腺苷脱氨酶
定义：催化腺苷水解脱氨成肌苷的氨基水解酶，是嘌呤代谢的必需酶。
腺苷脱氨酶作用机理
腺苷脱氨酶（EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA）是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。
人体分布情况
ADA广泛分布于人体各组织中，以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。血液中ADA主要存在于红细胞
腺苷脱氨酶作用图
、粒细胞和淋巴细胞，其活性约为血清的40～70倍，T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。人ADA基因位于第20对染色体上，并呈现出遗传多态性现象，其同工酶有3种，分别为ADA1，ADA1＋CP和ADA2。ADA1分子量为35kD，为一种单链蛋白质；ADA1＋CP分子量为280kD，实际上是由2条单键的ADA1分子和人个不具酶活力的200kD结合蛋白结合而成；ADA2分子量为100kD。3种同工酶具有不同的动力学性质：ADA1和ADA1＋CP最适PH为5.5～8.0，对腺苷的Km值为
50umol/L。对2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比为0.8，两者均对红-9-（2-羟基-3-壬烷基）腺嘌呤[erythro-9-
（2-hydroxyl-3-nonyl）adenine（EHNA）]抑制作用敏感。
ADA2相对于前两种同工酶具有较低的最适PH、较高的催化腺苷Km值（2000umol/L）以及较低的2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比值（0.2），对EHNA抑制作用不敏感。ADA同工酶在各类组织和细胞中的分布不同，ADA1在脾脏、红细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞中占优势，ADA1＋CP在肝脏、肺、胰、肾组织和骨骼中占优势，ADA2只存在于单核细胞，目前在其他组织细胞中尚未检出。
临床意义
腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。
肝脏疾病：
ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
用于判断急性肝损伤及残留病变
急性肝炎（AH）时ALT几乎明显升高，ADA仅轻、中度升高，且阳性率明显低于AST和ALT。因此ADA在诊断急性肝损伤时有一定价值，但并不优于ALT。重症肝炎发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而ADA明显升高。AH后期，ADA长高率高于
ALT，其恢复正常时间也较后者为迟，并与组织学恢复一致。因此，ADA较ALT、GGT更能反映急性肝损伤，并有助于探测AH的残留病变和肝脏病进展。ALT恢复正常而ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。
协助诊断慢性肝病
在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。慢性肝炎（CH）、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高。其阳性率达85%～90%，而肝硬化时ALT多正常或轻度升高，故ADA活性测定可作为慢性肝病的筛选指标。失代偿期肝硬化ADA活性明显高于代偿期肝硬化，因而可判断慢性肝病的程度。另外，慢性活动性肝炎（CAH）ADA活性明显高于慢性迁延性肝炎（CPH），故可用于二者的鉴别诊断。
有助于肝纤维的诊断
肝硬化患者血清ADA活性明显高于急性黄疸型肝炎、CPH、CAH、PHC、阻塞性黄疸及对照组，CAH者也明显高于CPH者及对照组，表明ADA活性差异关键在于肝纤维化程度，而与肝细胞损害关系不大。蔡卫民等用肝硬化的肝组织切片标本，作肝纤维化程度的分级评分观察，发现积分均值≤1.5者ADA 阳性率（38.46%）显著低于＞1.5者（86.96%），证实ADA
活性与肝纤维化程度有关。随肝纤维化程度增加，ADA活性逐渐增加，即肝硬化＞CAH＞CPH。
有助于黄疸的鉴别:有人对28例肝细胞性黄疸和19例阻塞性黄疸患者ADA和GGT活性进行比较，发现ADA鉴别意义最大，而其他酶在两种黄疸之间无明显差异（P＞0.05）。另有文献报道，阻塞性黄疸血清ADA活性及阳性率（16.7%），均明显低于肝细胞性黄疸（57.3%）及肝硬化伴黄疸者（80.9%），且重叠较小，尤其与GGT、ALP和5’-NT同时测定，如三项指标均增高，而ADA正常则更支持阻塞性黄疸的诊断。
其他:阿米巴肝脓肿（ALA）ADA活性明显减少。
重症联合免疫缺陷病（SCID）:1972年Giblett等首先报道ADA活性缺乏与SCID有关，这一发现曾引起临床和基础免疫学的很大重视。ADA作为核酸代谢重要的酶类，其缺乏可导致核酸代谢障碍，影响到胸腺的发育，从而引起免疫功能缺陷。综合国内外资料表明，SCID的传递者细胞内ADA活性显著低于正常对照，SCID患者该酶活性更低，甚至不及正常人的10%，患儿羊水细胞内ADA活性可能低至正常胎儿的1%以下。因此，胎儿羊水中纤维细胞ADA活性能有效地对SCID婴儿进行产前诊断。
血液病
Valentine等报道慢性溶血患者红细胞ADA活性显著升高，为正常人的45～70倍。由于腺苷的过度消耗，使ATP生成减少，导致红细胞提前破坏，而出现贫血症状。先天性再生障碍性贫血患者红细胞ADA明显高于正常对照，其酶活性高于溶贫及获得性再障。因此，红细胞内ADA活性可能成为诊断先天性再障的唯一指标。
肿瘤
肿瘤患者血清及组织中ADA活性均升高，但前者阳性率仅为15%～40%。肺癌和结肠癌组织中ADA活性均明显高于正常肺和结肠组织。
脑膜炎的鉴别诊断:1973年Piras首先提出结核性脑膜炎患者CSF-ADA明显升高，并用于结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎及病毒性脑膜炎的鉴别。Coovadia和Ribera等报道结脑患者CSF-ADA增高的阳性率为73%～99.4%。王北宁等报告64例结脑和非结脑CSF-ADA值分别为18.24±2.36U/L和
1.43±0.21U/L，以＞1.85U/L(非结脑X＋2SD)为结脑的诊断标准，其阳性率为90.6%，非结脑则全部阴性。还发现结脑发病初1个月内明显升高，治疗3个月后则明显下降，治愈者可恢复正常。罗蔚锋等发现结脑患者CSF-ADA活性显著高于正常对照和病脑组。以8U/L为阳性界限值，病脑组和对照组均100%阴性，结脑组阳性率91%，特异性为100%，其含量变化与结脑患者抗痨治疗及病程发展有一定关系。因此，
CSF-ADA测定可作为早期结脑诊断、观察病情和疗效的常规检查项目。
Mishra等报道结核性脑膜炎组CSF-ADA活性明显高于细菌性脑膜炎组、脑炎组和对照组，以ADA活性＞5U/L为临界值，其对结核性脑膜炎的诊断灵敏度和特异分别为89%和92%。结核性脑膜炎CSF-ADA水平与CSF细胞数、淋巴细胞百分数、蛋白浓度显著相关。认为CSF-ADA活性可作为儿童结核性脑膜炎早期鉴别的简便快速和有用的诊断指标。
浆膜腔积液的鉴别诊断:鉴别结核性和非结核性胸腹腔
