一、名词解释
1 电泳
答案: 带电粒子在电场中向所带电荷相反的电极移动的现象。
2 蛋白质的一级结构
答案: 构成蛋白质分子的氨基酸在多肽链中的排列顺序和连接方式。
3 蛋白质的等电点
答案: 使蛋白质分子所带正、负电荷相等，即净电荷为零时的溶液pH值。
4 变构效应
答案: 蛋白质分子因与某种小分子物质（变构调节剂）相互作用，使构象发生轻度改变，生物学活性发生显著改变的现象。
5 蛋白质变性
答案: 蛋白质分子在某些理化因素作用下，特定的空间结构破坏，导致生物学活性丧失及理化性质改变的现象。
6 肽键
答案: 是一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基脱水缩合形成的化学键。
7 蛋白质的二级结构
答案: 指多肽链主链骨架中若干肽平面，各自沿一定的轴盘旋或折叠所形成的有规则的主链构象。
8 蛋白质的三级结构
答案: 多肽链在二级结构的基础上，氨基酸残基侧链基团的相互作用，使多肽链进一步盘旋和折叠整个分子形成很不规则的特定构象。
9 蛋白质的四级结构
答案: 由两个或两个以上具有独立三级结构的多肽链（亚基）借次级键聚集而成的复杂结构。
10 亚基
答案: 蛋白质分子四级结构中每条具有独立三级结构的多肽链。又称亚单位或单体。
11 蛋白质复性
答案: 变性蛋白在除去变性因素后，能恢复天然结构和功能的现象。
12 蛋白质沉淀
答案: 蛋白质分子聚集从溶液中析出的现象。
13 盐析
答案: 当盐浓度较高时，蛋白质的溶解度降低，从溶液中沉淀析出的现象。
14 盐溶
答案: 当盐浓度低时，随着盐浓度增加，蛋白质的溶解度增高的现象。
15 抗原
答案: 能刺激机体免疫系统发生反应，使机体产生抗体或形成致敏淋巴细胞，并能和这些抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
16 抗体
答案: 抗原刺激机体，通过特异性体液免疫反应产生的蛋白质，又称免疫球蛋白。
二、填空题
1 当溶液pH等于某种氨基酸的等电点时，其带__电；当溶液pH大于某种氨基酸的等电点时，其带__电；溶液pH小于某种氨基酸的等电点时，其带__电。
答案: 不带电（0），负电，正电
2 维持蛋白质一级结构的主要作用力为，维持蛋白质二级的主要作用力为，
三级结构的主要作用力主要有、等。
答案: 肽键，氢键，疏水键，盐键或氢键
3 组成蛋白质的氨基酸有种，它们大多是型α-氨基酸，除外都具有旋光性。但它们在可见光区一般都光吸收，但、和等三种芳香族氨基酸却具有明显的紫外光吸收能力，所以蛋白质在nm处有特征性的最大光吸收峰。
答案: 20，L，Gly，无，Tyr，Trp，Phe，280
4 在α-螺旋结构中，氢键与螺旋长轴是关系，在β-片层结构中，氢键与片层长轴是关系。
答案: 平行，垂直
5 盐浓度低时，盐的加入使蛋白质的溶解度__，称为___现象。当盐浓度高时,盐的加入使蛋白质的溶解度，称为现象。
答案: 增加，盐溶，降低，盐析
6 组成蛋白质的氨基酸主要有种，除为亚氨基酸外，其余都是α-氨基酸。
答案: 20，Pro
7 由甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸6种氨基酸残基组成的肽链中有个肽平面，有个游离羧基。
答案: 5，3
8 半胱氨酸是含基的氨基酸。
答案: -SH(巯基)
9 蛋白质分子结构包括结构和结构。
答案: 一级结构，空间结构（立体结构，三维结构，构象）
10 蛋白质的一级结构是由通过键连接而成的多肽链。
答案: L-氨基酸，肽键
11 蛋白质分子的基本组成单位是。蛋白质的一级结构维持作用力是。蛋白质的分子结构决定蛋白质的和。
答案: 氨基酸，肽键，生物学功能，理化性质
12 蛋白质二级结构主要有和形状，维持其稳定结构的化学键是。答案: α-螺旋，β-折叠，氢键
13 多肽链中含有游离α-氨基的一端叫末端，含有游离α-羧基的一端叫末端。
答案: 氨基（N）末端，羧基（C）末端
14 人体体液中蛋白质的等电点是左右，在组织和体液中解离为离子。
答案: 5.0，负
15 蛋白质亲水胶体稳定的两个基本因素是和。
答案: 水化层，同性电荷
16 维持蛋白质空间结构的次级键有、和等。
答案: 氢键，盐键，疏水键（或：配位键，德华力）
17 血浆清蛋白的等电点为4.6，在血液中带电荷，在电场中向极移动。
答案: 负，正极
18 常用沉淀蛋白质的方法有、、、和。
答案: 盐析沉淀，有机溶剂沉淀，加热沉淀，重金属盐沉淀，生物碱试剂沉淀
19 蛋白质的主要物理化学性质有、、、和、、。答案: 两性性质，胶体性质，变性性质，沉淀性质，光吸收性质，颜色反应，免疫学性质20 按照蛋白质化学成分将其分为和。结合蛋白质是由和
部分结合而成。
答案: 单纯蛋白，结合蛋白，蛋白部分，非蛋白
21 在一定条件下，带电粒子在电场中的泳动方向主要取决于带电粒子自身，而泳动速度主要取决于带电粒子的、以及。
答案: 电荷性质，带电量，分子大小，分子形状
24 当氨基酸处于等电状态时，主要是以离子的形式存在。
答案: 兼性
25 不是所有氨基酸在紫外光下都有光吸收，主要是______、______、和_____等有紫外吸收，其中以_____的紫外吸收能力最强。由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸，特别是含_____的量最多，所以蛋白质这个特性常用来。
答案: Trp，Tyr，Phe，Trp，Tyr,
26 蛋白质中的含量比较恒定，平均为。
答案: N,16%
27 “Amino acid”的中文意思是，“蛋白质”的英文为，“变性”的英文为，“复性”的英文为，“Salting in”的中文意思是。
答案: 氨基酸，Protein，Denaturation，Renaturation，盐溶
28 测得某生物样品蛋白质12.5克，该样品中含氮克。
答案: 2
29 写出下列氨基酸的三字和单字符号，或者三字符号所代表的氨基酸：脯氨酸/ ，His 。
答案: Pro，P，组氨酸
30 “盐析”的英文是，“抗原”的英文为，“抗体”的英文为。
答案: Salting out, Antigen, Antibody
三、判断题
2 变性后，蛋白质的溶解度增加，这是因为电荷被中和，以及水化膜破坏所引起的。
答案: 错误
3 变性后的蛋白质在一定条件下，有些还能复性，恢复其生物学功能。
答案: 正确
4 人体很多蛋白质的等电点在5.0左右，所以这些蛋白质在生理条件下的体液中以兼性离子形式存在。
答案: 错误
6 蛋白质分子的种类和差别，是由其空间结构决定的。
答案: 错误
7 蛋白质主要是由C、H、O、N四种元素组成。
答案: 正确
8 氨基酸通过肽键连接而成的化合物称为肽。
答案: 正确
9 天然蛋白质的基本组成单位主要是L-α-氨基酸。
答案: 正确
10 肽键(-CO-NH-)中的C-N键可自由旋转，使多肽链出现多种构象。
答案: 错误
11 蛋白质的空间结构是指链状结构和螺旋状结构及片层状结构。
答案: 错误
12 维持蛋白质二级结构的化学键是氢键及德华力。
