胰蛋白胨大豆琼脂TSA
028072 胰蛋白胨大豆琼脂培养基(大豆消化酪素琼脂培养基)
(Tryptic Soy Agar)
胰蛋白胨大豆琼脂用途：
胰蛋白胨大豆琼脂培养基(大豆消化酪素琼脂培养基)用于普通的或营养要求较高的细菌的培养，还用于医药工业洁净室无菌程度的监测及消毒剂消毒效果的测试(GB4789.40-2010，GB/T16294-2010，《中华人民共和国药典》2010年版和消毒技术规范)。
胰蛋白胨大豆琼脂检测原理：
胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物)、大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物)提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
胰蛋白胨大豆琼脂培养基配方(每升)：
胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15g
大豆蛋白胨 (大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5g
氯化钠 5g
琼脂 15g
最终pH7.3±0.2
胰蛋白胨大豆琼脂使用方法：
1、称取胰蛋白胨大豆琼脂培养基(大豆消化酪素琼脂培养基)40g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min。
2、借助空气取样器或用沉降法测空气微生物数，或用平板接触法或用棉签拭擦取样测工作台表面和工人手表面的微生物数，取样后分别于22.5℃±2.5℃培养72h 和32.5℃±2.5℃培养48h。
3、观察结果并计数。
质量控制：
下列质控菌株接种后霉菌和酵母于22.5℃±2.5℃培养72h，细菌于32.5℃±2.5℃培养48h，结果如下：
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
方案批准 注：在方案批准部分签字表明签字者同意方案中规定的检测项目检测方法和记录要求。在执行本方案的过程中可能会出现影响严格执行本方案的偏差，对较小的偏差将通过偏差报告的形式来解决，对于关键性偏差，如对方法的调整、对参数或接受标准的调整必须制定出增补方案并按照原方案批准程序得到批准才能进行。所有的偏差报告和增补方案必须在提交验证报告供批准时一同提交。
目录 1.概述 (3) 2.参考资料 (4) 3. 职责 (4) 4. 色谱系统及色谱条件 (4) 5. 器材与试剂 (5) 6. 验证试验 (5) 6.1系统适应性 (5) 6.2专属性 (6) 6.3耐用性 (7) 6.4定量限 (8) 6.5检测限 (8) 6.6线性与围 (8) 6.7准确度 (9) 6.8精密度 (11) 7.再验证周期 (12) 8.偏差及纠正措施 (13) 9.最终审核和批准 (13) 药品残留溶剂顶空分析方法草案 (14)
1.概述 1.1根据ICH对药品中残留溶剂含量的要求及盐酸噻氯匹定生产工艺，必须控制盐酸噻氯匹定生产工艺中使用到的溶剂乙醇、丁酮、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的残留量。限度分别为：乙醇≤5000ppm、丁酮≤5000ppm、甲苯≤890ppm、DMF≤880ppm。 1.2分析方法草案见附件。 1.3本分析方法属于杂质定量分析，因此需要验证的项目有：系统适应性、专属性、线性、 准确度、检测限、定量限、精密度、耐用性，具体参数及接受标准要求见下表：
2.参考资料 ICH Q3C (R3), November 2005. ICH Q2 (R1), November 2005. <467> Residual Solvents, United States Pharmacopoeia 31, November 2007. <20424> Residual Solvents, European Pharmacopoeia 6.0, June 2007. 3. 职责 4.1色谱系统
培养基适用性检查记录 质量部
培养基名称：沙氏葡萄糖琼脂培养基来源：批号： 对照培养基：来源：批号： 检验依据：检验人：检验日期： 一、实验菌种： 白色念珠菌[CMCC(F)98 001]第代 黑曲霉[CMCC(F)98 003]第代 二、菌液制备 将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。将黑曲霉接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天。加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。 三、培养基适用性检查 取5个无菌平皿，分别接种白色念珠菌、黑曲霉各2皿，每皿接种1ml菌液（含 菌适宜浓度），另一皿接种1ml PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液作为空白对照，倾注对照沙 氏葡萄糖琼脂培养基，混匀。凝固后倒置培养，20-25℃培养5天计数。被检培养基同 法操作。 四、结果判断 五、结论 本品按《中国药典》2015年版“非无菌产品微生物检查：微生物计数法”及培养基适用性检验操作规程检验，结果：□符合规定□不符合规定。
