4.2 蛋白质的提取和分离学案（含答案）
第第14课时课时蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离学习导航
1.阅读教材P7475内容，理解电泳.同工酶和蛋白质组学。
2.结合教材P7375内容，进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。
3.结合教材P7375内容，总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。
重难点击
1.进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。
2.总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。
一
一..电泳电泳..同工酶和蛋白质组学同工酶和蛋白质组学带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。
1电泳1概念带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
2原理带电粒子许多重要的生物大分子，如多肽.核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
迁移动力与方向在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
分离依据电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异
以及分子本身的大小.形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
3常用的电泳方法琼脂糖凝胶电泳在电泳缓冲液和凝胶中加入琼脂糖，蛋白质分子的迁移速率主要取决于其所带净电荷以及分
子的大小和形状等因素。
变性胶电泳在电泳缓冲液和凝胶中加入二烷基硫酸钠SDS变
性剂，蛋白质都变为椭圆形，SDS带有大量的负电荷，掩盖了不同蛋白质的电荷差异，因此变性胶电泳中影响蛋白质的迁移速率的
主要因素是蛋白质分子的大小。
2同工酶同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构.理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。乳酸脱氢酶一般含有5
种同工酶，其相对分子质量相同，但所带电荷不同。
3蛋白质组学蛋白质组学指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质的氨基酸组成分析.立体结构研究和蛋白质的人工合成等。由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生.细胞代谢等过程的整体而全面的认识。蛋白质组学的研究不仅能分析生物体内
蛋白质的组成，还可以揭示各种蛋白质在生物体内的相互作用与
联系。
1从电荷方面思考，适合电泳法分离的各种分子需具备什么条件答案各种分子应带有不同种类和不同量的电荷。
2变性胶电泳分离蛋白质是否依据蛋白质所带电荷的差异为什么答案否。因为SDS能与蛋白质结合，形成蛋白质SDS复合物，SDS所带负电荷的量远大于蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差异，使电泳迁移率完全由蛋白质分子的大小决定。
归纳总结
琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳的两点区别1分离原理不同琼脂糖凝胶电泳依据分子所带电荷的差异和分子大小.形状等。变性胶电泳则完全取决于分子大小，而非电荷性质和分子形状。
2用途不同琼脂糖凝胶电泳广泛应用于核酸的研究中，用于分离大分子核酸。变性胶电泳则广泛应用于分离蛋白质和相对分子质量较小的核酸。
1带电荷的蛋白质在电场中移动的速度主要取决于A所带的电荷多少B蛋白质的分子大小C蛋白质的相对分子质量D蛋白质的分子大小和所带的电荷多少答案D2下列说法中，不正确的是A同工酶催化的化学反应相同，但结构不完全相同B同工酶的相对分子质量一定不同C蛋白质的多样性决定了其功能的多样性D蛋白质组学是21世纪生命科学研究领域新的前沿答案B解析同工酶催化的化学反应相同，但结构不完全相同，乳酸脱氢酶的5种同工酶的相对分子质量是相同的。
特别提醒同工酶存在于生物的同一种属或同一个体的不同组织.甚至同一组织或细胞中。
产生同工酶的主要原因是在进化过程中基因发生变异，而其变异程度尚不足以成为一个新酶。
二
二..乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离下面我们以乳酸脱氢酶同工酶的提取和分离为例，体验蛋白质的提取和分离技术。
1乳酸脱氢酶同工酶的提取1取5g新鲜的动物心脏，漂洗干净后剪碎到预冷的玻璃匀浆器中，加入25mL磷酸提取缓冲液，然后冰浴研磨成匀浆如图1。
2将匀浆收集到冰浴的离心管中，在4条件下12000rpm离心10min。吸取上清液，然后在4条件下保存备用如图2。
2琼脂糖凝胶电泳分离1制备琼脂糖凝胶用TBE电泳缓冲液配制质量分数为1的琼脂糖凝胶，加热溶解后混匀，缓慢倒入胶床中，插入适当的梳子，室温冷却至凝胶凝固。拔出梳子，将凝胶放入电泳槽中，然后向电泳槽中加入适量TBE电泳缓冲液如图3。
2加样取适量同工酶提取液与等量载样缓冲液质量分数40的蔗糖溶液.0.25溴酚蓝混匀，然后取20L加入样品孔内。
3电泳100V条件下进行电泳约30min。
4染色当溴酚蓝指示剂电泳到凝胶底部时切断电源，取出胶板浸入染色液中，37染色1530min，水洗后观察电泳结果。
3结果分析由图中电泳结果可以看出1每个器官形成了5个条带说明乳酸脱氢酶有5种同工酶。
2LDH2在心脏中含量最高，在骨骼肌中含量最低，说明不同的器官同一种同工酶的含量不同。
3骨骼肌中含量最高的是LDH5，含量最低的是LDH1，说明同一器官不同的同工酶含量不同。
1提取和分离乳酸脱氢酶同工酶过程中为什么要保持酶的活性答案酶作为一类特殊的蛋白质具有生物催化活性，在其提取和分离过程中必须保持其生物活性，这样分离出的酶才有可能用来研究其生化性质及相关功能。
2制备乳酸脱氢酶同工酶提取液的过程中，哪些是为了保持酶活性而采取的措施答案提供必要的缓冲系统，以维持pH的相对稳定，防止破坏其活性；保持低温环境，如将玻璃匀浆器和离心管预冷，低温离心；避免引入其他杂质或变性剂，导致酶变性，如对材料进行漂洗。
3溴酚蓝为什么能作为乳酸脱氢酶同工酶的指示剂答案溴酚蓝能和乳酸脱氢酶同工酶发生特定的反应，形成特殊的蓝紫色产物。
归纳总结1实验步骤概括取材剪碎漂洗匀浆离心制凝胶加样电泳染色冲洗观察。
2实验操作要点所有提取乳酸脱氢酶同工酶用到的器具最好都提前在冰箱中预冷处理，这样能更好地保持酶的活性。
蛋白质样品在上样之前，要与等量载体缓冲液混匀。载样缓冲液中的蔗糖可增加蛋白质样品的比重，防止加样时发生“漂
