2014-2015学年第二实践学期
蛋白质与酶工程
综合实训报告
专业：生物技术
班级： B1204
*名：***
学号： **********
指导教师：***
二○一五年七月六日
100g/LZnSO4 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 蒸馏水 3 3 3 3 3 0.5 mol/L NaOH 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 充分摇匀，室温下静放5min，过滤，另取5支中试管，同上编号，按下表加入试剂
滤液（mL） 1 1 1 1 1 蒸馏水（mL） 2 2 2 2 2 显色液（mL） 0.75 0.75 0.75 0.75 0.75 迅速摇匀，用分光光度计在420 nm 下测定各
管A 值。
5支试管在420 nm 下各管A 值分别为0.294、0.278、0.254、0.243、0.180
三、实验结果:
以尿素终浓度1/C为横坐标，1/A（1/v）为纵坐标作图，然后依1/C找出对应1/A点，将各点连线并延长与1/C轴相交，得- 1/Km ，计算出Km（以x×10-nmol·L-1表示）。
1/C 100 150 200 250
1/A 1.01 1.02 1.08 1.12
Km值代表酶的亲和力，km值越大亲和力越小，反之则越大。
三、实验结果：
测得糖浆液重：45.5g
实训三、不同浓度果胶酶对澄清果汁收得率的影响
所需药品与仪器：
药品：桃子、果胶酶溶液、抗坏血酸溶液、明胶、活性炭。
仪器：榨汁机、水果刀、PH试纸、温度计、定性滤纸、量筒、烧杯、刻度试管、恒温水浴器等。
一、实验原理
桃汁中存在的果胶，有很强的保护胶体的作用，能保持稳定的浑浊度，同时，果胶溶液粘度大，如果不加处理，过滤是困难的，而且即使过滤之后，在果汁中所存在的果胶和其它高分子物质，在贮藏中，由于分解、与金属离子结合及其他作用，也会产生凝固沉淀，因此，在过滤之前，必须先进行澄清，常用的澄清方法主要有自然澄清法和热处理法、冷冻法、酶法、加澄清剂法、离心分离法、超滤法等。酶法同其他方法比较，具有用量少、作用时间短、澄清效果好等诸多特点，且酶法的作用机制是生物降解。
二、实验步骤
三、1、桃汁的制备
将桃清洗后，去皮，去核，切成小块放入榨汁机。榨汁时190g桃质量放入0.19g 抗坏血酸溶液护色或不护色，将榨出的桃汁用滤布过滤数次，得到桃汁。
2、果胶酶澄清桃汁的工艺条件优化
根据果胶酶对果胶等大分子物质的生物降解特性，本实验着重考察果胶酶用量（0.10% 0.2% 0.3），酶作用温度（30℃ 50℃ 70℃）和时间（0.5h，1h，1.5h）3个主要影响因素，在单因素实验基础上，选用正交实验设计对酶法澄清熬制的工艺条件进行优化，从而确定果胶酶澄清桃汁的最佳工艺条件。
3、果汁澄清度的测定
采用可见分光光度法，以蒸馏水作参比，在波长660nm下，测定桃汁的透光率，用透光率表示桃汁的澄清度
4.沉淀
1 0.
2 70 1.840 34.5 50 69 0.5 0.1 50 1.806 32 50 64 由以上四组实验数据得到L9(34)正交实验表
试验号因素660nm
吸收值V1(ml) V2(ml) 实验结
果（澄清
率%）
A（时间）B（温度）C（酶量）
1 0.5 30 0.
2 1.794 24 50 40
2 0.5 50 0.1 1.806 32 50 64
3 0.5 70 0.3 1.807 32.5 50 65
4 1 30 0.1 1.791 41.
5 50 83
5 1 50 0.3 1.55
6 18 30 60
6 1 70 0.2 1.876 2 30 6
7 1.5 30 0.3 1.558 5 30 16
8 1.5 50 0.2 1.555 16 30 53
9 1.5 70 0.1 1.557 6.8 30 22
1k 2k 3k 56.3
49.7
30.3
46.3
59
31
56.3
33
47
Rj 26 28 23.3
主次顺序B--A--C
最优水平A1 B2 C1
即温度影响最大，其次是酶解时间，而加酶量的影响较小。最优条件是0.5h,50℃0.1%。
6、实验结果计算：
澄清桃汁收得率（R）：R=V1/V2×100%
式中：V1为澄清桃汁体积，V2为处理前桃汁体积。
分别为：24%、12%、30%、48%
在一定范围内，澄清果汁的收得率随着果胶酶浓度的增大而
增大，但当果胶酶浓度为6g/L时，澄清果汁的收得率达到最
大值，此时，澄清果汁的收得率不会再随着果胶酶的浓度增
大而增大，因此使果汁收得率达到最高时所需的果胶酶浓度
为6g/L.
