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单胺氧化酶

单胺氧化酶
单胺氧化酶

临床分析(1)血清单胺氧化酶的活性高低能反映肝纤维化的程度,是诊断肝硬化的重要指标。肝硬化患者血清单胺氧化酶活性升高的阳性率在80%以上,最高值可超过对照参考值的两倍,而且血清单胺氧化酶活性升高与肝表面结节形成的进程相平行。(2)各型肝炎急性期患者血清单胺氧化酶活性不增高,但暴发性重症肝炎或急性肝炎中有肝坏死时,由于线粒体破坏,血清单胺氧化酶活性可升高。单胺氧化酶活性升高还可见于甲亢、糖尿病合并脂肪肝、充血性心衰、肢端肥大症等疾病。(3)由于生物个体血清单胺氧化酶活性易波动,应多次测定以防偏差。若单胺氧化酶活性超过80U,应将样品稀释后重新测定肾上腺素、肾上腺素等也有作用。

单胺氧化酶(MAO)是一种可催化各种单胺类氧化生成相应的醛,然后进一步氧化成酸。单胺氧化酶广泛分布于体内各组织器官,以肝、肾、脑等组织中含量较多,在细胞内单胺氧化酶主要存在于线粒体内,另有少量存在于细胞浆中。人血清中单胺氧化酶是水溶性的,与线粒体单胺氧化酶不同。血清单胺氧化酶主要来自结缔组织,与结缔组织的代谢有重要关系。血清单胺氧化酶用苄胺偶氮-β-萘酚法测定参考范围为12~40单位。

临床结果分析:

(1)血清单胺氧化酶的活性高低能反映肝纤维化的程度,是诊断肝硬化的重要指标。肝硬化患者血清单胺氧化酶活性升高的阳性率在80%以上,最高值可超过对照参考值的两倍,而且血清单胺氧化酶活性升高与肝表面结节形成的进程相平行。

(2)各型肝炎急性期患者血清单胺氧化酶活性不增高,但暴发性重症肝炎或急性肝炎中有肝坏死时,由于线粒体破坏,血清单胺氧化酶活性可升高。单胺氧化酶活性升高还可见于甲亢、糖尿病合并脂肪肝、充血性心衰、肢端肥大症等疾病。

(3)由于生物个体血清单胺氧化酶活性易波动,应多次测定以防偏差。若单胺氧化酶活性超过80U,应将样品稀释后重新测定。

血清单胺氧化酶(MAO)检测正常值与临床意义

单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO),为催化单胺氧化脱氨反应的酶,作用于一级胺及其甲基化的二、三级胺,也作用于长链的二胺。对所谓生物胺,即酪胺、儿茶酚胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素等也有作用。此酶多见于脊椎动物的各种器官,特别是分泌腺、脑、肝脏,但在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在。在细胞内存在于线粒体外膜上,是不溶性酶。含FAD。1-异烟酰-2-异丙基肼(iproniazid)、β-苯基异丙基肼(pheniprazine)等药物对此酶有强烈的竞争性的阻抑作用,称为MAO抑制剂,但如果给动物,则可提高

脑中去甲肾上腺素和5-羟色胺等单胺的浓度,造成行动的刺激。所以认为单胺氧化酶具有调节生物体内胺浓度的功能。MAO有MAO-Ⅰ、MAO-Ⅱ及MAO-Ⅲ三型,血清MAO-Ⅰ活性升高常见于器官纤维化,特别是肝硬化和肢端肥大症;血清MAO-Ⅱ活性升高常见于大面积肝坏死,是诊断肝硬化的重要指标。

血清单胺氧化酶(MAO)正常值:

健康成人血清MAO活性:12~40U/ml。

(注:具体参考值请根据各实验室而定。)

血清单胺氧化酶(MAO)临床意义:

MAO为广泛分布于肝、肾、胃、小肠及脑组织中的酶,在细胞内定位于线粒体膜外。血清MAO活性测定是检查肝纤维化病变的重要指标。纤维化发生在汇管区之间或汇管中心区之间时,MAO活性明显增高,阳性率在80%以上;在假小叶周围有广泛纤维化形成时,则几乎全部增高,且升高同幅度最大。纤维化病变侵入肝实质内时,升高率仅为30%。

升高:

血清MAO-Ⅰ活性升高主要见于肝硬化和肢端肥大症;而MAO-Ⅱ升高则主要见于大面积肝坏死。器官纤维化患者血清MAO活性升高与结缔组织代谢亢进有关;爆发性肝炎患者血清MAO活性升高与MAO从坏死的肝细胞线粒体上脱落有关。因此,爆发性肝炎、重症肝细胞坏死时,线粒体的MAO释放,血清中该酶活性增高,阳性率可达73%以上。

降低:烧伤。

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【参考范围】

苄胺偶氮-β-艿酚法:12~40U/L。

【影响因素】

1.溶血不影响酶的测定结果。

2.标本在4℃时可稳定3d。

3.个体血清MAO活性较易波动,故应多次测定。

4.若MAO活性超过80U/L,应将样品稀释后重新测定。

【临床意义】

1.MAO广泛分布于体内各组织器官,尤以肝、肾、小肠和胃含量最多,主要位于线粒体膜外面,并与膜紧密结合。MAO的生理功能因不同组织而异。

2.MAO活性升高可见于下列疾病:①肝硬化:MAO活性的高低能反映肝脏纤维化的程度,是诊断肝硬化的重要指标。肝硬化患者血清MAO活性升高的阳性率可达80%以上。②各型肝炎:各型肝炎急性期患者的血清MAO活性多不升高,但急性重型肝炎时,因肝细胞坏死,线粒体释放大量MAO,可导致血清MAO活性升高。急性肝炎病程超过3个月者,血清MAO活性亦升高,活动性慢性肝炎约半数患者血清MAO活性升高。③糖尿病可因合并脂肪肝、充血性心力衰竭,或因肝淤血而继发肝硬化时,血清MAO活性可升高。④甲亢可因纤维组织分解与合成旺盛、肢端肥大可因纤维组织过度合成等原因,而导致血清MAO活性不同程度升高。MAO活性降低可见于:服用避孕药、肾上腺皮质激素、左旋多巴肼类等药物引起。