答案: 错误
13 蛋白质一级结构对空间结构起决定作用，空间结构的改变会引起功能的改变。
答案: 正确
14 维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是氢键。
答案: 正确
15 蛋白质必须具有四级结构才具有生物活性。
答案: 错误
16 蛋白质四级结构中的每个亚基单独都具有生物活性。
答案: 错误
17 具有四级结构的蛋白质分子一定是由两条或两条以上的多肽链组成的。
答案: 正确
18 溶液中带电粒子在电场中向电性相同的电极移动，这种现象称为电泳。
答案: 错误
19 溶液pH值等于7时，蛋白质不带电荷。
答案: 错误
20 蛋白质在碱性溶液中羧基电离被抑制。
答案: 错误
21 加热、紫外线、X射线均可破坏蛋白质的空间结构。
答案: 正确
22 蛋白质分子可以电离成正、负离子，仅是由于溶液的pH值不同。
答案: 错误
23 肽键是共价键。
答案: 正确
24 血红蛋白具有四级结构，由4个亚基组成。
答案: 正确
25 当蛋白质处于等电点时，在电场中向正极迁移。
答案: 错误
26 人体体液多数蛋白质的等电点在5.0左右，所以这些蛋白质在体液中以负离子的形式存在。
答案: 正确
27 蛋白质分子不能透过半透膜。
答案: 正确
28 蛋白质的变性作用包括肽键和二硫键的断裂。
答案: 错误
29 沉淀的蛋白质总是变性的。
答案: 错误
31 蛋白质变性后，其氨基酸排列顺序并不发生变化。
答案: 正确
32 蛋白质的变性过程都是可逆的。
答案: 错误
33 蛋白质变性就是因为肽键断裂，改变了一级结构。
答案: 错误
34 有机溶剂沉淀蛋白质的原理是破坏了蛋白质颗粒的水化膜及肽键结构。
答案: 错误
35 变性的蛋白质其溶解度增加。
答案: 错误
36 饱和硫酸铵能使血浆中清蛋白析出。
答案: 正确
37 蛋白质分子净电荷为零时的溶液pH值是它的pI。
答案: 正确
38 结合蛋白中，蛋白质部分和辅基是通过肽键相连的。
答案: 错误
39 由一条肽链组成的蛋白质可以具有一级结构、二级结构和三级结构。
答案: 正确
40 利用蛋白质中平均含氮量恒定这一性质, 可以直接测定蛋白质的含量。
答案: 错误
41 蛋白质的主链骨架有NCCNCCNCC……和NCCCNCCCNCCC……等规律。
答案: 错误
42 蛋白质分子的种类和差别，是由其一级结构决定的。
答案: 正确
43 所有蛋白质都具有一、二、三、四级结构。
答案: 错误
44 由亮氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸6种氨基酸残基组成的肽链中有2个游离羧基。
答案: 错误
45 多肽链中含有游离α-氨基的一端叫N末端，含有游离α-羧基的一端叫C末端，一般把N末端看作头，C末端看作尾。
答案: 正确
47 在一定pH 及低温条件下，加入适量预冷到-40℃以下的不溶于水的有机溶剂，可根据溶解度不同沉淀相应的目的蛋白质，称为有机溶剂沉淀法。
答案: 错误
50 比活性是指单位重量蛋白质中的生物活性，可用于反映蛋白质的纯度，单位常为：U/mg。答案: 正确
四、单选题
1 氨基酸中侧链含有巯基的氨基酸是（）。
A: Ala
B: Cys
C: Ser
D: Gly
答案: B
2 肽键的正确表示法是（）。
A: -NO-CH-
B: -CO-NH-
C: NH2CO-
D: -CH-NO-
答案: B
3 维持蛋白质二级结构的主要作用力是（）。
A: 盐键
B: 疏水键
C: 德华力
D: 氢键
答案: D
4 大多数蛋白质的含氮量比较恒定，平均为（）。
A: 9.9%
B: 9.4%
C: 14%
D: 16%
答案: D
5 下列氨基酸中侧链基团含有胍基的有（）。
A: Ala
B: Gly
C: Arg
D: Lys
答案: C
6 下列哪个元素不是组成蛋白质的主要元素？（）
A: C
B: N
C: H
D: S
答案: D
7 以下哪项功能不属于蛋白质可能具有的功能？（）
A: 携带氧气
B: 免疫反应
C: 催化作用
D: 遗传信息
答案: D
8 下列氨基酸哪一个不是碱性氨基酸？( )
A: 精氨酸
B: 赖氨酸
C: 天冬氨酸
D: 组氨酸
答案: C
9 以下哪一种氨基酸的α-碳原子是对称碳原子？( )
A: 丝氨酸
B: 甘氨酸
C: 半胱氨酸
D: 氨酸
答案: B
10 在20种氨基酸中，对紫外线具有吸收作用的氨基酸是( )。A: 苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸
B: 苯丙氨酸、酪氨酸、组氨酸
C: 蛋氨酸、酪氨酸、色氨酸
D: 苯丙氨酸、氨酸、丝氨酸
答案: A
11 在20种氨基酸中，属于亚氨基酸的为( )。
A: 甘氨酸
B: 丙氨酸
C: 脯氨酸
D: 蛋氨酸
答案: C
12 肽键和二硫键都属于( )，因此，其键能比较大，蛋白质一级结构稳定性较强。A: 离子键
B: 共价键
C: 氢键
D: 疏水键
答案: B
13 谷胱甘肽可参与体的氧化还原反应，其分子中的活泼基团是（）。
A: 羟基
B: 羧基
C: 甲基
D: 巯基
答案: D
14 将蛋白质溶液的pH值调节到其等电点时（）。
A: 可使蛋白质的稳定性增加
B: 可使蛋白质的表面净电荷增加
C: 可使蛋白质的稳定性降低，易沉淀
D: 可使蛋白质的溶解度增大
答案: C
15 蛋白质变性后将会产生下列哪一种后果？（）
A: 大量氨基酸游离出来
B: 大量肽碎片游离出来
C: 等电点变为零
D: 空间结构发生了改变
答案: D
16 以下哪种因素一般不易使蛋白质变性？（）
A: 加热震荡
B: 强酸强碱
C: 低温冷藏
D: 有机溶剂
答案: C
17 蛋白质溶液稳定的因素是（）。
A: 蛋白质溶液是真溶液
B: 蛋白质溶液中的颗粒做“布朗运动”
C: 蛋白质分子表面可以形成水化膜，在偏离等电点时带有相同电荷
D: 蛋白质溶液黏度大
答案: C
18 关于蛋白质正确的叙述是（）。
A: 二硫键只存在于两条肽链间
B: 亚基都有生物学活性
C: 一级结构中只有一条肽链
D: 四级结构至少由两条肽链组成
答案: D
19 在开链多肽中氨基酸数量与肽键的数量关系是（）。
A: 完全无联系
B: 多一个
C: 相等
D: 少一个
答案: B
20 短肽的命名原则是（）。
A: 从肽链的侧链开始
B: 从肽链的C-末端氨基酸开始
C: 从肽链的两端开始
D: 从肽链的N-末端氨基酸开始
答案: D
21 下列关于α-螺旋的叙述正确的一种是（）。
A: 通过两个螺旋中氨基酸残基间的链氢键维持稳定
B: 与β-片层的构象相同
C: 由二硫键形成周期性结构
D: 通过疏水键维持稳定
答案: A
22 蛋白质在形成螺旋过程中，如遇哪个氨基酸则螺旋中断？（）A: Gly
B: Glu
C: Val
D: Pro
答案: D
23 α-螺旋结构中，上下螺旋之间通过什么作用力使螺旋稳定？（）A: 德华力
B: 肽键
C: 氢键
D: 盐键
答案: C
24 多肽链盘曲折叠的基本单位是（）。
A: 氨基酸
B: 单核苷酸