样”现象；溴酚蓝作为一种电泳前沿指示剂，可据其在凝胶中的迁移距离判断电泳的进行程度。
将蛋白质样品加在电泳槽的负极段的加样孔，因为在碱性缓冲液中带负电荷的蛋白质在外加电场作用下会向正极移动。
3在乳酸脱氢酶同工酶分离过程中，使用缓冲液的作用是A维持溶液浓度不变B维持溶液酸碱度相对稳定C催化蛋白质分离过程顺利完成D无实际意义答案B解析分离蛋白质时加入缓冲液，其原因是缓冲液在一定范围内能抵制外界酸和碱对反应溶液pH的影响，保持pH基本不变。
4下列说法不正确的是A在酶的提取和分离过程中必须保持其生物活性B将心脏研磨成匀浆时要在冰浴下进行，是为了保证酶的活性C载样缓冲液中的溴酚蓝是一种酸碱缓冲物质，维持pH稳定D电泳结果出现了5个条带，说明乳酸脱氢酶有5种同工酶答案C解析酶提取之后要进行一系列活性条件下的研究，因此在酶的提取和分离过程中必须保持其生物活性，将心脏研磨成匀浆时要在冰浴下进行，就是为了保证酶的活性。载样缓冲液中的溴酚蓝是一种指示剂，指示酶的迁移位置；电泳结果出现了5个条带说明乳酸脱氢酶有5种同工酶。
特别提醒琼脂糖凝胶电泳的优点1琼脂糖含液体量大，近似自由电泳。
2琼脂糖作为支持体有均匀.区带整齐.分辨率高.重复性好等优点。
3电泳速度快。
4区带易染色，样品易回收，有利于制备。
5操作简单.快速.灵敏。
1下列有关同工酶的概念，描述正确的是A催化相同的化学反应，酶蛋白的分子结构.理化性质不同，电泳行为不同B催化不同的化学反应C催化不同的化学反应，酶蛋白的分子结构.理化性质相同，电泳行为相同D催化相似的化学反应答案A解析同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构.理化性质以及免疫学性质不同的一组酶。
2乳酸脱氢酶有几种同工酶A2B3C4D5答案D解析乳酸脱氢酶的同工酶共有5种。
3下列各项中，除哪项外均为电泳使样品中各分子分离的原因A分子带电性质的差异B分子的大小C分子的形状D分子的变性温度答案D解析电泳是指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。样品分子的带电性质不同.分子的大小和形状不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度，与分子的变性温度无关，故选D项。
4科学家发现蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者的重视。分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的__________.大小及形状不同，在电场中的________不同而实现的分离。
答案电荷带电情况迁移速度解析电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小.形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
苏教版化学必修1专题1第2单元（第1课时） 《物质的分离与提纯》教学设计 一、教学设计思路 化学实验是化学科学的基础之一，与其它自然学科相比，化学与实验的联系应更为紧密，化学原理、定律以及规律的发现都与化学实验密不可分，可以说离开化学就没有这些发现。本单元教学设计重在要让学们在实验中亲身体验化学实验室研究物质的重要方法，从中掌握相关的化学实验操作技能和化学实验方法，并在全课教学中进行启发式教学，通过情境设计、引导学生回忆已有知识对问题进行分析，得出物质分离的几种常用方法，并通过自己设计实验方案达到对知识运用、迁移的能力，这样既能提高学生学习积极性，也能全方位地提高学生的能力。本节课的教学设计安排了大量的实验，为学生的自主探究提供了直接观察和动手操作的平台。 二、学习任务分析 1、《课程标准》、《学科教学指导意见》对本课教学内容的要求 《课程标准》的要求：①初步学会物质分离、提纯等实验技能；②学习必要的化学实验技能，体验和了解化学科学研究的一般过程和方法，认识实验在化学学习和研究中的重要作用；③体验科学探究的过程，学习运用以实验为基础的研究方法；④能够独立或与同学合作完成实验，记录实验现象和数据，完成实验报告，并能主动进行交流。 《学科教学指导意见》的基本要求：了解蒸馏、萃取、分液、过滤、结晶等实验方法。 2、本课内容的组成成分和在模块学习中的地位和作用 （1）本课内容的组成成分 本节教材主要介绍了几种常用的物质分离与提纯的方法，以物质分离的物理方法→化学方法→仪器方法为暗线，首先简单温习了初中已经介绍过的几种物质分离方法：过滤、蒸发、结晶。然后以溴的萃取为例介绍了“萃取”这种分离方法以及分液，又以蒸馏自来水获取少量纯净自来水为例介绍了“蒸馏”，最后以“拓展视野”的形式简单介绍了层析法的发展与应用。 （2）在模块学习中的地位和作用 本节课编排在专题1第二单元《研究物质的实验方法》中，又从化学家要研究一种物质，首先考虑的是怎样从混合物中把这种物质分离出来，怎样提纯这种物质，再进行分析、检测，研究它的结构和组成这样一个科学探究过程入手，因此把本节课作为本单元的第一课时，以化学家研究物质的一般思路来进入物质研究的学习，能引导学生了解物质研究的一般步骤，首先是从物质的分离和提纯开始的，为学生建立起一种科学探究的思维方式，也为之后对物质的检验、溶液的配制等其它实验方法和操作的学习打下基础。化学实验也是高中化学学习的重要内容，学生较系统地学习实验方法旨在强调化学实验的重要性，让学生形成这种意识，这也是新课程教材与传统教材最重要的不同点。 教学重点：过滤、蒸发、结晶、萃取、分液、蒸馏等常用物质分离和提纯的方法 教学难点：萃取、蒸馏操作的掌握及应用
物质的分离与提纯 一、选择题 1．下列分离混合物的操作中，必须加热的是（） A. 过滤B．分液C．结晶D．蒸馏 2．用天然水制取纯度较高的水通常采用的方法是( ) A.煮沸并加入石灰纯碱 B. 加明矾搅拌 C. 进行多次过滤 D.蒸馏 3．现有三组溶液：①汽油和氯化钠溶液②39％的乙醇溶液⑧氯化钠和单质溴的水溶液，分离以上各混合液的正确方法依次是（） A . 分液、萃取、蒸馏 B. 萃取、蒸馏、分液 C . 分液、蒸馏、萃取 D. 蒸馏、萃取、分液 4下列从混合物中分离出其中的一种成分，所采取分离方法正确的是（）A．由于碘在酒精中的溶解度大，所以，可用酒精把碘水中的碘萃取出来。 B．水的沸点是100℃，酒精的沸点是78.5℃，所以，可用加热蒸馏方法使含水酒精变成无水酒精。 C．氯化钠的溶解度随着温度下降而减少，所以，用冷却法从热的含有少量氯化钾浓溶液中得到纯净的氯化钠晶体。 D．在实验室中，通常采用加热氯酸钾和二氧化锰的混合物方法制取氧气。我们可以用溶解、过滤的方法从反应产物中得到二氧化锰。 5．下列化学实验操作或事故处理方法不正确的是（）A．不慎将酸溅到眼中，应立即用水冲洗，边洗边眨眼睛 B．不慎将浓碱溶液沾到皮肤上，要立即用大量水冲洗，然后涂上硼酸 C．酒精灯着火时可用水扑灭 D．配制硫酸溶液时，可先在量筒中加入一定体积的水，再在搅拌条件下慢慢加浓硫酸 6．在“粗盐提纯”的实验中，蒸发时正确的操作是（）A．把浑浊的液体倒人蒸发皿内加热 B．开始析出晶体后用玻璃棒搅拌 C．蒸发时液体不超过蒸发皿容积的1/3