莱克多巴胺检测方法

莱克多巴胺检测方法 1.分析目标化合物 莱克多巴胺 2、仪器设备 高效液相色谱-质谱仪(LC-MS)。 3、试剂 除下列试剂外,使用附录2所列试剂。 莱克多巴胺:含莱克多巴胺99%以上,熔点为163.9℃~164.6℃。 4.试验溶液的制备 1)肌肉、肝脏、肾脏和其它可食用部分 肌肉:尽可能除去脂肪层,搅碎混合均匀后,称取其5.00g。 肝脏、肾脏和其它可食用部分:搅碎混合均匀后,称取其5.00g。 加入20mL乙酸乙酯和1mL4mol/L碳酸钾溶液,均质后,以每分钟3000转离心分离10分钟,收集乙酸乙酯层。离心管内残留物中加入20mL乙酸乙酯,振荡5分钟后,按上述同样条件离心分离,合并所得的乙酸乙酯层,40℃以下浓缩,除去乙酸乙酯。残留物中加入30mL乙腈溶解,移入分液漏斗中。加入30mL乙腈饱和正己烷,振荡,弃去正己烷层,重复操作2次。乙腈层在40℃以下浓缩,除去乙腈。残留物中加入1.0mL 甲醇溶解,此为试验溶液。 2)脂肪 尽可能除去肌肉层,搅碎混合均匀后,称取其5.00g。 加入30mL乙腈和30mL乙腈饱和正己烷,均质后,以每分钟3000转离心分离10分钟,乙腈层移入分液漏斗中。离心管内的正己烷层和残留物中加入30mL乙腈,振荡5分钟,按上述同样条件离心分离。合并所得的乙腈层于前面的分液漏斗中,加入30mL 乙腈饱和正己烷。激烈振荡5分钟后,静置,收集乙腈层, 40℃以下浓缩,除去乙腈。残留物中加入1.0mL甲醇溶解,此为试验溶液。 5.标准曲线的制作 将盐酸莱克多巴胺标准品配制成0.025~0.5mg(以莱克多巴胺计)/L的甲醇溶液数点,分别注入GC-MS中,用峰高法或面积法绘制成标准曲线。 6.定量试验 注入试验溶液于GC-MS中,根据5的标准曲线求出莱克多巴胺的含量。 7.测定条件 LC-MS 柱:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径2~5μm),内径2.0~6.0mm、100~250 mm 的不锈钢管。 柱温:40℃。 流动相:乙腈:0.05%三氟乙酸(1:4)混合溶液。 主离子(m/z): ESI+ 302 保持时间标准: 4 ~ 6 分钟 8.定量界 0.01 mg/kg

单胺氧化酶抑制剂

单胺氧化酶抑制剂 Document number:PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998

关于单胺氧化酶抑制剂 全网发布:2011-08-17 16:19 发表者: (访问人次:2937) 有经验的麻醉医师都知道,许多常用的麻醉药如杜冷丁、芬太尼等说明书上都在注意事项中明确提示“不得与单胺氧化酶抑制剂合用”。单胺氧化酶抑制剂都包括哪些药物呢 首先应把单胺氧化酶抑制剂这个名词解释清楚,所谓单胺,在化学上称做一元胺,指结构中含有一个氨基的物质,在自然界分布广泛,如多巴胺和5-羟色胺都是单胺类物质,有些食物如奶酪也富含单胺。许多单胺类物质有着很强的生理活性(如升的作用)。再说什么是单胺氧化酶。单胺氧化酶是一类能够选择性代谢(氧化脱氨基)单胺类物质的酶系,单胺氧化酶在人体内分布极广,除了红细胞之外,几乎所有的细胞内都有单胺氧化酶,专门对付单胺。前面讲到,单胺具有很强的生理作用,是个“危险分子”,它们一进入人体,在胃肠道和肝脏,便遭到单胺氧化酶的“围歼”,迫使它们氧化失活(失去活性),绝不让它们进入血循环。如果没有单胺氧化酶及时灭活这些单胺类物质,则可能引起严重后果,从这个意义上说,单胺氧化酶是有保护作用的。再说单胺氧化酶抑制剂,单胺氧化酶抑制剂就是专门抑制单胺氧化酶的,单胺氧化酶一旦受到抑制,单胺类物质便又可以“兴风作浪”了。同是单胺氧化酶抑制剂,药物的化学结构可能大相径庭,治疗的疾病也各种各样。那么,究竟哪些药属于单胺氧化酶抑制剂呢 常用的单胺氧化酶抑制剂有: 苯乙肼、异烟肼(雷米封)、异丙肼、异卡波肼(异唑肼、闷可乐)、苯异丙肼、异丙烟肼、异恶唑酰肼、苯二肼、沙夫肼、丙炔苯丙胺、超苯环丙胺、反苯环丙胺、吗氯贝胺、巴吉林、和苯环丙胺、尼亚胺、灰黄霉素、百乐明(强内心)等。以下按照其治疗作用的不同分类列出:1.治疗帕金森病: 咪多吡(司来吉兰(林)、丙炔苯丙胺、芬兰奥立安集团)----B型单胺氧化酶抑制剂 舒震宁(司来吉林:法国狄朗有限公司)----B型单胺氧化酶抑制剂 思吉宁:盐酸司来吉兰(林)片 克金平:司来吉兰(林) 烟草及其烟雾中的单胺氧化酶抑制剂2,3,6-三甲基1,4-萘醌 2.降压药:帕吉林(优降宁) 3、止泻药:痢特灵(呋喃唑酮) 4、抗肿瘤药:甲基苄肼(Procarbazine、甲苄肼,甲苄芋肼、丙卡巴肼) 5、局麻药:普鲁卡因、奴弗卡因novocaine 6、抗衰老药:中老年生物素、益康宁、复方益康宁、福康乐、老年维生素H3 7、某些中药也有单胺氧化酶抑制作用,如靛红、鹿茸、山楂、何首乌等。 下列药物禁止或不宜与单胺氧化酶抑制剂合用,否则可能引起不良反应,甚至是严重的、危及生命的不良反应,如血压骤然升高,甚至导致,心动过速,呼吸困难,运动失调,高热,精神错乱等。