培养基名称：胰酪大豆胨琼脂培养基来源：批号： 对照培养基：来源：批号： 检验依据：检验人：检验日期： 一、实验菌种： 金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]第代 铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104]第代 枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501]第代 白色念珠菌[CMCC(F)98 001]第代 黑曲霉[CMCC(F)98 003]第代 二、菌液制备 将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌分别接种于胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24 小时；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml的菌悬液。将黑曲霉接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上，20～25℃培养5～7天。加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成稀释至10-5～10-7,制成50～100cfu/ml 的菌悬液。 三、培养基适用性检查 取11个无菌平皿，分别接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2皿，每皿接种1ml菌液（含菌适宜浓度），另一皿接种1ml PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液作为空白对照，倾注对照胰酪大豆胨琼脂培养基，混匀。凝固后倒置培养，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌皿30-35℃培养3天计数；白色念珠菌、黑曲霉20-25℃培养5天计数。被检培养基同法操作。 四、结果判断
脑心浸液肉汤（BHI ）培养基 Brain Heart Infusion Medium 配方：（g/L ） 蛋白胨 脱水小牛脑浸粉 脱水牛心浸粉 氯化钠 葡萄糖 磷酸氢二钠 pH 值7.4 ± 0.2 10.0 12.5 5.0 5.0 2.0 2.5 25℃ 原理：蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂。 用法：称取本品 38.5g ，加热搅拌溶解于1000ml 蒸馏水中，121℃高压灭菌15 分钟，备用。 质控菌株接种后于35±0.5℃培养24h ，结果如下： 产品名称 用途
哥伦比亚 CNA 琼脂基 Columbia CNA Agar Base 用于革兰氏阳性球菌的分离培养,也可用于 制备哥伦比亚 CNA 血琼脂(需另加无菌脱纤 维羊血) 改良 Giolitti-Cantoni 肉汤基础 Modified Giolitti-Cantoni Broth Base 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养(ISO 标准) 卵黄甘露醇高盐琼脂基础 Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养(需另加 50% 卵黄液) 甲苯胺蓝 -DNA 酶琼脂 Toluidine Blue-O-DNase Agar 用于脱氧核糖核酸酶试验(SN 标准) 葡萄球菌选择性琼脂 Steptococcus Selective Agar 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性分离培养葡萄球菌增菌肉汤 Steptococcus Enrichment Broth 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养 亚碲酸钠肉汤基础 Sodium Tellurite Broth Base 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养 普通肉汤培养基 General Broth Medium 用于金黄色葡萄球菌的培养(SN 标准) 7.5% 氯化钠肉汤 7.5% Sodium Chloride Broth 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养(GB 标准) DNA 酶琼脂 DNase Agar 用于金黄色葡萄球菌 DNA 酶试验 冻干血浆 Freeze-Dried Plasma 用于血浆凝固酶试验 Baird-Parker 琼脂基础 Baird-Parker Agar Base 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养(ISO、FDA BAM、 GB、SN 标准) 10% 氯化钠胰酪胨大豆肉汤(TSB) 10% Sodium Chloride Tryptic Soy Broth 用于金黄色葡萄球菌的选择性增菌培养(GB 标准) 胰蛋白胨大豆肉汤(TSB) Tryptic Soy Broth 用于金黄色葡萄球菌MPN法测定的增菌培 养,NaCl浓度可根据需要而调整(FDA BAM、SN 标准);用于β溶血性链球菌的增菌培养(GB 标准); 也用于一般细菌的培养 肠毒素产毒培养基(不含琼 脂)Enterotoxin-Producing Medium(Agar-Free) 用于葡萄球菌肠毒素检验(GB 标准) 肉浸液肉汤 Meat Infusion Broth 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样 芽胞杆菌的培养(GB 标准)
指导原则编号： 【H】G P H7-1化学药物残留溶剂研究的技术指导原则 二OO五年三月
目 录 一、概述 (1) 二、基本内容 (2) (一)残留溶剂研究的基本原则 (2) 1、确定残留溶剂的研究对象 (2) 2、确定残留溶剂时需要考虑的问题 (2) 3、残留溶剂分类及研究原则 (4) (二)研究方法的建立及方法学验证 (6) 1、研究方法的建立 (6) 2、方法学验证 (8) (三)研究结果的分析及质量标准的制定 (9) 1、残留溶剂表示方法 (9) 2、质量标准制定的一般原则及阶段性要求 (10) (四)需要关注的几个问题 (12) 1、附录中无限度规定和未收载的有机溶剂 (12) 2、未知有机挥发物 (12) 3、多种有机溶剂综合影响 (13) 4、中间体的残留溶剂 (13) 5、制剂工艺对制剂残留溶剂的影响 (14) 6、辅料残留溶剂的研究及对制剂的影响 (14) 三、参考文献 (14) 四、附录 (16) 五、著者 (17)
