利用Xevo TQ-S增加低暴露量化合物的生物分析灵敏度
Paul D. Rainville和Robert S. Plumb
美国米尔福德马萨诸塞州沃特世公司
应用优势
这款新型的串联四极杆质谱系统大大增加了低浓度组织样品的药物化合物分析的灵敏度。
沃特世解决方案
Xevo? TQ-S
MassLynx?与T argetLynx?的联合使用
ACQUITY UPLC?
ACQUITY UPLC BEH色谱柱化学品
关键词
StepWave?、T-Wave,? 生物分析、药物化合物、丙酸氟替卡松、沙美特罗琥珀酸盐简介
对生物体液中的药物进行准确定量有助于准确测定药物的药代动力学参数。低暴露量组织样品中的化合物（如：吸入型药品或强代谢型药品）需要灵敏度非常高的分析，才可准确地确定药代动力学曲线的消除相。这对于现代的LC/MS/MS仪器灵敏度而言无疑是个挑战。
Xevo TQ-S是一款超高灵敏度的串联四极杆质谱仪。它具备以创新离轴离子源设计为特色的StepWave离子传输技术。这项设计显著提高了从离子源到四极杆分析器的离子传输效率，同时其离轴离子通路还可将中性污染物排除。这两个特点的结合大幅度增加了LC/MS/MS系统的灵敏度。
本应用纪要中，我们对2类药物化合物，丙酸氟替卡松和沙美特罗琥珀酸盐的分析灵敏度的增加进行了描述，这些药物均为吸入型药物，且在人体循环系统中表现为极低水平的浓度。Xevo TQ-S 的数据高捕获率特性可允许快速收集大量的多反应监测（MRM）迁移离子，并同时采集全扫描/MRM数据。
1
实验
色谱条件
液相色谱（LC）系统：A CQUITY
UPLC（二元
溶剂管理系
统、样品管理
器、HT色谱柱
恒温箱）
液相色谱柱：ACQUITY
UPLC BEH
C18柱，1.7微
米，2.1 ×50
毫米
梯度：A：0.1％氨水
（Aq）B：甲
醇5 ~ 95%B
洗脱1.5分钟
以上
流速：600 微升/分
钟
进样量：10 微升
质谱条件
质谱系统：Xevo TQ-S和Xevo
TQ于电喷雾正离子
模式下操作
MRM数据采集：501 => 292.95 氟
替卡松
416.15 => 380 沙
美特罗
电压：每个质谱仪及锥孔
气流的毛细管、锥孔
和碰撞电压都进行
了最优化
源温度：140 °C
脱溶剂温度：625 °C
喷雾气体流量：1200升/小时
数据管理
MassLynx 4.1
使用TargetLynx 应用管理系统进行定量分析结果和讨论
凭借从背景噪声中对目标峰的识别能力，对生物体液中的药物化合物进行精确定量。Xevo TQ-S中的StepWave源专为优化这项功能而设计。它包括两个差分抽取的离子传输阶段；两个阶段均启用了T-Wave1技术（多层环RF装置）。当离子束通过源抽样孔时，离子束会进行一定程度的扩散。因StepWave的进口设计得足够大，它可以有效地捕获扩散离子云中的所有离子。第一阶段的设计确保了所有离子均有效聚集并进入第二阶段。这项离轴设计确保了进入到源抽样孔的中性物质主动从系统中排出（如图-2所示）。
在图-2中，我们可以看到：当离子云进入MS迁移区时是如何扩散的，而之后当其转移到四极杆分析器区时又是如何聚集为一狭窄的离子束的。不带电的中性化合物因无法穿过这个离轴通路而被排出丢弃。这大大提高了检测限，使生物分析学者们可对血浆、血清和尿液的分析组分在曾经无法达到的水平下进行定量分析。
通过这项StepWave设计，根据所分析的化合物，我们发现灵敏度竟增加了约10 ~ 25倍。例如：治疗哮喘和鼻炎的现代药物（如：β2激动剂和类固醇激素类药物）不会进入到循环系统且通常都是经吸入给药。这些药物化合物被有意使得在人体全身系统中以极低浓度水平存在，因此适合使用Xevo TQ-S系统进行分析。
用甲醇将丙酸氟替卡松和沙美特罗琥珀酸盐溶解，然后以不同的生理相关水平注入至血浆中。之后，用2：1的乙腈使血浆样品沉淀并离心分离，将离心后的上清液注入色谱系统。
2 利用Xevo TQ-S增加低浓度化合物的生物分析灵敏度
图-1中所示数据显示：使用Xevo TQ-S对丙酸氟替卡松进行分析时灵敏度增
加；图-3中的数据显示：对沙美特罗琥珀酸盐分析所获取的峰值响应增加。丙
酸氟替卡松的峰高增加了12倍，沙美特罗琥珀酸盐的峰值响应增加了15倍。
表-1中给出了这两类药物化合物及其它类型药物在峰值响应上的总体增加水
平。这里我们可以看到，峰值响应增加了12~25倍不等。
利用Xevo TQ-S增加低浓度化合物的生物分析灵敏度 3
除了增加峰灵敏度之外，还有其他优点。更大的峰值响应使所述的检测限无需复杂的方法开发即可获取，从而使方法开发速度更快。峰高的增加还能更加简化峰的积分，使一般应用情况下的分析重现性更好。
结论
Xevo TQ-S中的StepWave离子传输技术显著提高了离子源中离子抽样的效率。其创新的离轴几何学设计还可阻止您不需要的中性化合物进入仪器的分析器阶段。这项新的设计致使灵敏度显著增加，增加幅度从10至25倍不等。该分析灵敏度的增加有以下功能：
?提高低暴露量化合物的检测限水平
?加速方法开发
?简化峰的积分
?更好的分析重现性
1此处描述的行波设备与美国专利5206506; 1993中Kirchner所描述的类似。
特世公司的注册商标。Xevo、StepWave、
T-Wave、MassLynx、TargetLynx和The
Science of What’s Possible是沃特世公
司的商标。所有其他商标属于各自所有
者。
?2010沃特世公司中国印刷
2010年5月720003419ZH
常见的微生物检测 方法
摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同
时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：