C: 脂肪酸
D: 肽键平面
答案: D
25 多数蛋白质的分子结构中是（）。
A: 只含α-螺旋结构
一、填空： 1.胺类化合物发生Mailard反应的活性氨基酸，而碱性氨基酸的反应活性高 于其他氨基酸。 2.稳定蛋白质构象的作用力和键包括（）、（）、 （）、（）和（）。 3.小麦面粉中与面粉筋力有关的两个蛋白质是（）和 （）。 4.蛋白质化学改性常用的方法有: __________、__________和_______________。 5.构成面筋的蛋白质主要包括__________和_______________。 6.Mailard反应主要是（）和（）之间的反应，该反应的初 期阶段包括两个步骤，即（）和（）。 7.根据蛋白质分子的化学组成特点，一般可以将其分为3大类（）， （），（）。 8.稳定蛋白质二、三、四级结构的作用力 是，，，，。 9.蛋白质的功能性质包括三大类，，。 二、概念： 蛋白质的功能性质；蛋白质的变性作用；盐析效应；胶凝作用；盐溶效应；蛋白质的二级结构；蛋白质的等电点；胶凝；缔合；沉淀；絮凝；凝结；胶凝 三、单项选择题() 1、下列关于氨基酸的描述不正确的是： A，氨基酸在等电点时所带净电荷为零；B，所有的氨基酸均有旋光性；C，水 溶液中氨基酸一般以两性离子形式存在；D，氨基酸均可溶于水 2、不属于蛋白质起泡的必要条件是（） A. 蛋白质快速扩展到气-液界面 B. 蛋白质充分伸展和吸附 C. 在界面上形成粘弹性较好的蛋白膜 D. 具有较高的蛋白质浓度 四、简答题（） 1、蛋白质变性的机制及影响因素是什么？ 2、什么叫乳浊液？乳浊液失稳的机制是什么？ 3、写出氨基酸与茚三酮反应的方程式 4、描述牛乳中的蛋白质及其分类 5、蛋白质的功能性质有哪些？
蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室 接受教育部评估 2005年9月5日-6日，教育部重点实验室评估专家组一行8人对我校“蛋白质化学及鱼类发育生物学”教育部重点实验室进行了现场评估。 5日上午，评估报告会在学校国际学术交流中心举行。参加报告会的有教育部重点实验室评估专家组成员：南开大学耿运琪教授、北京大学瞿礼嘉教授、厦门大学彭宣宪教授、上海交通大学张大兵教授、东北林业大学刘桂丰教授、山东大学曲音波教授、山东农业大学陈学森教授和教育部工作人员李小跃同志。省教育厅申纪云副厅长及科技处徐伟处长，学校刘筠院士、党委书记张国骥、副校长梁宋平、周景明、龚维忠、冀学锋、瞿树林、蒋洪新、科技处处长夏立秋以及重点实验室副主任罗琛教授和该实验室的全体老师参加了评估报告会。会议由学校副校长蒋洪新主持，学校党委书记张国骥代表学校致欢迎词。 评估报告会上，评估专家听取了实验室主任梁宋平教授关于2001到2005年实验室整体建设情况的汇报，随后实验室刘少军教授、罗琛教授、张健教授、吴秀山教授和梁宋平教授5人分别做了"异源四倍体鲫（鲤）鱼和三倍体湘云鲫（鲤）研究"、“鱼类发育的基因表达调控”、"心脏发育的基因调控"、"疾病相关蛋白的鉴定与功能分析"、“蜘蛛毒素的结构与功能的研究及蛋白质化学与蛋白质组学技术发
展与应用”的研究工作汇报。汇报会上，专家们针对汇报内容进行了现场提问。下午，专家组对实验室进行了现场考察，核对了该实验室的科研项目、研究论文、获奖成果、发明专利、重大仪器与建设经费、人才培养等有关的材料，分别召开了实验室成员和职能部门负责人参加的座谈会。 6日上午，专家组召开了小组会，在对实验室的各项条件进行认真讨论的基础上形成了专家组的评估意见。评估意见认为：湖南师范大学“蛋白质化学及鱼类发育生物学”教育部重点实验室实验室主要围绕蛋白质化学与蛋白质组学、发育生物学等生命科学前沿研究领域的重大科技问题，开展基础与应用基础研究，已在蜘蛛毒素蛋白质结构与功能、多倍体鱼类育种、心脏发育调控机制、基因敲除和基因表达调控等研究领域形成了自己的特色，研究方向明确，定位准确。同时，该实验室的部分研究成果如湘云鲫(鲤)的研究已产生重大的社会经济效益。该实验室5年来，承担了国家“863”计划课题3项、“973”重大计划子项目4项、国家自然科学基金重点项目4项等一批国家级和省部级科研课题，总经费3667.2万元，实验室具备较强的承担国家重大、重点科研课题的能力。实验室5年来发表论文256篇，其中SCI论文74篇；获国家科技进步二等奖1项，省部级科技进步一等奖3项、二等奖3项，国家发明专利4项。实验室各研究方向均取得了重要进展，整体水平较高，特别是异源四倍体鱼和三倍体湘云鲫（鲤）鱼、蜘蛛蛋白质毒素的结构与功能、心脏发育的基因调控等方面的研究具有很高的原创性，取得国际先进水平的成果，在国内外学
－第一章蛋白质化学测试题－－ 一、单项选择题 1.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少？ A.2.00g B.2.50g C.6.40g D.3.00g E.6.25g 2.下列含有两个羧基的氨基酸就是: A.精氨酸 B.赖氨酸 C.甘氨酸 D.色氨酸 E.谷氨酸 3.维持蛋白质二级结构的主要化学键就是: A.盐键 B.疏水键 C.肽键 D.氢键 E.二硫键 4.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的就是: A.天然蛋白质分子均有的这种结构 B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C.三级结构的稳定性主要就是次级键维系 D.亲水基团聚集在三级结构的表面 E.决定盘曲折叠的因素就是氨基酸残基 5.具有四级结构的蛋白质特征就是: A.分子中必定含有辅基 B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成 C.每条多肽链都具有独立的生物学活性 D.依赖肽键维系四级结构的稳定性 E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6.蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定: A.溶液pH值大于pI B.溶液pH值小于pI C.溶液pH值等于pI D.溶液pH值等于7.4 E.在水溶液中 7.蛋白质变性就是由于: A.氨基酸排列顺序的改变 B.氨基酸组成的改变 C.肽键的断裂 D.蛋白质空间构象的破坏 E.蛋白质的水解 8.变性蛋白质的主要特点就是:
