生物等效性实验生物样品处理注意事项
一、样品采集后的的处理和贮存
鉴于生物样本的特点，为了避免样品中被测药物发生分解或产生其他化学变化，取样后最好立即进行分析测定，但实际工作中几乎无法做到，常需将收集到的样品冷藏、冰冻，临用前再融化并放至室温后使用。在样本冷冻贮藏前，需及时进行处理。
1.1血液样本处理注意事项
1.1.1. 在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质(含钾、钠、氯离子)的液体时，建议3小时以后采集静脉血样本进行这些项目的检验，以防止上述检验项目因输液引起的假性升高。
1.1.2保定非麻醉状态的动物时应尽量避免用力挤压动物头颈和胸腹，以免引起血液淤滞，局部组织缺氧，造成血液某些成分的改变，特别是测定乳酸，血液含氧量等指标时。
1.1.3血液中红细胞内外成分有很大差异，溶血可造成红细胞内的物质向细胞外转移，如K+、Mg2＋和某些酶类(LD、AST、ALT、ACP)；另外，溶血还可干扰某些化学项目(TBil、DBil、TC等)的测定，严重影响结果的准确性，血样本应防止溶血。引起溶血的原因有：注射器采血时抽吸力太大；血液与抗凝剂比例失调；混匀样本时过度振荡；注射器或采血容器带水或容器污染；全血放置时间长或突然受冷或受热；注射器中的血沫注入采血容器；真空采血时如未采满至相应刻度，残存负压造成红细胞破裂；不拔针头直接注入采血容器；样本离心时离心力过大等。为避免溶血，取血时应注意：
①、抽拉注射器时应尽量避免注射器内产生大量真空；
②、添加抗凝剂后的容器在除必要干燥流程后应及时密封；
③、混匀样本时避免用力过度，切勿产生泡沫；
④、避免重复使用注射器、针头、采血管、毛细玻璃管等一次性用品，手术刀片和剪刀等器材取材时尽量洗去残留血液；
⑤、采血时的室温应控制在22℃至25℃，采取的血液容器在需要放入冰盒时，切勿紧贴冰袋，冰水；
⑥、当注射器内因吸入空气产生血沫时，注意弃掉血沫，在将血液注入采血容器时勿将血沫一并注入；
⑦、使用真空采血管需抽取负压时切勿过量；
⑧、将血液注入采血容器时要除去针头，轻柔推入；
⑨、离心带有血细胞的血样时，按照规格设定离心参数；
1.1.4. 正确选择采集管。通常情况下多采用血清为样本(不抗凝)，部分检测项目需注意样本属性为血清或血浆，两者不可替代。一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止样本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血样本采集后立即轻轻摇匀至少上下颠倒8次，以防凝血发生。
1.1.5. 多项化验采血顺序：血培养瓶(厌氧瓶优先)→蓝帽管→黑帽管→红/黄帽管→绿帽管→紫帽管→灰帽管→其他。
1.1.6需要冻存的全血按要求分装到统一规格的无菌冻存管中，加入DMSO混合均匀后将冻存管放入4℃冰箱中半小时，再放入-20℃冷冻冰箱中，至少4小时候后，才能转移到-80℃或更低温条件下储存。
1.1.7抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去除杂质再进行检测。
1.2尿液、粪便样本处理注意事项
1.2.1尿液主要是水、尿素、盐类及少量小分子蛋白，是理想的细菌生长液，因此应在取样后立即测定。不能立即测定时，应于4℃冷藏，如在室温保存，则应在采样后的尿液中加入少量防腐剂甲苯（1%）或氯仿（饱和）。
样本留取过程中应避免混有血、脓或阴道分泌物、粪便等可引起“假性蛋白尿”的成分。检测非蛋白类待测物时，可根据试剂盒需求进行蛋白沉降操作（离心/化学沉淀）。
用于一些血液病的样本应注意在留尿前勿对动物进行酒精涂抹、吸入，注射巴比妥类、磺胺类、利眠宁、眠尔通、苯妥英钠等药物，样本应避光保存。
1.2.2粪便样本应尽量使用新鲜样本，采集后立即送检。若样本久置，则会因pH及消化酶等因素而使粪便中生物成分分解破坏。
样本中不可混有尿液，更不可采取浸泡于尿液中的粪便样本。
样本中不可混入垫料、污水等，减少微生物和颗粒造成的影响。
粪便样本不应用卫生纸包裹、手指抓取，应使用棉签，干净的镊子等夹取，直接装入蜡纸盒或EP管并密封，以防水分丢失。
1.3 骨髓样本处理及注意事项
骨髓样本一般通过脊柱穿刺、股骨采取。采集的骨髓液收集于无菌肝素抗凝管内，取材环境应保持洁净（至少为SPF环境）。
若骨髓标本含有红细胞，在冷冻前应先将其离心去除。骨髓标本采集后应尽快根据冻存程序并储存在-80℃环境下。
1.4 胃肠液样本处理及注意事项
取材前应禁食12小时，在空腹状态下取材。取出胃肠组织时，应夹闭贲门和幽门，及肠道切口两端，避免肠液胃液流失/混入血液。需要灌洗肠胃时应注意灌洗液体积、回收率。肺泡灌洗液样本同上处理。
1.5 脏器样本处理及注意事项
取材后应迅速将脏器称重，以免水分蒸发造成差异，特别是肾上腺等小器官的称重。脏器称重前应尽量将周围脂肪组织和结缔组织剔除，并用滤纸吸去脏器表面血液及体液，特别是肾上腺、甲状腺、前列腺等较小的器官，更要新鲜称重，防止器官干燥失水而重量减轻。空腔器官称重前，应清除其腔内液体，如心脏应除去血块。
1.6组织匀浆样本处理及注意事项
匀浆介质的制备一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。ELISA检测的匀浆介质可使用PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol的PBS。酶活性类检测则必须使用生理盐水。
剪取组织块后应在4℃的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重，放入适合的匀浆管中。
按重量(g):体积(ml)比例（1g/ml=100%）加入匀浆介质（pH7.4，0.01mol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化钠溶液）或者0.86%的生理盐水于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块后匀浆：包括手工匀浆，机器匀浆，超声粉碎。
手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成10%的匀浆液；机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行），皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间；超声粉碎：用超声粉碎机进行粉碎处理。根据各型号仪器操作规程操作。
匀浆制作完成后可使用镜检观察：取少量组织匀浆作涂片（直接涂片、染色均可以），显微镜下观察细胞是否破碎，根据结果可延长匀浆时间。
匀浆液测定前用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定。
匀浆的保存：动物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中间如不反复冻融，-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。非必须冻存的样本应于制作当天进行测定，如放置时间过长相关酶活会有所下降，部分指标4℃可存放3～5天（如SOD要存放2～3天，MDA可存放3～5，总蛋白测定可存5～7天等）。
