厦门大学2002年生物化学
招生专业：生物化学与分子生物学、微生物学、细胞生物学
一、选择题（选择出每题的唯一正确答案，每题1分，共15分）
1、酯酶所催化的水解反应的专一性属于（）
A、顺饭异构专一性
B、旋光异构专一性
C、族专一性
D、键专一性
E、绝对专一性
2、决定大肠杆菌RNA聚合酶转录活性的组分是（）
A、α亚基
B、β亚基
C、β’亚基
D、δ亚基
3、血性物质是一类（）
A、磷蛋白
B、脂蛋白
C、糖蛋白
D、核蛋白
E、色蛋白
4、调节血糖的激素是（）
A、加压素
B、胃泌素
C、胃上腺素
D、甲状旁腺素
5、信号肽位于（）
A、内质网的腔内侧面
B、高尔基体的腔内侧面
C、内质网的细胞质侧面D/核糖体的表面
6、2，4—二硝基苯酚对生物氧化的作用是是属于何类试剂？
A、解偶联剂
B、离子载体抑制剂
C、激活剂
D、氧化磷酸化抑制剂
7、生物体内经从无到有途径合成的嘧啶核苷酸，其嘧啶环3位的氮是来自于
A、NH3 B.Gly C.Asp D.Gln
8、在pH6.0时，一个氨基酸混合物（Gly, Gln,His,Ser）,经纸电泳，那种氨基酸移动最快？
A、Gly
B、Gln
C、His
D、Ser
9、糖类物质在动物和人体内主要以哪一种形式运转？
A、葡萄糖
B、半乳糖
C、果糖
D、蔗糖
10、在下列哪种生物合成途径中需要NADPH？
A、糖原的生物合成
B、酮体的生物合成
C、胆固醇的生物合成
D、磷脂的生物合成
11、一个分子量为70000的蛋白质分子由两个相同的完全由α—螺旋组成的亚基所构成，每个亚基的二级结构长度是：（氨基酸残基德平均分子量为110）
A．50nm B、47.7 nm C、42.5 nm D、38.6 nm
12、丙酮酸羧化酶的辅酶为：
A、TPP
B、生物素
C、四氢叶酸
D、DND*
13、血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于：
A、CO2分压增加
B、CO2分压减少
C、O2分压增加
D、O2分压减少
14、一个RNA片段（GICmDUA）中含有稀有碱基：
A、五个
B、四个
C、三个
D、两个
15、在原核生物操纵子中，操纵基因是下了哪种物质的结合部位？
A、RNA聚合酶
B、Camp_CAP复合物
C、阻遏蛋白
D、ρ—因子
二、判断题（每题一分）
1、在原核细胞和真核细胞中，染色体DNA都与组蛋白形成复合物。
2、丙酮酸脱氢酶系与α—酮戊二酸脱氢酶酶系的催化剂机制相似。
3、吞噬作用是一个需能的主动转运过程。
4、核DNA编码的线粒体和叶绿体膜蛋白是在泡浆中游离状态的核糖体上合成的。
5、哺乳动物DNA聚合酶α兼具有校正复制错误的功能。
6、NAD*(辅酶Ⅰ)和NADP*（辅酶Ⅱ）均是作为脱氢酶的辅酶。
7、线粒体内的乙酰CoA可直接穿过线粒体内膜进入胞浆为脂肪酸合成提供碳架。
8、单糖都具有变旋现象的特性。
9、有一小肽，用测N端法未测出有α—NH2，则可认为此小肽必为环肽。
10、自然界的多肽类物质皆由L型氨基酸组成。
三、填空题（没空1分，共25分）
1.1953年，著名英国科学家（）等人首次阐明一级结构的蛋白质是（）。
2、细胞内分解代谢途径和生物氧化过程提供给细胞的三种产品是（）（）和（）。
3、琥珀酸脱氢酶的辅酶是（）。
4、生物体有许多种类的高能化合物，根据其键型特点可分为为（）（）和（）等类型。
5、在酶促反应中，竞争性抑制可通过（）得到解除。
6、氨基酸分解代谢中能产生乙酰CoA再进入三羧酸循环的途径有三条1、转变为（）再形成乙酰CoA；2、经（）再形成乙酰CoA；3、（）形成乙酰CoA。
7、支链淀粉分子是由（）通过（）和（）两种糖苷键连接而成，其外围支链呈（）状。
8、原核细胞基因表达的特点之一是（）和（）相偶联。
9、分子病是指（）的缺陷，造成人体（）结构和功能的障碍。
10、如果来自物种A的DNA的Tm值低，则前者的A—T含量比后者的（）。
11、一摩尔葵酸在细胞内被彻底氧化成H2O和CO2时能产生（）摩尔A TP。
12、人做剧烈运动时，血糖初一部分被彻底氧化外，还有一部分被分解，期终产物是（）。
13、从流感噬血杆菌d株（Haemophilus influenzae Rd）提取的第三种限制性内切酶应命名为（）。
四、解释下列成语（10分）
1、复制叉（2分）
2、必需脂肪酸（解释含义并列出两种）（4分）
3、多酶复合体（解释含义并列出两种）
五、写出下列物质的化学结构式（6分）
1、乳糖（2分）
2、谷氨酰胺酰甘氨酰苏氨酰赖氨酸（4分）
六、写出下列酶催化的化学反应方程（地物和产物均以化学结构式表示）
1、磷酸烯醇丙酮酸羟基酶（4分）
2、异柠檬酸脱氢酶（4分）
七、问答与计算分析题（26分）
1、在pH=7的水溶液中，大多数蛋白质折叠成使非极性氨基酸侧链处于分子内部，而大多数极性氨基酸侧链处于外部，于水接触。请回答下列问题：
（1）在水溶液中，Val、Pro、Asp、Phe、Lys、Ile和His侧链可能处于球状蛋白质的外部还是内部？
（2）为什么Gly和Ala即可处在分子内部，也可处在分子外部？
（3）虽然Ser、Thr、Asn和Gln是极性氨基酸，但他们也适用于在分子内部存在，这是为什么？
（4）Cys可以存在于什么位置？为什么？
2、试列出五个证据说明细胞内脂肪酸的生物合成不是沿着其β—氧化的逆途径进行。（5分
3、一种Hind Ⅲ酶切片段，包含10.0kb。当只用EcoR I对它进行完全酶解时，得到3.0kb和7.0kb两种片段；而只用Alu I进行完全酶解时，得0.5、1.0和8.5kb三种片段；如果以EcoR I和Alu I联合进行完全酶解时，则得到0.5、1.0、2.0和6.5kb四种片段。试画出该Hind Ⅲ酶切片段的限制性酶切图谱，并注明上述酶切点的位置、（5分）
4、有一种单体酶基因的编码区含有372bp（不包括基因的表达的启动和终止顺序）：
（1）使计算次酶基因编码区的长度
（2）若该酶分子中α—螺旋结构占75%，其余为β—折叠构象，试求该酶分子呈二级结构时的长度（长度单位以nm表示）（6分）