蛋白质实验报告 摘要： 本实验旨在探究蛋白质的结构和功能，并通过实验方法验证蛋白质的特性。首先，我们选择了几种常见的蛋白质进行实验，包括鸡蛋白、豆腐蛋白和牛奶蛋白。通过酸碱中和、热处理和酶的作用等实验操作，我们对蛋白质的性质和功能进行了深入研究。 引言： 蛋白质是构成生物体的重要组成部分，具有广泛的生物学功能。蛋白质的结构和功能与其氨基酸组成密切相关。通过实验，我们可以进一步了解蛋白质的特性和作用机制，对于深入理解生物体的生命活动具有重要意义。 材料与方法： 1. 实验材料：鸡蛋、豆腐、牛奶、盐酸、氢氧化钠、热水浴、酶溶液等。 2. 实验步骤： a. 酸碱中和实验：取少量鸡蛋白溶液，滴加盐酸或氢氧化钠溶液，观察其变化； b. 热处理实验：将一部分鸡蛋白溶液置于热水浴中加热，观察其变化； c. 酶的作用实验：将一部分豆腐蛋白溶液加入酶溶液中，观察其
结果与讨论： 1. 酸碱中和实验结果：鸡蛋白溶液在酸性条件下凝固，而在碱性条件下变为液体状态。这说明鸡蛋白在酸碱中和过程中发生了结构变化，从而影响了其性质。 2. 热处理实验结果：鸡蛋白溶液在高温下发生凝固，形成固态物质。这是由于高温引起蛋白质的变性，使其失去原有的结构和功能。 3. 酶的作用实验结果：豆腐蛋白溶液加入酶溶液后，出现了液体变浑浊的现象。这是由于酶能够分解蛋白质，使其失去稳定性，从而导致其结构的改变。 结论： 通过本实验，我们验证了蛋白质在酸碱中和、高温处理和酶的作用下的变化特性。鸡蛋白在酸性条件下凝固，在碱性条件下变为液体；在高温下发生凝固；酶能够分解蛋白质使其失去稳定性。这些实验结果进一步加深了我们对蛋白质的结构和功能的理解。 展望： 蛋白质是生物体中极为重要的分子，其在细胞代谢、免疫功能、酶催化等方面起着重要作用。今后的研究中，我们可以进一步探索蛋白质在不同条件下的变化特性，深入理解其结构与功能之间的关系，为生物科学领域的发展做出更大的贡献。
《蛋白质与酶工程实习》实习报告撰写规范 实习时间：2012年暑假 实习地点：湖南福来格生物技术有限公司 指导教师：王义强，周小慧，周波，许岗 实习目的：实践教学是高校人才培养中十分重要的教学环节，是巩固学生的理论知识，培养学生实践能力、创新能力和创业、敬业精神，使学生了解社会、接触生产实际，实现人才培养目标的重要途径。通过实习，让学生深入企业，了解企业，接触生产实际，巩固专业理论知识，达到理论与实践相结合的目的。《蛋白质与酶工程实习》是生物技术专业的实践教学课程。通过该实习，使学生在实习过程中进一步学习和掌握一些蛋白质和酶的特征﹑用途﹑制造原理﹑生产方法与工艺流程，培养学生的创造精神、创新意识和动手能力，对学生今后从事蛋白质和酶的生产、销售、教学和科研等工作奠定实践基础。 实习内容： 1. 实习总动员 2012年暑假，我们生命科学与技术学院09级的学生，在任课老师的带领下，来到湖南福来格生物技术有限公司参观实习。并在湖南福来格生物技术公司，许董事长介绍了公司的基本情况、学科发展方向、科研基础设施（包括大型的分析检测仪器设备和研究所发酵中试技术服务平台）、发展情况及近年来开展的课题、固体液体发酵流程等方面给以了讲解，使我们在接收书本知识之外，有了一次充分接触实际工作，锻炼自己的机会。 1.1上网站查询并了解浑南福来格生物技术有限公司的相关产业，技术产品已经公司的大体经营状况。预习酶制剂产品的工艺流程，酶制剂产品工艺流程图，掌握主要生物化学反应原理。 1.2在公司负责人许总和曾总的讲解下，分如下三个部分： 来了解福来格生物技术有限公司在当代社会发展中的地位及战略目标。 1.2.1当代酶工程的发展现况已经中国总体生物产业的发展状况： 生物技术形成阶段是：1980-2000年；发展阶段是：2000-2050年。 酶工程是指利用酶、细胞或细胞器等具有的特异催化功能，借助生物反应装置和通过一定的工艺手段生产出人类所需要的产品。它是酶学理论与化工技术相结合而形成的一种新技术。可以分为两部分。一部分是如何生产酶，一部分是如何应用酶。
蛋白质提取实验报告 蛋白质提取实验报告 引言： 蛋白质是生命体内最基本的组成部分之一，具有重要的生物学功能。为了研究蛋白质的结构和功能，科学家们经常需要从生物样品中提取蛋白质。本实验旨在探究蛋白质提取的方法和步骤，并评估不同提取方法的效果。 实验材料与方法： 1. 实验材料： - 细胞样品（例如细菌、植物或动物细胞） - 细胞裂解缓冲液（含有蛋白质保护剂） - 高速离心机 - 蛋白质定量试剂盒 2. 实验步骤： 1）将细胞样品收集到离心管中，并加入适量的细胞裂解缓冲液。 2）使用超声波处理仪对细胞样品进行超声波破碎，以破坏细胞膜，释放细胞内的蛋白质。 3）将破碎后的细胞样品放入高速离心机中，以分离蛋白质。 4）将上清液转移到新的离心管中，并进行蛋白质浓度的测定。 实验结果与讨论： 通过本实验，我们成功提取了细胞样品中的蛋白质，并进行了浓度测定。在实验过程中，我们注意到以下几个关键点。 1. 细胞裂解缓冲液的选择：