1.7用于基因扩增检测的样本
包括NG-DNA、CT-DNA、UU-DNA、HSV-Ⅱ-DNA、tRNA、mRNA等项目。
1.7.1血液
一般采用红色非抗凝血清管。如需要抗凝处理，首选的抗凝剂为EDTA和枸橼酸钠，不能使用肝素抗凝，肝素是Taq酶的强抑制剂。RNA检测的样本应在4小时内开始扩增程序处理；DNA检测的样本应在12小时内处理。如不能及时送检，可将样本放在-20℃冷冻保存。
1.7.2尿液
用无菌生理盐水清洗尿口，并用高压蒸汽灭菌处理过的无菌器皿收集，不做防腐处理。RNA检测的样本应在4小时内开始扩增程序处理；DNA检测的样本应在12小时内处理。如不能及时送检，可将样本放在-20℃冷冻保存。
1.7.3 脑脊液、胸腹水、穿刺液、肺泡灌洗液
严格遵照无菌操作规范取材，收集至经高压蒸汽灭菌处理的无菌容器。RNA检测的样本应在4小时内开始扩增程序处理；DNA检测的样本应在12小时内处理。如不能及时送检，可将样本放在-20℃冷冻保存。
二、生物样本贮存期间的稳定性考察
由于生物等效性试验样本从采样到检测的周期通常需要几周至几个月，在其贮存期间目标药物的稳定性需经考察验证。含药样本稳定性是指样品中的药物从采样至测定时性质和含量的稳定程度，它是贮存条件、药物的化学性质、空白生物样品和容器系统的函数，在特定的容器和生物样品中待测物的稳定性不能外推至其他系统。生物样本稳定性的评价应考察：
1、短期室温稳定性：要求高、低浓度样本在4~24 h内稳定。考察温度、光照、空气、酶解等因素。
2、长期低温条件下的稳定性：从第一个样本采集至最后一个样本的分析为一个考察时间周期，贮存温度一般为-20℃，如果需要也可在-70℃贮存。要求高、低浓度至少分别测定3次，测得结果与第一天测得的相应浓度比较应保持稳定。
3、冻融试验：取高、低浓度各3份于-20℃贮存24小时，取出后在室温自然解冻，取样测定，然后再将样品放回冷冻12~24小时，如此重复循环二次以上，分别比较各次测定结果。
4、对照液和内标液的稳定性：室温考察6小时稳定性，然后冷藏7~14天或恰当的周期后进行测定，与新配溶液的测定结果进行比较。
三、各类检测项目注意事项
激素类：包括类固醇（肾上腺皮质素、性激素）、蛋白质和多肽类（垂体、下丘脑、胰腺）、脂肪酸衍生物（白细胞三烯、前列腺素）、氨基酸衍生物（肾上腺素、甲状腺素）。在室温条件下大致稳定性从高到低为：固醇类（数周至数天）→蛋白质和多肽（数周至数分钟）→氨基酸衍生物（数天至数分钟）→脂肪酸衍生物（数天至数秒）。检验按照检验项目的特性取材即刻检测，或是选择-70℃冻存，避免反复冻融，且避免水浴时间过长，建议冻融即开始检测（注意吹打混匀）。
蛋白类：包括酶、抗体、表面标示蛋白、总蛋白组织液、泛素、部分激素类等。在-70℃中相对保存时间较长，但反复冻融极易破坏稳定性，水浴更容易被细菌或样本内自身的酶降解。其中抗体类蛋白最为稳定，IgG甚至能在血清中4℃稳定保存23天。而酶类在血清中4℃放置8小时即会造成活性下降。血清蛋白则能在24小时内保持稳定。
多肽类：根据分子量大小，较长的肽链稳定性能与蛋白相当，分子量越小则稳定性越差，血清样本建议24小时内检测处理，-70℃冻存时应避免反复冻融。
氨基酸：在中性条件下可在-70℃至-20℃冻存数月，但4℃以上开始，血清样本中氨基酸会缓慢被酶代谢，在酶类丰富的组织液和细胞裂解液中更容易代谢。建议加快冻融复温后的检验进程。
生化类检测项目：这些检验项目较为复杂，除了部分有机盐类之外，大部分易受氧化、光照分解、生物降解。考虑到实验室方法学允许误差，参考检验科对具体项目的测定要求：GLU应在4 h内测定，BUN（尿素氮）、TBIL（总胆红素）应在8 h内完成，TP（总蛋白）、ALB（白蛋白）、ALT（丙谷氨酸转移酶）、AST（天门冬氨酸转移酶）、ALP（碱性磷酸酶）、GGT（GGT谷氨酰基转移酶）、Ca2+、PT应在24 h内测定完。血液标本长时间放置后，其结果偏高的是：TP、ALB、ALT、AST、ALP、GGT、Ca2+；其结果偏低的是：BUN、TBIL；对结果影响差异无显著性的是：TG（甘油三酯）、DBIL（直接胆红素）。这提示，要得到血脂等指标的可靠准确的检测结果，标本也不适宜在低温下长时间保存。正是由于血液放置时间对有些生化检验项目的影响，对于工作量大的生化室应先测定不宜长时间放置的标本，而不能及时测定的项目应把血清分离出来后放置2-8℃冰箱保存并在当天检测。
因此，生化检测人员不仅要知道对标本放置时间的要求，还要知道其结果的变化趋势，以便了解长时间放置后其结果是偏高还是偏低，在实际检测中要合理安排检测项的顺序，对GLU和CO2等不稳定的项目要及时测定，减少冻融和放置的时间。必要时采取分批处理的方法，并严格参照仪器、试剂盒说明书、操作规程操作，力争把对实验结果的影响降到最低。
附件1 生物等效性研究的统计学指导原则 一、概述 生物等效性（Bioequivalence, BE）研究是比较受试制剂（T）与参比制剂（R）的吸收速度和吸收程度差异是否在可接受范围内的研究，可用于化学药物仿制药的上市申请，也可用于已上市药物的变更（如新增规格、新增剂型、新的给药途径）申请。 目前生物等效性研究通常推荐使用平均生物等效性（Average Bioequivalence, ABE）方法。平均生物等效性方法只比较药代动力学参数的平均水平，未考虑个体内变异及个体与制剂的交互作用引起的变异。在某些情况下，可能需要考虑其他分析方法。例如气雾剂的体外BE研究可采用群体生物等效性（Population Bioequivalence，PBE）方法，以评价制剂间药代动力学参数的平均水平及个体内变异是否等效。 本指导原则旨在为以药代动力学参数为终点评价指标的生物等效性研究的研究设计、数据分析和结果报告提供技术指导，是对生物等效性研究数据资料进行统计分析的一般原则。在开展生物等效性研究时，除参考本指导原则的内容外，尚应综合参考《以药动学参数为终点评价指标的化学药物仿制药人体生物等效性研究技术指导原则》和《药物临床试验的生物统计学指导原则》等相关指导原则。 二、研究设计 （一）总体设计考虑 生物等效性研究可采用交叉设计或者平行组设计。 —1 —
1.交叉设计 生物等效性研究一般建议采用交叉设计的方法。交叉设计的优势包括：可以有效减少个体间变异给试验评价带来的偏倚；在样本量相等的情况下，使用交叉设计比平行组设计具有更高的检验效能。 两制剂、两周期、两序列交叉设计是一种常见的交叉设计，见表1。 表1 两制剂、两周期、两序列交叉设计 序列 周期 1 2 1 T R 2 R T 如果需要准确估计某一制剂的个体内变异，可采用重复交叉设计。重复交叉设计包括部分重复（如两制剂、三周期、三序列）或者完全重复（如两制剂、四周期、两序列），见表2和表3。 表2 两制剂、三周期、三序列重复交叉设计 序列 周期 1 2 3 1 T R R 2 R T R 3 R R T —2 —
生物实验室注意事项 Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】
