Bacillus subtilis TPL16 (EU373393.1）99 WJ03 HM045827 1512
Bacillus pumilus S1 (FJ768456.1）99 WJ04 HM045828 1499
Pseudomonas sp. NJ-62 (AM396914.1）99 WJ05 HM045829 1508
Bacillus pumilus S1 (FJ768456.1）99 WJ06 HM045830 1520
Staphylococcus sp. Zp4 (DQ659595.1）99 WJ07 HM045831 1498
Acinetobacter sp. clone 1-40 (GQ464382.1）98 WJ08 HM045832 1512
Bacillus pumilus S1 (FJ768456.1）99 WJ09 HM045833 1499
Serratia sp. TCR (EF070125.1）99 WJ10 HM045834 1489
Kocuria sp. ZS2-6 (FJ889675.1）99 WJ11 HM045835 1520
Lysinibacillus fusiformis strain XW18 (EU545408.1）99 WJ12 HM045836 1515
Bacillus fusiformis isolate LLP (DQ333300.1）99 WJ13 HM045837 1485
Bacillus subtilis strain TPL16 (EU373393.1）99 WJ14 HM045838 1494
Pseudomonas sp. BSw10041N (FJ416144.1）99 WJ15 HM045839 1503
Miccrococcus sedentarius YIM 90716 (DQ979377.1）98 WJ16 HM045840 1524
Bacillus subtilis isolate C14-1 (EU257452.1）99 WJ17 HM045841 1515
Bacillus thuringinensis strain 2000031485 (AY138290.1）99 WJ18 HM045842 1485
Bacillus subtilis strain TPL16 (EU373393.1)99 WJ19 HM045843 1477
Microbacterium laevaniformans (EU181227.1)99 WJ20 HM045844 1485
Curtobacterium sp. S22 (GU120656.1)99 WJ21 HM045845 1515
Bacillus fusiformis isolate LLP (DQ333300.1)99
株WJ09为粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）；菌株WJ10为考克氏菌（Kocuria sp.）；菌株WJ11为乳杆菌属草乳杆菌（Lysinibacillus graminis）；菌株WJ15为微球菌属栖息微球菌（Miccrococcus sedentarius）；菌株WJ19为产左聚糖微杆菌（Microbacterium laevaniformans）；菌株WJ20为极小短小杆菌（Curtobacterium pusillum）。
2.1.3 内生细菌不同种群在健康和感病植株中的分布情况分离得到的不同种群的菌落数在健康和感病植株中不同部位的分布情况见表4。可知在健株中芽孢杆菌属、假单胞菌属、考克氏菌属为其优势菌群，菌落数均大于5.0×103 cfu·g-1鲜重。在病株中芽孢杆菌属、假单胞菌属、考克氏菌属和微杆菌属为优势菌，菌落数均大于5.0×103 cfu·g-1鲜重。而产左聚糖微杆菌WJ19在病株中的菌落密度远远大于在健株中。2.2 RFLP-PCR分析柑橘内细菌多样性
2.2.1 16S rDNA克隆文库的构建与筛选经鉴别分析阳性克隆的酶切图谱类型，对文库中的所有克隆进行分型，不同的类型即不同分类操作单元（Operational Taxonomic Unit，OTU）。不同 OTUs 测序结果与GenBank 进行序列同源性比对，结果鉴定出可培养细菌属10个以及不可培养细菌11个。不同属的RFLP OUTs 在健株（health plant，HP）与病株（infected plant，IP）的 16S rDNA克隆文库中所占的比率不同，分别随机挑取了229个、228个阳性克隆子，经过3种限制性酶MspⅠ、HaeⅢ和RsaⅠ酶切，产生29个不同RFLP OTUs。其中健株中有23个，病株25个，编号为C01—C29（表5）。
通过健株与病株的酶切图谱比较分析，结果显示不同细菌的比例不同：Dyella sp.（HP 27.08%；病株IP25%），Enterobacter sp.（HP 3.93%；IP 0%），Serratia marcescens（HP 16.16%；IP 18.86%），Enterococcus sanguinicola（HP 3.06%；IP 3.95%），Achromobacter sp.（HP 1.75%；IP 1.32%），Bosea sp.（HP 1.31%；
23期王爱华等：广西柑橘黄龙病植株韧皮部内生细菌多样性分析
表3 柑橘韧皮部内生细菌形态及生理生化鉴定结果
Table 3 Identified results of entophytic bacterial isolates by morphology, physiology and biochemical features
特征
Characteristic
WJ01 WJ02 WJ03 WJ04 WJ05 WJ06 WJ07 WJ08 WJ09 WJ10 WJ11 WJ12WJ13 WJ14 WJ15 WJ16 WJ17 WJ18 WJ19 WJ20 WJ21
菌落颜色Colony color 乳白色
Oyster
white
浅黄色
Light
yellow
乳白
色
Oyster
white
乳白色
Oyster
white
浅黄色
Light
yellow
白色
White
白色
White
白色
White
深红色
Crimson
淡橘色
Pale
orange
浅棕色
Light
brown
白色
White
浅黄色
Light
yellow
乳白色
Oyster
white
浅黄色
Light
yellow
白色
White
乳黄色
Oyster
yellow
黄色
Yellow
黄色
Yellow
黄绿色
Chartreuse
黄褐色
Sandy
brown
革兰氏染色Gram stain + + +
— + + — + — + + + — + + + + + + +
孢子Spore + + +
— + — + — + + — + + + +
细胞形态
Cell morphology 杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
球状
Spheric
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
球状
Spheric
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
球状
Spheric
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
杆状
Rod
过氧化氢酶
Catalase
+ + + + + + + + + + — + + + + + + + + 氧化酶Oxidase — —
苯基丙氨酸
Phenylalanine
deaminase
— — — — — — — — — — — — — —
葡萄糖酸盐
Glyconate
— — — — — — — — — — — — — — — 吲哚Indole —
柠檬酸盐
Citrate
+ + + — + — — — + — — + — + — — — — —
尿素Urea + — —
— + + + — + + + — + + + + + + + + 产气Aerogenic — — — — — — — — — — — — 赖氨酸Lysine + + + + — + + + — — +
— + — + + + + — + L-鸟氨酸
L-ornithine
+ — — + + + + + — + — — + — + + — + — —
棉子糖
Raffinose
+ — — — — + — — + — — + — + +
山梨醇Sorbitol + — — — + — — + — —
— + — — — — 核糖醇Adonitol — — — — — + — — — + — — — —
木糖醇Xylitol
— — —
中国农业科学43卷
续表3 Continued table 3
特征
Characteristic
WJ01 WJ02 WJ03 WJ04 WJ05 WJ06 WJ07 WJ08 WJ09 WJ10 WJ11 WJ12WJ13 WJ14 WJ15 WJ16 WJ17 WJ18 WJ19 WJ20 WJ21
精氨酸Arginine + + +
— —
D-甘露醇
D-mannito
— +
葡萄糖
Glucose ferment
+ + — + + + — +
麦芽糖Maltose + + + — + —
—
D-甘露糖
D-mannose
+ + + —
硝酸还原作用Nitrate reduction — + — —
— —
乳糖
Lactose
— + + + —
蜜二糖
Melibiose
— — —
果糖
Fructose
+ +
蔗糖Sucrose — + + + + —
— + +
凝胶Gelatin —
木糖Xylose + —
+ — — + + — + +
— — + —
阿拉伯糖
Arabinose
—
精氨酸二水解酶
Arginine
dihydrolase
— — + —
H2S — — —
— — + — — — — — — — — + + — 淀粉水解
Hydrolysis of starch
七叶素苷类Aescin glycosides — + — —
— —
—
表4 柑橘可培养内生细菌不同种群在健株和病株中的种群数量比较
Table 4 The different distribution levels of entophytic bacteria in the healthy and infected citrus plant tissue
菌株编号Sample No.