2004年 一、填空 1、纤维素分子是由( )组成，它们之间通过( )键相连。 2、真核生物的RNA聚合酶III转录的是( )。 3、糖原合成中，葡萄糖单体的活性形式是( )，蛋白质的生物合成中，氨基酸的活性形式是形成( )。 4、糖肽键的主要连接键有( )和( )两种。 5、卵磷脂是由( )、( )、( )和( )组成。 6、snRNA主要参与( )的加工成熟，真核生物tRNA的加工，成熟过程包括( )、( )、( )和( )等。 7、用碱水解核酸，产物主要是( )和( )混合物。 8、DEAE-纤维素是一种( )交换剂，CM-纤维素是一种( )交换剂。 9、蛋白质分子中的生色氨基酸是指( )、( )和( )三种。 10、糖酵解和糖异生作用是相反的两个过程，各自的调空酶协调作用，防止了( )是形成。 11、酶活力是指( )，一般用( )来表示。 12、DNA测序的解决得益于哪两种技术的应用：( )和( )。 13、羽田杀菌素是( )的结构类似物，可以强烈地一直腺苷酸琥珀酸合成酶的活性，从而抑制了腺苷酸的合成。 14、常用3.613-螺旋（n=3）来表示蛋白质二级结构中的α-螺旋，其中的3.6指( )，13表示( )。 15、蛋白质的生物合成中，每增加一个氨基酸残基要消耗( )个高能键。 二、选择题
1、环状结构的己醛其立体异构体的数目有几个？ A、4 B、16 C、32 D、64 2、真核生物mRNA的帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基联接，联接方式是 A2’-5 B3’-5 ’C3’-3’ D5’-5’ 3、下列哪种糖不能形成糖砂？ A、葡萄糖 B、乳糖 C、蔗糖 D、麦芽糖 4、下列物质中，不是高能化合物的是： A、琥珀酰CoA B、1，3-二磷酸甘油酸 C、SAM D1，6-二磷酸果酸 5、下列化合物中哪个不属于脂类化合物？ A、甘油三丁酸酯 B、胆固醇硬脂酸酯 C、羊毛蜡 D、石蜡 6、每分子血红蛋白所含铁离子数为几个？ A、1 B、2 C、4 D、8 7、煤气中毒主要是因为煤气中的一氧化碳的什么作用？ A、抑制琉基酶，使失活琉基酶 B、抑制胆碱酯酶，只乙酰胆碱堆积，引起神经中毒 C、抑制其它酶的作用，导致代谢紊乱 D、抑制血红蛋白的功能，导致组织细胞缺氧 8、反密码子UGA所识别的密码子是： A、ACU B、ACT C、UCA D、TCA 9、在判断酶对底物的亲和力时，认为最适的底物应该是： A、Km值最小 B 、Km值最大C、Vm/ Km值最小D、Vm /Km值最大 10、哪一种抑制剂存在时，酶反应的Vmax和Km都下降？ A、竞争性可逆抑制剂 B、非竞争性可逆抑制剂 C、反竞争性可逆抑制剂 D、不可逆抑制剂 11、下列突变中，哪一种致死性最大？ A、胞嘧啶取代腺嘌呤 B、腺嘧啶取代鸟嘌呤 C、插入三个核苷酸 D、插入一个核苷酸
第六章酶复习总结 酶的特点 酶和一般催化剂的共性 加快反应的速度，但不改变反应的平衡。 酶作为生物催化剂的特点 （1）易失活 （2）具有很高的催化效率 酶的催化效率可以用转换数（turnover number，TN）来表示，它的定义是在一定条件下，每个酶分子单位时间内（通常为1秒钟）转换底物的分子数。转换数高的可到四千万（如过氧化氢酶），低的不足1（如溶菌酶）。 （3）具有很高的专一性 （4）酶的活性受到调节控制 ①调节酶的浓度；②通过激素调节酶的活性；③反馈抑制调节酶的活性；④抑制剂和激活剂调节酶的活性；⑤其他调节方式如别构调节。 6.5.1 酶的活性部位 在整个酶分子中，只有一小部分区域的氨基酸残基参与对底物的结合与催化作用，这些特异的氨基酸残基比较集中的区域称为酶的活性部位（active site），或称为酶的活性中心（active center）。酶的活性部位是酶结合和催化底物的场所，是与酶活力直接相关的区域。酶活性部位的结构是酶作用机理的结构基础。 酶分子中与结合底物有关的部位称为结合部位，每一种酶具有一个或一个以上的结合部位，每一个结合部位至少结合一种底物，结合部位决定酶的专一性；酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位，催化部位决定酶的催化能力以及酶促反应的性质。酶的结合部位与催化部位共同构成酶的活性部位，在功能上，二者缺一不可，在空间构成上，二者也是紧密连接在一起。 不同酶有不同的活性部位，活性部位的共同特点是： ①活性部位在酶分子整体结构中只占很小的部分，通常由数个氨基酸残基组成，活性部位体积虽小，却是酶最重要的部分。 ②酶的活性部位具有三维立体结构，酶活性部位的立体结构在形状、大小、电荷性质等方面与底物分子具有较好的互补性。参与组成酶活性部位的氨基酸残基在一级结构上可能相距很远，但是通过肽链的折叠，它们最终在酶的高级结构中相互靠近。 ③酶的活性部位的催化基团主要包括氨基酸侧链的化学功能团以及辅因子的化学功能团，某些酶的辅因子也可作为酶的催化基团，辅因子与酶协同作用，为催化过程提供了更多种类的功能基团。除催化基团外，酶的活性部位还有参与底物结合的结合基团。在活性部位之外，也可能具有某些对于维持酶活性部位的结构和功能必不可少的基团。这些对酶的催化功能来说必不可少的基团，称为必需基团，若必需基团被改变，酶的活力会严重下降，甚至完全丧失。 ④酶的活性部位具有柔性。在酶和底物结合的过程中，酶分子和底物分子的构象均发生一定的变化才形成互补结构。诱导契合假说被诸多实验结果证实，此外，酶的活性部位相比于整个酶分子更具柔性或称可运动性，容易在蛋白变性
厦门大学《生物化学》课程试卷 Please give the explanations of the terms below: (2 scores per term) 1.Hydrogen bond The hydrogen on one molecule attached to O or N that is attracted to an O or N of a different molecule. 2.Zwitterion A zwitterion is a dipolar ion that is capable of carrying both a positive and negative charge simultaneously. 3.Quaternary structure The arrangement of multiple folded protein molecules in a multi-subunit complex. 