生物实验室注意事项 13.使用离心机应注意什么？ 14.首先应该根据自己的实验需求选择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心机时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格平衡样品。安装转子和转子盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心机异常应立即关闭离心机。离心结束后要安放好转子。 14.分子生物学实验室常用的灭菌方法有哪些？ 高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂消毒、过滤除菌 15.使用移液器有哪些注意事项？ 垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用；选择与移液器匹配的枪头，安装枪头时不要用力太猛；移液器每日用完后，应旋到最大刻度。 分子生物学操作中会涉及一系列仪器，使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项，是使后继实验事半功倍的一个必要准备。1.冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品
的分离制备实验中，都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。 使用方法： 1.离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 2.打开电源开关，按要求装上所需的转头，将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上（离心筒须与样品同时平衡），关闭机盖。 3.按功能选择键，设置各项要求：温度、速度、时间、加速度及减速度，带电脑控制的机器还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。 4.按启动键，离心机将执行上述参数进行运作，到预定时间自动关机。 5.待离心机完全停止转动后打开机盖，取出离心样品，用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 注意事项：1.机体应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线。 2.开机前应检查转头安装是否牢固，机腔有无异物掉入。 3.样品应预先平衡，使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 4.挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏，以免腐蚀机腔或造成事故。 5.擦拭离心机腔时动作要轻，以免损坏机腔内温度感应器。 6.每次操作完毕
生物实验室安全常识（废液处理篇） 2007-12-26 10:11:24 信息来源：生物谷 ?生物实验室安全常识（废液处理篇）生物谷编者按：我们的生物实验室存在多少危险？生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通联合《遗传》、《中国生物工程杂志》、《生命世界》杂志开展2 007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染，如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物 .bioon. 生物谷网站 生物谷编者按： 我们的生物实验室存在多少危险？ 生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？ 实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？ 这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通联合《遗传》、《中国生物工程杂志》、《生命世界》杂志开展2007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。 实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染，如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物试剂等。而化学污染则包括有机物污染和无机物污染。除此以外，还有部分实验室存在放射性污染。 在此次赛默飞世尔中国生物实验室安全调查活动中，从现有调查结果中，我们惊讶的发现许多生物实验室存在严重的污染问题，而其中又以废液废品的处理为最，大部分实验室在进行
生物实验室注意事项 13.使用离心机应注意什么？ 14.首先应该根据自己的实验需求选择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心机时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格平衡样品。安装转子和转子盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心机异常应立即关闭离心机。离心结束后要安放好转子。 14.分子生物学实验室常用的灭菌方法有哪些？ 高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂消毒、过滤除菌 15.使用移液器有哪些注意事项？ 垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用；选择与移液器匹配的枪头，安装枪头时不要用力太猛；移液器每日用完后，应旋到最大刻度。 分子生物学操作中会涉及一系列仪器，使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项，是使后继实验事半功倍的一个必要准备。 1.冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实
验中，都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。 使用方法： 1.离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 2.打开电源开关，按要求装上所需的转头，将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上（离心筒须与样品同时平衡），关闭机盖。 3.按功能选择键，设置各项要求：温度、速度、时间、加速度及减速度，带电脑控制的机器还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。 4.按启动键，离心机将执行上述参数进行运作，到预定时间自动关机。 5.待离心机完全停止转动后打开机盖，取出离心样品，用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 注意事项：1.机体应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线。2.开机前应检查转头安装是否牢固，机腔有无异物掉入。3.样品应预先平衡，使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。4.挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏，以免腐蚀机腔或造成事故。5.擦拭离心机腔时动作要轻，以免损坏机腔内温度感应器。6.每次操作完毕应作好使用情况
