第十一讲基因工 程模 因工程模型 梁虹 中国医学科学院医学实验动物学研究所 2011-10-28
WASHINGTON, DC - The international Mouse Genome Sequencing Consortium today announced the publication of a high-quality draft sequence of the mouse genome - the genetic blueprint of a mouse - together with a comparative analysis of the mouse and human genomes describing insights gleaned from the two sequ en ces. Th e paper appears in the Dec. 5 issue of the journal Nature. The Mouse Genome And The Measure of Man December 2002 基因工程技术，包括基因打靶、基因沉默和转基因技 术等首先在小鼠的基因修饰和品系培育上广泛使用， 并产生了大量的基因剔除、转基因疾病小鼠模型和基 因功能研究模型，成为生命科学研究、医学研究和药 学研究的重要支撑条件，并推动了对生命规律的探索 和医药研究的发展。
基因导入方式 一、显微注射法 在倒置显微镜下通过显微操作系统用注射针将DNA样品注射到受精卵雄原核中，利用外源基因整合到DNA中，从而得到转基因动物。 ?特点：对DNA大小无限制，不需要载体，转基因成功率约20%，外源基因在小鼠染色体上常呈成串的头尾项链的多拷贝插入。 ?缺点：外源基因的插入位点和插入拷贝数都无法控制，易造成宿主动物基因组的插入突变，引起相应的性状改变。 二、慢病毒感染法 将具有一次性感染的病毒注射到小鼠受精卵透明带下。 ?特点：转基因成功率和转基因表达率可达到70%以上，且大多为单拷贝或低拷贝整合。?缺点：目的基因插入容量＜10kb，制备病毒需要一定的安全考虑。 三、精子载入法 将精子与DNA混合，然后通过单精注射或IVF获得转基因小鼠。
第二章基因工程习题 一、选择题 1. 基因工程的单元操作顺序是【】 Ａ增，转，检，切，接 Ｂ切，接，转，增，检 Ｃ接，转，增，检，切 Ｄ检，切，接，增，转 Ｅ切，接，增，转，检 2. 根据当今生命科学理论，基因工程的用途是【】 I 分离纯化基因II 大量生产生物分子III 构建新型物种IV 提高基因重组效率ＡI + II + III ＢI + II + IV ＣI + III + IV ＤII + III + IV ＥI + II + III + IV 3. 根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是【】 Ａ基因诱变 Ｂ分子克隆 ＣDNA重组 Ｄ遗传工程 Ｅ基因无性繁殖 4. 下列有关基因的叙述，错误的是【】 Ａ蛋白质是基因表达的唯一产物 Ｂ基因是DNA 链上具有编码功能的片段 Ｃ基因也可以是RNA Ｄ基因突变不一定导致其表达产物改变结构 Ｅ基因具有方向性 5. 天然Pst I 限制性内切酶的来源是【】 ＡBacillus amyloliquefaciens
ＢEscherichia coli ＣHaemophilus influenzae ＤProvidencia stuartii ＥStreptomyces lividans 6. 下列黏性末端属于同种内切酶切割而成的是【】 A ①② B ①③ C ①④ D ②③ 7. 若载体DNA 用M 酶切开，则下列五种带有N 酶粘性末端的外源DNA 片段中，能直接与载体拼接的是【】 M N ＡA/AGCTT T/TCGAA ＢC/CATGG ACATG/T ＣCCC/GGG G/GGCCC ＤG/GATCC A/GATCT ＥGAGCT/C G/AGCTC 8. T4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是【】 Ａ2' -OH 和5' -P Ｂ2' -OH 和3' -P Ｃ3' -OH 和2' -P Ｄ3' -OH 和5' -P Ｅ5' -OH 和3' -P 9.下列哪一种酶作用时需要引物？
动物的基因工程技术及其意义
第 23 卷
第6期
临沂师范学院学报 2001 年 12 月 动物的基因工程技术及其意义 高 翔, 刘京贞
(临沂师范学院生物与农林科学系,山东临沂 276005) 摘 要:动物的基因工程技术(或遗传工程技术)目前已发展了三大类,包括动物转
基因技术、克隆技术及 转基因克隆技术.它们具有重大的应用价值和科学意义,有着诱人的发展前景,必将 成为 21 世纪全球范围内生物工程领域竞争的热点.b5E2RGbCAP 关键词:转基因动物技术; 中图分类号:Q789 克隆动物技术; 文献标识码:A 转基因克隆动物技术 文章编
号:1009-6051(2001)06-0065-02p1EanqFDPw 1 动物基因工程技术概述,值.而把转基因技术与克隆技术结合,.