健树侧根
Health roots
病树侧根
Infected roots
健叶中脉
Health midrib
病叶中脉
Infected midrib
健枝韧皮部
Health stern
病枝韧皮部
Infected stem
WJ01 11.00±1.00a 15.00±1.00b 8.00±1.00a 18.67±1.15b 13.67±1.15a 21.67±4.73b
WJ02 50.67±1.53a 96.33±6.11b 53.00±4.00a 64.33±3.51b 44.33±4.16a 59.33±4.16b
WJ03 17.33±2.52a 24.67±2.08b 11.00±2.00a 9.33±1.53a 14.33±4.16a 17.67±5.03b
WJ04 143.67±6.66a 155.67±11.85a 92.00±8.72a 119.67±3.51b 114±10.54a 160.67±11.24b
WJ05 180.67±8.02a 278±63.27b 34.67±5.69a 56.67±4.16b 79.00±9.17a 67.33±8.02b
WJ06 10.33±1.15a 16.33±3.06b 11.67±2.08a 12.67±2.08a 4.67±2.08a 3.00±1.00b
WJ07 — —
8.67±1.53a 11.33±1.53b — — WJ08 124±4.36a 119.67±7.02a— — — — WJ09 3.00±2.65a 5.67±2.08b — — 2.00±1.00a 1.50±0.71a
WJ10 — —
14.67±2.52a 18.67±0.58b 5.67±1.53a 10.67±2.08b
WJ11 2.00±0.00 — — — 12.33±2.52a 18.00±3.61b
WJ12 — — — —
8.00±2.65a 10.67±2.08b
WJ13 — — — —
2.67±1.53a
3.67±1.15b
WJ14 10.67±2.08a 8.00±1.00b — — 11.67±1.15a 15.67±3.06b
WJ15 — —
18.33±1.53a 29.67±1.15b 10.67±2.52a 4.67±2.52b
WJ16 110.33±9.71a 139±21.07b 35.67±4.16a 56.00±3.00b 49.33±4.51a 96.67±7.64b
WJ17 — — — —
6.33±1.53a 13.00±1.00b
WJ18 7.67±1.53a 8.33±1.15a 9.67±1.15a 11±2.65b 5.67±1.53a 15.00±2.00b
WJ19 6.33±1.15a 69.33±12.34b 8.33±5.03a 67.67±2.52b 3.00±1.00a 5.33±1.53b
WJ20 11.00±3.00a 22.67±4.16b 5.33±3.21a 15.00±2.00b 11.33±1.53a 13.67±0.58b
WJ21 5.67±2.08a 19.00±6.00b 3.67±3.06a 7.67±0.58b 7.00±1.73a 13.67±2.08b
“—”：此部位中没有分离到此种菌。健株与病株同一部位的平均值具不同上标字母者表示差异显著（P < 0. 05）。下同
“—”：No data available. Means with different superscripts in the same position indicated significant difference (P < 0. 05). The same as below
表5 部分RFLP操作单元在健株和病株中的分布
Table 5 The distribution of RFLP OUTs in the healthy and Huanglongbing pathogen-infected citrus phloem
分类操作单元RFLP OUTs
健株
Health plant
病株
Infected plant
分类操作单元
RFLP OUTs
健株
Health plant
病株
Infected plant
分类操作单元
RFLP OUTs
健株
Health plant
病株
Infected plant
C01 62
57
C11 4
—
C21 4
3 C02 7
6
C12 14
15
C22 3
1 C03 14 11
C13 — 4
C23 — 2
C04 9
—
C14 —
1
C24 —
7 C05 7
9
C15 8
13
C25 7
5 C0
6 4
2
C16 2
—
C26 —
2 C07 3
4
C17 5
5
C27 2
4 C08 4
3
C18 4
3
C28 3
3 C09 3
4
C19 9
10
C29 39
40 C10 12
8
C20 —
6
合计 Total 229 228
表中的数字代表克隆子数目。“—”：克隆子数目为零The numbers in table were clones of RFLP OUTs. “—”：No data
IP 0.44%），Lysinibacillus fusiformis （HP 0%；IP 0.88%），Candidatus Liberibacter asiaticus （HP 0%；IP 3.07%），Bacillus sp.（HP 1.31%；IP 1.31%），Pseudomonas sp.（HP 17.03%；IP 17.54%），Uncultured bacterium clone （HP 28.38%； IP27.63%）（表6，图）。
3 讨论
在分离柑橘内生细菌时，样品材料表面灭菌是影响试验结果的关键环节之一。目前，大多采用低浓度酒精、次氯酸钠、升汞等作为表面消毒剂。消毒时间过短会混入表生细菌，过长又会导致内生细菌类群丢失的问题[19]。Sun 等[20]用75%的乙醇溶液对铜耐海州香薷和鸭跖草的根、茎、叶灭菌2 min ，1%的升汞
A—D 表示不同的操作分类单元，最右边的为标准对照
A-D indicate different OUTs. The most offside one is standard control
图 病株阳性克隆子质粒Rsa I 的酶切图谱
Fig. Examples of the RFLP profiles of clones digested with
Rsa Ⅰ
表6 RFLP 操作单元的鉴定和序列分析
Table 6 Bacteria identified using RFLP and sequence alignment
RFLP 分类单元 RFLP OUTs
登录号 Accession No.
片段 Fragment (bp)
相关序列 Relative sequence
同源性 Identity (%)
C01 HM060200 730 Dyella sp. SBI—25(AB366319.1)
99 C02 HM060201 735 Uncultured bacterium clone AKAU4058(DQ125832.1) 98 C03
HM060202
730
Uncultured soil bacterium clone TC5(DQ248262.1)
93 C04 HM060203 730 Enterobacter sp. HI9(AB453290.1) 99 C05
HM060204
730
Uncultured bacterium clone JH-GY23(DQ351925.1)
94 C06 HM060205 730 Serratia marcescens strain DAP30(EU302855.1) 99 C07
HM060206
731
Uncultured bacterium clone DSM-R20(GU172192.1)
99 C08 HM060207 730 Serratia marcescens strain DAP30(EU302855.1) 99 C09
HM060208
730
Uncultured bacterium clone f6s9(DQ068821.1)
99 C10 HM060209 730 Serratia marcescens strain SB08(GQ465847.1) 96 C11 HM060210 730 Uncultured bacterium clone S22-19(EU669625.1) 99 C12
HM060211
651
Uncultured bacterium clone KD6-15(AY218754.1)
94 C13 HM060212 729 Serratia marcescens strain DAP30(EU302855.1) 100 C14 HM060213 732 Serratia marcescens strain DAP30(EU302855.1) 98 C15 HM060214 730 Serratia marcescens strain SB08(GQ465847.1) 98 C16
HM060215
724
Uncultured bacterium clone B33(GQ422768.1)
98 C17 HM060216 732 Enterococcus sanguinicola strain HN-S8(FJ378705.1) 97 C18 HM060217 732 Achromobacter sp. M23(GU086442.1)
100 C19 HM060218 725 Serratia marcescens strain DAP30(EU302855.1)
99 C20 HM060219 730 Uncultured gamma proteobacterium clone DEG86(GU084190.1) 89 C21 HM060220 730 Uncultured Candidatus Liberibacter sp.(FJ388873.1) 99 C22 HM060221 745 Bosea sp. 7F(AF531764.2)
99 C23 HM060222 735 Lysinibacillus fusiformis strain WH22(FJ418643.1) 100 C24 HM060223 734 Candidatus Liberibacter asiaticus(AB480102.1) 97 C25
HM060224
748
Uncultured bacterium clone KD6-15(AY218754.1)
94 C26 HM060225 732 Serratia marcescens strain DAP27(EU302852.1) 100 C27 HM060226 732 Enterococcus sanguinicola strain HN-S8(FJ378705.1) 97 C28 HM060227 732 Bacillus sp. NR3(2010) 16S(GU566323.1)
99
C29 HM060228 731 Pseudomonas sp.
