病毒的特点：
1、形体微小，能通过细菌滤器，用电子显微镜才能观察到。
2、无细胞结构，其主要成分是核酸和蛋白质
3、每种病毒只含有一种类型的核酸（RNA或DNA）
4、因缺乏完整的酶系统和能源，故只能寄生于活细胞内，依靠宿主细胞的代谢系统合成蛋白质和核酸
5、病毒以其基因为模板，在宿主细胞内复制出新的病毒颗粒
6、为了在生物界保存其种属，病毒具备从一个宿主转移到另一个宿主的能力，并具有对敏感宿主的侵染性和复制性
7、在宿主体外，能以大分子状态存在，并可长期保持其侵染能力
8、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的基因组中，并能诱发潜伏感染
体外细胞培养的基本条件：
1、条件要求高，培养液组分复杂，需要添加血清才能满足生长需要
2、避免微生物污染，需要在培养液中加入抗生素。
3、体外细胞培养的基本要求主要包括细胞接种（尽量选择对数期细胞接种）、
4、培养液营养成分、
5、酸碱度（能耐受的ph范围为6.6-7.8，依靠缓冲系统调节）、
6、气体条件（细胞生长需要CO2 ，大规模培养需要有足够的氧气）、
7、温度（最适温度为35-37。C）、
8、水的纯度（一般要求去离子水或三蒸水）、
9、无菌条件等
实验动物的微生物控制分类：
1、普通动物，一级动物，要求不携带动物烈性传染病和人兽共患病病原
2、清洁动物，二级动物，在一级动物要求上，不携带对动物危害大、对实验干扰大的
病原体，外观健康，主要器官不得有组织病理学病变
3、无特定病原体动物，三级动物，除普通动物、清洁动物不得携带病原体外，还要求
排除潜在感染或条件致病菌的感染
4、无菌动物，四级动物，要求在体内外不得检出其它生命体
实验动物的遗传学分类
1、近交系，指经过连续20代以上全同胞或亲子交配培育的动物品系
2、封闭系，不从外界引入新的血缘，非近亲交配方式的实验动物群体
3、突变系，由于遗传基因发生突变而具有某些特殊形状的动物
4、杂交群动物，由不同品系杂交所产生的后代
5、转基因动物，插入外源基因后能正常繁殖的动物
大鼠、小鼠的采血方法
1、剪尾采血，动物麻醉后，将尾端剪去约5mm，待血液流出采集，小鼠可每次采血
0.1ml，大鼠约0.4ml
2、眼眶后静脉丛采血，拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤固定，轻轻压迫颈部两侧，
使眼球充分外凸。采血管插入眼角与眼球之间，向眼底方向刺入，切开静脉丛，血流即流入取血管。
3、颈（股）动脉或颈（股）静脉采血，麻醉动物，剪去被毛，作颈静脉或劲动脉分离
术后采血
4、摘眼球采血，采血时，用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球凸出，右手用弯头
镊子摘除眼球，迅速采集血液
病毒的纯化方法：
一般原则释放病毒至细胞外、去除细胞碎块、病毒悬液浓缩
1、PEG浓缩法，包括直接加入法、液体浓缩法、固体浓缩法
2、超过滤法
3、吸附法，有凝胶吸附法、红细胞吸附法
4、超速离心法
中和试验及其应用
是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物，使病毒与抗体相互反应，再将混合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。通常以100TCID50/单位体积或100LD50/单位体积作为标准的病毒试验浓度
1、鉴定病毒、
2、分析病毒抗原的性质、
3、测定免疫血清的抗体效价和疫苗接种后的效果、
4、测定病人血清中的抗体，用于诊断病毒性疾病
鸡胚培养的优缺点
优点
1、组织分化程度低，病毒易于繁殖
2、来源充足，其本身很少携带病毒和细菌，敏感范围广，对接种的病毒不产生抗
体
3、有神经血管的分布和脏器的构造
缺点
1、与除引起鸡胚死亡的病毒及产生痘疱的病毒外，通常不产生特异性的感染指
症，必须通过另外的实验来证明病毒的存在
2、鸡食入的抗生素会使某些病原体的繁殖收到抑制
3、某些细菌和病毒能够从感染的鸡传递到鸡胚
PCR（聚合酶链反应）基本反应体系和步骤
反应体系：需要扩增的模板、与DNA靶序列3’末端互补的合成引物、4种三磷酸脱氧核糖核苷酸dNTP、耐热DNA聚合酶、合适的缓冲液体系。
基本步骤与反应：
1、变性，将反应体系混合物加热至94?C，维持约30~60秒，使待测双链DNA变性解链为单链模板。
2、2、退火，冷却至特定的温度（引物的Tm值左右，一般为45~65?C），一对寡糖核苷酸引物分别与正、负单链DNA序列两端互补结合。
3、延伸，将温度提高至72?C并维持一段时间，引物在聚合酶作用下，以3?端为起点，4种dNTP为原料，按碱基配对原则，沿5?→3?方向延伸，合成两条新DNA链。
基因克隆以及基本步骤：
利用酶将不同来源的DNA分子在体外进行特异性切割、重组连接、组成新的DNA 重组子，导入宿主细胞，随着宿主细胞的繁殖从而得到大量自带DNA重组子或其表达产物。
基本步骤：
1、分离或合成目的基因
2、将目的基因在体外插入载体形成重组DNA
3、将重组DNA导入宿主细胞
4、重组体的筛选、鉴定和分析
乙肝病人血清学检测的五项指标：
HBsAg（表面抗原）、抗-HBs（表面抗体）、抗-HBc（核心抗体）、HBeAg（e抗原）、抗-HBe（e抗体）
乙肝病毒血清学检查三种主要抗体及其意义
1、抗-HBe一般存在于无症状HBV携带者及活动期慢性肝炎患者中。
2、抗-HBs：是HBsAg刺激机体产生的特异性中和抗体，是保护性抗体。阳性表明机体已经产生免疫力
3、抗-HBc：包括抗-HBcIgM、抗-HbcIgG，前者是急性感染的重要指标，也是慢性活动肝炎的重要标志。阳性主要见于乙肝恢复期，慢性感染和既往感染。
空斑形成单位（PFUs）试验：是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合，当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时，会造成细胞被溶解而形成空斑，每个空斑系由一个病毒颗粒所造成，计算空斑数目再乘以稀释倍数，即可得知原来的病毒感染单位的浓度。凡是能在细胞培养物中产生CPE的病毒都可用空斑技术来测定其滴度。
50%终点法：是将病毒悬浮液经一系列稀释后，接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞，将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做曲线，找出造成50%动物、鸡胚死亡或病变的终点稀释度。