.也就是说此动物体的基因组中,.其原理是:从某种动物分离提取,重建和扩增,再 将加工好的这种目的基因导入另外一个同种或,使其稳定地整合到受体细胞的基因组中, 再将此受精卵移入代孕母体子宫内,发育成成熟的幼体产出.这种方式产生的动物即携 带有外源目的的基因,称转基因动物.常用的转基因动物技术方法有 3 种.即原核内显微 注射法,转染色体技术和细胞载体技术等.DXDiTa9E3d 克隆技术(Mammaliancloning),又称核移植或无性繁殖技术.也是通过特殊的人工 手段(如显微镜操作仪,电融合等)对动物特定发育阶段的核供体(胚胎分裂球或体细胞
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核)及相应的核受体(去核的原核胚或成熟的卵母细胞)不经过有性繁殖过程,进行体外 重构,形成重构胚,并通过胚胎移植(移入代孕母体子宫内)发育成新个体,这种新个体的 动物基因型与核供体的动物基因型相同.如“多莉羊”是由绵羊乳腺上皮细胞的细胞核 作核供体“,多莉”的基因型即与该绵羊的基因型相同.中国西北农业大学培育成的山 羊“阳阳”,核供体是山羊耳朵上的一个细胞核(体细胞核)“阳阳”,的基因型即与此 山羊的基因型相同.“多莉”和“阳阳”都没有亲生父母,它们的遗传基因仅来自一个 成年羊的体细胞,相当于此成年羊 RTCrpUDGiT (cloned)羊(即细胞核移植羊).“克隆”(细胞核移植)一词很快就成为一个专门的 科学的复制品,因此人们称它为“克隆”5PCzVD7HxA 术语,频繁地出现在科学及新闻文献中. “多莉”和“阳阳”的出生充分证明,高级哺乳动物已分化的体细胞核移植后,可 获得正常的克隆动物.由此引起了全世界的轰动,有人提出要克隆人,并声称已掌握了克 隆人的技术,由此引起了全球有关克隆人及其人类伦理学方面的争论.人的克隆技术将 会危及到人类的家庭观念和夫妻关系,并可造成人与人之间关系的混乱和社会的动荡. 于是,包括中国在内的许多国家纷纷制定了禁止克隆人研究和实验的法律和法规.但目 前美英等国已放宽了对人类克隆的限制,允许治疗性克隆(即用于治疗疾病的克隆)的研 究,禁止繁殖性克隆(即用于繁殖人的克隆)的研究.jLBHrnAILg 转基因克隆动物是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合.它是以体细胞(包 括动物成体体细胞、胎儿成纤维细胞等)为受体 xHAQX74J0X ,将目的基因以 DNA 转染的方式导入能进传代培养的动物体细胞,再以这些体细胞 为核供体,进行动物克隆.转基因动物克隆是指在获得转基因动物的基础上再进行动物
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青岛农业大学 动物基因工程课程论文 题目：转基因动物生物反应器的构建及应用 姓名： 学院：动物科技学院 专业： 班级： 学号： 任课教师：闵令江 二〇一一年十月二十三日
转基因动物反应器的构建与应用 兽医专业刘朝霞 任课教师指导老师：闵令江 摘要:21世纪是生命科学突飞猛进的时代,生命科学在人类生活中占有极为重要的位置。一是生命科学的发展促进了其他学科的发展;二是生命科学发展带动的产业将推动世纪经济的发展近年来生物学和分子生物学取得的显著进展终于使这种幻想成为现实。基因工程应用技术之一的基因重组，可用于对不同生物遗传物质的体外人工剪切、组合、拼接，使遗传物质重新组合，然后，通过载体，如微生物、病毒等转入微生物或细胞内，进行"无性繁殖"，并使所需基因在细胞内表达出来，产生人类所需的物质或创造新的物种。根据目的蛋白表达部位的不同可分为乳腺生物反应器、血液生物反应器、卵生物反应器、尿生物反应器、精囊腺生物反应器、唾液腺生物反应器等。 关键词：转基因分子生物学生物反应器
Transfers animals biological reactor construction and application Student maioring in:Veterinary professional name:liuzhaoxia Tutor name:minlingjiang Abstract：21 century is the life science by leaps and bounds times, life science in human life has very important position. One is the development of life science promoted the development of other disciplines; 2 it is life science development of industry will push to drive the development of the economy of the century in recent years