BWDY-27(DQ314541.1) 99
1 min；张敏等[19]处理甘草时用75% 酒精浸泡3 min，2% NaClO 浸泡1 min，均获得较好的内生细菌分离效果。本研究选用了75% 的乙醇溶液表面消毒1 min，2% 的次氯酸钠对不同部位柑橘样品进行表面消毒，经过多次重复试验，选择灭菌时间短而灭菌效果好的处理作为灭菌方法。选取柑橘枝条韧皮部、侧根和柑橘叶脉为试材，其中叶片中脉处理1 min；病根处理25 min。
内生细菌在柑橘根、枝条、叶片中脉等部位的菌落丰富度和种群数量存在差异。内生细菌丰富度依次为病根＞健根＞病叶中脉＞病枝条＞健枝条＞健叶中脉。根部内生细菌丰富度最大与土壤栖息着丰富的细菌种类并可由植物根部进入植物体内有关。而病叶中脉韧皮部或木质部中内生细菌的丰富度大于健叶，可能与柑橘木虱主要取食新梢嫰芽，在取食的同时也会将自身所带的病原菌或内生细菌传给柑橘有关。从内生细菌多样性分子鉴定结果可知，感病柑橘植株内生细菌种类与无症柑桔植株的种类或数量存在明显差异，如受黄龙病感染的柑橘植株中产左聚糖微杆菌WJ19的种群数量变化最大。Araújo等[21]在研究内生细菌与木质部难养菌（Xylella fastidiosa）的相互作用时发现，在被该菌侵染但不表现症状的柑橘植株中，内生细菌Curtobacterium flaccumfaciens的数量相比健康植株大量增加, 而且能够减轻由X. fastidiosa引发的症状。很可能与M. laevaniformans ATCC15953产生左聚糖[22]，Microbacterium sp.XT11能够合成黄原胶降解酶，将植物病原菌野油菜黄单孢菌分泌的毒素因子黄原胶分解，生成具有激发子和抗微生物活性的黄原胶寡糖[23]。
采用常规方法获得的优势属为芽孢杆菌属，罗永兰等[15]从柑橘、Sun 等[20]从耐铜海州香薷和鸭跖草、张敏等[19]从甘草中分离的内生细菌也均以芽孢杆菌属为主。Magnani等[24]从巴西甘蔗中分离出的内生细菌以Enterobacteriaceae和Pseudomonaceae为优势种群，而不是芽孢杆菌属。本研究发现，柑橘不同组织的内生细菌出现的频次不同。内生细菌以根部出现的频次最高，枝条韧皮部次之，叶片中脉最少，与罗永兰等[15]的研究报道基本一致。本研究检出的内生细菌与GenBank中10个已知属的细菌具有很高的相似性。基于16S rDNA基因的RFLP方法分析的结果表明，鉴定出10个属的细菌以及11个不可培养细菌，其中9个操作单元的序列与GenBank存在的序列比对相似性小于等于97%，这些可能是一些新发现的菌种。本研究采用传统与分子鉴定技术对柑桔健康植株与黄龙病感病植株进行了详细比较研究，发现粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）、肠球菌（Enterococcus sanguinicola）、芽孢杆菌属的细菌种群数量大量增加；血生梭形杆菌（Lysinibacillus fusiformis）、亚洲韧皮杆菌（Candidatus Liberibacter asiaticus）的细菌只在罹病柑橘植株中检测到。据报道假单胞菌属菌株可以调节植物生长激素——乙烯[25]，芽孢杆菌属和假单胞菌属某些细菌可以产生不同的抗生素[19]；粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens strain DAP30）对病原菌具有拮抗作用[26]。广西合浦乌家柑橘场黄龙病果园10年生奥林达夏橙无症植株及带斑驳叶片症状植株不同部位中内生细菌的种群数量、细菌种类均存在一定差异，与Sagaram等[18]的研究结果基本相同，但是与中国黄龙病区柑桔老果园中采集的柑桔维管束组织内分离鉴定的优势菌群有明显差异，这些内生细菌优势菌株与黄龙病菌相互作用的研究正在进行。
迄今为止，国内外仅有少数几则柑桔黄龙病菌体外培养的相关报道 [12,14,27-29]。赵鸿燕等[28]曾利用病叶分离得到的培养物进行抗菌素敏感性试验和生物感染试验；张景宁等[29]报道培养柑桔黄龙病罹病组织的纯培养菌获得成功，并将分离菌接种健康柑桔幼苗，表现出褪绿黄化症状；电镜观察发现黄化植株筛管细胞存在具柄类细菌。但限于技术瓶颈，上述研究获得的培养物当时都未能进行PCR分子检验证实，而未得到国内外同行公认。由于罹病柑桔体内同时存在不止一种病原细菌或原核生物，有可能分离物并非黄龙病菌而是同样可以引起植株黄化的韧皮部其它内生菌或植原体，因此其结论仍有许多值得商榷之处、存在较大争议而没有获得同行的一致公认，其中留存的疑团有待深入研究加以澄清。值得一提的是Chen等[30]报道用巢式PCR在柑桔黄龙病样品中单独检出广东的柑桔黄龙病菌或者植原体，抑或同时检出。因报道引起畸形、黄化或小叶等症状的柑桔体内存在植原体，如同HLB病菌一样活体寄生在韧皮部组织细胞中，至今未能人工培养。而本研究的PCR-RFLP的克隆序列比对分析结果中却未见相关的序列信息，究竟是样品数量或部位，抑或采样时期的原因，还是黄龙病病原学其它原因，尚有待进一步研究。
现代微生物微生态学研究结果证明，自然生态环境中的微生物与周围环境、包括环境中的其它微生物有着非常复杂特殊的联系[20,22,24]。互养（Syntrophism）、共代谢（Cometabolism）等方式是微生物在自然界中
中国农业科学43卷
最重要的生存模式之一，同一生境中的微生物之间存在千丝万缕的联系，细胞与细胞间有着广泛的通讯和联系。Lacava等[31]利用实时荧光PCR检测技术研究柑桔内生菌，发现嗜中温甲基杆菌（Methylobacterium mesophilicum）与柑桔木质部难养菌存在相互作用关系，将嗜中温甲基杆菌人工针刺接种马达加斯加长春花后可以促进病菌生长和病害发生。Davis等[12]发现柑桔黄龙病菌的生长可能与植物体内的放线菌有一定关系，但后续研究报道发现没有必然的联系。 Sechler 等[14]采用柑桔汁液在选择性人工培养基上进行共培养，获得柑桔黄龙病的纯培养菌，且经qPCR检测阳性。采用浸润法接种柑橘幼苗表现HLB的类似黄化症状，遗憾的是纯培养物尚不能连续人工传代培养。总之，柑桔黄龙病菌的人工培养是黄龙病病原学研究的关键技术难题，彻底解决有待于深入了解病原菌与内生细菌之间在寄主细胞中相互作用的关系。
4 结论
本研究以无症健康柑橘植株为对照比较分析了中国广西合浦柑橘农场10年生黄龙病感染奥林达夏橙植株内生细菌的多样性，获得与亚洲韧皮杆菌伴生的内生细菌优势种群，为深入研究柑橘黄龙病菌与伴生细菌的相互作用提供了实验基础。
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（责任编辑岳梅）
