从MHCⅠ/Ⅱ类相关因子探讨针灸对带状疱疹的免疫逃避作用
学号：12007076 姓名：李建伟专业：中医外科学
(一)研究内容、研究目标、以及拟解决的关键问题
1.研究内容
课题以VZV免疫逃避机制中发挥着重要作用的感染病毒细胞免疫识别的MHCⅠ/Ⅱ类基因抑制为切入点，围绕IFN-γ和参与免疫逃避的的两条主要途径，有目的地观察IFN-γ和相关基因CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ的表达量、分布及变化规律，进一步检测CⅡTamRNA、MHCⅠmRNA 、MHCⅡmRNA的表达变化以及外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性的动态变化，并对上述指标的相关性及变化规律进行分析，说明调节VZV病毒感染的免疫逃避机制是针灸治疗带状疱疹、减轻疼痛和后遗症的关键。且明确针刺与放血作用机制的差异所在。
主要开展以下工作：
研究内容：
（1）皮损组织病理学观察。
（2）镜检：外周血有核细胞计数、白细胞、淋巴细胞分类计数、巨噬细胞吞噬功能。
（3）流式细胞仪检测：外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性。（4）免疫组化法ABC染色法检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ、蛋白的表达及分布规律。
（5）western blot检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHC Ⅰ、MHCⅡ蛋白量的表达。
（6）RT-PCR法检测：皮损组织CⅡTamRNA、MHCⅠmRNA 、MHCⅡmRNA。
2.研究目标：
2.2.1旨在明确针灸治疗带状疱疹，减轻疼痛和后遗神经痛，与调节MHCⅠ/Ⅱ类相关基因、蛋白的分布及表达关系，为针灸治疗免疫逃避类疾病提供科学依据。
2.2.2通过比较针灸与传统抗病毒药物的作用差异，为解决带状疱疹病毒耐药性问题提供理论依据。
2.2.3旨在明确针刺与放血在治疗疱疹作用机制中的差异。
3.拟解决的关键性问题：
针刺放血对MHCⅠ/Ⅱ类相关基因、蛋白的调节与其有效干预VZV病毒免疫逃避机制的关系。
(二)拟采用的方案及可行性分析
1.拟采用的方案
实验环境：实验室相对封闭，自然采光，环境温度控制在20℃～25℃之间，湿度控制在60%左右。
实验动物：清洁级昆明种小鼠，体重22～24g，笼养，自由饮食，由上海市实验动物中心提供全价动物颗粒饲料。
1.1分组及造模：
第一次实验采用大鼠192只，按照体重分层随机，分为6组，每组8只，在造模完成后开始治疗，连续7天，隔日（第1、3、5、7天）处死一批，动态观察针刺放血对大鼠VZV病毒初感染的影响；第二次实验在造模后30天开始治疗，观察针刺放血对大鼠VZV病毒潜伏、复发的影响，其他处理同上，第7天处死取材观察；
造模：腹腔注射VZV8805株系病毒，按照100TCID50/0.1ml病毒量接种细胞，感染后48小时，模型即成。
模型组：造模方法同上，每天陪同正常组、针刺组、放血组、针刺放血组固定，连续7天。
药物组：造模方法同上。左侧腹腔注射ACV0.1g/kg/d，连续三天，每天陪同正常组、针刺组、放血组、针刺放血组固定，连续7天。
针刺组：造模方法同上。按照造模时间的先后顺序，在造模完成后，开始针刺，进针0.2～0.3mm，平补平泻，留针10min，每日1次，连续7天。
放血组：造模方法同上。按照造模时间的先后顺序，使用皮肤针沿皮损和脊神经叩刺，连续7天。
针刺加放血组：方法同针刺组和放血组，治疗连续7天。
正常组：腹腔注射同体积生理盐水。每天陪同模型组、针刺组、艾灸组固定，连续7天。
1.2 取材方法：
造模结束后，在模型组40只中随机处死8只，取材检测VZV对对小鼠相关指标的影响。针刺组、放血组、针刺加放血组、药物组、正常组在治疗后的第1、3、5、7天随机处死8只小鼠取材。取材放入-80o C低温冰箱保存、备检。
1.3穴位选取：
固定小鼠方法：根据小鼠的形体，在木板上钉上四个适当距离的铁钉，将夹子套在铁钉上，用夹子夹住小鼠的四肢以做固定。小鼠穴位定位参考《实验针灸学》，模拟小鼠的定位方法：“大椎”在第七颈椎与第一胸椎间；“膈俞”在第七胸椎下两旁肋间，左右侧各一穴；“合谷”在在手背，当第二掌骨桡侧的中点处，“曲池”在在肘横纹外侧端，当尺泽与肱骨外上髁连线中点，“委中”在在腘横纹中点，当股二头肌腱与半腱肌腱的中间，“尺泽”在在肘横纹中，肱二头肌腱桡侧凹陷处。
1.4 观察指标及方法：
1.4.1皮肤组织病理切片
1.4.2镜检：外周血有核细胞计数、白细胞、淋巴细胞、巨噬细胞分类计数
各组小鼠每天定时，专人割尾静脉采血10μl，加入0.38ml的白细胞稀释液中，摇匀，静置3分钟，光镜查外周血有核细胞、白细胞数和淋巴细胞、巨噬细胞分类计数；
1.4.3流式细胞仪检测：外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性。
①制备样品：处死动物，离心，收集细胞悬液，滴加特异性免疫荧光抗体，
用流式细胞仪上机检测并进行分选。
②流式细胞仪检测：将分选细胞清洗、离心(1500RPM，10min)，清洗两次，
弃上清；加入PI荧光标记抗体；用流氏细胞仪分别检测CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性。
③分析方法：测出的数据经PHOENIX公司分析软件Multicycle处理，得出
细胞各周期的CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞相对含量和百分数,并绘出DNA分布的直方图。
1.4.4免疫组化法ABC染色法检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ、蛋白的表达及分布规律。
①制备样品：处死动物，取股骨骨髓，10%福尔马林固定标本，石蜡
包埋，4μm厚切片。
②免疫组化染色检测方法：鼠抗人IFN-γ单克隆抗体(DO-27)（武汉博士德
（NeoMarker 生物有限责任公司，浓度1:50）；鼠抗人cyclinD1单克隆抗体（DCS/6）
福州迈新公司，浓度1:100）；鼠抗人单克隆抗体CⅡTa 、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ（晶美公司）；S-P免疫组化试剂盒（北京中山公司）。ABC法：用0.1 mol/L PBST洗，切片与0.1mol/L PBST(含0.5%H2O2)作用30 min，用0.1mol/L PBST 洗,10 min×3次，与一抗4℃温育，用0.1 mol/L PBST洗,10 min×3次，与二抗(1:1000稀释)室温作用2 h，用0.1 mol/L PBST洗，10 min×3次，与ABC(1:2000稀释)室温作用1 h.用0.1mol/L PBST洗，10 min×3次.在DAB溶液中反应，用0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液终止反应，用包被有明胶的玻片固定、水洗，用系列浓度乙醇(70%1次，80%1次，90%2次，95%2次，100%3次，每次5 min)脱水，二甲苯中透明，封边。