单胺氧化酶

单胺氧化酶(缩写MAO),EC1.4.3.4,是催化单胺类物质氧化脱氨反应的酶。单胺氧化酶存在于细胞的线粒体外膜上,在人体内分布极广,尤以肝、脑及肾等组织细胞内的含量最高。由于需要黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作辅因子,因此它属于黄素蛋白酶或含黄素胺氧化酶。 人体内含有两种单胺氧化酶:单胺氧化酶A(MAO-A)和单胺氧化酶B(MAO-B)。两者 都存在于神经元和星形胶质细胞中。除中枢神经系统外,MAO-A还存在于肝、胃肠道和胎盘中,而MAO-B则主要存在于血小板中。 MAO-A是消化道摄取的单胺类物质代谢中的重要酶。MAO的两种亚型都可以使单胺类神 经递质失活,但两者对底物和抑制剂的专一性不同: ?MAO-A偏重于极性芳香胺5-羟色胺、去甲肾上腺素和肾上腺素的分解脱氨,它对选择性抑制剂如氯吉兰敏感。 ?MAO-B偏重于非极性芳香胺苯乙胺的分解脱氨,它对抑制剂司来吉兰和雷沙吉兰敏感。 [2] ?多巴胺被两种MAO亚型分解的机会大致均等。 MAO-A可通过病理途径导致头痛:5-羟色胺可被毛细血管中残留的MAO-A所分解,当它 的含量较少时,血管过度舒张,而产生搏动性头痛。[3] 人和动物的攻击行为与MAO-A基因的变种有关。[4] MAO-A的不同基因型也可能对人对事 物的新奇感产生影响。[5] 吸烟对MAO-B有抑制作用。[6] MAO-B的含量随着年龄的增长而增加,因此MAO-B被认 为是老化的标志,称为老化相关酶。 单胺类物质是一类含有“芳环-CH2-CH2-NH2”的神经递质和神经调质,其中包括儿茶酚胺(多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素)、褪黑素、组胺、5-羟色胺和甲状腺素类似物等。单胺氧化酶所催化的,是单胺被氧化脱氨,生成过氧化氢、氨和相应醛的反应。反应通式可以写为: 生成的醛迅速被醛脱氢酶氧化为相应的羧酸。单胺氧化酶作用于一级胺及其甲基化的二、三级胺,也作用于长链的二胺。有很强生理作用的单胺类物质在发生这个反应后失活,因此MAO有调节生物体内胺浓度的功能。 在临床检验中,血清MAO升高,见于肝脏病、肢端肥大症、甲亢和糖尿病等。[7] MAO升 高也与抑郁症、痴呆症及巴金森氏症等老年精神病有关。[8] 异丙烟肼和苯异丙肼等单胺氧化酶抑制剂对单胺氧化酶有抑制作用,可用作抗抑郁症的药物,不过由于疗效不佳,且副作用大,现已少用。单胺氧化酶被抑制后,脑中的儿茶酚胺含量增多,有利于延缓衰老。

人二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书

人二胺氧化酶(DAO)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中二胺氧化酶(DAO)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人二胺氧化酶(DAO)水平。用纯化的人二胺氧化酶(DAO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入二胺氧化酶(DAO),再与HRP标记的二胺氧化酶(DAO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人二胺氧化酶(DAO)浓度。 试剂盒组成: 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份 封板膜2片(48)2片(96) 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存 标准品:27U/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

多巴胺的测定

多巴胺的测定 神经递质多巴胺的测定,采用荧光分光光度法 荧光法测定大鼠脑组织和血液中单胺类物质的方法探讨: 1、主要仪器:荧光分光光度计(日本产,SHIMADZURF-5301PC);组织高速分散器(上海产,XHF-1);冷冻离心机(上海产,TGL-16G);恒温水浴箱;旋涡混合器等。。 2、试剂:剂来源除标明外均为国产分析纯级,试剂配制使用双蒸水。 (1)标准品:重酒石酸去甲肾上腺素;盐酸多巴胺;5-羟色胺硫酸肌酐;5-羟吲哚乙酸为瑞士Fluka产品。 (2)混合标准储存液的配制:分别精确称取上述标准品各50mg,用0.01N盐酸配制成100ml混合标准储存液(500ugml),置4℃冰箱保存,临用前稀释成1.25ugml应用液。 (3)酸性正丁醇:每升正丁醇加入浓盐酸0.85ml,混匀。 (4)正庚烷。 (5)0.1%OPT-10N盐酸溶液:邻苯二甲醛为瑞士Fluka产品,临用前用10N盐酸稀释成0.001%OPT-10N盐酸溶液。 (6)0.25%半胱氨酸溶液:用0.1N盐酸新鲜配制。 (7)碘试剂:配制0.02N碘液和5%碘化钠(以70%乙醇溶解),临用前以1∶1体积比混合。 (8)115M,PH=7.2的磷酸盐缓冲液。 (9)0.33M碳酸氢钠溶液。 (10)碱性亚硫酸钠溶液:25%亚硫酸钠与5N氢氧化钠在临用前以1∶9体积比混合。 (11)0.1MEDTA试剂:用1M醋酸钠溶液配制,以10N氢氧化钠调节H至7.0。 3、实验方法:

⑴标本处理:大鼠断头处死,立即取血及脑组织。脑组织用冰生理盐水冲洗,去除血膜、嗅球和小脑,沿脑中线剖开,取一半脑组织吸干水分称重,加入10倍体积的冰酸性正丁醇,用组织分散器匀浆备用。血液静置凝固后用冷冻离心机分离血清,立即加入10倍体积冰酸性正丁醇摇匀。 ⑵提取过程:同时制备标准管和空白管,与血、脑标本在相同条件下按下图流程进行提取,获得水相A和水相B。 ⑶NE、DA的测定步骤:各管取水相A0.5ml,按下列流程进行操作: ①水相A0.5ml+115M磷酸盐缓冲液1.5ml+0.1MEDTA0.4ml+碘液0.2ml ②混匀、静置3mn+碱性磷酸钠(新配)0.4ml ③混匀、静置3mn+5N醋酸0.4ml ④混匀,80℃水浴,冷却 ⑤测NE荧光测度,激发波长为382488 ⑥继续沸水浴20mn,冷却

二胺氧化酶(DAO)活性检测试剂盒说明书 微量法

二胺氧化酶(DAO)活性检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。 货号:BC1285 规格:100T/48S 产品内容: 提取液:液体70mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:液体0.25mL×1支,4℃保存。 试剂二:粉剂×1瓶,使用时加2mL水溶解,4℃可保存1个月。 试剂三:液体1mL×1支,4℃保存。 产品说明: DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。 DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质,在500nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、96孔板/玻璃比色皿、蒸馏水。 操作步骤: 一、粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液) 进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入 1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。 3.血清等液体:直接测定。