为了避免大家在生物等效性试验备案的过程中少走弯路，帮助大家更顺利的通过，今天就为大家详细的讲解一下生物等效性试验备案的流程吧： （一）注册申请人向具有资质的药物临床试验机构提出申请，获得该机构伦理委员会的批准，并签署BE试验研究合同。 （二）注册申请人开展生物等效性试验前30天，应当在国家食品药品监督管理总局指定的化学药BE试验备案信息平台进行化学药BE试验备案，按要求提交备案资料。 提前30天申请，但未明确说30天未收到异议即可开展BE研究，这点很重大！ （三）备案资料主要包括注册申请人信息、产品基本信息、处方工艺、质量研究和质量标准、参比制剂基本信息、稳定性研究、原料药、试验方案设计、伦理委员会批准证明文件等。 此条对讨论稿中的“合法原料”做了终版解释，无“合法原料”说法，所以可解读为新3+5，老3+6都是可以备案的啦。 （四）注册申请人BE试验的参比制剂及各参与方的基本信息等向社会公开。 （五）注册申请人在获得备案号后，应在第1例受试者入组前在国家食品药品监督管理总局药物临床试验登记与信息公示平台完成开展试验前的所有信息登记，并由国家食品药品监督管理总局向社会公示；1年内未提交受试者入组试验信息的，注册申请人须说明情况；2年内未提交受试者入组试验信息的，所获得备案号自行失效。 （六）注册申请人应严格执行《药物临床试验质量管理规范》（GCP），按照试验方案开展BE试验。BE试验过程中，参比制剂、原料药、制剂处方、工艺等发生变更，注册申请人应停止试验，通过备案平台提交试验中止的申请，国家食品药品监督管理总局将公示其中止试验。注册申请人根据变更情况，向国家食品药品监督管理总局提交备案变更资料，生成新的备案号后重新开展BE试验。 这条写的很好，BE试验过程中的终止与变更必须引起大家的关注，BE试验在国外的一次性通过几率有多少？偷偷做人体预试验这个事儿，靠谱不？ （七）注册申请人应当在BE试验完成或因故终止一年内，在备案平台提交BE试验的总结报告或情况说明。 （八）注册申请人完成BE试验后，应将试验数据申报资料、备案信息及变更情况提交国家食品药品监督管理总局，在此基础上提出相应药品注册申请。注册申请人要承诺其注册申请资料及数据的真实、完整、规范。 BE结束后，才是正式的“药品注册申请”啦，在此之前都是企业自行验证药品质量的过程。而真实性的关注将化作永恒。 （九）未按本公告规定备案而开展的BE试验，国家食品药品监督管理总局不受理其注册申请。
高中生物的实验操作注意事项 1、应注意实验选材的合理性 如：⑴所选材料应有利于实验现象的观察：如可溶性还原糖的鉴定中应选择“白色或近白色”的材料; ⑵所选材料应容易获得：尽可能选择无明显季节性、地域性的材料; ⑶所选材料应价格便宜 2、应注意操作细节的合理性 如：⑴溶液或培养基灭菌后是否要冷却后使用?冷却后 ⑵向淀粉糊中加了唾液后是否要振荡试管呢?要 ⑶酶促反应的试管如何加热?是直接加热，还是水浴加温?水浴加热 ⑷用酒精溶解叶中叶绿素时，酒精直接或隔水加热?隔水加热 ⑸使甲状腺激素、胰岛素、生长激素进入动物体内的方法应如何操作?是饲喂，还是注射?甲状腺激素饲喂，胰岛素、生长激素注射 ⑹不同的情况下要合理地选用不同的水。如：清水、池水、凉开水、蒸馏水、生理盐水。 3、应注意操作顺序的合理性 例：为“验证pH对唾液淀粉酶活性的影响”。在如下实验步骤中，顺序应该是
①在1-5号试管中分别加入0.5%的淀粉液2mL; ②加完淀粉液后，向各试管中加入相应的缓冲液3mL，使各试管中反应液的pH依次稳定在5.00、6.20、6.80、7.40、8.00; ③分别向1-5号试管中加入0.5%唾液1mL，然后进行37℃恒温水浴; ④反应过程中，每隔1min从第3号试管中取出一滴反应液，滴在比色板上，加一滴碘液显色，待呈橙黄色时，立即取出5支试管，加碘液显色并比色，记录结果; A.①②③④ B.③①②④ C.③②①④ D.①③②④ 答案：C 4、应注意实验方案的可操作性 例：为“验证镁是植物生活的必需元素”。请写出你的设计思路。 方案1：将幼苗中运载Mg2+的载体去掉 方案2：用去掉镁的砂性土壤培养幼苗 方案3：将植物体内的Mg2+分离出来 方案4：取生长状况一致的大豆幼苗，用符合实验要求的容器，对照组盛有含植物必需的各种矿质元素的完全培养液，实验组盛有不含镁离子的完全培养液，两组置于相同的适宜条件下培养;观察比较两组植物的生长发育情况。 方案1、2、3均缺乏可操作性，正确思路应该是方案4。
生物等效性实验生物样品处理注意事项(严)
生物等效性实验生物样品处理注意事项一、样品采集后的的处理和贮存 鉴于生物样本的特点，为了避免样品中被测药物发生分解或产生其他化学变化，取样后最好立即进行分析测定，但实际工作中几乎无法做到，常需将收集到的样品冷藏、冰冻，临用前再融化并放至室温后使用。在样本冷冻贮藏前，需及时进行处理。 1.1血液样本处理注意事项 1.1.1. 在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质(含钾、钠、氯离子)的液体时，建议3小时以后采集静脉血样本进行这些项目的检验，以防止上述检验项目因输液引起的假性升高。 1.1.2保定非麻醉状态的动物时应尽量避免用力挤压动物头颈和胸腹，以免引起血液淤滞，局部组织缺氧，造成血液某些成分的改变，特别是测定乳酸，血液含氧量等指标时。 1.1.3血液中红细胞内外成分有很大差异，溶血可造成红细胞内的物质向细胞外转移，如K+、Mg2＋和某些酶类(LD、AST、ALT、ACP)；另外，溶血还可干扰某些化学项目(TBil、DBil、TC等)的测定，严重影响结果的准确性，血样本应防止溶血。引起溶血的原因有：注射器采血时抽吸力太大；血液与抗凝剂比例失调；混匀样本时过度振荡；注射器或采血容器带水或容器污染；全血放置时间长或突然受冷或受热；注射器中的血沫注入采血容器；真空采血时如未
采满至相应刻度，残存负压造成红细胞破裂；不拔针头直接注入采血容器；样本离心时离心力过大等。为避免溶血，取血时应注意： ①、抽拉注射器时应尽量避免注射器内产生大量真空； ②、添加抗凝剂后的容器在除必要干燥流程后应及时密封； ③、混匀样本时避免用力过度，切勿产生泡沫； ④、避免重复使用注射器、针头、采血管、毛细玻璃管等一次性用品，手术刀片和剪刀等器材取材时尽量洗去残留血液； ⑤、采血时的室温应控制在22℃至25℃，采取的血液容器在需要放入冰盒时，切勿紧贴冰袋，冰水； ⑥、当注射器内因吸入空气产生血沫时，注意弃掉血沫，在将血液注入采血容器时勿将血沫一并注入； ⑦、使用真空采血管需抽取负压时切勿过量； ⑧、将血液注入采血容器时要除去针头，轻柔推入； ⑨、离心带有血细胞的血样时，按照规格设定离心参数； 1.1.4. 正确选择采集管。通常情况下多采用血清为样本(不抗凝)，部分检测项目需注意样本属性为血清或血浆，两者不可替代。一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止样本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血样本采集后立即轻轻摇匀至少上下颠倒8次，以防凝血发生。 1.1.5. 多项化验采血顺序：血培养瓶(厌氧瓶优先)→蓝帽管→黑帽管→红/黄帽管→绿帽管→紫帽管→灰帽管→其他。