D．蒸发皿中出现大量固体时即停止加热 ＊7．过滤后的食盐水仍含有可溶性的CaCl 2、MgCl2、Na2SO4等杂质，通过如下几个实验步骤，可制得纯净的食盐水：①加入稍过量的Na2CO3溶液；②加入稍过量的NaOH溶液；③加入稍过量的BaCl2 溶液；④滴入稀盐酸至无气泡产生；⑤过滤正确的操作顺序是（）A．③②①⑤④B．①②③⑤④ C．②③①④⑤D．③⑤②①④ 二、填空题 8．粗食盐中除含有钙离子、镁离子、硫酸根离子等可溶性杂质外，还含有泥砂等不溶性杂质。我们食用的精盐是用粗食盐提纯而得到的。通过教材中“粗盐的提纯”及你做过的该实验回答下列问题。 （1）实验室进行NaCl溶液蒸发时，一般有以下操作过程①放置酒精灯； ②固定铁圈位置；③放上蒸发皿（蒸发皿中盛有NaCl溶液）；④加热搅拌;⑤停止加热。其正确的操作顺序为 （2）如何运用最简方法检验溶液中有无SO42－离子？。如果有，应该如何除去SO42－离子？。 （3）在粗盐经过溶解→过滤后的溶液中滴加饱和Na2CO3溶液，直至不再产生沉淀为止。请问这步操作的目的是。 （4）将经过操作（3）后的溶液过滤。请问这一操作能除掉哪些杂质？ 。 （5）实验室里将粗盐制成精盐的过程中，在溶解、过滤、蒸发三个步骤的操作中都要用到玻璃棒，分别说明在这三种情况下使用玻璃棒的目的：溶解时：。 过滤时: 。 蒸发时：。 9．就有关物质的分离回答下面的问题 （1）分离沸点不同但又互溶的液体混合物，常用什么方法？试举例说明。 答：。 （2）在分液漏斗中用一种有机溶剂提取水溶液里的某物质时，静置分
物质的分离、除杂和提纯 北重一中 卜丽玲 【知识疏理】 一、物质的分离和提纯原理 不增 不减、易分 二、物质的分离和提纯方法 （一）、常用的物理方法：利用物质物理性质的不同，采用相应的分离方法。 1. 过滤法：当可溶性物质混入不溶性物质或不溶性物质中混有可溶性物质时，用此法。 如：食盐中混有泥沙，可按如下步骤： ①先将混合物溶于水。 ②过滤。 ③将滤液蒸发得NaCl 。 2. 结晶法：当两种物质都可溶，但溶解度随温度变化差异较大时，用此法。如：KNO 3 中混入NaCl ，可按如下步骤：①溶于水加热，把混合物制成高温下的饱和溶液。②降温结 晶。③过滤。 3. 升华法：当易升华物质与其他物质相混合时，可用此法。如：碘单质中混有砂子，其 操作是：①加热使碘升华，收集碘蒸气。②冷凝，得单质碘。 4. 特殊性质法：利用混合物中某些物质的特性进行物质分离。如：Cu 粉中混有Fe 粉， 可用磁铁吸出铁粉。 （二）、常用的化学方法：化学方法是利用两种物质化学性质的差异，选用合适的试剂，进 行化学反应，然后再用物理方法分离。（关键是转变物质的状态） 1. 沉淀法：即加入一种试剂和杂质反应生成沉淀经过滤而除去。如：HNO 3中混有H 2SO 4， 可加入适量的Ba(NO 3)2溶液： 342342HNO BaSO )NO (Ba SO H +↓=+ 2. 化气法：即加入一种试剂和杂质反应，使其生成气体而除去。如一般某盐中混有少量
碳酸盐、碳酸氢盐等常用此法除去。如NaCl 溶液中混有Na 2CO 3，可加入适量的稀盐酸： ↑++=+2232CO O H NaCl 2HCl 2CO Na 3. 置换法：即在某盐溶液中加入某金属，把盐溶液中的金属置换出来，从而把杂质除去。 如4ZnSO 溶液中混有4CuSO ，可加入过量的锌： Cu ZnSO CuSO Zn 44+=+ 4. 转化法：即通过某种方法，把杂质转化为被提纯的物质。如CO 2气体中混有少量的CO ， 可将混合气体通过盛有足量灼热的CuO 的试管： 2CO Cu CuO CO +?+ 5. 加热法：即通过加热的方法使杂质转化为气体或使杂质分解变成气体而除去。如CuO 中混有少量的木炭粉，可把混合物放在氧气流中加热，使C 转化为CO 2气体而除去： 22CO O C 点燃+ 6. 吸收法：即把混合气体通过某溶液，使其中杂质被吸收。如CO 中混有少量CO 2，可 将混合气体通入足量的NaOH 溶液，CO 2被吸收而除去： O H CO Na NaOH CO 2322+=+ 7. 溶解法：即往混合物中加入某种溶液将杂质溶解而除去。如Cu 里混有少量CuO ，可 往其中加入足量稀硫酸（或盐酸）CuO 溶解过滤而除去： O H CuSO SO H CuO 2442+=+ 三、物质的分离与提纯原则 1、对于物质的提纯和分离，不论用何种方法都应遵循以下原则：①不增：即在除掉杂 质时不增加新杂质。②不减：即被提纯的物质不能减少或改变。③易分：即操作简便易行， 杂质易分离除去，即反应后的生成物必须容易分离(最好是转化为沉淀或气体)。④最佳：即 最好在除去杂质的同时能增加被提纯物质的量。④不污染环境。即要求所选用的除杂方法， 不能产生可污染环境的物质。 2、除杂方法的几个优化原则 （1）若同时有多种方法能除去杂质，要选择那些简单易行、除杂彻底的方法。 （2）应尽量选择既可除去杂质，又可增加保留物质的方法，即“一举两得”。 （3）先考虑物理方法，再用化学方法。
常见物质的分离、提纯和检验 一、物质分离的方法 1.物理分离提纯法 常见的物理分离提纯法有：过滤、结晶（重结晶）、蒸馏（分馏）等。 例：在下列括号中填写适当的物理分离提纯方法。 ①除去石灰水中悬浮的碳酸钙（） ②从自来水中制得蒸馏水（） ③从氯化钠和硝酸钾中提取硝酸钾（） 2.化学方法分离和提纯物质 对物质的分离可一般先用化学方法对物质进行处理，然后再根据混合物的特点用恰当的分离方法进行分离。 用化学方法分离和提纯物质时要注意： 用化学分离和提纯物质时要注意： ①不引入新的杂质； ②不能减少被提纯物质的质量； ③操作简便，试剂价廉，现象明显，易于分离。 对于无机物溶液常用下列方法进行分离和提纯： （1）生成沉淀法： （2）生成气体法： （3）置换法： （4）加热法： 二、物质的除杂方法
三、物质的检验 物质的检验通常有鉴定、鉴别和推断三类，它们的共同点是：依据物质的特殊性质和特征反应，选择适当的试剂和方法，准确观察反应中的明显现象，如颜色的变化、沉淀的生成和溶解、气体的产生和气味、火焰的颜色等，进行判断、推理。 鉴定通常是指对于某一种物质的定性检验，根据物质的化学特性，分别检出阳离子、阴离子，鉴别通常是指对分别存放的两种或两种以上的物质进行定性辨认，可根据一种物质的特性区别于另一种，也可根据几种物质的颜色、气味、溶解性、溶解时的热效应等一般性质的不同加以区别。推断是通过已知实验事实，根据性质分析推求出被检验物质的组成和名称。我们要综合运用化学知识对常见物质进行鉴别和推断。1．常见气体的检验