in biology and molecular biology significant progress finally make this fantasy become a reality. Genetic engineering application of the technology of genetic restructuring, which can be used on different biological genetic material of in vitro artificial shear, combined, joining together, make new combination of genetic material, and then, through the carrier, such as microorganisms, virus into the microbial or within cells, for "asexual reproduction", and make required in a cell gene expression, produce human needs corporeal or create new species.According to the purpose of protein expression can be divided into different parts of the mammary gland bioreactor, blood bioreactor, eggs bioreactor, urine biological reactor, the seminal vesicle gland bioreactor, salivary gland bioreactor, etc. Keywords: Genetically modified Molecular biology Biological reactor
动物转基因技术及其应用 摘自（作者：幸宇云任军江西农业大学来源：《百名专家谈转基因》） 转基因是指利用现代分子生物学技术，将某些生物的基因导入到其他物种中，由于导入基 因的表达，引起这些物种性状发生可遗传的变化。转基因动物就是利用转基因技术获得的、具 有正常表达和可稳定遗传外源基因的动物。自1982年第一只转基因动物——一只因导入大鼠 生长激素基因而使生长速度倍增的转基因鼠诞生以来，各种转基因动物，如鱼、兔、猪、牛、 羊等先后问世，1997年，举世轰动的“多莉”克隆羊的诞生使转基因克隆动物成为现实，转 基因动物研究得到了进一步发展。 生产转基因动物的方法有很多，如：显微注射法、精子载体法、逆转录病毒载体法、胚胎 干细胞介导法、体细胞克隆介导法、人工染色体介导的基因转移法等，这些方法各有其优缺点，在转基因动物生产中有着不同程度的应用。 显微注射法是动物转基因技术中最早使用的方法。1982年，美国人Gordon就是利用这种 方法获得了名噪一时的转基因鼠。其基本原理是在显微镜下直接将目的基因注射到受精卵细胞 的原核内，在目的基因与胚胎基因组融合后进行体外培养，最后移植给受体母畜“借腹怀胎”。这种方法的优点是：可靠性高，重复性好，目的基因的整合效率相对较高，导入基因片段的大 小和类型不受限制，转基因在世代之间可以稳定遗传。该方法也有其缺点，主要体现在导入基 因整合的随机性和不可见性，这样会导致基因表达不稳定及可能出现不希望的插入突变。该方 法成功的范例很多，如：美国科学家Hammer等在1985年获得一批转基因兔、绵羊和猪；荷兰 科学家KrimPenfort等于1991年获得了转基因牛；1985年，我国朱作言院士等成功获得了世 界上首例转基因鱼；由中国农业大学李宁院士领导的课题组于2008年获得了一头导入人CD20 抗体基因的转基因奶牛——贝贝。 有的学者另辟蹊径，创立了精子载体转基因法。该方法是将精子与目的DNA进行预培养后，使精子具有携带目的基因进入卵子的能力，精子与卵子结合后，该基因被整合到受精卵的DNA 中。同显微注射法相比，该方法有几个明显的优点：无需显微注射操作，不会对胚胎造成损伤，整合率高，成本很低，不需要对动物进行胚胎移植手术处理等。但该方法成功率不高、效果不 稳定，有待科研人员进一步探索和改进。与显微注射法相比，该方法成功的例子不多。1989 年意大利Lavitrano等首次报道利用精子载体法获得转基因鼠；1996年意大利Sperandio科 研小组报道了采用该方法生产转基因牛和猪。 谈到病毒，人们往往面容失色，殊不知病毒在科学上有很多妙用。逆转录病毒是一种RNA 病毒，在转基因技术中有着独特的应用。人们将目的基因结合到逆转录病毒上，通过病毒感染 可将目的基因插入到宿主基因组中去。该方法具有可同时感染大量胚胎、不需要昂贵的显微注 射设备等优点，但也存在插入外源DNA大小有限、外源基因易发生重排和丢失、逆转录病毒的 序列可能干扰转基因表达等缺点。