积液是临床病因诊断的一个常见难题，1978年Piras等报告结核性胸水中ADA活性明显高于其他原因所致的胸水，提出胸水ADA活性可用于结核性和癌性胸膜炎的鉴别诊断。费晓峰等对72例不同胸水ADA活性测定，以40U/L为界，结核性均超过此值，恶性者97.9%低于此值，小于35U/L者占93.2%，故作者认为胸水ADA大于40U/L提示结核性，小于35U/L提示恶性或非结核性。
ADA测试方法演变及介绍
近十几年来，随着对ADA的深入研究，检测方法也不断发展。目前已发展了四代。
第一代ADA测试:
ADA将腺苷 (Adenosine) 脱氨产生次黄苷 (Inosine)
和氨 (NH3)。一个ADA活性单位在测试特定条件下每分钟脱
氨1μmole腺苷成为次黄苷。通过动态测量腺苷265nm处吸
光度下降的速度，可以测算ADA的活性大小。Kaplan法 (1955) 由此建立。由于高底物浓度造成吸光度过高，该法仅适用于
腺苷浓度低于40μM。如此低的底物浓度达不到底物饱和要求，造成ADA活性检测失真。因此，该法不适用于临床应用。
第二代ADA测试:
原理为腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤
核苷和氨。然后用Berthelot显色反应(1859)测定反应过程
中产生氨的量，从而计算血清ADA活性单位。所需试剂易配制，仪器简单，但灵敏度低，易受外源性NH3影响，空白过高，不能直接测定红细胞ADA活性。
同样原因，ADA偶联谷氨酸脱氢酶(Glutamate Dehydrogenase, GLDH)反应:
通过测量340nm处NADPH吸光度下降的速度来测算ADA
活性。该法也因血清含氨干扰，以及测试系统中过高NADPH
造成非特异性氧化而无成算。
第三代ADA测试:
Kalckar氏应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶 (Purine nucleoside phosphorylase，PNP) 和黄嘌呤氧化酶
(Xanthine Oxidase, XOD) 反应连续监测法。通过测量293nm 处尿酸盐吸光度上升的速度来测算ADA活性。
但是，293nm时血清吸光度太高，造成临床应用不便。
第四代ADA测试:
通过ADA偶联PNP，XOD，过氧化氢酶(Catalase)和醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase)，借助过氧化氢(H2O2)反应测量334nm处NADPH吸光度上升的速率来测算ADA活性。该法克服了以往ADA测试的困难，然而，鉴于试剂成本高，阻碍实际临床使用。
最新对第四代测试方法的改进为偶联PNP，XOD和过氧化物酶(Peroxidase, POD)反应。ADA酶解腺苷(Adenosine)脱氨产生次黄苷(Inosine);再通过PNP的作用，生成次黄嘌呤(Hypoxanthine);后者在XOD氧化下生成尿酸(Uric Acid)和过氧化氢(H2O2);最后在POD的作用下H2O2再与
N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3-methylaniline (EHSPT)、4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine, 4-AA)反应(Trinder氏反应)，生成紫红色的有色醌(Quinone dye)。通过动态测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。从反应原理可知NH4+对该法无影响。其原理反应方程式如下：
反应具有测定精密度高，抗干扰能力强，适合自动化快速测定的特点，为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。
腺苷脱氨酶（ADA）检测试剂盒性能指标
检测方法：XOD-PAP法（第四代改良法），不与其它核苷反应，无NH4+影响，灵敏度高。
剂型：液体双试剂，直接使用，避免复溶引起瓶间差。
线性范围：0～200U/L，γ2≥0.99
准确度：不准确度正常水平≤15%，异常水平≤10%。
稳定性：密闭避光贮存2～8℃可稳定12个月，开瓶上机2～8℃避光稳定30天。
抗干扰能力：标本中胆红素≤342umol/L，血红蛋白
≤200mg/dl,甘油三酯≤8.47mmol/L,抗坏血酸≤4mg/dl 及NH4+对本试剂测定无影响。
适用性：适用于各种半/全自动生化分析仪。
参考范围：4～22U/L（37℃），建议各实验室建立自己的参考值范围
腺苷脱氨酶测定试剂盒（过氧化物酶法） 适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性。 1.1 规格 试剂盒是由试剂1和试剂2组成的液体双试剂，校准品和质控品均为冻干粉。规格及装量见表1。 表1 规格及装 量
1.2 主要组成成分试剂1主要组分: 试剂2主要组分： 校准品主要组分： 质控品主要组分：
2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液；校准品：白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体；质控品：白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体。外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在546nm（540nm-550nm）处测定试剂空白吸光度，应≤0.3； 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.1。 2.4 分析灵敏度 测试100U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0065 。 2.5 准确度 使用国际参考品（BCR647）对试剂（盒）进行测试，相对偏差应不大于±15%。 2.6 重复性 变异系数（CV）应不超过10％。 2.7 线性 2.7.1在(0,150]U/L区间内，线性回归的相关系数r应不低于0.990；
2.7.2（0,40）U/L区间内绝对偏差不超过±6U/L；[40,150]U/L区间内相对偏差不超过±15%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定，相对极差＜15％。 2.9校准品批内瓶间差 变异系数（CV）应≤10%。 2.10 质控品批内瓶间差 变异系数（CV）应≤10%。 2.11溯源性 根据GB/T 21415-2008的规定，本试剂盒内校准品溯源至国际参考物质BCR647。 2.12质控品赋值有效性 质控品测值应在靶值范围内。 2.13 稳定性 2.1 3.1效期稳定性 原包装的试剂盒在2℃～8℃条件下贮存达到18个月后的试剂进行检测，应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.12之规定。 2.1 3.2复溶稳定性 a)校准品复溶后在2℃～8℃密闭避光保存，稳定期为7天，稳定期满后1天内，性能应符合2.5之规定。 b)质控品复溶后在2℃～8℃密闭避光保存，稳定期为7天，稳定期满后1天内，性能应符合2.12之规定。
腺苷脱氨酶ADA测定 1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2原理 ADA 腺苷+H2O 肌苷+NH3 PNP 肌苷+Pi 次黄嘌呤+1-磷酸核糖 XOD 次黄嘌呤+2 H2O+2O2尿酸+2 H2O2 POD H2O2 +4-AAP+EHSPT 4H2O+苯醌类 3标本要求 3.1使用新鲜血清,不使用血浆. 3.2在采集血液后2h分离血清.