③分析方法：IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ免疫组化阳性信号均为棕黄色细颗粒状，染色结果按阳性细胞百分比及染色强度综合记分作半定量分析。
1.4.5 western blot检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHC Ⅰ、MHCⅡ蛋白量的表达。
①制备样品：取样品1×106～1×107细胞，PBS清洗，去PBS加0.1～1ml 总蛋白抽提试剂抽提总蛋白；使用KCTMBCA蛋白质定量试剂盒，测定样品浓度。
②方法：变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE)；蛋白质转移到硝酸纤维膜，30mA恒流，4°C转移，过夜；膜在5％BSA溶液中室温孵育1小时，加入一级抗体室温孵育1.5小时；加入HRP标记的二级抗体，室温孵育1小时；化学发光法检测，X胶片曝光显影。
③分析方法：扫描图片，用ImageJ分析软件将图片上每个特异条带灰度值数字化；将目的蛋白灰度值除以内参GAPDF的灰度值，校正误差，所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量。
1.4.6 RT-PCR法检测：皮损组织CⅡTamRNA、MHCⅠmRNA 、MHCⅡmRNA。
①提取总RNA：取标本，用试剂(GIB-CO公司，美国)提取总RNA，溶于
无RNA酶的灭菌超纯水中，用紫外分光分度计测定总RNA的浓度和纯度，同时琼脂糖电泳观察其完整性。将RNA稀释成1mg/L，-80°C保存。
② MHCⅠ、MHCⅡ和β-actin引物序列
CⅡTa: 5′-ACTCGATATCATTCCGGCAGACCTGAAGCAT-3′
5′-GCTCACTGCC-CCAGCCCAATA-3′
MHCⅠ: 5’- TGTCCCGGCCCGGCCTCGGG-3’
5’-TCTCAGCAGGGTAGAAGCTA- 3’
MHCⅡ: 5’-ACCAACGGGACGAGCGCAT-3’
5’-CAAGCCGCCGCAGGGAGGTG-3’
β-actin: 5’- AACGGCTCCGGCATGTGCAA - 3’
5’-CTTCTGACCCATGCCCACCA-3’
PCR反应体系30μl，转录产物3μl，2U Taq DNA聚合酶，10mmol/L 4×dNTP 2μlPOLβ和β-actin引物。
反应条件：94°C预变性；94°C 50s，55°C 55s，72°C 60s，72°C 10min共30个循环。
③分析方法：产物经SYNGENE凝胶成像系统分析，以目的基因和β-actin 积分灰度值的比值，作为目的基因mRNA的相对表达量。
研究路线
3.可行性分析：
1、本人针灸专业硕士、中医外科皮肤病方向在读博士，多学科背景保证实验研究按计划进展并不断推向深入。
2、前期大量的临床实践和文献回顾性研究显示出针刺放血可改善VZV感染机体免疫功能；
3、研究思路清晰，目的明确，有成熟的理论指导，所选指标针对性强，研究方案可行，研究方法及技术路线成熟；
4、实验室的软件、硬件设备完全具备科研条件。上海中医药大学实验室条件先进，课题所需仪器设备均已具有，所需试剂、抗体均可购买。
5、课题组成员层次结构、知识结构合理，有较强的科研能力和团结协作精神。
4.本项目的特色与创新之处
1、首次开展针灸对VZV免疫逃避机制的研究，进一步揭示针灸改善调节VZV感染机体免疫功能的的分子生物学机制，也为针灸治疗病毒感染的相关疾病提供了理论依据。
2、通过研究针灸对带状疱疹后遗神经痛的调节机制，促进临床药物、针刺放血等多种疗法相结合，提高临床疗效，更具实际意义。
3、首次探讨针刺与放血疗法在改善VZV感染机体免疫功能中的差异，为两种疗法治疗不同病理的相关疾病提供实验依据。
5.年度研究计划及预期研究结果
2008.01-2008.06 建立动物模型，进行细胞分选及各项检测的预实验。
2008.07-2009.07 扩大样本数量，应用流式细胞仪、免疫组织化学方法、Western Blot法、RT-PCR法等方法，完成所有实验。
2010.08-2010.12 完成统计学处理，进行课题总结。
6.预期研究结果
本课题通过观察针刺放血对MHCⅠ/Ⅱ类相关酶类和蛋白的影响，从而揭示针灸对抗病毒、提高免疫力作用新的分子生物学机制，为针灸在皮肤病及相关免疫类疾病中的应用提供可靠的实验室依据，丰富针灸的科学内涵。其研究成果不仅为免疫逃避类相关疾病提供新的治疗思路和方法，同时推动了针灸学与皮肤病学学科的交叉研究，同时明确针刺与放血作用机制的差异，为针灸在该领域的应
用打下基础。
（二）研究基础与工作条件
1. 文献掌握情况：对近20年来国内外有关带状疱疹的相关文献进行了回顾性分析，尤其是近10年的有关中、西医治疗带状疱疹的临床和实验研究的论文，较全面的掌握了本研究领域的最新科研动态。
2. 预研究情况：拟开展相关预研究，为下一步的研究提供基础数据。
3. 现有技术力量：本课题的指导老师（硕博导师）和相关成员涵盖针灸、中医外科相关专业，分别主持参与过多项课题，具有较强的科研能力。
4.个人简介：针灸专业本科、硕士，中医外科皮肤病专业博士生，曾参加国家自然基金重大研究计划1项，国家中管局、省科委、省自然基金项目、省科技攻关计划4项，主持校级课题1项，参与1项，具备一定的专业技能和科研能力。（四）经费使用清单
课题研究的基本方法主要有: ⑴观察法.⑵调查法.⑶测验法.⑷行动研究法.⑸文献法⑹经验总结法.⑺个案研究法.⑻案例研究法. ⑼实验法(在一个课题研究过程中，根据不同的研究目的和要求，往往会用到两种以上方法) 教育课题研究的基本方法主要有以下几种： 一、观察法 1．观察法：为了了解事实真相，从而发现某种现象的本质和规律。 2．观察法的步骤：观察法的实施分为以下三个步骤，步骤之一就是进行观察研究的设计，此步骤可分为如下几个方面： （1）作大略调查和试探性观察。 这一步工作的目的不在于搜集材料，而在于掌握基本情况，以便能正确地计划整个观察过程。例如：要观察某一教师的教学工作，便应当预先到学校大致了解这位教师的工作情况，学生的情况，有关的环境和条件等等。这可以通过跟教师和学校领导人谈话，查阅一些有关的材料，如教案、教学日记、学生作业等，以及听课等方式进行。 （2）确定观察的目的和中心。 根据研究任务和研究对象的特点，考虑弄清楚什么问题，需要什么材料和条件，然后作明确的规定。如果这规定不明确，观察便不能集中，结果就不能深入。观察不能有几个中心，范围不能太广，全部观察要围绕一个中心进行。如果必须要观察几个中心，那就采取小组观察，分工合作。 （3）确定观察对象 一是确定拟观察的的总体范围； 二是确定拟观察的个案对象； 三是确定拟观察的具体项目。比如，要研究新分配到小学任教的中师或大专毕业生在课余时间进行业务、文化进修的情况，那么，拟观察总体就是教师工作年限达一年或两年的新教师。在这一总体范围内，再定下具体观察哪几所小学，哪几个教研组中的哪些教师。具体观察名单确定以后，再把拟观察的时间、场合、具体观察项目确定下来。 （4）制定观察计划 观察计划除了明确规定观察的目的、中心、范围，以及要了解什么问题、搜集什么材料之外，还应当安排观察过程：观察次数、密度、每次观察持续的时间，如何保证观察现象的常态等。 （5）策划和准备观察手段观察手段一般包括两种：