A.粘度下降 B.溶解度增加 C.不易被蛋白酶水解 D.生物学活性丧失 E.容易被盐析出现沉淀 9.若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时,该溶液的pH值应为: A.8 B.＞8 C.＜8 D.≤8 E.≥8 10.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？ A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.胱氨酸 D.丝氨酸 E.瓜氨酸 二、多项选择题(在备选答案中有二个或二个以上就是正确的,错选或未选全的均不给分) 1.含硫氨基酸包括: A.蛋氨酸 B.苏氨酸 C.组氨酸 D.半胖氨酸 2.下列哪些就是碱性氨基酸: A.组氨酸 B.蛋氨酸 C.精氨酸 D.赖氨酸 3.芳香族氨基酸就是: A.苯丙氨酸 B.酪氨酸 C.色氨酸 D.脯氨酸 4.关于α-螺旋正确的就是: A.螺旋中每3.6个氨基酸残基为一周 B.为右手螺旋结构 C.两螺旋之间借二硫键维持其稳定 D.氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5.蛋白质的二级结构包括: A.α-螺旋 B.β-片层 C.β-转角 D.无规卷曲 6.下列关于β-片层结构的论述哪些就是正确的: A.就是一种伸展的肽链结构 B.肽键平面折叠成锯齿状 C.也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成 D.两链间形成离子键以使结构稳定 7.维持蛋白质三级结构的主要键就是: A.肽键 B.疏水键 C.离子键 D.范德华引力 8.下列哪种蛋白质在pH5的溶液中带正电荷？ A.pI为4、5的蛋白质 B.pI为7、4的蛋白质 C.pI为7的蛋白质 D.pI为6、5的蛋白质 9.使蛋白质沉淀但不变性的方法有:
蛋白质测定方法——化学报告
蛋白质的检测 酚试剂法灵敏度较高 20~250mg 费时蛋白质在碱性溶 液中其肽键与 Cu2+螯合，形成 蛋白质一铜复合 物，此复合物使 酚试剂的磷钼酸 还原，产生蓝色 化合物 酚类、柠檬 酸、硫酸铵、 tris缓冲液、 甘氨酸、糖 类、甘油等均 有干扰作用 由上表可大致了解五种检测蛋白质的方法，下面以实验的形式进行详细阐述：
1 材料与方法 1.1 仪器材料 (1)仪器:凯氏定氮仪、紫外分光光度计、可见光分光光度计、工作离心机、布氏漏斗、抽滤泵。 (2)试剂及原材料:牛奶、酸奶、豆浆、0.12mol/LpH=4. 7醋酸- 醋酸钠缓冲液、乙醇-乙醚等体积混合液、浓H2SO4 、40%氢氧化钠、30%过氧化氢、2%硼酸溶液、0. 050molPL标准盐酸溶液、硫酸钾- 硫酸铜接触剂、混合指示剂、标准蛋白溶液、双缩脲试剂、考马斯亮蓝G- 250试剂。 1.2 实验方法 (1)凯氏定氮法测定蛋白质含量 将待测样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨(消化) ,氨又与硫酸作用,变成硫酸铵。为了加速消化,可以加入CuSO4 作催化剂和加入K2SO4 以提高溶液的沸点,而加入30%过氧化氢有利于消化溶液的澄清。消化好的样品在凯氏定氮仪内经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至定量硼酸溶液中,然后用标准盐酸溶液进行滴定,记录,计算出样品含氮量。每个样品做三次重复测定,取平均值。 (2)紫外吸收法测定蛋白质含量 蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质,吸收峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。 紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。低浓度的盐,例如, 生化制备中常用的(NH4)2SO4 等和大多数缓冲液不干扰测定,特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值。 此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质较多,在用标准曲线法测定蛋白质含量时,对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质有一定的误差,故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表,再进行计算的方法加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的,虽然经过校正,测定的结果还是存在一定的误差。 此外,进行紫外吸收法测定时,由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。取待测样品制成蛋白浓度大约在0. 1～1. 0mgPmL的蛋白质溶液,用紫外分光光度计进行比色,对照标准曲线得出样品含氮量。每个样品做3次重复测定,取平均值。 (3)双缩脲法测定蛋白质含量
高中化学关于蛋白质和核酸的测试题及答案解析 1.（株州高二检测）关于蛋白质的叙述错误的是（） A.浓HNO3溅在皮肤上，使皮肤呈黄色，是由于浓HNO3和蛋白质发生颜色反应 B.蛋白质溶液中加入饱和（NH4）2SO4溶液，蛋白质析出，再加水也不溶解 C.蛋白质水解的最终产物是氨基酸 D.高温灭菌的原理是加热后使蛋白质变性，从而使细菌死亡 解析：蛋白质溶液中加入饱和（NH4）2SO4能使蛋白质发生盐析，加水后析出的蛋白质又会溶解. 答案：B 2.（广东高考）下列说法正确的是（） A.乙烯和乙烷都能发生加聚反应 B.蛋白质水解的最终产物是多肽 C.米酒变酸的过程涉及了氧化反应 D.石油裂解和油脂皂化都是由高分子生成小分子的过程 解析：本题考查常见有机物，旨在考查考生对常见有机物性质的理解能力.乙烯分子中含有碳碳双键，能发生加聚反应，而乙烷分子中不含不饱和键，不能发生加聚反应，A项错误；蛋白质水解的最终产物为氨基酸，B项错误；米酒变酸的过程为米酒中的乙醇氧化为乙酸，发生氧化反应，C项正确；石油裂解是在高温条件下，把长链分子的烃断裂为各种短链的气态烃和液态烃，油脂皂化是在碱性条件下，油脂水解为高级脂肪酸钠和甘油，是由大分子（但不是高分子）生
成小分子的过程，D项错误. 答案：C 3.蛋白质分子中各种氨基酸的连接方式和排列顺序称为蛋白质的（） A.一级结构 B.二级结构 C.三级结构 D.四级结构 解析：蛋白质分子中各种氨基酸的连接方式和排列顺序称为蛋白质的一级结构. 答案：A 4.下列有机物水解时，键断裂处不正确的是（） 解析：肽键（）水解的断键部位为，而不是 . 答案：D 5.在澄清的蛋白质溶液中加入以下几种物质： （1）加入大量饱和食盐水，现象为________________，此过程叫做________. （2）加入甲醛溶液，现象为________________，此过程称为蛋白质的________. （3）加入浓硝酸并微热，现象为________________，这是由于浓硝酸与蛋白质发生了________反应的缘故. （4）加热煮沸，现象为________________________________________________，此过程称为蛋白质的________. 解析：蛋白质遇轻金属盐能发生盐析，加热或遇到甲醛能使蛋白质变性.蛋白质与浓HNO3发生颜色反应而呈黄色. 答案：（1）产生白色沉淀盐析（2）产生白色沉淀变性（3）蛋白质变为黄色颜色（4）产生白色沉淀变性