细胞裂解缓冲液中的蛋白质保护剂可以保护蛋白质免受降解。在本实验中，我 们选择了含有蛋白质保护剂的缓冲液，以最大程度地保留蛋白质的完整性和活性。 2. 超声波破碎的条件： 超声波破碎是破坏细胞膜的常用方法之一。然而，超声波的功率和处理时间对 实验结果有很大的影响。在本实验中，我们对超声波功率和处理时间进行了优化，以确保细胞样品完全破碎，但又不会对蛋白质造成不可逆的损伤。 3. 高速离心的参数选择： 高速离心是将细胞碎片与蛋白质上清液分离的关键步骤。离心的参数，如转速 和离心时间，对分离效果有重要影响。在实验中，我们尝试了不同的离心参数，并选择了最佳条件，以获得最高纯度的蛋白质上清液。 4. 蛋白质浓度的测定： 蛋白质浓度的测定是评估蛋白质提取效果的重要步骤。在本实验中，我们使用 了蛋白质定量试剂盒进行测定。该试剂盒利用比色法，根据蛋白质与染色剂的 反应产生的吸光度变化来测定蛋白质的浓度。通过与标准曲线的比较，我们可 以准确地确定蛋白质的浓度。 结论： 通过本实验，我们成功地提取了细胞样品中的蛋白质，并进行了浓度测定。在 实验过程中，我们优化了细胞裂解缓冲液的选择、超声波破碎的条件、高速离 心的参数选择等关键步骤，以获得最佳的提取效果。蛋白质提取的成功为进一 步研究蛋白质的结构和功能奠定了基础。 然而，本实验仅是蛋白质提取的初步探索，还有许多其他因素需要考虑，如不
蛋白质含量测定实验报告 一、实验目的。 本实验旨在通过测定食物中蛋白质含量的方法，掌握蛋白质的测定原理和操作技能，加深对蛋白质的认识，为日常饮食提供科学依据。 二、实验原理。 本实验采用了比色法测定蛋白质含量。比色法是根据蛋白质与双酚类物质在碱性条件下生成紫色化合物的原理，利用紫外可见光谱法测定其吸光度，从而计算出蛋白质的含量。 三、实验步骤。 1. 样品制备，将食物样品研磨成粉末状。 2. 蛋白质提取，取适量样品加入提取液，振荡离心，收集上清液。 3. 比色反应，将提取液与试剂混合，待反应完成后进行测定。 4. 吸光度测定，用紫外可见光谱仪测定吸光度。 5. 计算蛋白质含量，根据吸光度值计算出样品中蛋白质的含量。 四、实验结果。 经过实验测定，得出食物样品中蛋白质含量为Xg/100g。 五、实验分析。 通过本次实验，我们了解了蛋白质含量测定的原理和方法，掌握了比色法测定蛋白质含量的操作技能。同时，也发现不同食物样品中蛋白质含量的差异，为我们科学合理地进行日常饮食提供了参考。
六、实验总结。 蛋白质是人体生命活动的重要组成部分，合理摄入足够的蛋白质对维持身体健康至关重要。通过本次实验，我们不仅学会了测定蛋白质含量的方法，也增加了对蛋白质的认识，为我们的健康饮食提供了科学依据。 七、实验感想。 本次实验让我深刻认识到蛋白质在日常饮食中的重要性，也让我对科学实验有了更深的理解和体会。希望通过今后的学习和实践，能够更好地运用所学知识，为自己和他人的健康提供帮助。 八、参考文献。 1. 《食品分析实验指导》，XXX，XXX出版社，XXXX年。 2. 《食品化学与分析》，XXX，XXX出版社，XXXX年。 以上就是本次蛋白质含量测定实验的报告内容，希望对大家有所帮助。
蛋白质合成实验报告 摘要： 本实验旨在探究蛋白质合成的过程，并通过实验验证其在细胞内的 发生。实验中，我们使用细胞质和核仁提取物，通过添加适当的底物、转录因子和酶的参与，观察蛋白质合成的结果。结果表明，蛋白质合 成与细胞功能紧密相关，具有重要的生物学意义。 引言： 蛋白质合成是细胞内的重要过程之一，对于维持生物体的正常生理 功能具有至关重要的作用。通过对蛋白质合成机制的深入研究，我们 可以更好地理解基因表达调控、细胞增殖以及疾病发生发展等过程。 本实验旨在通过模拟蛋白质合成的实验方法，加深对蛋白质合成过程 的理解。 材料与方法： 1. 准备细胞质和核仁提取物； 2. 准备适当的底物、转录因子和酶； 3. 将底物、转录因子和酶加入细胞质和核仁提取物； 4. 反应体系进行温育，控制温度和时间； 5. 通过SDS-PAGE或Western blot等方法检测蛋白质的合成情况； 6. 分析结果并得出结论。
结果： 在实验过程中，我们观察到蛋白质合成实验组样品中出现了明显的蛋白条带，而对照组样品中蛋白条带较为模糊或未出现。这表明，在添加了适当的底物、转录因子和酶后，细胞质和核仁提取物发生了蛋白质合成的过程。 讨论： 通过本实验，我们验证了蛋白质合成的存在与细胞质和核仁提取物中，并成功模拟了蛋白质合成的实验过程。蛋白质合成是细胞内的一项复杂而精密的过程，涉及到多个环节的协同作用。底物的提供、转录因子和酶的参与以及核酸和氨基酸等物质的合成都是蛋白质合成中不可缺少的要素。 此外，蛋白质合成与细胞功能之间存在着密切的联系。蛋白质是细胞功能的基础性物质，在维持细胞结构和功能以及调控生理过程等方面起着重要的作用。研究蛋白质合成对于理解细胞生物学、疾病发生以及药物开发等具有重要的应用价值。 结论： 通过本实验，我们成功模拟了蛋白质合成的实验过程，并验证了蛋白质合成的存在。蛋白质合成作为细胞生物学中的重要过程，对于维持细胞功能、调控生理过程以及理解疾病发生等具有重要意义。进一步深入研究蛋白质合成机制，有助于推动生物学领域的发展与进步。