二、测定操作表: 1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至500nm,蒸馏水调零。 2、操作表 对照管测定管 粗酶液(μL)5050 提取液(μL)128108 试剂一(μL)22 试剂二(μL)2020 试剂三(μL)20 混匀,37℃水浴30min,测定500nm吸光值。ΔA=A测定-A对照。 三、酶活性计算公式: a.使用96孔板测定的计算公式如下 1、动物组织DAO活力的计算 (1)按蛋白浓度计算 单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生1μmol氧化型邻联茴香胺定义为一个酶活力单位。 DAO(U/mg prot)=ΔA÷d÷ε×V反总÷(cpr×V样本)÷T=30×ΔA÷cpr (2)按样本鲜重计算 单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟催化产生1μmol氧化型邻联茴香胺定义为一个酶活力单位。DAO(U/g鲜重)=ΔA÷d÷ε×V反总÷(W÷V提取×V样本)÷T=30×ΔA÷W 2、血清(浆)DAO活力的计算 单位的定义:每mL血清(浆)在反应体系中每分钟催化产生1μmol氧化型邻联茴香胺定义为一个酶活力单位。 DAO(U/L)=ΔA÷d÷ε×V反总÷V样本÷T=30×ΔA V反总:反应总体积,0.2mL;V样本:加入粗酶液体积,0.05mL; V提取,加入提取液体积,1mL;cpr:样本蛋白浓度,mg/mL; W:样本鲜重,g;d:光径,0.6cm;

单胺氧化酶酶活测试

单胺氧化酶酶活的测试 作者:陈志坚 1 准备工作 0.2M pH=7.6的缓冲液的制备:A:B=87:13(抽滤冰箱后使用) 0.2M Na2HPO4:35.82g Na2HPO4于500mL蒸馏水溶解(A) 0.2M NaH2PO4:15.605g NaH2PO4于500mL蒸馏水溶解(B) 0.3M蔗糖:10.268g蔗糖,加入100mL缓冲液 2 酶液制备 将1只雄性wista大鼠脱颈椎处死,取出其肝脏,用预冷的磷酸缓冲液冲洗肝脏表面。将肝脏剪碎,用磷酸缓冲液(pH=7.6)洗涤数次以冲洗去血水,待洗涤干净后,加入20 mL,0.3 M蔗糖缓冲液进行匀浆,充分匀浆后,各取10 mL倒入两个50 mL离心管中。用20 mL,o.3 M蔗糖缓冲液洗涤匀浆器后,各取10 mL倒入前面所述的离心管中。经托盘天平配平(误差不能超过0.01 g)后进行低温差速离,在-4℃下,1000×g离心10 min。吸取上清液,将上清液配平,1200×g离心15 min,吸取上清液,将上清液配平,10000Xg离心30 min,弃去上清液,沉淀加4 mL的磷酸缓冲液混匀,得到Wistar大鼠肝脏线粒体浓缩物,即为实验用单胺氧化酶。 3 酶活性抑制测试 所提取的酶液按照1:3倍稀释(体积比),并进行超滤。(2只小鼠肝脏,最后我们拿到4mL 酶原液,那我们就稀释到12mL使用) 3.1 配药液 配药液(浓度为100μmol/L)= (Mw *10-7 g/ml):x/(10-7*M)=Y 【X】克晶体,用【X*107/MW】ml溶剂溶解x为晶体质量,M为晶体的相对分子质量,Y为溶剂的体积。 例如:称出晶体质量为0.0010g,M=341,则溶解它的溶剂(DMSO:水=1:1)Y就为 Y=0.0010/(10-7*341)=29ml,用29ml的(DMSO:水=1:1)溶剂溶解0.0010g的晶体。 3.2 底物、显色液

多巴胺的测定

荧光法测定大鼠脑组织和血液中单胺类物质的方法探讨: 1、主要仪器:荧光分光光度计(日本产,SHIMADZU RF-5301 PC);组织高速分散器(上海产,XHF-1);冷冻离心机(上海产,TGL-16G);恒温水浴箱;旋涡混合器等。。 2、试剂:剂来源除标明外均为国产分析纯级,试剂配制使用双蒸水。 (1)标准品:重酒石酸去甲肾上腺素;盐酸多巴胺;5-羟色胺硫酸肌酐;5-羟吲哚乙酸为瑞士Fluka产品。 (2)混合标准储存液的配制:分别精确称取上述标准品各 50mg,用 0.01N 盐酸配制成 100 ml 混合标准储存液(500ug/ml),置4℃冰箱保存,临用前稀释成1.25ug/ml应用液。(3)酸性正丁醇:每升正丁醇加入浓盐酸0.85ml,混匀。 (4)正庚烷。 (5)0.1% OPT-10N 盐酸溶液:邻苯二甲醛为瑞士 Fluka 产品,临用前用 10N 盐酸稀释成0.001% OPT-10N盐酸溶液。 (6)0.25%半胱氨酸溶液:用0.1N盐酸新鲜配制。 (7)碘试剂:配制0.02N碘液和5%碘化钠(以70%乙醇溶解),临用前以1∶1体积比混合。(8) 1/15 M ,PH=7.2的磷酸盐缓冲液。 (9) 0.33M碳酸氢钠溶液。 (10)碱性亚硫酸钠溶液:25%亚硫酸钠与5N氢氧化钠在临用前以1∶9体积比混合。(11)0.1M EDTA 试剂:用1M醋酸钠溶液配制,以10N氢氧化钠调节pH至7.0。 3、实验方法: ⑴标本处理:大鼠断头处死,立即取血及脑组织。脑组织用冰生理盐水冲洗,去除血膜、嗅球和小脑,沿脑中线剖开,取一半脑组织吸干水分称重,加入10倍体积的冰酸性正丁醇,用组织分散器匀浆备用。血液静置凝固后用冷冻离心机分离血清,立即加入10倍体积冰酸性正丁醇摇匀。 ⑵提取过程:同时制备标准管和空白管,与血、脑标本在相同条件下按下图流程进行提取,获得水相A和水相B。 ⑶NE、DA的测定步骤:各管取水相A 0.5ml,按下列流程进行操作: ①水相A 0.5ml+1/15M 磷酸盐缓冲液 1.5ml+0.1M EDTA 0.4ml+碘液0.2ml ②混匀、静置 3min+碱性磷酸钠(新配)0.4ml ③混匀、静置 3min+5N 醋酸 0.4ml ④混匀,80℃水浴,冷却 ⑤测NE荧光测度,激发波长为 382/488 ⑥继续沸水浴 20min,冷却

