试剂：
乙酸铵溶液，[c(CH3COONH4)=1 mol2L-1]：称取77.08g乙酸铵溶于近1L
水中，用稀乙酸(CH3COOH)或氨水(1：1)(NH32H2O)调节PH值为7.0，用水稀
释至1L。该溶液不宜久放；
钾标准溶液[ρ(K)=100μg2mL-1]：称取在110℃烘2h的氯化钾(优级
纯)0.1907g，用水溶解后定容至1L，贮于塑料瓶中保存。（乙酸铵的钾标准溶
液不能久放，以免长霉影响测定结果）
分析步骤：
称取通过2mm孔径筛的风干试样5.00g于200mL塑料瓶中，加入50.00mL乙
酸铵溶液(土液比为1：10)，盖紧瓶塞，摇匀，在15℃~25℃下，
150r/min~180r/min振荡30min，干过滤。滤液直接在火焰光度计上测定或经适当稀释后用原子吸收分光光度计测定。同时做空白试验。（若样品含量过高需要稀释时，应采用乙酸铵浸提剂稀释定容，以消除基体效应）
标准曲线的绘制：分别吸取100μg2mL-1的钾标准溶液0.00、3.00、6.00、9.00、12.00、15.00mL于50mL容量瓶中，用乙酸铵溶液定容，即为浓度0、6、12、18、24、30μg2mL-1的钾标准系列溶液。以钾浓度为零的溶液调节仪器
零点，用火焰光度计或原子吸收分光光度计测定，绘制标准曲线或求回归方程。
试剂：
无磷活性碳粉：如所用活性含磷，应先用1：1盐酸溶液浸泡24h，然后移
至平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无Cl-为止(约4~5次)，再用碳酸氢钠浸提
剂浸泡24h，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘
干备用；
氢氧化钠溶液[ρ(NaOH)=100g2L-1]：称取10g氢氧化钠溶于100mL水中；
碳酸氢钠浸提剂[ρ(NaHCO3)=0.5mol2L-1，PH=8.5]称取42.0g碳酸氢钠(NaHCO3)溶于约950mL水中，用100g2L-1氢氧化钠溶液调节PH至8.5(用酸度
计测定)，用水稀释至1L。贮存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正PH；
酒石酸锑钾溶液[ρ(K(SbO)C4H4O6212H2O)=3g2L-1]：称取0.3酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100mL；
钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵[(NH4)6Mo7O2424H2O]溶于300mL约60℃
水中，冷却。另取181mL浓硫酸缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀
硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100mL3 g2L-1酒石酸锑钾溶液，最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用；
钼锑抗显色剂：称取0.5g抗坏血酸(C6H8O6左旋，旋光度+21~22°)溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，应用时现配。
磷标准贮备液[ρ(P)=100μg2mL-1]：准确称取经105℃下烘干2h的磷酸
二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至
1000mL。该溶液放入冰箱可供长期使用；
磷标准标准液[ρ(P)=5μg2mL-1]：吸取5.00mL磷标准贮备液于100mL容
量瓶中，定容。该溶液用时现配。
实验方法：
称取通过2mm孔径筛的风干试样2.50g，置于200mL塑料瓶中，加入约1g
无磷活性炭，加入25℃±1℃的碳酸氢钠浸提剂50.0mL，摇匀，在25℃±1℃
温度下，于振荡器上用180r/min±20r/min的频率振荡30±1min，立即用无磷
滤纸过滤于干燥的150mL三角瓶中。
吸取滤液10.00mL于25mL比色皿中，加入显色剂5.00mL，慢慢摇动，排
后加水定容至刻度，充分摇匀。在室温高于20℃处放置30min，用空白
出CO
2
溶液(以10.00mL碳酸氢钠浸提剂代替土壤浸提液，同上处理)为参比，用1cm
光径比色皿在波长700nm处比色，测量吸光度。
标准曲线绘制：吸取磷标准溶液[ρ(P)=5μg2mL-1]0、0.5、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00mL于25mL比色管中，加入浸提剂10.00mL，显色剂5mL，慢
慢摇动，排出CO2后加水定容至刻度。此标准系列溶液中磷的浓度依次为0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60μg2mL-1。在室温高于20℃处放置
30min后，按上述样品待测液分析步骤、条件进行比色，测量吸光度，绘制标
准曲线或计算回归方程。
土壤有效氮测定
试剂：
1.8mol/L的NaOH：称取7
2.0g NaOH溶于水中，冷却后稀释至1 L。
1.20mol/L的 Na0H：称取48g NaOH溶于水中，冷却后稀释至1L。
2％的硼酸溶液：称取硼酸20g，溶于水中，稀释至1L。
混合指示剂溶液：称取0.50g溴甲酚绿和0.10g甲基红于玛瑙研钵中，加入少量5％的乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95％乙醇至100ml。贮于棕色瓶中。
锌一硫酸亚铁还原剂：称取50gFeSO
4
及1g锌粉(可省去)磨细，并通过0.25筛孔，装入棕色瓶中，存于阴凉处。
碱性胶液：称取40g阿拉伯胶(可用明胶代替)放入装有50ml水于烧杯中，温
热至70～80℃搅拌促溶(水浴加热)，冷却约1h，加入20ml甘油和20ml饱和K
2CO
3
水溶液，搅匀放冷，离心除去泡沫及不溶物，将清液贮于玻璃瓶中备用。
0．10molL- 盐酸标准溶液：（配制）量取9ml盐酸，注入1L水中。
（标定）称取0．20g(精确至0．0001g)于270～300℃灼烧至恒量的基准无水碳酸钠，溶于50ml水中，加10滴溴甲酚绿一甲基红混合指示剂，用
0．10molL-r盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2rain，冷却后继续滴定至溶液呈暗红色。同时做空白试验。盐酸标准溶液准确浓度按下式计算：C：roy[(V 一V2) O．05299
操作步骤：
称取通过0,25mm筛孔的风干土样2 确到o．oo1~和1g硫酸亚铁粉剂均匀铺在扩散皿外室，水平地轻轻旋转扩散皿，使土样铺平。