大学酶工程与蛋白质工程教案 引言 酶工程和蛋白质工程是生物技术领域中最重要的研究方向之一。这两个领域是紧密联系的，它们的研究旨在开发制造更加高效、可持续和环保的生产方法。本教案将介绍酶工程和蛋白质工程的基本知识和实践技术。 一、酶工程介绍 1. 酶的定义和种类：酶是一种生物催化剂，可加速特定化学反应的速率。酶的种类包括氧化酶、酯酶、纤维素酶、葡萄糖酶等。 2. 酶的制备和分离：酶的制备和分离过程主要包括培养酶产生菌株、酶提取、酶纯化等步骤。常用的酶提取方法包括超声波法、高压破碎法等。 3. 酶的催化机理：酶的催化方式与机理因酶而异，通常情况下，酶作用的方式可分为四种基本类型：酸碱催化、亲和催化、共价催化和金属离子催化等。 二、蛋白质工程介绍 1. 蛋白质工程的概念：蛋白质工程是指通过有创新性的技术手段，改变蛋白质的某些性质和结构，使其具有特定的功能和应用价值。 2. 蛋白质工程的基本技术：蛋白质工程的基本技术包括蛋白质表达及纯化、变异、修饰、折叠、精细调节、重组等。 3. 蛋白质工程的应用领域：蛋白质工程的应用领域非常广泛，如药物、生物材料、生物传感器、工业酶等。 三、酶工程和蛋白质工程的联系与应用 1. 酶工程和蛋白质工程的联系：酶工程和蛋白质工程紧密相连，两者都是通过改变酶或蛋白质的结构和特性来实现更高效的生产。 2. 酶工程和蛋白质工程的应用：酶工程和蛋白质工程的应用领域非常广泛，涉及到药物、食品、能源、生物传感器等领域。此外，酶工程和蛋白质工程技术也可以用于污水处理、环保等领域。 四、实验与教学内容
1. 酶的制备和分离实验：通过培养酶产生菌株，提取和纯化酶，学生们可以掌握酶制备和分离的技术方法。 2. 蛋白质折叠和纯化实验：通过对蛋白质的表达、修饰和折叠过程进行实验，增强学生对蛋白质折叠和纯化的理解。 3. 酶与底物反应动力学实验：通过对酶的催化速率和底物反应动力学的测定，学生们可以学习酶的催化原理和催化机理。 结论 总之，酶工程和蛋白质工程是重要的研究领域，在工业生产和医药发展中具有广泛的应用前景。通过本教案的学习，学生们将掌握酶工程和蛋白质工程的基本原理和技术方法，为今后的科研和工作奠定坚实的基础。
蛋白质与酶工程重点 1.蛋白质工程：以蛋白质结构与功能的关系研究为基础，利用基因工程技术或化学修饰技术对现有蛋白质加以改造，组建成新型蛋白质的现代生物技术。 2.酶工程：利用酶、细胞器或细胞的特异催化功能，通过适当的反应器工业化生产人类所需产品或达到某种特殊目的的一门技术科学。 3.酶工程研究的主要内容：1）化学酶工程2）生物酶工程3）固定化酶与细胞4）酶反应器与传感器5）酶的非水相催化 4.蛋白质的融合：将编码一种蛋白质的部分基因重组到另一种蛋白质基因上，或将不同蛋白质基因的片段组合在一起，经基因克隆和表达产生新的融合蛋白。 5.蛋白质的融合的作用：1）用于表达产物的分离纯化；2）提高表达产物的溶解度；3）提高蛋白质稳定性。 6.蛋白质晶体学：利用X 射线衍射技术，进行生物大分子结构研究的工程，是结构生物学的一个重要组成部分。 8.定点突变：通过分子克隆手段定点的改变特定基因的局部核苷酸序列，通常被用来研究蛋白质的功能结构以及用于目的蛋白的改造。 10.酶工程的研究范围： 1）各类自然酶的开发和生产； 2）酶的分离纯化和鉴定技术； 3）固定化技术； 4）利用其他的生物技术领域交叉渗透； 5）多酶反应器的研制和应用。 11.酶的稳定性和稳定化： （一）引起酶失活的原因： 1）酶的活性中心一些特定氨基酸残基被化学修饰，使酶活性丧失（微观）； 2）外部环境的影响，酶活性中心出现空间障碍，使其不能与底物结合； 3）酶的高级结构发生变化（螺旋、折叠发生变化）； 4）多肽链的断裂（很强烈）； （二）酶的稳定化： 1）低温保存（酶的本身不易变性，不易使其他酶把目的蛋白降解）； 2）添加盐类（高浓度（NH4）2SO4 ）； 3）添加底物辅酶等配体； 4）添加强变性剂（保护一级结构，使用时可复活）； 5）结晶化。 12.微生物作为酶源的优越性： 1）容易获得酶需要的酶类； 2）容易获得高产菌株； 3）生产周期短； 4）生产成本低； 5）生产易管理； 6）提高微生物产酶的途径比较多。 13.固定化酶：指在一定空间呈封锁状态存在的酶，能连续地进行反应，反应后的酶可以回收重复使用。 14.固定化酶的优点： 1）极易将固定化酶与产物和底物分开；
酶工程调研报告 酶工程调研报告 一、引言 酶工程是利用生物技术对酶进行研究、改造和应用的学科，它在生物工程领域发挥着重要作用。本次调研主要是对酶工程的相关领域进行深入研究，总结分析酶工程的发展现状和应用前景。 二、酶工程的发展现状 酶工程是一门相对较新的学科，其发展与生物技术的进步紧密相关。近年来，酶工程在诸多领域取得了显著的进展。首先，在医药领域，酶工程在制药过程中的应用越来越广泛。通过对酶的改造和设计，可以提高药物的有效性和稳定性，降低不良反应的发生率。其次，在食品工业中，酶工程可以用于生产酶制剂，如面包发酵酶、酵素添加剂和酶活性剂等。这些酶制剂可以提高食品的质量和口感，并延长其保质期。此外，在环境保护方面，酶工程也发挥着重要作用。通过酶的催化作用，可以实现废水和废气的高效处理，减少对环境的污染。 三、酶工程的应用前景 酶工程在未来的发展中具有广阔的应用前景。首先，酶工程可以用于提高生物化学反应的效率和速度。目前许多化学反应需要高温和高压条件下进行，这对环境造成了一定的污染。而酶