ID50：即是指可造成50%动物或鸡胚感染的剂量
CCID50：造成50%细胞培养产生病变效应的剂量
LD50：为造成50%动物或鸡胚死亡的病毒含量
血凝试验（HA）：有些病毒和病毒表面的血凝素能引起人或某些哺乳动物的红细胞发生凝集，这就是所谓的红细胞凝集现象。当病毒数与红细胞数比值足够大时，病毒会与红细胞结合成网状，造成悬浮液沉淀或凝集
血凝滴度HT：将红细胞与一系列病毒稀释液混合。造成凝血的最高稀释倍数即为血凝滴度
电镜分辨率：是指分清楚两个点或两条线中心之间的最小距离的能力
负染色技术：高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本，从而清楚的显示出被衬物的细节结构
质粒：是存在于细菌染色体之外的、可自主复制的双链环状DNA，几乎完全裸露，易于分离纯化。
核酸杂交技术：用特定标记的已知核酸序列与待测核酸进行特异性结合，形成杂交体，并体用相应的显示技术检测目标核酸的存在及其位置。
Southern印迹杂交：一是将待测定核酸DNA分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物（硝酸纤维素膜或尼龙膜）上，即印迹（blotting）；二是固定于膜上的核酸与同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火，即分子杂交过程。步骤包括：1、待测核酸样品的制备与限制酶消化2、琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品3、电泳凝胶的预处理4、转膜5、探针标记6、预杂交与southern杂交7、洗膜8、放射性自显影检测。
Nouthern印迹杂交：将RNA样品通过琼脂凝胶电泳进行分离，再转移到固相支持物上，用探针对其进行杂交，将具有阳性的位置与标准相对分子质量进行比较可得到RNA种类的数目、分子大小及丰度等信息。
Ct值：值每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数，每个模板的Ct 值与其起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。
核酸探针：是指以研究和诊断为目的，带有标记物的已知序列的核酸片段，它能和与其互补的核酸序列杂交，用来检测特定序列核酸的DNA或RNA片段。
Tm值：Tm值就是DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度，Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
CPE细胞病变效应：是病毒或接种分离标本后。细胞出现的病理性变化。不同的病毒可引起不同的细胞病变效应。
干扰现象interference phenomenon：一种病毒感染细胞后，可以干扰另一种病毒在细胞内的增值。
复性：变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的链又可重新结合成为双螺旋结构，这个过程称为复性。方法是缓慢冷却。
《病毒学检验》课程教学大纲 一、课程基本信息 课程名称：病毒学检验（Experimental Virology） 课程编码： 课程类别: 必修课(专业课) 适用专业: 卫生检验学本科 开课学期: 第七学期 课程学时: 63学时（理论学时27，实验学时36） 课程学分：3.5 先修课程：医学寄生虫学及检验、细菌学检验、临床医学概要等 课程简介：病毒学检验是卫生检验重要的专业课程之一，是卫生检验课程体系的重要组成部分，也是卫生检验专业学生必修的考试课程。本课程通过课堂讲授、实验实习、网络自学等方式进行教学。注重培养学生综合性思维能力，重视学生自主学习、自觉学习，分析和解决实际问题能力，以及创新思维和能力的培养。 选用教材：李洪源、王志玉主编：《病毒学检验》，人民卫生出版社，第一版，2006年7月。 参考书: 1. 张朝武主编：《现代卫生检验》，第一版，人民卫生出版社，2005。 2. 李影林主编：《中华医学检验全书》，人民卫生出版社，1996。 3. 王秀茹主编：《预防医学微生物学及检验技术》，人民卫生出版社，2002。 4. 贾文祥主编：《医学微生物学》，四川大学出版社，2005年1月。 5. 李凡、刘星晶主编：《医学微生物学》，人民卫生出版社，第七版，2008年1月。 二、课程教育目标 通过学习，使学生知悉病毒学检验的基本技术和分子生物学技术，知悉 常见重要致病病毒。要求学生掌握病毒的分离培养方法、血清学实验及分子 生物学技术在病毒学检验中的应用；掌握常见重要致病病毒的生物学性状、 检验方法和预防医学意义。为学生能独立开展各种病毒学检验打下良好基 础。
三、理论教学内容与基本要求 绪论 （一）学时：0.5 （二）要求 【掌握】病毒的特性；病毒学检验的内容及其应用范围；病毒学检验的一般原则。 【熟悉】病毒学检验的质量控制；病毒学实验室的生物安全管理。 【了解】病毒学和病毒学检验的发展史。 第一篇病毒学检验技术 第一章细胞培养技术 （一）学时：1.5 （二）要求 【掌握】体外培养细胞的生物学特性；体外细胞培养的条件；组织培养的种类；细胞系和细胞株的概念；细胞培养方法；细胞培养中平衡盐、消化液和血清的作用；细胞检查方法；细胞的冻存。 【熟悉】用于病毒培养的细胞选择、细胞培养操作过程和细胞培养污染与监测。 【了解】细胞培养技术在病毒学研究中的发展；细胞系的鉴定。 第二章鸡胚接种技术 （一）学时：1.5 （二）要求 【掌握】鸡胚的结构；鸡胚的孵育与检查；接种途径与方法及其用途；病毒的检测；鸡胚接种技术的应用。 【熟悉】实验材料、器械与准备。 【了解】鸡胚的解剖与生理。 第三章动物实验技术 （一）学时：1.5 （二）要求 【掌握】实验动物的分类；普通动物、清洁动物、无特定病原体动物、无菌动物、悉生动物；近交系动物、封闭群动物、突变系动物、杂交群动物及其特点；常用实验动物种类及其品系；
序号 是否N/A 备 注 1 2 3 4井架 底座 底盘 绞车，刹车系统 提升系统部件 其他部件 井架 底座 底盘 绞车，刹车系统 提升系统部件 其他部件 底盘试验记录 部件试验记录（角箱、绞车、平衡试验） 专用性能实验记录 8文件编号： 检验日期： 检验员： 试验报告7NDE 报告56材料报告制造工艺，工艺编号焊接工艺评定（WPS ）井架、底座等主要构件有限元计算 质量控制文件检验 描述记录：按技术协议验收其他文件的完整性 制造图样，记录图号