实验一 蛋白质和氨基酸的呈色反应 一、目的要求 验证蛋白质特性；学习和掌握蛋白质呈色反应的原理和方法；学习几种常用 的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。 二、实验原理 蛋白质中的某些化学键或氨基酸残基中的某些化学基团可以与某些特殊试 剂形成特定的有色物质。这些反应称为蛋白质的呈色反应。 各种蛋白质的氨基酸残基不完全相同。因此，呈色反应产物的颜色也不完全 一样。呈色反应不是蛋白质所特有，一些非蛋白物质也能呈现类似的呈色反应。因此，不能仅以呈色反应结果来判别被测物质是否为蛋白质。 三、呈色反应 双缩脲反应 1.原理 两分子尿素经加热至180°C 后可以缩合成一分子双缩脲，并放出一分子氨。 双缩脲在碱性溶液中与铜离子结合生成紫红色络合物，此反应称为双缩脲反应。 多肽及所有蛋白质均具有肽键，与双缩脲分子中亚酰胺键结构相同，也能发 生此反应，因此，蛋白质在碱性溶液中与铜离子也能呈现出类似于双缩脲的颜色反应。 2.器材与试剂 1)器材 试管、药匙、电炉、试管夹、滴管。 2)试剂 〈1〉蛋白质溶液(10%卵清蛋白溶液)：吸取鸡蛋清溶液10ml ，加蒸馏水稀 释，定容至100ml 。 〈2〉10%氢氧化钠溶液。 〈3〉1%硫酸铜(CuSO4)溶液。 〈4〉0.1%甘氨酸(Gly)溶液：称0.1g 甘氨酸溶于蒸馏水中，稀释至100ml 。 〈5〉结晶尿素。 3.实验步骤 双缩脲反应实验 1234 尿素＋ 加热后的尿素＋ 蛋白质溶液/滴3 0.1%Gly/滴3 10%NaOH/滴5555 1%CuSO 4/滴1111 显色现象 试管 试剂/滴 (1)制备双缩脲：取结晶尿素少许(约火柴头大小)，放入干燥的小试管中。 微火加热至尿素熔解至硬化，刚硬化时立即停止加热，尿素放出氨，此时双缩脲
单元测试一：蛋白质化学 班级：姓名：分数： 一．填空题（每空1.5分，共30分） 1.当溶液pH等于某种氨基酸的等电点时，其带_ 零 _电荷；当溶液pH大于某种氨基酸的等电点时，其带_ 负 _电；溶液pH小于某种氨基酸的等电点时，其带_ 正电。 2.盐浓度低时，盐的加入使蛋白质的溶解度_ 增大 _，称为_ 盐溶__现象。当盐浓度高时,盐的加入使蛋白质的溶解度降低，称为盐析现象。 3.由甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸6种氨基酸残基组成的肽链 有 5 个肽平面，有 3 个游离羧基。 4.蛋白质分子结构包括一级结构和二级结构。 蛋白质的一级结构是由氨基酸通过肽键连接而成的多肽链。 6.蛋白质分子的基本组成单位是氨基酸。蛋白质的一级结构维持作用力是肽 键。蛋白质的分子结构决定蛋白质的性质和功能。 7.蛋白质二级结构主要有 a螺旋和B折叠形状，维持其稳定结构的化学键是 氢键。 判断题 1．用凝胶过滤(Sephadex G-100)柱层析分离蛋白质时，总是分子量大的先被洗脱下来，分子量小的后下来。对 2．变性后，蛋白质的溶解度增加（减小），这是因为电荷被中和（空间结构被破坏），以及水化膜破坏所引起的。错 3．变性后（物理变性不可逆，化学变性可逆，可复性）的蛋白质在一定条件下，有些还能复性，恢复其生物学功能。对 4．有机溶剂沉淀法分离纯化蛋白质的优点是有机溶剂容易蒸发除去，且不会使蛋白质变性。错 5.蛋白质分子的种类和差别，是由其空间结构决定的。错（一级结构） 6．蛋白质主要是由C、H、O、N四种元素组成。对 7．氨基酸通过肽键连接而成的化合物称为肽。对 8．天然蛋白质的基本组成单位主要是L-α-氨基酸。对 9．肽键(-CO-NH-)中的C-N键可自由旋转，使多肽链出现多种构象。错（不可旋转） 10．维持蛋白质二级结构的化学键是氢键及范德华力（不是）。错 11．蛋白质一级结构对空间结构起决定作用，空间结构的改变会引起功能的改变。对 12．维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是氢键。对 13．蛋白质必须具有四级结构才具有生物活性。错（肌球蛋白是三级结构可存活） 14．蛋白质四级结构中的每个亚基单独都具有生物活性。错（不具有活性） 15．具有四级结构的蛋白质分子一定是由两条或两条以上的多肽链组成的。对 16．溶液中带电粒子在电场中向电性相同（相反）的电极移动，这种现象称为电泳。错 17．溶液pH值等于7时，蛋白质不带电荷。错 18．加热、紫外线、X射线均可破坏蛋白质的空间结构。对
实验一蛋白质含量的测定 姓名：mangogola 一．实验原理 生物化学实验中，经常需要测定蛋白质的含量，一般常用的蛋白质含量测定方法有紫外吸收法、福林酚试剂法以及一些改进的Lowry法可以应用。 紫外吸收法测定蛋白质含量的原理是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸中的苯环含有共轭双键，因此蛋白质具有吸收紫外光的性质，吸收高峰在280nm处，且蛋白质溶液的光密度值与其含量呈正比关系。该方法具有简单、灵敏、快速和不消耗样品的优点，但易受核酸分子中嘌呤、嘧啶等的干扰，准确度较差。根据蛋白质和核酸的吸收峰不同，可通过计算适当校正核酸的干扰作用。 Lowry法的原理是：在碱性条件下，蛋白质与铜离子形成铜-蛋白质复合物，该复合物可还原磷钼酸-磷钨酸（Folin试剂）产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物。该方法灵敏度较高，但较费时。 对膜蛋白或相当稀的（如<1ug/ml）蛋白溶液的含量测定，以及为减小去污剂、脂类、碳水化合物的干扰，可采用一些改进的Lowry法，如蛋白质-染料结合法。原理是：当染料考马斯亮蓝G250与蛋白质结合时，最大吸收峰从465nm移动到595nm，而且吸收值在一定蛋白浓度下线性相关，因此用标准浓度的蛋白测OD595作标准曲线，即可求得待测样品的蛋白浓度。此方法简单经济、快速、灵敏度也较高。需要注意的是，染料与蛋白质可在3min内完成结合，由于染料试剂中含有酒精成分，易挥发，所以结合生成的复合物在1h 内可比较稳定地存在于溶液中，制作的标准曲线后部会出现弯曲现象。 二．实验过程（Lowry法） 1.溶液配制 A液：2%Na2CO3，用0.1mol/LNaOH配制。（不能将NaOH和 Na2CO3干粉混合配制，这样会因释放CO2而不准确） B液：0.5%CuSO4.5H2O,用1%酒石酸钾或酒石酸钠配制。 C液：使用前将A、B液按50:1混合，当天使用。 D液：Folin试剂 标准蛋白溶液：200ug/mLBSA溶液 2.标准曲线测定 按照下表进行操作，用一系列标准浓度的BSA平行进行两组测定反应，记录A500。取两组测定的平均值，以蛋白浓度为横坐标，光密度值为纵坐标绘制标准曲线。 3.将待测样品稀释至标准曲线浓度范围内，同时按上述方法测A500，根据标准曲线读出蛋