应用该方法，美国人Salter等（1987）生产出转基因鸡； 德国学者Hofmann等获得绿色荧光蛋白转基因猪（2003），随后又生产出转基因牛（2005）； 来自冷泉港实验室的Michael获得能够发荧光的山羊（2006）。 胚胎干细胞是生命体中保留的未成熟细胞，具有再分化形成其他细胞和组织器官的潜力， 被称为“万能细胞”。利用胚胎干细胞生产转基因动物的原理是将外源基因导入分离好的胚胎 干细胞，然后将转基因的胚胎干细胞注射于受体动物胚胎后，参与宿主的胚胎融合形成嵌合体，从而得到转基因动物。这一方法的优点是可以对胚胎干细胞进行特定选择。缺点是目前只有小 鼠干细胞系比较成熟，而家畜干细胞系还未完全建立，有不少问题尚待解决。 体细胞克隆介导的转基因是动物转基因技术中的“高级版本”。说到体细胞克隆，很多人都会想到一位“动物明星”——多莉羊，它是于1997年由英国Wilmut等获得的杰作。转基因 克隆技术是转基因技术和动物克隆技术的有机结合，其基本原理是将目的基因导入动物体细胞
阶段质量检测(一)基因工程 (时间：45分钟，满分：100分) 一、选择题(每小题3分，共45分) 1．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是() A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．只要是细菌中的质粒都可以直接作为基因工程中的载体 D．载体必须具备的条件之一是有多个限制酶切割位点，以便与外源基因进行连接 2．(浙江高考)天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是() A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 3．日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白(GFP)等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是() A．作为标记基因，研究基因的表达 B．作为标记蛋白，研究细胞的转移 C．注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠 D．标记噬菌体外壳，示踪DNA路径 4．下列有关质粒的叙述，正确的是() A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA C．质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制 D．基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核DNA、动植物病毒以及λ噬菌体的衍生物 5．下列有关基因工程的叙述正确的是() A．用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获得相同的黏性末端 B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同 C．检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功 D．质粒上抗生素的抗性基因有利于质粒与外源基因连接 6．下列有关基因工程和蛋白质工程步骤的叙述不．正确的是() A．将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法 B．设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列
大学基因工程知识点生物基因工程知识点 基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段，下面WTT给你分享生物基因工程知识点，欢迎阅读。 生物基因工程知识点(一) 基因工程的基本工具 1.“分子运输车”载体(1)载体具备的条：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是??质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 (3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 2.“分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 (3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