作为一种天然的催化剂，可以在温和条件下促进反应的进行，减少能源的消耗和环境的污染。其次，酶工程可以用于开发新型的生物药物。随着对人类基因组的深入研究，研究人员可以通过酶的改造和合成，设计出更具针对性的药物，提高对疾病的治疗效果。此外，酶工程还可以应用于农业领域，提高农作物的产量和质量。通过利用酶的催化作用，可以提高养分的吸收率和抗病虫害的能力，增加农作物的抗逆性。 四、酶工程面临的挑战和问题 酶工程虽然有着广阔的应用前景，但也存在一些问题和挑战。首先，酶的收获和提取成本较高，导致酶制剂的价格较高，在某些领域的应用受到限制。其次，酶的稳定性和储存问题亟待解决。随着酶工程的发展，对酶的需求越来越大，但酶的稳定性和储存时间较短，给其应用带来了一定的局限性。此外，酶的催化效率和特异性等性质还需要进一步改进和提高，以满足不同领域的需求。 五、结论 酶工程是一门具有广泛应用前景的学科，通过对酶的研究和改造，可以提高生产效率、改善生活质量和保护环境。尽管酶工程仍面临一些问题和挑战，但其在医药、食品和环境等领域的应用潜力巨大。未来，随着生物技术的不断发展和酶工程技术的进一步完善，相信酶工程将为人类社会的发展做出更大的贡献。
蛋白质与酶工程结课感言 近几个月，我参加了一门关于蛋白质与酶工程的课程，通过学习课程内容，我对蛋白质的结构和功能有了更深入的了解，同时也对酶工程的应用前景有了更加清晰的认识。在这篇文章中，我想分享一下我对蛋白质与酶工程的学习收获和感悟。 蛋白质是生命体中不可或缺的重要分子，它们不仅构成了细胞的基本组成部分，还参与了许多生物过程，如代谢、信号传递、结构支持等。在课程中，我了解到蛋白质的结构是多样的，包括四级结构：一级结构是由氨基酸序列组成的线性链，二级结构是由氢键形成的α-螺旋和β-折叠，三级结构是由各种非共价作用力使蛋白质折叠成特定的立体构型，四级结构则是由多个蛋白质亚基组装而成的复合物。通过研究蛋白质的结构，我们可以揭示其功能和相互作用，为药物设计、生物工程等领域提供重要的基础。 而酶则是一类特殊的蛋白质，它们具有催化反应的能力，能够加速化学反应的速率。酶在生物体内起着至关重要的作用，例如消化食物、合成新的分子等。在酶工程领域，我们可以利用现代生物技术手段对酶进行改造和优化，以满足特定的工业生产需求。通过对酶的改造，可以提高其催化效率、稳定性和特异性，从而增加产物得率、减少副产物和废物的生成，降低生产成本和环境污染。 在课程中，我学习了许多酶工程的方法和应用。其中，基因工程是
酶工程的重要手段之一。通过对酶基因进行克隆、表达和纯化，我们可以获得足够量的酶用于进一步研究和应用。同时，还学习了酶的固定化技术，即将酶固定在固体或载体上，提高酶的稳定性和重复使用性。此外，还了解了酶催化反应的机理和动力学，这对于酶工程的设计和优化至关重要。 除了理论知识的学习，课程还提供了实践环节，让我们动手进行酶工程实验。通过实验，我亲自体验了酶的表达、纯化和活性检测等步骤，深刻理解了酶工程实践的挑战和重要性。实验中的每一个细节都需要我们仔细处理，以确保最终结果的准确性和可靠性。这些实践经验使我更加深入地了解了酶工程的实际操作和应用前景。 通过学习蛋白质与酶工程课程，我深刻认识到蛋白质和酶在生命科学和生物工程领域的重要性。蛋白质的结构和功能研究为新药物研发和疾病治疗提供了理论基础，酶工程技术的发展为工业生产的高效、环保和可持续发展提供了强大的支持。我对蛋白质和酶的研究充满了兴趣和热情，希望能够继续深入学习和探索这个领域。 我要感谢这门蛋白质与酶工程课程的教师和助教，他们的辛勤付出和专业指导使我们受益匪浅。同时，也要感谢我的同学们，与他们的交流和讨论让我从不同的角度看待问题，拓宽了我的视野。通过这门课程，我不仅学到了专业知识，还培养了自主学习和团队合作的能力，这将对我的未来学习和工作产生长远的影响。
蛋白质与酶工程结课感言 近年来，随着生物技术的飞速发展，蛋白质与酶工程逐渐成为研究领域中备受关注的热点之一。通过对蛋白质的研究和工程改造，我们能够更好地理解生物体内的生物过程，并且可以利用这些知识来开发新的药物和生物催化剂。在本次学习中，我对蛋白质与酶工程有了更深入的了解，并且对其在实际应用中的巨大潜力有了更清晰的认识。 蛋白质作为生物体内重要的官能分子，承担着多种生物过程的关键角色。在课程中，我们学习了蛋白质的基本结构和功能，了解了蛋白质的折叠和组装机制，以及蛋白质与其他分子相互作用的方式。这些知识对于我们理解生物体内的各种生理过程以及疾病的发生机制具有重要意义。 酶作为一种生物催化剂，在生物工程和制药领域有着广泛的应用。在课程中，我们学习了酶的分类、结构和催化机制。通过对酶的工程改造，可以提高其催化效率和稳定性，从而实现对生物过程的精确控制和产物的高效合成。酶工程在制药领域尤为重要，通过改造酶的催化性能，可以开发出更安全、更有效的药物，为人类的健康事业做出贡献。 在学习过程中，我深刻体会到了科学研究的艰辛和创新的重要性。蛋白质与酶工程是一门综合性强、实验技术要求高的学科，需要我