3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次. 3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定. 4试剂 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ADA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1试剂组成 试剂1 60 ml,试剂主要成分如下: Tris—HCL缓冲液（PH8.0）50.0mmol/L XO 0.2u/ml 4-AAP 2.0mmol/L POD 0.6u/ml PNP 0.1u/ml NaN3 0.2g/L 试剂2 60 ml,试剂主要成分如下: Tris—HCL缓冲液（PH4.0） 50.0mmol/L EHSPT 2.0 mmol/L 腺苷 10.0mmol/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。试剂1 与试剂2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20天。 4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 4.2 校准品： 4.2.1采用以检测用水为空白的方式进行校准。 4.2.2校准及校准频次的要求：正常情况下，应每周至少对测定进行一次校准。当发生下列情况时（如：使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等），应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。 5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
★肺炎 pneumonia ★肺血栓栓塞症 pulmonary thromboembolism ★PTE ★★严重急性呼吸综合征 severe acute respiratory symptom ★SARS ★★慢性阻塞性肺疾病 chronic obstructive pulmonary diseases ★★COPD ★长期家庭氧疗 long-term domiciliary oxygen therapy ★LTOT ★支气管哮喘 bronchial asthma BA 寂静胸沉默胸 silent chest ★支气管激发试验 bronchial provocation test BPT ★支气管舒张试验bronchodilatation test BDT 特发性间质性肺炎 idiopathic interstitial pneumonia IIP ★肺出血-肾炎综合征Goodpasture syndrome 胸腔积液 pleural effussion ★原发性支气管肺癌 primary bronchogenic carcinoma 肺癌 lung cancer ★类癌综合征 carcinoid syndrome ★肺上沟癌 pancoast cancer ★睡眠呼吸暂停综合征 sleep apnea syndrome SAS ★★呼吸衰竭respiratory failure RF 通气/血流比例失调 ventilation-perfusion mismatch ★★肺性脑病 pulmonary encephalopathy 动脉血气分析 arterial blood gas analysis 科赫现象 Koch phenomenon 霍纳综合征 Horner syndrome 胸膜反应 pleura reaction 比奥呼吸 Biot's respiration 无创正压通气 non-invasive positive pressure ventilator NIPPV 耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌methicillin resistant staphylococcus aureus MRSA 肺脓肿 lung abscess 支气管扩张 bronchiectasis 肺结核 pulmonary tuberculosis ★TB ★全程督导短程化学治疗 directly observed treatment short-course DOTS 纯蛋白衍化物 purified protein derivative PPD 异烟肼 Isoniazid ★INH H 利福平 Rifampicin ★RFR R 吡嗪酰胺 Pyrazinamide ★PZA Z
腺苷脱氨酶（ADA ）测定试剂盒 （酶比色法） 使用说明书 【产品用途】 本试剂用于测定血清、胸腹水、脑脊液中的腺苷脱氨酶活性。 【临床意义】 肝脏疾病时，本酶活性往往升高，有助于黄疸的鉴别诊断。在阻塞性黄疸时，此酶活性升高很少，而在肝实质性损伤时，此酶和转氨酶往往同时升高，特别在慢性活动性肝炎和肝硬变时，转氨酶阳性率较低，增高幅度也不明显，而ADA 活性的阳性率可达90%左右，增高程度也较明显。同时ADA 检测对白血病、伤寒、出血热也有辅助诊断作用。 测定胸腹水及脑脊液标本中的ADA 活性，有鉴别诊断价值。结核性胸腹水中ADA 活力显著高于癌症及炎症胸腹水中ADA 活力，对早期诊断结核性胸、腹膜炎有较高的敏感性和一定的特异性。此外，脑脊液ADA 检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎ADA 活性升高，病毒性脑膜炎不升高。 【适用范围】 液体双试剂，即开即用，自动化分析仪用。 【产品规格】 R 1 50ml ×2 R 2 50ml ×1 【试剂成份】 R 1 Tris-HCl pH8.0 50mM 4-AA 2mM PNP 0.1kU/mL XOD 0.2kU/mL POD 0.6kU/mL 稳定剂 R 2 Tris-HCl ph4.0 50mM 腺苷 10mM EHSPT 2mM 【检测原理】 腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成次黄苷，次黄苷在PNP 作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD ）作用下转化为尿酸和过氧化氢（H 2O 2），H 2O 2与EHSPT 和4-氨基安替比林（4-AA ）反应生成醌色物，显色强度与ADA 活性成正比。 腺苷?? ?→?ADA 次黄苷 + NH 3 次黄苷 + Pi ??→?PNP 次黄嘌呤 + 核酸-1-磷酸 次黄嘌呤 + 2H 2O + 2O 2???→?XOD 尿酸+ 2H 2O 2 2H 2O 2 + 4-AA + EHSPT ??→?POD 醌亚氨染料+ H 20 【样本采集】 新鲜非溶血血清或血浆，ADA 在4℃时可稳定1周。 【测定方法】 1.试剂1、2在使用前恢复到37℃。 2.180μl R 1与5μl 血清（浆）样品混合，在37℃孵育3min-5min 。 3.加入90μl R 2孵育3min ，在540nm 或546nm 处测2分钟，计算每分钟平均光度变化△A/min 。 【参考范围】 血 清：4~24U/L 胸腹水：0~35 U/L 脑脊液：0~6 U/L 各实验室应建立自己的参考范围; 【产品性能】 1.试剂空白吸光度：A 340nm(1cm) ≥0.800 2.本试剂线性范围：0-150 U/L 3.精密度：批内CV ≤5% 批间相对极差CV ≤8% 4.准确度：相对偏差≤±10% 【试剂保存】 R 1、R 2为液体试剂，直接使用。2-8℃避光稳定1年。 【注意事项】 1.本方法特异测定ADA ，其它核苷与本方法不发生反应。 2.血清胆红素达20mg/dL ，血红蛋白100mg/dL ，甘油750mg/dL ，抗坏血酸4mg/dL 对实验无干扰。 【单位意义】 在37℃条件下，每分钟用于产生1 umol 次黄苷的量定义为一个单位的ADA 。 【生产许可证】 【注册标准号】 【注册证号】