单胺氧化酶抑制剂

单胺氧化酶抑制剂【转】 单胺氧化酶抑制剂有那些? 首先应把单胺氧化酶抑制剂这个名词解释清楚,所谓单胺。在化学上称做一元胺,指结构中含有一个氨基的物质,在自然界分布广泛,如多巴胺和5-羟色胺都是单胺类物质,有些食物如奶酪也富含单胺。许多单胺类物质有着很强的生理活性(如升高血压的作用)。再说说什么是单胺氧化酶。单胺氧化酶是一类能够选择性代谢(氧化脱氨基)单胺类物质的酶系,单胺氧化酶在人体内分布极广,除了红细胞之外,几乎所有的细胞内都有单胺氧化酶,专门对付单胺。前面讲到,单胺具有很强的生理作用,是个“危险分子”,它们一进入人体,在胃肠道和肝脏,便遭到单胺氧化酶的“围歼”,迫使它们氧化失活(失去活性),绝不让它们进入血循环。如果没有单胺氧化酶及时灭活这些单胺类物质,则可能引起严重后果,从这个意义上说,单胺氧化酶是有保护作用的。再说单胺氧化酶抑制剂。单胺氧化酶抑制剂就是专门抑制单胺氧化酶的,单胺氧化酶一旦受到抑制,单胺类物质便又可以“兴风作浪”了。同是单胺氧化酶抑制剂,药物的化学结构可能大相径庭,治疗的疾病也各种各样。那么,究竟哪些药是单胺氧化酶抑制剂呢? 常用的单胺氧化酶抑制剂有: 苯乙肼、异烟肼(雷米封)、异丙肼、异卡波肼(异唑肼、闷可乐)、苯异丙肼、异丙烟肼、异恶唑酰肼、苯二肼、沙夫肼、丙炔苯丙胺、超苯环丙胺、反苯环丙胺、吗氯贝胺、巴吉林、和苯环丙胺、尼亚胺、灰黄霉素、百乐明(强内心)等; 1.治疗帕金森病: 咪多吡(司来吉兰(林)、丙炔苯丙胺、芬兰奥立安集团)----B型单胺氧化酶抑制剂 舒震宁(司来吉林:法国狄朗有限公司)----B型单胺氧化酶抑制剂 思吉宁:盐酸司来吉兰(林)片 克金平:司来吉兰(林) 烟草及其烟雾中的单胺氧化酶抑制剂2,3,6-三甲基1,4-萘醌 2.降压药:帕吉林(优降宁) 3、止泻药:痢特灵(呋喃唑酮) 4、抗肿瘤药:甲基苄肼(Procarbazine、甲苄肼,甲苄芋肼、丙卡巴肼) 5、局麻药:普鲁卡因、奴弗卡因novocaine 6、抗衰老药: 中老年生物素、益康宁、复方益康宁、福康乐、老年维生素H3 某些中药也有单胺氧化酶抑制作用,如靛红、鹿茸、山楂、何首乌等。 下列药物禁止或不宜与单胺氧化酶抑制剂合用,否则可能引起不良反应,甚至是严重的、危及生命的不良反应,如血压骤然升高,甚至导致高血压危象,心动过速,呼吸困难,运动失调,高热,精神错乱等。 ●抗抑郁药:丙米嗪(米帕明)、氯米帕明、阿米替林等三环类抗抑郁药,马普替林、米氮平、米安色林等四环类抗抑郁药,氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀、茚达品、舍曲林、西酞普兰、安非他酮等5羟色胺摄取抑制剂,苯丙胺、诺米芬新等。 ●降压药:可乐定、胍乙啶、利血平以及含利血平的复方制剂。 ●中枢神经抑制药:水合氯醛、卤恶唑仑、替吡度尔、苯二氮卓类。 ●镇咳药:右美沙芬及其复方制剂。 ●平喘药:麻黄碱。 ●镇痛药:哌替啶、舒马普坦、芬太尼。 ●抗帕金森药:左旋多巴。 ●抗过敏药:苯噻啶。

血清单胺氧化酶(MAO)活性测定及意义

血清单胺氧化酶(MAO)活性测定及意义 单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO),为催化单胺氧化脱氨反应的酶,作用于一级胺及其甲基化的二、三级胺,也作用于长链的二胺。对所谓生物胺,即酪胺、儿茶酚胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素等也有作用。此酶多见于脊椎动物的各种器官,特别是分泌腺、脑、肝脏,但在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在。在细胞内存在于线粒体外膜上,是不溶性酶。含FAD。1-异烟酰-2-异丙基肼(iproniazid)、β-苯基异丙基肼(pheniprazine)等药物对此酶有强烈的竞争性的阻抑作用,称为MAO抑制剂,但如果给动物,则可提高脑中去甲肾上腺素和5-羟色胺等单胺的浓度,造成行动的刺激。所以认为单胺氧化酶具有调节生物体内胺浓度的功能。MAO有MAO-Ⅰ、MAO-Ⅱ及MAO-Ⅲ三型,血清MAO-Ⅰ活性升高常见于器官纤维化,特别是肝硬化和肢端肥大症;血清MAO-Ⅱ活性升高常见于大面积肝坏死。 1.正常参考值: 健康成人血清MAO活性小于36 U/L。 2.临床意义: MAO为广泛分布于肝、肾、胃、小肠及脑组织中的酶,在细胞内定位于线粒体膜外。血清MAO活性测定是检查肝纤维化病变的重要指标。纤维化发生在汇管区之间或汇管中心区之间时,MAO活性明显增高,阳性率在80%以上;在假小叶周围有广泛纤维化形成时,则几乎全部增高,且升高同幅度最大。纤维化病变侵入肝实质内时,升高率仅为30%。 血清MAO-Ⅰ活性升高主要见于肝硬化和肢端肥大症;而MAO-Ⅱ升高则主要见于大面积肝坏死。器官纤维化患者血清MAO活性升高与结缔组织代谢亢进有关;爆发性

肝炎患者血清MAO活性升高与MAO从坏死的肝细胞线粒体上脱落有关。因此,爆发性肝炎、重症肝细胞坏死时,线粒体的MAO释放,血清中该酶活性增高,阳性率可达73%以上。