在扩散皿的内室中，加入2ml2％含的硼酸溶液，再加1滴定氮混合指示剂。然后在扩散皿的外室边缘涂上碱性胶液，盖上毛玻璃，旋转数次，使毛玻璃与扩散皿边缘完全粘合，然后小心地用橡皮筋二根交叉成十字形圈紧。再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿外室露出一条狭缝，迅速加入1 0mL 1．20molL NaOH液于扩散皿的外室中，立即将毛玻璃旋转盖严。
在实验台上水平地轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀；随后小心放入40％的恒温箱中。
24h后取出，用微量滴定管以0．01molL 的盐酸(或硫酸)标准液滴定扩散四内室硼酸液中吸收的氨量，其终点为颜色由蓝色变为紫红色。滴定时应用细玻璃棒搅动内室溶液，不宜摇动扩散皿，以免溢出。
在样品测定的同时，另取一扩散皿，做空白试验，不加土壤，其他步骤与有土壤的相同。再加上参备样。
土壤水解性氮的测定(碱解扩散法) 土壤水解性氮，包括矿质态氮和有机态氮中比较易于分解的部分。其测定结果与作物氮素吸收有较好的相关性。测定土壤中水解性氮的变化动态，能及时了解土壤肥力，指导施肥。测定原理 在密封的扩散皿中，用1.8mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液水解土壤样品，在恒温条件下使有效氮碱解转化为氨气状态，并不断地扩散逸出，由硼酸(H3BO3)吸收，再用标准盐酸滴定，计算出土壤水解性氮的含量。旱地土壤硝态氮含量较高，需加硫酸亚铁使之还原成铵态氮。由于硫酸亚铁本身会中和部分氢氧化钠，故需提高碱的浓度(1.8mol/L，使碱保持 1.2mol/L 的浓度)。水稻土壤中硝态氮含量极微，可以省去加硫酸亚铁，直接用1.2mol/L氢氧化钠水解。 操作步骤 1.称取通过18号筛(孔径1mm)风干样品2g(精确到0.001g)和1g硫酸亚铁粉剂，均匀铺在扩散皿外室内，水平地轻轻旋转扩散皿，使样品铺平。(水稻土样品则不必加硫酸亚铁。) 2.用吸管吸取2%硼酸溶液2ml，加入扩散皿内室，并滴加1滴定氮混合指示剂，然后在皿的外室边缘涂上特制胶水，盖上毛玻璃，并旋转数次，以便毛玻璃与皿边完全粘合，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一条狭缝，迅速用移液管加入10ml1.8mol/L氢氧化钠于皿的外室(水稻土样品则加入10ml1.2mol/L氢氧化钠)，立即用毛玻璃盖严。 3.水平轻轻旋转扩散皿，使碱溶液与土壤充分混合均匀，用橡皮筋固定，贴上标签，随后放入40℃恒温箱中。24小时后取出，再以0.01mol/LHCl标准溶液用微量滴定管滴定内室所吸收的氮量，溶液由蓝色滴至微红色为终点，记下盐酸用量毫升数V。同时要做空白试验，滴定所用盐酸量为V0。 结果计算 水解性氮(mg/100g土)= N×(V-V0)×14／样品重×100 式中： N—标准盐酸的摩尔浓度； V—滴定样品时所用去的盐酸的毫升数； V0—空白试验所消耗的标准盐酸的毫升数；14—一个氮原子的摩尔质量mg/mol； 100—换算成每百克样品中氮的毫克数。注意事项(1)滴定前首先要检查滴定管的下端是否充有气泡。若有，首先要把气泡排出。 (2)滴定时，标准酸要逐滴加入，在接近终点时，用玻璃棒从滴定管尖端沾取少量标准酸滴入扩散皿内。 (3)特制胶水一定不能沾污到内室，否则测定结果将会偏高。 (4)扩散皿在抹有特制胶水后必须盖严，以防漏气。主要仪器 扩散皿、微量滴定管、1/1000分析天平、恒温箱、玻璃棒毛玻璃、皮筋、吸管(2ml和10ml)，腊光纸、角匙、瓷盘。 试剂 (1)1.8mol/L氢氧化钠溶液。称取化学纯氢氧化钠72g，用蒸馏水溶解后冷却定容到1000ml。 (2)1.2mol/L氢氧化钠溶液。称取化学纯氢氧化钠48g,用蒸馏水溶解定容到1000ml。 (3)2%硼酸溶液。称取20g硼酸，用热蒸馏水(约60℃)溶解，冷却后稀释至1000ml，用稀盐酸或稀氢氧化钠调节pH至4.5(定氮混合指示剂显葡萄酒红色)。 (4)0.01mol/L盐酸标准溶液。先配制1.0mol/L盐酸溶液，然后稀释100倍，用标准碱标定。 (5)定氮混合指示剂。与土壤全氮的测定配法相同。 (6)特制胶水。阿拉伯胶(称取10g粉状阿拉伯胶，溶于15ml蒸馏水中)10份、甘油10份，饱和碳酸钾5份混合即成(最好放置在盛有浓硫酸的干燥器中以除去氨)。 (7)硫酸亚铁(粉状)。将分析纯硫酸亚铁磨细保存于阴凉干燥处。
一、植物全氮测定 （一）H2SO4-H2O2消煮法 1、适用范围 本方法不包括硝态氮的植物全氮测定,适合于含硝态氮低的植物样品的测定。 2、方法提要 植物中的氮、磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在。样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释出。消煮液经定容后,可用于氮、磷、钾的定量。采用H2O2为加速消煮的氧化剂,不仅操作手续简单快速,对氮、磷、钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N2气或氮的氧化物而损失。 3、试剂 （1）硫酸(化学纯,比重1.84); （2）30% H2O2(分析纯)。 4、主要仪器设备。消煮炉，定氮蒸馏器。 5、操作步骤 称取植物样品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g)装入100ml开氏瓶或消煮管的底部,加浓H2SO45ml,摇匀(最好放置过夜),在电炉或消煮炉上先小火加热,待H2SO4发白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加班10滴H2O2(3),再加热至微沸,消煮约7～10min,稍冷后重复加H2O2,,再消煮。如此重复数次,每次添加的H2O2应逐次减少, 消煮至溶液呈无色或清亮后,再加热10min,除去剩余的H2O2。取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容(V1)。用无磷钾的干滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差。 6、注释 （1）所用的H2O2应不含氮和磷。H2O2在保存中可能自动分解,加热和光照能促使其分解,故应保存于阴凉处。在H2O2中加入少量 H2SO4酸化,可防止H2O2分解。 （2）称样量决定于NPK含量,健状茎叶称0.5g,种子0.3g,老熟茎叶可称1g,若新鲜茎叶样,可按干样的5倍称样。称样量大时,可适当增加浓H2SO4用量。 （3）加H2O2时应直接滴入瓶底液中,如滴在瓶劲内壁上,将不起氧化作用,若遗留下来还会影响磷的显色。 （二）水杨酸-锌粉还原- H2SO4-加速剂消煮法 1、适用范围 包括销态氮的植物全氮测定,适合于硝态氮含量较高的植物样品的测定。 