4.Salting out A method of separating proteins based on the principle that proteins are less soluble at high salt concentrations. 5.Induced fit The change in shape of the active site of an enzyme so that it binds more snugly to the substrate, induced by entry of the substrate. Please fill in the blanks with proper words: (1.5 score per blank) 1.Two major elements of secondary structure are the ( α helix) and the ( β strand). 2.Polypeptide chains can be synthesized by automated solid-phase methods in which the ( carboxyl ) end of the growing chain is linked to an insoluble support. 3.Three-dimensional protein structure can be determined by ( NMR Spectroscopy ) and ( X-Ray Crystallography ). 4.The cleavage of peptide bonds by chymotrypsin is initiated by the attack of a serine residue on the peptide carbonyl group. The attacking hydroxyl group is activated by interaction with the a ( histidine) residue, a ( aspartate) residue. This catalytic triad generates a powerful nucleophile. 5.Three amino acids ( Tyr ), ( Trp ) and ( Phe ) contribute to most of the ultraviolet (UV) absorbance of proteins, which absorb maximally at 280nm. Multiple choices: (1.5 score per choice) 1.The roles of carbohydrates are ( e ) (i)Structural components (ii) component of nucleic acids (iii) Energy source (iv)Protein modification a.(i) only b.(iii) only c.(i), (iii) d.(i), (iii), and (iv) e.All of above 2.Which of the following are disaccharides ( a ) (i) Galactose (ii) Maltose (iii) Sucrose (iv) Lactose a.(i), (ii)
厦门大学2015年招收攻读硕士学位研究生 入学考试试题 科目代码：620 科目名称：分子细胞生物学 招生专业：生命科学学院、医学院、化学系、海洋与地球学院、环境与生态学院、药学院各相关专业 一、选择题（单选，每题2分，共30分） 1.病毒与细胞在起源上的关系，下面（）的观点越来越有说服力 A.生物大分子→病毒→细胞 B.生物大分子→细胞→病毒 C.细胞→生物大分子→病毒 D都不对 2.已克隆人的rDNA，用（）确定rDNA分布在人的哪几条染色体上 A.单克隆抗体技术 B.免疫荧光技术 C.免疫电镜技术 D.原位杂交技术 3.关于弹性蛋白的描述，（）是对的 A.糖基化、高度不溶、很少羟基化、富含脯氨酸和甘氨酸 B.非糖基化、高度不溶、羟基化、富含脯氨酸和甘氨酸 C.非糖基化、可溶、很少羟基化、富含脯氨酸和甘氨酸 D.非糖基化、高度不溶、很少羟基化、富含脯氨酸和甘氨酸 4.乙酰胆碱受体属于（）系统 A.通道耦联受体 B.G蛋白耦联受体 C.酶耦联受体 D.都不对 5.内质网还含有( ),可以识别不正确折叠的蛋白或未装配好的蛋白亚基,并促进它们重新折叠和装配 A.Dp B.Bip C.SRP D.Hsp90 6.染色体骨架的主要成分是（） A.组蛋白 B.非组蛋白 C.DNA D.RNA 7.溶酶体内所含有的酶为( ) A.碱性水解酶 B.中性水解酶 C.酸性水解酶 D.氧化磷酸化酶 8.用特异性药物松弛素B可以阻断( )的形成 A.胞饮泡 B.吞噬泡 C.分泌小泡 D.包被小泡 9.有丝分裂中期最主要的特征是( ) A.染色体排列在赤道面上 B.纺锤体形成 C.核膜破裂 D.姐妹染色单体各移向一极 二、名词解释（每题6分，共30分）
厦大生化难题解读 厦大研究生入学考试03-08---生物化学疑难题目 一、填空题 1. 琥珀酰CoA是_TCA的中间产物，可参与氨基酸氧化和_____。【08】 2. 对Michaelis型的酶来说，酶促反应速度达v=90%Vmax，和v=10%Vmax，则[S]0.9[S]0.1 的比值应为0.1【08】 3. 一个蛋白质分子含有四个半胱氨酸残基。若所有半胱氨酸残基都可能配对形成二硫键，则此种蛋白质形成二硫键的方式有6种。【07】 4. 对Michaelis型的酶来说，如果要求酶促反应v=80%Vmax，则[S]应为Km的倍数是4 5. 当两条来源不同DNA或者RNA间存在互补配对时，在一定条件下形成双螺旋分子，这个过程称为分子杂交【07】 6. 核糖体中催化肽键合成的是RNA，其实质是一种核酶，蛋白质只使用于维持前者构象的。【07】 7. 实验室常用的薄膜层析或纸层析来分离鉴定游离氨基酸，根据的原理是什么是氨基酸分配系数不同【06】 8. 1986年，Lerner R A 和Schult PG等人发现了具有催化活性的RNA（抗体），称之为核酶（抗体酶）【06】 9. 在氨基酸代谢中，直接生成游离氨的脱氨方式有氧化脱氨和联合脱氨【06】 10. 