一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧 链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含 有氨基酸、氨基酸或氨基酸。3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团 是；组氨酸的侧链基团是。这三种氨基酸三字母代表符号分别是、、、 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色 是；因为脯氨酸是a—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。5．蛋白质结构中主键称为键，次级键 有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子b亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸 为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型 有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的a-螺旋往往 会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。
10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征 是、。 11．在适当浓度的b-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶 的被破坏造成的。其中b-巯基乙醇可使RNA酶分子中 的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除b-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性 是、。13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸 或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示 为，单个肽平面及包含的原子可表示 为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH ＞pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＜pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在。 16．侧链含—OH的氨基酸 有、和三种。侧链含—SH的氨基酸是氨基酸。 17．人体必需氨基酸是指人体自身不能合成的、必须靠食物提供的氨基酸。这些氨基酸包 括、、 、、 、、、 等八种。 18．蛋白质变性的主要原因是被破坏；蛋白质变性后的主要特征是；变性蛋白质在去除致变因素后仍能（部分）恢复原有生物活性，表明没被破坏。这是因为一级结构含有的结构信息，所以蛋白质分子构象恢复后仍能表现原有生物功能。 19．盐析作用是 指 ；盐溶作用是 指 。 20．当外界因素（介质的pH＞pI、电场电压、介质中离子强度、温度等）确定后，决定蛋白质在电场中泳动速度快慢的主要因素是和。
蛋白质化学练习题 第三章蛋白质化学 一：填空题 1. _________________________________ 氨基酸的结构通式为。 2. __________________________________________ 组成蛋白质分子的碱性氨基酸有__________ 、和。酸性 氨基酸有_________________ 和_________________ 。 3. 在下列空格中填入合适的氨基酸名称。 实验八食品中蛋白质含量测定 1.实验目的 （1）学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。 （2）掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。 2.实验原理 2.1消解 蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸在催化剂作用下共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵而留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。因为食品中除蛋白质外，还含有其它含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白。 NH 2(CH2) 2 COOH+13H 2 SO 4 =(NH 4 ) 2 SO 4 +6CO 2 +12SO 2 +16H 2 O 浓硫酸将有机物炭化后为碳、氢与氮，将形成的碳氧化： 2H 2SO 4 +C（Δ）=CO 2 +2H 2 O+2SO 2 ↑ 生成的二氧化硫将氧化态的氮还原为氨而自身被氧化为三氧化硫，氨随之与硫酸反应生成硫酸铵， H 2SO 4 +2NH 3 =(NH 4 ) 2 SO 4 在消解试验中，为了加速蛋白质的分解，缩短消解时间，常常加入下列物质： （1）硫酸钾：一般浓硫酸的沸点为340℃，但加入硫酸钾后，硫酸不断分解，水不断溢出引起硫酸钾浓度不断增加，沸点因此而增加。 K 2SO 4 +H 2 SO 4 =KHSO 4 KHSO 4（Δ）=K 2 SO 4 +H 2 O↑+SO 3 但硫酸钾浓度不能太大，否则消化温度过高会引起铵盐的热分解而释放出氨， （NH 4） 2 SO 4 （Δ）=（NH 4 ） 2 SO 4 +NH 3 ↑ 2KSO 4（Δ）=2H 2 O+2NH 3 ↑+2SO 3 ↑ 除了可以添加硫酸钾之外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等以提高溶液温度，但效果要差于硫酸钾。 （2）硫酸铜：硫酸铜可以催化反应。可以采用的催化剂除了硫酸铜外，还可以加入氧化汞、汞、硒粉以及二氧化钛等，但考虑效果、价格以及污染等原因外，最常用的还是硫酸铜，同时可以加入少量的过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物的氧化，反应机理为： 2CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +O 2 ↑+SO 2 ↑ C+CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +CO 2 ↑+SO 2 ↑ H 2SO 4 +Cu 2 SO 4 （Δ）= 2CuSO 4 +2H 2 O↑+SO 2 ↑ 此反应不断进行，如溶液没有褐色生成（Cu 2SO 4 颜色）而呈现清澈的蓝绿色，说明有机 物已经全部被消解完毕。因此，在试验过程中，硫酸铜不但能够催化反应，而且能够指示反应的进行程度。 