中草药热疗了解方案-文章 一、认识热疗 1、热疗是通过提升人体体温的方式，达到疾病防治、养生保健的目的； 2、历史以来对热疗的诠释 1.公元前460年，被称为西方医学之父的希波克拉底，利用热疗治疗肿瘤，还断言，连热疗都无法治疗的疾病，便无法再治了。 2.我国古代很早就有用“热”来治疗顽疾的传统，如砭石、灸术等，还用烧红小烙铁治疗浅表肿瘤。 3.18世纪德国医生Busch首次报告1例病例证实面部肉瘤，因感染丹毒，高烧后肿瘤消失，患者存活。 4.1893年美国医生Coley在《美国医学杂志》发表最新研究，利用丹毒毒素诱发患者发热38-40℃，治疗晚期癌症38例，随访27年，其中12例治愈，19例好转，5年生存率达60%。 5.1953年美国医生Coley的女儿Helen Naut报告30例软组织肉瘤、淋巴瘤、宫颈癌等，用高热治疗，其中25例生存率10年以上。 6.1957年美国医生Selawry综合各家文献经病理证实450例自行消退的恶性肿瘤，发现其中至少有150例患有疟疾、伤寒而诱发高热的历史。
7.1975年第1次国际加温治疗癌症会议在日内瓦召开，并成立国际肿瘤热疗学会，作为学会的组织机构，下设欧洲、北美、亚洲肿瘤热疗学会。3、国际性热疗专项大会讲述热疗对人体病灶治疗的重要性 4、热疗方面的书籍对于热疗全面阐述二、认识热疗设备 1、局部热疗设备 2、全身热疗设备 3、热疗后身体受热体内细胞变化 4、小结 ●认识了热疗及热疗被广泛运用及推广，同时也看到了关于大型的热疗设备被运用，说明热疗是确实可以用来治病救人的。 ●但是大型热疗设备价格昂贵，同时不能被轻易搬动，在收费上根本无法让普通人得到享用，根据一些大型医院使用收费标准，基本上做一次热疗，一个小时时间收费在2500-4000之间，这让很多人望钱而却步。 ●根据以上情况，杏林天道（北京）国际医学研究院副院长高汉卿及中心主任朱国清联合各个专家研制出了可以穿在 身上并通过24V以下直流低电压供电的热疗专利的热疗服。 三、认识机构 1、杏林天道（北京）国际医学研究院 本研究院是一所集中医，西医，养生学，基因营养学，运动
艾灸特色：安全、速效、无副作用、工具简单、操作方便、费用低廉、应用范围个广泛，能治多种疾病，即使无病，灸疗也能养生保健，与其他的医疗有很多不同的地方，灸法亦可与针刺或药物配合应用，可治的有效病种已有百种中华医学奇宝--香薰经络美容艾灸，乃中国最古老的医术之一，属于医外治物理疗法，它源于远古时代，形成于商周年间，历时几千年。温灸美容是通过百草之王艾草和13种名贵中草药特制成香条状，点燃后放入温灸器中产生温热的刺激，配合艾油(或精油渗入)在经络或患处四周，帮助人体全面温通经络，温补元气，调和气血，润泽肤色，散发健康神采。 温灸养生在身体方面有六大功效：温肌散寒、疏风解表；温经通络、活血散瘀；温中活里、强脏壮腑；温阴补虚、回阳固脱；行气活血、消火化淤；平衡阴阳、保健防病。面部皮肤方面：可加速皮肤的血液循环，使老化细胞代谢，新细胞再生加强，淡化色斑，减少皱纹，使肤色红润，延缓衰老。眼部方面：可改善眼袋、黑眼圈、眼睑下垂、皱纹、延缓眼部的松弛老化现象，使眼部恢复光彩。面部温灸次序：额头--太阳穴--眼部(瞳子胶、承泣、四白)--脸颊--鼻翼--嘴周--颌尖--颈部--耳周 艾灸疗法 慢性病是由于多种原因而使气血长期淤阻，阴阳不平衡，内分秘紊乱，有关功能失调而造成的。已不是一天两天形成的，病久已传化，上下痞涩，阴阳失和，病情已不限于一经一脏一腑。也就是说不是仅病在一个地方，而是整体病了。只能用艾灸等中医经络方法从整体来慢慢调理。 西医主要是从局部来治，是无法根治慢性病的。如吃药，是药三份毒，也就是药是有偏性的；对症，病好的快，不对症，会起反作用；有的在治这个病时，可能对其它的脏腑会有伤害，如果长期吃药，伤害可能会很大。 我们用温灸（包括香灸）治慢性病，注重整体配穴，以期灸通脏腑、经络，灸通上下，调平阴阳，通过对人体的经络系统和神经系统的有效调理，创造条件，最大限度的发挥人体的自身修复潜能，使人在不用吃药打针的轻松状态下恢复健康！。艾灸温灸，能治百病！其功效确非我们意想所能及的，其中的妙味和神奇之处！没有亲身经过实践的人是不会知道的。灸法（温灸），是中医中最上乘的治疗保健方法，是人类唯一的一套完整的内病外治的体系，是保命第一法。艾灸的温热刺激能直达深部，经久不消，使人发生畅快之感。 本馆温灸结合针灸，按摩，整脊、拔罐、刮痧等手法。可以治百病！适应症广泛： 妇科病，减肥、去痘。去斑、去皱；不孕，痛经，月经不调，闭经、炎症、盆腔炎，子宫脱垂，子宫囊肿、子宫仲瘤，宫颈息肉、子宫内膜溥，子宫内膜异位、输卵管堵塞，乳腺病，乳汁过少； 眼病：眼睛疼，近视眼，散光眼、巩膜炎、白内障、青光眼，麦粒肿、泪囊炎。 肝炎、肝硬化、肝脓肿、肝气旺盛，脂肪肝，胆囊炎；抑郁症。 风湿性心脏病，冠心病，高血压，心律紊乱，心肌炎。胸闷。 咽喉炎，扁桃体炎，支气管炎，肺炎，肺结核，肺气肿，哮喘，胸膜炎。各种皮肤病 肠胃病：胃疼，胃及十二指肠溃疡，肠炎，痢疾，阑尾炎，肠痉挛，呕吐，泄泻。便秘痔疮。肾病综合症，肾小球肾炎，膀胱炎，遗尿证，遗精，阳委，早泄，前列腺炎，阴茎海棉体炎，睾丸炎，肾虚。背冷。骨结核。脊髓灰质炎（小儿麻痹症），脱发。 腮腺炎，甲亢，糖尿病，神经衰弱，失眠，耳呜，盗汗，癫痫，眩晕，头痛，三叉神经痛，牙痛。颜面神经麻痹，面肌痉挛，美尼尔综合征。中风，偏瘫；。帕金森综合症。 颈椎病，。腰椎痛，腰椎间盘突出，骨质增生；肩周炎，关节炎，痛风等 肿瘤，癌症，血小板减少性紫癫，贫血，静脉曲张，灰指甲，腋臭等。
松花粉的荣誉与奖项 ●1995年，朱镕基总理批示：松花粉项目有前途，是否请一大中型企业与研究所合作生产。 ●1998年1月，荣获98美国国际新产品博览会“国际金奖”、“国际特别荣誉：对人类突出贡献奖”（只有极个别的发明和重大发现才被评上该奖项，如飞机、轿车、电灯、电话、电脑等）。 ●1998年，获美国食品与药品管理局FDA通关认证。 ●2004年，被世界保健品研究会等机构评为“世界十大保健食品”。 ●2005年9月，荣获“中国航天专用保健食品”。 ●2005年9月，荣获“2005中国食品安全年会唯一指定保健食品”。 ●品牌：国珍，国之珍宝。 ●中国著名营养学家、原国家营养学会主席于若木（原国家领导人陈云夫人）曾三次为松花粉题词：“松花粉的开发是造福人民的事业。”、“世界珍奇，中国独有”、“国珍松花粉，上帝赐给人类的保健珍品。” ●法国医学界：松树保健品对人体具有29种独特的健体作用。 ●营养学家王岚教授：松花粉富含最强大有效的抗衰老物质，即天然的长寿物质。 ●世界自由基生物与医学会主席莱斯特. 派克博士2000年就宣布：松树提取物是世界上迄今为止文献记载和实验室发现最强的天然抗氧化（抗衰老）物质。●德国、法国等世界几十家权威科研机构数百次的科学实验证实：松树提取物富含天然的长寿物质，对于整个人类具有重大的保健养生价值。 ●世界保健研究会首席科学家林德说：“松花粉，是国际上最好的细胞营养食品。” ●欧洲食品研究中心公开宣称：“全世界没有任何一位营养专家能够配比出象松花粉这样对人体有益的活性物质。” ●法国学者A.卡亚所言：松花粉这种自然界为我们提供的浓缩和奇异的食物，是一种真正的灵丹妙药。即使它不能治好所有的病，但它可使所有病情中最令人失望和危险的症状得以减轻。 ●北京大学人民医院内科教授、世界卫生组织成员、美国斯坦福大学营养学教授齐伯力：“松花粉是健康的微型营养库。” ●中国中医研究院王连清教授（曾经是刘少奇、胡耀邦、叶剑英、邓小平、聂荣臻的保健医生）：“松花粉是最好的保健食品。” ●卫生部首席健康教育专家、中国人民解放军总医院微量研究室主任赵霖教授：“松花粉将引领养生健康新理念。” ●原中国保健食品协会副会长、中国保健科技学会健康促进会会长刘建文：“松花粉已成一种健康文化。” ●原中国人民解放军三一六医院院长兼党委书记袁秀英教授：“松花粉是均衡人体营养的最佳营养食品。” ●中国健身俱乐部委员会副主任、营养学家王岚教授：“松花粉是最好的美容剂。” 一、第三届亚洲冬季运动会唯一选用花粉