按国际酶学委员会的规定，每一种酶都有一个唯一的编号，碱性磷酸酶的编号是EC3.1.3.1，EC代表Enzyme Commision(酶学委员会)。【05】 11. 实验室常用二苯胺测定DNA含量，用地衣酚测定RNA含量。【05】 12. 褪黑激素来源于Tyr氨基酸，而硫磺酸来源于Cys氨基酸。【05】 13. 卵磷脂是由甘油，脂肪酸，磷酸和胆碱组成。【04】 14. snRNA主要参与rRNA的加工合成，真核生物的tRNA的加工，成熟过程包括 等【04】 15. DEAE—纤维素是一种阴交换剂，CM—纤维素是一种阳交换剂。【04】 16. 蛋白质分子中的生色氨基酸是指Phe，Tyr和Trp三种氨基酸。【04】 17. 糖酵解和糖异生是两个相反的过程，各自的调控酶协同作用，防止了无效循环的形成。【04】 18. DNA测序的解决得益于哪两种技术的应用：高灵敏度聚丙烯酰胺凝胶电泳和限制性内切酶的应用。【04】 19. 蛋白质的生物合成中，每增加一个氨基酸残基要消耗4个高能键。【04】 20. 给动物食用3H标记的胸腺嘧啶，可使DNA带有放射性，而RNA不带放射性。【03】 21. 糖酵解的关键控制酶是磷酸果糖激酶，果糖－２，６－二磷酸的作用是促进糖酵解。【03】 22. 血红蛋白与氧结合的过程呈现协同效应，是通过血红蛋白的变构现象实现
厦门大学2003年生物化学考研试题 一．填空题（共30分） 1．蔗糖是有一分子（）和一分子（）组成，它们之间是通过（）键相连。2．核苷三磷酸在代谢中起重要的作用。（）是能量和磷酸基团转移的重要物质，（）参与单糖的转变和多糖的合成，（）参与卵磷脂的合成，（）供给肽链合成时所需要的能量。 3．将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，此技术称为（）印迹法。4．给动物食用3H标记的（），可使DNA带有放射行，而RNA不带放射性。5．酶促反应动力学的双倒数作图（Lineweaver-Burk作图法），得到的直线在纵轴上的截距为（），横轴上的截距为（）。 ６．核酸复制时，ＤＮＡ聚合酶沿模板链（）方向移动；转录时，ＲＮＡ聚合酶沿模板链（）方向移动；翻译时，核糖体沿模板链（）方向移动。 ７．糖酵解的关键控制酶是（），果糖－２，６－二磷酸的作用是（）糖酵解。 ８．细菌的ＤＮＡ连接酶以（）为能量来源，动物细胞和Ｔ４噬菌体的ＤＮＡ连接酶以（）为能源。 ９．血红蛋白与氧结合的过程呈现（）效应，是通过血红蛋白的（）现象实现的。 １０。双链ＤＮＡ中，若（）含量多，则Ｔm值高。 １１。SnRNA主要参与（）的加工成熟，真核生物tRNA的加工成熟过程包括（）（）和（）等。 １２。常用定量测量还原糖的试剂为（）试剂和（）试剂。二．选择题（每题１分，共２０分） １．下列哪种糖无还原性？ Ａ。麦芽糖 Ｂ。蔗糖 Ｃ。果糖 Ｄ。阿拉伯糖 ２．有一个三肽，用胰蛋白酶水解，发现有游离的Ｇly和一种二肽，下列多肽的一级结构中，哪一个符合该肽的结构？ A. Ala-Lys-Gly B. Lys-Ala-Gly C. Gly-Lys-Ala D. Ala-Gly-Lys ３．人体内嘌呤分解代谢的最终产物是： Ａ。肌酐 Ｂ。尿素 Ｃ。肌酸 Ｄ。尿酸 ４．ＳＤＳ凝胶电泳把混合的蛋白质分开，是根据各种蛋白质的什么性质？Ａ。蛋白质分子带电性的不同 Ｂ。分子大小不同
核酸化学及研究方法 一、名词解释 1.正向遗传学：通过研究突变表型确定突变基因的经典遗传学方法。 2.核小体组蛋白修饰：组成核小体组蛋白，其多肽链的N末端游离于核小体之外，常被化学基团修饰，修饰类型包括：乙酰化、甲基化、磷酸化和泛素化，修饰之后会改变染色质的结构和活性。 3.位点特异性重组：位点特异性重组是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会，重组只发生在同源短序列的范围之内，需要位点特异性的蛋白质分子参与催化。 4.转座机制：转座酶上两个不同亚基结合在转座子的特定序列上，两个亚基靠在一起形成有活性的二聚体，切下转座子，转座酶-转座子复合物结合到靶DNA上，通过转座酶的催化将转座子整合到新位点上。 5.基因敲除：利用DNA同源重组原理，用设计的外源同源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的靶基因发生重组，从而将外源DNA整合到受体细胞的基因组中，产生精确的基因突变，完成基因敲除。 6.Sanger双脱氧终止法：核酸模板在核酸聚合酶、引物、四种单脱氧碱基存在的条件下复制或转录时，如果在四管反应系统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，若双脱氧碱基掺入链端，该链便停止延长，若单脱氧碱基掺入链端，该链便可继续延伸。如此每管反应体系中便合成了以共同引物为5’端，以双脱氧碱基为3’端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后，分四个泳道进行电泳，以分离长短不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基），根据片段3’的双脱氧碱基，便可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。 7.荧光实时PCR技术原理 探针法：TaqMan探针是一小段可以与靶DNA序列中间部位结合的单链DNA，它的5’和3’端分别带有一个荧光基团，这两个荧光基团由于距离过近，相互发生淬灭，不产生绿色荧光。PCR反应开始后，靶DNA变性，产生单链DNA，TaqMan探针结合到与之配对的靶DNA序列上，之后被Taq DNA聚合酶切除降解，从而解除荧光淬灭，荧光基团在激发光下发出荧光，最后可根据荧光强度计算靶DNA的数量。染料法：荧光染料（如SYBR GreenⅠ）能与双链DNA发生非序列特异性结合，并激发出绿色荧光。PCR反应开始后，随着DNA的不断延伸，结合到DNA上的荧光染料也相应增加，被激发产生的荧光也相应增加，可根据荧光强度计算初始模板的数量。 8.双分子荧光互补(BiFC)技术原理 将荧光蛋白在某些特定的位点切开，形成不发荧光的N片段和C片段。这2个片段在细胞内共表达或体外混合时，不能自发地组装成完整的荧光蛋白，不能产生荧光。