3.“分子缝合针”DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E?coliDNA 连接酶和T4-DNA连接酶)的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E?coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 生物基因工程知识点(二) 基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 3.PCR技术扩增目的基因 (1)原理：DNA双链复制 (2)过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链;第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链;第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 第二步：基因表达载体的构建
·129· 129 生物技术 动物基因工程技术的应用 徐小静 （河北农业大学，河北 保定 071000） 摘 要：动物的基因工程技术或称遗传工程技术，目前已发展了三大类,包括动物转基因技术、克隆技术及转基因 克隆技术。它们具有重大的应用价值和科学意义,有着诱人的发展前景,必将成为21世纪全球范围内生物工程领域研究的热点。这篇论文旨在介绍动物基因工程技术在制药技术、植物、动物方面的应用以及研究进展。 关键词:动物基因工程；药学；植物学；动物 文章编号：ISSN2096-0743/2019-24-0129 1.动物基因工程的概念 动物基因工程的研究建立在动物遗传学、分子生物学、动物繁殖学等多门学科的基础上，利用基因工程技术人为地改造动物的遗传特性的现代生物学技术，主是的研究是在转基因动物。转基因是指利用一定的方法，将人工重组的外源DNA 导入受体动物的基因组中或将受体基因组中的一段DNA 敲除，从而使受体动物的遗传信息发生人为地改变，并且可以将这种改变遗传下去的生物技术。 基因工程子自20世纪70年代诞生以来，动物研究受到了全国各界的重视，在药物的研究、开发、生产等多方面方面广泛应用，在植物方面的拓展也有不 错的效果。 2.动物基因工程在畜牧上的贡献 动物基因工程开始于1938年，德国生物学家斯佩曼（Hans Spemman，在1935年获得诺贝尔奖）提出将胚胎细胞核移植到去核卵母细胞中研究胚胎分化发育的想法，也就是所说的胚胎细胞核移植又称胚胎克隆。 基因工程技术对于畜牧学来讲，有重要作用。我 国各地有多种生物及其宝贵，尤其对于珍稀物种来讲说，利用基因工程技术将其遗传资源保存下来，加大了物种遗传改良进程，有利于良种繁育体系的建立。 同时，基因工程技术在动物方面发展广泛，如荧光猪的培育，使猪在不同波长激发光下可以发出红黄绿青四种荧光。在云南农业大学培育的转基因克隆猪，猪蹄可以发出绿色光。 绿色荧光猪 3.动物基因工程药物 基因工程制药是指按照人们的意图,将外源基因整合入宿主基因组中,表达具有生物学活性的蛋白药物。基因工程药物旨在生产能够预防和治疗某种疾病但是却难以提取的药物。它们对预防人类的肿瘤、遗传病、糖尿病、艾滋病、疫苗的生产等以有重要作用。如胰岛素自投入市场以来，以基因工程药物为主导的基因工程产业就已经成为全球发展最快的产业之一。 3.1人类的肿瘤 世界上每年因为肿瘤而死的人很多，其发病机制复杂，目前治疗肿瘤采用的基本上就是放疗、化疗综合治疗法，因此肿瘤仍然是医药界的一大难解之题。应用基因工程抗体抑制肿瘤，应用基因治疗法治疗肿瘤，基质金属蛋白酶抑制剂可抑制肿瘤血管生长，阻止肿瘤生长与转移。
大连医科大学实验动物研究及使用计划（试用） A. 管理信息： □初次申请 □3年复审，请填写已有的研究计划号：（ ） 列出在本计划中所有动物实验操作人员： 注：职责可为课题设计、主要操作、辅助操作、手术操作、小鼠管理等 列出每个人相对于职责，已有的实验经验和资格 B. 研究或教学的目的： 以一般非生物医学背景人员为对象，简述研究目的，以及对人类或动物的健康与解决的科学问题。一般只需要以非科学术语描述做什么以及做这个实验的必要性。 C. 危险试剂或感染性试剂： □本计划不使用任何有害物质 □本计划使用有害物质，假如使用 危险试剂的使用需要取得大连医科大学生物安全委员会的认可。危险试剂包括下列几个范畴： □1. 放射性性物质 □2. 致癌物/致突变物 □3. 感染物质 □4. 重组DNA □5. 肿瘤等细胞系 □6. 组织或抗血清 □7.其他有害物质 1.请详细描述具体的试剂名称、拟使用剂量，以及给药或使用方式： 2. 请详细描述对人或动物的潜在毒性、并简述安全操作和处理受污染动物及材料的方法及程序： D. 需求动物信息：