微生物农药的应用现状和发展前景 摘要化学农药的使用能够控制病虫害，增加作物的产量，但在土壤、空气和粮食中的残留也带来了环境污染、生态平衡破坏和食品安全等一系列问题。微生物农药是指微生物及其代谢产物，和由它加工而成的、具有杀虫、杀菌、除草、杀鼠或调节植物生长等活性的物质，包括活体微生物农药和农用抗生素两大类。前者主要包括Bt制剂、病毒杀虫剂、真菌杀虫剂和真菌除草剂；后者主要指微生物所产生的一些有活性的次级代谢产物及其化学修饰物。微生物农药由于其广谱、高效、安全、环境相容性好等特点，日益受到重视。本文介绍了微生物农药的种类、特点、应用现状，并在此基础上对其发展前景进行了展望。 关键词微生物农药；应用现状；发展前景 1.传统化学农药和微生物农药的比较 1.1传统化学农药产生的危害 1.1.1对土壤的影响 传统化学农药施用以后，一部分残留在农作物表面，一部分直接进入土壤，被土壤颗粒吸附。大气中的残留农药和农作物上的农药经雨水淋洗进入土壤，直接或间接与土壤接触，杀灭土壤中的微生物，影响土壤的腐熟和透气性，破坏土壤结构和土壤肥力，影响作物生长发育。 1.1.2破坏生态平衡 在杀灭害虫的同时，也杀灭了害虫的天敌，破坏了生态平衡，导致害虫种群急剧上升。有些次要的害虫，由于天敌数量急剧减少，很快发展为主要害虫。 1.1.3产生抗药性 针对一种害虫长期使用同种农药，往往会使其产生抗药性，从而导致农药浓度及用药频率增加，使农药残留更高。 1.1.4威胁食品安全和人体健康 化学农药在蔬菜水果上的残留会对食品安全造成巨大的威胁。农药通过饮食或食物链间接进入人体造成急性或慢性中毒，甚至致癌，危害人体健康。 1.2微生物农药的优点 与传统化学农药相比，微生物农药具有以下优点：（1）对病虫害的防治效果良好。病原
生物农药的介绍及使用技术 目录 1、生物农药的内容简介 2、生物农药的出现和发展 3、生物农药的4大优点 4、生物农药的5大优势 5、生物农药四大类型 6、转基因生物农药 7、生物农药的使用技术 8、使用生物农药要注意四大气候因素 1、生物农药的内容简介 生物农药是指利用生物活体或其代谢产物对害虫、病菌、杂草、线虫、鼠类等有害生物进行防治的一类农药制剂，或者是通过仿生合成具有特异作用的农药制剂。关于生物农药的范畴，目前国内外尚无十分准确统一的界定。按照联合国粮农组织的标准，生物农药一般是天然化合物或遗传基因修饰剂，主要包括生物化学农药(信息素、激素、昆虫生长调节剂)和微生物农药(真菌、细菌、昆虫病毒、原生动物，或经遗传改造的微生物)两个部分，农用抗生素制剂不包括在内。我国生物农药按照其成分和来源可分为微生物活体农药、微生物代谢产物农药、植物源农药、动物源农药四个部分。按照防治对象可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀螨剂、杀鼠剂、植物生长调节剂等。就其利用对象而言，生物农药一般分为直接利用生物活体和利用源于生物的生理活性物质两大类，前者包括细菌、真菌、线虫、病毒及拮抗微生物等，后者包括农用抗生素、性信息素、摄食抑制剂、保幼激素和源于植物的生理活性物质等。但是，在我国农业
生产实际应用中，生物农药一般主要泛指可以进行大规模工业化生产的微生物源农药。 2、生物农药的出现和发展 我国是最早应用杀虫剂、杀菌剂防治植物病虫害的国家之一，早在1800年前就已应用了汞剂、砷剂和藜芦等。直到20世纪40年代初，植物性农药和无机农药仍是防治病害虫的有利武器。20世纪40年代发明有机化学农药之后，极大地增强了人类控制病虫危害的能力，为我们挽回农作物产量损失作出了重大的贡献。但是，长期依赖和大量使用有机合成化学农药，已经带来了众所周知的环境污染、生态平衡破坏和食品安全等一系列问题，对推动农业经济实现持续发展带来许多不利的影响。 生物农药的出现和发展是和生物防治研究的发展及化学农药的使用分不开的，经历了曲折的过程。agostino bassi于1853年首次报道由白僵菌引起的家蚕传染性病害”白僵病”，证实了该寄生菌在家蚕幼虫体内能生长发育，采用接种及接触或污染饲料的方法可传播发病；俄国的梅契尼可夫于1879年应用绿僵菌防治小麦金龟子幼虫；1901年日本人石渡从家蚕中分离出一种致病芽孢杆菌--苏云金芽孢杆菌；1926年g.b.fanford使用拮抗体防治马铃薯疮痂病。这些都是生物农药早期的研究基础，当时并未形成产品。化学农药发展到20世纪60年代，“农药公害”问题日趋严重，在国际上引起了震动，使农药发展发生了转折，引出了生物农药。1972年，我国规定了新农药的发展方向：发展低毒高效的化学农药，逐步发展生物农药。70～80年代，我国生物农药的发展呈现出蓬勃发展的景象。但是，由于化学农药高效快速，人们仍寄希望于化学农药防治病虫害，对生物农药的研制和应用曾一度漠视忽略。进入20世纪90年代，随着科学技术不断发展进步，减少使用化学农药，保护人类生存环境的呼声日益高涨，研究开发利用生物农药防治农作物病虫害，发展成为国内外植物保护科学工作者的重要研究课题之一。生物农药具有安全、有效、无污染等特点，与保护生态环境和社会协调发展的要求相吻合。因此，近年来我国生物农药的研究开发也开始呈现出新的局面，目前，已发展成为具有几十个品种、几百个生产厂家的队伍。生物农药在病虫害综合防治中的地位和作用显得愈来愈重要。