化学药物残留溶剂研究的技术指导原则 一、概述 药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中、以及在制剂制备过程中使用或产生而又未能完全去除的有机溶剂。根据国际化学品安全性纲要，以及美国环境保护机构、世界卫生组织等公布的研究结果，很多有机溶剂对环境、人体都有一定的危害，因此，为保障药物的质量和用药安全，以及保护环境，需要对残留溶剂进行研究和控制。 本指导原则是在参考人用药物注册技术要求国际协调会（International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use，ICH）颁布的残留溶剂研究指导原则,美国药典（the United States Pharmacopoeia，USP）、英国药典(British Pharmacopoeia, BP)、欧洲药典(European Pharmacopoeia，EP)、中国药典(Chinese Pharmacopoeia, ChP)相关内容的基础上，结合我国药物研发的特点，通过分析、研究残留溶剂问题与药物的安全性、有效性及质量可控性之间的内在关系而制定的。本指导原则总结了对残留溶剂问题的一般认识，旨在帮助药物研发者科学合理的进行残留溶剂方面的研究，也为药物评价者提供参考。 考虑到残留溶剂研究涉及的范围比较广泛，本指导原则主要对原料药的残留溶剂问题进行讨论，并以此为基础，探讨和总结药物研究过程中对残留溶剂问题的一般性原则。药物研发者可参考本指导原则对制剂和辅料的残留溶剂问题进行研究。
版药典培养基适用性验 证 公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-
培养基验证文件 药 有 限 公司 制药有限公司 验证立项申请表
验证方案的审批 验证方案目录 1、概述 2、验证目的 3、验证范围 4、验证项目小组成员及职责 5、验证合格标准 6、试验材料 7、菌液制备 8、适用性检查 9、验证记录 10、验证结论及综合评价 计数培养基适用性检查的验证方案 1. 验证目的：
需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。 2. 参照标准：《中国药典》2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。 3. 验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。 4.验证小组人员及职责： 5. 合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5～2范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。 6. 试验材料： 6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。 6.2. 仪器设备： 6.2.1. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器
6.2.2. GHT-00双人净化工作台 6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜 6.2.4. MJ-250I型霉菌培养箱 (20～25℃) 6.2.5. LRH-250生化培养箱 (30～35℃) 6.2.6. 电热恒温干燥箱 6.2.7微波炉 6.3. 验证用培养基 6.4. 验证用菌株：(第代) 7. 菌液制备 按6.4规定程序培养各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50~100cfu∕ml的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入3～5ml含 0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50~100cfu∕ml的黑曲霉孢子悬液。 8. 适用性检查：
附录C.通过细菌反硝化法进行硝酸盐氮同位素分析的准备程序 培养板的制作 1. 准备培养板 a. 混合到一起： i. 23 g胰蛋白大豆琼脂培养基(TSA) ii. 0.5 g KNO3 iii. 500 mL E-pure or Milli-Q water b. 高压灭菌30分钟。 c.冷却大概15分钟（直到戴手套时可以把住烧瓶）。 d. 倒入无菌塑料培养皿中，每做3～4块板以后，烧一下烧瓶的边缘（500mL可以制作大 约20块板）。 e. 让培养板过夜凝固。 f.用标签给袋子做上标记；包括培养板的种类（TSA，加NO3–），今天的日期以及培养 板最初的制作人。 g.把培养板保存在冰箱中待用。 2.划线培养细菌： a. 在–80 °C的冰箱中，有一个盒子包含有P. aureofaciens冰冻储存物的美国型培养菌种集 （ATCC）13985。 b.从库存中取出细菌：不要等到小瓶融化—用一个牙签从管子中挖一些细菌。在做其他事情 之前，密封管子。冰冻存储物是我们最重要的资源。 c.用牙签轻轻地接触一个培养板的表面以转移细菌浆。它应该形成一个小胶团。
d. 用一个烧过的环，通过来回的经过胶团划线将胶团平铺开。烧环。继续划线，沿着第一 次的划线轨迹穿过路径两次。烧环。沿着第二次的划线穿过路径两次并且继续。这块培养板的序号定为#1。 e.从先前的培养板中划线培养新板：用来自于#1板的单一菌落，划线，烧，划线，烧，划线 （同上冰冻存储物的操作）。这块板的序号定为#2。 f. 培养板标记： i. 菌株(P. aureofaciens) ii. 板号 iii. 今天的日期 iv. 括号中的信息来源(“冰箱” 或者先前培养板的制作日期) g.培养板需2～3天的时间长成，所以一个培养板一周会典型地经历一个回合。 h. 将板宗族放在一起以便于管理。当#2板长成并准备用来接种时，丢掉旧的板宗族。如果 划线培养#3板，那么在同一天也要划线培养新的#1板。 胰蛋白胨大豆肉汤（TSB的准备） 1.清洗（新的不需要清洗）580ml的特制培养基瓶子（580ml的瓶子附带一个23 × 75.5 mm， 20 mL 的顶部瓶颈）用作血清瓶： a.用Liqui-Nox清洗剂刷洗内部。 b. 用温水以及去离子水清洗。 C. 在烤炉中，200° C 下过夜烘干。 2.培养基的制作：（配制7000mL培养基分装到14个580ml的瓶子中）： a.混合到一起: i. 210 g胰蛋白胨大豆肉汤琼脂(TSB) ii. 7.0 g KNO3