巢之安牌知本天韵胶囊本产品不能替代药物使用 马雷的多重身份 马雷毕业于北京中医药大学，研究女性的保养方法四十多年，对女性养生和抗衰老有着丰富的临床经验和高端的国际视野。著有《每天都要修复生命》、《把国医带回家：没病的女人才美丽》等书籍，是《人民周刊》健康栏目专家。 马雷有着诸多身份。除了与生俱来家庭给予自己的身份，还有后天自己也孜孜不倦地学习争取来的身份。 红墙国医王连清老师的女儿 王连清，1933年1月生，1954年毕业于当时的北京医学院，之后荣幸地被组织上安排在中央条例委员会和卫生部双重领导的高级干部调理基地——北京医院的内科、神经内科、康复科工作。是主任医师，也是教授。 早年因为对针灸产生兴趣，走上了学习中医的道路。并在之后的发展中，成为京城岐黄国医馆馆长，“皇城国医”品牌创始人，曾为刘少奇、胡耀邦、叶剑英、聂荣臻等几十位中央领导和外国元首做过医疗保健。《北京晚报》健康快车大课堂列车长，李嘉诚特约保健医生。
巢之安牌知本天韵胶囊本产品不能替代药物使用 马雷，是王连清老师的女儿、嫡传弟子及学术传承人。曾与母亲一同参加湖南卫视的《百科全说》普及身体知识。 北京岐黄国医馆创始人 马雷是北京岐黄国医馆创始人，同时是知名养生专家、中国针灸学会会员、中国保健科技学会健康产业促进会专家委员会委员、养生专业委员会考评员、圣迪斯哥(CIDESCO)国际专业美容师、家电视台健康讲座嘉宾，曾赴美国、德国、马来西亚等国家做访问学者。创造出了独树一帜的身体调理体系，成为养巢俱乐部首席顾问。 养巢俱乐部的首席顾问 养巢俱乐部是一个在线会员组织，隶属于武汉一元堂生物科技有限公司。组织以保养卵巢为特色，以健康咨询和管理为主要服务方式，以巢之安系列女性保养品、卵巢调理产品、女性滋补品、女性私护产品为基础，以线下会员俱乐部以会员体验中心（在建）为依托，为女性提供安全的调理服务。养巢俱乐部成立至今已经十三年，截至2017年10月，粉丝数已近600万。
马雷，红墙国医生王连清的女儿及嫡传人，圣迪斯哥（CIDESCO）国际专业美容师，马雷养巢俱乐部的首席专家，知名养生专家，多家电视台的健康讲座嘉宾，曾赴美国、德国、马来西亚等国家做访问学者。众多荣誉加身的马雷教授为女性普及了很多的健康知识，在五一劳动节来临之际，为了向我们广大女性劳动者致敬，我们巢之安工作人员特意在一星期前预约了我们的马雷教授，并进行了一次会心访谈。 1.巢之安：马雷老师从医多久了呢 马雷教授：二十多年了。 2.巢之安：马雷老师是如何踏上学医之路的，最初学医时是抱着什么样的心情 呢？ 马雷教授：当医生是我儿时的梦想，我是早产儿，从小生活在医院的集体宿舍里，周围的叔叔阿姨都是医生，用我妈妈的话说，我是按照前苏联的科学营养配餐计算卡路里喂大的孩子。 儿时的我玩的过家家都是当医生啊，护士啊，学着大人的模样给我的娃娃打针、听诊、用小勺分药。可以说是医生之家的氛围，以及对医生这个神圣职业的崇拜下长大的。本来我高考的志愿是考医学院的，但父母因为担心我的身体就让我考师范大学当老师，谁曾想毕业后阴差阳错地把我分配到了首都医科大学任教，这又勾起了我对医生职业的憧憬，于是我就报考了北京中医药大学，终于实现了我当医生的愿望。
3.巢之安：每一次跟咱们会员见面的时候，您的心情是怎样的呢？ 马雷教授：非常期待，因为这些会员姐妹是真正对自己身体健康用了心的。她们有的是寻求多方、用药无数，但是没有达到自己预期的效果才来见我的。我用心倾听每一位姐妹的苦衷，耐心解答她们的困惑，为她们量身定制调理方案。其实每一个姐妹的病案都是有代表这种问题的共性解决方案。我希望通过和姐妹 们见面能够对她们有所帮助。
王连清教授：饮食的禁忌 饮食的禁忌 中国中医研究院原主任医师、崔月犁传统医学研究中心特邀研究员、曾经为几十位中央领导和外国元首作过医疗保健、北京京城岐黄国医馆馆长、首席医官王连清教授患有不同疾病的人，要有严格的饮食禁忌，就是常说的“忌口”。病中忌口是对患者的调护，与疾病的发生、发展、转归都有着密切的关系。俗话说：“三分治疗，七分调养”，其中，“忌口”就是病中调养的重要一环。 病中的忌口，一方面与服药有密切的关系，也就是药后忌口；另一方面是要注意与病情的关系，要针对疾病的寒、热、虚、实、表、里、上、下，五脏六腑等病因、病位、病性诸方面，结合食物的性、味全面加以考虑，凡于病不利的饮食，皆为所忌。 根据中医文献记载和临床经验，可以总结出如下一些饮食禁忌。 1、凡体质较弱的病人，忌食不易消化的食物，如油炸、油煎的肉类，以及腊肉、鱼干、年糕、韭菜等，并忌一切生冷，特别是冷水、凉菜、生菜、生杏等。 2、一切病人都须忌暴饮暴食、偏嗜五味、过用油腻、
腥臊、煎炸厚味，以及吸烟酗酒等。 3、凡发热的病人，忌辛辣、油腻之物，如姜、椒、肥肉、酒类等。 4、热病初愈后，宜忌油腻、肉类、辛辣类食品，如羊、驴、马、猪肉，以及葱、姜、蒜、椒等。 5、久病忌食猪头肉、母猪肉、鹅肉、鱼腥类，乔面等发病食品。 6、小儿病后忌饱食及腥荤厚味。 7、产后及月经期忌寒凉食品。 8、肝、胃、心脏疾病皆忌酒。 9、疮疡肿毒病人，忌羊肉、蟹、虾及辛辣刺激性食物。在《黄帝内经》中就有“高粱之变，足生大丁”之说。著名皮肤病专家赵炳南说：“如过食腥发动风，膏梁厚味、烟、酒、浓茶辛辣，以致脾为湿热所困，并可引起湿疹的发作”。 10、要注意食物与食物、药物与食物之间的禁忌，就像药物有十八反、十九畏一样，它们之间也存在着不相宜的情况。如服食滋补剂后，严禁服用莱菔子及大寒、大凉饮食；服蜂蜜，忌食土茯苓、威灵仙；用荆芥后，忌食鱼蟹。在外感病初期，如果感受了风寒之邪，正在服解表散寒药时，则当禁食生冷油腻；如果是温热之邪，初期正在清解阶段，亦当忌食生冷。 11、要注意不同的病，有不同的忌口。水肿病，忌盐；