E.疼痛（Pain）或紧迫（Distress）反应的级别评价及预防与减轻： 1. 疼痛或紧迫反应的级别评价（参考美国农业部（USDA）分类标准） □ USDA- C类 -实施实验的动物没有疼痛、紧张或轻微或一过性的疼痛、紧张 □ USDA- D类 -实验过程中有疼痛和紧张，但实施合适的麻醉、镇痛、镇静措施 □ USDA- E类 -实验过程中有疼痛和紧张，但麻醉、镇痛、镇静的应用会影响实验结果 2. 预防与减轻疼痛或紧迫反应的措施： 是否有更好的避免疼痛或紧迫操作的方法：□是□否 假如是，请说明： F.是否存在禁食、禁水（手术前的禁食除外）□是□否 假如是，请说明禁食、禁水的时间长度： G.是否存在单笼饲养：□是□否 假如是，请说明动物环境丰富化策略，如何满足动物的社会性需求。 H.实验设计和动物实验操作步骤：
一、单项选择题 1. 生物工程的上游技术是( ) A. 基因工程及分离工程 B. 基因工程及发酵工程 C. 基因工程及酶工程 D. 基因工程及细胞工程 2. 基因工程的单元操作顺序是( ) A. 增，转，检，切，接 B. 切，接，转，增，检 C. 接，转，增，检，切 D. 切，接，增，转，检 3. 下列哪种克隆载体对外源DNA 的容载量最大?( ) A. 质粒 B. 黏粒 C. 酵母人工染色体(YAC) D. λ噬菌体 E. cDNA 表达载体 4. 同一种质粒DNA以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是() A. OC DNA>SC DNA>L DNA B. SC DNA>L DNA>OC DNA C. L DNA>OC DNA>SC DNA D. SC DNA>OC DNA>L DNA 5. 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是( ) A. 修复自身的遗传缺陷 B. 促进自身的基因重组 C. 强化自身的核酸代谢 D. 提高自身的防御能力 6. 基因工程的三大理论基石是（） A. 经典遗传学、细胞生物学、微生物学 B. 分子遗传学、分子生物学、生化工程学 C. 动物学、植物学、微生物学 D. 生物化学、生化工程学、化学工程学 E. 生理学、仿生学、免疫学 7. 基因工程作为一种技术诞生于（） A. 上世纪 50 年代初 B. 上世纪 60 年代初 C. 上世纪 70 年代初 D. 上世纪 80 年代初 E. 上世纪 90 年代初 8. 下述对DNA聚合酶的描述哪些是错误的（）。 A. 具有5’→3’外切酶活性 B. 具有3’→5’外切酶活性 C. 具有5’→3’聚合酶活性 D. 具有3’→5’内切酶活性 9. 下列关于酵母和哺乳动物的陈述错误的是（） A．大多数酵母基因没有内含子，而大多数哺乳动物基因有许多内含子 B．酵母基因组的大部分基因比哺乳动物基因组的大部分基因小 C．大多数酵母蛋白比哺乳动物相应的蛋白小 D．尽管酵母基因比哺乳动物基因小，但大多数酵母蛋白与哺乳动物相应的蛋白大致相同 10. 下列哪一种不是产生星号活性的主要原因？( ) A. 甘油含量过高 B. 反应体系中含有有机溶剂 C. 含有非镁离子的二价阳离子 D. 酶切反应时酶浓度过低 11. 下面关于细菌人工染色体(BAC)的特征描述，除了( )外都是正确的。
生命科学院 分子生物学 期末综述 题目：基因工程在转基因动物领域的应用现状及展望 班级：09动物科学 姓名：曾雪婷 学号：2009084548 【摘要】本文阐述了基因工程和转基因技术研究的原理、基本路线，介绍了转基因技术和生产转基因动物的方法，总结转基因技术在哺乳动物领域的应用，提
出了转基因动物面临的问题，并对转基因技术及转基因动物的前景进行了展望。【关键词】基因工程；原理；转基因动物；应用；展望 基因工程是改变生物的遗传组成，增加生物的遗传多样性，赋予转基因生物新的表型特征，使其能够更好地服务于人类社会的一项工程技术。基因工程在转基因动物领域的应用具有巨大的发展潜力，促进了转基因方法的不断发展和转基因动物应用领域的迅速扩大。 1.基因工程与动物基因工程的原理 基因工程又名遗传工程(geneticengineering)、一主要包括DNA重组技术、分子克隆或基因克隆等技术，它是指在分子水平上提取(或合成)不同生物的遗传物质，在体外切割，再和一定的载体拼接重组，然后把重组的DNA分子引入细胞或生物体内，使这种外源DNA(基因)在受体细胞质中进行了复制与表达，按人们的需要繁殖扩增基因或生产不同的产物或定向创造生物的新性状，并能稳定遗传给后代[1]。基因工程的核心内容包括基因克隆和表达。 动物基因工程就是利用基因工程技术来人为地改造动物遗传特性的技术体系。它的具体应用就是生产转基因动物(transgenicanimal)，即用基因工程的方法获得目的基因并导入到动物的受精卵中，使外源基因与动物本身的基因组DNA整合到一起，并随细胞的分裂而增殖，从而在动物体内得到表达，产生具有特定性