一、血清腺苷脱氨酶（ADA）临床意义： 血清ADA活性增高见于： ①肝脏疾病：急性黄疸性肝炎，肝细胞出现损伤，在黄疸尚未出现前，可见增高，因ADA分子量较ALT小，当肝细胞轻度受损时ADA比ALT先释入血内，慢性肝炎活动期，慢性迁延性肝炎升高明显；肝硬化，原发性肝癌时，ADA活性也升高。 ②肿瘤引起的阻塞性黄疸，前列腺癌和膀胱癌，网状细胞瘤，淋巴瘤，溶血性贫血，风湿热，伤寒，痛风，重症地中海贫血，骨髓性白血病，结核，自身免疫性疾病，传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。 ③结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清中ADA活性二者无明显差别，故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。 ④结核性脑膜炎ADA显著增高，而病毒性脑膜炎则不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高，所以脑脊液ADA检测可以作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。 血清ADA活性降低见于：见于重度免疫缺陷症状。 二、血清单胺氧化酶（MAO）临床意义 血清中MAO和结缔组织中的MAO性质相似，能促进结缔组织的成熟，在胶原形成过程中，参与胶原成熟的最后阶段架桥形成，使胶原
和弹性硬蛋白结合。临床上测定血清MAO主要用于诊断肝硬变。肝硬变时，血清MAO活性常明显增高，阳性率可高达80%以上。 三、前白蛋白(PA) 临床意义 PA 降低： 1.诊断和监测营养不良：血清PA在无感染情况下，是儿童营养不良的灵敏指标，在蛋白质-热卡不足型营养不良（PCM）中随着营养状况的改善，多数病人血清PA水平显著升高而血清TP、Alb未见明显升高。 2.诊断肝病：肝脏疾病时血清PA变化较Alb早，有30％肝病患者血清Alb正常而PA降低。各型肝炎患者（病毒性肝炎、乙醇性肝炎和药物性肝炎）血清PA水平均有不同程度降低，以肝硬化和重症肝炎降低最著。对重型肝炎预后有较大的参考价值，PA明显上升，预后良好，ＰＡ持久降低者，预后险恶。 3.诊断急性时相反应，PA可作为癌症的筛选指标。 PA升高： 肾病综合征 >500 mg/L （此时ALB<30g/L），发作期 PA ↑ ALB ↓，恢复期 PA ↓ ALB ↑。 四、血清5’-核苷酸酶（5’-NT）临床意义 血清5’-NT活性升高主要见于肝胆胰系统疾病及某些恶性肿瘤，故有较特异的诊断价值。胆管结石或肿瘤所致之肝外胆管阻塞，以及氯
1 产品概述、处方及规格 1.1产品概述 本试剂通过测定人体液中同型半胱氨酸（Hcy）的浓度，主要是用于诊断心肌功能疾病。 产品测定原理： 同型半胱氨酸被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）转化为NAD+，样本中的同型半胱氨酸的浓度与NADH的变化成正比。 1.2产品处方 1.2.1 试剂为液体双试剂。校准品可使用朗道、罗氏等复合定标液。 1.2.2 产品所用主要原材料为S-腺苷甲硫氨酸（SAM）、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）、三（2羧乙基）磷氯化氢（TCEP）、α- 酮戊二酸、Hcy甲基转移酶（HMTase）、谷氨酸脱氢酶（GLDH）S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）水解酶及腺苷脱氨酶（ADA）等。根据文献资料选用适当的缓冲液和稳定剂。 1.3 产品规格 产品包装规格制定要考虑不同适用机型和不同客户需求，根据以往经验，拟制定规格： R1-8 ml、R2-2 ml；R1-16 ml、R2-4ml；R1-20 ml、R2-5ml；R1-32 ml、R2-8ml；R1-40 ml、R2-10 ml； R1-2×40 ml、R2-2×10 ml；R1-4×40 ml、R2-4×10 ml；R1-2×40 ml、R2-20 ml；R1-4×40 ml、R2-2×20 ml；R1-8×40 ml、R2-8×10 ml；R1-80 ml、R2-20 ml；R1-2×80 ml、R2-2×20 ml； R1-4×80 ml、R2-4×20 ml；R1-8×80 ml、R2-8×20 ml ；R1-60 ml、R2-15 ml；R1-2×60 ml、R2-2×15 ml；R1-3×60 ml、R2-3×15ml；R1-8×50 ml、R2-2×50ml；R1-6×70 ml、R2-3×35ml； R1-5×40 ml、R2-50ml；R1-4×50 ml、R2-50ml；R1-3×60 ml、R2-45ml；R1-8×20 ml、R2-8×5 ml。 2 产品质量标准 根据《临床化学体外诊断试剂（盒）通用技术要求》，应对试剂外观、净含量、试剂空白、灵敏度、准确度、批内精密性、批间精密性、线性范围和稳定性等做出要求和规定。 应参考已上市产品并满足临床使用要求。 2.1外观 R1、R2均为无色至浅黄色透明液体。 2.2净含量 不少于标示值。 2.3试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度变化率 以蒸馏水为检测样本时，每分钟吸光度变化值(△A/min)的绝对值应不大于0.100A。
胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义分析 目的探讨胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义。方法选择本院结核性胸腔积液患者共35例，作为结核组；同时选择本院肿瘤性胸腔积液患者共30例，作为肿瘤组。取两组患者胸腔积液，测定腺苷脱氨酶活性。结果结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶阳性检出率显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论胸腔积液患者中行胸腔积液腺苷脱氨酶活性检测有助于结核性胸腔积液和肿瘤性胸腔积液鉴别诊断，检测意义重要，值得借鉴。 标签：胸腔积液；肿瘤；结核；鉴别诊断；检测意义 胸腔积液在临床症状中很常见，导致胸腔积液的病因较多，在临床上主要有肿瘤性胸腔积液及结核性胸腔积液。对于胸腔积液来说，明确病因对正确诊断和治疗至关重要。但胸腔积液的早期诊断较为困难。部分患者采用常规的方法不能明确胸腔积液的性质。本文探讨腺苷脱氨酶在胸腔积液中的检测意义。现报道如下： 1 资料与方法 1.1 一般资料 选择本院2009年10月～2011年10月结核性胸腔积液患者共35例，作为结核组，男19例，女16例，年龄最小为18岁，最大为63岁，平均（38.1±4.6）岁。结核性胸腔积液诊断条件：所选患者有结核中毒症状表现；合并有肺结核，痰涂片检测到抗酸杆菌；胸腔积液为渗出性改变；结核菌素试验阳性；血沉加快；抗结核药物治疗有效。上述5条中具备3条即可诊断为结核性胸腔积液。同时选择本院肿瘤性胸腔积液患者共30例，作为肿瘤组，男21例，女9例，年龄最小为18岁，最大为67岁，平均（40.1±6.1）岁。肿瘤组患者中，14例纤维支气管镜取组织行病理检查，6例患者经肺活检确诊，10患者胸腔积液中发现癌细胞。 1.2 方法 取两组患者胸腔积液，操作步骤如下：患者坐位，面向椅背，两前臂置于椅背上，前额伏于手臂上；选择肩胛下角线或腋后线7～8肋间作为穿刺点；常规消毒；2%利多卡因局部逐层浸润麻醉；左手固定穿刺部位皮肤，右手持穿刺针沿麻醉部位经肋骨上缘垂直缓慢刺入，当有突破感时停止；接上注射器后；注射器抽满后再次用血管钳夹闭胶管才能取下注射器；抽完液后拔出穿刺针，再次消毒皮肤，覆盖无菌纱布；用胶布固定。胸腔积液均为患者入院后第一次抽取的，离心后取上清液2 mL置于管中待测。腺苷脱氨酶检测采用酶法，检测步骤严格根据说明书提供的步骤进行。当腺苷脱氨酶活性大于19.6 U/L为诊断结核阳性界值。 1.3 统计学处理 采用统计学软件SPSS 14.0进行统计学分析，均数比较采用t检验，率的比较采用卡方检验，P ＜0.05，显示差异有统计学意义。 2 结果 结核组和肿瘤组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性检测结果显示，结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶阳性检出率显著高于肿瘤组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。
腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法) 适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性浓度。 1.1产品规格 1.2产品组成 试剂1：PNP 1.5U/mL，XOD 1.0U/mL。 试剂2：腺苷10mmol/L，TOOS 2mmol/L。 2.1 外观 试剂1、2为无色或略带黄色透明溶液；试剂盒各组分齐全、完整，液体无渗漏，包装标签文字符号清晰牢固不易脱落，外包装完整无破损。 2.2 装量 液体试剂的净含量应不少于标示量。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 在37℃、540nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.20。2.3.2 试剂空白吸光度变化率 在37℃、540nm波长、1cm光径条件下，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白波光度变化率（ΔA/min）应不大于 0.005/min。 2.4分析灵敏度 测定80U/L腺苷脱氨酶时，吸光度变化率在（0.04±0.02）/min范围内。 2.5 准确度
采用比对试验，相关系数r≥0.98；[1.0，30]U/L区间内，线性绝对偏差不超过±3U/L；(30，200]U/L区间内，线性相对偏差不超过±10% 。 2.6 精密度 2.6.1 重复性 用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数（CV）应不大于5.0%。 2.6.2 批间差 试剂（盒）批间相对极差应不大于7.0%。 2.7 线性区间 试剂线性在[1.0，200]U/L（37℃）区间内： a) 线性相关系数|r|应不小于0.990； b) [1.0，30]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±3U/L；（30，200]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±10%。 2.8稳定性 原包装试剂2～8℃避光保存有效期12个月，到效期后的样品检测试剂空白、分析灵敏度、准确度、重复性、线性区间应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7 的要求。
腺苷脱氨酶（ADA） 参考值：0-15U/L 海丰参考区间4~24U/L 介绍：腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。ADA广泛存在于各组织中，以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高，肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低，肝脏含量约为小肠的7%~10％。肝内ADA90％存在与细胞浆水溶性部分，其余在细胞核内。此外，血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍，因此测定ADA时应避免溶血。血清中的ADA主要来自肝脏，所以肝细胞损伤或膜通透性增强，均可使血中酶活性增高，故可依据该酶活性增高或降低反映肝细胞损伤和恢复程度。 血清腺苷脱氨酶（ADA）正常值： (1)酶速率法(37℃)：健康成年人：7.7-19.3 U/L (2)分光光度法：<25 U/L (3)比色法：健康成年人为：5～25 U/L 诊断参考： 肝脏疾病： ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。 一．ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与AIT或GGT等组成肝酶谱。 （1）用于判断急性肝损伤及残留病变急性肝炎时ALT明显升高。ADA仅低度，中度升高。但重症肝炎发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而ADA常明显升高。 而ALT恢复正常，ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。 （2）协助诊断慢性肝病在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高，因而可判断慢性肝病的程度。另外， 慢性活动性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎。故可用于二者的鉴别诊断。 （3）有助于肝纤维化的诊断ADA活性差异与肝细胞损害关系不大，与肝纤维化程度相关。肝纤维化程度增加，ADA活性增加。 （4）有助于黄疸的鉴别据文献报道，阻塞性黄疸血清ADA活性明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸。 二.肿瘤引起的阻塞性黄疸，前列腺癌和膀胱癌，网状细胞瘤，淋巴瘤，溶血性贫血， 风湿热，伤寒，痛风，重症地中海贫血，骨髓性白血病，结核，自身免疫性疾病，传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。 3.结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清中ADA活性二者无 明显差别，故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。 4.结核性脑膜炎ADA显著增高，而病毒性脑膜炎则不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统
胸腔积液 胸腔指的是由膈肌和胸廓围成的总腔，胸膜腔是由脏壁两层胸膜在左右两肺周围围成的一个完全封闭的潜在性腔隙，腔内含少量浆液，起到润滑作用。正常人胸膜腔内有3～15ml液体，在呼吸运动时起润滑作用，正常人，每24小时亦有500～1000ml的液体形成与吸收。胸膜腔内液体自毛细血管的静脉端再吸收，其余的液体由淋巴系统回收至血液，滤过与吸收处于动态平衡。若由于全身或局部病变破坏了此种动态平衡，致使胸膜腔内液体形成过快或吸收过缓，临床产生胸腔积液（P leural effusion，简称胸液）。 产生机制： 胸腔积液 健康人的胸膜腔为负压（呼吸时平均为-5cmH2O，1cmH2O=98Pa），胸液中含蛋白质，具有胶体渗透压（8cmH2O）。胸液的积聚与消散亦与胸膜毛细血管中渗透压、静水压有密切关系。壁层胸膜由体循环供血，毛细血管静水压高（30cmH2O）；脏层胸膜则由肺循环供血，静脉压低（1 1cmH2O）。体循环与肺循环血膜以相等速度被吸收。胸液中的蛋白质主要经由淋巴管进入胸导管。 病因及发病机制 一、胸膜毛细血管内静水压增高 如充血性心力衰竭、缩窄性心包炎、血容量增加、上腔静脉或奇静脉受阻，产生胸腔漏出液。 二、胸膜毛细血管通透性增加 如胸膜炎症（结核病、肺炎）结缔组织病、胸膜肿瘤、肺梗死、膈下炎症，产生胸腔渗出液。 三、胸膜毛细血管内胶体渗透压降低 如低蛋白血症、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、粘液性水肿等，产生胸腔漏出液。 四、壁层胸膜淋巴引流障碍癌症 淋巴管阻塞、发育性淋巴管引流异常等，产生胸腔渗出液。 五、损伤所致胸腔内出血：主动脉瘤破裂、食管破裂、胸导管破裂等。 症状： 积液量少于0.3L时症状多不明显；若超过0.5L，患者渐感胸闷。积液量增多后，两层胸膜隔开，不再随呼吸摩擦，胸痛亦渐缓解，但呼吸困难亦渐加剧；大量积液时纵膈脏器受压，心悸及呼吸困难更加明显。 诊断