(一)、概述 食用被微生物污染的食品而导致的疾病，称作食源性疾病。导致这类疾病的微生物叫食源性致病菌。随着人们居住和卫生条件的不断改善，以及抗生素的滥用，人类对病菌的抵抗能力却在不断下降，食源性疾病一直呈上升的趋势。因此，对食品中致病菌的监测和检验也就越显示其重要性，常规的检验大多依靠培养目标微生物的方法来确定食品是否受到此微生物的污染，这些方法需要一定的培养时间，少则2～3天，多至数周，才能确定。而现行有效的一些快速检测方法不仅可以大大缩短检测时间提高微生物检出率并可用于微生物计数、早期诊断、鉴定等方面，以做到快速、简便、准确。快速方法包括了微生物学、分子化学、生物化学、生物物理学、免疫学和血清学等领域。 （二）、常见、常用的快速、简便的检测微生物数量的方法如下： 1、活细胞计数的改进方法 （1）、旋转平皿计数方法 （2）、疏水性栅格滤膜法（HGMF）或等格法（isogrid method） （3）、血膜系统（Pertrifilm） （4）、酶底物技术（ColiComplete） （5）、直接外荧光滤过技术（DEFT） （6）、“即用胶”系统（SimPlate） 2、用于估计微生物数量的新方法 （1）、阻抗法 （2）、A TP生物发光技术 3、其他方法 （1）、微量量热法 （2）、接触酶测定仪 （3）、放射测定法 （三）、食品中沙门氏菌的快速筛检方法 1、沙门氏菌显色培养基法 2、免疫学方法 3、分子生物学方法 4、自动传导法 （四）、大肠杆菌O157：H7快速检测方法 大肠杆菌O157：H7肠出血性大肠杆菌的主要血清型，自1982年在美国被分离并命名以来，陆续发现本菌与轻度腹泻、溶血性尿毒综合症、出血性肠炎、婴儿猝死综合症等多种人类病症密切相关，是食源性疾病的一种重要致病菌。E.coli O157：H7属于肠杆菌科埃希氏菌属，为革兰氏阴性杆菌，有鞭毛。近年来作为食品卫生及流行病学的研究热点，E.coli O157：H7的分离和鉴定方法已取得了较大进展。利用其生化特征、免疫原性建立的方法以及现代分子生物学技术的应用，可以从多方面对E.coli O157：H7进行检测。 1、E.coli O157：H7鉴别培养基及显色培养基 2、免疫学检测方法 3、分子生物学方法 （五）、金黄色葡萄球菌的快速检测方法 金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈普通串状排列无芽孢，无鞭毛，不能运动。该菌在自然界中分布广泛，如空气、水、土壤、饲料和一些物品上，是最常见的化脓性球菌之一，食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌食物中毒是其肠毒引起的，目前已确认的肠毒素至少有A,B,C1,C2,C3,D,E和F8个型。由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的中毒爆发事件，近年来
第一节细胞中的元素和无机化合物 学习目标核心素养 1.说出细胞主要由C、H、O、N、P、S等元素构 成，它们以碳链为骨架形成复杂的生物大分子。 2.指出水大约占细胞重量的2/3，以自由水和结 合水的形式存在，赋予了细胞许多特性，在生命 中具有重要作用。 3.举例说出无机盐在细胞内含量虽少，但与生命 活动密切相关。 1.从元素的种类和含量等角度理解生物界和非 生物界的统一性和差异性。 2.通过饼状图分析、列表格等方法归纳组成生命 的元素、无机物的作用。 3.按照科学探究的要求，提出验证或探究植物必 需的无机盐的方案。 一、组成细胞的元素 1．元素的种类 (1)按与生命的关系，可以分为必需元素和非必需元素。缺乏必需元素可能导致疾病。 (2)种类：细胞中常见的化学元素有20多种。 2．特点 (1)组成生物体的任何一种元素在无机自然界都能找到。 (2)不同生物体内所含元素种类基本相同，但每种元素的含量却有多有少。 3．含量 (1)地壳中含量最多的元素是氧，再依次是硅、铝、铁。 (2)生物细胞中含量最多的元素是氧，然后分别是碳、氢、氮。 4．生物会因缺乏某些元素而产生该元素的缺乏症。如一些山区居民患有克山病，该病与缺硒有明显关系。 二、细胞中的无机化合物 1．组成细胞的化合物 (1) (2)含量 ①鲜重条件下，含量最多的化合物是水。 ②鲜重条件下，含量最多的有机化合物是蛋白质。 ③干重条件下，含量最多的化合物是蛋白质。
(1)自由水 ①含义：在细胞内可以自由流动。 ②作用 a．良好的溶剂。 b．细胞中生物化学反应的介质。 c．有些自由水直接作为反应物参与生物化学反应。 d．运送营养物质和代谢废物。 e．参与细胞中各种代谢作用。 (2)结合水 ①含义：在细胞中通过氢键等与蛋白质、糖类等物质结合在一起。 ②作用：组成细胞结构的重要成分。 (3)水与代谢的关系 ①在代谢旺盛的细胞中，自由水的含量一般较多。 ②抗逆性较强的细胞中，结合水的含量相对较多。 3．细胞中的无机盐 含量较少 存在 形式 主要以离子形式存在，如Na＋、K＋、Ca2＋、Cl－、HCO－3；少数以化合态存在，如I －构成甲状腺激素等 生理 作用 合成有机化合物的原料，如Mg2＋是叶绿素的必需成分、P是合成核苷酸的原料 合成某些具有特殊生理功能的物质的原料，如Fe2＋是血红蛋白的重要成分 维持细胞的酸碱平衡，如红细胞中的K2HPO4/KH2PO4、HCO－3/H2CO3 1．生物界和非生物界在元素组成的种类和含量上都相同。( ) 2．Ca、Mg、Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等是组成细胞的微量元素。( ) 3．某些无机盐是细胞内一些大分子物质的组成成分，如Fe2＋参与血红蛋白的构成，Mg2＋参与叶绿素的形成。( ) 4．自由水的作用比结合水的作用大。( ) 5．占细胞鲜重最多的化合物是水，占细胞干重最多的化合物是蛋白质。( ) 6．不同细胞内自由水与结合水的比例基本相同。( ) [答案] 1.×提示：生物界和非生物界在元素组成的种类相同，但含量相差很大。 2．×提示：Ca、Mg是组成细胞的大量元素。 3．√ 4．×提示：自由水、结合水的作用都非常大。