序号是否N/A 备 注各类设备，零部件，连接件装配完整，齐全； 安装方法正确，无漏装现象； 螺栓、螺母安装正确 2管缆布置布置整齐，走向合理，安装牢固。 整体平面度不大于10mm； 相邻两台面高度差不大于5mm；间隙均匀不大于 10mm； 围栏、扶梯能顺利装拆。 无表面缺陷，清除飞边、毛刺；暴露的加工面防腐处理5 6产品铭牌、警示牌、指示牌、编号牌、仪器仪 表刻度等 液、气、水管线标志 电气接口标志 井口安装基础标志 其他标志（链条节数等标记） 油漆颜色、质量和品种符合相关要求 表面质量9 其他8 记录：描述 4 加工表面标志7非加工表面焊接结构件 完整性 1工作平台 喷漆3产品外观检验
序号是否N/A 备 注主、捞砂滚筒刹车鼓、筒身参数 主、捞砂滚筒钢丝绳参数 捞砂滚筒容绳量 平衡性，平衡记录温升。温升小于45℃，最高温度小于80℃刹带间隙均匀，1mm—3mm；接合面大于80%刹把操作灵活，夹角在45—70之间4辅助刹车 5润滑系统 管路连接正常，无泄漏压力、温度指示7尺寸检验 链条等尺寸确认8防碰测试 9绕绳情况 排列整齐10其他记录： 绞 车 描述 空运转试验，发动机 2100rpm，15min 2设计要求1刹车系统 3 6冷却系统
病毒得特点: 1、形体微小,能通过细菌滤器,用电子显微镜才能观察到。 2、无细胞结构,其主要成分就是核酸与蛋白质 3、每种病毒只含有一种类型得核酸(RNA或DNA) 4、因缺乏完整得酶系统与能源,故只能寄生于活细胞内,依靠宿主细胞得代谢系统合成蛋白质与核酸 5、病毒以其基因为模板,在宿主细胞内复制出新得病毒颗粒 6、为了在生物界保存其种属,病毒具备从一个宿主转移到另一个宿主得能力,并具有对敏感宿主得侵染性与复制性 7、在宿主体外,能以大分子状态存在,并可长期保持其侵染能力 8、有些病毒得核酸能整合到宿主细胞得基因组中,并能诱发潜伏感染 体外细胞培养得基本条件: 1、条件要求高,培养液组分复杂,需要添加血清才能满足生长需要 2、避免微生物污染,需要在培养液中加入抗生素。 3、体外细胞培养得基本要求主要包括细胞接种(尽量选择对数期细胞接种)、 4、培养液营养成分、 5、酸碱度(能耐受得ph范围为 6、6- 7、8,依靠缓冲系统调节)、 6、气体条件(细胞生长需要CO2 ,大规模培养需要有足够得氧气)、 7、温度(最适温度为35-37。C)、 8、水得纯度(一般要求去离子水或三蒸水)、 9、无菌条件等 实验动物得微生物控制分类: 1、普通动物,一级动物,要求不携带动物烈性传染病与人兽共患病病原 2、清洁动物,二级动物,在一级动物要求上,不携带对动物危害大、对实验干扰大得病原 体,外观健康,主要器官不得有组织病理学病变 3、无特定病原体动物,三级动物,除普通动物、清洁动物不得携带病原体外,还要求排除 潜在感染或条件致病菌得感染 4、无菌动物,四级动物,要求在体内外不得检出其它生命体 实验动物得遗传学分类 1、近交系,指经过连续20代以上全同胞或亲子交配培育得动物品系 2、封闭系,不从外界引入新得血缘,非近亲交配方式得实验动物群体 3、突变系,由于遗传基因发生突变而具有某些特殊形状得动物 4、杂交群动物,由不同品系杂交所产生得后代 5、转基因动物,插入外源基因后能正常繁殖得动物 大鼠、小鼠得采血方法 1、剪尾采血,动物麻醉后,将尾端剪去约5mm,待血液流出采集,小鼠可每次采血0、1ml, 大鼠约0、4ml 2、眼眶后静脉丛采血,拇指及食指抓住鼠两耳之间得皮肤固定,轻轻压迫颈部两侧,使眼 球充分外凸。采血管插入眼角与眼球之间,向眼底方向刺入,切开静脉丛,血流即流入取血管。 3、颈(股)动脉或颈(股)静脉采血,麻醉动物,剪去被毛,作颈静脉或劲动脉分离术后采血 4、摘眼球采血,采血时,用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球凸出,右手用弯头镊子摘 除眼球,迅速采集血液 病毒得纯化方法:
环保VMAS检测验收大纲 一、单机设备验收 1、汽车底盘测功机： 根据JJF 1221－2009《汽车排气污染物检测用底盘测功机》国家计量校准规范检验： （1）主滚筒直径与表面径向圆跳动、前后滚筒母线平行度 （2）主滚筒线速度误差 （3）扭力误差 （4）基本惯量误差 （5）恒载荷加载滑行时间与变载荷加载滑行时间 （6）内部损耗功率 （7）加载响应时间 2、汽车排放气体测试仪 根据GB18285-2005《点燃式发动机汽车排气污染物排放限值及测量方法（双怠速法及简易工况法）》国家标准，按JJG688-2007《汽车排放气体测试仪》规定的00级测试仪器进行检定： （1）H C、CO、CO2、NO、O2的示值误差 （2）H C、CO、CO2、NO、O2的分辨力 （3）零位漂移、示值漂移与重复性 （4）HC、CO、CO2、NO、O2的响应时间 3、根据JJF 1385－2012《汽油车简易瞬态工况法用流量分析仪》国家计量校准规范检验：
（1）流量漂移及示值误差、示值重复性 （2）稀释氧浓度示值误差及重复性 （3）稀释氧浓度响应时间 【说明】由于软件的测评目前没有实用可靠的手段和方法，所以通过下面三个方面从侧面验证整套系统是否满足相应的要求。 二、汽车排放气体测试仪O 2的响应时间与流量分析仪稀释氧浓度响应时间一致性的检验 按JJG688-2007方法（改进）对O 2的响应时间进行10次重复性测量，计算10次测量的标准偏差Q σ；按JJF 1385－2012方法（改进）对稀释氧 浓度的响应时间进行10次重复性测量，计算10次测量的标准偏差L σ。 单次测量标准偏差Q σ与L σ均不得超过1s 。 汽车排放气体测试仪10次重复性测量平均值与流量分析仪10次重复性测量平均值值之差不得超过1s 。 【理由】因为VMAS 检测方法原理是测量同一瞬间的排放浓度和流量，根据气体密度（固定物理量）三者相乘就得到了排放量。所以，O 2响应时间的一致性非常重要，不然就会造成不知何时的排放浓度（？）和不知何时的流量（？）相乘，得到的结果也不知是什么？ 三、被检车辆轮胎、底盘测功机主滚筒与VMAS 检测系统（软件）一致性 按GB18285-2005《点燃式发动机汽车排气污染物排放限值及测量方法（双怠速法及简易工况法）》规定的VMAS 检测程序（如下图）。 用测量靠轮同步测量、记录被检车辆轮胎、底盘测功机主滚筒的速度－时间曲线，并与VMAS 检测系统进行比对，是否一致？