基因工程测试题（四） 一、选择题(每题1.5分，共60分) 1．我国科学家成功地将人的抗病毒干扰素基因转移到烟草DNA 分子上，从而使烟草获得了抗病毒的能力。这项技术所依据的遗传学原理主要是 A ．碱基的互补配对原则 B ．中心法则 C ．基因分离定律 D ．基因自由组合定律 2．下图示一项重要生物技术的关键步骤，字母X 可能代表 A ．能合成胰岛素的细菌细胞 B ．能合成抗体的人类细胞 C ．不能合成胰岛素的细菌细胞 D ．不能合成抗生素的人类细胞 3．基因工程技术引起的生物变异属于 A ．染色体变异 B ．基因突变 C ．基因重组 D ．不可遗传的变异 4．在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个）放入DNA 扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是 A ．540个 B ．8100个 C ．17280个 D ．7560个 5．能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是 A ．单倍体育种 B ．杂交育种 C ．基因工程育种 D ．多倍体育种 6．基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②将目的基因导入受体细胞，③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④提取目的基因。正确的操作顺序是 A ．③②④① B ．②④①③ C ．④①②③ D ．③④①② 7．基因工程常用的受体细胞有 ①大肠杆菌②枯草杆菌③支原体④动植物细胞 A ．①②③④ B ．①②③ C ．②③④ D ．①②④ 8．下列有关基因工程技术的正确叙述是 A ．重组DNA 技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B ．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 人胰岛素基因 切开的质粒 酶 插入细菌细胞 细胞分裂
高等植物基因工程 HEWenxingUNIVERSITYOFJinan第二节植物基因工程方法一、植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：（一）生物介导的转化方法主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高广泛应用于双子叶植物的遗传转化。 （二）直接基因转移技术包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等其中基因枪转化法是代表。 第二节植物基因工程方法一植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：（一）生物介导的转化方法主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高广泛应用于双子叶植物的遗传转化。 （二）直接基因转移技术包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等其中基因枪转化法是代表。 HEWenxingUNIVERSITYOFJinan、农杆菌的Ti质粒与TDNA的整合机制几乎所有双子叶植物都容易受到土壤农杆菌感染而产生根瘤。 它是一种革兰氏阴性土壤杆菌（Atumefaciens）。 其致瘤特性是由Ti（tumor－inducing）质粒介导的。 （一）生物介导的转化（一）生物介导的转化农杆菌的Ti质粒与
TDNA的整合机制几乎所有双子叶植物都容易受到土壤农杆菌感染而产生根瘤。 它是一种革兰氏阴性土壤杆菌（Atumefaciens）。 其致瘤特性是由Ti（tumor－inducing）质粒介导的。 农杆根瘤菌之所以会感染植物根部是因为植物根部损伤部位分泌出酚类物质乙酰丁香酮和羟基乙酰丁香酮这些酚类物质可以诱导Vir （Virulenceregion)基因的启动表达Vir基因的产物将Ti质粒上的一段T－DNA单链切下而位于根瘤染色体上的操纵子基因产物则与单链T －DNA结合形成复合物转化植物根部细胞。 HEWenxingUNIVERSITYOFJinanTi质粒（Tumorinducedplasmid）Ti质粒（Tumorinducedplasmid）环状dsDNA,kb具六个功能区致瘤区：合成植物生长素和细胞分裂素冠瘿碱合成区：参与冠瘿碱合成冠瘿碱分解区：参与冠瘿碱分解Ti质粒转移区(tra)：参与在不同农杆菌中的接合转移毒性区（Vir）（Virulenceregion)：直接参与TDNA的转移和插入植物染色体DNA复制区（Re织、细胞、细胞器内完成整合并表达的基因转化的方法。 最早是由Cornell大学研制的火药基因枪。 年美国杜邦公司推出了商品基因枪PDS系统。 基因枪的组成部分由点火装置、发射装置、挡板、样品室、真空系统组成。 基因枪法基因枪法（particlegun）又称微弹轰击法（microprojectilebombardment,particlebombardment,biolistic)。