2．几种重要阳离子的检验 （l）H+ （2）Ba2+ （3）Mg2+ （4）Ag+ （5）NH4+ （6）Fe2+ （7）Cu2+ 3．几种重要的阴离子的检验 （1）OH－ （2）Cl－ （3）SO42－ （4）CO32－ （5）HCO3－ 4．用一种试剂或不用试剂鉴别物质 用一种试剂来鉴别多种物质时，所选用的试剂必须能和被鉴别的物质大多数能发生反应，而且能产生不同的实验现象。常用的鉴别试剂有NaOH溶液、Na2CO3溶液、稀H2SO4、稀HCl 、FeCl3溶液等。 不用其他试剂来鉴别一组物质，一般情况从两个方面考虑： ①利用某些物质的特殊性质（如颜色、气味、溶解性等），首先鉴别出来，然后再用该试剂去鉴别其他物质。 ②采用一种试剂与其他物质相互反应的现象不同，进行综合分析鉴别。 四、典型例题 1、仅用水就能鉴别的一组物质是（） A．乙醇、醋酸、植物油B．食盐、苏打、小苏打 C．大理石、生石灰、胆矾D．氧化铜、二氧化锰、高锰酸钾 2、为了除去粗盐中的Ca2+、Mg2+、SO42-及泥砂，可将粗盐溶于水，然后进行下列五项操作。其中正确的操作顺序是（） ①过滤②加过量的NaOH溶液③加适量盐酸④加过量NaCO3溶液⑤加过量BaCl2溶液 A．①④②⑤③B．④①②⑤③C．②⑤④①③D．⑤②④①③
蛋白质的提取和分离专题训练 一．选择题 1．下列有关蛋白质的提取和分离的操作，其中排序正确的是()。 A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定 2．下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是()。 A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐 B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面 C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱 3．在蛋白质的提取和分离中，下列对样品处理过程的分析正确的是()。 A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的结果 C．洗涤过程选用质量分数0.1%的NaCl溶液(生理盐水) D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质 4．下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是()。 A．可采集猪血作为实验材料B．用蒸馏水重复洗涤红细胞 C．血红蛋白释放后应低速短时间离心 D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液 5．蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列叙述不正确的是()。 A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离 B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质 C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质 D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质 6．凝胶色谱法分离蛋白质时使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG—75)，其中G、75的含义分别是()。 A．G表示凝胶的使用量，75表示加75 g水 B．G表示凝胶的交联程度，75表示需加热75 ℃ C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5 g D．G表示凝胶的膨胀体积，75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm3 7．用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质()。 A．路程较长，移动速度较慢B．路程较长，移动速度较快 C．路程较短，移动速度较慢D．路程较短，移动速度较快 8．下列关于蛋白质提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是()。 A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心 B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌 C．分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心，过滤后，用分液漏斗分离 D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h 9．下列各项中不属于电泳使样品中各分子分离的原因的是()。 A．分子带电性质的差异B．分子的大小C．分子的形状D．分子的变性温度10．下列有关提取和分离血红蛋白的程序叙述错误的是()。 A．样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液 B．通过透析可以去除样品中相对分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取 C．可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化 D．可通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度 11．下列有关蛋白质提取和分离的叙述中，错误的是()。 A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极移动
教版化学必修1专题1第2单元（第1课时） 《物质的分离与提纯》教学设计 一、教学设计思路 化学实验是化学科学的基础之一，与其它自然学科相比，化学与实验的联系应更为紧密，化学原理、定律以及规律的发现都与化学实验密不可分，可以说离开化学就没有这些发现。本单元教学设计重在要让学们在实验中亲身体验化学实验室研究物质的重要方法，从中掌握相关的化学实验操作技能和化学实验方法，并在全课教学中进行启发式教学，通过情境设计、引导学生回忆已有知识对问题进行分析，得出物质分离的几种常用方法，并通过自己设计实验方案达到对知识运用、迁移的能力，这样既能提高学生学习积极性，也能全方位地提高学生的能力。本节课的教学设计安排了大量的实验，为学生的自主探究提供了直接观察和动手操作的平台。 二、学习任务分析 1、《课程标准》、《学科教学指导意见》对本课教学容的要求 《课程标准》的要求：①初步学会物质分离、提纯等实验技能；②学习必要的化学实验技能，体验和了解化学科学研究的一般过程和方法，认识实验在化学学习和研究中的重要作用；③体验科学探究的过程，学习运用以实验为基础的研究方法；④能够独立或与同学合作完成实验，记录实验现象和数据，完成实验报告，并能主动进行交流。 