检验、测试、调试与验收方案 【隐蔽工程检验、测试、验收方案】 1）凡隐蔽工程都必须组织隐蔽验收。—般分部（项）隐蔽工程由施工员组织验收，邀请现场监理工程师参加；重要的请现场监理工程师、建设单位及设计单位派员参加。 2）隐蔽工程检查记录是工程档案重要内容之一，隐蔽工程经三方共同验收后，及时填写隐蔽工程检查记录。隐蔽检查记录由施工员或工程技术负责人填写，监理工程师和建设单位代表共同会签。 3）不同项目的隐蔽工程，应分别填写检查记录表应复写一式五份，建设单位、监理单位各一份，自存三份归档。 4）隐蔽工程项目及检查内容 A 管线、接线盒预埋：导管、位置、规格、标高、弯度、防腐等，电缆耐压绝缘试验、地线、地板的接地电阻。 B 埋地管道工程：位置、标高、坡度、焊接、防锈、防腐及预埋件等。 5）隐蔽工程检查记录表的填写内容 A 单位工程名称、隐蔽工程名称、部位、标高、尺寸和工程量。 B 材料产地、品种、规格、质量等。 C 合格证及试验报告编号。 6）填写隐蔽工程检查记录，文字要简练、扼要，能说明问题，必要时应附三面图（平、立、剖面图）。 【系统工程检验、测试、调试、验收方案】 1、检验、测试和调试前的准备 （1）仔细确认每一台设备是否安装、连接正确，认真向施工人员询问施工遗留的可能影响使用的有关问题。 （2）再次认真地阅读所有的设备说明书，仔细查阅设计图纸的标注和连接方式。 （3）一定要确认供电线路和供电电压没有任何问题。 （4）调试前应该保证现场没有无关人员。
（5）准备相应的仪器和工具，并保证工作状态优良。 2、检验、测试和调试的项目、方法、程序以及要求 音响系统的调试是工程调试的关键，音响系统涉及的设备最多，调试的部位也最多，遇到的问题也可能最多，所以应首先集中精力完成。调试的原则，必须认真阅读产品说明，逐步细致地进行微调，在不破坏基本的声场条件的前下，有选择地使用音频处理设备，以达到设计要求。需要准备的仪器和工具：相位仪，噪声发生器，频谱仪（含声级计），万用表。主要关键设备调试的步骤：（1）单独开机，从音源开始逐步检查信号的传输情况。因为，当信号在各个设备中传输良好，功放和音箱才会得到一个正常以经过正确处理的信号，才可能有一个好的扩声音量。此时，周边处理设备置于旁路状态，音箱和功放与系统断开。检查时顺着信号的去向，逐步检查它的电平设置、增益、相位及畅通情况，保证各个设备都能得到前级设备提供的最佳信号，也能为下级提供最佳信号。在检查信号的同时，逐一观察设备的工作是否正常，是否稳定，这项工作意义就在于，单台设备的在此时出现故障或不稳定，处理起来比较方便，也不会危及其他设备的安全，因此，这项检查不要带入下一步进行。 （2）上述无误后，就将音箱和功放逐一接入系统，在较小的音量下，利用相位仪首先逐一检查所有立场箱的相位是否一致，为下面的调试作好设备，将噪声发生器的均衡器接入系统，准备好频谱仪，以适中音量开始对均衡器接入系统，准备好频谱仪，以适中的音量开始对均衡器进行调试，频谱仪的测试点要按照有关标准选取，对均衡器的调试原则是：使频谱仪在于20HZ-20KHZ的音频范围内，显示的厅堂频响曲线在各测试点处基本平直。注意：对各个点进行测试时要使音量保持一致，然后记录好调试后的均衡各频点电位器的位置；同样以较小的音量和较大的音量保持一致，然后记录好调试后均衡器各频点电位器的位置；同样以较小的音量和较大的音量分别再进行一次调试，再将均衡器的调试结果记录下来，最后将几种调试结果的数据进行分析，寻找到一个各种音量下均衡量各频点的折中位置，然后再进行测试，并将厅堂频响曲线描绘下来，最终的均衡器各频点位置也要进行记录。在均衡器的调试中，调音台的频率补偿置于0处，其它的周边设备要处于旁路状态。另外需要说明的是：在通常的音响工程中，考虑到厅堂的装饰材料对高频信号的吸收较弱，所以，可以适当将10KHZ以上的信号略做
2020智慧树知到《病毒学检验》章节测试 题【完整答案】 2020智慧树知到《病毒学检验》章节测试答案 绪论 1、用于测量病毒大小的单位是： A.μm B.nm C.pm D.fm E.am 答案: nm 第一章 1、PCR反应的引物需要2条。 A:对 B:错 答案: 对 2、甲型肝炎病毒归属于嗜肝DNA病毒科 A:对 B:错 答案: 错 3、病毒只含有一种核酸，DNA或RNA A:对
B:错 答案: 对 4、乙肝大三阳时，以下哪些项应为阳性 A:HBsAg B:HBeAg C:HBcAg D:抗HBc E:抗HBs 答案: HBsAg,HBeAg,抗HBc 第二章 1、可传播HIV的途径有 A:分娩 B:共用牙刷、剃须刀等 C:输血、血浆及血液制品 D:手术器械 E:皮肤接触 答案: 分娩,共用牙刷、剃须刀等,输血、血浆及血液制品,手术器械 2、狂犬病防治措施有 A:捕杀病犬加强家犬管理 B:人被咬伤后应及时处理伤口 C:动物咬伤后应及时接种狂犬病疫苗
D:及时足量注射丙种球蛋白 E:对可疑患者或严重咬伤者在作用疫苗前注射抗狂犬病病毒血清 答案: 捕杀病犬加强家犬管理,人被咬伤后应及时处理伤口,动物咬伤后应及时接种狂犬病疫苗,对可疑患者或严重咬伤者在作用疫苗前注射抗狂犬病病毒血清 第三章 1、DNA的Tm值大小与下列哪个因素有关 A:温度的升高 B:酸碱度的改变 C:DNA的均一性 D:化学试剂 E:缓冲液 答案:B 2、下列哪项决定了PCR特异性与产量( ) A:变性温度 B:退火温度 C:延伸温度 D:循环次数 E:二价阳离子 答案:B 3、基因分型的传统方法是( )
河南省河口村水库主体工程上游围堰防渗墙工程 验收工作大纲 河南省河川工程监理有限公司 河口村水库主体工程监理部 二〇一一年九月
一、验收依据： 1、《水利水电建设工程验收规程》（SL223-2008）； 2、《水利水电工程施工质量评定规程(试行)》（SL176-2007）； 3、经批准的设计文件及相应的工程变更文件； 4、工程施工合同文件及监理合同文件； 5、其他有关法律、法规、规章和技术标准。 二、验收组织 1、验收参加单位 建设单位：河南省河口村水库工程建设管理局 设计单位：黄河勘测规划设计有限公司 监理单位：河南省河川工程监理有限公司 施工单位：中国水电基础局有限公司 2、验收工作组成员 验收主持人： 王为然河南省河川工程监理有限公司副总经理、项目总监理工程师 验收组成员： 曹先升河南省河口村水库工程建设管理局副局长/验收工作组组长 褚青来河南省河口村水库工程建设管理局总工 严实河南省河口村水库工程建设管理局质量安全科科长
李泽民黄河勘测规划设计有限公司设代处副主任 王为然河南省河川工程监理有限公司副总经理、项目总监理工程师 江永安河南省河川工程监理有限公司副总监理工程师 陆涛河南省河川工程监理有限公司监理工程师 王建生中国水电基础局有限公司项目经理 崔文光中国水电基础局有限公司项目总工 三、验收程序 1、验收准备 （1）承包人向监理单位提出验收申请； （2）发包人（或监理单位）审批申请报告，明确验收时间、验收安排； （3）分部工程验收前，通知相关单位参加。 2、分部工程验收 （1）召开验收预备会，介绍验收成员、分工和验收工作安排； （2）听取承包人施工过程和工程质量评定情况汇报； （3）听取施工监理过程情况汇报； （4）现场检查工程完成情况； （5）检查资料的完整性和规范性； （6）召开验收会，对监理单位起草《分部工程验收鉴定书》草稿进行讨论，并最终形成《分部工程验收鉴定书》； （7）验收组成员在《分部工程验收鉴定书签名表》上签字。