2、方法原理 样品中的硝态氮在室温下与硫酸介质中的水杨酸作用,生成硝基水杨酸,再用硫代硫酸钠及锌粉使硝基水杨酸还原为氨基水杨酸.然后按 H2SO4-加速剂消煮法进行消煮法进行消煮样品,使样品中全部氮转化为铵盐。 3、试剂 （1）固体Na2S2O3; （2）还原锌粉(AR); （3）水杨酸-硫酸:30g水杨酸溶于1L浓硫酸中。也可以该用含苯酚的浓硫酸:40g苯酚溶于1L浓硫酸中。 4、仪器设备。同上。 5、操作步骤 称取磨细烘干样品(过0.25mm筛)0.1000～0.2000g或新鲜茎叶样品1.000～2.000g,置于100ml开氏瓶或消煮管中,先用水湿润内样品(烘干样),然后加水杨酸-硫酸10ml,摇匀后室温放置30min,加入Na2S2O3约1.5g,锌粉0.4g和水10ml,放置10 min,待还原反应完成后,加入混合加速剂2g,按土壤全氮测定方法进行消煮, 消煮完毕,取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容(V1)。用于滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮。每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差。 （三）消煮液中铵的定量(凯氏法) 1、适用范围。适合于各种植物样品消煮液中氮的定量。 2、方法原理
植株全氮的测定 1 主题内容与适用范围 本标准规定了植株全氮测定的硫酸-过氧化氢消煮、碱化后蒸馏定氮的方法。 本标准适用于禾本科植株全氮含量的测定。 2引用标准 GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 297-1995 有机肥料全氮的测定 3 方法原理 植株样品用浓硫酸加双氧水消煮，使有机氮转化为铵盐。铵盐经碱化后形成氨，经蒸馏将氨吸收到硼酸溶液中。以甲基红—溴甲酚绿为指示剂，用标准酸滴定，测定植株中的全氮含量（不包括全部硝态氮）。 4 试剂 所有试剂除注明者外，均为分析纯。分析用水应符合GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法三级水的规格。 4.1 硫酸（GB/T 625）。 4.2 30%过氧化氢（GB 6684）。 4.3氢氧化钠：40%，（m/V）溶液 称取40g氢氧化钠（GB 629 分析纯）溶于100mL水中。 4.4硼酸：2%（v/m）溶液 20g硼酸（GB 628）溶于1L约60℃去离子水中，冷却后再用稀碱调节溶液pH至4.5。使用前每升硼酸溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂20mL，并用稀酸或稀碱调节至微红色，此时该溶液的PH值为4.5。 4.5甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 0.5g溴甲酚绿(HG 3-1220)和0.1g甲基红(HG 3-958)于研钵中，加少量95%乙醇研磨至指示剂全溶为止，最后加95%的乙醇至100mL。 4.6硫酸标准液[c（1/2 H2SO4）=0.02mol/L]（GB 601）。 5 仪器 通常实验室仪器和 5.1消煮管：50mL或100mL。 5.2消煮炉或可调电炉：1000W。 5.3弯颈小漏斗：￠2cm。 5.4 凯氏定氮仪：全自动或半自动。 5.5分析天平：感量为0.1mg。 5.6移液管：5，10mL。 6 检试样的制备 取风干的实验室待测样品充分混匀后，按四分法缩减至100g，粉碎，籽粒全部通过0.
植株全氮、磷、钾测定方法 一、植物全氮测定 （一）H2SO4-H2O2消煮法 1、适用范围 本方法不包括硝态氮的植物全氮测定,适合于含硝态氮低的植物样品的测定。 2、方法提要 植物中的氮、磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在。样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释出。消煮液经定容后,可用于氮、磷、钾的定量。采用H2O2为加速消煮的氧化剂,不仅操作手续简单快速,对氮、磷、钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N2气或氮的氧化物而损失。 3、试剂 （1）硫酸(化学纯,比重; （2）30% H2O2(分析纯)。 4、主要仪器设备。消煮炉，定氮蒸馏器。 5、操作步骤 称取植物样品(称准至装入100ml开氏瓶或消煮管的底部,加少量水润湿，加浓H2SO45ml,摇匀(最好放置过夜),盖上弯劲漏斗，在电炉或消煮炉上先小火加热,待H2SO4发白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加1-5滴H2O2(3),再加热至微沸,消煮约7～10min,稍冷后重复加H2O2,,再消煮。如此重复数次,每次添加的H2O2应逐次减少, 消煮至溶液呈无色或清亮后,再加热10min,除去剩余的H2O2。取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容(V1)。每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差。
6、注释 （1）所用的H2O2应不含氮和磷。H2O2在保存中可能自动分解,加热和光照能促使其分解,故应保存于阴凉处。在H2O2中加入少量H2SO4酸化,可防止H2O2分解。 （2）称样量决定于NPK含量,健状茎叶称,种子,老熟茎叶可称1g,若新鲜茎叶样,可按干样的5倍称样。称样量大时,可适当增加浓H2SO4用量。 （3）加H2O2时应直接滴入瓶底液中,如滴在瓶劲内壁上,将不起氧化作用,若遗留下来还会影响磷的显色。 （4）上机分析准备的试剂 指示剂溶液：取10ml指示剂储备液加入500ml容量瓶，加入4ml磷酸盐缓冲液。用蒸馏水定容。在分析前一天准备此试剂。（一般1L能分析200个样品） 4mol/LNaOH :在蒸馏水中溶解80g氢氧化钠并稀释定容至500ml.（一般1L能分析200个样品） 1000ppm N储备液;在1000ml容量瓶中溶剂氯化铵，并稀释定容。 分析标线梯度：0、5、10、15、20、25ppm （二）水杨酸-锌粉还原- H2SO4-加速剂消煮法 1、适用范围 包括销态氮的植物全氮测定,适合于硝态氮含量较高的植物样品的测定。 2、方法原理 样品中的硝态氮在室温下与硫酸介质中的水杨酸作用,生成硝基水杨酸,再用硫代硫酸钠及锌粉使硝基水杨酸还原为氨基水杨酸.然后按H2SO4-加速剂消煮法进行消煮法进行消煮样品,使样品中全部氮转化为铵盐。 3、试剂