但是，当这2个荧光蛋白的片段分别连接到一组有相互作用的目标蛋白上，在细胞内共表达或体外混合这两个目标蛋白时，由于目标蛋白质的相互作用，荧光蛋白的2个片段在空间上互相靠近互补，重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子，并在该荧光蛋白的激发光激发下，发射荧光。 简言之，如果目标蛋白质之间有相互作用，则在激发光的激发下，产生该荧光蛋白的荧光。反之，若目标蛋白质之间没有相互作用，则不能被激发产生荧光。 二.问答题： 1.怎样将一个基因克隆到pET32a载体上；原核表达后，怎样纯化该蛋白？ 2.通过哪几种方法可以获得cDNA的全长？简述其原理。 （一）已知序列信息 1.同源序列法：根据基因家族各成员间保守氨基酸序列设计简并引物，利用简并引物进行RT-PCR扩增，得到该基因的部分cDNA序列，然后再利用RACE（cDNA末端快速扩增技术）获得cDNA全长。 2.功能克隆法：cDNA文库；基因组文库 （二）未知序列信息： 1.基于基因组DNA的克隆：是在鉴定已知基因的功能后，进而分离目标基因的一种方法。
一、生物化学、化学生物学、分子生物学，三者联系与区别 欧洲化学生物学的一个专门刊名为ChemBioChem刊物，这部刊物在我所阅读的文献中被反复提及，我查到该文献的两位主编分别是Jean-Marie Lehn教授和Alan R. Fersht教授，他们在诠释刊物的宗旨[1]时指出：ChemBioChem意指化学生物学和生物化学，其使命是涵盖从复杂的碳水化合物、多肽蛋白质到DNA/RNA，从组合化学、组合生物学到信号传导，从催化抗体到蛋白质折叠，从生物信息学和结构生物学到药物设计，这一范围宽广而欣欣向荣的学科领域。既然化学生物学涵盖面这么广泛，它到底和其它学科之间怎么区分呢？ 想到拿这个题目出来介绍是因为这是我在第一节课课堂讨论中的内容，我们小组所参考的文献主要是关于对化学生物学这门学科的认识，化学生物学的分析手段以及一些新的研究进展，比如药物开发和寻找药物靶点。当时课堂上对于题目中三者展开过热烈讨论，作为新兴学科的化学生物学，研究的是小分子作为工具解决生物学问题的学科，它如何从生物化学和分子生物学中分别出来，这也是我自己最开始产生过矛盾的问题，这里我结合所查阅的文献谈一下自己的理解。 1.1 生物化学(Biological Chemistry) 生物化学是研究生命物质的化学组成、结构、化学现象及生命过程中各种化学变化的生物学分支学科[1]。根据一些生物化学的书我归纳了一下，其研究的基本内容包括对生物体的化学组成的鉴定，对
新陈代谢与代谢调节控制，生物大分子的结构与功能测定，以及研究酶催化，生物膜和生物力学，激素与维生素，生命的起源与进化。 生物化学对其他各门生物学科的深刻影响首先反映在与其关系比较密切的细胞学、微生物学、遗传学、生理学等领域。通过对生物高分子结构与功能进行的深入研究，揭示了生物体物质代谢、能量转换、遗传信息传递、光合作用、神经传导、肌肉收缩、激素作用、免疫和细胞间通讯等许多奥秘，使人们对生命本质的认识跃进到一个崭新的阶段。(摘自https://www.doczj.com/doc/5a11151826.html,/view/253496.htm) 1.2 化学生物学（Chemical Biology） 化学生物学是使用小分子作为工具解决生物学的问题或通过干扰/调节正常过程了解蛋白质的功能[1]。曾看到过一篇关于介绍化学生物学的奠基人Schreiber的文章，他曾经指出：“化学生物学是对分子生物学的有力补充，分子生物学采用定点突变的方法来改变生物分子如蛋白质和核酸的功能；而化学生物学是采用化学的手段，如运用小分子或人工设计合成的分子作为配体来直接改变生物分子的功能[2]。” 化学生物学是近年来出现的新兴研究领域，它融合了化学、生物学、物理学、信息科学等多个相关学科的理论、技术和研究方法，是一个有活力、有应用前景的新学科。它主要研究的内容包括[3]：1化学遗传学—采用小分子活性化合物作为探针,探索和调控细胞过程 (1)基因表达的小分子调控
机密*启用前 厦门大学2007年招生攻读硕士学位研究生 入学考试试题 科目代码：432 科目名称：生物化学 招生专业：生命科学学院各专业 考生须知：全部答案一律写在答题纸上，答在试题纸张上的不得分！请用蓝、黑色墨水笔或圆珠笔作答。 一、填空题：（每空1分，共30分） 1.蛋白质的酸水解一般用6mol/L HCI，110℃水解20小时左右，可使蛋白质完全水解。酸水解的优点是（），缺点是使（）被完全破坏。 2.生物体内的多糖按其生物功能可以分为两类（）、（）。前者往往以（）糖苷键连接而成；后者往往以（）糖苷键连接而成。 3.酶的变性作用和抑制作用都可以使酶活力丧失，两者的根本区别在于（）。 4.蛋白质N-末端测定的方法有很多，其中（）法由于该试剂与N-末端氨基酸形成的物质具有强烈的荧光，灵敏度很高。 5.一个蛋白质分子含有四个半胱氨酸残基。若所有半胱氨酸残基都可能配对形成二硫键，则此种蛋白质形成二硫键的方式有（）种。 6.对Michaelis型的酶来说，如果要求酶促反应v =80%Vmax ,则[S]应为Km的倍数是（）。 7.双倒数作图法测定酶的米氏常数Km时，Km值可以从直线的（）截距获得。 8.维持DNA双螺旋结构稳定的因素是（）和（）。 9.当两条（）之间存在互补配对时，在一定条件下形成（），这个过程称为（）。 １０.核糖体中催化肽键合成的是（），其实质是一种（），（）只是用于维持前者构象的。 １１.人体缺乏维生素Ａ会患（），缺乏（）会患脚气病。 １２.糖酵解中有三个反应是不可逆的，催化这三个反应的酶是（），（），（）。其中（）是糖酵解反应的关键限速酶。 １３.果糖－１－磷酸在（）的催化下，产生甘油醛和磷酸二羟丙酮，前一种产物可在（）催化下生成３－磷酸甘油醛而进入酵解途径。 １４.１分子丙酮酸彻底氧化，反应中有（）次脱氢，共生成（）分子ＡＴＰ，生成（）分子ＣＯ２。 二选择题(下列每题有一个正确答案，选择正确答案的编号写在答卷纸上，每题1分，共30分) 1.在蛋白质合成过程中最主要的供能物质是： A.ATP； B.GTP； C.CTP； D.UTP。 2.下列氨基酸中，哪种氨基酸经转氨作用可直接生成草酰乙酸？ A.苏氨酸； B.天冬氨酸； C.丙氨酸； D.谷氨酸。