《学科教学指导意见》的基本要求：了解蒸馏、萃取、分液、过滤、结晶等实验方法。 2、本课容的组成成分和在模块学习中的地位和作用 （1）本课容的组成成分 本节教材主要介绍了几种常用的物质分离与提纯的方法，以物质分离的物理方法→化学方法→仪器方法为暗线，首先简单温习了初中已经介绍过的几种物质分离方法：过滤、蒸发、结晶。然后以溴的萃取为例介绍了“萃取”这种分离方法以及分液，又以蒸馏自来水获取少量纯净自来水为例介绍了“蒸馏”，最后以“拓展视野”的形式简单介绍了层析法的发展与应用。 （2）在模块学习中的地位和作用 本节课编排在专题1第二单元《研究物质的实验方法》中，又从化学家要研究一种物质，首先考虑的是怎样从混合物中把这种物质分离出来，怎样提纯这种物质，再进行分析、检测，研究它的结构和组成这样一个科学探究过程入手，因此把本节课作为本单元的第一课时，以化学家研究物质的一般思路来进入物质研究的学习，能引导学生了解物质研究的一般步骤，首先是从物质的分离和提纯开始的，为学生建立起一种科学探究的思维方式，也为之后对物质的检验、溶液的配制等其它实验方法和操作的学习打下基础。化学实验也是高中化学学习的重要容，学生较系统地学习实验方法旨在强调化学实验的重要性，让学生形成这种意识，这也是新课程教材与传统教材最重要的不同点。 教学重点：过滤、蒸发、结晶、萃取、分液、蒸馏等常用物质分离和提纯的方法 教学难点：萃取、蒸馏操作的掌握及应用
《物质的分离与提纯》专题复习学案 一、考点梳理 1、定义：采用适当的方法,除去物质中的少量杂质得到纯物 质的过程。 2、原则：___________________________________________ 3、方法: ①物理方法______________________________________ ②化学方法： _____________________________________
______________________________________ 二、中考链接 1、（2018深圳中考）下列方法不能达到除杂的目的的是（） 选项物质（括号内为杂质）方法 A N2（O2）将混合气体通过灼热铜网 B Fe粉（炭粉）加入足量稀H2SO4充分反应，过滤、洗涤、干燥 C CaO（CaCO3）高温煅烧 D FeCl2溶液（CuCl2）加入足量Fe粉，过滤 2、（2016年广州）下列除杂质所选用的试剂及实验操作均正确的是（） 选项 C.物质（括号内为杂质） D.除杂试剂 E.实验操作 A MnO2（KClO3）水 F.溶解、过滤 B CO2（CO）O2G.点燃 C KCl（KOH）稀H2SO4H.蒸发结晶 D 铁粉（碳粉）稀HCl I.过滤 3、（2017深圳中考）为了达到相应的实验目的，下列实验设计不合理的是（） A．分离H2O2和MnO2制O2后的固液混合物B．除去CO中的CO2气体
C.区分NaCl、NH4NO3、NaOH三种固体D．探究可燃物燃烧的条件 三、方案设计 如何除去NaCl固体中的CaCl2、MgCl2？ 四、实践及应用 通过晾晒海水或煮盐井水、盐湖水等可以蒸发除去水分得到粗盐。粗盐中含有难溶性杂质（泥沙等）和多种可溶性杂质（氯化镁、氯化钙等）。某同学为了提纯粗盐，设计了如下实验方案进行实验。
物质的分离与提纯学案 [学习目标] 1、初步学会过滤、结晶、分液、蒸馏等分离物质的实验技能，能独立完成一些简单的物质分离、提纯的实验操作。 2、初步了解根据混合物的性质，选择不同的分离方法对物质进行分离。 [课前准备] 我们每天所吃的食盐来自于海洋，如何才能从海水中获得纯净的能够供人食用的食盐呢？需要经过什么样的一系列步骤？ [学海导航] 一、物质的分离与提纯 在初中我们学过哪些有关混合物分离的方法？ （一）过滤 1、原理或适用范围： 利用物质的差异，将液体和分 离开来。 2、装置及仪器 使用的仪器有_________、___________、___________、 __________。 3、操作及注意事项 过滤时，将滤纸折叠好放入漏斗，加少量的______，使滤纸紧贴 _____________。滤纸边缘应略________漏斗边缘，加入漏斗中液 体的液面应略__________滤纸边缘。向漏斗中倾倒液体时应用玻璃棒___________，烧杯尖嘴处应与玻璃棒_________，玻璃棒下端应________________，漏斗颈末端应__________________。 4、实例与应用 _____________________________ （二）蒸发 1、原理或适用范围： 一般是通过加热的方法，使________不断挥发，析出________ 的过程。 2、装置及仪器 使用的仪器有_________、___________、___________、 __________。 3、操作及注意事项 蒸发皿可以直接_________，倒入蒸发皿中的液体不得超过其容
24 物质的分离与提纯 【学习目标】 1．弄清含有多种杂质的物质提纯的一般思路。 2．了解物质分离、提纯的原则。 3．依据物质的性质特征，能选择恰当的除杂方法或除杂试剂。 【活动方案】 物质的分离是将混合物中各成分一一分开成为纯净物的过程，而物质的提纯是除去物质中混有杂质的过程。 活动一、体验物质的提纯思路 粗盐中含有的可溶性杂质（如CaC l 2等）和不溶性杂质（泥沙等）。通过提纯可除去粗盐中不溶性杂质和可溶性杂质。过程设计如下： 1．除去氯化钠中的泥沙 2．除去氯化钠中混有的氯化钙 NaCl （CaCl 2）
提纯的原理：利用杂质与被提纯物质的___________和___________的差异，进行提纯。 活动二、感悟物质提纯的原则 为除去氢氧化钠溶液中混有碳酸钠，甲、乙、丙、丁、戊五位同学设计了不同的方案。 通过上述活动的学习，你能说出物质提纯的原则吗？ 活动三、归纳物质提纯的方法 1．请选择合适方法，除去下列各组物质中的杂质（括号内为杂质）： ⑴ NaCl固体（泥沙）：_____ _ ⑵ KNO3（NaCl）： ____ _ ⑶水（色素）：_____ _ ⑷铜粉(铁粉)：_____ _ A活性炭吸附 B磁铁吸引 C溶解、过滤、蒸发 D高温溶解、降温结晶、过滤 2．请选择合适方法或试剂，除去下列各组物质中的杂质（括号内为杂质），写出相关的化学方 程式。 ⑴CaO（CaCO3）___________________________ （2） CuO（Cu） __________________________ 讨论：有同学认为上述两组物质中杂质，都可以通过加入足量稀盐酸而除去，你认为可行吗？ 3．请选择合适方法或试剂，除去下列各组物质中的杂质（括号内为杂质），写出相关的化学方 程式。 （1）C粉（CuO）★（2）Cu（Fe） 思考：上述除杂过程的具体操作顺序是： A过滤 B干燥 C洗涤 D加入过量稀盐酸 4．请选择合适方法或试剂，除去下列各组物质中的杂质（括号内为杂质），写出相关的化学方 程式。 （1）CO2（CO）_________________________（2）CO（CO2）____________________________ 讨论：实验室制取的二氧化碳气体中常有少量氯化氢气体，能否用氢氧化钠溶液来除？为什么？