土壤速效氮、磷、钾的测定 一. 土壤速效N 的测定（碱解扩散法） 1、原理：用1.0N 氢氧化钠水解土壤样品，使土壤潜在有效氮，转化为氨气状态，不断逸出，由硼酸吸收，用标准酸滴定，然后计算出水解性氮的含量。 2、仪器及试剂配制 主要仪器：扩散皿、半微量滴定管、恒温箱 试剂配制： （1）1.0N 氢氧化钠 称取化学纯氢氧化钠40克，用水解溶解后冷却定容1升。 （2）硼酸指示剂液 称取硼酸（H 3BO 3）20克加水900毫升稍稍加热溶解，冷却，加混合指示剂（0.099克溴甲酚绿和0.066克甲基红溶于100毫升乙醇中）20毫升，然后以0.1N 氢氧化钠调节溶液至红紫色（PH 约5.0）最后加入水稀疏至1000毫升，使溶液混合均匀，贮存于塑料瓶中。 （3）0.005mol/L （1/2H 2SO 4）标准溶液 量取H 2SO 4（化学纯）2.83mL ，加蒸馏水稀释至5000mL ，然后用标准碱或硼酸标定之，此为0.020mol/L （1/2H 2SO 4）标准溶液，再将此标准液准确地稀释4倍，即得0.005mol/L （1/2H 2SO 4）标准液。 （4）碱性胶液 取阿拉伯胶40.0g 和水50mL 在烧杯中热温至70～80℃。搅拌促溶，约1h 后放冷。加入甘油20mL 和饱和K 2CO 3水溶液20mL ，搅拌、放冷。离心除去泡沫和不溶物，清液贮于具塞玻瓶中备用。 3、操作步骤： 取通过60号筛的风干样品2.00克于扩散皿外室，水平的轻轻旋转扩散皿，使样品铺平。在扩散皿内室加入2%硼酸指示剂液2毫升，然后在扩散皿外室边缘涂上碱性甘油，盖上毛玻璃，并旋转数次，以使毛玻璃与皿边完全粘住，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿漏出一条缝，迅速加入1.0N 氢氧化钠5毫升于扩散皿外室，立即用毛玻璃盖好。水平轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，用橡皮筋固定，随后小心的放入40度的恒温箱中24小时取出，以0.01N 硫酸标准溶液滴定扩散皿内室硼酸溶液吸收的氨量，终点是由蓝绿色转变红紫色，记下所用的标准酸量（V ） 4、计算结果： 3c V-V N mg kg 10m ??-10（）14.0碱解氮（）含量 （）= 式中；c —0.005mol/L （1/2H 2SO 4）标准溶液的浓度； V —样品滴定时用去0.005mol/L （1/2H 2SO 4）标准溶液体积（mL ） ； V 0—空白试验滴定时用去标准液体积（mL ） 14.0—氮原子的摩尔质量（g·mol -1） W —样品质量（g ）；
比色法测定土壤中氨态氮、有效磷、速效钾 1. 实验仪器及药品 1.1 实验仪器：可见分光光度计、磁力搅拌仪、pH计、滴管。 2.2 所需药品：浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、无水硫酸钠、碳酸氢钠、无磷活性炭、酒石酸钾钠、阿拉伯胶、碘化钾、氯化汞、氢氧化钾、酒石酸钠、钼酸铵、氯化亚锡、甘油、五水硫酸铜、酒石酸、EDTA-Na2、四笨硼钠、磷酸二氢钾、硫酸氨、硝酸钾、硫酸钾。 2. 实验试剂配制： 2.1 (1+9）硫酸溶液：1体积硫酸+9体积水 2.2 (1+1)盐酸溶液：盐酸与水1:1混合 2.3 氢氧化钠溶液：100g/L 2.4 联合浸提剂：称取无水硫酸钠5 3.12g，碳酸氢钠37.8g，溶于800mL水中，用（1+9）硫酸或氢氧化钠溶液将pH值调至8.5，蒸馏水定容至1000mL。 2.5 无磷活性炭 2.6 氨态氮掩蔽剂：400g/L酒石酸钾钠溶液。 2.7 氨态氮助色剂：50g/L阿拉伯胶溶液。 2.8 氨态氮显色剂：称取碘化钾50g溶于50mL水中，边搅拌边加入饱和氯化汞溶液，直至出现少量的紫红色沉淀充分搅拌后不溶解为止。缓缓加入氢氧化钾150g，搅拌使其溶解，定容至1000mL，转移到大烧杯中静置过夜，取上清液。 2.9 氨态氮强色剂：300g/L氢氧化钠溶液。 2.10 有效磷掩蔽剂：10g/L酒石酸钠溶液。 2.11 有效磷显色剂：35g/L钼酸铵溶液:量取146mL浓硫酸，溶于500mL水中，冷却；另取35g钼酸铵溶于200mL水中；将硫酸缓缓倒入钼酸铵溶液中，边加边搅拌，最后加水定容至1000mL。 2.12 有效磷还原剂：20g/L氯化亚锡甘油溶液：称取氯化亚锡20g溶于100mL盐酸中，充分溶解后转入1000mL容量瓶中，用甘油定容至1000mL。 2.13 速效钾掩蔽剂：称取五水硫酸铜5g，酒石酸12g，溶于500mL 水中，加入浓硫酸200mL，冷却后定容至1000mL。 2.14 速效钾助掩剂：75g/LEDTA-Na2溶液。
硝态氮 30分钟后，提取液中硝氮测定 水中硝态氮的测定（紫外分光光度法） ?主要试剂： (1)0.100mg/ml硝酸盐氮标准储备液(购置或自配)：称取0．7218g硝酸钾(经105—110℃烘4小时)溶于水中，移至1000毫升容量瓶中用水稀释至标线。 (2)盐酸溶液：C (HCl) =lmol／L(盐酸系优级纯) ?标准曲线的绘制 向6支100ml0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，其相应浓度为0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mg／L)。按水样测定相同步骤测量吸光度。根据220nm 与二倍275nm ? 用 光度计上，测定水样在220nm 及275nm波长处的吸光度。 ?结果计算 校正吸光度计算：Ar=A220nm-2A275nm 式中：Ar——校正吸光度；A220nm——220nm波长处测得的吸光度； A275nm——275nm波长处测得的吸光度 由标准曲线算出相应水样硝态氮含量。 氨态氮 2 mol·L-1KCl浸提—蒸馏法 方法原理用2mol·L-1KCl浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO（MgO是弱碱，有防止浸出液中酰铵有机氮水解的可能）蒸馏。蒸出的氨以H3BO3吸收，用标准酸溶液滴定，计算土壤中的NH4+—N含量。 主要仪器振荡器、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管（5mL）。 试剂 （1）20g·L -1硼酸—指示剂。20gH3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜久放。 （2）0.005 mol·L-11/2H2SO4标准液。量取H2SO4（化学纯）2.83mL，加蒸馏水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼酸标定之，此为0.0200 mol·L-1 (1/2H2SO4)标准溶液，再将此标准液准确地稀释4倍，即得0.005mol·L-11/2H2SO4标准液（注1）。 （4）120g·L MgO悬浊液MgO12g经500～600℃灼烧2h，冷却，放入100mL水中摇匀。 操作步骤