生物农药的种类及使用 目前国内生物农药的年产量为12万吨，防治面积达2670万公顷，约占农药市场份额的5%。生物农药有效成分登记超过90种，登记产品约3000个，其中抗生素产品约占登记产品总数的70%。生物农药产品约占我国登记农药总数的11%～13%。 一、生物农药的种类 1．微生物农药品种
3．植物源农药品种
4．抗生素类农药品种
5．天敌生物类农药品种 赤眼蜂和平腹小蜂产品在我国已登记并商品化，登记产品4种，主要是杀虫卵卡、杀虫卵袋。主要天敌产品有：赤眼蜂、平腹小蜂等。 二、生物农药如何使用？ 1．微生物农药 掌握温度微生物农药的活性与温度直接相关，使用环境的适宜温度应当在15℃以上，30℃以下。低于适宜温度，所喷施的生物农药，在害虫体内的繁殖速度缓慢，而且也难以发挥作用，导致产品药效不好。通常，微生物农药在20～30℃条件下防治效果比在10～15℃间高出1～2倍。
把握湿度微生物农药的活性与湿度密切相关。农田环境湿度越大，药效越明显，粉状微生物农药更是如此。最好在早晚露水未干时施药，使微生物快速繁殖，起到更好的防治效果。 避免强光紫外线对微生物农药有致命的杀伤作用，在阳光直射30和60min，微生物死亡率可达到50%和80%以上。最好选择阴天或傍晚施药。 避免雨水冲刷喷施后遇到小雨，有利于微生物农药中活性组织的繁殖，不会影响药效。但暴雨会将农作物上喷施的药液冲刷掉，影响防治效果。要根据当地天气预报，适时施药，避开大雨和暴雨，以确保杀虫效果。 另外，病毒类微生物农药专一性强，一般只对一种害虫起作用，对其他害虫完全没有作用，如小菜蛾颗粒体病毒只能用于防治小菜蛾。使用前要先调查田间虫害发生情况，根据虫害发生情况合理安排防治时期，适时用药。 2．植物源农药 预防为主发现病虫害及时用药，不要等病虫害大发生时才防治。植物源农药药效一般比化学农药慢，用药后病虫害不会立即见效，施药时间应较化学农药提前2～3天，而且一般用后2～3天才能观察到其防效。 与其他手段配合使用病虫害危害严重时，应当首先使用化学农药尽快降低病虫害的数量、控制蔓延趋势，再配合使用植物源农药，实行综合治理。 避免雨天施药植物源农药不耐雨水冲刷，施药后,遇雨应当补施。 3．生物化学农药 生物化学农药是通过调节或干扰植物（或害虫）的行为，达到施药目的。
哈茨木霉菌使用技术明白纸 一、产品特点：哈茨木霉菌是微生物类杀菌剂，其本身是一种真菌，作用机制是以菌治菌，具有保护和治疗双重作用，对蔬菜作物安全，无药害，无残留。不仅能增强作物抗病性，还能促进作物生长，提高产品品质，增产增收。 二、防治对象：对多种真菌性病害有很好的控制作用，如黄瓜、番茄、辣椒等作物霜霉病、灰霉病、根腐病、猝倒病、立枯病、白绢病、疫病，大白菜霜霉病，葡萄灰霉病等。 三、使用要点 ●该产品可以喷雾、灌根、拌种。应在阴天或下午喷雾，避免施药后阳光直晒导致药效减弱。根 据病情和药效，每隔7-10天喷1次，连喷2-3次。施药后8小时内遇雨应补喷。 ●灌根可用于防治根腐病、白绢病等根部病害。施药时，为防止阳光直射造成菌体活力降低，使 药液与根部接触、吸附土壤，可先在病株周围挖穴，药液渗入后及时覆土。 ●拌种可用于防治立枯病、猝倒病、白绢病、根腐病、疫病等。常用药量一般是种子重量的5%-10%。 为了增加药剂在种子上的附着，可先向种子喷少量水再搅拌均匀，使每粒种子都湿润，然后倒入药粉，再均匀搅拌，使种子表面都附着上药粉，然后播种。如果是催了芽的种子，因本身湿度大，附着药粉性能更好。 ●不能与碱性农药（如氢氧化铜、波尔多液，石硫合剂等）混用。配药时要充分搅拌均匀。存放 于阴凉干燥处，避免受潮和光线照射。 四、登记防治对象和使用方法（具体使用剂量以实际产品为准）
枯草芽孢杆菌使用技术明白纸 一、产品特点： 枯草芽孢杆菌是微生物制剂，其本身是一种细菌，主要用于白粉病、灰霉病、枯萎病、软腐病等病害的防治。具有预防和治疗作用，喷洒在作物叶片上后，其活芽孢利用叶片上的营养和水分在叶片上繁殖，迅速占领整个叶片表面，同时分泌具有杀菌作用的活性物，达到有效排斥、抑制和杀灭病菌的作用。 二、使用要点： ?在病害初期或发病前施药，使用前要充分摇匀，施药时注意使药液均匀喷施至作物各部位。 ?请勿在强阳光下喷雾，晴天傍晚或阴天全天用药效果好。大风天或预计1小时内降雨不施药。?不能与碱性农药（如氢氧化铜、波尔多液，石硫合剂等）、乙蒜素和链霉素等杀菌剂混用，保质期1年。 ?应密封避光，低温15℃储藏； 三、登记防治对象和使用方法（具体使用剂量以实际产品为准）
常用生物农药种类及施用技术1、常用生物农药种类 （1） B.t乳剂。乳化性能好，杀虫谱广。主要防治对象有松毛虫、槐尺蠖、黄杨绢野螟、槐叶柄小卷蛾、茶毛虫等。B.t乳剂是一种胃毒剂，害虫食后能产生一种特殊的酶，这种酶可以分解昆虫肠道中的1种蛋白质，使害虫肠道穿孔，肠道里的东西流入体腔，最后得败血症死亡。使用时应掌握气温15℃以上，一般以20℃为适宜，施用时间应比施用化学农药提前2～3天。 （2）青虫菌和杀螟杆菌。青虫菌可防治槐尺蠖。杀螟杆菌用于防治黄杨绢野螟，还能防治苍蝇、蚊子、黏虫、松毛虫、白蚁等害虫。 （3）白僵菌。对防治松毛虫和水稻害虫黑尾叶蝉有特效。白僵菌液接触害虫后，通过体壁进入害虫体内，很快萌发菌丝，吸收害虫体液，使害虫变僵发硬而死。 （4）井冈霉素。可防治某些真菌引起的植物病害，如花卉苗期立枯病。有效期长达15～20天，耐雨水冲刷，对人畜安全无毒。 （5）农用抗菌素。生产上应用的抗菌素有春雷霉素、庆丰霉素、多抗霉素、土霉素、灰黄霉素、放线菌酮链霉素等。如农抗120是一种新型的农用抗生素，对植物白粉病具有很好的防治效果。 2、高效施用技术 （1）看天生物农药从喷洒于植物上到昆虫取食或接触菌体需要一定的时间，而从害虫取食到死亡也需要一个过程，在这一时期易受外界影响，其中影响最大的因素是温度、湿度、光照和风。在施用时应尽量避开强光，如下午4：00以后使用效果较好；在微风下施用粉剂，作用效果最佳。 （2）看地生物杀虫剂在所需的最佳条件时，才能发挥作用。一方面在干旱地区要加大喷药用水量，造成一种高湿环境，易于微生物孢子的存活和繁殖；另一方面可在制剂中加入一些特定的高分子物质和增加溶液粘度的物质，如淀粉渤物骨胶、草木灰浸出液等，避免快速干燥，从而提高生物农药的使用效果。 （3）看虫害虫各个发育阶段对生物杀虫剂的抵抗力不同，如菜青虫一生可分为卵、幼虫、蛹、蛾4个发育阶段，卵期有卵壳保护，蛹期有蛹体保护，老龄幼虫又有较厚蜡质层保护，而成虫有翅可飞行。因此，只有选择低龄幼虫期施药，才能充分发挥生物农药的效果。另外还要根据害虫取食特点使用不同类型的生物杀虫剂，如B.t对鳞翅目害虫效果很好，喷洒后分布于植物表面，使害虫取食或触药死亡，但对刺吸汁液的害虫（如螨类）无效：阿维菌素对螨作用效果非常好。 （4）看机械生物农药生产成本高，应优化用药技术。使用高性能喷洒机械势在必行，如采用弥雾法喷施，与扇形空气喷口配套的液压
高中生物1.1水和无机盐是构成细胞的重要无机化合物同步练习（1）（含 解析）浙科版必修1 1．比较小麦和家兔体内的各种化学元素( ) A．种类和含量都相差很大 B．种类和含量都相差不大 C．种差相差很大，其中相同元素的含量都大体相同 D．种类大体相同，其中相同元素的含量大都相差很大 【答案】D 【解析】 A、小麦和家兔体内的各种化学元素的种类大体相同，A错误； B、小麦和家兔体内的各种化学元素的含量相差较大，B错误； C、小麦和家兔体内的各种化学元素的种类大体相同，而含量相差较大，C错误； D、小麦和家兔体内的各种化学元素的种类大体相同，其中相同元素的含量不一定相同，可能存在较大差异，D正确． 2．在探索外星空间是否存在生命的过程中，科学家始终把寻找水作为最关键的一环，这是因为水在生命中的意义主要是( ) A．水可以在生物体内流动 B．水是生命的最重要成分 C．细胞内的生物化学反应都是在水中进行 D．水在细胞中含量最多 【答案】B 【解析】谁在细胞中有两种存在形式：自由水和结合水，水是生命之源，生物体的生命活动离不开水，水对生物最重要的作用即生化反应都必须浸润在以水为主要成分的液体环境中进行，故在探索外形空间是否存在生命的过程中，科学家始终把寻找水作为关键的一环。 3．下列两表是一组生物体含水量和人体组织、器官的含水量。从表中数据分析，可得到的正确结论是( )
①构成生物体的成分中水的含量最多②生物体的含水量与生物的生活环境密切相关③代谢旺盛的组织器官含水量较高④组织器官的形态结构差异与水的存在形式相关( ) A．①④B．②③C．①③④D．①②③④ 【答案】D 【解析】 ①由表1可知，构成生物体的成分中水的含量最多，①正确； ②由表1可知，水生生物的含水量高于陆生生物，说明生物体的含水量与其生活环境密切相关，②正确； ③由表2可知，代谢旺盛的组织或器官中含水量较多，③正确； ④由表2可知，血液和心脏的含水量相差无几，但心脏呈固态，而血液呈液态，说明组织或器官的形态差异与水的存在形式相关，④正确． 4. 下列有关细胞中无机物的说法正确的是( ) A．无机物就是无机盐 B．每种无机物的含量都很高 C．无机盐在生物体内含量一般为60%～90% D．无机盐多数以离子的形式存在 【答案】D 【解析】无机盐的存在形式多数为离子。 5. 乳酸亚铁口服液可以有效的治疗人类缺铁性贫血症，这是因为其中的Fe2+进入人体后能( ) A．构成红细胞中的血红蛋白 B．调节血液的渗透压 C．调节血液的酸碱平衡 D．促使更多红细胞的产生 【答案】A 【解析】 Fe2+是血红蛋白的成分，缺铁会影响血红蛋白的合成从而表现出缺铁性贫血症． A、Fe2+是血红蛋白的成分，“朴雪”乳酸亚铁进入人体后能构成红细胞中的血红蛋白，B正确； B、血液渗透压主要由血浆蛋白和钠离子和氯离子维持，C错误； C、调节血浆酸碱平衡是血浆中缓冲物质的作用，不是铁离子的作用，A错误； D、Fe2+进入人体后参与血红蛋白的合成，不能促进红细胞的产生，D错误． 6. 下列关于水的叙述正确的是 ( ) A．细胞代谢加强，细胞内的结合水与自由水的比值升高 B．秋初收获的种子在晒场上丢失的水分主要为自由水其次是结合水 C．在细胞内充当良好溶剂和参与生化反应的水分为自由水
高一生物苏教版必修1课时作业2.1 细胞中的元素和无机化合物 第一节细胞中的元素和无机化合物 目标导航 1.结合材料P8～9，举例说出组成细胞的元素。2.结合教材P9～10，举例说出细胞中无机化合物的功能、存在形式和作用。 一、组成细胞的元素(阅读P8～9) 1.元素的种类 (1)按与生命的关系，可以分为必需元素和非必需元素。缺乏必需元素可能导致疾病。 (2)按含量的多少，必需元素分为大量元素和微量元素。其中大量元素有C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg等，微量元素有Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等。微量元素虽含量少，作用却很大。 2.不同种类生物体内所含的元素种类基本相同，但是每种元素的含量却有多有少。 3.一些山区居民患有克山病，该病与缺硒有明显关系。 二、细胞中的无机化合物(阅读P9～10) 1.细胞中的化合物 (1)种类 ①无机化合物：水和无机盐。 ②有机化合物：糖类、脂质、蛋白质和核酸。 (2)含量 ①含量最多的化合物是水。 ②含量仅次于水的化合物是蛋白质。 ③有机化合物中含量最多的是蛋白质。