常用的单胺氧化酶抑制剂有

常用的单胺氧化酶抑制剂有: 苯乙肼、异烟肼(雷米封)、异丙肼、异卡波肼(异唑肼、闷可乐)、苯异丙肼、异丙烟肼、异恶唑酰肼、苯二肼、沙夫肼、丙炔苯丙胺、超苯环丙胺、反苯环丙胺、吗氯贝胺、巴吉林、和苯环丙胺、尼亚胺、灰黄霉素、百乐明(强内心)等。以下按照其治疗作用的不同分类列出:1、治疗帕金森病: 咪多吡(司来吉兰(林)、丙炔苯丙胺、芬兰奥立安集团)----B型单胺氧化酶抑制剂 舒震宁(司来吉林:法国狄朗有限公司)----B型单胺氧化酶抑制剂 思吉宁:盐酸司来吉兰(林)片 克金平:司来吉兰(林) 烟草及其烟雾中的单胺氧化酶抑制剂2,3,6-三甲基1,4-萘醌 2、降压药:帕吉林(优降宁) 3、止泻药:痢特灵(呋喃唑酮) 4、抗肿瘤药:甲基苄肼(Procarbazine、甲苄肼,甲苄芋肼、丙卡巴肼) 5、局麻药:普鲁卡因、奴弗卡因novocaine 6、抗衰老药:中老年生物素、益康宁、复方益康宁、福康乐、老年维生素H3 7、某些中药也有单胺氧化酶抑制作用,如靛红、鹿茸、山楂、何首乌等。 下列药物禁止或不宜与单胺氧化酶抑制剂合用,否则可能引起不良反应,甚至是严重的、危及生命的不良反应,如血压骤然升高,甚至导致高血压危象,心动过速,呼吸困难,运动失调,高热,精神错乱等。 ●抗抑郁药:丙米嗪(米帕明)、氯米帕明、阿米替林等三环类抗抑郁药,马普替林、米氮平、米安色林等四环类抗抑郁药,氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀、茚达品、舍曲林、西酞普兰、安非他酮等5羟色胺摄取抑制剂,苯丙胺、诺米芬新等。 ●降压药:可乐定、胍乙啶、利血平以及含利血平的复方制剂。 ●中枢神经抑制药:水合氯醛、卤恶唑仑、替吡度尔、苯二氮卓类。 ●镇咳药:右美沙芬及其复方制剂。 ●平喘药:麻黄碱。 ●镇痛药:哌替啶、舒马普坦、芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼、曲马多等。 ●抗帕金森药:左旋多巴。 ●抗过敏药:苯噻啶。 ●促智药:阿米三嗪-萝巴新(都可喜)。 ●单胺氧化酶抑制剂:单胺氧化酶抑制剂之间亦不可合用。单胺氧化酶抑制剂作用时间较长,必须在停药两周以上方可开始服用以上药物。如果先用了上述药物,也必须停药一段时间才可以开始用单胺氧化酶抑制剂,至于停药多长时间,每种药都不一样,比如氟西汀就至少要停药5周,请注意仔细阅读药品说明书。 单胺氧化酶抑制剂亦可通过抑制肝药酶系统,影响某些药物的代谢,致血药浓度升高,半衰期延长,药理活性增强。例如有报道单胺氧化酶抑制剂可延缓口服降糖药甲磺丁脲、氯磺丙脲、巴比妥类、苯妥英钠、乙醚和抗组胺药异丙嗪和苯海拉明的代谢,使这些药的药效增强。 特别要提及的是,服用单胺氧化酶抑制剂期间,禁食富含单胺的食物和饮料,如奶酪、酸奶、动物肝脏、腌鱼、香肠、腊肉、蚕豆、扁豆、巧克力、酵母、腐乳、罐头无花果、菠萝、啤酒、葡萄酒、柑橘类果汁等,否则可因酪胺大量吸收造成血压急剧上升。曾有人报道服用苯环丙胺的患者,食用鸡肝后均引起血压升高。

莱克多巴胺检测标准

ICS 65.120 B 46 备案号: DB33 饲料中莱克多巴胺的测定 Determination of ractopamine in feedstuffs 浙江省质量技术监督局发布

前言 本标准是在参阅了国内外文献的基础上,根据我国技术发展水平研究制定的,采用了酶联免疫法、高效液相色谱-荧光检测法和气相色谱-质谱法。 本标准由浙江省农业厅提出并归口。 本标准由浙江省畜产品质量安全检测中心、浙江省疾病预防控制中心负责起草,浙江一星集团饲料有限责任公司参与起草。 本标准主要起草人:陈慧华、吴平谷、应永飞、任玉琴、屈健、周文海、陈勇、浦琴华。

饲料中莱克多巴胺的测定 1 范围 本标准规定了以酶联免疫(ELISA)法、高效液相色谱(HPLC)法和气相色谱-质谱(GC-MS)法检测饲料中莱克多巴胺的方法,规定GC-MS法为仲裁法。 本标准适用于饲料和饲料添加剂中莱克多巴胺的测定。 酶联免疫(ELISA)法为筛选方法,检测限为0.01mg/kg,高效液相色谱(HPLC)法和气相色谱-质谱(GC-MS)法为定量方法,定量限HPLC法为0.1mg/kg、GC-MS法为0.05mg/kg。线性范围:酶联免疫(ELISA)法为0.005ng-0.05ng,高效液相色谱(HPLC)法为2.5ng-10ng,气相色谱-质谱(GC-MS)法为0.05ng-1.0ng。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样方法 3 试样制备 按GB/T 14699.1抽取有代表性的饲料样品,用四分法缩减取约200g,粉碎至过0.45mm孔径的分析筛,混匀,装入磨口瓶中备用。 第一法酶联免疫法 4 原理与方法 4.1 原理 本测定方法是酶联免疫法中的竞争性测定法,其主要原理是:吸附在孔内的莱克多巴胺与标准或样品中的莱克多巴胺竞争性地与莱克多巴胺抗体相结合,与标准品或样品相结合的莱克多巴胺抗体被洗涤去除后,只剩下与微孔内药物相结合的抗体,其再与加入的酶标记的第二抗体相结合,酶底物在酶作用下产生蓝色产物,吸光度的高低与样品中莱克多巴胺的含量成反比。 4.2 方法 采用莱克多巴胺酶联免疫试剂盒或类似产品,按试剂盒的使用说明操作。 5 试剂和溶液 5.1 除非另有说明,本法所用试剂均为分析纯,水为去离子水,符合GB/T 6682二级水的规定。 5.2 PBS缓冲液:用水10倍稀释厂商提供的浓缩PBS缓冲液。 5.3 工作洗液:用水20倍稀释厂商提供的浓缩洗液。 5.4 乙酸乙酯。 5.5 碳酸盐缓冲液:称取4.3g碳酸钠(Na 2CO 3 ?10H 2 O),2.9g碳酸氢钠(NaHCO 3 ),加水至1000mL, 摇匀,调节pH值至9.5。