化学药品分类第XXXXXX类（未上市品种） 批准文号国药准字XXXXXX（已上市品种） 注：以上批准文号根据项目实际情况确定后，删除不适用内容。 研究药物名称: XXXXXX 临床研究名称: XXXXXX 研究单位名称： 地址： 主要研究者： 联系人： 联系电话/ E-mail： 检测单位名称： 地址： 实验室负责人： 联系人： 联系电话/ E-mail： 药品注册申请单位： 地址： 项目负责人： 联系人： 联系电话/传真： 原始资料保存处： CRO: 统计分析单位：
保密声明 本文所含信息均属秘密，并为XXXXXX（申办方）所有。本方案提供有关信息的目的在于为药物临床试验机构提供XXXXXX（研究药物名称）生物等效性临床试验方案。研究者可以在符合下列条件的基础上将方案中的内容透露给试验的参加人员或研究者机构审查委员、伦理委员会或药事管理委员会。本方案的内容不能用在其他临床试验中，也不能在事先未经XXXXXX（申办方）书面许可的情况下擅自将本方案内容透露给其他任何个人或集体。另外，对本方案进行增补的任何信息也属秘密，并为XXXXXX（申办方）所有，其保密原则同方案内容。 本方案仅用于经XXXXXX（申办方）授权的事项，未经事先书面许可不得向任何他人公开。若事先未获得授权而持有本方案，请及时与XXXXXX（申办方）联系，并将方案和其复印件交还XXXXXX（申办方）。 注：括号斜体显示为需填写内容，具体根据项目信息确认后删除。
本研究方案版本信息及修订记录 注：括号斜体显示信息根据实际情况进行填写，若未发生，需删除。
申请单位方案签名页 申请单位项目负责人声明： 我和研究者共同制定，并仔细阅读过该研究方案（版本号：XXXX，版本日期：XXXX年XX月XX日），并且同意按照该方案来执行。我将根据《药物临床试验质量管理规范》（GCP）规定，负责发起、申请、组织、资助、监查和稽查本项临床研究，任命监查员，并为研究者所接受，监查临床试验的进行，特别对临床研究中发生与研究相关的损害的受试者提供治疗的经济补偿，向研究者提供法律上与经济上的担保。 我向研究者提供具有易于识别、贴有特殊标签的受试制剂和参比制剂，并保证提供的试验用药质量合格。试验药品按试验方案的需要进行适当包装。 申请单位： 项目负责人：（签名）签名日期：年月日
一级生物安全实验室注 意事项 https://www.doczj.com/doc/7015960643.html,work Information Technology Company.2020YEAR
一、一级生物安全注意事项 1.在实验期间实验室门保持关闭状态。 2.按照操作规程使气溶胶的产生降到最小。 3.在一级生物安全区域内不许吸烟、进食、喝饮料及贮存食物。 4.穿实验服。 5.不许用嘴吸吸液管，应使用机械的吸液设备。 6.避免使用皮下注射针。 7.完成实验操作离开实验室前要洗手。 8.定期消毒工作台面，有液体飞溅应立即消毒。 9.生物废弃物丢弃前需消毒。其它污染的原料在清洗、再利用或丢弃前也 需消毒。 10.污染物封口、耐用的、防漏的容器袋包裹，高压消毒后送到指定销毁 点。 11.控制昆虫和啮齿动物的出没。 12.保持工作区清洁。 二、清除污染 建议使用次氯酸盐和高级别的消毒剂来清除污染。一般情况可使用新鲜配制的含有效氯1 g/L 的次氯酸盐溶液，处理溢出的血液时，有效氯浓度应达到5 g/L。 (一)血液溢出物 1.穿戴手套、实验服和口罩， 2.用纸巾覆盖溢出物，向纸巾上倒有效氯含量5000mg/L含氯消毒剂，直到全 部浸透且不能流出。并维持适当的接触时间约30分钟。 3.用镊子夹取纸巾丢入医疗垃圾袋中。 4.用有效氯含量1000mg/L含氯消毒剂喷雾溢出区域并空气干燥15分钟。 5.15分钟接触反应后，用清水冲洗，用纸巾擦净这一区域。 6.将纸巾、手套丢入丢入医疗垃圾袋中。 7.用皂液和消毒洗手液洗手。 8.就此事件和处理过程做一个记录，报告给主管部门。 (二)皮肤感染
用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。 (三)眼、面部飞溅 用冲眼器冲洗冲洗感染部位15分钟。 (四)医疗锐器伤或粘膜受血液或体液沾染 1.用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。 2.如有伤口，应当在伤口稍上方轻轻挤压，从伤口近心处向远心方向挤压， 尽可能挤出损伤处的血液。禁止在伤口的局部，以免损伤局部组织。再用肥皂液和流动水进行冲洗5分钟，还应注意是哪个病人污染的，如果不知是哪一个病人，也应留意刺伤自已的针头。然后，填写《医疗锐器伤登记表》，报有关部门，做好登记，定期监测。 3.受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如：75%酒精或者0.5%碘伏进行消 毒，并包扎伤口；被暴露的粘膜，应当反复用生理盐水冲洗干净。 4.如遇被乙肝病人或艾滋病病人用过的针头刺伤，除了上述处理方法外，还 要立即注射免疫球蛋白，同时注射相应的疫苗，如乙肝疫苗等。同时还要在当时，三个月及六个月时抽血化验有没有相应的表面抗原，然后，报有关部门，做好登记，定期监测。 (五)检验冰箱冰柜离心机消毒 1.冰箱、冰柜的消毒 1)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室的消毒用75%的酒精。 2)冰箱、冰柜的门把宜每日清洁，用75%的酒精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦 拭水分。 3)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室最好每月清洁一次，清洁前取出全部物品，用75% 的酒精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦拭水分。作好记录。 2.离心机的消毒 1)离心机表面的消毒每天一次，按仪器表面消毒操作程序进行。 2)离心机内部的消毒宜每周一次，打开离心机盖，用75%酒精浸湿的毛巾擦拭 离心机内壁，转动机杆、转盘。 3)取出离心机离心筒用75%酒精醮湿棉签擦拭，当发生意外时，如试管离心 破裂时，要立即取出机筒，将玻璃碎片放入锐器盒，将污染的机筒放入容
附件3 以药动学参数为终点评价指标的 化学药物仿制药人体生物等效性研究 技术指导原则 一、概述 本指导原则主要阐述以药动学参数为终点评价指标的化学药物仿制药人体生物等效性试验的一般原则，适用于体内药物浓度能够准确测定并可用于生物等效性评价的口服及部分非口服给药制剂（如透皮吸收制剂、部分直肠给药和鼻腔给药的制剂等）。进行生物等效性试验时，除本指导原则外，尚应综合参考生物样品定量分析方法验证指导原则等相关指导原则开展试验。 生物等效性定义如下：在相似的试验条件下单次或多次给予相同剂量的试验药物后，受试制剂中药物的吸收速度和吸收程度与参比制剂的差异在可接受范围内。生物等效性研究方法按照研究方法评价效力，其优先顺序为药代动力学研究、药效动力学研究、临床研究和体外研究。 药代动力学（药动学）研究： 对于大多数药物而言，生物等效性研究着重考察药物自制剂释放进入体循环的过程，通常将受试制剂在机体内的暴露情况与参比制剂进行比较。 在上述定义的基础上，以药动学参数为终点评价指标的生物等