智慧树知到《病毒学检验》章节测试答案绪论 1、用于测量病毒大小的单位是： A．μm B．nm C．pm D．fm E．am 答案: nm 第一章 1、PCR反应的引物需要2条。 A:对 B:错 答案: 对 2、甲型肝炎病毒归属于嗜肝DNA病毒科 A:对 B:错 答案: 错 3、病毒只含有一种核酸，DNA或RNA A:对 B:错 答案: 对
4、乙肝大三阳时，以下哪些项应为阳性 A:HBsAg B:HBeAg C:HBcAg D:抗HBc E:抗HBs 答案: HBsAg,HBeAg,抗HBc 第二章 1、可传播HIV的途径有 A:分娩 B:共用牙刷、剃须刀等 C:输血、血浆及血液制品 D:手术器械 E:皮肤接触 答案: 分娩,共用牙刷、剃须刀等,输血、血浆及血液制品,手术器械 2、狂犬病防治措施有 A:捕杀病犬加强家犬管理 B:人被咬伤后应及时处理伤口 C:动物咬伤后应及时接种狂犬病疫苗 D:及时足量注射丙种球蛋白 E:对可疑患者或严重咬伤者在作用疫苗前注射抗狂犬病病毒血清 答案: 捕杀病犬加强家犬管理,人被咬伤后应及时处理伤口,动物咬伤后应及时接种狂犬病疫苗,对可疑患者或严重咬伤者在作用疫苗前注射抗狂犬病病毒血清
第三章 1、DNA的Tm值大小与下列哪个因素有关A:温度的升高 B:酸碱度的改变 C:DNA的均一性 D:化学试剂 E:缓冲液 答案:B 2、下列哪项决定了PCR特异性与产量（）A:变性温度 B:退火温度 C:延伸温度 D:循环次数 E:二价阳离子 答案:B 3、基因分型的传统方法是（） A:反向杂交 B:质谱 C:基因芯片技术 D:焦磷酸测序技术 E:超深度焦磷酸测序 答案:A
病毒的特点： 1、形体微小，能通过细菌滤器，用电子显微镜才能观察到。 2、无细胞结构，其主要成分是核酸和蛋白质 3、每种病毒只含有一种类型的核酸（RNA或DNA） 4、因缺乏完整的酶系统和能源，故只能寄生于活细胞内，依靠宿主细胞的代谢系统合成蛋白质和核酸 5、病毒以其基因为模板，在宿主细胞内复制出新的病毒颗粒 6、为了在生物界保存其种属，病毒具备从一个宿主转移到另一个宿主的能力，并具有对敏感宿主的侵染性和复制性 7、在宿主体外，能以大分子状态存在，并可长期保持其侵染能力 8、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的基因组中，并能诱发潜伏感染 体外细胞培养的基本条件： 1、条件要求高，培养液组分复杂，需要添加血清才能满足生长需要 2、避免微生物污染，需要在培养液中加入抗生素。 3、体外细胞培养的基本要求主要包括细胞接种（尽量选择对数期细胞接种）、 4、培养液营养成分、 5、酸碱度（能耐受的ph范围为6.6-7.8，依靠缓冲系统调节）、 6、气体条件（细胞生长需要CO2 ，大规模培养需要有足够的氧气）、 7、温度（最适温度为35-37。C）、 8、水的纯度（一般要求去离子水或三蒸水）、 9、无菌条件等 实验动物的微生物控制分类： 1、普通动物，一级动物，要求不携带动物烈性传染病和人兽共患病病原 2、清洁动物，二级动物，在一级动物要求上，不携带对动物危害大、对实验干扰大的 病原体，外观健康，主要器官不得有组织病理学病变 3、无特定病原体动物，三级动物，除普通动物、清洁动物不得携带病原体外，还要求 排除潜在感染或条件致病菌的感染 4、无菌动物，四级动物，要求在体内外不得检出其它生命体 实验动物的遗传学分类 1、近交系，指经过连续20代以上全同胞或亲子交配培育的动物品系 2、封闭系，不从外界引入新的血缘，非近亲交配方式的实验动物群体 3、突变系，由于遗传基因发生突变而具有某些特殊形状的动物 4、杂交群动物，由不同品系杂交所产生的后代 5、转基因动物，插入外源基因后能正常繁殖的动物 大鼠、小鼠的采血方法 1、剪尾采血，动物麻醉后，将尾端剪去约5mm，待血液流出采集，小鼠可每次采血 0.1ml，大鼠约0.4ml 2、眼眶后静脉丛采血，拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤固定，轻轻压迫颈部两侧， 使眼球充分外凸。采血管插入眼角与眼球之间，向眼底方向刺入，切开静脉丛，血流即流入取血管。
病毒的特点是：1、形体微小，能通过细菌滤器，用电子显微镜才能观察到。2、无细胞结构，其主要成分是核酸和蛋白质3、每种病毒只含有一种类型的核酸（RNA或DNA）4、因缺乏完整的酶系统和能源，故只能寄生于活细胞内，依靠宿主细胞的代谢系统合成蛋白质和核酸5、病毒以其基因为模板，在宿主细胞内复制出新的病毒颗粒6、为了在生物界保存其种属，病毒具备从一个宿主转移到另一个宿主的能力，并具有对敏感宿主的侵染性和复制性7、在宿主体外，能以大分子状态存在，并可长期保持其侵染能力8、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的基因组中，并能诱发潜伏感染 细胞培养技术：是对由组织分散成的单个细胞或某一型细胞群进行的体外培养方法，即模拟体内的生理环境条件，提供细胞适宜的营养条件和温度，在无菌操作的基础上，使离体组织细胞生长增殖并进行传代的技术 二、单层细胞培养： 用于培养病毒的细胞有原代细胞、传代细胞（二倍体细胞株和传代细胞系） 三、鸡胚的接种途径：1、羊膜腔接种2、绒毛尿囊膜接种3、尿囊腔接种4、卵黄囊接种 四、 间接计数在病毒检验过程中较为常用，是判定病毒感染性的定量方法，常用的有：空斑形成单位法，50%终点法，血凝试验和干扰测定 空斑形成单位（PFUs）试验：是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合，当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时，会造成细胞被溶解而形成空斑，每个空斑系由一个病毒颗粒所造成，计算空斑数目再乘以稀释倍数，即可得知原来的病毒感染单位的浓度 凡事能在细胞培养物中产生CPE的病毒都可用空斑技术来测定其滴度。 50%终点法：是将病毒悬浮液经一系列稀释后，接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞，将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做曲线，找出造成50%动物、鸡胚死亡或病变的终点稀释度。 