医学科研方法学 第一章 概论 研究(research 是有计划和有目的的探索和创造的过程。 一、 科学研究的概念：运用科学的方法，探索未知的现象，揭示客观规律，创造 新理论、新技术、开辟知识新应用领域的智力性劳动。 联合国教科文组织界定的 科技活动包括研究与试验性发展活动( R&D )、科技教育与培训活动 (STET)、 科学技术服务活动(STS)。在我国科研工作一般特指R&D 。科研活动的主要特征 有： 1．探索性与创新性：这是科研工作区别于一般劳动性工作之所在。探索的目的 在于获得新的认识、发现新的事实、阐明新的规律、建立新的理论、发明新的技 术、研制新材料、新产品，探索是手段，创新是目的。 2．继承性和积累性：科学研究工作必须建立在科学的方法和知识的基础上，而 这些方法和知识是人们通过大量的科学研究所积累发展形成的， 我们利用了这些 方法和知识， 就体现了科学研究的继承性， 同时我们在科学研究中的创新， 也为 科学的发展积累了知识。 科学研究首先是收集和积累相关信息， 对他人的研究工 作、思路、方法进行分析、评价，提出自己的研究目标、任务和方案。 二、 医学科学研究的特征 医学科学研究具有一般自然科学研究的特征， 还具有研究对象的特殊性和研究工 作的复杂性。 医学研究的三个层次：①群体水平；②器官组织水平；③细胞分子水平。 医学研究的对象：①人，包括正常人和病人；②离体组织细胞；③动物。 医学研究的方法：①观察法；②实验法；③理论法。 医学研究的场所：①社区；②医院；③实验室。 医学研究的三个基本环节：①设计；②衡量；③评价。 、医学研究的基本过程 选题 设计 实施 分析 报告 1． 2． 3． 4． 5． 1． 2． 3． 4． 5． 四、医学研究的分类 1． 按照科技活动类型分 ① 基础研究：增加知识、探索未知、解决理论问题。基础医学主要研究的内容。 产生社会效益。 ② 应用研究： 利用基础理论针对某一问题提出解决的方案和方法。 预防医学和临 床医学主要研究的内容。产生社会效益为主。 ③ 开发性研究：研制新产品、新技术，产生经济效益。 2． 按照研究方法分 ① 观察性研究：描述性研究、分析性研究。 ② 试验性研究：动物试验、临床试验、社区干预试验。
平时作业要求： 网络课程《学前教育科研方法》平时作业 1、学前教育研究方案设计的内容主要包括哪些方面？请选择一个自己平时感兴趣的问题，提出有待研究的课题，写出课题名称。 2、根据自己选定课题，查找文献资料，将所有相关度高的文献资料全文收集在一个文件夹内，根据综述写作要求，整理撰写研究资料的综述，并正确罗列参考文献。 3、请根据第五章的学前教育调查问卷中问卷设计要求，设计《幼儿园教师教学工作压力和心理健康调查问卷》的问卷，并详细说明设计问卷的构思。 主要内容有： 1、学前教育科研方法概述 2、学前教育研究方案设计 3、学前教育研究论文写作 4、学前教育观察研究 5、学前教育测量研究
6、学前教育调查研究 7、学前教育叙事研究 幼儿园小班课间游戏的实践研究 课题研究方案 一、课题研究背景： 《幼儿园教育指导纲要（试行）》明确指出：幼儿园教育应尊重幼儿的人格和权利，尊重幼儿身心发展的规律和学习特点，以游戏为基本活动，保教并重，关注个别差异，促进每个幼儿富有个性的发展。游戏伴着儿童发展，儿童在游戏中成长。课间游戏是幼儿园自主性游戏之一，由于课间游戏在活动内容、地点、对象的选择上完全由幼儿自由控制，自由安排，孩子们可充分展示自我，课间游戏为幼儿提供了主动开展各种游戏的环境，孩子们可以轻松的进行交流、交往，因此受到幼儿的喜欢。课间游戏也是教师了解孩子发展、增进师生感情、实施教育的良好契机。 但是事实上，当前幼儿园往往只把课间游戏看成是一日活动的过渡环节，容易被忽视。幼儿园课间游戏内容较少、形式单一，且缺乏较强的整合性、系统性。教师对课间游戏存在认识上的误区，特别是对于小班课间游戏，一些老师认为，让孩子们好好玩一下，自己轻松一下，或者做一些准备工作，只要注意安全，就可以了，于是就出现了“放羊式”的现象，而且课间游戏时间得不到保证，不是被侵占就是被挪用。针对本园小班课间游戏中存在的问题，我计划开展“幼儿园小班课间游戏的实践研究”，探寻适合小班课间游戏的内容及材料，并探索有效的组织方法和策略。 二、课题的界定： （一）课间游戏。 是指：在教学活动之间或教学活动与集体游戏之间开展的游戏活动。 （二）幼儿园小班课间游戏的实践研究。
中医药科研思路与方法 （讲义） 第一篇概论 一、进入研究生学习阶段的几个转变 由学习型向创新型的转变 1由学习知识（输入）型转为创造知识（输出）型 2由知识积累型转为能力掌握与提高型 能力包括：思路新颖独特，方法正确可行；逻辑（科学）思维能力，实验动手能力，语言文字表达能力，人事组织协调能力，应变能力和忍耐力等。 3知识增长方式的转变：知识增长由算术均数增长型转变为几何均数增长型。 4由封闭型人才向开拓型人才的转变 开拓型人才的特点： --竞争性； --外向性（善于表达，善于交流）； --经济性（市场化）; --资源配置合理性; --创造性。 5由注重智商向注重智商和情商的全面发展 由“高智商型”转变为“高智商+高情商型” 二、科学研究 科学研究是一种探索未知，创造新知识和新技术的活动。 三、科学研究的方法与过程 选题→形成假说→定题→文献检索→科研设计→实验→数据收集→数据整理统计→分析、总结→科研论文、报告、答辨、发表、专利、推广→奖励→下一个选题。
四、医学科学研究 1．特点： --对象特殊 --方法困难 --内容复杂 2．类型 2.1根据研究性质分 一般可分为基础性研究、应用性研究和开发性研究。 2.1.1基础性研究 2.1.1.1定义：在医学科学领域中是指阐明人体内在运动的基本规律以及健康与疾病相互转化的规律等。 2.1.1.2特点：所研究的课题着重于知识的深度；特异性及针对性不明显；所需研究时间较长；研究成果短期内效益不显著；但对学科的根本性进步影响深远。 2.1.1.3细胞结构的研究，核酸性质的研究；血液动力学的研究，中医藏象研究；证的研究；诊法、治法研究等。 2.1.2应用性研究 2.1.2.1定义：在医学科学领域指解决防病治病中有待解决的各种实际问题或具体问题的研究。 2.1.2.2特点：研究的课题着重于应用的广度；特异性和针对性较强；课题研究周期较短；效益显著或立竿见影地解决问题；需要基础理论研究成果做为指导，形成新方法和产品，如新药，新仪器等。 2.1.2.3如：某种疾病诊断的研究；一种新疗法的研究；某病发病率的调查；中药栽培、炮制等，新药的研制及研究。 2.1.3开发性研究 2.1. 3.1定义：对应用研究成果的进一步扩大或转化，它是运用基础研究和应