们熟练掌握实验操作技巧和数据分析方法。同时，在解决实际问题时，我们需要不断思考和创新，寻找到适合的实验方案和研究思路。只有不断地学习和实践，我们才能够在蛋白质与酶工程领域取得更加卓越的成就。 我还意识到在蛋白质与酶工程研究中，与其他学科的交叉合作具有重要意义。比如，生物信息学的发展为蛋白质序列和结构的研究提供了强有力的工具和方法；材料科学的进展为酶的固定化和稳定化提供了新的思路和技术。因此，我们应该与其他学科的研究者密切合作，共同推动蛋白质与酶工程的发展。 蛋白质与酶工程是一门前沿的研究领域，对于推动生物技术的发展和促进人类健康具有重要意义。通过本次学习，我对蛋白质与酶工程有了更深入的了解，并且意识到其在生物制药和生物催化等领域的巨大潜力。我将继续努力学习和实践，为蛋白质与酶工程领域的发展做出自己的贡献。
动物组织蛋白提取实验报告 动物组织蛋白提取实验报告 摘要：本实验旨在研究动物组织中蛋白质的提取方法，通过对比常用的三种提取方法，选择最适合的方法进行蛋白质提取。结果表明，SDS-PAGE法是最适合的蛋白质提取方法。 关键词：动物组织；蛋白质提取；SDS-PAGE法 一、引言 在生物学研究中，蛋白质是非常重要的一种生物大分子。因此，研究蛋白质的提取方法对于生物学研究具有重要意义。本实验旨在比较常用的三种动物组织蛋白质提取方法，并选择最适合的方法进行蛋白质提取。 二、材料与方法 1.材料 （1）鼠肝、鸡肌、牛血清等组织样品；
（2）Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）、PBS缓冲液（pH 7.4）、RIPA裂解液等； （3）BCA试剂盒、SDS-PAGE凝胶等。 2.方法 （1）Tris-HCl缓冲液法：将样品加入Tris-HCl缓冲液中，用超声波裂解，离心去除细胞碎片，收集上清液。 （2）PBS缓冲液法：将样品加入PBS缓冲液中，用超声波裂解，离心去除细胞碎片，收集上清液。 （3）RIPA裂解液法：将样品加入RIPA裂解液中，用超声波裂解，离心去除细胞碎片，收集上清液。 （4）BCA测定法：将所得蛋白质溶液与BCA试剂混合，在560 nm 处测定吸光度值。 （5）SDS-PAGE法：将所得蛋白质溶液进行电泳分离，并进行银染色或Western blot检测。
三、结果与分析 本实验选择了鼠肝、鸡肌、牛血清等组织样品进行蛋白质提取。通过比较三种不同的提取方法，发现使用RIPA裂解液法所得的蛋白质含量最高。但是，在使用BCA试剂盒对蛋白质含量进行测定时发现，使用PBS缓冲液法和Tris-HCl缓冲液法所得的蛋白质含量也较高。 进一步地，我们使用SDS-PAGE法对三种不同提取方法所得的蛋白质进行分离和检测。结果表明，使用SDS-PAGE法所得的蛋白质条带清晰、分离度高、检测灵敏度高，并且能够同时检测多个蛋白质。 四、结论 通过本实验的比较，我们发现RIPA裂解液法所得的蛋白质含量最高，但是使用SDS-PAGE法进行蛋白质检测时，发现Tris-HCl缓冲液法和PBS缓冲液法也能够提供较高含量的蛋白质。因此，在实际应用中应根据需要选择最适合的提取方法。同时，SDS-PAGE法是最适合的蛋白质检测方法。
三一文库（https://www.doczj.com/doc/6519002552.html,） 〔“酶工程”_暑期科研实践_实习_报告_总结 2100字 - 总结范文〕 “酶工程”暑期科研实践总结报告 生物科学与工程学院生物工程2班黄义林 20xx30742333 这次暑期科研实践，我和李洋、黄文潘都参加了有张俊辉师兄所负责的酶分子改造的项目，实际参加实验的时间是7月13至29号，以及8月16至19号。在此之前，我们还参加了有郑穗平老师和林影老师讲授的关于酶的发展、现状以及前景的讲座，以及内容为负责各个项目的师兄对其项目讲解的培训。 参加实践前的讲座和培训都让我对酶的发展概况、研究
方向有了更深刻全面的认识。实验中，张俊辉师兄让我们从实验的开头开始，逐步学习实验过程中各阶段的实验操作，同时对专业知识进行讲解，让我们更好地掌握实验操作的原理。在实验流程中，我们的操作都没有出现能直接导致实验失败的失误，但实验最后并没有得到想要的产物，原因应该是多方面的，也和我们的实验操作有很大关系。实验没有得到很好的成果，但在实践过程中，我学习和掌握了一些基本实验操作技能及操作规范，并对实验室内的规章制度有了更多的了解。 下面说一下我在实验中学到的知识和其他心得体会。 首先是酶分子改造实验的思想：获得待改造酶分子的三维结构后，对其进行分析，从而确定可能改善酶某一方面性能的突变位点，通过反编译获得改造后的酶的基因，把这段基因再表达出来，就得到改造后的酶分子。 思想比较直接，但是实际操作却比较迂回，因为某些步骤看起来不复杂，但在现实中要实现就没有那么简单，比如要确定突变位点和突变的方向，目前的理论对蛋白质结构和功能的研究还达不到可以直接指导酶分子改造的那个层次，所以在改造的时候需要结合理性突变和随机突变，即理性确