腺苷脱氨酶(ADA)测定试剂盒（过氧化物酶法） 适用范围：用于体外定量测定人体血清中腺苷脱氨酶的活性。 1.1 试剂盒包装规格 试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml； 试剂1：3×45ml，试剂2：3×15ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml； 试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。 质控品（选配，冻干品）：1×1ml。 1.2试剂盒主要组成成分
2.1 外观 液体双试剂：试剂1无色至浅黄色澄清液体，试剂2无色至浅黄色澄清液体。质控品：冻干品，溶解后为无色至淡黄色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度：在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。 2.3.2试剂空白吸光度变化率：在37℃、546 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.005。
2.4 分析灵敏度 测定活性为25U/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.009。 2.5 线性范围 在（2，180）U/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。在（60，180）U/L 区间内线性相对偏差不大于±10%；在（2，60]U/L区间内线性绝对偏差不大于±6U/L。 2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。 2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。 2.8 准确度 相对偏差：相对偏差应不超过±10%。 2.9 质控品赋值有效性 测定结果在靶值范围内。 2.10瓶间差（均一性） 质控品的瓶间变异系数（CV）应不大于5%。 2.11含水量（冻干品） 质控品水分含量应不大于8%。 2.12稳定性 2.12.1复溶稳定性 质控品开瓶复溶后，复溶物在10℃~30℃室温密封避光保存，可以稳定4小时，在第5小时检测，测量结果应在其靶值范围内。质控品开瓶复溶后，复溶物在2℃
腺苷脱氨酶 定义：催化腺苷水解脱氨成肌苷的氨基水解酶，是嘌呤代谢的必需酶。 腺苷脱氨酶作用机理 腺苷脱氨酶（EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA）是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。 人体分布情况 ADA广泛分布于人体各组织中，以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。血液中ADA主要存在于红细胞
腺苷脱氨酶作用图 、粒细胞和淋巴细胞，其活性约为血清的40～70倍，T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。人ADA基因位于第20对染色体上，并呈现出遗传多态性现象，其同工酶有3种，分别为ADA1，ADA1＋CP和ADA2。ADA1分子量为35kD，为一种单链蛋白质；ADA1＋CP分子量为280kD，实际上是由2条单键的ADA1分子和人个不具酶活力的200kD结合蛋白结合而成；ADA2分子量为100kD。3种同工酶具有不同的动力学性质：ADA1和ADA1＋CP最适PH为5.5～8.0，对腺苷的Km值为 50umol/L。对2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比为0.8，两者均对红-9-（2-羟基-3-壬烷基）腺嘌呤[erythro-9- （2-hydroxyl-3-nonyl）adenine（EHNA）]抑制作用敏感。
ADA2相对于前两种同工酶具有较低的最适PH、较高的催化腺苷Km值（2000umol/L）以及较低的2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比值（0.2），对EHNA抑制作用不敏感。ADA同工酶在各类组织和细胞中的分布不同，ADA1在脾脏、红细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞中占优势，ADA1＋CP在肝脏、肺、胰、肾组织和骨骼中占优势，ADA2只存在于单核细胞，目前在其他组织细胞中尚未检出。 临床意义 腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。 肝脏疾病： ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。 用于判断急性肝损伤及残留病变 急性肝炎（AH）时ALT几乎明显升高，ADA仅轻、中度升高，且阳性率明显低于AST和ALT。因此ADA在诊断急性肝损伤时有一定价值，但并不优于ALT。重症肝炎发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而ADA明显升高。AH后期，ADA长高率高于
腺苷脱氢酶（ADA） 一、定义 腺苷脱氨酶（Adenosine deaminase）是一种参与嘌呤代谢作用的酶。它是用作拆解食物组织中的核酸中的腺苷。在人体中，它主要参与了免疫细胞的制造；若该酶突变，会造成T细胞、B细胞、自然杀伤细胞皆无法表现的严重复合型免疫缺乏症(SCID) 二、异构体 有两种ADA同种型：ADA1和ADA2。 （一）ADA1存在于大多数体细胞中，特别是淋巴细胞和巨噬细胞中，它不仅存在于胞质溶胶和细胞核中，而且还存在于与二肽基肽酶-4（aka，CD26）连接的细胞膜上的外胚层中。ADA1主要参与细胞内活动，并且以小形式（单体）和大形式（二聚体）存在。小型到大型的相互转换受肺中“转换因子”的调节。 （二）ADA2首次在人类脾脏中发现。随后在包括巨噬细胞在内的其他组织中发现它与ADA1共存。这两种同种型调节腺苷与脱氧腺苷的
比例，增强了寄生虫的杀灭。ADA2主要存在于人血浆和血清中，并且仅作为同型二聚体存在。 三、临床意义 （一）、用于肝胆疾病的诊断 1．急性肝炎患者ADA与ALT均显著升高。乙型肝炎患者ALT的升高大于ADA，而非甲非乙肝炎病人ADA的升高大于ALT，非甲非乙肝炎患者ADA活性极度升高者多易转变为迁延性肝炎。 2．慢性肝炎患者ADA活性均升高，慢性活动型肝炎比非活动型升高更甚。 3．肝纤维化、肝硬化及慢性肝炎患者ADA活性显著升高而ALT 不升高，所以同时测定ALT和ADA更具有临床价值。 4．阻塞性黄疸ADA不升高，而肝细胞性黄疸ADA活性升高，因此测定血清ADA有助于黄疸类型的鉴别诊断。 （二）、用于结核性胸膜炎及结核性腹膜炎的诊断