效性研究又可表述为：通过测定可获得的生物基质（如血液、血浆、血清）中的药物浓度，取得药代动力学参数作为终点指标，藉此反映药物释放并被吸收进入循环系统的速度和程度。通常采用药代动力学终点指标C max和AUC进行评价。 如果血液、血浆、血清等生物基质中的目标物质难以测定，也可通过测定尿液中的药物浓度进行生物等效性研究。 药效动力学研究： 在药动学研究方法不适用的情况下，可采用经过验证的药效动力学研究方法进行生物等效性研究。 临床研究： 当上述方法均不适用时，可采用以患者临床疗效为终点评价指标的临床研究方法验证等效性。 体外研究： 体外研究仅适用于特殊情况，例如在肠道内结合胆汁酸的药物等。对于进入循环系统起效的药物，不推荐采用体外研究的方法评价等效性。 二、基本要求 （一）研究总体设计 根据药物特点，可选用1）两制剂、单次给药、交叉试验设计；2）两制剂、单次给药、平行试验设计；3）重复试验设计。 对于一般药物，推荐选用第1种试验设计，纳入健康志愿者参与研究，每位受试者依照随机顺序接受受试制剂和参比制剂。对于
实验室安全及防护知识及其常识 （一）实验室安全知识 在生物化学实验室中，经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触，常常使用易碎的玻璃和瓷质器皿以及在煤气、水、电等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作，因此，必须十分重视安全工作。 1．进入实验室开始工作前应了解煤气总阀门、水阀门及电闸所在处。离开实验室时，一定要将室内检查一遍，应将水、电、煤气的开关关好，门窗锁好。 2、使用煤气灯时，应先将火柴点燃，一手执火柴紧靠近灯口，一手慢开煤气门。不能先开煤气门，后燃火柴。灯焰大小和火力强弱，应根据实验的需要来调节。用火时，应做到火着人在，人走火灭。 3．使用电器设备（如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等）时，严防触电；绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。应该用试电笔检查电器设备是否漏电，凡是漏电的仪器，一律不能使用。 4．使用浓酸、浓碱，必须极为小心地操作，防止溅出。用移液管量取这些试剂时，必须使用橡皮球，绝对不能用口吸取。若不慎溅在实验台上或地面，必须及时用湿抹布擦洗干净。如果触及皮肤应立即治疗。 5．使用可燃物，特别是易燃物（如乙醚、丙酮、乙醇、苯、金属钠等）时，应特别小心。不要大量放在桌上，更不要在靠近火焰处。只有在远离火源时，或将火焰熄灭后，才可大量倾倒易燃液体。低沸点的有机溶剂不准在火上直接加热，只能在水浴上利用回流冷凝管加热或蒸馏。 6．如果不慎倾出了相当量的易燃液体，则应按下法处理： （1）立即关闭室内所有的火源和电加热器。 （2）关门，开启小窗及窗户。 （3）用毛巾或抹布擦拭洒出的液体，并将液体拧到大的容器中，然后再倒入带塞的玻璃瓶中。 7．用油浴操作时，应小心加热，不断用温度计测量，不要使温度超过油的燃烧温度。8．易燃和易爆炸物质的残渣（如金属钠、白磷、火柴头）不得倒入污物桶或水槽中，应收集在指定的容器内。 9．废液，特别是强酸和强碱不能直接倒在水槽中，应先稀释，然后倒入水槽，再用大量自来水冲洗水槽及下水道。 10．毒物应按实验室的规定办理审批手续后领取，使用时严格操作，用后妥善处理。（二）实验室灭火法 实验中一旦发生了火灾切不可惊慌失措，应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和电源。然后根据具体情况正确地进行抢救和灭火。常用的方法有： 1．在可燃液体燃着时，应立即拿开着火区域内的一切可燃物质，关闭通风器，防止扩大燃烧。若着火面积较小，可用抹布、湿布、铁片或沙土覆盖，隔绝空气使之熄灭。但覆盖时要轻，避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿，导致更多的溶剂流出而再着火。 2．酒精及他可溶于水的液体着火时，可用水灭火。
微生物实验注意事项 1.实验过程中要及时详细标清除产物和日期，实验做完以后要对以前的过度产品做个清 理，以免东西积累过多。 2.实验后的DNA和RNA要及时放回冰箱，以免时间长降解，特别是用水溶解的时候。 3.要及时甘油保存你鉴定出的细菌，每个细菌保存两份，存放在-80度冰箱里。 4.实验用的酶类虽然在室温下放一段时间也没什么问题，但还是要及时放回冰箱，以免 活性降低。 5.要及时清理实验台面，保持干净，整洁，有序。 6.无菌操作台用后及时清理干净，操作真菌和细菌等最好不要交叉使用。 7.培养基使用的时候要注意无菌操作，移液器不要插入培养基中，之准许无菌枪头进入 瓶子腔体，如培养基较少，可以倾斜瓶子，移液器取液体最好不要用到最大量程，以免吸液过猛导致与移液器接触。 8.灭好的培养基标签一定要写好，包括名称，日期，是否加抗生素，是否加抗生素非常 重要，特别是在共用培养基的实验室。 9.实验用过的试剂盖子一定要盖好，以免挥发。特别是有毒的物品，如氯仿，苯酚等， 用完后的瓶子及时拿出实验室。 10.带手套接触有毒物品后，要及时处理掉手套。不管是否接触过有毒物品，，不要戴着 手套乱接触其他东西，如开窗等。 11.做实验过程中不要接电话，说话，考虑其他事情。特别是PCR和配溶液的时候。做PCR 和配溶液的时候要把所用的试剂找全，一字排开，加完一种东西就把这种东西放到一边，可防止自己少加错东西。 12.同时作几个实验的时候一定要有定时器，防止自己忘记，特别是在煮东西，加热溶化 溶液等危险操作的时候，切忌。 13.饭前，有活动前不要做实验，这时候匆匆忙忙非常容易出错，特别是作有危险的实验， 更要注意。 14.作好试验记录，不管有没有结果，一定要坚持。还有点用图片，测序结果等，如果不 清楚记录东西多了，就乱了，混了。这个一定要认真做好。 15.要随时写下自己的想法，因为有些想法稍纵即逝。
药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则
附录三药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则生物利用度是指剂型中的药物被吸进入血液的速率和程度。生物等效性是指一种药物的不同制剂在相同的试验条件下，给以相同的剂量，反映其吸收速率和程度的主要动力学参数没有明显的统计学差异。 口服或其他非脉管内给药的制剂，其活性成分的吸收受多种因素的影响，包括制剂工艺、药物粒径、晶型或多晶型，处方中的赋形剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、包衣材料、溶剂、助悬剂等。生物利用度是保证药品内在质量的重要指标，而生物等效性则是保证含同一药物的不同制剂质量一致性的主要依据。生物利用度与生物等效性概念虽不完全相同，但试验方法基本一致。为了控制药品质量，保证药品的有效性和安全性，特制定本指导原则。何种药物制剂需要进行生物等效性或生物利用度试验，可根据有关部门颁布的法规要求进行。 进行药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验的临床实验室和分析实验室，应提供机构名称以及医学、科学或分析负责人的姓名、职称和简历。 一、生物样品分析方法的基本要求 生物样品中药物及其代谢产物定量分析方法的专属性和灵敏度，是生物利用度和生物等效性试验成功的关键。首选色谱法，如HPLC、GC以及GC-MS、LC-MS、LC-MS-MS联用技术，一般应采用内标法定量。必要时也可采用生物学方法或生物化学方法。