植株全氮磷钾测定方法 植株全氮的测定 1 主题内容与适用范围 本标准规定了植株全氮测定的硫酸-过氧化氢消煮、碱化后蒸馏定氮的方法。 本标准适用于禾本科植株全氮含量的测定。 2 引用标准 GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 297-1995 有机肥料全氮的测定 3 方法原理 植株样品用浓硫酸加双氧水消煮，使有机氮转化为铵盐。铵盐经碱化后形成氨，经蒸馏将氨吸收到硼酸溶液中。以甲基红—溴甲酚绿为指示剂，用标准酸滴定，测定植株中的全氮含量(不包括全部硝态氮)。 4 试剂 所有试剂除注明者外，均为分析纯。分析用水应符合GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法三级水的规格。 4.1 硫酸(GB/T 625)。 4.2 30%过氧化氢(GB 6684)。 4.3 氢氧化钠:40%，(m/V)溶液 称取40g氢氧化钠(GB 629 分析纯)溶于100mL水中。 4.4 硼酸:2%(v/m)溶液
20g硼酸(GB 628)溶于1L约 60?去离子水中，冷却后再用稀碱调节溶液pH至4.5。使用前每升硼酸溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂20mL，并用稀酸或稀碱调节至微红色，此时该溶液的PH值为4.5。 4.5 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 0.5g溴甲酚绿(HG 3-1220)和0.1g甲基红(HG 3-958)于研钵中，加少量95%乙醇研磨至指示剂全溶为止，最后加95%的乙醇至100mL。 4.6 硫酸标准液[c(1/2 HSO)=0.02mol/L](GB 601)。 24 5 仪器 通常实验室仪器和 5.1 消煮管:50mL或100mL。 5.2 消煮炉或可调电炉:1000W。 5.3 弯颈小漏斗:,2cm。 5.4 凯氏定氮仪:全自动或半自动。 5.5 分析天平:感量为0.1mg。 5.6 移液管:5，10mL。 6 检试样的制备 取风干的实验室待测样品充分混匀后，按四分法缩减至100g，粉碎，籽粒全部通过 1 0. 25mm(秸秆通过0.5mm)孔径筛，装入样品瓶备用。 7 分析步骤 7.1 试样溶液制备 称取试样0.5g，精确至0.001g，置于50ml消煮管(5.1)中(勿将样品粘附在瓶颈上)。先滴入少些水湿润样品，然后加8mL硫酸(4.1)，轻轻摇匀并放置过夜。在
土壤氮磷钾检测仪对土壤中氮磷钾的测定植物生长需要很多元素，其中氮磷钾是植物所需元素中需求量比较大的三种元素，主要是通过施肥的方式来对植物进行养分补充的，因此，氮磷钾也被称为是肥料的三要素。不过经调研人员调查发现，在实际农业生产中，有很多农业种植者普遍反映存在着这样一种情况，那就是在田间施用了大量的肥料之后，作物依然不能得到很好的发育，眼看着种植成本不断增加，作物的产量却得不到提升，这是怎么回事呢？最终经研究分析发现，是因为不合理施肥造成的。而简单有效的解决方法就是对该农田土壤肥料进行检测，通过检测分析土壤所需元素，进而进行合理施肥，那么，对土壤中的氮磷钾该如何检测呢？可以用土壤氮磷钾检测仪。 土壤氮磷钾检测仪是一款专门用来检测土壤、植株、化学肥料、生物肥料等样品中的速效氮、有效磷、速效钾等元素的一款仪器。据了解，该仪器的投入和使用，种植大户可量身定制肥料为土地进补，使得土壤检测更加的便捷。并且检测完成后，该仪器会根据即将种植的农作物来生成配方，同样的地块，农作物的品种不用，所需要的肥料配方也不相同，量身定制肥料配方能做到更精细、更准确地施肥。相对于这样快捷的土壤养分检测方法，传统的检测方法则耗时较长，少则半年，多则一年，等检测结果出来后再进行配肥，可能土壤的养分含量又发生改变，导致不准确，检测成本也相对较高，不适用于所有农户。 托普云农研发生产的TPY-8A土壤氮磷钾检测仪具有多种功能特点，凭借其自身的优势广泛应用于各级农业检测中心、农业科研院校、肥料生产、农资经营、农技服务、种植基地等领域。利用土壤氮磷钾检测仪搞好测土配方施肥，提高科学施肥水平，不仅能够稳定增产、节本增效、提高农产品质量，还能够保护生态环境、促进农业持续发展。
土壤的阳离子交换 土壤的阳离子交换性能是由土壤胶体表面性质所决定，由有机质的交换基与无机质的交换基所构成，前者主要是腐殖质酸，后者主要是粘土矿物。它们在土壤中互相结合着，形成了复杂的有机无机胶质复合体，所能吸收的阳离子总量包括交换性盐基(K+、Na+、Ca++、Mg++)和水解性酸，两者的总和即为阳离子交换量。其交换过程是土壤固相阳离子与溶液中阳离子起等量交换作用。 阳离子交换量的大小，可以作为评价土壤保水保肥能力的指标，是改良土壤和合理施肥的重要依据之一。 测量土壤阳离子交换量的方法有若干种，这里只介绍一种不仅适用于中性、酸性土壤，并且适用于石灰性土壤阳离子交换量测定的EDTA—铵盐快速法。 方法原理采用0.005mol/LEDTA与1mol/L的醋酸铵混合液作为交换剂，在适宜的pH 条件下(酸性土壤pH7.0，石灰性土壤pH8.5)，这种交换络合剂可以与二价钙离子、镁离子和三价铁离子、铝离子进行交换，并在瞬间即形成为电离度极小而稳定性较大的络合物，不会破坏土壤胶体，加快了二价以上金属离子的交换速度。同时由于醋酸缓冲剂的存在，对于交换性氢和一价金属离子也能交换完全，形成铵质土，再用95%酒精洗去过剩的铵盐，用蒸馏法测定交换量。对于酸性土壤的交换液，同时可以用作为交换性盐基组成的待测液用。 主要仪器架盘天平(500g)、定氮装置、开氏瓶(150ml)、电动离心机(转速3000—4000转/分)；离心管(100ml)；带橡头玻璃棒、电子天平(1/100)。 试剂 (1)0.005mol/LEDTA与1mol/L醋酸铵混合液：称取化学纯醋酸铵77.09克及EDTA1.461克，加水溶解后一起冼入1000ml容量瓶中，再加蒸溜水至900ml左右，以1：1氢氧化铵和稀醋酸调至pH至7.0或pH8.5，然后再定容到刻度，即用同样方法分别配成两种不同酸度的混合液，备用。其中pH7.0的混合液用于中性和酸性土壤的提取，pH8.5
试剂： 乙酸铵溶液，[c(CH3COONH4)=1 mol2L-1]：称取77.08g乙酸铵溶于近1L 水中，用稀乙酸(CH3COOH)或氨水(1：1)(NH32H2O)调节PH值为7.0，用水稀 释至1L。该溶液不宜久放； 钾标准溶液[ρ(K)=100μg2mL-1]：称取在110℃烘2h的氯化钾(优级 纯)0.1907g，用水溶解后定容至1L，贮于塑料瓶中保存。（乙酸铵的钾标准溶 液不能久放，以免长霉影响测定结果） 分析步骤： 称取通过2mm孔径筛的风干试样5.00g于200mL塑料瓶中，加入50.00mL乙 酸铵溶液(土液比为1：10)，盖紧瓶塞，摇匀，在15℃~25℃下， 150r/min~180r/min振荡30min，干过滤。滤液直接在火焰光度计上测定或经适当稀释后用原子吸收分光光度计测定。同时做空白试验。（若样品含量过高需要稀释时，应采用乙酸铵浸提剂稀释定容，以消除基体效应） 标准曲线的绘制：分别吸取100μg2mL-1的钾标准溶液0.00、3.00、6.00、9.00、12.00、15.00mL于50mL容量瓶中，用乙酸铵溶液定容，即为浓度0、6、12、18、24、30μg2mL-1的钾标准系列溶液。以钾浓度为零的溶液调节仪器 零点，用火焰光度计或原子吸收分光光度计测定，绘制标准曲线或求回归方程。