LD50：为造成50%动物或鸡胚死亡的病毒含量 ID50：即是指可造成50%动物或鸡胚感染的剂量 CCID50：造成50%细胞培养产生病变效应的剂量 五、病毒纯化的一般原则：1、释放病毒至细胞外2、去除细胞碎块3、病毒悬液浓缩 六、病毒的保存：1、用低温（-60~25℃）、超低温（-70以下）冰箱或液氮罐（-196~150）保存 2、冷冻干燥保存 七、血清学实验的方法很多，最常用的是中和试验、补体结合试验、红细胞凝集及红细胞凝集抑制试验 中和试验：是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物，使病毒与抗体相互反应，再将混合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。 中和抗体：凡是能与病毒结合，并使其失去感染力的抗体称为中和抗体 中和试验必须在敏感的动物体内（包括鸡胚）和细胞培养中进行
技术文件 文件名称：中钢滨海48MV A矿热炉测试和验收大纲 （电炉主体设备） 文件编号：ZBHJ-48.0M-01YY 编制部门：中钢集团吉林机电设备有限公司技术管理部编制时间：2010年1月 编制：丛佩森 审核： 批准：
中钢滨海48MV A矿热炉测试和验收大纲 （电炉主体部分） 1.测试和验收大纲文件的适用范围： 本测试和验收大纲文件适用于《中钢集团滨海镍铁项目（一期）工程设备采购-48MVA镍铁熔炼矿热炉》主体设备的初步验收和最终验收。在招标文件第2.1定义中对矿热炉设备初步验收和最终验收做了规定。初步验收：是指货物经热负荷试运转后达到了设计要求，买方对设备质量的验收。最终验收：是指货物质保期满后，买方对设备质量的验收。 2. 编制测试和验收大纲文件的依据： 编制本矿热炉主体设备测试和验收大纲文件的设计依据如下：2.1 本设计依据《中钢集团滨海镍铁项目（一期）工程设备采购-48MVA镍铁熔炼矿热炉》招标书，招标编号：0840STCBH277。2008年3月21日的《澄清文件》和2008年3月30日的《答疑之二》之技术规格要求。 2.2 中钢集团吉林机电设备有限公司的投标文件，时间2008年4月8日，文件名称《48MVA镍铁熔炼矿热炉设计依据及原则》。 2.3 中钢集团吉林机电设备有限公司提供的本项目的设计图纸和有关技术文件，设计图纸必须是履行了签字手续的。由卖方（设计方）提出并经买方同意并签字的设计变更单。 2.4 现行有效的国家法律和法规。 3. 测试和验收所使用的标准：
以下列出本设备招标和投标文件中要求采用的国家标准和技术规范，也就是本测试和验收大纲文件所执行的标准和技术规范：GB50056-93 《电热设备电力装置设计规范》 GB10067.7.2—88 《电热设备基本技术条件炼钢电弧炉》 GB5083—85 《生产设备安全卫生设计总则》 GB50211-2004 《工业炉砌筑工程施工及验收规范》 GB50309-92 《工业炉砌筑工程质量检验评定标准》 GB 10066.1-88 《电热设备的试验方法通用部分》 GB5959.1-86 《电热设备的安全第1部分通用要求》 GB 50231-98 《机械设备安装工程施工及验收通用规范》 GB5959.2-1998 《电热设备的安全第2部分对电弧炉设备的特殊要求》 GB/T 10066.1-88 《电热设备试验方法通用部分》 GB 10066.1-88 《电热设备的试验方法通用部分》 GB 10067.1-88 《电热设备基本技术条件通用部分》 GB 5959 《电热设备安全其它部分》 GB50056-93 《电热设备电力装置设计规范》 GB1800～1804 公差与配合未注公差尺寸的极限偏差等 GB1184 形状和位置公差、未注公差的规定 GB1801 公差与配合尺寸至500mm孔、轴公差带与配合 GB/T1804 一般线性尺寸的未注公差 GB324 焊缝代号
HIV病毒学检测及质量保证指南编写人员：潘品良蒋岩李敬云钟平尚红李太生 审核咨询专家及技术人员：邵一鸣康来仪朱效科王佑春汪宁朱红郭志宏季阳刘海林肖瑶邱茂锋马春涛 编写单位：中国疾病预防操纵中心性病艾滋病预防操纵中心参编单位：中国人民解放军军事医学科学院 上海市疾病预防操纵中心 中国医科大学 北京协和医院 技术顾咨询：Mike Ussery, Hao Zhang 美国国立卫生研究院过敏及传染病研究所 James W. Bremer 美国Rush 大学医学中心VQA实验室 Trever Peter 克林顿基金中国艾滋病防治项目实验室专家 Donald J. Brambilla 美国华盛顿大学新英格兰研究所 Francis F. Mandy 加拿大公共卫生局疾病预防操纵中心国家免疫学实验室
前言 随着HIV-1病毒载量检测在艾滋病临床辅助诊断和抗病毒治疗监测以 及艾滋病科研工作中的广泛应用，我国开展该项检测工作的实验室日益增多。自1997年艾滋病实验室首次引进HIV-1病毒载量检测技术，截至200 7年底，全国差不多配备了近120台HIV-1病毒载量检测仪，覆盖了疾控、医院、检疫、军队等系统。目前，尽管许多实验室差不多将病毒载量检测纳入艾滋病有关辅助诊断和治疗监测工作，但大多数实验室开展工作的时刻较短，体会不足，因此，急需加大该领域的培训和质量操纵工作，以保证检测结果的准确性和可靠性。 为了加大质控和保证检测质量，并得到国际上的认可，艾滋病参比实验室2004年开始参加美国NIH组织的HIV-1病毒载量检测能力验证工作。在通过考核和积存体会的基础上，2005年启动了国内HIV-1病毒载量检测能力验证工作。在主动组织实验室能力验证的同时，艾滋病参比实验室也对实验室技术人员进行培训，主动开展室内质控。这些工作对提升HIV-1病毒载量的检测技术，保证质量起到了重要作用。为了进一步规范艾滋病实验室HIV-1病毒载量检测，建立标准化质量操纵程序，准确开展各项检测及质量操纵工作，特制定本指南。 本指南是按照各种HIV-1病毒载量检测方法的技术要求，结合现行的国内外有关技术规范而制定。本指南针对HIV-1病毒载量检测的实验室设置、样品治理、检测技术、质量操纵、生物安全等方面提出指导。 本指南自2006年初正式开始编写，性病艾滋病预防操纵中心多次组织了有国内外专家参加的指南编写专项技术咨询会，与会专家对指南提出了专门多建设性意见和建议，美国NIH病毒载量检测质量保证实验室专家多次对指南进行认确实批阅和具体指导。指南编写过程中，也认真听取了实验室一线检测人员的具体需求和建议，并补充了大量的实验数据，包括HI V-1病毒载量检测值的稳固性、冻融阻碍实验与不同检测方法之间比较的实