临床生化检验中常见检验项目套餐组合模式 肝功能检测项目： 肝功能五项：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶 肝功能十四项：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比、直接胆红素、间接胆红素、腺苷脱氨酶、总胆汁酸、胆碱脂酶 肝功能十八项：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比、直接胆红素、间接胆红素、腺苷脱氨酶、总胆汁酸、前白蛋白、甲胎蛋白、5-核苷酸酶、胆碱脂酶、a-L-岩藻糖苷酶 肾功能检测项目： 肾功能五项：肌酐、尿素氮、尿酸、二氧化碳、β2-微球蛋白 肾功能九项：肌酐、尿素氮、尿酸、二氧化碳、β2-微球蛋白、胱胺酸蛋白酶抑制剂C、尿微量白蛋白、视黄醇结合蛋白、a1微球蛋白。 血脂检测项目： 血脂七项：甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B。 血脂八项：甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B、脂蛋白a。 心血管疾病检测项目： 血管紧张素转换酶、全量C反应蛋白、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸、肌红蛋白、肌钙蛋白、同型半胱胺酸。 血脂类及心血管类检测项目： 甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B、脂蛋白a、全量程c反应蛋白、同型半胱胺酸、血管紧张素转换酶。 糖尿病检测项目： 葡萄糖、果糖胺、糖化血红蛋白、β-羟丁酸。胰腺疾病检测项目： 淀粉酶、脂肪酶血栓与止血检测项目： D-二聚体 风湿三项： 抗‘O’、类风湿、C-反应蛋白 微量元素及电解质： 铜、铁、锌、无机磷、镁、钙、CO2-CP 其他项目： 免疫球蛋白IgG、免疫球蛋白IgM、免疫球蛋白IgA、补体C3、补体C4
腺苷脱氨酶测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法） 组成： 适用范围：用于体外定量测定人血清中ADA的含量。 2.1外观 试剂盒外观应整洁,液体无渗漏，文字符号标识清晰；试剂1、试剂2为透明液体，不得有沉淀和絮状物。校准品质控品为冻干品，复溶后为无色至淡黄色透明液体。 2.2 装量 每瓶不少于标示值。 2.3试剂空白吸光度
用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在波长340nm处测定试剂空白吸光度A≥1.0，试剂空白吸光度变化率ΔA/min≤0.03。 2.4分析灵敏度 试剂测定30U/L被测物，吸光度变化△A/min≥0.004。 2.5线性范围 2.5.1在[2，200] U/L被内，相关系数R≥0.990。 2.5.2在[2，60] U/L内，线性绝对偏差不超过±6U/L；(60，200] U/L内，线性相对偏差不超过±10%。 2.6精密度 2.6.1重复性 重复测试（30±10）U/L和（80±20）U/L的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。 2.6.2批间差 测定（30±10）U/L和（80±20）U/L 样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。 2.7准确度 回收率应在85%-115%范围内。 2.8 质控品赋值有效性 试剂盒内的质控品，检测结果均在质控范围内。 2.9 瓶间差 瓶间差CV≤10%。 2.10稳定性 2.10.1 效期稳定性 试剂有效期为12个月，取到效期后一个月内进行检测，测定结果应符合 2.3-2.6.1、2.7和2.8项要求。 2.10.2复溶稳定性 校准品、质控品复溶后在2-8℃密闭避光保存24h。检测开瓶后的工作校准品，测试结果与靶值的偏差应不超过±15%，开瓶后的质控品，检测结果均在质控范围内。
腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法) 简介： 腺苷脱氨酶(Adenosine Deaminase ，ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于一种巯基酶，每分子至少含2个活性巯基。ADA 能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。 Leagene 腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法)其检测原理是待测样品中的ADA 催化腺嘌呤核苷水解脱氨，产生次黄嘌呤核苷和铵离子，利用波氏显色法，测定氨离子生成量。其反应公式为：腺苷+H 2O →次黄嘌呤+NH 3。通过分光光度计检测540nm 处吸光度，根据计算公式可得ADA 活力。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-70℃冻存，用于ADA 的检测。 ②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于ADA 的检测。 高活性样品：如果样品中含有较高活性的ADA ，可以使用ddH 2O 稀释。 ④(选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计 算单位蛋白重量组织或细胞内的ADA 含量。 2、 稀释标准品：。 3、 ADA 检测：按照下表设置空白管、标准管、对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加 入，并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。 编号 名称 TE0233 100T Storage 试剂(A):氨氮标准(1mg/ml) 1ml 4℃ 试剂(B): 底物缓冲液 30ml 4℃ 试剂(C): 波氏ADA 显色液 250ml 4℃ 避光 试剂(D): ADA Assay buffer 250ml 4℃ 避光 试剂(E): ddH 2O 100ml RT 使用说明书
胸水腺苷脱氨酶检测对结核性胸膜炎的诊断意义 【摘要】目的: 探讨胸水的腺苷脱氨酶（ADA）测定值对结核性胸膜炎的诊断意义和应用价值。方法: 对436例住院的胸腔积液患者分别行结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）试验，同时应用酶速率法检测胸水标本中ADA 的活性，比较 二者的灵敏度及特异度。所有患者试验前均未行抗结核治疗。结果: ADA试验 灵敏度（96.1%）高于PPD（90.2%），二者差异有显著性（P<0.05）。结论: 胸腔积液ADA含量的检测对于早期诊断及治疗结核性胸膜炎具有积极意义。 【关键词】腺苷脱氨酶（ADA）；胸腔积液；结核性胸膜炎；诊断 【ABSTRACT】 Objective: To study the relationship between the ADA rising in pleural effusion and tuberculous pleuritis,so as to prefer early chemotherapy. Methods: 436 cases with pleural effusion were tested with PPD and ADA activity was determined by enzyme kinetic analytical method respectively at the same time.All the patients had never been treated with chemotherapy for tuberculosis. Results: Statistical analysis suggest significant differences of sensitivity and specificity between ADA and PPD (P<0.05),the former sensitivity was higher (96.1%) than that of the later (90.2%). Conclusion: ADA test has active value in early diagnosis for tuberculous pleural effusion and its chemotherapy. 