由于生物样品取样量少、药物浓度低、内源性物质（如无机盐、脂质、蛋白质、代谢物）及个体差异等多种因素影响生物样品测定，所以必须根据待测物的结构、生物介质和预期的浓度范围，建立适宜的生物样品分析方法，并对方法进行验证。 1．专属性必须证明所测定的物质是原形药物或特定的活性代谢物，内源性物质和相应的代谢物不得干扰样品的测定。对于色谱法至少要提供空白生物样品色谱图、空白生物样品外加对照物质色谱图（注明浓度）及用药后的生物样品色谱图。对于复方制剂应特别加强专属性研究，以排除可能的干扰。对于LC-MS和LC-MS-MS方法，应着重考察基质效应。 2．标准曲线与线性范围根据所测定物质的浓度与响应的相关性，用回归分析方法获得标准曲线。标准曲线高低浓度范围为线性范围，在线性范围内浓度测定结果应达到试验要求的精密度和准确度。 必须用至少6个浓度建立标准曲线，应使用与待测样品相同的生物介质，线性范围要能覆盖全部待测浓度，不允许将线性范围外推求算未知样品的浓度。标准曲线不包括零点。 3．精密度与准确度要求选择3个浓度的质控样品同时进行方法的精密度和准确度考察。低浓度选择接近定量下限（LLOQ），在LLOQ的3倍以内；高浓度接近于标准曲线的上限；中间选一个浓度。每一浓度至少测定5个样品。 精密度用质控样品的日内和日间相对标准差（RSD）表示，RSD一般应小于15%，在LLOQ附近RSD应小于20%。 准确度是指用特定方法测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度，一般应在85%～115%范围内，在LLOQ附近应在80%～120%范围内。
高中生物实验总结 实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA 绿色，RNA 红色 分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 实验二物质鉴定 还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹III ～橘黄色 脂肪 + 苏丹IV～红色 蛋白质 + 双缩脲试剂～紫色反应 1、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） ★模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）
1、[判断题]实验室灭火的方法要针对起因选用合适的方法。一般小火可用湿布、石 棉布或沙子覆盖燃烧物即可灭火。（分值1.0） 你的答案：正确 2、[判断题]有“严禁烟火”警示牌的大楼和实验室，可不必配置必要的消防、冲淋、 洗眼、报警和逃生设施和有明显标志。（分值1.0） 你的答案：错误 3、[判断题]实验大楼因出现火情发生浓烟时应迅速离开，当浓烟已穿入实验室内时， 要沿地面匍匐前进，因地面层新鲜空气较多，不易中毒而窒息，有利于逃生。当逃到门口时，千万不要站立开门，以避免被大量浓烟熏倒。（分值1.0） 你的答案：正确 4、[判断题]消防队在扑救火灾时，有权根据灭火的需要，拆除或者破损临近火灾现 场的建筑。（分值1.0） 你的答案：正确 5、[判断题]在扑灭电气火灾的明火时，用气体灭火器扑灭。（分值1.0） 你的答案：正确 6、[判断题]发现火灾时，单位或个人应该先自救，当自救无效、火越着越大时，再 拨打火警电话119。（分值1.0） 你的答案：错误 7、[判断题]扑救气体火灾切忌盲目扑灭火势，首先应切断火势蔓延途径，然后疏散 火势中压力容器或受到火焰辐射热威胁的压力容器，不能疏散的部署水枪进行冷却保 护。（分值1.0） 你的答案：正确 8、[判断题]消防工作的方针是：“预防为主，防消结合”，实行消防安全责任制。（分 值1.0） 你的答案：正确 9、[判断题]所有的火灾刚开始时都是小火，随着火灾的发展输出的热量越大，火灾 蔓延的速度和范围也愈大，所以扑灭初起火灾最容易的。（分值1.0） 你的答案：正确
10、[判断题]万一发生了火灾，不管是否是电气方面引起的，首先要想办法迅速切断 火灾范围内的电源。（分值1.0） 你的答案：正确 11、[判断题]V类放射源的下限活度值为该种核素的豁免活度。（分值1.0） 你的答案：正确 12、[判断题]Ⅲ类放射源为危险源。在没有防护情况下，接触这类源几小时就可对人 造成永久性损伤，接触几天至几周也可致人死亡。（分值1.0） 你的答案：正确 13、[判断题]Ⅰ类放射源为极高危险源。在没有防护情况下，接触这类源几分钟到1 小时就可致人死亡。（分值1.0） 你的答案：正确 14、[判断题]使用手提灭火器时，拨掉保险销，握住胶管前端，对准燃烧物根部用 力压下压把，灭火剂喷出，左右扫射，就可灭火。（分值1.0） 你的答案：正确 15、[判断题]实验大楼出现火情时千万不要乘电梯，因为电梯可能因停电或失控，同 时又因“烟囱效应”，电梯井常常成为浓烟的流通道。（分值1.0） 你的答案：正确 16、[判断题]火灾对实验室构成的威胁最为严重，最为直接。应加强对火灾三要素（易 燃物、助燃物、点火源）的控制。（分值1.0） 你的答案：正确 17、[判断题]灭火器按其移动形式可分为：手提式和推车式。（分值1.0） 你的答案：正确 18、[判断题]不得堵塞实验室逃生通道。（分值1.0） 你的答案：正确 19、[判断题]液体着火时，应用灭火器灭火，不能用水扑救或其它物品扑打。（分 值1.0） 你的答案：正确 20、[判断题]岗位消防安全“四知四会”中的“四会”是指：会报警，会使用消防器 材，会扑救初期火灾，会逃生自救（分值1.0） 你的答案：正确 21、[判断题]身上着火被熄灭后,应马上把粘在皮肤上的衣物脱下来。（分值1.0）你的答案：正确标准答案：错误