常规病毒学实验技术 （一）病毒的培养 实验动物：家兔、小白鼠、大白鼠、豚鼠、仓鼠 主要用于： ①分离病毒，并借助感染范围试验鉴定病毒 ②培养病毒，制造抗原和疫苗 ③测定各毒株之间的抗原关系，（用实验动物作中和试验和交叉保护实验） ④制备免疫血清和单克隆抗体 ⑤作病毒感染的实验研究，包括病毒毒力测定、建立病毒病动物模型等 注意：选择对目的病毒敏感的实验动物品种品系，以及适宜的接种途径和剂量。 鸡胚 （一）条件要求 SPF鸡、孵化温度38-39℃，湿度40-70%，通风。新鲜受精卵：产下后不超过10天并保存10℃左右。 （二）优点 组织分化程度低，可选择不同的日龄和接种途径，病毒易于增殖，感染病毒的组织和液体中含有大量病毒，容易采集和处理，而且来源充足，设备和操作简便易行。 （三）接种途径 1．绒毛尿囊膜接种（10-12日龄鸡胚） 主要用于痘病毒和疱疹病毒的分离和增殖。 1）方法一（造人工气室） ①在胚胎附近近气室处，选择血管较少的部位，用电烙器在卵壳上烙一个直径约3-4mm的 烤焦圈。 ②用碘酊和酒精消毒后，小心用刀尖撬起卵壳，造成卵窗。 ③在气室端中央钻一个小孔。 ④用针尖挑破卵窗中心的壳膜，切勿损伤其下的绒毛尿囊膜。 ⑤滴加滴生理盐水于刺破处，用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气，造成气室内负压， 使卵窗部位的绒毛尿囊膜下陷而形成人工气室，此时可见滴于壳膜上的生理盐水迅速渗入。 ⑥用1ml注射器滴入2-3滴接种物于绒毛尿囊膜上。 ⑦用透明胶纸封住卵窗，或用玻璃纸盖于卵窗中，周围涂上熔化的石蜡密封，气室中央的 小孔用石蜡密封。 ⑧鸡胚横卧于卵箱中，不许翻动，保持卵窗向上。 2）方法二 ①在气室端的卵壳上开约1.5×1.5cm的口。 ②用灭菌眼科镊子撕去一小片内壳膜。 ③滴入接种物。 ④用透明胶纸封闭开口。 2．尿囊腔接种（10-11日龄） 用于正粘病毒和副粘病毒（NDV）
江苏天雨铸造股份有限公司 检 验 大 纲 编制审核批准日期日期日期1目的 本大纲用作铸钢件检验验收依据 2 引用文件 GB5676 一般工程用铸造碳钢的1)、化学成分2)、机械性能3)、热处理GB5680 高锰钢铸件的1)、化学成分2)、机械性能 GB2100 不锈耐酸钢铸件的1)、化学成分2)、机械性能 GB5678 铸造合金光谱分析取样方法 GB6414 铸件尺寸公差 GB228 金属拉伸试验法 GB6060 铸造表面粗糙度样块 GB5677铸钢件射线照相及底片等级分类方法 GB9444铸钢件磁粉探伤及质量评级方法 GB9443铸钢件渗透探伤及缺陷显示痕迹的评级方法 GB7233铸钢件超声探伤及质量评级方法
ISO3452无损探伤—液体渗透探伤—一般原理 ISO无损挥伤—用X射线或γ射线进行的金属材料射线照相探伤—基本规则 3 技术要求 3、1 牌号与试棒 本公司生产GB5676 GB5680 GB2100 标准中各牌号铸钢件,各牌号的试样生产的方法及尺寸见各自标准。 3、2机械性能 各标准中的各牌号铸钢的机械性能见各自标准,客户有特殊的要求时,铸件的性能应符合客户的确定的要求。 3、3 化学成分金相组织热处理 各标准中的各牌号铸钢的化学成分,金相组织热处理,必须达到各自标准中的要求,除非客户对上述三项中的一项不要求时,可不做该项检查。 3、4无损探伤 各种探伤液体渗透探伤,磁粉探伤,射线照相探伤,超声波探伤见各自标准,并且根据客户要求决定采用何种探伤。 3、5 几何形状与尺寸 铸件的形状与尺寸应符合图纸样品或订货协议中规定的要求。 3、6 尺寸公差 3、6、1公差 铸件图纸尺寸带有公分差的应符合其公差,示注公差的尺寸,水玻璃砂按CT12-14级选用公差,铸件基本尺寸小于等于16MM时,铸件的公差等级选用CT10-12级,铸件基本尺寸小于等于25时,铸件的公差等级选用CT11-13级。 3、6、2 公差带的位置 公差带应对称于铸件基本尺寸,有斜度要求的部位,公差带应沿斜度倾斜方向对称。3、6、3内外圆角公差 内外圆角公差的上限就是铸件公差,下限就是0。 3、6、4 壁厚公差 壁厚公差按照选用的铸件公差降一级。 3、6、5 错型值 错型值不得大于2MM且必须位于铸件尺寸公差内。 3、6、6 起模斜度
病毒学检验教学大纲 《病毒学检验》教学大纲 课程编码:10272045 课程名称:病毒学检验 英文名称:virology test 开课学期:8 学时/学分:40/2.5 (其中实验学时:20) 课程类型:专业课 开课专业:卫生检验专业方向 选用教材:《病毒学检验》华西医科大学公共卫生学院自编主要参考书: 1、殷震，刘景华主编:《动物病毒学》，科学出版社，1997年版 2、熊菊贞等著:《诊断病毒学》，科学出版社，1987年版 3、黄祯祥主编:《医学病毒学基础及实验技术》，科学出版社，1990年版 4、纳塔莉 J.施密特;理查德 W.埃蒙斯主编，顾方舟等译:《病毒、立克次体及衣原体疾病诊断技术》，北京医科大学中国协和医科大学联合出版社(第六版)，1993年版 5、张卓然主编:《培养细胞学与细胞培养技术》，上海科学出版社，2004年版 6、杜平等主编: 《分子病毒学原理与实验技术》，第二军医大学出版社，2002年版 7、杨占秋主编:《诊断与实验病毒学》，郑州大学出版社，2002年版 8、周先志，赵敏主编:《艾滋病诊疗新技术》，人民军医出版社，2005年版执笔人:甄清 一、课程性质、目的与任务
《病毒学检验》是微生物学检验的一个分支，是卫生检验专业必修课程。通过对病毒学检验技术的理论和实验教学，使学生掌握病毒学检验技术的基本原理、方法和操作技能，并能综合运用这些知识和技能解决病毒性疾病的诊断、预防和监测问题。 二、教学基本要求 1. 系统掌握病毒学检验技术的基本原理、方法。 2. 了解对人群健康危害较大的各种病毒的检测方法。 3. 注重培养学生综合性思维能力，结合当前发生的一些病毒性疾病流行案例进行理论和实践教学，培养学生综合分析问题和解决问题的能力。在完成本门课程学习后，使学生能够主动发现问题并能够积极探索解决问题的方案。 三、各章节内容及学时分配 第一篇病毒学检验总论(12学时) 教学目的与要求 通过该篇内容学习，使同学们认识到病毒学检验在疾病的诊断、预防与控制方面的重要地位，掌握病毒学检验的基本技术、原理和方法，了解病毒学检验方法的研究进展。 第一章病毒学检验概述(1学时) 教学目的与要求 通过本章学习了解病毒学检验的用途和内容，掌握病毒实验室常用的消毒处理方法和基本要求。 教学内容 一、病毒学检验概要 (一)病毒学在医学领域中的重要地位 (二)病毒学检验概况
《动物病毒学》实验课 讲稿 任课教师：方六荣 授课对象：2002级动物医学专业1-4班 授课时间：2004.09-2005.01