1.中国蓝平板：含有牛肉粉、蛋白胨、乳糖、琼脂、氯化钠、中国蓝、玫瑰红等成份。是一种弱选择性（亦有学者称为无抑制性）选择培养基。成份中的中国蓝为指示剂，玫瑰红为弱抑制剂，仅能抑制革兰阳性菌生长，而对大肠杆菌没有抑制作用，发酵性革兰阴性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上的菌落颜色不同，便于鉴别菌种。根据菌落形态，可做出相应的处理或报告。例如：大肠埃希菌菌落呈蓝色；痢疾志贺菌呈淡红色；鼠伤寒沙门菌呈淡红色。 2.巧克力平板：普通营养琼脂成份添加进氯化血红素，万古霉素，辅酶A。用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，在分离培养上具有重要意义，不能用血平板来替代。巧克力平板含有嗜血杆菌生长需要的营养因子X因子和V因子。其原理为：绵羊血中的V因子通常处于被抑制状态，加热到80～90℃12Min即可破坏红细胞膜上的不耐热抑制物，可使V因子释放，故嗜血杆菌在加热的血琼脂培养基即巧克力琼脂培养基上生长较佳。 3. TCBS：含酵母膏粉蛋白胨氯化钠柠檬酸钠硫代硫酸钠胆酸钠牛胆粉蔗糖柠檬酸铁溴麝香草酚兰麝香草酚兰琼脂；其中：氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH（8.6）可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂。利用指示剂来区分是否发酵蔗糖：副溶血性弧菌不发酵蔗糖，菌落呈蓝绿色。霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色。TCBS常用于致病性弧菌的选择性分离，是GB2008、SN标准指定培养基。 4.MAC平板：即麦康凯琼脂培养基，用于大肠杆菌和大肠菌群的分离培养(05药典)，主要成分：蛋白胨脙胨猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠琼脂乳糖1%结晶紫水溶液0.5%中性红水溶液。麦康凯平板的原理：利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长，而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用．利用乳糖发酵，中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开．沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落． SS培养基 2.原理 培养基中牛肉膏、蛋白胨等为营养物;煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠等抑制非病原菌生长,而胆盐能促进某些病原菌生长。因大肠埃希菌等能迅速分解乳糖产酸并与胆盐结合成胆酸,故形成中心混浊的粉红色菌落;病原菌不能分解乳糖。菌落呈透明无色,枸橼酸铁能指示硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色。硫代硫酸钠有缓和胆盐对志贺菌及沙门菌的有害作用并中和煌绿和中性红染料的毒性作用,且能使大肠埃希菌的红色菌落颜色鲜明。 3.用途 用于分离肠道致病菌。 SS琼脂培养基是分离沙门菌及志贺菌属的强选择性培养基,它对大肠埃希菌有较强的抑制 作用,而对肠道病原菌则无明显抑制作用。因此,可以增加粪便等标本的接种量,从而提高病原菌的检出率,是目前公认比较满意的培养基。 附注:大肠埃希菌属细菌在此培养基虽不易生长,但亦不被杀灭,故挑选病原菌菌落时,应仅挑取菌落的中心部分,否则易将其四周的杂菌一并挑入,影响结果。
残留溶剂测定法
残留溶剂测定法 1 简述 药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用过，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。药物中常见的残留溶剂及限度参照《中国药典》2015年版四部通则0861附表1的规定，除另有规定外，第一、第二、第三类溶剂的残留量应符合其规定；对其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制订相应的限度，使其符合产品质量标准的要求。本法照气相色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0521测定。 本测定方法适用于对各论项下未收载残留溶剂检测方法的品种中残留溶剂的检验，也可用于指导建立各论项下具体品种的残留溶剂检查方法。 2 仪器和用具 2.1 气相色谱仪，带FID检测器，顶空进样器。 2.2 计算机，安装工作站软件。 2.3 色谱柱 2.3.1 毛细管柱除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间可以互代使用。2.3.1.1 非极性色谱柱固定液为100%的二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。 2.3.1.2 极性色谱柱固定液为聚乙二醇(PEG-20M)的毛细管柱。 2.3.1.3 中极性色谱柱固定液为(35%)二苯基-(65%)二甲基聚硅氧烷，(50%)二苯基-(50%)二甲基聚硅氧烷，(35%)二苯基-(65%)二甲基亚芳基聚硅氧烷，(14%)氰丙基苯基-(86%)二甲基聚硅氧烷，(6%)氰丙基苯基-(94%)二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。 2.3.1.4 弱极性色谱柱固定液为(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷，(5%)二苯基-(95%)二甲基亚芳基硅氧烷共聚物的毛细管柱。 2.3.2 填充柱以直径为0.18~0.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适宜的填料作为固定相。 3 供试品溶液和对照品溶液的制备 3.1 供试品溶液的制备 3.1.1 顶空进样除另有规定外，精密称取供试品0.1~1g；通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可采用N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其他适宜溶剂；