生物实验中的注意事项 无论做那一个实验，如果选取的材料不适合，或者取材部位不适合；或者实验操作不规范；或者实验结果没有取平均值；或者实验过程不彻底等等都会影响本个实验。这些都是我们做每一个实验应该注意的问题，比如在以下实验中：在“观察植物细胞”的实验中。 1在“观察植物细胞”的实验中 给学生分发的洋葱鳞片，应放在事先盛有清水的烧杯中，以免材料失水，还可以用番茄、苹果果肉细胞、鸭跖草叶表皮、花瓣表皮等作材料制成临时装片用于观察。 2在“观察动物细胞”的实验中 2.1取材前口腔一定要用清水漱净，所用的牙签一定是灭菌的，给学生做取材示范时，应告诉学生怎样操作才不会刮破口腔粘膜。 2.2取材部位以口腔两侧颈部为好，因为在这一部位能取到时较多的口腔上皮细胞，而在口腔顶壁取得的上皮细胞数较少。 2.3 选取适宜的染液浓度才能将口腔上皮细胞的细胞质、细胞核和细胞膜较明显地显示出来，染液过浓时，细胞失水收缩变形，影响观察。 2.4盖玻片要轻拿轻放，擦盖玻片时应把它放在两层纱布中间，用食指、拇指夹住轻轻擦干，用力一定要均匀才不至破碎，取用玻片时要用镊子夹取盖玻片，或用食指和拇指握住载玻片的侧壁。 2.5制片时不要有气泡产生，玻片上的标本始终应浸在液体中，当液体过多时，必须用吸水纸吸去多余的液体，如果液体不足时，容易产生气泡，这时应在盖玻片一侧加一滴水，让水慢慢流入以排出气泡。 2.6由于制片关系，在视野中可能出现多个口腔上皮细胞重叠在一起，模糊不清，或细胞折边等现象，因此需寻找分离的、完整的细胞进行观察。 3在“食物能量的测定”实验中 3.1在对每种食物进行重复实验时，应注意每次在试管里换上新鲜的水，并求出多次测量的平均温度，所用的水应与室温相同，避免吸热或散热时测量水温产生误差。 3.2同一物质燃烧所测出的数据如果出现差异，主要原因是燃烧程度不尽一至。因此，要注意称取的食物质量不宜过大，计算时要换算成1克食物的质量。
USP<1090>体内生物等效性试验指南第一部分 背景 该章节提出进行药物制剂性能体内及体外评估的有关建议。该章节提供指导目的是为科学家或医师欲通过找到可以替代与人体临床试验相关或临床试验前研究的方法，用于评估药物制剂性能。USP-NF提供原料药、辅料以及成品的质量标准。法定物质或制剂的USP-NF中每一个品种正文均对应一个官方批准的原料药或制剂。品种正文包括产品定义；包装，储存条件；以及质量标准内容。质量标准包括一系列通用的检查（性状、鉴别、杂质、含量测定）以及特定的检查项目，每个检查具有一个或多个分析方法以及限度要求。质量标准是药物制剂不可或缺的重要属性。满足USP-NF的标准，在全球范围内均可作为高质量药物制剂的保障，并且是生物等效性（BE）、可替代的多来源药物制剂获批的必要要求。多来源药物制剂（Multisource drugproducts）必须达到体内及/或体外试验特性标准，以确认具有治疗等效性及可替代性。在不同的国家，可替代的多来源药物制剂的法规获批情况是不同的（参考即将颁布的章节《药物制剂选择的要点Essentials for DrugProduct Selection》（1096）仍在议）。药物制剂（drug performance）可被定义为活性成分（API）从药物制剂中的释放，产生API的体内利用度可以获得理想的疗效。该章节讨论了决定药物制剂特性的体内及体外方法，重点讨论口服固体制剂方面。 该章节参考了FDA指导原则，《行业指导原则-口服制剂生物利用度及生物等效性研究-基本研究Guidance forIndustry—Bioavailability and Bioequivalence Studies for Orally AdministeredDrug Products—General Considerations（2003）》(https://www.doczj.com/doc/7015960643.html,/;请以文件名检索)，以及WHO文件，《附录7 多来源（仿制）药物制剂：建立可替代性注册要求的指导原则Annex7 Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on RegistrationRequirements to Establish Interchangeability（2006）》(http://who.int/en/;请以文件名检索)。FDA 的指导原则主要适合于在美国境内使用；各国家/地区药物制剂监督机构可以使用WHO、FDA和其他由国家/地区的指南。一旦获得批准，药物制剂质量控制可以在一定程度上由内部或公开标准进行，包括性能检查。USP提供了以下通则，描述了这些检查及实施步骤：《崩解度》<701>、《溶出度》<711>、《药物释放》<724>，《药物制剂的体内及体外评价》<1088>以及《溶出度实验方法的建立和验证》（1092）。 该章节提供了生物等效性（BE）研究以及溶出曲线对比实施的通用信息，BE研究作为体内药物制剂特性检查的替代方法，溶出曲线对比作为体外药物制剂特性检查的方法。该章节还讨论了针对特定药物制剂的体内BE豁免条件，并且叙述了如何应用生物药剂学分类系统（BCS）进行药物制剂性能的预测。该章节的附件定义了关键科学术语，并提供了FDA及WHO药物制剂释义评估的对比。 生物利用度，生物等效性以及溶出度 生物利用度（BA）研究主要是测定药物从口服制剂中释放并到达作用部位的过程及速度（参见FDA指导原则《行业指导原则-口服制剂生物利用度及生物等效性研究-基本研究Guidancefor Industry—Bioavailability and
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/7015960643.html, 组织开展生物实验的几点注意事项 作者：徐兴权 来源：《南北桥·人文社会科学学刊》2015年第07期 【摘要】实验是高中生物课不可缺少的一部分。组织开展生物实验时，教师不仅需要做 好前期的准备，还要在实验的过程中留意各个注意事项。实验结束之后，及时总结每次实验的经验教训也是必需的。 【关键词】高中生物实验理论分工合作实验报告 中图分类号：G4 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1672-0407.2015.07.144 实验不仅是高中不可或缺的一部分，也是深受学生们欢迎和喜爱的一个版块。组织好每一次的实验，对于激发学生兴趣、锻炼学生的动手操作实力都是有积极意义的。目前，我们的生物课教学时间原本就有限，分到实验上的就更少了。因此，我们要么不轻易组织实验，要么就力争取得最理想的实验效果。理想的实验效果的取得，需要教师始终留意一些注意事项，归结起来，可以划分为实验前、实验中和实验后的各个注意事项。 一、实验前的注意事项 学生们接触生物实验的机会不多，因此，每一次的实验课都是十分珍贵的。在组织实验之前，只有认真做好前期的准备工作，才可以达到较为理想的实验效果。具体说来，应该注意以下三个方面的问题。 1.要在理论方面做好充足的准备。理论是实验的基础，包括实验过程中的原理、操作步骤等等，学生都可以从前期的课本知识学习中找到答案。但是，如果教师要针对某一章节的内容组织实验，那么在理论教学的时候多讲一些跟实验相关的内容是很必要的。这既是一个做铺垫的过程，也帮助学生在实验的时候更加顺利。如果是操作起来比较复杂的实验，教师就需要不止一次的讲授相关的理论知识。 2.要选定最适合学生操作的实验。生物实验有很多，有限的实验机会，我们选择最适合学生操作的实验是很关键的。首先，在实验难度上，既不能过高，也不可太低。过高，学生操作起来遇到的问题就很多，整个实验的流程就不顺畅。难度太低了，学生容易高估自己的实验水平，轻视实验课，进而贻误了锻炼操作能力的最佳时机。其次，尽量选取一些比较有趣的实验主题也是很必要的。虽然说实验本身就是有吸引力的，但是，为了取得最佳的实验效果，尽量选择一些学生们最感兴趣的主题实验很必要。进行这一准备时，教师为了更加精准地把握学生的心理，与学生进行直接的交流也是可以的。 3.要精心设计实验的每一个环节。实验教学与普通的教学存在差别，有很多的不可控因素会影响整个实验的进度。所以，在组织实验之前，针对实验的每一个环节、甚至说每一个细节