【KEY WORDS】 Adenosine deaminase(ADA); Pleural effusion; Tuberculous pleuritis; Diagnosis 胸腔积液常因结核性胸膜炎、全身恶性肿瘤等疾病所致，胸水常规及酶学检查为结核性胸膜炎的诊断和鉴别诊断以及早期治疗提供着有力和必不可少的帮助。近年来，胸液及血清腺苷脱氨酶（Adenosine deaminase，ADA ）的检测已被不少学者和临床工作者用于发现和确诊结核性胸膜炎。经过几年的探索和临床经验积累，本文分析了对疑似结核性胸膜炎患者胸水ADA的测定结果，旨在探讨其对结核性胸膜炎的早期诊断和治疗意义，现报告如下。 1 资料与方法
腺苷脱氨酶测定试剂盒（过氧化物酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性。 1.1规格 校准品（选配）：1×0.5mL。 1.2主要组成成分
校准品靶值批特异，详见瓶标签。 2.1 外观 2.1.1 试剂1为无色透明液体，无混浊，无可见不溶物。 2.1.2 试剂2为白色或微黄色胶乳液体。 2.1.3 校准品应为白色或浅黄色粉末。 2.1.4 标签内容清晰，字迹不易脱落。 2.2 试剂装量 液体试剂的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 A≤0.5（光径1.0cm，500nm±20nm波长）。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率 ΔA/min≤0.020/min。 2.4 分析灵敏度 测定60U/L的样本，吸光度变化率在0.006/min～0.060/min区间内。2.5 线性 2.5.1 [1，200]U/L。在规定的线性范围内，测定值与样本浓度值的相关系数（r）应不低于0.9900。 2.5.2 [1，20]U/L区间内，绝对偏差应不超过2U/L；（20，200]U/L区间内，相对偏差应不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1 批内精密度 用高、低2个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于5%。 2.6.2 批内瓶间差 校准品批内瓶间差CV≤5%。 2.6.3 批间差 用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于6%。 2.7 准确度 相对偏差在±10%范围内（测试国际参考物质(BCR-647)）。 2.8 溯源性 根据GB/T21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定
胸水腺苷脱氨酶检测对结核性胸膜炎诊断意义 【摘要】目的: 探讨胸水的腺苷脱氨酶（ADA）测定值对结核性胸膜炎的诊断意义和应用价值。方法: 对436例住院的胸腔积液患者分别行结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）试验，同时应用酶速率法检测胸水标本中ADA 的活性，比较二者的灵敏度及特异度。所有患者试验前均未行抗结核治疗。结果: ADA试验灵敏度（96.1%）高于PPD（90.2%），二者差异有显著性（P<0.05）。结论: 胸腔积液ADA含量的检测对于早期诊断及治疗结核性胸膜炎具有积极意义。【关键词】腺苷脱氨酶（ADA）；胸腔积液；结核性胸膜炎；诊 断【ABSTRACT】 Objective: To study the relationship between the ADA rising in pleural effusion and tuberculous pleuritis,so as to prefer early chemotherapy. Methods: 436 cases with pleural effusion were tested with PPD and ADA activity was determined by enzyme kinetic analytical method respectively at the same time.All the patients had never been treated with chemotherapy for tuberculosis. Results: Statistical analysis suggest significant differences of sensitivity and specificity between ADA and PPD (P<0.05),the former sensitivity was higher (96.1%) than that of the later (90.2%). Conclusion: ADA test has active value in early diagnosis for tuberculous pleural effusion and its chemotherapy. 【KEY WORDS】 Adenosine deaminase(ADA); Pleural effusion; Tuberculous pleuritis; Diagnosis 胸腔积液常因结核性胸膜炎、全身恶性肿瘤等疾病所致，胸水常规及酶学检查为结核性胸膜炎的诊断和鉴别诊断以及早期治疗提供着有力和必不可少的帮助。近年来，胸液及血清腺苷脱氨酶（Adenosine deaminase，ADA ）的检测已被不少学者和临床工作者用于发现和确诊结核性胸膜炎。经过几年的探索和临床经验积累，本文分析了对疑似结核性胸膜炎患者胸水ADA的测定结果，旨在探讨其对结核性胸膜炎的早期诊断和治疗意义，现报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料我科1999.9～2005.12月间收治胸腔积液患者的胸腔积液标本436份，所选患者的 标本均为渗出液，符合胸腔积液诊断金标准[1]，即胸液/血清蛋白＞0.5，胸液/血清乳酸脱氢酶＞0.6和胸液乳酸脱氢酶＞200IU/L。结核性胸膜炎（结核 组）256例，男147例，女 109例；年龄 15～78（43.4±13.1）岁；经临床表现、胸腔积液分析、胸水PCR、影像学检查和抗痨治疗反应确诊。非结核组180例，恶性胸腔积液137例，所有患者均经组织学和细胞学检查证实，非特异性感染32例，其他11例；男102例，女78例；年龄17～86（56±10.3） 岁。 1.2 方法采用上海森雄公司生产的试剂盒，参照试剂盒中提供的方法，用速率法检测ADA，同时采用传统的 PPD 试验对照检测， 7 年间检测试剂均为同一厂家来源，检测方法及仪器固定，所有患者均为一次检测，此前均未曾使用任何抗结核药物。 PPD 检测阳性标准： 1U++。 1.3 统计学方法分别采用四格表χ2检验，两试验间参数比较采用u检验。 2 结果 2.1 ADA 检测阳性标准为>45U/L，ADA试验对结核性胸膜炎诊断的灵敏度为96.1%，特异度为87.8%（见表1）。表 1 436例患者胸水ADA测定结果注： χ2=3.78 P<0.05 2.2 PPD 检测阳性标准1U++， PPD对照试验对