DAO,二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书

DAO,二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书 本试剂仅供研究使用 操作步骤 1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔 中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀; 然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为90ng/L,60ng/L ,30ng/L,15ng/L,7.5ng/L)。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相 同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍 稀释后备用。 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后 弃去,如此重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃ 避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测 定应在加终止液后15分钟以内进行。 DAO,二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书 注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

多巴胺的计算方法

1. (体重乘以3)mg 加盐水配制至50ml ,多少ml/h 就是多少ug/kg/min. ,一般5ml/h 开始,以后根据血压调速度, 例如:一般早产还有新生儿窒息,新生儿肺炎,多巴胺的浓度在 2 至5Ug ,小剂量可以治 疗小儿支气管肺炎以改善肺部微循环、降低肺微循环阻力,促进炎症吸收消散,疗效可观, 还有早产机理都是一样的! 9. 体重乘3 等于多巴胺的量(毫克) ,稀释成50 毫升, 以多少ml/h 速度泵入就是以多少ug/kg.min 的速度泵入。如:病人体重60 公斤,多巴胺 180mg( 18ml)+32ml生理盐水,配制成50ml,每小时以10ml的速度泵入,就是以10ug/kg.min 的剂量泵入。 10. 新生儿多用小剂量,一般用2.5ug/kg.min 。比如4kg 的体重。100ml GS 中加入多巴胺 4X6=24mg 。 10GS%100 ml +多巴胺24mg速度2.5ml/h。多巴胺的浓度为2.5ug/kg.min,用这种方法更好的调节浓度。速度7 ml /h 的浓度就是7ug/kg.min. 11. 下面是心源性的休克时的治疗! 首要措施是增加心排血量及组织的血液灌流,要分秒必争,尽可能 在休克早期获得充分 治疗,以免贻误病情而发展为不可逆性休克。具体措施: ( 1)镇静、吸氧,保持呼吸道畅通,良好静脉通道至少 2 个。 ( 2 )多巴胺和硝普钠两药同一静脉匀速经输液泵输入,多巴胺用量 为2?10g ? kg -1 ? min -1 ,硝普钠用量为1?6卩g ? kg -1 ? min -1 ,两药比例一般为2:1 (多巴胺用量:硝普钠用量)或1:1,应由小剂量开始,如多巴胺按41 g ? kg -1 ? min -1 及硝普钠按2 i g ? kg -1 ? min -1溶于10%葡萄糖溶液中匀速滴入。在滴入过程中血压上 升不满意时,应适当加大多巴胺用量,遇末梢循环改善不满意时,表现为面色仍苍白、皮肤 紫绀,四肢厥冷未改善应适当加大硝普钠的用量,休克缓解后,两药应逐渐减量至0.5?1 1 g ? kg -1 ? min -1左右,再观察1?2h,病情稳定可以停药。(3)快速洋地黄化,休克症状好转或休克缓解后使用地戈辛快速化量。 (4)激素早期大量使用,地塞米松1?2mg/kg,甲基强的松龙10?30mg/kg。(5)限制静脉速度,禁忌扩容,匀速低张力,无异常丢失只补充生理维持液。 (6)利尿剂的使用:血容量充足前提下,前负荷增加因素。(7)纠正酸中毒, 心源性休克时出现的代谢性酸中毒主要是循环障碍引起,当有效循环恢复后,可自动纠正,当pH小于7.20时,一般采用5%碳酸氢钠1?1.5ml/kg静注1?2次即可。(8)对症处理。 12. 多巴胺的简易方法:个人所需多巴胺用量= 3X体重 将多巴胺加入NS至50ml后用泵维持,如果需要A ug/kg/min,则泵的速度为A ml/h 。 例:一60kg 的病人,需5ml/kg/min (一支多巴胺为2ml:20mg) 计算:患者所需多巴胺的支数为3X60-20= 9 (支) 所需生理盐水50 —2X 9 = 32 ( ml),这样配成了50ml的溶液然后用泵维持5ml/h 即可这个方法是ICU 的老师教的,大家可以验证的。证明:设病人体重为M, 按上述方法将泵维持在 A ml/h 则每小时所用量为3M/50X A (mg), 按单位换算后为 ( 3M/50X A X 1000)- M- 60= A (ug/kg/min) 6. 100ml == 50ml == 40 ml == 30 ml == 20 ml == 10 ml 6mg 3mg 2.4mg 1.8mg 1.2mg 0.6mg