《物质的检验、分离和提纯》教案 一、教学目标 1．了解常见离子的检验方法，能对常见的物质的组成进行检验和分析； 2．了解常见气体的检验方法； 3．了解过滤、蒸发、萃取、蒸馏等物质分离、提纯的常用方法，能能对常见物质进行分离与提纯； 4．培养学生分析问题和解决问题的能力； 5．培养学生探究知识和使用知识的能力。 二、教学重点 1．常见阳离子、阴离子和气体的检验方法； 2．过滤、蒸馏、萃取、蒸发等基本操作的方法，以及实验过程中的注意事项。 三、教学手段 1．学案 2．多媒体 四、教学方法 讨论、探究、演示、讲授、训练 五、教学过程 [引入]物质的检验、分离与提纯方法属于化学实验的基础与技能，是高考的重点与热点内容之一，主要考点有四个，一是离子的检验，如Fe3+、NH4+等；二是气体的检验，如NH3、SO2等；三是物质分离与提纯的方法，如过滤、蒸馏等；四是综合运用化学知识设计实验方案对离子、气体等混合物进行分离提纯。 [板书]一、物质的检验 [学案]学生根据学案要求学成相关表格内容 [多媒体]师生讨论几种阳离子、几种阴离子和几种气体的检验方法 表格一：常见阳离子的检验
②滴加NaOH溶液②产生红褐色沉淀 NH＋4和碱液共热生成能使湿润的红色石蕊试纸试纸变蓝 表格二：常见阴离子的检验 实验方案实验现象OH－①滴入无色酚酞溶液，溶液变红 Cl－加入硝酸酸化的硝酸银溶液产生白色沉淀 Br－①加入硝酸酸化的硝酸银溶液 ②加入少量新制氯水，用力振荡后，加入 少量四氯化碳，振荡静置， ①产生淡黄色沉淀 ②四氯化碳层显橙色 I－①加入硝酸酸化的硝酸银溶液 ②加入少量新制氯水，用力振荡后，加入 少量四氯化碳，振荡静置， ③加入少量新制氯水，用力振荡后，加入 少量淀粉溶液， ①产生黄色沉淀 ②四氯化碳层显棕黄 色 ③溶液变成蓝色 CO2－3①滴加盐酸后生成使澄清石灰水 ②加CaCl2溶液后①变浑浊 ②产生白色沉淀 SO2－3滴加盐酸后生成气体通入品红溶液 来源学科网ZXXK] 品红溶液褪色 SO2－4先加稀盐酸，没有明显现象，后滴加氯化 钡溶液 产生白色沉淀 表格三：常见气体的检验 实验方案现象 O2用试管或集气瓶取待检气体，然后向试管 或集气瓶中插入带有火星的木条 带火星的木条复燃 H2使待检气体通过尖嘴玻璃导气管并点燃， 在火焰上方罩一个冷而干燥的烧杯 烧杯内有水雾生成 NH3①用湿润的红色石蕊试纸检验试纸变蓝 ②把待检气体收集在集气瓶里，盖上玻璃 片，用玻璃棒蘸取浓盐酸，开启玻璃片插 入瓶中 产生白烟 SO2在洁净试管里加入5 mL品红溶液，再通 入待检气体 品红溶液褪色 CO2通入澄清石灰水中石灰水变浑浊 Cl2用湿润的KI淀粉试纸靠近集气瓶口试纸变蓝 [师生共同探究] [例1] 三位学生设计了下述三个方案，并都认为：如果观察到的现象和自己设计的方案一致，即可确证试液中有SO42-。 方案甲：试液白色沉淀沉淀不溶解
蛋白质的提取与纯化 一，蛋白质的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。 （一）水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸，碘乙酸等）。 下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。 1、pH值 蛋白质，酶是具有等电点的两性电解质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 范围内。用稀酸或稀碱提取时，应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化，从而导致蛋白质构象的不可逆变化，一般来说，碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取，而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。 2、盐浓度 稀浓度可促进蛋白质的溶，称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合，具有保护蛋白质不易变性的优点，因此在提取液中加入少量NaCl等
中性盐，一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。 （二）有机溶剂提取法 一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶，不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂，它们具的一定的亲水性，还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越，一是因为丁醇亲脂性强，特别是溶解磷脂的能力强；二是丁醇兼具亲水性，在溶解度范围内（度为10%，40度为6.6%）不会引起酶的变性失活。另外，丁醇提取法的pH及温度选择范围较广，也适用于动植物及微生物材料。 二、蛋白质的分离纯化 蛋白质的分离纯化方法很多，主要有： （一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法 1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子（如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力，可夺取蛋白质分子的水化层，使之“失水”，于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。盐析时若溶液pH在蛋白质等电点则效果更好。由于各种蛋白质分子颗粒大小、亲水程度不同，故盐析所需的盐浓度也不一样，因此调节混合蛋白质溶液中的中性盐浓度可使各种蛋白质分段沉淀。
专题3 常见物质的分离、除杂、提纯 【复习目标】 1、了解除杂的定义、方法、原则，会应用它除去杂质; 2、了解物质分离、提纯定义、方法，会应用分离、提纯解决问题。 【课时安排】教学安排：2课时 【复习重点和难点】 1、了解除杂的定义、方法、原则，会应用它除去杂质; 2、了解物质分离、提纯定义、方法，会应用分离、提纯解决问题。 【教学过程】 （一）、知识梳理： 物质的分离、除杂和提纯是化学实验中的一个重要环节。所谓分离就是用物理或化学的方法将混合物中的各组分一一分开。分离完成后各组分要保持（经过化学反应使混合物的组分经过转化而分离还要恢复为）原有的物质组成和状态。除杂和提纯是将混合物中的某组分用物理或化学的方法除去而得到纯物质。在提纯物质的过程中除了选择合适的试剂外，还应选择适宜的杂质（或产物），以便于同被提纯物进行分离。 现将有关要点归纳如下： 1、应注意几个“不” ⑴不能“玉石俱焚”。即试剂一般与杂质反应，不与要保留的物质反应。但特殊情况下，所加试剂需要和保留物质反应，但最终要转化成需要保留的物质。如除去FeCl3溶液中的NaCl，可加过量的NaOH溶液→过滤→洗涤→加适量稀盐酸。 ⑵“不增”、“不减”。即不增加新的杂质，不减少要保留的物质。 ⑶不污染环境。即要求所选用的除杂方法，不能产生可污染环境的物质。 ⑷不能“旧貌变新颜”。即除杂结束前，要恢复保留物质的原有状态。 2、除杂方法的几个优化原则 ⑴若同时有多种方法能除去杂质，要选择那些简单易行、除杂彻底的方法。 ⑵应尽量选择既可除去杂质，又可增加保留物质的方法，即“一举两得”。 ⑶先考虑物理方法，再用化学方法。 拓展延伸 一、气体的净化与干燥 1、气体净化的几种方法 ⑴吸收法：用吸收剂将杂质气体吸收除去。如，除去CO中混有的少量CO2，可先用浓NaOH溶液吸收CO2，再用浓硫酸等干燥剂除去水蒸气。 常见气体吸收剂见下表：