2.细胞中的水 在活细胞中，含量最多的物质是水，一切细胞都是生活在水环境中的。 (1)结合水：其与细胞内的其他物质相结合，是组成细胞结构的重要成分。其在休眠的种子、越冬的植物、生活在干旱和盐渍条件下的植物的细胞中含量较多，使得它们抵抗不良环境的能力增强。 (2)自由水 ①自由水可以自由流动，是细胞内的良好溶剂。 ②自由水可作为细胞中几乎所有的生物化学反应的介质，有的直接还作为反应物参与生物化学反应。 ③生物体内的各种物质只有溶解在水中，才能运送到各个细胞并被其吸收和利用，自由水还能将细胞代谢废物排出体外。 3.细胞中的无机盐 无机盐在细胞中常以离子形式存在，虽然含量比较少，但在生物体的生命活动中却不可缺少。生物体内的无机盐过多或过少，均会影响其生命活动，例如血液中的钙离子缺少时，会发生肌肉抽搐现象，而血钙过高时又会出现肌肉乏力现象。 一、组成细胞和生物体的元素 1.组成细胞和生物体的元素 (1)种类 细胞中最常见的化学元素有20多种。 (2)各种元素的归属范围
湖南人文科技学院教案本 课程名称：生物农药（理论） 授课班级： 2012级生物技术、农学 教师姓名：谭显胜 编号时间：2014.3
课程名称生物农药 使用教材生物农药 主编洪华珠,喻子牛,李增智主编 出版社华中师范大学出版社出版（修订）时间2010年3月 专业班级2012级生物技术、农学 授课时数总 36 课时；理论： 24 课时；实践： 12 课时；其它：0课时授课教师谭显胜 授课时间 2013 至 2014 学年度第二学期 主要参考文献 1、《生物农药》沈寅初,张一宾编著，高新技术科普丛书，北京-化学工业出版社 2000.11 ，7-5025-3156-4 2、《生物农药及其应用》曹挥编著，中国社会出版社，2006.09，7-5087-1180-7 3、《生物农药及其应用》吴文君, 高希武主编，北京-化学工业出版社2004.9， 7-5025-5804-7 4、《生物农药及其应用技术问答》魏艳敏主编，北京-中国农业大学出版社2007.3， 978-7-81117-185-3
课题绪论 目的要求掌握生物农药的含义、分类和主要特点。了解生物农药发展的历史, 理解生物农药在农业生产中的重要地位、作用以及发展的必然性。 教学重点生物农药的概念、特点和分类，生物农药的研究进展状况以及在农业生产中的应用及重要性。 教学难点无 教学课时2个学时 教学方法PowerPoint 、讨论 教学内容与步骤第一节生物农药概述 一、定义和范围 1．定义 农药：即杀虫剂，系指用于防治危害农林牧业生产和卫生上的有害生物（如害虫、害螨、线虫、病原菌、杂草及鼠类等）与调节植物生长的药剂。农药按其来源，可分为矿物（源）农药、化学合成农药以及生物（源）农药。 生物农药：指用生物活体、或生物代谢过程产生的具有生物活性的物质、或从生物体中提取的物质，防治农林作物病虫草鼠害，并可以制成商品上市流通的制剂。 2．研究范围 当前，生物农药应用相当成功的例子是微生物农药，包括病毒、细菌、真菌等。由于微生物农药可以用发酵的方法大规模生产，并研制成不同的剂型，因此成为生物农药应用量最大的一类，其重要性日益突出，应用范围越来越广。 二、生物农药的特点 1. 与化学农药相比具有的优点 1.1 对病虫害防治效果好，而对人畜安全无毒，不污染环境，无残留 1.2 对病虫害特异性强，不杀伤害虫的天敌和有益生物，能保护生态平衡 1.3 生产原料和有效成分属于天然产物，能保证可持续发展 1.4 可用现代生物技术手段对产生菌及其发酵工艺进行改造，不断改进性能和提高品质 1.5 由多种因素和成分发挥作用，害虫和病菌难以产生抗药性 2. 不同生物农药具有的一般特点 2.1 环境相容性 环境相容性是指农药对非标把生物（non-target organism）的毒性低，影响小，在大气、土壤、水体、作物中易于分解，无残留影响。 2.2 不易产生抗药性 大多数生物农药作用成分和作用机理复杂，病虫草鼠害对他们的抗药性发展很慢。特别是活体生物农药，其活性生物在与植物病原体、害虫长期共存生活的过
微生物检测手段及注意事项
微生物检测手段及注意事项 微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而
测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 1. 微生物计量法 1.1 体积测量法 又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10 mL）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5 min）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法 可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
生物农药使用的五大禁忌 据调查，在我国生物农药主要应用于经济作物区和有机绿色种植项目，大田粮食作物很少有农户选择。生物农药又称天然农药，系指非化学合成，来自天然的化学物质或生命体，而具有杀菌农药和杀虫农药的作用。近些年随着绿色有机农业的发展扩大，使得生物农药的需求逐渐上扬。有关专家预测：在未来数年内，化学农药的预估市场成长率约为2%，而生物农药则为10%到15%。 生物农药是利用生物活体或其代谢产物对害虫、病菌、杂草、线虫、鼠类等有害生物进行防治的一类农药制剂，或者是通过仿生合成具有特异作用的农药制剂。 我国生物农药按照其成分和来源可分为微生物活体农药、微生物代谢产物农药、植物源农药、动物源农药四个部分。同化学农药一样，按照防治对象生物农药可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀螨剂、杀
鼠剂、植物生长调节剂等。 在使用时一定要格外注意几点，温度、湿度、光照、雨水以及一些化学药剂。 温度。生物农药使用温度建议在20℃以上。有实验证明在20到30℃的条件下，生物农药的防治效果比在10到15℃的时候高出1到2倍 湿度。农田环境湿度越大，药效越明显，特别是粉状生物农药更是如此。因此，生物农药在雨后阴天或早晚露水未干的时候使用效果好，在蔬菜、瓜果等食用农产品上使用时，务必使药剂能很好地粘附在茎叶上，使芽孢快速繁殖，害虫只要一食到叶子，立即产生药效，起到很好的防治效果。