国内外专家评价磁化水 1.西晋陶弘景在《名医别录》中指出，炼水饮之可养肾脏，强筋骨。炼水之物说的就是磁化水。 2.明代医学家李时珍发现磁力处理过的水具有“去疮瘘”、“长肌肤”、“畅饮令人有子，易入酒”、“壮阳”等功效。（《本草纲目》583-586页，磁化水的杀菌消毒作用）。 3.中国医促会中老年保健专业委员会副主任委员齐宝华说：磁化水是比白开水还便宜的健康水。 4.赵春媛在《喝出健康来》中说：对于肾结石，目前还没有一种治疗方法能和饮用磁化水相比。 5.中南科技学院的何世春教授认为：真正优质的磁化水是人类饮用水的理想选择。 6.香港健康理事会磁化水疗加草药（精油）加手脚按摩等与终结疾病。 7.日本医学博士、水专家林秀光认为：在众多的饮用水品种当中，净化后的磁处理水是第一选择。 8.美国的大卫-威乐博士和麦隆尼-蒙哥马利，实验测试国际知名的功能水、著名品牌矿泉水、电解水共8种水样，结论是磁化水是切实可信的功能水。 9.美国科学家R.T莫里森指出，水经过磁场处理后，磁场会对水产生洛伦兹力的作用，使水分子产生极小的缔合集团，也就是小分子团。 10.世界水文化研究会会长李复兴教授认为：磁化水是生命科学和物理科学结合的产物。 11.国际水疗协会会长盛贤远指出：用磁化水做温水浴，就能融化病根“寒冷”。 12.国际健康事业促进会会长史迪夫指出：用磁化水洗浴，大多数人一定能走向健康之路。 13.全通直通商务总会总干事安格斯说：磁化水闪耀着财富金光! 14.世界保健品研究会舒沁说：磁化水是“神力水”，是可以为身体排酸的水。 15.国际自然疗法研究院院长王连清指出：磁化水是人类完美的生命活水。磁化水疗是人类慢性病简便有效的自然疗法。 16.国际自然疗法研究院研究员李聚志指出：部分慢性病患者引用磁化水会出现“瞑眩反映”这是好转反应，放心饮用。 17.国际自然疗法研究院教授李文论指出：磁化水不仅养生保健，在西方医学界已被称为“第三医疗”，即符合安全、经济、疗效等优点，还会给人类带来长久的健康福果。 18.国际自然疗法研究院教授黎明雅指出：磁化水是二十一世纪饮用水革命新主流。 19.国际自然疗法研究院研究员伍思骏指出：磁化水具有一定的保健功能，是高品质的饮用水。 20.国际自然疗法研究院研究员魏微庸指出：饮用磁化水是防衰老、预防疾病发生的重要措施，是养生保健的有效、经济实惠的明智选择。
如何保养维护好我们的身体 ―― 拥有健康，才能拥有一切 我们都知道，一辆汽车，如果经常维护保养，它的使用寿命就会增加。女士们为了使脸部的皱纹出现的晚一点，会一直使用各种护肤品。那么对于世界上，最重要的精密“机器”――我们的身体，我们是否会经常保养呢？ 如果给您三样选择：健康、财富、美丽，而且只能选择一样，你会选择哪样呢？各位正在奋斗于自己事业的朋友，如果让你们选择：事业和健康，你们又会选择哪个？ 我相信大家肯定会选择健康。大家心里也明白，健康对于我们每一个人，都是最重要的。同时许多人，却有意无意的想赌一下（侥幸也是赌哦），我就是不注意健康，看疾病何时来。我们赌的起吗？因为一个人的健康不仅关系到他的身体，还关系到他的事业，更关系到他整个家庭，一人生病拖累全家！ 一：健康靠谁 有人会说，健康应该是医生的事情，有病只要找医生就是。真的如此吗？无疑，现代医学挽救了很多人的生命，为人类做出了不可磨灭的贡献。同时，我们现在的医疗条件明显比过去好了，各种新药也不断出来，可是在我们人类的身体体质却越来越差，亚健康人群占成人的70％；患各种慢性病的人越来越多，而这些慢性病是导致人死亡的最主要的原因。对于这些慢性病，我们的医院目前束手无策，许多专家自己正生着他所看的慢性病。人类经过多年的研究，终于明白什么对于我们的健康更重要。为此世界卫生组织研究报告特别指出，影响人类健康的有以下因素：遗传因素占15％、医疗条件占8％、气候因素占7％、社会因素占10％，其中，自我保健占最主要的因素，是60％。原来自我保健才是我们保持健康最重要的方法。中南海名医，原叶剑英、邓小平的保健医生王连清教授也说：“保健，就是保护身体健康，21世纪将以预防疾病和保健为主，我们要从依赖医生为主，改变到以自我保健为主，以提高身体健康素质为主。”所以，健康要靠我们自己，靠我们平时的保养，靠自我保健！人必须靠自我保健的还有一个重要理由是：一旦生病，特别是大病，那笔昂贵的医药费，那时间精力会拖垮全家。实际上，我国的祖先们，在几千年前，已经提出身体保养――养生。他们的养生理念至今领先世界！后来由于种种原因，我们在一段时期，抛弃了我国五千年的养生文化，跟在别人的屁股后面。直到外国人在经过不断碰壁后，开始认识到保健重于治疗，我国的养生文化才被世界所认识（可叹的是，目前美、日两国在中医研究上的投资，远大于我们）。我们那些认为别人的月亮比我们圆的，才又跟在别人后面讲起保健。可是我们的国人对于健康的认识，还停留在医治上，我们关于保健的模式也依然以外国的模式为样板。这依然是可悲、可虑的。 二：人应该从何时开始保养 我们或许会认为，身体保养是老年人的事情。可是现实却是那么的无情：已经发现婴儿患糖尿病；许多年轻人因为长期疲劳又不注意保养突然猝死（如爱立信中国老总）；各种文明病已经大量出现在青年乃至婴幼儿身上；同时研究发现大量
卵巢保养新方法，让女人年轻10岁红墙国医教你睡前养巢， 太神奇，遭疯传！ 她，出身中医世家，是新中国第一代国家领导人保健医王连清的女儿。她，行医40余载，是众多政界女官员、演艺明星和名媛富太的私人养生顾问。她，对女性养生和抗衰老有着丰富的临床经验和高端的国际化视野，是公认的中国女性养巢抗衰第一人。她在女性卵巢早衰的治疗与保养上堪称一绝！一剂睡前养巢方，效果立竿见影。很多女性在服用她的养巢方后，当天就能睡个好觉，15天色斑、皱纹就能减退，2个月内就能全效解决潮红、潮热、盗汗、阴道干涩、皮肤松垮、脸色腊黄、心情烦乱等更年期症状。这些年，通过她调养卵巢的病人，有的停经2年再回潮；有的50岁皮肤白净，不长皱纹不长斑；就连年近60岁还能生娃娃的案例也比比皆是。她，就是马雷教授，我国妇科医学领域的' 养巢圣手'，女性卵巢衰老的救星。马雷与母亲（大国医王连清）温馨合影马教授有一个朋友是妇科病领域的专家，曾经问诊过数千计的卵巢早衰的女性，却无法治好自己的卵巢早衰，最终因为卵巢衰竭导致停经。结果在服用了马教授推荐的'睡前养巢方'后，不到3个月月经就来了。如今3年过去了，老专家现年57岁，而年龄皮肤和身材就象40岁的人。不仅如此，今年年初还'一不小心'又生了一个胖儿子！养巢圣手马
雷马雷问诊娃哈哈董事长宗庆后马教授随母——大国医王连清行医40年，其名声在中医界无人不知。凡经她手的患者，既不用三餐煎服药膏的繁琐，更不靠激素药物的刺激，只用睡前一个简单方便的办法，衰老的痕迹就能一扫而空，容光焕发，坚持个一年半载，整个人活力重现，脱胎换骨！马雷本人现也已年过半百，但她皮肤依然细腻光滑，气色白里透红，每每出镜看起来还不到40岁，女人味十足。谈及女人的养生之道，她总说：女人只要做好'养巢'这一件事，全身都可以变年轻！马雷曾为歌唱家关牧村的私人养生顾问马教授曾是享誉京城的红墙国医，也曾为众多政界女官员、演艺明星和名媛富太做过营养与保健医生。弟子更是遍布大江南北。影视明星刘慧是马雷的忠实粉丝马教授的医馆里，到处都是一些政府女官员和明星们送的锦旗马教授从小受着母亲中医养生传承，也形成了自己独有的风格，和很多老中医不同，马教授擅长将复杂的问题简单化，往往是成堆的症状摆在她这儿，但她总能用最简单最直接的办法一气儿解决。很多病人都说，用马教授的方子，有时比西药效果来得还快。在女人抗衰老这件事上，她也总强调：抓住卵巢这个源头，就可以找到更简单的解决办法。找马教授养巢的女性特别多，马雷从不拒绝，她说：'女人想年轻，其实一点都不难。'经她手的女明星也不少，皮肤糟糕得不成样的，用了她的方子，2个月下来可以素颜上镜。年纪大了身材走形、眼