2.2碱化蒸馏 在消解完全的样品溶液中加入过量的浓的氢氧化钠溶液使溶液呈现碱性，加热蒸馏而放出氨气： 2NaOH+（NH 4） 2 SO 4 （Δ）= Na 2 SO 4 +2H 2 O+2NH 3 ↑ 2.3吸收与滴定 将加热蒸馏释放出来的氨利用硼酸溶液进行吸收，因硼酸属于弱酸，其后再用盐酸进行滴定： 2NH 3+ 4 H 3 BO 3 =(NH 4 ) 2 B 4 O 7 +5H 2 O (NH 4) 2 B 4 O 7 +5H 2 O+2HCl=2NH 4 Cl+4H 3 BO 3 除此之外，也可以用过量的盐酸或者硫酸吸收整流而出的氨气，然后再用氢氧化钠进行回滴。 3. 仪器及材料 3.1仪器 第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释：1．氨基酸 2．肽 3．肽键 4．肽键平面 5．蛋白质一级结构 6．α-螺旋 7．模序 8．次级键 9．结构域 10．亚基 11．协同效应 12．蛋白质等电点 13．蛋白质的变性 14．蛋白质的沉淀 15．电泳 16．透析 17．层析 18．沉降系数 19．双缩脲反应 20．谷胱甘肽 二、填空题 21．在各种蛋白质分子中，含量比较相近的元素是____，测得某蛋白质样品含氮量为15.2克，该样品白质含量应为____克。 22．组成蛋白质的基本单位是____，它们的结构均为____，它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23．由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基，可以在酸性溶液中带____电荷，在碱性溶液中带____电荷，因此，氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时，氨基酸成为____离子，此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24．决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构，该结构是指多肽链中____的排列顺序。25．蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象，多肽链的折叠盘绕是以____为基础的，常见的二级结构形式包括____，____，____和____。 26．维持蛋白质二级结构的化学键是____，它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27．稳定蛋白质三级结构的次级键包括____，____，____和____等。 28．构成蛋白质的氨基酸有____种，除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____，____，____。酸性氨基酸有____，____。 29．电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下，蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的，还和蛋白质的____及____有一定关系。 30．蛋白质在pI时以____离子的形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以____离子形式存在，在pH 蛋白质化学（客观题带答案） 蛋白质化学 一、名词解释 1．氨基酸（amino acids）:是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物，氨基一般连接在α-碳上。氨基酸是肽和蛋白质的构件分子。 2.必需氨基酸（essential amino acids）：指人（或其它脊椎动物）自己不能合成，需要从饮食中获得的氨基酸，例如赖氨酸、苏氨酸等氨基酸。 3.等电点（pI，isoelectric point）：使分子处于兼性分子状态，在电场中不迁移（分子的净电荷为零）的pH值。 4.茚三酮反应（ninhydrin reaction）：在加热条件下，氨基酸或肽与茚三酮反应生成紫色（与脯氨酸反应生成黄色）化合物的反应。 5.肽键（peptide bond）：一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基缩合，除去一分子水形成的酰胺键。 6.肽（peptides）：两个或两个以上氨基酸通过肽键共价连接形成的聚合物。 蛋白质一级结构(primary structure)：指蛋白质中共价连接的氨基酸残基的排列顺序。 7.Edman降解(Edman degradation)：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。N末端氨基酸残基被苯异硫氰酸酯修饰，然后从多肽链上切下修饰的残基，再经层析鉴定，余下的多肽链（少了一个残基）被回收再进行下一轮降解循环。 8.同源蛋白质（homologous proteins）:来自不同种类生物、而序列和功能类似的蛋白质。例如血红蛋白。 9.酰胺平面（肽单位peptide unit）：又称之肽基（peptide group），是肽链主链上的重复结构。是由参与肽键形成的氮原子和碳原子和它们的4个取代成分：羰基氧原子、酰胺氢原子和两个相邻的α-碳原子组成的一个平面单位。10.蛋白质二级结构（protein secondary structure）:在蛋白质分子中的局部区域内氨基酸残基的有规则的排列，常见的二级结构有α-螺旋和β-折叠。二级结构是通过骨架上的羰基和酰胺基团之间形成的氢键维持的。 11.蛋白质三级结构（protein tertiary structure）:蛋白质分子处于它的天然折叠状态的三维构象。三级结构是在二级结构的基础上进一步盘绕、折叠形成的。三级结构主要是靠氨基酸侧链之间的疏水相互作用、氢键范德华力和盐键（静电作用力）维持的。 12.蛋白质四级结构（quaternary structure）:多亚基蛋白质的三维结构。实际上是具有三级结构的多肽链（亚基）以适当方式聚合所呈现出的三维结构。 13.α-螺旋(α-helix)：蛋白质中常见的一种二级结构，肽链主链绕假想的中心轴盘绕成螺旋状，一般都是右手螺旋结构，螺旋是靠链内氢键维持的。每个氨基酸残基（第n个）的羰基氧与多肽链C端方向的第4个残基（第n＋4个）的酰胺氮形成氢键。在典型的右手α-螺旋结构中，螺距为0.54nm，每一圈含有3.6个氨基酸残基，每个残基沿着螺旋的长轴上升0.15nm。 14.β-折叠(β-sheet)：是蛋白质中的常见的二级结构，是由伸展的多肽链组成的。折叠片的构象是通过一个肽键的羰基氧和位于同一个肽链或相邻肽链的另一个酰胺氢之间形成的氢键维持的。氢键几乎都垂直伸展的肽链，这些肽链可以是平行排列（走向都是由N到C方向）；或者是反平行排列（肽链反向排列）。 15.