光照。尤其是微生物农药为芽孢杆菌类物质，活性物质，太阳光中的紫外线对芽孢有着致命的杀伤作用。因此，为了确保用药效果一定要避免强的太阳光，增强芽孢活力，发挥芽孢治虫效果。这点与微生物肥料的使用禁忌相同。 雨水。生物农药要避免雨天施药。尤其植物源生物农药不耐雨水冲刷，施药后遇雨应当补施。 避免与一些化学药剂混合使用。化学杀菌杀虫剂农药对生物农药真菌、细菌孢子、菌丝、芽孢生长有抑制损害作用。特别是有机磷类抑制真菌菌丝生长及孢子发育达90％。如块状耳霉菌，作为一种真菌杀虫剂，药效是通过块状耳霉菌的活孢子作用来实现的。施用后活孢子侵染蚜虫并致死，可持续传染，引起群体大量死亡。但作为一种活体真菌，如果与化学杀虫杀菌剂混用，主导作用物质被致死，自然就失去作用。 所以在使用生物农药时一定要格外注意。（河北农粮网）
第二章第1节细胞中的元素和化合物 一、教材分析 《细胞中的元素和化合物》这一节，首先在节的引言中，明确指出自然界的生物体中的元素是生物有选择地从无机自然界中获得的，没有一种元素是细胞特有的。但细胞与非生物相比，各元素的含量又大不相同。说明生物界与非生物界的统一性和差异性内容。这部分内容较为浅显，但是结论非常重要，对于学生了解生物的物质性具有重要意义。 关于组成生物体的化学元素的内容，一开始就指出组成生物体的化学元素主要有20多种，紧接着以人体细胞为例，将含量较多的化学元素以及各种元素的含量制成图形。通过对图形内容的分析，概括出两点：一是组成人体的基本元素是C、O、H、N；二是组成生物体的各种化学元素，在不同的生物体内，含量相差很大，由此进一步说明了大量元素和微量元素的概念和种类。并且强调指出在大量元素中，C是最基本的元素。 关于组成细胞的化合物，首先说明组成生物体的化学元素进一步组成多种多样的化合物，接着指出组成细胞化合物的种类及各种化合物的质量分数，从而说明它是生物体结构和生命活动的物质基础。 二、教学目标 1.知识目标 （1）知道组成细胞的主要元素；知道为什么碳元素是构成细胞的基本元素。（2）学会检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的方法。 2.能力目标 （1）通过对C元素的分析，说明有机化合物形成的可能性及必然性，初步培养学生跨学科综合分析问题的能力。 （2）通过对组成细胞中的元素的百分比的分析，通过对不同化合物的质量分数的学习，培养学生理解、思考和分析问题的能力。 3.情感态度与价值观（1）认同生命的物质性。 （2）认同生物界在物质组成上的统一性。 三、教学重点难点 重点：1.组成细胞的主要元素和化合物。
生物农药使用注意事项 这些年来，生物农药在我们日常生活中已经逐渐取代了一些化学农药而用于种植生产中。相对于化学农药来说，生物农药不会对人畜造成危害，对农产的产量质量也更有保障。不过我们在使用生物农药的时候也是有很多地方需要注意的。那么小编下面就为大家带来了生物农药使用注意事项，一起来看看吧！ 1、注意温度 温度是我们在使用生物农药时需要着重注意的。因为大部分时生物农药中，其活性成分都主要是通过有蛋白质晶体以及芽孢组成的。而如果温度过低的话，那么芽孢在害虫中的繁殖速度将会明显下降，同时还会抑制蛋白质晶体的作用。也有过专门的调查显示，在大约28度左右的温度中使用生物农药的话，那么其药效大约要比15度的温度下高出两倍左右。
2、注意湿度 除了温度之外，湿度也是需要我我们多多注意的。生物农药中的微生物一般都是喜欢生长在一个较为湿润的环境中的。所以我们在使用生物农药的时候，田间湿度的保持是非常重要的。特别是在喷洒粉状生物农药的时候，更要适当提高田间施入。所以我们在喷洒生物农药时，最好时能够在早晚进行。因为这个时候田间都是有露水的，能够保证菌剂良好的黏在作物上，促进芽孢的繁殖，提高农药效果。
3、注意光照 生物农药的药效与光照也是有着直接联系的。阳光中的紫外线对芽孢有着非常强的杀伤作用。如果生物农药暴露在阳光下半小时的话，那么其中芽孢的死亡率便可达到将近一半。而如果被阳光直射超出一小时的话，芽孢死亡高达80%。除此之外，伴孢晶体如果受到紫外线的辐射的话，那么还会降低药效。所以我们一定要注意不可在阳光下使用生物农药，同时这也是为什么要在早晚使用生物农药的主要原因之一。
配餐作业(二) 细胞中的元素及无机化合物 1．(2018·浙江衢州、丽水、湖州、舟山四市联考)小A同学的血常规检验报告显示血红蛋白含量偏低，这可能是因为她体内缺乏( ) A．Na＋B．Fe2＋ C．Mg2＋D．Ca2＋ 解析Fe2＋是合成血红蛋白的原料。若某人血红蛋白含量偏低，则可能是因为其体内缺乏Fe2＋，B正确。 答案 B 2．电影《侏罗纪公园》中恐龙是霸主动物，可是恐龙已经灭绝了。请你推测，在组成恐龙的细胞的各种元素中，含量最多的四种元素是( ) A．C、O、Ca、K B．C、H、O、N C．O、C、N、P D．C、H、O、P 解析组成细胞的各种元素中含量最多的四种分别是C、H、O、N。 答案 B 3．如图表示人体细胞中四种主要元素占细胞鲜重的百分比，其中表示碳元素的是( ) A．甲B．乙 C．丙D．丁 解析细胞鲜重水含量最多，氧元素最多，其次是C、H、N、P、S元素。 答案 B 4.如图所示为组成人体细胞的主要的元素及其比例。下列相关叙述中，错误的是( ) A．图中所示为细胞鲜重中主要的元素的所占比例 B．因为O的含量最多，所以O是构成有机物的最基本元素 C．细胞失去大部分水分后，C的所占比例最大 D．图中所示的元素在非生物界也可以找到 解析题图中O的所占比例最大，细胞中的O主要来自于水，所以题图所示为细胞鲜重