从MHCⅠ/Ⅱ类相关因子探讨针灸对带状疱疹的免疫逃避作用 学号：12007076 姓名：李建伟专业：中医外科学 (一)研究内容、研究目标、以及拟解决的关键问题 1.研究内容 课题以VZV免疫逃避机制中发挥着重要作用的感染病毒细胞免疫识别的MHCⅠ/Ⅱ类基因抑制为切入点，围绕IFN-γ和参与免疫逃避的的两条主要途径，有目的地观察IFN-γ和相关基因CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ的表达量、分布及变化规律，进一步检测CⅡTamRNA、MHCⅠmRNA 、MHCⅡmRNA的表达变化以及外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性的动态变化，并对上述指标的相关性及变化规律进行分析，说明调节VZV病毒感染的免疫逃避机制是针灸治疗带状疱疹、减轻疼痛和后遗症的关键。且明确针刺与放血作用机制的差异所在。 主要开展以下工作： 研究内容： （1）皮损组织病理学观察。 （2）镜检：外周血有核细胞计数、白细胞、淋巴细胞分类计数、巨噬细胞吞噬功能。 （3）流式细胞仪检测：外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性。（4）免疫组化法ABC染色法检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ、蛋白的表达及分布规律。 （5）western blot检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHC Ⅰ、MHCⅡ蛋白量的表达。 （6）RT-PCR法检测：皮损组织CⅡTamRNA、MHCⅠmRNA 、MHCⅡmRNA。 2.研究目标： 2.2.1旨在明确针灸治疗带状疱疹，减轻疼痛和后遗神经痛，与调节MHCⅠ/Ⅱ类相关基因、蛋白的分布及表达关系，为针灸治疗免疫逃避类疾病提供科学依据。 2.2.2通过比较针灸与传统抗病毒药物的作用差异，为解决带状疱疹病毒耐药性问题提供理论依据。 2.2.3旨在明确针刺与放血在治疗疱疹作用机制中的差异。
科研思路与方法 我们中西医临床专业，走在西医与中医的夹缝中，究竟要攀上哪座大山是一个值得思考的问题，而他们又有什么质和量的区别呢？以下就摘取的文献资料对比讨论一二。 《生气通天论篇第三》黄帝曰：黄帝曰：夫自古通天者生之本，本于阴阳。天地之间，六合之内，其气九州、九窍、五藏、十二节，皆通乎天气。其生五，其气三，数犯此者，则邪气伤人，此寿命之本也。苍天之气清净，则志意治，顺之则阳气固，虽有贼邪，弗能害也，此因时之序。故圣人传精神，服天气，而通神明。失之则内闭九窍，外壅肌肉，卫气散解，此谓自伤，气之削也。阳气者若天与日，失其所，则折寿而不彰，故天运当以日光明。是故阳因而上，卫外者也。因于寒，欲如运枢，起居如惊，神气乃浮。因于暑，汗烦则喘喝，静则多言，体若燔炭，汗出而散。因于湿，首如裹，湿热不攘，大筋短，小筋弛长，短为拘，弛长为痿。因于气，为肿，四维相代，阳气乃竭。阳气者，烦劳则张，精绝，辟积于夏，使人煎厥。目盲不可以视，耳闭不可以听，溃溃乎若坏都，汨汨乎不可止。阳气者，大怒则形气绝，而血菀于上，使人薄厥。有伤于筋，纵，其若不容，汗出偏沮，使人偏枯。汗出见湿，乃生痤。高粱之变，足生大丁，受如持虚。劳汗当风，寒薄为，郁乃痤。阳气者，精则养神，柔则养筋。开阖不得，寒气从之，乃生大偻。陷脉为瘘。留连肉腠，俞气化薄，传为善畏，及为惊骇。营气不从，逆于肉理，乃生痈肿。魄汗未尽，形弱而气烁，穴俞以
闭，发为风疟。故风者，百病之始也，清静则肉腠闭拒，虽有大风苛毒，弗之能害，此因时之序也。故病久则传化，上下不并，良医弗为。故阳畜积病死，而阳气当隔，隔者当写，不亟正治，粗乃败之。故阳气者，一日而主外，平旦人气生，日中而阳气隆，日西而阳气已虚，气门乃闭。是故暮而收拒，无扰筋骨，无见雾露，反此三时，形乃困薄。岐伯曰：阴者，藏精而起亟也，阳者，卫外而为固也。阴不胜其阳，则脉流薄疾，并乃狂。阳不胜其阴，则五藏气争，九窍不通。是以圣人陈阴阳，筋脉和同，骨髓坚固，气血皆从。如是则内外调和，邪不能害，耳目聪明，气立如故。风客淫气，精乃亡，邪伤肝也。因而饱食，筋脉横解，肠澼为痔。因而大饮，则气逆。因而强力，肾气乃伤，高骨乃坏。凡阴阳之要，阳密乃固，两者不和，若春无秋，若冬无夏，因而和之，是谓圣度。故阳强不能密，阴气乃绝，阴平阳秘，精神乃治，阴阳离决，精气乃绝。因于露风，乃生寒热。是以春伤于风，邪气留连，乃为洞泄，夏伤于暑，秋为疟。秋伤于湿，上逆而咳，发为痿厥。冬伤于寒，春必温病。四时之气，更伤五藏。阴之所生，本在五味，阴之五宫，伤在五味。是故味过于酸，肝气以津，脾气乃绝。味过于咸，大骨气劳，短肌，心气抑。味过于甘，心气喘满，色黑，肾气不衡。味过于苦，脾气不濡，胃气乃厚。味过于辛，筋脉沮弛，精神乃央。是故谨和五味，骨正筋柔，气血以流，腠理以密，如是，则骨气以精，谨道如法，长有天命。文档收集自网络，仅用于个人学习中医提出“天人相应”的观点，明确指出人身阳气的重要性，
《科研思路与方法》复习提纲 注：含5%的自学内容。 ▲什么是科研。 答：科研又称科学研究，是指运用科学的理论和方法，探索自然界未知领域中物质运动现象及其规律，创造新理论、新技术的认识活动。探索与创新是科研活动的目的基本特征。 ▲科研的类型包括： 答：基础研究、开发研究、应用研究 ▲中医药科研的类型包括哪些？ 答：动物实验、临床试验、预防医学研究、新药研究、调查研究、文献研究、名医学术思想研究。 ▲中医药科研的复杂性体现在哪些地方？ 对象主要是人，人是复杂的生物体，既有生物性又有社会性，除一般的生理活动外，还有着十分复杂的精神、心理活动。中医科研中除了立足于人的生物学因素外，还要重视心理因素、自然因素、社会因素等对人体产生的影响，从而使中医药的科研具有显著的复杂性和困难性。 ▲什么是临床试验？ 答：临床试验是指以人体(病人或健康人)作为研究对象的医学科研活动，以揭示研究因素(新药、新疗法等)对人体的作用、不良反应，或探索药物在人体内的代谢规律等。 ▲什么是临床研究？ 答：临床研究是以病人为研究对象，研究人体各器官、系统的发病机制、诊断、治疗、预防及其预后的规律，促进疾病向健康转化的科学。 ▲什么是新药？ 答：新药是指化学结构、药品组分和药理作用不同于现有药品的药物。 ▲中医药科研为什么要重视证候研究。 答：中医学"证候"的理论，贯穿于对疾病诊断、治疗、康复、疗效评价的全过程。"证候"是从整体观出发，对疾病特征性的描述以及规律性的概括。"辨证论治"