当前位置：生物帮 > 实验技巧 > 生物化学技术 > 正文 蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全 日期：2012-06-13 来源：互联网 标签： 相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展 摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度 恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销！ Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统 广州赛诚生物基因表达调控专题 蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。 EDTA 1)抑制金属蛋白水解酶; 2)0.5mol/L水溶液，pH8~9;
脑心浸液肉汤（BHI）培养基 Brain Heart Infusion Medium 脑心浸液肉汤（BHI）培养基用途：用于细菌的增菌培养配方：（g/L） 蛋白胨 脱水小牛脑浸粉脱水牛心浸粉氯化钠 葡萄糖 磷酸氢二钠 pH值7.4 ± 0.2 10.0 12.5 5.0 5.0 2.0 2.5 25℃
原理：蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂。用法：称取本品38.5g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15 分钟，备用。 质控菌株接种后于35±0.5℃培养24h，结果如下： 微生物合成培养基—金黄色葡萄球菌相关产品： 产品名称用途 哥伦比亚 CNA 琼脂基 Columbia CNA Agar Base 用于革兰氏阳性球菌的分离培养,也可用于 制备哥伦比亚 CNA 血琼脂(需另加无菌脱纤 维羊血) 改良 Giolitti-Cantoni 肉汤基础 Modified Giolitti-Cantoni Broth Base 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养(ISO 标准) 卵黄甘露醇高盐琼脂基础 Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养(需另加 50% 卵黄液) 甲苯胺蓝 -DNA 酶琼脂 Toluidine Blue-O-DNase Agar 用于脱氧核糖核酸酶试验(SN 标准) 葡萄球菌选择性琼脂 Steptococcus Selective Agar 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性分离培养葡萄球菌增菌肉汤 Steptococcus Enrichment Broth 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养 亚碲酸钠肉汤基础 Sodium Tellurite Broth 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养
大豆胰蛋白酶抑制因子 动科1112班 2011230054 夏娉 摘要：大豆胰蛋白酶抑制因子是大豆食品和饲料中的主要抗营养因子，是一种蛋白质或多肽，可与胰蛋白酶结合形成稳定的化合物，从而抑制胰蛋白酶活性。本文主要从胰蛋白酶抑制因子的理化性质，作用机理，危害，应对措施，展望等方面进行综述。 关键词：胰蛋白酶抑制因子作用机理危害应对措施展望 引言：在生大豆中胰蛋白酶抑制因子含量约30毫克/克，它对植物本身有保护作用，可防止大豆自身发生分解代谢，并具有抗虫作用，因此是大豆的含需成分。 [1]。但随着养殖业的不断发展，为达到更好地养殖效益以及产品质量，对饲喂养殖动物的食品和饲料的要求日益增加，因此对饲料中常见到的抗营养因子的研究越来越受关注，胰蛋白酶抑制因子是大豆食品和饲料中含量高，对畜禽危害最大的一种抗营养因子，可抑制鸡、猪等畜禽的生长，引起胰腺肿大，抑制蛋白酶活性。本文主要是针对目前已有的大豆胰蛋白酶抑制因子研究作一综述。 1 大豆胰蛋白酶抑制因子的种类和理化性质 大豆胰蛋白酶抑制因子是大豆中的主要抗营养因子。目前从大豆中分离出的胰蛋白酶抑制因子主要是Kunitz型胰蛋白酶抑制因子(KTI)和Bowman- Birk 型胰蛋白酶抑制因子( BBI）。 KTI由181个氨基酸和少量的半胱氨酸形成的2个二硫键组成。活性中心位于第63号精氨酸和第64号异亮氨酸之间，主要对胰蛋白酶直接且专一的起作用，与胰蛋白酶1:1定量结合[2]。KTI不溶于乙醇；遇酸和蛋白酶易失活；热不稳定：80℃时短时间加热变性；90℃不可逆失活。 BBI是由71个氨基酸所组成的单肽链，包含7个二硫键，其分子量约为8kDa。BBI分子中有两个活性中心：一个是赖氨酸16-丝氨酸17，为胰蛋白酶结合位点；另一个是亮氨酸44-丝氨酸45，为胰凝乳蛋白酶结合位点。[3]BBI不溶于丙酮；对热、酸较稳定；105℃干燥10min仍能保持活性；不易被蛋白酶水解。 这两种抑制因子通过结合位点的作用与胰蛋白酶络合，从而使胰蛋白酶失活，起到对昆虫、动物及人类的抗营养作用。根据大豆胰蛋白酶抑制因子的结构特点和理化性质，可以破坏分子中的二硫键、结构从而使其失活。