厦门大学2014年832生物化学研究生入学考试试题（部分参考） 一、填空题 1.糖原和支链淀粉结构上非常相似，构件分子均是，它们之间的连接键有和两种糖苷键。 2.蛋白质之所以存在及其丰富的构象，是因为键和键能有不同程度的转动。 3.用电泳方法分离蛋白质的原理，是在一定的pH缓冲液条件下，不同的蛋白质的、和不同，因而在电场中移动的和 不同，从而使蛋白质得到分离。 4.ATP是转移的重要物质，UTP参与，CTP参 与，GTP供给所需能量。 二、选择题 1.下列关于葡萄糖的陈述，正确的是（） A.由于葡萄糖分子中有醛基，所以它能与Schiff试剂起加成反应 B.醛式葡萄糖转变成环状后就失去了还原性 C.葡萄糖形成葡萄糖甲基苷后，仍然具有还原性 D.葡萄糖和甘露糖是差向异构体 2.下列哪个糖是酮糖（） A.D-果糖 B.D-半乳糖 C.乳糖 D.蔗糖 3.生物膜上的何种组分可以用高浓度尿素或盐溶液分离（） A.跨膜蛋白 B.共价结合的糖类 C.外周蛋白 D.整合蛋白 4.下列哪种化合物不是磷脂（） A.脑磷脂 B.醛缩磷脂 C.神经+ D.卵磷脂 5.若用电泳分离Gly-Lys、Asp-Val和Ala-His三种二肽，在下列哪个pH条件下电泳最为合适？（） A.pH2以下 B.pH2-4 C.pH7-9 D.pH10-12 6.蛋白质中氨基酸在280nm处吸光值最大的是（） A.色氨酸 B.酪氨酸 C.苯丙氨酸 D.赖氨酸 14.从葡萄糖合成糖原时，每加上一个葡萄糖残基需要消耗几个高能磷酸键？
（） A.0 B.2 C.3 D.4 15.能调节三羧酸循环速率的别构酶是（） A.异柠檬酸脱氢酶 B.乌头酸酶 C.苹果酸脱氢酶 D.琥珀酸脱氢酶 17.NADPH能为合成代谢提供还原势能，NADPH的氢主要来自（） A.糖酵解 B.三羧酸循环 C.磷酸戊糖途径 D.糖异生 18.经长期进化后，高等真核细胞的生物化学反应被精确地局限在细胞特定部位，EMP途径在（）中进行 A.溶酶体 B.细胞质 C.线粒体基质 D.核基质 28.遗传密码的简并性是指（） A.密码子之间无标点间隔 B.一个氨基酸可以有一个以上的密码子编码 C.一个密码子只代表一个氨基酸 D.密码子的碱基可以变更 30.以下对别构酶的论述哪个是错误的（） A.别构酶一般都是寡聚酶 B.别构酶的活性中心和调节中心分别位于催化亚基和调节亚基上，或者位于同一亚基空间上相距较远的部位 C.别构酶通过构象变化来实现其功能的改变 D.在生理情况下效应剂和别构酶的结合时共价结合 三、是非判断题（正确的请用“T”表示，错误的用“F”表示） 1.在溶解温度时，双链DNA分子会变为无序的单链分子 2.提高盐浓度可使DNA分子的熔点Tm升高 3.血红蛋白由四个亚基组成，而肌红蛋白只有一条肽链，因此，在一定氧分压条件下，血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强 4.自然界中的单糖绝大多数为D型糖，由于果糖是左旋的，因此它属于L型糖 5.蛋白质的α-螺旋结构通过侧链之间形成氢键而稳定 6.温和碱性条件下，RNA容易水解，DNA则稳定 7.蛋白质是两性电解质，它的酸碱性质主要取决于肽链上可解离的R基团 8.一般来说，真核生物的mRNA与它的DNA模板是等长的 9.黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤，也可以是次黄嘌呤 10.内含子是编码基因内部一些不能翻译成蛋白质的间隔序列，外显子是指能被翻译成蛋白质的序列。迄今为止还没有发现内含子有任何生物学功能 11.原核生物的每一个染色体只有一个复制起点，而真核生物的一个染色体就有许多复制起点 12.糖原、淀粉和纤维素分子中均有一个还原性末端，故均有还原性
生化大题汇总 ※参与DNA复制的主要酶和蛋白因子有哪些？各有什么功能？ 拓扑异构酶：松解DNA的超螺旋。 解链酶：打开DNA的双链。 引物酶：在DNA复制起始处以DNA为模板，催化合成互补的RNA短片断。 DNA聚合酶：以DNA为模板、dNTP为原料，合成互补的DNA新链。 连接酶：连接DNA片断。 DNA结合蛋白：结合在打开的DNA单链上，稳定单链。 ※DNA复制有何主要特点？ 半保留复制，半不连续合成、需RNA引物，以dNTP（A，T，C，G）为原料，新链合成方向总是5’->3’，依赖DNA的DNA聚合酶（DDDP） ※DNA复制的高保真性主要取决于哪些因素？ DNA复制的高保真性取决于三个方面：1、DNA双链碱基的严格配对与DNA聚合酶对配对碱基的严格选择性；2、5’->3’外切核酸酶的即时校读作用；3、对DNA分子中的错误或损伤的修复机制。 ※真核生物DNA复制在何处进行？如何进行？ 在细胞核内。 复制分为以下几个阶段：1、起始阶段（DNA解旋解链及引物合成）：DNa拓扑异构酶、解链酶分别使DNA 解旋、解链，形成复制叉，在起始点由引物酶催化合成RNA引物；2、DNA合成阶段：以DNA的两条链分别作为模板，dNTP为原料按碱基互补原则（A-T，C-G）在RNa引物引导下，由DNA聚合酶催化合成DNA新链（分前导链和随从链）；3、终止阶段：水解RNa引物（polI），填补空缺（polI），连接DNA片断（连接酶）。 ※何谓反转录？在哪些情况下发生反转录？写出主要酶促反应过程。 以RNA为模板在反转录酶的作用下合成DNA的过程叫做反转录。 反转录可发生于：1、在RNA病毒感染宿主细胞甚至致癌过程中；2、在基因工程中，以mRNA为模板合成cDNA。 病毒RNA（反转录酶dNTP）－>RNA-DNA杂化链（RNA酶活性）－>cDNA单链（DNA聚合酶活性）－>cDNA 双链 ※概述DNA的生物合成。 DNA的生物合成包括DNA半保留复制，DNA损伤后的修复合成和反转录 DNA复制是以DNa的两条链分别作为模板，以dNTP为原料，在DNA聚合酶作用下按照碱基配对原则合成互补新链，这样形成的两个子代DNA分子与原来DNa分子完全相同，一条链来自亲代，另一条链是新合成的，故称为半保留复制。 在某些梨花、生物学因素作用下DNa链发生碱基突变、缺失、交联或链的断裂等损伤后，可进行修复。修复方式有光修复、切除修复、重组修复与SOS修复等。切除修复：1、核酸内切酶从损伤处的5’端切开，出现正常的3’端；2、核酸外切酶水解已打开的损伤DNA段；3DNA聚合酶以互补的DNA链为模板，dNTP为原料，5’->3’方向合成新的DNa片段；4、连接酶连接形成完整的DNA链。 以RNA为模板在反转录酶的作用下合成DNA的过程叫做反转录。反转录在病毒致癌过程中起重要作用；在基因工程中可用于以mRNA为模板合成cDNA的实验。 ※催化磷酸二酯键形成的酶有哪些？比较各自不同特点。 有DNA聚合酶、RNA聚合酶、引物酶、反转录酶、连接酶和拓扑异构酶。