物质的分离与提纯 【考纲要求】1．能对常见物质进行分离和提纯。 2．掌握化学实验的基本操作，绘制和识别典型的实验仪器装置图。 【知识网络】一、物质的分离与提纯方法 混合物的物理分离方法 混合物的化学分离法 【易错指津】 1．分离与提纯物质的原则：（1）不引入新的杂质。（2）先简单后复杂，先用物理方法，后用化学方法。（3）注意加入化学物质的先后顺序。（4）注意加入化学试剂量的要求。 2．在解答物质提纯试题时，选择试剂和实验措施应注意三个原则：①不能引入新杂质； ②提纯后的物质成分不变；③实验过程和操作方法简单易行。 3．物质提纯和净化时要注意下列几点：①所加试剂和被提纯的物质不能发生化学反应； ②所选择的反应要具有较大的不可逆性，即反应要完全，为了使杂质能除尽，所加的试剂要稍过量；③加入的试剂以不引入新的杂质为好；④提纯物易分离。 4．有机物的提纯与分离中较多地使用蒸馏（可分馏）、分液等方法，以及物理与化学的综合法。在分离提纯有机物时，常犯的错误是套用无机分离中的反应转化法。例如，除去乙酸乙酯中混有的乙酸，如果采用加入乙醇及催化剂并加热的方法，试图将乙酸加转化为乙酸乙酯，这是适得其反的。其一是加入的试剂难以除去；其二是有机反应缓慢、复杂，副反应
多，该反应是可逆反应，不可能反应到底将乙酸除尽。 【典型例题评析】例1只用水就能鉴别的一组物质是( ) A.苯、乙酸、四氯化碳 B.乙醇、乙醛、乙酸 C.乙醛、乙二醇、硝基苯 D.苯酚、乙醇、甘油 例2提纯含有少量硝酸钡杂质的硝酸钾溶液，可以使用的方法为（） A.加入过量碳酸钠溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸 B.加入过量硫酸钾溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸 C.加入过量硫酸钠溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸 D.加入过量碳酸钾溶液，过滤，除去沉淀，溶液中补加适量硝酸 例3 只用胶头滴管和试管，不用其他试剂就可以区别的下列溶液(浓度均为0.1mol／L)是 ( ) (双选) A.CaCl2和Na2C03 B.稀H2S04和Na2C03 C.Ba(OH)2和NaHC03 D.NaAlO2和盐酸 例4 实验室用溴和苯反应制取溴苯，得到粗溴苯后，要用下列操作精制：①蒸馏；②水洗；③用干燥剂干燥；④用10%NaOH溶液洗；⑤水洗，正确的操作顺序是（） A.①②③④⑤ B.②④⑤③① C.④②③①⑤ D.②④①⑤③练习1．血液属于胶体，透析是除去肾衰竭病人血液中的毒性物质，从而拯救病人生命的重要方法。透析的原理是（）A．蒸发B．电泳C．过滤D．渗析 2．下列各组物质，用一种试剂无法区别 ．．．．的是（）A．三种浓酸：HNO3、H2SO4、HCl B．四种黑色粉末：FeO、Fe、CuO、C C．四种无色溶液：NaCl、NaOH、KOH、KCl D．四种白色粉末：（NH4）2SO4、NH4Cl、Na2SO4、NaCl 3．下列各项实验操作中，正确的是（）A．用氨水洗涤试管内壁上的“银镜” B．只用溴水鉴别苯、CCl4、KI溶液、Na2SO3溶液 C．为加快过滤速度，用玻璃棒搅拌过滤器中的食盐水 D．为迅速除去乙酸乙酯中的少量乙酸，加入足量NaOH溶液并加热 4．在中学化学实验中可用于分离或提纯的方法很多，如蒸馏、结晶、过滤、盐析等，下列各组混合物的分离或提纯选用方法最合适的是（）A．除去AgI胶体中混有的I—离子——（过滤、洗涤、干燥） B．除去苯中含有的少量苯酚——（加入NaOH溶液、分液） C．分离CuSO4·5H2O和BaSO4的混合物——（溶解、过滤） D．除去乙酸乙酯中混有的乙酸杂质——（加入NaOH溶液、分液） 5 甲、乙、丙、丁分别是Al2(SO4)3、FeSO4、NaOH、BaCl2四种物质中的一种。若将丁溶液滴入乙溶液中，发现有白色沉淀生成，继续滴加则沉淀消失，丁溶液滴入甲溶液时，无明显现象发生。据此推断丙物质是（） A.Al2(SO4)3 B.NaOH C.BaCl2 D.FeSO4 6 某溶液含有较多的Na2SO4和少量的Fe2(SO4)3。若用该溶液制取芒硝，可供选择的操作有：①加适量H2SO4溶液，②加金属Na，③结晶，④加过量NaOH溶液，⑤加强热脱结晶水，⑥过滤。正确的操作步骤是（） A.②⑥③ B.④⑥①③ C.④⑥③⑤ D.②⑥①③⑤ 7 在一定条件下，萘可以被硝酸和硫酸的混合酸硝化生成二硝基物，它是1,5-二硝基萘和1,8-二硝基萘的混合物。后者可溶于质量分数大于98%的硫酸，而前者不能。利用这一性质可以将这两种异构体分离。将上述硝化产物加入适量的98.3%的硫酸，充分搅拌，用耐酸漏斗过滤，欲从滤液中得到固体1,8-二硝基萘，应采用的方法是（）
蛋白质的提取和分离 【教学目标】 1．知道蛋白质分离和提取技术的基本原理。 2．能进行血清蛋白的提取和分离。 3．尝试提取和检测牛奶中的酪蛋白。 4．尝试卵清蛋白的分离。 【教学重难点】 1．知道蛋白质分离和提取技术的基本原理。 2．能进行血清蛋白的提取和分离。 【教学过程】 一、蛋白质分离提纯技术 1．将生物体内的蛋白质提取出来并加以分离，就可以得到高纯度的、甚至是单一种类的蛋白质。 2．蛋白质分离提纯技术包括离心技术、层析技术和电泳技术等。其中，电泳技术最为快捷灵敏、简便易行。 二、电泳技术及分离蛋白质的原理 1．电泳现象：带电粒子在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。电泳常用的支持物是聚丙烯酰胺凝胶，由此而来的技术称为聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2．电泳技术分离蛋白质的原理： （1）蛋白质含有游离的氨基和羧基，是两性电解质，在一定pH条件下带有电荷。 （2）蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快；电荷数相同时，分子量越小，则移动越快。 （3）不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹。每一种带纹可能就是一种蛋白质。将这些带纹一个一个地剪下来，分别予以洗脱，然后对洗脱液中的蛋白质做进一步的分离。如果待测洗脱液不能再分离，则这个带纹中很可能含有一种单纯蛋白质。如果待测洗脱液还能再分离，则这个带纹中含有多种蛋白质，需要作进一步分离，直至提纯。 三、血清蛋白的提取和分离 1．新鲜血液在体外凝固后，会析出清亮的淡黄色液体——血清。血清中含有丙种球蛋白、