目录 实验一鸡胚接种 (1) 实验二传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养 (6) 实验三原代细胞培养 (9) 实验四病毒TCID50的测定 (11) 实验五中和试验 (13)
实验一鸡胚接种 一、实验目的 了解鸡胚的基本结构与功能及鸡胚接种的方法，掌握常用的鸡胚接种方法。 二、鸡胚接种的作用 主要用于： ①分离病毒，并根据病变初步鉴定病毒 ②培养病毒，制造抗原和疫苗 ③测定各毒株之间的抗原关系（用鸡胚作中和试验和交叉保护实验） ④测定病毒毒力 三、材料 1、鸡胚10日龄 2、病毒鸡传染性支气管炎病毒（IBV） 3、照蛋灯 4、打孔器 5、石蜡 6、注射器 7、蛋座 8、酒精棉球、碘酊棉球 四、鸡胚用于病毒培养的优缺点 （一）优点 1、组织分化程度低 2、可选择不同的日龄和接种途径 3、病毒易于增殖 4、感染病毒的组织和液体中含大量病毒 5、容易采集和处理 6、来源充足 7、设备和操作简便易行 （二）缺点 1、胚内可能污染细菌和病毒 沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、禽脑脊髓炎病毒 2、母源抗体 3、许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的感染指针
五、鸡胚的结构与功能 1、卵壳上有细孔，进行气体交换 2、壳膜使气体分子和液体分子在内外两方面进行交换。 3、气室呼吸和调节压力 4、绒毛尿囊膜起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交换是在膜的血管内通过卵壳孔而进行的。 5、尿囊腔胚胎的排泄器官，内含有尿囊液，初为透明液体，是单纯生理盐溶液，以后尿囊液中 尿酸盐迅速增加，胚胎发育到第12-13天后，尿囊液开始变得混浊。 6、羊膜与羊膜腔其中盛有羊水，胎体浸泡于其中 7、卵黄在胚胎发育早期供给鸡胚营养。 8、卵白在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。 六、受精卵的选择 1、最好是来自SPF鸡群，以降低母源抗体的影响。 2、受精卵的壳最好是白色的，以便于检卵。 3、受精卵必须新鲜，保存在5-20℃不要超过10天，保存一个月的受精卵，孵化率将近于零。 七、鸡胚的孵育 1、孵卵箱内的温度应保持在37.5-38.5℃ 2、相对湿度：50%-60% 3、必须保证具有充分的新鲜空气流通，特别是在孵化5-6天以后
大型变压器制造过程质量验收检验大纲 1总则 1.1内容和适用范围 1.1.1本大纲主要规泄了采购单位（或使用单位）应对石油化工用35kV及以上大型变压器制造过程进行质疑验收检验的基本内容及要求，也可作为委托驻厂监造的主要依据。 1.1.2本大纲适用于石汕化工工业使用的输变电用35kV及以上大型变压器。 1.2.1GB 1094.1-5《电力变压器》； 1.2.2IEC 60076 ?电力变压器》； 1.2.3GB/T6451-2008《油浸式电力变压器负载导则》； 1.2.4GB311.1-1997《高压输变电设备的绝缘配合》； 1.2.5GB/T 1094.7-2008《汕浸式电力变压器负载导则》： 1.2.6GB 5273《变压器、髙压电器和套管的接线端子》： 1.2.7GB 2536《变压器油》； 1.2.8GB 7449《电力变压器和电抗器等雷电冲击试验和操作冲击试验导则》； 1.2.9国家及行业相关标准规范等。 2原材料 2.1依据采购《技术协议》核对铜导线供应商，并审查原始质保书中的化学成分、机械性能、导电率、电阻率、截而积及绝缘等级： 2.2根据采购《技术协议》核对硅钢片供应商，并审査原始质保书中的化学成分、机械性能、磁感强度、单耗、厚度： 2.3根据采购《技术协议》核对绝缘材料供应商，并审査原始质保书中的机械性能、电气性能及绝缘等级： 2.4根据采购《技术协议》审查变压器用汕的供应商、牌号、油基、化学成分、物理性能、抗氧化剂含量： 2.5根据采购《技术协议》及施工图要求审查钢板的供应商，并审查原始质保书中的化学成分、机械性能、规格等： 2.6根据采购《技术协议》及施工图要求审查外购仪表的供应商、规格及型号。 3主要组件检测 3.1电容式套笛、分接开关耐压试验抽查比例按采购《技术协议》规左； 3.2电容式套管介质损耗因数测左按采购《技术协议》规泄： 3.3电容式套管的电容值测定按采购《技术协议》规左； 3.4硅钢片、铁芯对地、绕组对地绝缘电阻测左。 4几何尺寸 4.1按制造厂图纸及工艺规定验收； 4.2线圈高度、内径、外径、出线线头及位置偏差应进行核查； 4.3外绝缘距离应进行核査； 4.4套管爬电距离应进行核査： 4.5变压器本体轨距与地脚螺栓配合尺寸应进行核查。
第三篇病毒学实验技术 实验学时计划：实验一实验须知6小时；实验二细胞培养用水的制备及检验15小时；实验三组织培养技术20小时；实验四病毒的分离及其理化性质的测定20小时；实验五病毒提纯技术15小时。 实验一实验须知 一、实验室注意事项 1．凡参加病毒学实验的人员均应接种与实验有关的病毒疫苗。 2．实验室内，特别是组织培养操作室，须经常保持干燥、清洁。在进行病毒接种或无菌操作前后，均应用紫外线照射灭菌，必要时可用3～5%的酚或煤酚皂溶液擦拭或喷雾消毒。 3．进入操作室，须先洗净双手并用消毒药水严格消毒；更换拖鞋，戴口罩和帽子，穿消毒的实验服。 4．病毒实验操作完毕后，将所穿戴实验服、口罩、帽子和拖鞋等物，出操作室前须更换；两手须经消毒药水严格浸洗后方能外出。 5．一个接种操作室，严禁同时进行两株病毒株的传种；吸取病毒材料时，勿于悬空吹出或打出。 6．凡沾病毒材料的吸管、试管等器具，须随时投入5%煤酚皂或1%盐酸溶液内，浸泡过夜，或煮沸消毒后才能进行洗涤。 7．凡带有感染性的鸡胚或动物尸体，须立即投入炉内焚化或进行煮沸消毒，或盛入容器内进行高压消毒后，方能携出室外进行处理。 8．工作人员要随时注意安全操作，以免发生事故；如发生意外，应迅速采取有效措施补救。 二、病毒材料收集、运送和保存 （一）材料的收集 分离病毒的成功率与采集材料有密切的关系。采集病料必须在适当的部位和时间内进行，前者与各种传染的发病机理有关，后者常规在疾病早期，因为通常在疾病刚出现时病毒的滴度高。各种病毒感染所采适宜病料参见图1和图2。 由于许多病毒的不稳定性，欲作病毒分离的材料，都应尽快的冷藏。－30℃保存的病毒材料（除少数例外），至少可以活存几个月以上；而－70℃保存的病毒，甚至几年不见毒力降低。有些病毒需在潮湿环境下保存，有的则需干燥环境（如Orf virus）。