厦门大学2002年生物化学 招生专业：生物化学与分子生物学、微生物学、细胞生物学 一、选择题（选择出每题的唯一正确答案，每题1分，共15分） 1、酯酶所催化的水解反应的专一性属于（） A、顺饭异构专一性 B、旋光异构专一性 C、族专一性 D、键专一性 E、绝对专一性 2、决定大肠杆菌RNA聚合酶转录活性的组分是（） A、α亚基 B、β亚基 C、β’亚基 D、δ亚基 3、血性物质是一类（） A、磷蛋白 B、脂蛋白 C、糖蛋白 D、核蛋白 E、色蛋白 4、调节血糖的激素是（） A、加压素 B、胃泌素 C、胃上腺素 D、甲状旁腺素 5、信号肽位于（） A、内质网的腔内侧面 B、高尔基体的腔内侧面 C、内质网的细胞质侧面D/核糖体的表面 6、2，4—二硝基苯酚对生物氧化的作用是是属于何类试剂？ A、解偶联剂 B、离子载体抑制剂 C、激活剂 D、氧化磷酸化抑制剂 7、生物体内经从无到有途径合成的嘧啶核苷酸，其嘧啶环3位的氮是来自于 A、NH3 B.Gly C.Asp D.Gln 8、在pH6.0时，一个氨基酸混合物（Gly, Gln,His,Ser）,经纸电泳，那种氨基酸移动最快？ A、Gly B、Gln C、His D、Ser
9、糖类物质在动物和人体内主要以哪一种形式运转？ A、葡萄糖 B、半乳糖 C、果糖 D、蔗糖 10、在下列哪种生物合成途径中需要NADPH？ A、糖原的生物合成 B、酮体的生物合成 C、胆固醇的生物合成 D、磷脂的生物合成 11、一个分子量为70000的蛋白质分子由两个相同的完全由α—螺旋组成的亚基所构成，每个亚基的二级结构长度是：（氨基酸残基德平均分子量为110）A．50nm B、47.7 nm C、42.5 nm D、38.6 nm 12、丙酮酸羧化酶的辅酶为： A、TPP B、生物素 C、四氢叶酸 D、DND* 13、血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于： A、CO2分压增加 B、CO2分压减少 C、O2分压增加 D、O2分压减少 14、一个RNA片段（GICmDUA）中含有稀有碱基： A、五个 B、四个 C、三个 D、两个 15、在原核生物操纵子中，操纵基因是下了哪种物质的结合部位？ A、RNA聚合酶 B、Camp_CAP复合物 C、阻遏蛋白 D、ρ—因子 二、判断题（每题一分） 1、在原核细胞和真核细胞中，染色体DNA都与组蛋白形成复合物。 2、丙酮酸脱氢酶系与α—酮戊二酸脱氢酶酶系的催化剂机制相似。 3、吞噬作用是一个需能的主动转运过程。 4、核DNA编码的线粒体和叶绿体膜蛋白是在泡浆中游离状态的核糖体上合成的。
一、什么是酶？酶与一般催化剂有何区别？ 酶是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质。 它与一般催化剂的区别表现在： （1）酶对底物具有极高的催化效率。较一般催化剂高107~1013倍。（2）酶对底物具有高度的特异性。一般可分为绝对特异性(即一种酶只能催化一种底物，进行一种反应)、相对特异性(即一种酶可作用于一类化合物或一种化学键)和立体异构特异性。 （3）酶的活性与酶量具有可调节性。包括对酶的生成与降解量的调节，酶催化效力的调节。体内许多酶的活性和酶量受体内代谢物或激素的调节。 （4）酶具有不稳定性。酶的化学本质主要是蛋白质，在某些理化因素（如高温、强酸、强碱等）的作用下，酶会发生变性而失去催化活性。因此，酶促反应往往都是在常温、常压和接近中性的条件下进行的。 二、什么是酶原？某些酶以酶原形式存在具有什么生物学意义？ 有些酶在细胞内合成或初分泌、或在其发挥催化功能前处于无活性状态，这种无活性的酶前体称作酶原。 1、避免细胞产生的酶对自身消化，并使酶在特定的部位和环境中发挥作用，保证体内代谢正常进行。 2、有的酶原可以视为储存形式。在需要时激活，发挥其催化作用。
例1消化道蛋白酶以酶原形式分泌可避免胰腺的自身消化和细胞外基质蛋白遭受蛋白酶的水解破坏，同时还能保证酶在特定环境和部位发挥其催化作用。 例2 生理情况下，血管内的凝血因子以酶原形式存在，不发生血液凝固，可保证血流畅通。一旦血管破损，一系列凝血因子被激活，凝血酶原被激活生成凝血酶，后者催化纤维蛋白原转变成纤维蛋白，产生血凝块以阻止大量失血，对机体起保护作用。 三、简述酮体代谢的特点和生理意义。 酮体代谢特点：肝内生成，肝外氧化利用。 酮体代谢的生理意义： （1）分子小，易溶于睡，便于在血中运输。脂肪酰辅酶A进入线粒体内膜，需要载体肉毒碱转运，脂肪酸在血中转运需要与血浆清蛋白结合，而酮体通过线粒体内膜以及在续重转运均不需要载体。（2）易通过血脑屏障及肌肉等的毛细血管壁，因而酮体易于利用可以把酮体看做脂肪酸在肝脏加工生成的半成品 （3）节省葡萄糖供脑和红细胞利用。肝外组织利用酮体氧化功能减少了对葡萄糖的需求，以保证脑组织和红细胞的葡萄糖供应。在饥饿状态下也利用酮体功能，饥饿5-6周，酮体功能可多达70%。（4）肌肉组织利用酮体时可抑制肌肉蛋白质的分解，减少蛋白质的消耗。
厦门大学2004年招收攻读硕士学位研究生入学考试试题年招收攻读硕士学位研究生入学考试试题 招生方向招生方向：：水生生物学水生生物学、、生化与分子生物学生化与分子生物学 考试科目考试科目：：生物化学477477 研究方向研究方向：： 一、填空填空 （每空1分，共30分） 1、纤维素分子是由 组成，它们之间通过 键相连。 2、真核生物的RNA 聚合酶III 转录的是 。 3、糖原合成中，葡萄糖单体的活性形式是 ，蛋白质的生物合成中，氨基酸的活性形式是形成 。 4、糖肽键的主要连接键有 和 两种。 5、卵磷脂是由 、 、 和 组成。 6、snRNA 主要参与 的加工成熟，真核生物tRNA 的加工，成熟过程包括 、 、和 等。 7、用碱水解核酸，产物主要是 和混合物。 8、DEAE-纤维素是一种 交换剂，CM-纤维素是一种 交换剂。 9、蛋白质分子中的生色氨基酸是指 、 和 三种。 10、糖酵解和糖异生作用是相反的两个过程，各自的调空酶协调作用，防止了 是形成。 11、酶活力是指 ，一般用 来表示。 12、DNA 测序的解决得益于哪两种技术的应用： 和 。 13、羽田杀菌素是 的结构类似物，可以强烈地一直腺苷酸琥珀酸合成酶的活性，从而抑制了腺苷酸的合成。