凝集素等多种蛋白质。 2．过程： （1）点样：取新制血清与蔗糖溶液及溴酚蓝指示剂等体积混匀后，小心加到电泳样品槽的胶面上。 （2）电泳。 （3）染色：取出凝胶，放入质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液中。染色与固定同时进行，使染色液没过胶板，染色30min。 （4）脱色：用体积分数为7%的醋酸溶液浸泡漂洗数次，每隔1~2h更换脱色液，直至底色脱净，背景清晰。 （5）制干胶板：将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡3~4h，然后放在两层透气玻璃纸中间，自然干燥即可获得血清蛋白的电泳谱带。 四、其他蛋白质的提取与分离 1．牛奶中酪蛋白的提取与检测： 当pH=4.8时，酪蛋白的溶解度降低，并析出沉淀。用酒精除去酪蛋白沉淀中的脂肪后，即得到纯的酪蛋白。 酪蛋白中含有酪氨酸，能与米伦试剂起颜色反应，首先生成白色沉淀，加热后变成红色。 2．卵清蛋白质的分离： 选取鸡、鸭、鹅、鹌鹑等动物的新鲜卵清做实验材料。采用电泳法分离卵清蛋白质。 自主思考： 可否利用蛋白质的提取与分离技术快速诊断早期癌变？ 提示：可以。只需从早期患者的尿液、血液或细胞裂解液中提取少量蛋白质样品，采用蛋白质指纹图谱技术，就可以更加快速、简便、准确地对细胞癌变做出诊断。 探究一：蛋白质的分离原理 问题导引： 为年老多病的人注射丙种球蛋白，可以在一定程度上增强其身体的抵抗力。在动物体内，丙种球蛋白和许多蛋白质混在一起。要获得纯净的丙种球蛋白，就必须进行提取和分离。你能提供分离蛋白质的思路吗？ 提示：可根据蛋白质各种特性的差异，如分子的大小、所带电荷的性质和多少等来分离不同种类的蛋白质。 名师精讲： 蛋白质的分离方法：
蛋白质提取与制备具体操作方法 1、原料的选择 早年为了研究的方便，尽量寻找含某种蛋白质丰富的器官从中提取蛋白质。但至目前经常遇到的多是含量低的器官或组织且量也很小，如下丘脑、松果体、细胞膜或内膜等原材料，因而对提取要求更复杂一些。 原料的选择主要依据实验目的定。从工业生产角度考虑，注意选含量高、来源丰富及成 本低的原料。尽量要新鲜原料。但有时这几方面不同时具备。含量丰富但来源困难，或含量 来源均理想，但分离纯化操作繁琐，反而不如含量略低些易于获得纯品者。一般要注意种属 的关系，如鲣的心肌细胞色素C较马的易结晶，马的血红蛋白较牛的易结晶。要事前调查 制备的难易情况。若利用蛋白质的活性，对原料的种属应几乎无影响。如利用胰蛋白酶水解 蛋白质的活性，用猪或牛胰脏均可。但若研究蛋白质自身的性质及结构时，原料的来源种属 必须一定。研究由于病态引起的特殊蛋白质（本斯.琼斯氏蛋白、贫血血红蛋白）时，不但 使用种属一定的原料，而且要取自同一个体的原料。可能时尽量用全年均可采到的原料。对 动物生理状态间的差异（如饥饿时脂肪和糖类相对减少），采收期及产地等因素也要注意。 2、前处理 a、细胞的破碎 材料选定通常要进行处理。要剔除结缔组织及脂肪组织。如不能立即进行实验，则应冷 冻保存。除了提取及胞细外成分，对细胞内及多细胞生物组织中的蛋白质的分离提取均须先 将细胞破碎，使其充分释放到溶液中。不同生物体或同一生物体不同的组织，其细胞破坏难 易不一，使用方法也不完全相同。如动物胰、肝、脑组织一般较柔软，作普通匀浆器磨研即 可，肌肉及心组织较韧，需预先绞碎再制成匀桨。 ⑴机械方法 主要通过机械切力的作用使组织细胞破坏。常用器械有：①高速组织捣碎机（转速可达 10000rpm，具高速转动的锋利的刀片），宜用于动物内脏组织的破碎；②玻璃匀浆器（用两 个磨砂面相互摩擦，将细胞磨碎），适用于少量材料，也可用不锈钢或硬质塑料等，两面间 隔只有十分之几毫米，对细胞破碎程度较高速捣碎机高，机械切力对分子破坏较小。小量的 也可用乳钵与适当的缓冲剂磨碎提取，也可加氧化铝、石英砂及玻璃粉磨细。但在磨细时局 部往往生热导致变性或pH显著变化，尤其用玻璃粉和氧化铝时。磨细剂的吸附也可导致损 失。 ⑵物理方法 主要通过各种物理因素的作用，使组织细胞破碎的方法。
物质的分离与提纯 授课人：侯集中学化学组汪永朋 【学习目标】 1、知识与技能： 初步学会过滤、结晶、萃取、分液、蒸馏等分离物质的实验技能，能独立完成一些简单的物质分离、提纯的实验操作；初步学会设计简单的实验方案。 2、过程与方法： 初步了解根据混合物的性质，选择不同的分离方法对物质进行分离。 3、情感态度与价值观： 结合实际事例讨论遵守实验安全守则的重要性。树立安全意识，初步形成良好的实验工作习惯。 【教学重难点】 分离物质等基本实验技能；设计简单的实验方案。 【教学方法】 实验探究、交流讨论、归纳总结 【教学过程】 【引入】 某化学兴趣小组在实验室中用KClO 3在MnO 2 催化下受热分解制取氧气，为了节约试剂以及防 止污染环境，打算分离回收反应后的KCl和MnO 2 （难溶于水），请你帮助他们设计完善实验方 案。 【方案设计】将混合物溶解在适量水中，并充分______，静置，_____，洗涤滤渣，即得到 MnO 2 ，将滤液___________，可得到KCl晶体。 【归纳总结】过滤：用于难溶性固体与溶剂的分离 操作注意事项：“一贴二低三靠”(请学生上台模拟实验，体现“一贴二低三靠”) 蒸发结晶：用于可溶性固体与溶剂的分离 操作注意事项：1、蒸发皿中的液体不能超过其容积的________。 2、蒸发过程中必须________________，防止局部温度过高而使液体飞溅。 3、当出现大量固体时，应_________用余热蒸干。 【过渡】两种固体，一种可溶于水，另一种不溶，我们就可以利用其溶解性的差异，通过过滤的方法实现分离。若两种物质都能溶解于水，例如硝酸钾与氯化钾，我们如何实现其分离呢？ 【交流讨论】将90℃的KNO 3 浓溶液冷却至室温，会有大量晶体析出，请结合教材P18图1-11解释产生这一现象的原因。 【思考】若是上述溶液的溶质为KCl，仍会有大量晶体析出吗？为什么？ 【问题探讨】现有混有少量氯化钾的硝酸钾粉末，请完善提纯硝酸钾的实验方案。 【方案设计】在________下将混合物溶于水中形成______，然后冷却到一定温度，_______，即可得到纯净的硝酸钾晶体 【归纲总结】在该方案中所使用的方法我们称为降温结晶，适用于_________随______变化有明显差异的可溶性固体混合物的分离。 【拓展思考】若上述提纯的KNO 3 仍含有少量KCl，我们该怎么办？ 【拓展】给出重结晶概念 【过渡】知道了固体混合物常用的分离提纯方法，那么对于液态物质的混合物应该采用哪些