中主要的元素的所占比例，A正确；O含量最多是因为细胞中水含量最多，不能说明O是构成有机物的最基本元素，B错误；细胞失去大部分水分后，有机物的所占比例增大，在有机物中，C的所占比例最大，C正确；组成生物体的化学元素在非生物界都可以找到，D正确。 答案 B 5．微量元素在生物体内含量虽然很少，却是维持正常生命活动不可缺少的。这可通过下面的哪一实例得到证实( ) A．缺镁时叶片变黄 B．油菜缺硼时只开花不结果 C．动物血液中钙盐的含量太低会抽搐 D．缺磷会影响ATP的合成 解析本题考查组成细胞的元素，属于考纲分析判断层次，难度较小。镁、钙、磷等都属于大量元素；硼属于微量元素，硼能促进花粉管萌发，缺硼导致“花而不实”。 答案 B 6．下列有关细胞中的元素和无机化合物的叙述，正确的是( ) A．细胞中常见的化学元素有20多种，根据作用的大小分为大量元素和微量元素 B．组成人体细胞的主要元素中，因水的含量多，故O的含量(占细胞鲜重的百分)最多，H次之 C．生物体在不同的生长发育期，含水量也不同，如同种植物萌发种子的含水量比休眠种子的含水量高 D．许多种无机盐对于维持细胞和生物体的生命活动有重要作用，如哺乳动物的血钙太低，会出现肌无力症状 解析大量元素和微量元素是根据含量划分的，A错误；组成人体细胞的主要元素中含量最多的是O，其次是C，B错误；生物体含水量与生物种类、器官种类、生长发育时期等因素有关，萌发种子代谢活跃，其含水量比休眠种子高，C正确；哺乳动物的血钙太低，会出现抽搐等症状，D错误。 答案 C 7．鉴定可溶性还原糖、蛋白质、脂肪，观察DNA、RNA在细胞中的分布，下列所用实验材料均较合理的一组是( ) A．韭菜叶、豆浆、大豆、洋葱鳞片叶内表皮 B．梨、鸡蛋清、花生子叶、口腔上皮细胞 C．苹果、花生子叶、大豆、洋葱鳞片叶外表皮 D．番茄、豆浆、花生子叶、人口腔上皮细胞 解析做物质鉴定实验时，选择实验材料要把握两个原则：一是相应物质的含量丰富；二是材料本身是无色或接近白色，防止材料本身的颜色对实验结果造成干扰。鉴定还原糖时
微生物快速检测方法及应用进展 随着人们生活水平不断提高，各种安全问题越来越受到人们的重视，微生物的污染问题也相应地备受关注。在食品和环境等各个方面都有微生物污染的可能，一旦污染，微生物将大量繁殖而导致食源性疾病或环境污染甚至医院内感染。特别是近年来随着环境污染的加剧和生态平衡的不断破坏，导致感染的致病菌的种类越来越多，病原微生物对人类的威胁越来越大。传统的检验方法，主要包括形态检查和生化方法，其准确性、灵敏性均较高，但涉及的实验较多、操作烦琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重，而且要有大量人员参与［1，2］。所以，迫切需要准确、省时、省力和省成本的快速检验方法。本文对微生物快速检测方法的进展情况及实际应用进行综述，以利于预防食源性疾病及公共卫生突发事件的发生。 1 即用型纸片法 3M公司的perrifilmTMPlate系列微生物测试片，可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、霉菌和酵母计数［3］。由RCP Scientific Inc 公司开发上市的Regdigel系列，除上述项目外还有检测乳杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌的产品［4］，这两个系列的产品与传统检测方法之间的相关性非常好。如用大肠菌群快检纸片检测餐具的表面，操作简便、快速、省料，特异性和敏感性与发酵法符合率高，已经被列为国标方法。使用时应正确掌握操作技术和判断标准，从而达到理想的检测效果［5］。美国3M公司生产的PF(Petrifilm)试纸还加入了染色剂、显色剂，增强了菌落的目视效果，而且避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。霉菌快速检验纸片，应用于食品检验中的霉菌具有操作简便，仅需36℃培养，不需要低温设备；快速，仅需2 d就可观察结果，比现在的国家标准检验方法缩短3～5 d，大大提高了工作效率。纸片法与国标法在霉菌检出率上差异无统计学意义，且菌落典型，易判定。纸片荧光法利用细菌产生某些代谢酶或代谢产物的特点而建立的一种酶—底物反应法。只需检测食品中大肠菌群、大肠杆菌的有关酶的活性，将荧光产物在365 nm紫外光下观察即可。同时纸片可高压灭菌处理，4℃保存，简化了实验准备、操作和判断［6］。但由于它们价格昂贵，限制了在基层单位的实际应用。 2 生物化学技术 2.1 PCR技术PCR技术采用体外酶促反应合成特异性DNA片段，再通过扩增产物来识别细菌。由于PCR灵敏度高，理论上可以检出一个细菌的拷贝基因，因此在细菌的检测中只需短时间增菌甚至不增菌，即可通过PCR进行筛选，节约了大量时间，但PCR技术也存在一些缺点：食物成分、增菌培养基成分和其他微生物DNA对Taq酶具有抑制作用，可能导致检验结果假阴性；操作过程要求严格，微量的外源性DNA进入PCR后可以引起无限放大产生假阳性结果，扩增过程中有一定的装配误差，会对结果产生影响。由于以上原因，PCR技术对操作者的自身素质要求很高，对于基层单位而言难以做到。短时间内也不会有经济效益和社会效益，因此影响了这项技术在基层的应用。 2.2 基因探针技术基因探针技术利用具有同源性序列的核酸单链在适当条件下互补形成稳 定的或链的原理，采用高度特异性基因片段制备基因探针来识别细菌。基 因探针的优点是减少了基因片段长度多态性所需要分析的条带数。如法国生物一梅里埃公司的 基因探针检测系统，对于分离到的单个菌落，30 min完成微生物的确证试验［7］， 基因探针的缺点是不能鉴定目标菌以外的其他菌。 3 选择、鉴定用培养基法