集中体现了中医学对人体病理规律和临床诊疗思想的认识，是有别于西医学诊疗体系的特色和优势。抓住"证候"这一关键环节开展科学研究，才能够充分保持和发扬中医学的优势，推动中医学理论的发展。 ▲医学科研的基本程序包括哪些？ 答：选题、课题设计、课题实施、资料分析、提出研究结论、撰写研究报告等。▲医学科研选题的原则有哪些？ 答：教材P25－P27。 ▲医学科研选题的步骤有哪些？ 答：选题步骤是选题的思维过程，包括提出问题、查阅文献、建立假说、确定选题4个步骤。 ▲什么是科学假说？ 答：科学假说是根据已知的科学知识和科学事实，对未知自然现象及其规律性所作的推测性的解释和说明，是自然科学理论思维的一种重要形式。 ▲科学假说有哪些特征？ 答：科学假说不是主观臆断，它的前提是客观事实或科学理论，并以此为基础，对新的未知事物的推断，因此科学假说具有科学性和推测性、可验证性、动态性四个特征，其中以科学性、推测性最为重要。 ▲怎样应用类推法来建立中医科研中的假说。 答：中医学理论中取类比象的方法，就是类推的思维方法。如中医学的五行学说，就是根据自然界金木水火土五者之间相互生成、相互制约的关系，来类推人体的五脏六腑之间具有类似的相互生成、相互制约的关系。譬如自然界里木可以疏松土地，存在着"木克土"的相互关系，就把肝脏帮助脾胃消化饮食的作用也称为"木克土并把肝比喻为木，脾胃则比喻为土。又如治疗热性病初起，病变在上焦肺卫阶段时的治则，因肺在人体上部，所以提出"治上焦如羽，非轻不举而对病变在下焦肝肾阶段的治则，则提出"治下焦如权，非重不沉"。中医学理论中许多观点、认识的形成，是通过大量的实践活动所观察到的现象，运用类推的思维方法加以表述的，是中医科研课题假说的重要来源。 ▲建立科学假说的方法有哪些？ 答：类推法、演绎法、对比法、归纳法。
填空题，10分 1、医学研究最高层的方法是（哲学层次）的方法，是医学研究各种方法的概括和总结，是 人们认识疾病和改造疾病的方法的理论，是医学研究的科学（方法论）。（比较试验研究方法）、（逻辑层次的方法）和（哲学层次的方法）构成了医学研究方法的基本内容。 2、医学研究分为（预防医学），（临床医学），（基础医学），（康复医学）。 3、中医药研究也同现代医学一样是一门（防治疾病），（保护人民健康）为目的的（应用科学）。 4、医学活动是从（感性认识阶段）上升到（理性认识阶段）。 5、科学假说形成的基础（事实依据）和（科学思维）。 6、联合国科教文组织关于“科学与技术分类”：基础研究、应用研究、试验发展。 判断题，20分 1、科学研究是发现问题，分析问题，解决问题的过程。通过实验或调查、观察取得信息， 并对其进行加工，如数据资料的统计学处理。 2、如果设计方法出现错误，可以用统计的方法弥补。 3、中医药的研究方法是从临床研究，然后在进行实验研究。（临床到基础，理论到实践，宏 观到微观） 4、治疗组和对照组均衡一致，也就是所谓的齐同原则。除了处理因素外。 5、科研设计的三要素是研究对象、处理因素和实验效应。 研究对象：绝大多数是人和动物，而药物研究也可以使植物或矿物。 处理因素：根据不同的研究目的而给研究对象施加的各种干预措施。 实验效应：研究对象在处理因素作用下产生的相应效应或反应，也称试验效应。效应指标的有无或强弱应通过具体的指标来反映。 名词解释：25分 1、初始意念：一个完整的严谨的科研题目，总不会是瞬间完成的，要经过一段时间的酝酿、 思考，甚至可以说是苦思冥想的构思过程。问题的线索都是瞬间在脑海里闪现出来的，这种瞬间的闪念，又叫思想火花，哲学的说叫初始意念。 2、一次文献：指以作者本人的研究或研究成果为依据而创作的原始文献。如期刊论文、研 究报告、专利说明书、会议论文等。 3、零次文献：指未经正式发表或未形成正规载体的一种文献形式。一般是通过口头交谈、 参观展览、参加报告会等途径获取，不仅在内容上有一定的价值，而且能弥补一般公开文献从信息的客观形成到公开传播之间费时甚多的弊病。如：书信，手稿，会议记录，笔记等。 4、四段式：是科技论文中一种相对固定的格式。包括前言、材料与方法、结果、分析与讨论。 5、科学假说：是人们从实验观察的事实出发，在分析与综合、归纳与演绎等科学抽象概括 过程中，通过概念、判断、推理，对所探索的问题提出初步的、推测性的、带有假定意义的理论解释。 6、观察法：在自然条件下，研究自然现象的一种方法，是从自然发生的现象中获取事实资料。 7、科研设计的三要素：处理因素、研究对象、实验效应。 8、比较实验：又称对照实验，是医学科研中最重要的概念，是医学实验研究的重要方法。 在对照试验中，有两个或两个以上的相似组群，一个是对照组，用以作为比较的标准，另一个则是实验组，对其施加处理因素，以确定这个因素的效应。两个原则：设立对照、组间一致原则（齐同原则）。 9、齐同原则：齐同原则是指在实验中实验组与对照组之间，除处理因素外，其他一切因素 应保持一致。 10、关键词：文献主题标引的一种形式，通过分析文献的主题，提炼出若干个代表性的名词 和词组，以供文献检索之用，3—8个为宜，又称主题词。
论文研究思路和研究方法 许多学子为撰写毕业论文而绞尽脑汁发愁，论文东拼西凑应付差事，实在不行，在网上另请高手代写论文通关，其实掌握了撰写毕业论文的研究方法和技巧，揭开毕业论文的神秘面纱，一切会变得简单而明了。下面我们一起分享一下网站老师常用的撰写毕业论文的研究方法，希望对大家有所帮助。 一、调查法 调查法是科学研究中最常用的方法之一。它是有目的、有计划、有系统地搜集有关研究对象现实状况或历史状况的材料的方法。调查方法是科学研究中常用的基本研究方法，它综合运用历史法、观察法等方法以及谈话、问卷、个案研究、测验等科学方式，对教育现象进行有计划的、周密的和系统的了解，并对调查搜集到的大量资料进行分析、综合、比较、归纳，从而为人们提供规律性的知识。调查法中最常用的是问卷调查法，它是以书面提出问题的方式搜集资料的一种研究方法，即调查者就调查项目编制成表式，分发或邮寄给有关人员，请示填写答案，然后回收整理、统计和研究。 二、观察法 观察法是指研究者根据一定的研究目的、研究提纲或观察表，用自己的感官和辅助工具去直接观察被研究对象，从而获得资料的一种方法。科学的观察具有目的性和计划性、系统性和可重复性。 在科学实验和调查研究中，观察法具有如下几个方面的作用： ①扩大人们的感性认识。 ②启发人们的思维。 ③导致新的发现。 三、实验法 实验法是通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果联系的一种科研方法。 其主要特点是： 第一、主动变革性。观察与调查都是在不干预研究对象的前提下去认识研究对象，发现其中的问题。而实验却要求主动操纵实验条件，人为地改变对象的存在方式、变化过程，使它服从于科学认识的需要。 第二、控制性。 科学实验要求根据研究的需要，借助各种方法技术，减少或消除各种可能影响科学的无关因素的干扰，在简化、纯化的状态下认识研究对象。 第三，因果性。实验以发现、确认事物之间的因果联系的有效工具和必要途径。 四、文献研究法 文献研究法是根据一定的研究目的或课题，通过调查文献来获得资料，从而全面地、正确地了解掌握所要研究问题的一种方法。文献研究法被子广泛用于各种学科研究中。 其作用有： ①能了解有关问题的历史和现状，帮助确定研究课题。 ②能形成关于研究对象的一般印象，有助于观察和访问。 ③能得到现实资料的比较资料。 ④有助于了解事物的全貌。 五、实证研究法 实证研究法是科学实践研究的一种特殊形式。其依据现有的科学理论和实践的需要，提出设计，利用科学仪器和设备，在自然条件下，通过有目的有步骤地操纵，根据观察、记录、测定与此相伴随的现象的变化来确定条件与现象之间的因果关系的活动。主要目的在于说明各种自变量与某一个因变量的关系。 六、定量分析法