β-转角（β-turn）:也是多肽链中常见的二级结构，连接蛋白质分子中的二级结构（α-螺旋和β-折叠），使肽链走向改变的一种非重复多肽区，一般含有2～16个氨基酸残基。含有5个氨基酸残基以上的转角又常称之环（loops）。常见的转角含有4个氨基酸残基，有两种类型。转角I的特点是：第1个氨基酸残基羰基氧与第4个残基的酰胺氮之间形成氢键；转角II的第3个残基往往是甘氨酸。这两种转角中的第2个残基大都是脯氨酸。 16.超二级结构（super-secondary structure）：也称之基元（motif）。在蛋白质中，特别是球蛋白中，经常可以看到由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成的有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体。17.结构域(structural domain)：较大的多肽链或亚基，多肽链往往在二级结构的基础上先折叠成若干个球状的单位，这种相对独立的三维实体即为结构域。 18.二硫键（disulfide bond）：通过两个（半胱氨酸）巯基的氧化形成的共价键。二硫键在稳定某些蛋白的三维结构上起着重要的作用。 实验一蛋白质分子的测定─凝胶层析法一、实验原理 凝胶层析法（即凝胶过滤法，gel filtration）是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法。将凝胶颗粒在适宜溶剂中浸泡，使充分吸液膨胀，然后装入层析柱中，加入欲分离的混合物，再以同一溶剂洗脱，在洗脱过程中大分子不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙最先流出柱外，小分子可以进入凝胶内部，流苏缓慢，一直最后流出柱外，从而使样品中分子大小不同的物质得以分离。 凝胶是由胶体溶液凝结而成的固体物质，不论是天然凝胶还是人工合成凝胶，其内部都具有很微细的多空网状结构。凝胶层析法常用的天然凝胶是琼脂糖凝胶（Sepharose），人工合成的凝胶是聚丙烯酰胺凝胶（Bio-gel-P）和葡聚糖凝胶（Sephadex G）。其中葡聚糖凝胶是具有不同孔隙度的立体网状结构的凝胶，不溶于水。 将凝胶装柱后，柱床体积称为“总体积”，以Vt表示。Vt由V o，Vi与Vg三部分组成，即Vt=Vi+Vg+V o。V o为“孔隙体积”、“外水体积”，即存在于柱床内凝胶颗粒外面空隙之间的水相体积；Vi为内体积，即凝胶颗粒内部所含水相的体积；Vg为凝胶本身体积；Ve为洗脱体积，即自加入样品时算起到组分最大浓度（峰）出现时所流出的体积，Ve与V o及Vi之间的关系为：Ve=V o+K d Vi，；K d为样品组分在二相间的分配系数，Kd=(Ve-V o)/Vi，有效分配系数为Kav，Kav=(Ve-V o)/(Vt-V o)。 在一般情况下，凝胶对组分没有吸附作用时，当流动相流过Vt体积后，所有的组分都应该被洗出来，这一点为凝胶层析的特点，与一般层析方法不同。 Ve与分子量的关系：对同一类型的化合物，洗脱特性与组分的分子量有关，流过凝胶柱时，按分子量大小顺序流出，分子量大的走在前面。Ve与分子量的关系为：Ve=K1-K2logM，K1与K2为常数，M为分子量，通常用Kav代替V e，建立标准蛋白质分子式量LgM与Kav的标准曲线，称为“选择曲线”。在允许的工作范围内，曲线越陡，则分级越好，而工作坊为越窄。凝佼层析主要决定于溶质分子的大小，每一类型的化合物，如球蛋白类，右旋糖酐类等都有它自己的特殊的选择曲线，可用以测定未知物的M r，测定时以使用曲线的直线部分为宜。 二、试剂材料 第三章蛋白质化学样题 一、选择题 1.蛋白质分子的一级结构概念主要是指（） A、组成蛋白质多肽链的氨基酸数目。 B、氨基酸种类及相互比值。 C、氨基酸的排列顺序。 D、二硫键的数目和位置。 2.下列何种结构不属蛋白质分子构象（） A、右手双螺旋 B、α-螺旋 C、β-折叠 D、β-转角 3. 在蛋白质三级结构中可存在如下化学键，但不包括（） A、氢键 B、二硫键 C、离子键 D、磷酸二酯键 4. 下列关于蛋白质四级结构的有关概念，何者是错误的（） A、由两个或两个以上亚基组成。 B、参与形成四级结构的次级键多为非共价键。 C、所有蛋白质分子只有具有四级结构，才表现出生物学活性。 D、组成四级结构的亚基可以是相同的，也可以是不同的。 5. 蛋白质变性是由于（） A、蛋白质一级结构的改变 B、组成蛋白质的共价键发生变化 C、蛋白质空间构象的破坏 D、辅基的脱落 6. 维系蛋白质一级结构的化学键（） A、盐键 B、肽键 C、氢键 D、分子间作用力 7. 对具有四级结构的蛋白质进行一级结构分析时（） A、只有一个自由的α-氨基和一个自由的α-羧基。 B、只有自由的α-氨基，没有自由的α-羧基。 C、有一个以上的自由α-氨基和α-羧基。 D、既无自由的α-氨基，也无自由的α-羧基。 8. 蛋白质分子中的α-螺旋和β片层都属于（） A、一级结构 B、二级结构 C、三级结构 D、四级结构 9. 维系蛋白质分子中α-螺旋的化学键是（） A、肽键 B、离子键 C、二硫键 D、氢键 10. α-螺旋每上升一圈相当于几个氨基酸（） A、2.5 B.2.7 C.3.0 D、3.6 11. 谷氨酸的等电点是3.22，下列描述正确的是（） A、谷氨酸是碱性氨基酸 B、谷氨酸是酸性氨基酸 C、谷氨酸在pH=7的溶液中带正电荷 D、谷氨酸分子中含有一个氨基和一个羧基 12. 肽键是（） A、属于维系蛋白质二级结构的重要化学键 B、属于次级键 C、可以自由旋转 D、由肽键形成的肽平面包含了6个原子 13. 关于蛋白质二级结构的描述正确的是（） A、属于蛋白质的空间构象
(1) 是带芳香族侧链的极性氨基酸。
(2) _______________ 和_________________ 是带芳香族侧链的非极性氨基酸。
(3) __________________ 是含硫的极性氨基酸。
(4) ______________ 或__________________ 是相对分子质量小且不含硫的氨基酸， 在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。
(5) 在一些酶的活性中心中起作用并含羟基的极性较小的氨基酸是_________________________ 。 4. _________________________________________ H enderson-Hasselbalch 方程为。 5. ____________________________________ 氨基酸的等电点(pI) 是指。 6. _______________________________________ 氨基酸在等电点时，主要以离子形式存在，在pH>pI 的溶液中，大部分以 _________________ 离子形式存在，在pH实验八 食品蛋白质含量测定
生物化学蛋白质的结构与功能试题及答案
蛋白质化学(石河子大学生物化学试题库)
实验报告 蛋白质分子的测定
第三章 蛋白质化学期末复习样题
相关主题
文本预览