编号：022142 中文名称：麦康凯琼脂培养基（药典） 英文名称：MacConkey Agar 用途： 供分离发酵乳糖的革兰氏阴性肠道杆菌。（《中华人民共和国药典》2010年版）原理： 胨提供碳氮源、维生素和生长因子;牛胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长; 氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；乳糖为可发酵的糖类；中性红是pH指示剂，细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。 微生物图鉴： 配方（每升）： 胨20.0g 牛胆盐5.0g 氯化钠5.0g 琼脂14.0g 乳糖10.0g 中性红0.03g 最终pH 7.2 ± 0.2
使用方法： 1、称取本品54.0g，加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121T高压灭菌15mi n。 2、待培养基冷至50?55°C倾注灭菌平皿，待凝固后，备用。 3、取待检样品划线接种于麦康凯平板。 4、将平板置培养箱于30?35 C培养18?24h。 5、观察结果。在做致泻大肠埃希氏菌微生物检验时，观察结果不但要注意乳糖发酵的菌落，同时也要注意不发酵和迟缓发酵的菌落。 质量控制： 下列菌株经30?35C培养18?24h，生长情况如下表： 菌名菌号生长状况菌落特征 大肠埃希氏菌CMCC(B)44102 良好粉红或红，周围有混浊胆盐沉淀圈 弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864 良好粉红或红，周围有混浊胆盐沉淀圈 鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115 良好无色半透明 金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 不长或差 贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年
规格：250g
培养基适用性 验证 方案起草人： 方案审核人： 方案批准人： XXXXX药业股份有限公司
目录 1. 验证目的 (2) 2. 参照标准 (2) 3. 验证项目 (2) 4. 验证小组人员及职责 (3) 5. 验证可接受的标准 (3) 6. 验证步骤 (3) 7. 菌液制备 (6) 8. 适用性检查 (6) 9. 控制菌检查 (7) 10. 操作方法 (8) 11.结论 (11)
1. 验证目的： 需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基及控制菌培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数及测定和控制菌适用性检查。 2. 参照标准：2015版中国药典微生物限度检查法。 3. 验证项目：营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基的适用性检查和控制菌适用性检查。 4.验证小组人员及职责： 4.1验证小组人员: 4.2验证人员职责及要求 4.2.1按验证方案及相关文件实施验证。 4.2.2认真观察并做好验证原始记录。 4.2.3对实施验证的结果负责。 4.3验证中各部门的职责 4.3.1验证领导组职责 4.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。 4.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。 4.3.1.3负责验证方案的批准工作。 4.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。 4.3.1.5负责验证报告的批准工作。 4.3.2验证工作小组职责 4.3.2.1负责验证方案的起草工作。 4.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。 4.3.2.3负责验证方案的实施。
4.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。 4.3.2.5参与验证结果的评价工作。 4.3.3质量部职责 4.3.3.1负责验证方案的审核工作。 4.3.3.2负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。 4.3.3.3负责验证中各项检测工作，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过程中的各项 检验工作负责。 4.3.3.4负责验证资料和报告的审核工作。 4.3.3.5负责验证文件回收、归档管理工作。 5. 合格标准：被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，且菌 落形态大小与对照培养基上的菌落一致。 6. 试验材料： 6.1. 被验证产品：溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、三糖铁琼脂培养基、肠道菌增菌液培养基、RV沙门菌增菌液培养基、麦康凯琼脂培养基、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基、甘露醇氯化钠琼脂培养基、麦康凯液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基 6.2. 仪器设备： 6.2.1. LXD型压力蒸汽灭菌器 6.2.4.JMP-250霉菌培养箱(20～25℃) 6.2.5. SHP-250生化培养箱(30～35℃) 6.2.7 101-1电热鼓风干燥箱
蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全 标签： 相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展 摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度 恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销！ Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统 广州赛诚生物基因表达调控专题 蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。 EDTA 1)抑制金属蛋白水解酶; 2)0.5mol/L水溶液，pH8~9; 3)溶液在4℃稳定六个月以上;
4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml); 5)加入NaOH调节溶液的pH值，否则EDTA不溶解。 胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n) l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋白酶D和凝乳酶; 2)1mg/ml溶于甲醇中; 3}储存液在4℃一周内稳定，-20℃稳定6个月; 4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L) 5)在水中不溶解。 亮抑蛋白酶肽(leupeptin) 1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶，如木瓜蛋白酶，血浆酶和组织蛋白酶B; 2)lOmg/ml溶于水; 3)储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月; 4)工作浓度0.5mg/ml。 胰蛋白酶抑制剂(aprotinin) 1)抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶; 2)lOmg/ml溶于水，pH7~8 3}储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月; 4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L); 5)避免反复冻融: 6)在pH>12.8时失活。 蛋白酶抑制剂混合使用 35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂 0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂 0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂 0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂
菌落总数测定、无菌检验、广泛增菌 编号产品名称规格价格（元）用途 10103 营养琼脂（NA）GB 250g/瓶130 菌落总数、菌种纯化和传代10101 平板计数琼脂（PCA）GB、SN250g/瓶160 用于细菌总数测定 10204 营养肉汤GB250g/瓶120 用于细菌的增菌、复壮等11502 胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）250g/瓶165 用于细菌的纯化、培养10112 琼脂培养基S(R2A琼脂) EP、USP250g/瓶360 用于水中菌落总数测定11801 0.5%葡萄糖肉汤培养基GB250g/瓶110 用于灭菌效果检验 10114 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基GB 250g/瓶110 用于灭菌效果检验 10115 TTC营养琼脂250g/瓶140 用于细菌总数测定 11012 锰盐营养琼脂GB 250g/瓶140 用于芽孢杆菌的培养11007 液体硫乙醇酸盐培养基药典250g/瓶170 用于无菌试验 10107 胰酪胨大豆肉汤培养基药典、SN 250g/瓶160 用于广泛增菌、无菌检查大肠杆菌、大肠菌群、粪大肠菌群 10201 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤GB、SN250g/瓶120 用于大肠菌群测定 10202 煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤GB、SN250g/瓶250 用于大肠菌群测定 10203 结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）GB、SN250g/瓶130 用于大肠菌群平板计数10212 EC肉汤GB、SN250g/瓶140 大肠杆菌、粪大肠菌群测定10236 去氧胆酸盐琼脂（DC）日本标准250g/瓶190 用于大肠菌群平板计数10224 胆盐乳糖培养基（BL）药典250g/瓶160 用于大肠菌群的测定10205 乳糖胆盐发酵培养基药典、GB 250g/瓶135 用于大肠菌群测定 10219 MFC培养基GB、SN250g/瓶215 用于大肠菌群滤膜法检测10404 伊红美蓝琼脂（EMB）GB、SN250g/瓶140 用于肠道菌选择性分离10217 品红亚硫酸钠培养基GB 250g/瓶140 用于大肠菌群滤膜法计数10240 MEE肉汤SN250g/瓶260 用于肠道菌选择性增菌10237 VRBGA SN250g/瓶140 用于肠道菌选择性分离10238 葡萄糖琼脂SN250g/瓶180 用于细菌生化试验 10239 缓冲MUG琼脂SN250g/瓶420 用于滤膜法测定大肠杆菌10313 胆盐硫乳琼脂培养基（DHL）药典、SN 250g/瓶150 用于肠道菌选择性分离10210 MUGal肉汤GB 100g/瓶540 用于大肠菌群快速检测20203 头孢磺啶溶液（0.5mg）1ml×20支/盒120 每支用于100ml10210中10211 Aliz-gal琼脂GB 100g/瓶720 用于大肠菌群快速检测10220 EC-MUG培养基GB 100g/瓶540 用于大肠埃希氏菌计数10221 MUG营养琼脂培养基（NA-MUG）GB 100g/瓶900 大肠埃希氏菌滤膜法计数11604 LST-MUG肉汤SN100g/瓶1080 用于大肠杆菌荧光检测10241 Columbia-MUG琼脂培养基SN100g/瓶360 用于大肠杆菌荧光检测
NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T1103.2－2006 转基因植物及其产品食用安全检测 抗营养素第2部分：胰蛋白酶抑制剂的测定 Safety assessment of genetically modified plant and derived products Part 2: assay of anti-nutrients pancreatic typsin inhibiter 2006-07-10发布2006-10-01实施 中华人民共和国农业部发布
前言 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、农业部科技发展中心、中国农业大学、天津市卫生防病中心。 本标准主要起草人：杨月欣、王竹、韩军花、李宁、汪其怀、黄昆仑、刘克明、刘培磊、连庆。 本标准首次发布。
转基因植物及其产品食用安全检测 抗营养素第2部分：胰蛋白酶抑制剂的测定 1 范围 本标准规定了转基因植物及其产品中胰蛋白酶抑制剂的测定方法。 本标准适用于转基因大豆及其产品、转基因谷物及其产品中胰蛋白酶抑制剂的测定。其他的转基因植物，如花生、马铃薯等也可用该方法进行测定。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 转基因植物genetically modified plant 指利用基因工程技术改变基因组构成，用于农业生产或者农产品加工的植物。 2.2 转基因植物产品products derived from genetically modified plant 指转基因植物的直接加工产品和含有转基因植物的产品。 3 原理 胰蛋白酶可作用于苯甲酰-DL-精氨酸对硝基苯胺（BAPA），释放出黄色的对硝基苯胺，该物质在410 nm下有最大吸收值。转基因植物及其产品中的胰蛋白酶抑制剂可抑制这一反应，使吸光度值下降，其下降程度与胰蛋白酶抑制剂活性成正比。用分光光度计在410 nm 处测定吸光度值的变化，可对胰蛋白酶抑制剂活性进行定量分析。 4 试验材料 转基因植物及其产品、受体植物及其产品。如果对转基因植物产品中的胰蛋白酶抑制剂进行测定，转基因植物产品和受体植物产品的处理条件应相同。 上述材料的水分含量和种植环境应基本一致。
原料药或制剂中有机溶剂的残留量一般要求控制在几个至几千个ppm之间，属于微量或痕量测定，与常量测定有着不同的特点。残留溶剂检查方法的选择对测定结果有着重要的影响，有时采用不同的方法测定同一个样品会得到截然不同的结果。 通过对最近一段申报资料的审评，经常发现在残留溶剂的检查方法尚不合理的情况下，若样品的色谱图中未出现溶剂峰，也未经其它系统验证，研究者就简单地作出样品无该溶剂残留的结论，进而不将其残留定入质量标准，药检所也不再进行复核。针对这种情况，从审评的角度出发，就如何评价残留溶剂检查方法的合理性谈自己的一些认识，与各位业内同仁交流。 有机残留溶剂检查一般采用气相色谱法，评价色谱系统的适用性和方法学验证资料遵循与液相色谱方法评价相同的原则，不再赘述。与液相方法不同的是，气相色谱有多种进样方式，残留溶剂检查常用直接进样法或顶空进样法。针对这两种进样方法不同的特点，评价方法合理性的要点应有所不同。对于直接进样法，应着重评价方法的灵敏度和重复性。目前已普遍用毛细管柱取代填充柱，因为毛细管柱的柱效高，其灵敏度也较填充柱大为提高。但由于毛细管柱直接进样的体积小，一般仅几微升，即使提高供试溶液的浓度，对于测定限量极低的溶剂（如：苯、四氯化碳、1，2-二氯乙烷等）及对FID检测器响应低的溶剂（如：含氯的溶剂），其检测限一般接近或高于限量，灵敏度难以满足测定的需要。测定此类溶剂最好采用顶空进样法，对含卤素的溶剂可改用电子捕获检测器（ECD）。进样量小也易造成进样重复性差，采用内标法较外标法的结果更为准确。 顶空进样法是将大量样品中的残留溶剂富集在顶空瓶上层的气体中，对绝大多数有机溶剂而言，灵敏度较直接进样法大为提高，但顶空进样系统中存在气液两相的平衡问题，对结果准确性的影响因素增多。评价方法是否合理，应着重关注以下三个方面：1）顶空条件：顶空瓶的平衡温度和时间是最重要的参数，根据溶解样品的溶剂和待测溶剂的不同性质，达到气液平衡所需的温度和时间可能不同，应有试验数据作为选择的依据，但在申报资料中一般都未提及。判断顶空条件是否适用，一般的规律是：顶空瓶的平衡温度应低于溶解样品所用溶剂的沸点10℃以下，能满足检测灵敏度即可；对于沸点过高的溶剂，如DMF、DMSO、聚乙二醇等，用顶空进样测定的灵敏度不如直接进样，不适宜采用顶空法；顶空瓶的平衡时间一般应为30至60分钟，才能保证气液两相达到稳态平衡。 2）供试品和对照品是否平行：由于供试品和对照品的液体部分状态不完全一致而造成的基质效应会直接影响到结果的准确性。采用标准加入法可以消除基质效应，但目前在国内的申报资料中较少见到，其原因可能是方法较为繁琐，且需要消耗大量的样品，对新药研发初期样品量较少的情况或一些贵重的药品不太适用。如果申报资料中提供了回收率数据，就容易判断基质效应的大小，但由于目前对此没有强制要求，大多数资料都未对回收率进行研究。因此在评价方法时，至少应要求对照品和供试品采用相同的溶剂溶解，且液体部分的体积应完全一致。 3）重复性：由于顶空进样法存在气液平衡和气体进样的问题，粗放度较大，中国药典2005年版的要求是：内标法连续五次进样的相对标准偏差小于5％，外标法的相对标准偏差小于10％；欧洲药典则要求相对标准偏差小于15％，因此重复性应密切关注。 此外，无论是直接进样或顶空进样，都应尽量使供试液中的样品完全溶解，否则当残留溶剂被包裹在样品晶格中时就不能被检测出来，可能造成结果与实际情况完全不符。对溶解性差的样品，可采用不挥发性酸或碱的溶液、高沸点的有机溶剂、混合溶剂等来溶解样品，即使样品在加热的条件下可能被破坏，只要待测的残留溶剂不被破坏（如：测定酯类溶剂不