护理科研方法作业参考答案（答题要点） 作业： 一、名词解释 1.护理研究：通过科学方法，探索护理领域的问题，用以直接或间接地指导护理实践的过 程。 2.科研行为不端：指在提出研究问题、实施研究以及报告研究结果的过程中，有意伪造、 歪曲、剽窃或其他严重偏离科学界普遍原则的行为。 3.有益原则：指研究结果应对研究对象和社会有益，并尽可能地使研究对象免于遭受伤害。 4.公正原则：指研究对象得到公平治疗和护理的权利，其内容包括公平选择研究对象和公 平对待研究对象两个方面。 5.知情同意：是尊重研究对象自主决定权的实现途径，包括“知情”和“同意”两个方面， 即让研究对象知晓和明了与研究项目有关的必要信息，并自主同意参与该项研究。 二、单选题 ：: 三、简答题 1.确定研究问题、文献回顾、科研设计、预实验、研究实施与资料收集、资料整理与分析、 撰写论文、研究成果交流与应用。见教材,第“四”点。 2.见教材，倒数第二段。 3.了解研究课题的现状与动态、查看自己的选题与已有研究是否完全重复、启发和充实自 己的研究思路和方法、获得相关的理论依据。见教材 4.明确检索目的、选择文献检索工具、确定检索途径和检索词、根据线索查找原始文献。 具体见教材 5.略 作业： 一、名词解释 1.实验性研究：见教材 2.网络抽样：见教材 3.分层抽样：见教材 4.自变量：见教材 5.测评指标：见教材 二、单选题 ：: 三、问答题 1.见教材,共种 2.见教材，“确定样本来源”后面，综上所述一段中点 3.见教材，优点：实验性研究对研究对象、干预措施的实施有严谨的设计和严格的控制， 能准确地解释自变量与因变量之间的因果关系，研究的科学性和客观性较高； 缺点：设计与实施较为复杂，要求严格，可行性和普遍性较差，适用范围受到限制。4.自变量：家庭干预 因变量：生活质量 外变量：患者意识、年龄、性别、经济状况、家庭状况与家庭支持情况、疾病严重程度、有
研究思路、研究方法、技术路线和实施步骤 2009年04月04日星期六 12:35 1、研究什么？——怎样确定研究课题 一切科学研究始于问题——问题即课题；教学即研究（掌握方法很重要，否则就不是研究）；进步与成果即成长。 教育科研课题主要来源于两大方面： A．实践来源——客观存在的或潜在的教育实际问题，教育教学实践本身存在的问题。 教育教学与其外部的矛盾（教师与家长、教师与学校、学校与社会、教育与社会发展）。 B．理论来源——现有教育理论所揭示的问题以及理论体系中的空白和矛盾点（例如《关于“信息技术与课程整合”的冷思考》一文产生的过程） 2、怎样进行研究课题的论证？ 我们既然已选定了一个课题，我们就必须对这个课题的所有情况进行全面的了解。了解这个课题目前在国外、国内的研究情况，包括研究已取得的成果和存在的问题，了解这一课题所属的理论体系等等。对课题的全面了解，可以使我们在研究过程中少走弯路，确立研究的主攻方向，这就是我们常说的：“知己知彼，百战百胜”。 怎样对一个课题进行论证呢？论证一个课题主要是弄清如下几个问题： A．所要研究的问题是什么性质和类型的问题？ B．要研究的问题具有什么现实意义？它的理论价值（即在理论上预计有哪些突破？） C．要研究的问题目前已有哪些研究成果？研究的方向是什么？ D．要研究的问题所应具备的条件分析。 E．课题研究的策略和步骤如何？ F．课题研究的成果及其表现形式有哪些？ 3、教育课题研究的基本方法有： ⑴ 观察法⑵ 调查法⑶ 测验法⑷ 行动研究法⑸ 文献法⑹ 经验总结法⑺ 个案研究法⑻ 案例研究法 ⑼ 实验法（在一个课题研究过程中，根据不同的研究目的和要求，往往会用到两种以上方法） 3.1 观察法：为了了解事实真相，从而发现某种现象的本质和规律。 观察法的步骤：观察法的实施分为以下三个步骤,步骤之一就是进行观察研究的设计,此步骤可分为如下几个方面： 3.1.1 作大略调查和试探性观察。 这一步工作的目的不在于搜集材料，而在于掌握基本情况，以便能正确地计划整个观察过程。例如：要观察某一教师的教学工作，便应当预先到学校大致了解这位教师的工作情况，学生的情况，有关的环境和条件等等。这可以
名词解释、填空、判断改错、简答、论述 科学研究与方法 名词解释： 1、科学研究：凡是运用科学的方法，产生新知识的、具有创造性或创新性的活动。（联合国教科文组织） 2、基础研究：增加科学技术知识和发现新的探索领域而不考虑任何特定的实际目的的创造性活动。 3、应用研究：指为了特定的实际目的或目标而发展基础研究的成果。 4、开发研究：指运用基础研究和应用研究的知识，推广新材料、新产品、新设计或对之进行重大改进的创造性活动。 5、随机化：指抽样调查或分组时，样本来自同一总体，按机会均等的原则而抽样或分组的方法。 重点： 1、科研的类型包括：基础研究、开发研究、应用研究 2、科研选题的原则 （1)需要性原则：符合国家经济建设、科学发展和社会实践需要。意义：体现了科研工作的目的性选择意义重大、迫切需要解决的问题；选择实际工作中的问题。 （2)创新性原则：突出“新”字，探索医学的“空白”，敢于推翻前人、权威，突破认识的“0”。意义：1.体现了科研工作的价值；2.避免低水平的重复劳动，减少浪费。 （3)先进性原则:与创新性原则密切相关，凡是创新的课题必然先进。先进性表示创新的程度两者差别：创新指科学而言，先进多对技术；创新指整个世界，前人没有解决的问题；先进往往对一定地区、一定范围。 (4）目的性原则：科研选题要有明确的研究目的，不含糊，不分散，不笼统。研究者要热爱科研，有实事求是、孜孜不倦的研究精神。 （5）科学性原则：所选课题应符合客观实际和已有的科学理论体系了科研选题的依据。科研的定义中强调“用科学的方法”艺术活动、体育活动虽然有创新，但不是用科学方法，也没有增加新知识。所以不是科学研究 （6）可行性原则：课题研究目标、指标实现的可能性；技术路线的合理性。课题必须具备相应的客观条件、主观条件体现科研选题的条件性研究初期先预试、小试、模拟实验。 2、科研设计要素：研究对象、实验因素、评估指标 3、科研设计的原则： （1）对照原则 科研设计中常见的对照方式包括：安慰剂对照、空白对照、实验对照、标准对照、自身对照、相互对照、历史对照。 对照的目的：设立对照组，实际上就是寻找一个“参照物”或“对比的基础”，因为缺乏对照的研究是没有说服力的。目的：自然环境、实验条件和生物的变异影响实验结果。 对照的意义： 鉴别处理因素与非处理因素的差异 消除和减少实验误差 （2）均衡原则：除了要对比的因素不同以外，其它因素要尽可能的保持一致。保证每组非实验因素的影响是完全平衡的。即差别非其他因素不同所造成的。 （3）.随机化原则：指抽样调查或分组时，样本来自同一总体，按机会均等的原则而抽样或分组的方法。 随机化方法：随机数字表，抽签、抛币、随机抽样（增加研究对象代表性）、随机分组（增