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 科学养生与均衡营养 科学养生与均衡营养各位朋友各位新时代人大家好，欢迎大家走进新时代健康大课堂，首先做一下自我介绍，我叫 XXX，今天大家相聚在这里就是为了了解一些健康知识，下面我就和大家共同探讨一下科学养生与均衡营养。 中国的科技在迅速发展，经济实力在不断增强，人们的生活水平在不断提高，由于很多人不懂得健康知识，随心所欲的饮食，结果吃出了很多文明病，如糖尿病，心脑血管病，肥胖症，癌症等，总体上看国民体质不断下降。 据调查发现我国有 22%的成年人超重，糖尿病患病率 11%，高血压患病率 23.44%。 另据调查，我国贫困人口中因病致贫因病返贫的约占 30%到60%，疾病已成为贫困地区奔小康的严重障碍。 因此有人形象的把健康的身体比作 1 ，家庭，财富，权力，地位，名誉等，比作零，当健康的身体 1 存在的时候这一切才是真实的，而当健康的身体 1 倒下的时候后面的一切毫无意义。 健康如此重要，我们对健康的知识又能了解多少呢？今天我们探讨的第一个话题是： 什么是健康。 一。 什么是健康这位朋友请你回答一下好吗?他的回 1 / 16
答代表了大多数人的想法，没有病就是健康，，这是传统的健康观念，大家给他一个掌声。 世界卫生组织把健康的定义延伸开来，健康不仅仅是躯体没有疾病，也就是生理健康，心理健康，社会适应力良好，道德健康。 具备这四个条件的人才是一个完全健康的人。 大家看看，我们身边的朋友具备这四个条件的多不多？，据统计，真正健康的人只占我们人群总数的5%，亚健康的占 75%，疾病的占 20%.。 那什么是亚健康呢？亚健康包括两方面的情况： 一是身体出现腰酸背痛腿抽筋，头晕头痛，失眠多忘，浑身无力，但到医院检查不出什么病，吃药也不管用，二是身体没什么感觉，但到医院检查血压血脂有点高，有脂肪肝等。 出现了这些症状如果合理饮食，加强锻炼，戒烟限酒还能恢复到健康状态，如果满不在乎，拖着靠着挨着就会走向疾病状态，真正得了疾病再想回到健康只有 8%的希望，由此可见亚健康是健康通往疾病的桥梁。 因此我们要懂得如何获得健康。 二。 如何获得健康要想获得健康，就应该按照健康的四大基石去做。 四大基石是什么呢？那就是充足的睡眠，适量运动，良好心情，均衡营养。
王连清教授：饮食的禁忌 王连清教授：饮食的禁忌饮食的禁忌中国中医研究院原主任医师、崔月犁传统医学研究中心特邀研究员、曾经为几十位中央领导和外国元首作过医疗保健、北京京城岐黄国医馆馆长、首席医官王连清教授患有不同疾病的人，要有严格的饮食禁忌，就是常说的“忌口”。病中忌口是对患者的调护，与疾病的发生、发展、转归都有着密切的关系。俗话说：“三分治疗，七分调养”，其中，“忌口”就是病中调养的重要一环。病中的忌口，一方面与服药有密切的关系，也就是药后忌口；另一方面是要注意与病情的关系，要针对疾病的寒、热、虚、实、表、里、上、下，五脏六腑等病因、病位、病性诸方面，结合食物的性、味全面加以考虑，凡于病不利的饮食，皆为所忌。根据中医文献记载和临床经验，可以总结
出如下一些饮食禁忌。1、凡体质较弱的病人，忌食不易消化的食物，如油炸、油煎的肉类，以及腊肉、鱼干、年糕、韭菜等，并忌一切生冷，特别是冷水、凉菜、生菜、生杏等。2、一切病人都须忌暴饮暴食、偏嗜五味、过用油腻、腥臊、煎炸厚味，以及吸烟酗酒等。3、凡发热的病人，忌辛辣、油腻之物，如姜、椒、肥肉、酒类等。4、热病初愈后，宜忌油腻、肉类、辛辣类食品，如羊、驴、马、猪肉，以及葱、姜、蒜、椒等。5、久病忌食猪头肉、母猪肉、鹅肉、鱼腥类，乔面等发病食品。6、小儿病后忌饱食及腥荤厚味。7、产后及月经期忌寒凉食品。8、肝、胃、心脏疾病皆忌酒。9、疮疡肿毒病人，忌羊肉、蟹、虾及辛辣刺激性食物。在《黄帝内经》中就有“高粱之变，足生大丁”之说。著名皮肤病专家赵炳南说：“如过食腥发动风，膏梁厚味、烟、酒、浓茶辛辣，以致脾为湿热所困，并可引起
百科全说治疗失眠的方法王连清安睡灵的做法 配方：炒枣仁30克，炙远志10克，莲子心5克，制法：研磨成粉后，用蜂蜜调服早晚服用，首长服用以后效果很好。失眠严重的可加4克琥珀粉，还可以治疗抑郁症。注意事项：脾胃不和的患者，需要加服调理脾胃的药物，如保和丸等。食用方法：失眠症状严重者，每日午饭前，晚饭前和睡前服用。症状较轻者，每天早晚两次。对失眠特别严重的人可以加入4克琥珀粉兑服用，效果更好些。 王连清教授王连清，中国四大名医之一汪逢春入室弟子，主任医师，教授，中国中医科学院知名专家，崔月犁传统医学研究中心特约专家，京城岐黄国医馆馆长，“皇城国医”品牌创始人，从事中西医结合临床医疗保健工作五十余年，曾经为刘少奇、胡耀邦、叶剑英、聂荣臻等几十位中央领导和外国元首做过医疗保健，临床擅长针药并用诊治心脑血管疾病、中风瘫痪、消化系统疾病、亚健康调治及各种疼痛病症。王老针药并用治疗疼痛病症的论文于1983年在美国国际学术会议上获奖。走进北京电视台《养生堂》、中央十套《走进科学》节目的知名养生专家，中西医结合保健医生，现任中国中医科学院针灸医院主任医师，中国科协中医药专家组和激光专家组咨询专家，中华医学会激光分会委员，中国中西医结合软组织疼痛研究会理事，香港保健协会医学顾
问，《北京晚报》健康快车大课堂列车长，李嘉诚特约保健医生。“神奇的针灸带我走上中医路”1954年毕业于当时的北京医学院，王老荣幸的被组织上安排在中央保健委员会和卫生部双重领导的高级干部保健基地——北京医院的内科、神经内科、康复科工作。由于特殊的工作环境她经常能够接触到来自全国的名老中医给领导看病。得天独厚的机会被王老抓住了。某部李部长患有肝硬化、并伴有腹水和黄疸，生命危在旦夕。院领导请来了湖北的针灸专家杨济生大夫，经杨大夫针刺三阴交(穴)和用“太乙神针”灸神阙穴后，病情减轻了许多。腹水减少了，黄疸减轻了，食欲也改善了。神奇的治疗效果，使王老对祖国中医产生了浓厚的兴趣，对针灸也产生了好奇心。在李部长的鼓励下，王老走上了学中医的道路。1954年毕业于北京大学医学院，在中央保健局和卫生部双重领导下的高级干部保健基地（北京医院），从事党和国家领导人的医疗保健工作21年，曾经为刘少奇、胡耀邦、叶剑英、邓小平、聂荣臻等几十位中央领导和外国元首作过医疗保健，尤其擅长消化系统、疼痛疾病、中风后遗症、植物神经失调、失眠、保健抗衰老等方面的治疗保健，具有丰富的临床经验。1975年调入卫生部中国中医研究院，职称教授。2011年王连清老师做客湖南卫视《百科全说》做嘉宾“中医大夫只会开药方，不会扎针灸，只能算半个大夫；反之，只会扎针灸不会开药方也算是半个大夫。一位完整的中