试剂： 无磷活性碳粉：如所用活性含磷，应先用1：1盐酸溶液浸泡24h，然后移 至平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无Cl-为止(约4~5次)，再用碳酸氢钠浸提 剂浸泡24h，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘 干备用； 氢氧化钠溶液[ρ(NaOH)=100g2L-1]：称取10g氢氧化钠溶于100mL水中； 碳酸氢钠浸提剂[ρ(NaHCO3)=0.5mol2L-1，PH=8.5]称取42.0g碳酸氢钠(NaHCO3)溶于约950mL水中，用100g2L-1氢氧化钠溶液调节PH至8.5(用酸度 计测定)，用水稀释至1L。贮存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正PH； 酒石酸锑钾溶液[ρ(K(SbO)C4H4O6212H2O)=3g2L-1]：称取0.3酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100mL； 钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵[(NH4)6Mo7O2424H2O]溶于300mL约60℃ 水中，冷却。另取181mL浓硫酸缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀 硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100mL3 g2L-1酒石酸锑钾溶液，最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用； 钼锑抗显色剂：称取0.5g抗坏血酸(C6H8O6左旋，旋光度+21~22°)溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，应用时现配。 磷标准贮备液[ρ(P)=100μg2mL-1]：准确称取经105℃下烘干2h的磷酸 二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至 1000mL。该溶液放入冰箱可供长期使用； 磷标准标准液[ρ(P)=5μg2mL-1]：吸取5.00mL磷标准贮备液于100mL容 量瓶中，定容。该溶液用时现配。
土壤中氮，钾，磷的测定方法研究进展 摘要：测定土壤中氮、磷、钾，对土壤肥力具有重要意义。本文综述了氮，磷，钾测定方法的特点和理化性质。联合测定方法，高效液相色谱法，开氏法，火焰原光度法，分光光度法，扩散定氮法，原子吸收法的测定方法及原理。 关键词：土壤，氮，钾，磷，测定方法 前言：氮、磷、钾、等大量元素，是植物生长发育不可缺少的，虽然作物对这些元素需要的量相差很大，但是它们对作物生长发育起的作用同等重要，而且不可相互代替。过多地使用某种营养元素，不仅会对作物产生毒害，还会妨碍作物对其它营养元素的吸收，引起缺素症[1]。 正文钾作为植物生长必需的大量元素，对农作物的高产、优质和抗
逆性有着举足轻重的作用。通常作物体内钾含量一般为干物质重的1％～5％，约占灰分重量的50％左右。作物吸钾量大而钾矿资源有限，使得我国农田土壤钾素多年来一直处于亏缺状态。只有土壤全钾量的变化在理论上能准确反应土壤钾素变化，但土壤全钾量远高于土壤中的有效钾量，其取样或测定误差即可掩盖土壤有效钾的变化量。基于我国农田土壤钾素普遍亏缺并日趋严重的现状，寻找一个准确测定土壤有效钾素变化的方法，对准确评估农田土壤钾素耗竭速率、预测我国钾肥的市场需求、指导钾肥的合理分配和平衡施用具有重要的意义[2]。 土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态氮两大类，其中95%以上为有机态氮，主要包括腐殖质、蛋白质、氨基酸等。小分子的氨基酸可直接被植物吸收，有机态氮必须经过矿化作用转化为铵，才能被作物吸收，属于缓效氮。土壤全氮中无机态氮含量不到 5%，主要是铵和硝酸盐，亚硝酸盐、氨、氮气和氮氧化物等很少。大部分铵态氮和硝态氮容易被作物直接吸收利用，属于速效氮。无机态氮包括存在于土壤溶液中的硝酸根和吸附在土壤颗粒上的铵离子，作物都能直接吸收。土壤对硝酸根的吸附很弱，所以硝酸根非常容易随水流失。在还原条件下，硝酸根在微生物的作用下可以还原为气态氮而逸出土壤，即反硝化脱氮。部分铵离子可以被粘土矿物固定而难以被作物吸收，而在碱性土壤中非常容易以氨的形式挥发掉。土壤腐殖质的合成过程中，也会利用大量无机氮素，由于腐殖质分解很慢，这些氮素的有效性很低。土壤中的氮素主要来自施
实验报告 课程名称： 土壤学实验 指导老师： 倪吾钟 成绩：__________________ 实验名称： 植物全氮、全磷、全钾含量的测定 同组学生姓名： 余慧珍 一、实验目的和要求 二、实验内容和原理 三、实验材料与试剂 四、实验器材与仪器 五、操作方法和实验步骤 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析 八、讨论、心得 一、 实验目的和要求 1. 掌握植物样品消煮液制备方法； 2. 掌握植物全氮、磷、钾的测定与结果分析。 二、 实验内容和原理 1. 植物样品消煮——H 2SO 4-H 2O 2消煮法 在浓H 2SO 4溶液中，植物样品经过脱水、碳化、氧化等作用后，易分解的有机物则分解。再加入H 2O 2 ，H 2O 2在热浓H 2SO 4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化 专业： 农资1202 姓名： 平帆 装订