1 医学科研方法”答案 1、逻辑思维的三大主要推理模式是（C、归纳、演绎和类比） A、分析、归纳和总结 B、分析、演绎和总结 C、归纳、演绎和类比 D、分析、归纳和类比 2、以下哪种类型的综述被认为是更高级的综述形式，有较高的参考价值（B、系统综述） A、叙述性文献综述 B、系统综述 C、归纳性综述 D、普通综述 3、以下哪种统计图表示两个连续型变量中一个随着另一个变化而变化的趋势（C、普通线图） A、直方图 B、直条图 C、普通线图 D、圆图 4、PubMed显示检索结果的缺省格式为（B、Summary格式） A、Abstrac格式 B、Summary格式 C、Citation格式 D、Brief格式 5、I期临床试验的研究内容主要是（A、人体对受试药的耐药程度） A、人体对受试药的耐药程度 B、对受试药的不良反应及危险性作出评价 C、完成预期的受试病例数的系统观察 D、在新药试生产结束时对其安全性、有效性作出确认性评价 6、现患率越靠近多少，样本含量就越小（C、50%）A、30% B、40% C、50% D、60% 7、综述的写作基础是（D、复习相关文献） A、具有分析综合能力 B、收集创新性资料 C、摘取资料中有用信息 D、复习相关文献 8、过去根据文稿中资料的提炼加工程度、组织写作形式和学术水平的高低，分为了初级、中级、高级三类，高级文献综述即（B、评论性综述） A、归纳性综述 B、评论性综述 C、文献综述 D、普通综述 9、一般慢性病的随访间隔期可定为（A、1～2年） A、1～2年 B、2～3年 C、3～4年 D、4～5年 10、常用的有关调查表处理、数据库建立、统计分析处理软件中，完全免费可以自由拷贝的是（B、EpiData,Epi info） A、Excel B、EpiData,Epi info C、FoxPro D、SPSS,SAS 1、对于计量资料，一般用什么来描述其集中趋势（B、平均数） A、标准差 B、平均数 C、相对数 D、百分比 12、血清抗体滴度常用的评价指标是（C、几何均数） A、疾病发病率 B、疾病感染率 C、几何均数 D、算术均数 13、Meta分析是循证医学用于定量综合评价文献研究的常用方法，它的思想可追溯到（A、20世纪30年代） A、20世纪30年代 B、20世纪50年代 C、20世纪70年代 D、20世纪90年代 14、循证医学发展最快的阶段在于（D、20世纪90年代中期） A、20世纪60年代中期 B、20世纪70年代中期 C、20世纪80年代中期 D、20世纪90年代中期 15、病例对照研究选择对照应符合的原则不包括（A、暴露应作为选择对照的依据） A、暴露应作为选择对照的依据 B、代表性 C、可比性 D、暴露不能作为选择对照的依据 16、生态学研究最主要的缺点是（B、生态学谬误） A、无应答偏倚 B、生态学谬误 C、选择性偏倚 D、回忆偏倚 17、以下哪种分析性研究又称回顾性研究（A、病例对照研究） A、病例对照研究 B、队列研究 C、病例—队列研究 D、病例—病例研究 18、对于敏感问题，最常用的调查方法是（A、问卷调查） A、问卷调查 B、开放式调查 C、随机应答技术 D、封闭式调查
內容 : 1. 什么是科学研究？ ( 5分) (1) 2. 什么是假说？假说有哪些特性？ ( 5分) (1) 3. 形成假说有哪几种推理方法？ ( 5分) (1) 4. 什么是文献？文献有哪几种级别？ (5分) (1) 5 . 设对照组的方法有哪些？ ( 5分) (2) 6. 什么是盲法？盲法有哪几种？ ( 5分) (2) 7. 什么是文献检索？文献检索有哪些途径？ ( 5分) (2) ８. 课题申请书主要包括哪些内容？（5分） (2) ９. 什么是科研设计？科研设计应遵守哪三个要素和哪五个原则？ ( 5分) (2) １０. 什么是开题报告？开题报告的目的是什么 ? ( 5分) (3) １１. 什么是文献综述？文献有哪几种类型？ ( 10分) ........... 4~5 １２. 什么是医学学术论文？包括哪些部分(主要回答哪些问题）？ ( 10分) .. (3) １３. 临床研究的主要方法是什么？应注意哪些问题？ ( 15分) (3) １４. 请从内容、格式、特点方面比较文献综述和医学学术论文有何异同？ ( 15分) ............................................ 4~7 1 什么是科学研究？ ( 5分) 答:科学研究是运用正确的观点和方法，对未知事物进行的认识活动，目的是揭示事物的本质及其内部联系,最重要者是创新。 2 什么是假说？假说有哪些特性？ ( 5分) 答: (1) 假说是根据已知的科学事实和科学理论，对准备研究內容的內在特征和规律,提出的一种假定的解释。 (2) 假说的四个特性：来源的科学性，说明的推测性，解释的系统性及结论的可验证性。 3 形成假说有哪几种推理方法？ ( 5分) 答:形成假说有三种推理方法： (1)类比推理：用已知的事物去设想未知的事物,实务上此方法用较多。 (2)归纳推理：将大量的现象经过综合与系统加工，找出共同的特征。 (3)演义推理：采用已知的规律和理论，解释另一个事物。 4 什么是文献？文献有哪几种级别？ (5分) 答: (1).文献是记录知识的一切载体,以符号,图形,文字,声頻,视频等手段記录知识的载体,均可称为文献。 (2).文献可分为四个级别： 一次文献：又称原始文献，是以科研成果为依据撰写的论文,称论著。 二次文献：对一次文献加工,整理,编排而成的检索工具。
医学科研心得体会 医学科研心得体会一：学习《医学科研方法学》的心得体会 作为一名合格的医学类研究生，不仅要临床知识过硬，还要具有一定的发现问题、提出问题继而尝试依靠科学研究解决问题的能力，这在临床工作中有很重要的意义。科学研究是人们以科学的观点与方法，对未知事物进行的探索、观察和分析，从而发展有关科学知识的认识活动。科学研究是一个严肃的探索和思维过程，其落脚点是发展科学理论和技术。 《医学科研方法》既是一门方法学也是一门科学，也是研究生教育的一门公共必修课，指导研究生和医学科技工作者如何正确掌握科学研究全过程、按规范化要求撰写科研论文的专著。开展《医学科研方法》，不仅使医药专业的学生了解医学科研的基本方法和基本程序，开阔学生的视野，激发学生对医学科学研究的兴趣以及对本专业的热爱，培养和增强学生的创新意识、创新能力、科学态度、科研能力、科研道德和社会责任感，而且为毕业课题论文的完成做好铺垫。如何想到某个选题，有什么样的背景，又如何从选题思路的萌发到怎样建立起来假说，最后思路怎样进一步完善。老师以结合实例的讲授对我们有着更多的直接的帮助和启发作用。 在科学研究的进行中，创新是科研选题的灵魂。科学研究强调科研的核心是对未知事物的探索、观察和分析，它的生命力在于创新。科研能力的实质就在于知识创新能力。创新是科研的生命线，尤其是基础性研究的选题，必须要具有产生新见解、获得新发现的可能性;应用研究的选题，也必须要具有发明新技术、新材料、新工艺、新产品或将已有的先进技术应用于新领域的可能性。 创新性的来源可以是前人或他人未研究过的问题;或对前人或他人已研究过的题目进一步发展、补充或修正;也可以是将国外或其它领域的科技新进展结合我国实际或本领域的特点进行创新性研究。创新一般认为有四层含义，第一层：新理论、新方法研究新问题(创新性强);第二层：新理论、新方法研究老问题(创新性较强);第三层：旧理论、旧方法研究新问题(创新性一般) ;第四层：填补空白，跟踪研究不算创新。 科研中提出科学问题就是创新过程，而且是最难做到的。爱因斯坦指出：“提出一个问题往往比解决一个问题更重要”。科研课题的选择是研究过程的起点，是贯穿于全部科研过程的主题思想，是科研工作基本内容和目标的高度概括。因此，我们要学会抓住关