《国医谈蜂胶》——红松蜂胶 主持人：您正在收看的是《国医谈蜂胶》，今天特邀红墙国医为您解读大自然的馈赠，蜂胶。为您的健康长寿指点迷津，告诉糖尿病病人您不知道的蜂胶的奥秘。 今天很荣幸的请到了中国中医科学院知名专家，主任医师教授资深的中西医结合医学专家，王连清教授。 红墙国医王连清教授从医60余年，与共和国同龄，是中国四大名医之一汪风春的入室弟子，中国科学院知名专家，教授，中南海专职保健医，资深的中西医结合专家，连华人首富李嘉诚都接受着她的保健治疗，多次走入中央电视台，北京电视带养生堂，及各大卫视的养生栏目。 主持人：从很多的电视节目当中我们知道，您为党和国家领导人为做医疗保健工作，被尊称为红墙国医，那么在谈蜂胶之前，我想问您一个老百姓最关心、也是最好奇的一个问题，您曾经是咱们国家领导人的红墙保健医，那么在那个时候咱们建建国时期的开国元勋有得糖尿病的吗？ 王教授：有的，我记得最清楚的一位总司令，他就是有糖尿病，那个时候，糖尿病的治疗的方法以口服降糖药或者是注射胰岛素，饮料调理和运动为主的，就像现在人常说的，要管住嘴，要迈开腿，所以总司令在全国解放之后，基本上退居二线了，但是还是因为他的糖尿病影响了他的身体健康，我记得那是1976年的春天，大概就是这个时候，这个季节，他得了感冒，由于得了感冒之后，血糖比较高，一直控制得不是很好，继发感染了，就得了肺炎，肺炎持续干烧不退，最后过早的就离开了人世了。很多糖尿病人死亡的原因都是因为糖尿病并发症造成的，比如说糖尿病眼底它会造成你失明，甚至白内障等等，另外糖尿病肾病它影响你的肾脏功能了，它会得肾衰，甚至于尿毒症，更痛苦的是它的脚和小腿的下部，出现坏疽了，这种坏疽的情况，特别特别的疼，可以说疼痛难忍，蔓延到小腿，甚至于就要截肢了，不久就会离开人世的。据我了解90%糖尿病的人是因为并发症死亡的，生前的时候他只知道要降血糖，但是最后还是没有用过他最适合自己的食品或者是保健品，所以我经常说，如果得了糖尿病之后，要坚持合理的治疗和饮食调理，包括适量的运动之后，还要提高你自己的抗病能力，更好的做好保健工作，那样的话你才能够提高你的生存质量，才可以延长你的寿命。 主持人：谈到保健，我问您一下，您平常是如何保健的呢？ 王教授：我可以告诉大家，我的保健是有一个原则的，这个原则是什么，就是根据我自己的身体状况，选择最适合自己的保健方法，我要做到未病先防，我今年是82岁了，跟同龄人相比，我可以说我健康很多很多的，我每年都做健康体检，一切指标都正常，血压一直平稳，从来血压都不高，心脏供血也很好，我觉得这跟我长时间的注重科学养生，注意保健有直接的关系，其实90%以上的人生病，都是因为没有做好保健，或者用错了保健的方法，跟着感觉走，选择保健品的时候，不是适合自己的，由于吃错的造成对身体的伤害临床上我见到很多。 主持人：很多人都知道蜂胶对糖尿病患者有益处，可是不知道究竟有多大的益处？ 王教授：我先问问大家，知道蜂胶是怎么来的吗，蜂胶是蜂蜜从植物的牙胞或者或者树木上采集的树脂，经过它自身的转化而成的胶状物，采集的树木不同，功效就有天壤之别，蜂胶它的性状是有芳香味，味微苦，略带辛辣味，不含糖份，它的功效第一是降血糖，抗感染，抗氧化，提高药效净化血液，恢复体力，调节代谢，补充多种微量元素。
百科全说第三季【2011年12月份】视频笔记全集 百科全说第三季视频全集：https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,/zhuanti/bkqs/bkqss3/ 百科全说笔记：https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,/zhuanti/bkqs/biji/ 获得《百科全说》最新视频和笔记，了解健康养生知识，请关注“养生路”新浪微博，腾讯微博 1、百科全说20111201-闫民川糖尿病的养生保健 视频地址：https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,/zhuanti/bkqs/bkqss3/1290.html 简介：什么食品有软化心血管并有益糖尿病的神奇功效呢？如何理解“糖尿病”呢？糖尿病容易引发的并发症都有哪些呢？引起糖尿病的原因都有哪些？糖尿病的养生保健方法都有哪些？本期百科全说节目请到王鹤滨医学研究中心院长闫民川老师告诉您糖尿病患者的养生保健方法。 2、百科全说20111205-夏梦“孕期”的健康保养! 视频地址：https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,/zhuanti/bkqs/bkqss3/1296.html 简介：为什么孕前一定要消除一切口腔疾病？父母年龄相差多大生出来的孩子最聪明？女性应当在多少岁之前完成第一胎生育？孕前都应当有哪些生理状态？不孕的原因都有哪些？本期百科全说20111205期请到北京弘医堂中医医院主治医师夏梦为您讲解“孕期”的健康保养! 3、百科全说20111206-夏梦“孕期”的健康保养(2) 视频地址：https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,/zhuanti/bkqs/bkqss3/1303.html 简介：什么方法能有效调节妊娠呕吐呢？孕早期食欲不振怎么办？民间传说“酸儿辣女”的说法正确吗？“肚尖生男、肚圆生女”的说法正确吗？本期百科全说20111206期节目邀请到北京弘医堂中医医院主治医师夏梦老师继续教大家孕期保健法。 4、百科全说20111207-佟彤脸要穷养，身要娇养 视频地址：https://www.doczj.com/doc/7618241115.html,/zhuanti/bkqs/bkqss3/1308.html 简介：为什么说“脸要穷养，身要娇养”？人体长斑的原因有哪些？要想美白，什么最重要？有效的防晒方法有哪些？最好的面膜又是什么？邀请到中医学者、
户外锻炼最佳时间是什么时候?冬天中老年人最佳锻炼的方法是什么?您是否贫血、畏寒怕冷?您知道“益血养颜膏”怎么做吗?中国中医科学院知名专家、主任医师、香港保健协会医学顾问、李嘉诚私人医生王连清老师及女儿马雷医师，为您带来保健秘方。 户外锻炼最佳时间 室外活动锻炼时间应以上午10点或下午4点为好，中老年人冬天应以室内活动为主。 敲经络保健方法 敲12正经的方法，敲经络时，手指、脚趾末端都要敲到。 王连清：中国四大名医之一汪逢春入室弟子，主任医师，教授，中国中医科学院知名专家，崔月犁传统医学研究中心特约专家，京城岐黄国医馆馆长，“皇城国医”品牌创始人，从事中西医结合临床医疗保健工作五十余年，临床擅长针药并用诊治心脑血管疾病、中风瘫痪、消化系统疾病、亚健康调治及各种疼痛病症。 她就是有着“最美红墙医生”之称的王连清老师。虽然王老师已经是80岁高龄，但在现场看来，王老师的气色特别好，王老师首先分享和观众她保持年轻的秘密，她每天早上六点起床，先用小锤子敲打经络。在床上做一套王氏八段锦，神清气爽。80岁依然一头黑亮的头发，全都得益于王老师经常吃自制的益血养颜膏。 益血养颜膏的功效： 益气活血，能有效改善脱发，面色憔悴、手脚冰凉等亚健康问题。 益血养颜膏的做法： 阿胶1斤;黄酒1斤。用黄酒浸泡阿胶三到五天。加入冰糖(打碎)半斤，桂圆肉少许，上锅蒸。蒸好后，加入黑芝麻、核桃仁(炒熟后打碎)适量，调成粥状。 注意事项：为了避免核桃、黑芝麻全都浮在上面，就要在膏体快要凝固的时候，用勺子和几下，搅匀，然后放到冰箱里。 使用方法：霜降或立冬开始吃，到立春前结束。每天早晚两次，每次一勺，约10克。 妊娠妇女慎用。 益血养颜膏食用时间，在每年的冬季。 每个人应根据自己的体质调整药物的种类和分量 气虚的人可在益血养颜膏中加大枣。 阴虚的人加龟甲膏。