作用，可继续分解没被H 2SO 4 破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。同时， 样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，植株中K以离子态存在。故可用同一消煮液分别测定N、P、K。 2.植株全氮的测定——靛酚蓝比色法 经消煮待测液中氮主要以铵态氮存在，被测物浸提剂中的NH4+，在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，其深浅与溶液中的NH4+－N含量呈正比，线性范围为之间。 3.植株全磷的测定——钒钼黄比色法 经消煮待测液中磷主要以磷酸盐存在，在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸—钒钼磷酸[1]。溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的含量成正相关。 4.植株全钾的测定——火焰光度计法 消煮待测液中难容硅酸盐分解，从而使矿物态钾转化为可溶性钾。待测液中钾主要以钾离子形式存在，用酸溶解稀释后即可用火焰光度计测定。 三、实验器材与仪器 样品：三叶草，取于东七教学楼南侧，研磨过18目筛备用； 试剂：浓硫酸、300g/l H 2O 2 、6mol/l NaOH溶液、%二硝基酚指示剂、酚溶液、次氯 酸钠溶液、铵标准溶液（准确称量经105℃干燥2h的氯化铵（NH 4 Cl），用少量水溶
以下实验步骤的适用原则“样品量大，测定快速，数据准确” 一、土壤全N、P、K测定方法 土样粒径采用：2mm 母液制取： 步骤： 称取土样于100ml三角瓶中，分别加入5ml浓硫酸和高氯酸（不需准确），盖上小漏斗，于红外消解仪上消解直至灰白色。取下三角瓶，冷却后全量转入50ml容量瓶中定容。 注： 1、尽量不要使土壤附着在瓶壁上，以免损失。 2、母液静置澄清后再使用。 3、消解时高氯酸要尽量赶完，后侧会影响后续测定。 4、消解20后若土样还没有变白，可以适量加入1~2滴高氯酸，切勿多加。 5、消解总时间大概40~60分钟，黑色碳渣粒无法变白，可不用管它。 6、全量测定顺序，全P和全K可同时测定，全N最后测定。 （一）全N 步骤： 倒取摇匀后的母液25ml（用25ml量筒量取即可），加入15ml 40%氢氧化钠（大概）蒸馏，溜液进入装有7ml硼酸吸收液的100ml三角瓶中，溶液变蓝，总体积在40~50ml 即可，最后用标准酸（高浓度/低浓度）滴定。 注： 1、氢氧化钠加入后溶液会变成棕红色（高氯酸没有赶完时，加入氢氧化钠后管中 溶液不会变色，此时应注意控制氢氧化钠加入量）。 2、控制管中液体总量在50ml以内。 3、40%氢氧化钠：用一整瓶均分成两份，分别在氢氧化钠的塑料瓶中配制，加水 至满即可。 4、记录标准酸浓度。 5、蒸馏时前面滴出来的溜液是最重要的，所以一定不能损失。 （二）全P 步骤： 吸取母液1ml于25ml容量瓶中，加水至1/3处，加入两滴二-六（或二-四）二硝基酚，然后用40%氢氧化钠（浓度自定，可高可低）调色至微黄（注意颜色的统一性），加入显色剂后定容，定容显色半小时后进行测定。 注： 1、钼锑抗储备液：称取20g钼酸铵放入1L烧杯中，加入200~300ml纯水溶解， 然后加入180ml浓硫酸。待上述溶液冷却后用量筒量取准确体积转移至另外一个1L烧杯中（转移时要把原烧杯洗净，洗液也全量转入，计算总体积）。称取酒石酸锑钾于量筒中，加入100ml纯水溶解（体积准确），待全部溶解后全量转入前面的1L烧杯中（计算总转入体积），最终控制溶液体积在1L，搅拌均匀后倒入棕色玻璃瓶中备用。 2、显色剂：称取抗坏血酸加入100ml钼锑抗储备液，搅拌均匀全量溶解即为显色 剂，现配现用，有效期为1天。冰箱储存。 3、磷标线：吸取2ml浓度为500ug /ml（或1ml浓度为1000ug /ml）的磷标液母液 于100ml容量瓶中定容，配制成10ug/ml的标液。分别吸取0、、、1、和2ml标液于25ml 容量瓶中，加显色剂定容显色即可。
土壤全氮磷钾快速测定实验方法 一般测定土壤全氮、磷、钾都是分开测定的，但是我们可以通过统一消煮、定容，然后再从定容液中分别取出一部分分别测定全氮、全磷、全钾，这样的话我们就节约了大量的时间。而且消煮好的消煮液可以放两三天而不会影响测定结果。 消化：称量0.25mm 土样1.0000g 于消化管中，加少量蒸馏水湿润，加5ml 浓硫酸，再加6~8滴高氯酸，消化至消化液呈亮蓝色，定容至100ml ，待用。 一、全N(半微量开氏法) 1 蒸馏定氮 将消化液定量转入蒸馏瓶中，加水至约200ml 。沿瓶内壁加30ml 浓碱，蒸馏20min ，以25mlH 3BO 3 溶液吸收(其中加2滴定氮混合指示剂)。 用硫酸标准溶液滴定。 同时做空白实验。 2 结果计算 ))(2 1(00.1400.14))(21(/)(0420421V V SO H c m V V SO H c kg g N -=?-=?-ω 二、全P 1.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml 容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸(定量试纸)将溶液滤入干燥的100ml 三角瓶中。同时做空白试验。 2.吸取滤液2—10ml 于50ml 容量瓶中，用水稀释至30ml ，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H 2SO 4)溶液调节pH 至溶液刚呈微黄色。 3.加入钼锑抗显色剂5ml ，摇匀，用水定容至刻度。 4.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm 的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P —mg/L 数。 5.工作曲线的绘制。分别吸取5mg/L 标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml 于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml ，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP 标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L 数为横坐标，绘制成工作曲线。
离心替代过滤，酶标仪替代分光光度计的土壤全磷测试方法 1.用万分之一天平，称取1g左右的风干土，记录下重量。 2.加入8ml浓硫酸，放置过夜后加入10滴高氯酸，消煮至白色。 3.在50ml消煮管中定容，可以先加水1/3，混匀后再加水至刻度线附近，放置过夜后再加水至刻度线，摇匀。 4.吸取1ml消煮液到1.5ml离心管中，10000rpm，离心1分钟。 5.吸取50ul上清液+750ul H2O+100ul NaOH(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中。 6.摇匀后，14000rcf离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色 备注：5.中吸取的上清液的量可根据显色状况调整，相应地NaOH的量也要做出调整，保证比色体系体积为1ml，氢离子浓度为0.55mol/L左右，每个样品做三个重复，重复间允许误差<0.005%即 50mg/kg。 磷酸二氢钾工作曲线制做方法 1.先将100mg/L(0.4394g KH2PO4(烘干2小时)先加水300ml，再加5ml浓硫酸，再定容到1L)的磷标贮液(磷酸二氢钾溶液)稀释20倍，比如吸取5ml定容到100ml 2.配制 3.摇匀后，10000rpm离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色 备注：利用散点图绘制曲线，添加趋势线和r值，r^2要大于0.999。利用forecast.line函数计算比