六、队列研究 Cohort study 一、概述 概念 （一）概念 暴露(exposure) 指接触过某种物质、具备某种特征或处于某种状态。 队列(cohort) 有共同经历或有共同暴露特征的一群人 分为固定队列和动态队列 基本原理 （二）基本原理 1、根据研究对象是否暴露于某研究因素或其不同水平将 研究对象分成暴露组（E）与非暴露组（ē） 2、随访一定时间，比较两组之间所研究结局(outcome)发生率的差异，以分析暴露因素与研究结局之间的关系 目标人群→代表性样本(暴露)→E/ē→结局Y/N 主要特点 观察法 设立对照
由因到果，符合时间顺序 确证暴露和结局因果关系 （三）研究目的（用途） 检验病因假设( hypothesis) 评价预防措施效果(effect of prevention) 研究疾病的自然史( natural history of disease) （四）研究类型 1、前瞻性队列研究(prospective cohort study)：前瞻性收集资料 2、历史性队列研究(historical cohort study）：回顾性收集已有的历史资料 3、双向性队列研究(ambispectivecohort study)：继续前瞻性收集资料 前瞻性队列研究 Prospective Cohort Study ●研究队列的确定是现在(concurrent) ●根据研究对象现在的暴露分组 ●需要随访(follow-up) ●结局在将来某时刻出现 优点： 1.时间顺序增强了病因推断的可信度
2.直接获得暴露与结局资料，结果可信 3.能获得发病率 缺点：所需样本量大，花费大，时间长，影响可行性 历史性队列研究 Historical (Retrospective) Cohort Study ●根据研究开始时研究者掌握的有关研究对象 在过去某时刻的暴露情况的历史材料分组 ●不需要随访，研究开始时结局已出现 优点： 1.短期内完成资料的收集和分析 2.时间顺序仍是由因到果 3.省时、省力、出结果快 缺点： 1.资料积累时未受到研究者的控制，内容上未必符合要求 2.需要足够完整可靠的过去某段时间有关研究对象的暴露和结局的历史 记录或档案材料 双向性队列研究 Mixed (Ambispective) Cohort Study
20xx杭州继续教育《医学科研方法与论文 写作》100分试卷 1.双盲实验中不知道病人所用药物是试验药还是对照药的是： D. 以上均是 2.下面对于选择研究对象需遵循的原则描述错误的是： C. 选择干预对其影响较大的对象 3.下面哪项不是实验性研究的优点：B. 应用的普遍性好 4.下面对类实验研究的描述错误的是：D. 类实验性研究在回答自变量和因变量的关系时，比实验性研究的可信度高 5.试验组和对照组的最佳分配比例是：A. 1:1 6.实验设盲是为了避免：D. 以上均是 7.百科全书属于：B. 参考性工具书 8.文献检索时应当先检索：A. 电子文献 9. 中国科学引文数据库属于:A. 参考数据库 10.资料搜集时应注意：D. 以上都是 11. 国内最大型的学术期刊数据库为：A. 中国学术期刊数据库 12.综述的组成包括：B. 封面、题名页、目次摘要 13.通过综述的写作，可以：D. 以上都是 14.以下一般宜采用纵式写法的综述是：C. 动态性综述 15.学位经答辩委员会举行会议，进行讨论，以无记名投票方式，全体委员中至少（）以上通过才符合要求。B. 三分之二 16.学位论文的组成不包括：D. 答辩报告
17.写好综述的关键是：D. 体现创新的思想 18.资料搜集时应注意：D. 以上都是 19.下面哪项不符合图书的特点：C. 出版周期短 20. Web上最大的免费提供临床医学全文文献和继续医学教育资源（CME）的网点是：B. Medscape(医景) 21.学术性期刊多选用的文摘类型是：A. 报道性文摘 22.下面哪项是情报线索：C. 二次文献 23. 揭示文献内容较深的是：B. 索引 24.一个研究人员的全部工作时间中，查阅文献的时间占： B. 50.90% 25.现代最常用的摘要形式为：C. 结构式摘要 26.医学学术论文的基本要求不包括：A. 描述性 27.医学学术论文的前置部分不包括：D. 前言 28.以下不能成为著者的是：C. 对研究组做一般监管者 29.实验型论文的讨论部分：B. 要体现创造性发现与独到见解 30.以下结构灵活，没有统一格式的论文是：D. 医学管理论文 31.对于由一个错误的实验设计所产生的实验数据，在进行数据处理 之前，其最好的补救办法是：D. 重新设计，重做实验 32.实验设计的核心内容由三方面组成：D. 以上都包括 33. 什么是实验设计不可缺少的三要素：D. 以上都是 34.试验设计中强调必须遵守“随机、对照、重复、均衡”四大原则，其根本目的就是为了：C. 纯化“信号”、降低“噪音”、多快好省35. 下列对于实验设计类型阐述全面的是：A. 就是在实验研究中安
科研思路和方法作业 (一)研究内容、研究目标、以及拟解决的关键问题 1.研究内容 课题以VZV免疫逃避机制中发挥着重要作用的感染病毒细胞免疫识别的MHCⅠ/Ⅱ类基因抑制为切入点，围绕IFN-γ和参与免疫逃避的的两条主要途径，有目的地观察IFN-γ和相关基因CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ的表达量、分布及变化规律，进一步检测C ⅡTamRNA、MHCⅠmRNA 、MHCⅡmRNA的表达变化以及外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性的动态变化，并对上述指标的相关性及变化规律进行分析，说明调节VZV病毒感染的免疫逃避机制是针灸治疗带状疱疹、减轻疼痛和后遗症的关键。且明确针刺与放血作用机制的差异所在。 主要开展以下工作： 研究内容： （1）皮损组织病理学观察。 （2）镜检：外周血有核细胞计数、白细胞、淋巴细胞分类计数、巨噬细胞吞噬功能。 （3）流式细胞仪检测：外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群、NK细胞活性。 （4）免疫组化法ABC染色法检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHC Ⅰ、MHCⅡ、蛋白的表达及分布规律。 （5）western blot检测：皮损组织IFN-γ、CⅡTa、Stat1α、Jak1、Jak2、MHCⅠ、MHCⅡ蛋白量的表达。 （6）RT-PCR法检测：皮损组织CⅡTamRNA、MHCⅠmRNA 、MHCⅡmRNA。 2.研究目标： 2.2.1旨在明确针灸治疗带状疱疹，减轻疼痛和后遗神经痛，与调节MHCⅠ/Ⅱ类相关基因、蛋白的分布及表达关系，为针灸治疗免疫逃避类疾病提供科学依据。 2.2.2通过比较针灸与传统抗病毒药物的作用差异，为解决带状疱疹病毒耐药性问题提供 理论依据。 2.2.3旨在明确针刺与放血在治疗疱疹作用机制中的差异。 3.拟解决的关键性问题：