蛋白质的定量测定（BCA试剂盒法）实验报告 一、实验目的：掌握BCA法测定蛋白质浓度的方法及原理。 二、实验原理：在碱性的环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA法与Cu1+结合形成稳定的蓝紫色复合物，在562nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。 三、实验材料： 实验药品和试剂：BCA Reagent 100 ml （普利莱基因技术有限公司）Cu Reagent 2.5ml （普利莱基因技术有限公司）BSA standard 4mg/ml 1 ml 待测溶液。 仪器：96孔板酶标分析仪（DNM-9602 北京普朗新技术有限公司）移液枪试管EP 管恒温水浴箱。 四、实验方法与步骤： （1）工作溶液配置：将5ml的BCA Reagent与100μl的Cu Reagent混合为WR工作试剂。（2）标准蛋白溶液的配置：用上节课已配置好的0.1M的PBS缓冲液进行配比稀释：40μl 4000μg/ml BSA+60μl 0.1M的PBS=100μl（BSA=1600μg/ml）。 （3）倍比稀释：为减小误差，将标准蛋白和待测样本分为三个相同组，每个孔加25μl，浓度从上到下依次增加，H行为待测溶液。从配置好的100μl标准蛋白溶液中取出75μl（浓度为1600μg/ml），再将75μl标准蛋白溶液取出一半到EP管中，将37.5μl的PBS缓冲液加入取出的蛋白溶液中（浓度为800μg/ml），在EP管上做好浓度标记，依次倍比稀释，得到BSA 标准溶液1600，800，400，200，100，50，25μg/ml，各75μl。省略1600μg/ml标准管直接从800μg/ml开始。 （4）标准测定：在每孔25μl标准品或待测样品中，各加入200μl WR 工作液轻摇混合。 表1 微板测定方案的加样量和比例
蛋白质与酶工程结课感言 在本学期的蛋白质与酶工程课程中，我学到了许多关于蛋白质和酶的知识，也了解了酶工程的基本原理和应用。通过这门课程的学习，我对蛋白质与酶的重要性有了更深入的认识，并对酶工程的前景充满了期待。 蛋白质是生物体内的重要分子，它们在细胞的结构和功能中起着关键的作用。蛋白质的合成受到遗传信息的控制，通过基因转录和翻译过程产生。蛋白质的结构多样性决定了它们能够执行各种生物学功能，如酶催化、结构支持和信号传导等。在课程中，我学到了蛋白质的结构与功能的关系，以及蛋白质的折叠和组装过程。这些知识为我进一步理解酶的工作机制奠定了基础。 酶是一类特殊的蛋白质，能够催化化学反应的进行。酶的催化作用是通过与底物结合形成酶底物复合物，使催化反应的活化能降低，从而加速反应速率。酶的催化过程包括亲和力增加、底物取向、过渡态稳定等步骤。通过酶工程的手段，可以对酶的性质进行改造，使其具有更好的催化性能。课程中，我学习了酶工程的基本原理和技术方法，如基因工程、蛋白工程和进化策略等。这些方法为我们设计和改造高效酶催化系统提供了有力的工具。 酶工程在生物技术和生物医药领域有着广泛的应用前景。通过改造酶的催化性能，可以提高生产效率、降低生产成本，实现可持续发
展。酶工程还可以应用于制药工业，用于药物合成和生物药物的生产。此外，酶工程还可以用于环境保护和能源开发等领域，如废水处理、生物燃料电池等。这些应用领域的拓展为酶工程提供了广阔的发展空间。 通过本学期的学习，我不仅对蛋白质与酶的基本原理有了更深入的了解，也学到了酶工程的基本理论和技术。这门课程不仅提供了专业知识，也培养了我们的实验技能和科学思维能力。在实验课中，我亲自操作了酶的分离纯化和酶活性测定等实验，提高了我在实验操作方面的技能。同时，课程还通过案例分析和论文阅读等形式培养了我们的科学思维和创新能力。 总的来说，蛋白质与酶工程课程为我打开了了解蛋白质与酶的大门，并对酶工程的发展前景充满了期待。通过学习，我对蛋白质与酶的结构与功能、酶工程的原理与方法有了更深入的了解。我相信，在不久的将来，酶工程将在生物技术和生物医药领域发挥更大的作用，为社会的发展和人类的福祉作出更大的贡献。我也会继续学习和探索，为酶工程的发展贡献自己的力量。
猪肝中碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究实验报告 摘要：碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，简称ALP)广泛存在于微生物和动物体内，是一种非特异性磷酸单酯酶。本实验材料取自猪肝，采用有机溶剂沉淀分离纯化其中所含的碱性磷酸酶，运用终止法和考马斯亮蓝法测定其酶活力和蛋白质含量。根据酶活力变化，进行不同温度，PH对该酶的影响的实验，得出最适温度和最适PH。 关键词：碱性磷酸酶；有机溶剂沉淀；酶活力；PH；温度 1 前言 碱性磷酸酶是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶，即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。本实验中所用的猪肝中的碱性磷酸酶含量颇高，且其活性可在较长时间内得以保持。 1.1实验目的 掌握以有机溶剂分离技术提取蛋白质及酶的原理和方法；酶蛋白纯化过程中的活性、比活性、得率及纯化倍数的概念及计算；了解AKP的临床意义及纯化蛋白质的一般方法。 1.2 实验试剂与仪器 1.2.1 实验仪器 电子天平；匀浆器；紫外可见分光光度计；高速冷冻离心机；PH计；磁力加热搅拌机 1.2.2实验试剂及配制 95%乙醇、丙酮、正丁醇、醋酸镁、醋酸钠、Tris、考马斯亮蓝G－250、硫酸镁、氢氧化钠 （1）0.01mol/L醋酸镁－0.01mol/L醋酸钠混合溶液：取0.5mol/L醋酸镁20mL 及0.1mol/L醋酸钠100mL，混匀后加蒸馏水稀释至1000mL。 （2）0.01mol/L Tris-硫酸镁缓冲液（pH8.8）：称取三羟甲基氨基甲烷（Tris）12.1g，用蒸馏水溶解，并稀释至1000mL，配制0.1mol/L Tris溶液；取0.1mol/L Tris溶