单胺氧化酶抑制剂

关于单胺氧化酶抑制剂 全网发布:2011-08-17 16:19 发表者: (访问人次:2937) 有经验的麻醉医师都知道,许多常用的麻醉药如杜冷丁、芬太尼等说明书上都在注意事项中明确提示“不得与单胺氧化酶抑制剂合用”。单胺氧化酶抑制剂都包括哪些药物呢 首先应把单胺氧化酶抑制剂这个名词解释清楚,所谓单胺,在化学上称做一元胺,指结构中含有一个氨基的物质,在自然界分布广泛,如多巴胺和5-羟色胺都是单胺类物质,有些食物如奶酪也富含单胺。许多单胺类物质有着很强的生理活性(如升的作用)。再说什么是单胺氧化酶。单胺氧化酶是一类能够选择性代谢(氧化脱氨基)单胺类物质的酶系,单胺氧化酶在人体内分布极广,除了红细胞之外,几乎所有的细胞内都有单胺氧化酶,专门对付单胺。前面讲到,单胺具有很强的生理作用,是个“危险分子”,它们一进入人体,在胃肠道和肝脏,便遭到单胺氧化酶的“围歼”,迫使它们氧化失活(失去活性),绝不让它们进入血循环。如果没有单胺氧化酶及时灭活这些单胺类物质,则可能引起严重后果,从这个意义上说,单胺氧化酶是有保护作用的。再说单胺氧化酶抑制剂,单胺氧化酶抑制剂就是专门抑制单胺氧化酶的,单胺氧化酶一旦受到抑制,单胺类物质便又可以“兴风作浪”了。同是单胺氧化酶抑制剂,药物的化学结构可能大相径庭,治疗的疾病也各种各样。那么,究竟哪些药属于单胺氧化酶抑制剂呢 常用的单胺氧化酶抑制剂有: 苯乙肼、异烟肼(雷米封)、异丙肼、异卡波肼(异唑肼、闷可乐)、苯异丙肼、异丙烟肼、异恶唑酰肼、苯二肼、沙夫肼、丙炔苯丙胺、超苯环丙胺、反苯环丙胺、吗氯贝胺、巴吉林、和苯环丙胺、尼亚胺、灰黄霉素、百乐明(强内心)等。以下按照其治疗作用的不同分类列出: 1.治疗帕金森病: 咪多吡(司来吉兰(林)、丙炔苯丙胺、芬兰奥立安集团)----B型单胺氧化酶抑制剂 舒震宁(司来吉林:法国狄朗有限公司)----B型单胺氧化酶抑制剂 思吉宁:盐酸司来吉兰(林)片 克金平:司来吉兰(林) 烟草及其烟雾中的单胺氧化酶抑制剂2,3,6-三甲基1,4-萘醌 2.降压药:帕吉林(优降宁) 3、止泻药:痢特灵(呋喃唑酮) 4、抗肿瘤药:甲基苄肼(Procarbazine、甲苄肼,甲苄芋肼、丙卡巴肼) 5、局麻药:普鲁卡因、奴弗卡因novocaine 6、抗衰老药:中老年生物素、益康宁、复方益康宁、福康乐、老年维生素H3 7、某些中药也有单胺氧化酶抑制作用,如靛红、鹿茸、山楂、何首乌等。 下列药物禁止或不宜与单胺氧化酶抑制剂合用,否则可能引起不良反应,甚至是严重的、危及生命的不良反应,如血压骤然升高,甚至导致,心动过速,呼吸困难,运动失调,高热,精神错乱等。 ●抗药:丙米嗪(米帕明)、氯米帕明、阿米替林等三环类抗抑郁药,马普替林、米氮平、米安色林等四环类抗抑郁药,氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀、茚达品、舍曲林、西酞普兰、安非他酮等5羟色

二胺氧化酶(Diamine Oxidase,DAO)试剂盒说明书

货号:MS1406 规格:100管/48样二胺氧化酶(Diamine Oxidase,DAO)试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。 测定原理: DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在460nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 试剂组成和配制: 提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:液体0.25mL×1支,4℃保存。 试剂二:液体2mL×1管,4℃保存。 试剂三:液体1mL×1管,4℃保存。 粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加 入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500 万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。 3.血清等液体:直接测定。 测定操作表: 1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至460nm,蒸馏水调零。 酶活性计算公式: 第1页,共3页

多巴胺的计算方法

1. (体重乘以3) mg加盐水配制至50ml,多少ml/h就是多少ug/kg/min., —般5ml/h开 始,以后根据血压调速度, 例如:一般早产还有新生儿窒息,新生儿肺炎,多巴胺的浓度在2至5Ug ,小剂量可以治 疗小儿支气管肺炎以改善肺部微循环、降低肺微循环阻力,促进炎症吸收消散,疗效可观 , 还有早产机理都是一样的! 2. 体重乘3等于多巴胺的量(毫克),稀释成50毫升, 以多少ml/h速度泵入就是以多少ug/kg.min的速度泵入。女口:病人体重60公斤,多巴胺 180mg( 18ml)+32ml生理盐水,配制成50ml,每小时以10ml的速度泵入,就是以10ug/kg.min 的剂量泵入。 3. 新生儿多用小剂量,一般用2.5ug/kg.min。比如4kg的体重。100ml GS中加入多巴胺 4X6=24mg。 10GS%100 ml +多巴胺24mg速度2.5ml/h。多巴胺的浓度为2.5ug/kg.min,用这种方法更好的调节浓度。速度7 ml /h的浓度就是7ug/kg.min. 4. 下面是心源性的休克时的治疗! 首要措施是增加心排血量及组织的血液灌流,要分秒必争,尽可能在休克早期获得充分治疗,以免贻误病情而发展为不可逆性休克。具体措施:(1)镇静、吸氧,保持呼吸道畅通, 良好静脉通道至少2个。(2)多巴胺和硝普钠两药同一静脉匀速经输液泵输入,多巴胺用量 为2?10g ? kg -1 ? min -1 ,硝普钠用量为1?6卩g ? kg -1 ? min -1 ,两药比例一般为 2:1 (多巴胺用量:硝普钠用量)或1:1,应由小剂量开始,如多巴胺按41 g ? kg -1 ? min -1及硝普钠按2 i g ? kg -1 ? min -1溶于10%葡萄糖溶液中匀速滴入。在滴入过程中血压上 升不满意时,应适当加大多巴胺用量,遇末梢循环改善不满意时,表现为面色仍苍白、皮肤 紫绀,四肢厥冷未改善应适当加大硝普钠的用量,休克缓解后,两药应逐渐减量至0.5?1 1 g ? kg -1 ? min -1左右,再观察1?2h,病情稳定可以停药。(3)快速洋地黄化,休克症状好转或休克缓解后使用地戈辛快速化量。(4)激素早期大量使用,地塞米松1?2mg/kg , 甲基强的松龙10?30mg/kg。(5)限制静脉速度,禁忌扩容,匀速低张力,无异常丢失只补充生理维持液。(6)利尿剂的使用:血容量充足前提下,前负荷增加因素。(7)纠正酸中毒, 心源性休克时出现的代谢性酸中毒主要是循环障碍引起,当有效循环恢复后,可自动纠正,当pH小 于7.20时,一般采用5%碳酸氢钠1?1.5ml/kg静注1?2次即可。(8)对症处理。 5. 多巴胺的简易方法:个人所需多巴胺用量二3X体重 将多巴胺加入NS至50ml后用泵维持,如果需要A ug/kg/min,则泵的速度为A ml/h。 例:一60kg的病人,需5ml/kg/min (一支多巴胺为2ml:20mg 计算:患者所需多巴胺的支数为3X 60- 20= 9 (支) 所需生理盐水50-2X 9 = 32 ( ml),这样配成了50ml的溶液然后用泵维持5ml/h即可这个方法是ICU的老师教的,大家可以验证的。 证明:设病人体重为M,按上述方法将泵维持在A ml/h

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