14、常用3.613-螺旋（n=3）来表示蛋白质二级结构中的α-螺旋，其中的3.6指，13表示。 15、蛋白质的生物合成中，每增加一个氨基酸残基要消耗个高能键。 选择题 （每题1分，共20分） 二、选择题 1、环状结构的己醛其立体异构体的数目有几个？ A、4 B、16 C、32 D、64 2、真核生物mRNA的帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基联接，联接方式是 A2’-5 B3’-5’C3’-3’ D5’-5’ 3、下列哪种糖不能形成糖砂？ A、葡萄糖 B、乳糖 C、蔗糖 D、麦芽糖 4、下列物质中，不是高能化合物的是： A、琥珀酰CoA B、1，3-二磷酸甘油酸 C、SAM D1，6-二磷酸果酸 5、下列化合物中哪个不属于脂类化合物？ A、甘油三丁酸酯 B、胆固醇硬脂酸酯 C、羊毛蜡 D、石蜡 6、每分子血红蛋白所含铁离子数为几个？ A、1 B、2 C、4 D、8 7、煤气中毒主要是因为煤气中的一氧化碳的什么作用？ A、抑制琉基酶，使失活琉基酶 B、抑制胆碱酯酶，只乙酰胆碱堆积，引起神经中毒 C、抑制其它酶的作用，导致代谢紊乱
1、论述DNA的结构与功能的关系。 ①DNA分子中各脱氧核苷酸的排列顺序。核苷酸之间以磷酸二酯键连接形成多核苷酸链，即核酸。不同的脱氧核苷酸的排列顺序决定不同的遗传信息。 ②DNA的二级结构：DNA双螺旋结构是核酸的二级结构。双螺旋的骨架由糖和磷酸基构成，两股链之间的碱基互补配对，是遗传信息传递者，DNA半保留复制的基础，结构要点： a.DNA是一反向平行的互补双链结构亲水的脱氧核糖基和磷酸基骨架位于双链的外侧，而碱基位于内侧，碱基之间以氢键相结合，其中，腺嘌呤始终与胸腺嘧啶配对，形成两个氢键，鸟嘌呤始终与胞嘧啶配对，形成三个氢键。确保了DNA分子的稳定性。 b.DNA是右手螺旋结构螺旋直径为2nm。每旋转一周包含了10个碱基，每个碱基的旋转角度为36度。螺距为3.4nm，每个碱基平面之间的距离为0.34nm。纵向碱基堆积力进一步稳定了DNA双链结构。DNA 双螺旋结构稳定的维系横向靠互补碱基的氢键维系，纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持，尤以后者为重要。 ③DNA的三级结构 三级结构是在双螺旋基础上进一步扭曲形成超螺旋，使体积压缩。在真核生物细胞核内，DNA三级结构与一组组蛋白共同组成核小体。在核小体的基础上，DNA链经反复折叠形成染色体。使得在狭小的细胞空间内存储巨大的遗传信息成为可能。 ④DNA的功能：DNA的基本功能就是作为生物遗传信息复制的模板和基因转录的模板，它是生命遗传繁殖的物质基础，也是个体生命活动的基础。DNA中的核糖和磷酸构成的分子 骨架是没有差别的，不同区段的 DNA分子只是碱基的排列顺序不 同。 2、什么是基因表达? 有何基本特征? 试述基因表达调控对生物体的重要 性。 ①生物基因组中结构基因所携带的 遗传信息经过转录及翻译，产生具 有生物学功能的产物（蛋白质、 RNA），这一过程称为基因表达。 ②基本特征（一）时间特异性：按 功能需要，某一特定基因的表达严 格按特定的时间顺序发生，称之为 基因表达的时间特异性(temporal specificity)。多细胞生物基因表达 的时间特异性又称阶段特异性 (stage specificity)。 （二）空间特异性 多细胞生物个体在生长发育过程 中，同一基因产物在不同组织器官 的表达水平不同，称为基因表达的 空间特异性(spatial specificity)。基因 表达伴随时间顺序所表现出的空间 分布差异，是由细胞在器官的分布 决定的，故空间特异性又称细胞或 组织特异性(cell or tissue specificity)。 基因表达调控的生物学意义1、适 应环境、维持生长和增殖2、维持 细胞分化与个体发育 3. 比较真核和原核生物基因表达 和基因表达调控的相似和不同之 处。 （1）原核生物和真核生物基因表达 调控的共同点：a 结构基因均有调 控序列； b 表达过程都具有复杂 性，表现为多环节；c 表达的时空 性，表现为不同发育阶段和不同组 织器官上的表达的复杂性； （2）与原核生物比较，真核生物基 因表达调控具有自己的特点：a 真 核生物基因表达调控过程更复杂； b 基因及基因组的结构特点不同， 如真核生物基因具有内含子结构 等；c 转录与翻译的间断性，原核 生物转录与翻译同时进行，而真核 生物该两过程发生在不同区域，具 有间断性；d 转录后加工过程；e 正负调控机制；f RNA聚合酶种类 多。 4. 什么叫衰减子？以色氨酸操纵 子为例说明衰减子的调控机制。 ⑴原核生物基因转录不依赖ρ （rho）因子的终止结构------茎环结 构紧接约6个U，使RNA聚合酶脱 落，转录终止，称为衰减子 （attenuator）。 ⑵细菌E．Coli具备合成色氨酸所 需要的酶，这些酶的编码基因串联 成一个操纵子------trp operon , trp operon是一个阻遏型操纵子，在第 一个结构基因与启动序列P之间有 一个衰减子区域(attenuator region)。 当细菌内色氨酸浓度很高时，trp operon表达关闭。是因为trp operon 的序列1中有两个色氨酸密码子， 色氨酸浓度高时，核蛋白体很快通 过编码序列1，并封闭序列2，这种 与转录偶联进行的翻译过程导致序 列3、4形成一个不依赖ρ（rho） 因子的终止结构------衰减子 attenuator[茎环结构紧接约6个U]， 使RNA聚合酶脱落，转录终止。而 细菌内色氨酸浓度缺乏时，trp operon转录，转录速率受转录衰减 机制调节。色氨酸缺乏，没有色氨 酸－tRNA 供给，核蛋白体翻译停 止在序列1中的两个色氨酸密码子 前，序列2与序列3形成发夹结构， 阻止了3、4形成衰减结构，RNA 转录继续进行。实质上是转录与一 个前导肽翻译过程的偶联，是原核 特有的一种基因调控机制。 5、试列举几种研究基因表达调控的 方法,并简述其原理。 目前常用的方法有：（1）、电泳迁移 率实验（EMSA）又称凝胶阻滞试 验，是体外分析DNA（或RNA） 结合蛋白和特异DNA （或RNA）