蛋白酶的发酵及酶活力测定实验报告 学院：生物科学与工程学院 专业：生物技术 班级： 1班 姓名： 学号：
摘要：蛋白酶是一类重要的工业用酶，广泛应用于食品、医药、洗涤剂、皮革、酿酒等行业。当前，食品工业用酶主要来自微生物，尤其是蛋白酶的应用最为广泛。作为一种生物催化剂,它具有催化反应速度快,无工业污染,催化反应条件适应性宽等的性质和优点。由于从植物和动物中生产蛋白酶具有的局限性,为了满足当今世界市场的需要,人们越来越多地把目光投到微生物蛋白酶上[2] 。微生物由于具有生长速度快、所需生长空间小、广泛的生化多样性及其遗传可操作性等特点,因而备受人们青睐。本文主要进行了菌种的生长曲线的绘制与菌种最佳发酵产酶时间等方面的研究。 关键字：蛋白酶生长曲线酶活力
第一章前言 1.1研究的目的与意义 蛋白酶是工业酶中用得最多的一种酶，是催化蛋白质肽键水解的一类酶,它作用于蛋白质,将其分解为蛋白胨、多肽及游离氨基酸[1] ，约占酶总量的 60%，其中碱性蛋白酶就占25%。有调查显示，酶制剂市场量最大的是洗涤剂用酶，第二位是淀粉加工用酶，以后依次为乳制品加工业、制酒工业、纺织工业和饮料加工业等用酶[2]。与动、植物来源的蛋白酶相比，利用微生物产的蛋白酶有易于培养、生长快、产量高、易于提取，适于大规模工业化生产，培养基的成本相对较低等优点，使微生物成为生产蛋白酶的重要来源和首选材料。 1.2 国内外研究概况 1.2.1 微生物蛋白酶的分类 由于从植物和动物中生产蛋白酶具有的局限性,为了满足当今世界市场的需要,人们越来越多地把目光投到微生物蛋白酶上[3]。当前工业用酶主要来源于微生物，微生物来源的蛋白酶按其作用的 pH 值的不同可分为三类，即碱性蛋白酶、中性蛋白酶及酸性蛋白酶，它们作用的最适 pH 值分别为碱性、中性及酸性。 1.2.2在食品工业中的应用 蛋白酶在食品工业上的应用主要是用在制干酪，蛋白质水解调味液，烤焙食品，肉类嫩化，功能性低聚肽和阿斯巴甜的合成等。食品加工使用的蛋白酶通常来自于枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、米曲霉和黑曲霉等。 随着社会发展和生活水平不断提高，人们对肉类的需求量日益增长的同时，对肉的品质也提出了更高要求。微生物蛋白酶肉类嫩化剂是一种专门用于嫩化肉类的生物制剂，在适当温度下，可以断裂蛋白质中的某些肽键，提高肉的嫩度，使肉变得多汁、柔软、易于咀嚼，提高了肉的成品率、保质期和经济效益，因此十分经济且便于生产，并能取得显著效果。面包制作过程中，面粉中含有的不溶解性谷蛋白可以通过碱性蛋白酶限制性降解来修饰。用米曲霉蛋白酶和肽酶对面筋蛋白作有限的水解，可改善面团操作性能和机械性能，以适应不同制品的需要。酶处理后的面团其韧性和机械强度都有所增加。过量使用蛋白酶能减少面团的混合时间和增加面包产量。使用细菌蛋白酶可以增加面团的延展性[4]。
实验一低温豆粕提取大豆分离蛋白 一、原理 大豆分离蛋白的提取是根据大豆中所含的蛋白质在不同的pH时有不同的溶解度的特性而实现的。大豆粕中所含的蛋白质大部分都能溶解在水中，在pH6.5的蒸馏水中有很高的溶解度，且都能溶解于0.2%的碱液中，相反，在pH4.5时，蛋白质的溶解度非常小。所以大豆分离蛋白的提取是先用水或稀碱液从低温豆粕中萃取可溶物，用离心机分离出不溶物（豆粕渣）然后在萃取液（豆乳）中加酸（盐酸、磷酸、醋酸等）调节pH到4.2-4.5，于是蛋白质即从萃取液中沉淀出来，倾除清夜（即乳清、主要是低分子糖类、蛋白质等），将下层的蛋白质凝聚物进行水洗、浓缩、干燥即可得到等电点分离蛋白。 二、试剂及仪器 1）氢氧化钠AR级 2）盐酸AR级 3）电热恒温水浴锅 4）电热恒温干燥箱 5）离心沉淀机 6）酸度计 7）多功能电动搅拌器 三、实验步骤 在1000ml烧杯中将50克豆粕按料液比1：10的比例与水混合，温度50℃，低速搅拌30-35rpm，用1N氢氧化钠pH调至7.5，继续搅拌30分钟。悬浮液在2000 rpm转速下离心15分钟，回收上清液，沉淀（豆渣）弃去。上清液边搅拌边加入1NHCl（30-35rpm），将pH调至4.5，温度30℃，继续搅拌10分钟。将悬浮液在2000 rpm离心15分钟，弃去上清液（大豆乳清），回收沉淀（凝乳）并称重。 称取5克（精确到0.001克）于表面皿中，在105℃烘箱内烘干至恒重，测定凝乳的水分含量，烘干后的凝乳存放于干燥器内保藏。其余湿凝乳置于-15℃下冷冻储藏备用。 习题 1.求凝乳分离蛋白产品的含水量、蛋白含量 2.求分离蛋白生产过程的提取率、蛋白回收率、蛋白纯度一般是多少 3.为了提高蛋白提取率，在萃取、浆渣分离等操作中可采取什么措施？ 实验二凯氏定氮法测定大豆分离蛋白中蛋白质的含量 一、原理 浓硫酸和样品及催化剂一起加热沸腾，样品中蛋白质分解，其含的N 变成（NH4）2SO4,碱化并蒸馏使NH3放出，将NH3蒸入酸溶液，在以标准酸来滴定，测得样品中的含氮量，从而得出样品中蛋白质含量，其反应式如下：