色液磷含量 钼锑抗配制方法 1.浓硫酸153ml加入500ml左右H2O(用1L的烧杯)，用磁力搅拌器搅匀 2. 1L烧杯中加入10g 钼酸铵,用磁力搅拌器融化 3. 0.5g酒石酸锑钾加入100ml左右H2O(用100ml的烧杯)，用磁力搅拌器溶化 4. 步骤3所得溶液倒入1L烧杯，在磁力搅拌器上混合均匀，定容到1L 备注：避光储存，使用时每10ml 加入0.15g抗坏血酸 二硝基酚溶液：0.2g 二硝基酚溶于100ml水中 离心替代过滤，酶标仪替代分光光度计的土壤有效磷(碳酸氢钠浸提)测定方法 1. 42g碳酸氢钠定容到1L，用4mol/L NaOH溶液(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)调节pH至8.5，得到浸提剂 2. 1.00g风干土加入50ml塑料管中，再加入0.1g活性炭粉，再加入20ml碳酸氢钠溶液， 20~25℃，180rpm，震荡30min 3.吸取1ml浸提液到1.5ml离心管中，10000rpm，离心1分钟 4.吸取200ul上清液+700ul H2O+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中 5.摇匀后，14000rcf，离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色 备注：吸取的上清液体积可以根据显色情况调整，保证比色体系1ml，每个样品做三个重复 植物组织全磷含量快速测定 1.将烘干后的植物组织样品磨碎，再将样品粉末继续烘干至恒重。 2.称取0.1g粉末放入50ml消煮管，加入5ml浓硫酸，盖上小漏斗，放置过夜，在300℃下，消煮
植株全氮、磷、钾测定方法一、植物全氮测定 （一）H 2SO 4 -H 2 O 2 消煮法 1、适用范围 本方法不包括硝态氮的植物全氮测定,适合于含硝态氮低的植物样品的测定。 2、方法提要 植物中的氮、磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在。样品经浓H 2SO 4 和氧 化剂H 2O 2 消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释 出。消煮液经定容后,可用于氮、磷、钾的定量。采用H 2O 2 为加速消煮的氧化剂, 不仅操作手续简单快速,对氮、磷、钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N 2 气或氮的氧化物而损失。 3、试剂 （1）硫酸(化学纯,比重1.84); （2）30% H 2O 2 (分析纯)。 4、主要仪器设备。消煮炉，定氮蒸馏器。 5、操作步骤 称取植物样品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g)装入100ml开氏瓶或消煮 管的底部,加浓H 2SO 4 5ml,摇匀(最好放置过夜),在电炉或消煮炉上先小火加热, 待H 2SO 4 发白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加班10滴 H 2O 2 (3),再加热至微沸,消煮约7～10min,稍冷后重复加H 2 O 2, ,再消煮。如此重复数 次,每次添加的H 2O 2 应逐次减少, 消煮至溶液呈无色或清亮后,再加热10min,除 去剩余的H 2O 2 。取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml容量瓶中,冷却至 室温后定容(V 1 )。用无磷钾的干滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差。 6、注释 （1）所用的H 2O 2 应不含氮和磷。H 2 O 2 在保存中可能自动分解,加热和光照能 促使其分解,故应保存于阴凉处。在H 2O 2 中加入少量H 2 SO 4 酸化,可防止H 2 O 2 分解。
土壤里氮磷钾的检测方法 一、土壤样品的采集与处理 为了能使测定的样品代表田间的养分状况，要求必须多点混合取样，切忌在田边、路边、沟边、粪堆旁或放化肥的地方等地点取样。取样的方法可采用对角线法、五点取样法、棋盘式取样法等。一般每块地至少要取五个样点，地块大时可多取些，取样深度一般以耕层（0—20cm） 为准，多点取到的样品应充分混合，按四分法弃去多余的部分，保留约半斤，拣去枯枝落叶、 残根、石硕等杂质，如有土块应研碎，作为分析化验的待测样品。一般土壤养分的快速测定以新鲜土样为宜。 1.土壤铵态氮的测定 用吸管分别吸取浸提剂2mL（作空白），浸提剂2mL+1 滴土壤养分混合标准储备液（作标准用），土壤待测液2mL 于三个小试管中，分别依次加入： 土壤铵态氮1 号试剂4 滴 土壤铵态氮2 号试剂4 滴 土壤铵态氮3 号试剂4 滴 摇匀，5 分钟后分别转移到比色皿中上机测定： ①拨动滤光片左轮使数值置1，置空白液于光路中，按“比色”键，功能号切换至1，按“调整＋”键或“调整－”键，使仪器显示100％。 ②将标准液置于光路中，按“比色”键，功能号切换至3，按调整键，
使仪器显示值为48.0。 ③再将待测液置于光路中，此时仪器读数即为土壤中铵态氮含量（mg/kg）。 2.土壤硝态氮的测定 用吸管分别吸取浸提剂2mL（作空白），浸提剂2mL+1 滴土壤养分混合标准储备液（作标准用），土壤待测液2mL 于三个小试管中，分别依次加入： 硝态氮1 号试剂4 滴（逐渐加入并摇动） 硝态氮2 号试剂10 滴 硝态氮3 号试剂1 滴（使用前剧烈摇动或70℃左右热水水浴3 分钟后摇动几下，使沉积物充分悬浮后加用） 振荡一分钟，静置15 分钟后分别转移到比色皿中，上机测定。 ①拨动滤光片左轮使数值置2，置空白液于光路中，按“比色”键，功能号切换至1，按“调整＋”键或“调整－”键，使仪器显示100％。 ②将标准液置于光路中，按“比色”键，功能号切换至3，按调整键，使仪器显示值为48.0。 ③再将待测液置于光路中，此时仪器读数即为土壤中硝态氮含量（mg/kg）。 [ 注1 ]硝态氮随水升降，主要分布在0～40cm 土层中，为了使测试结果更加符合土壤实际，建议采土深度取0～40cm，同时将计算时土重系数0.15 改为0.3。 [ 注2 ]测土壤水解氮时加还原剂者，不必再另测硝态氮。