穿心莲内酯的提取 分离及鉴定 2011级16班 摘要：穿心莲为解毒消炎类临床常用药，穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分，分子式C20H30O5，白色方形或长方形结晶，味极苦，难溶于水易溶于乙醇、甲醇等。利用乙醇提取方法、超声、回流、旋转蒸发浓缩方法对穿心莲内酯进行提取分离以及纯化，使用TLC法对其鉴别，可得到纯度较高的穿心莲内酯。 关键词：穿心莲、穿心莲内酯、超声提取法、乙醇提取法、TLC鉴别 Isolation & Identification of Andrographolide ABSTRACT:Clinical commonly used medicines, creat for detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula C20H30O5, white square or rectangle crystal, taste bitter, soluble in water, soluble in ethanol，methanol, https://www.doczj.com/doc/5211932097.html,ing the ethanol extract method, ultrasound, reflux, rotary evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide. KEY WORDS:Andrographis paniculata；Ultrasonic extraction；Andrographolide；alcohol extraction；Thin layer chromatography (TLC) 穿心莲为常用中药，来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. f.）Nees.的干燥地上部分。收载于《中国药典》2000 年版一部。具有清热解毒，凉血，消肿的功能，临床用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤等。其主要活性成分为穿心莲内酯（andrographoiide）、新穿心莲内酯（neoandrographoiide）脱水穿心莲内酯（dehydroandrographoiide）[4]。 穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。主要药理作用：抗菌作用、抗病毒作用、利胆保
22.5 D 穿心莲内酯提取 陈树美 张慧莹 蒙倩倩 武秋贤 尚兴宇 广西医科大学药学院药学专业09级18班 广西南宁 530021 【摘要】目的：探讨穿心连内酯的提取工艺。方法：以穿心莲内酯为检测指标，测定其含量。结果：穿心莲粗粉提取穿心莲内酯产率为0.53% 【关键词】穿心莲；穿心莲内酯；提取 穿心莲为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees 的全草。穿心莲中含有多种二萜类化合物，主要为穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯等【1】 1．穿心莲内酯(andrographolide) 又称穿心莲乙素。分子式C20H30O5，分子量350.44。无色方形或长方形结晶，味极苦。mp.230～231℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微溶于氯仿、乙醚、难溶于水、石油醚、苯。 2．新穿心莲内酯(neoandrographolide) 又称穿心莲丙素、穿心莲新苷。分子式C26H40O8，分子量480.58。无色柱状结晶，无苦味。mp.167～168℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微溶于水，较难溶于苯、乙醚、氯仿及石油醚。 3．去氧穿心莲内酯(deoxyandrographolide) 又称穿心莲甲素。分子式C20H30O4，分子量334.44。无色片状（丙酮、乙醇或氯仿）或无色针状结晶（醋酸乙酯），味稍苦。mp.174～175℃，［α］ -40°（C=1,无水乙醇）。易溶于甲醇、乙醇、 丙酮、吡啶、氯仿，可溶于乙醚、苯中，微溶于水。 4．脱水穿心莲内酯(dehydroandrographolide) 分子式C20H28O4,分子量332.42。无色针状结晶（30％或50％乙醇），mp.204℃。易溶于乙醇、丙酮，可溶于氯仿，微溶于苯，几不溶于水【2】。 O HO O CH 2 CH 2OH HO 16131511171820 1910O O CH 2CH 2OH HO O O CH 2CH 2O glc O O H CH 2OH HO 1 仪器与设备 1．1 仪器 旋转蒸发仪 冷凝管 圆底烧瓶 电热套 铁架台 真空抽滤泵 烧杯等 1．2 试药 穿心莲对照品 穿心莲药材 95%乙醇 乙酸乙酯等 2. 提取工艺 穿心莲叶粗粉30g ↓95%乙醇提取；合并提取液 提取液 ↓回收乙醇至300ml 总浓缩液 ↓活性炭脱色 滤液 ↓浓缩 穿心莲内酯 去氧穿心莲内酯 新穿心莲内酯 脱水穿心莲内酯
穿心莲内酯类注射剂市场浅析 陈莹、李德馨 （天津天士力集团有限公司） 摘要：穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分，具有抗感染、抗炎、解热等多种功能，对目前应用于临床的穿心莲内酯类注射剂进行了综述，并对市场前景进行了分析。 关键词：穿心莲内酯注射剂应用市场分析 穿心莲内酯(Andrographolide)是由爵床科植物穿心莲Andrographolispanieuafa(burm．f．)nees经提取制得的中药植物单体，具有清热解毒、抗菌消炎功能．是治疗上呼吸道感染、急性菌痢、病毒性感冒等常用中成药穿琥宁制剂的主要原料。[1]穿心莲具有抗感染、抗炎、解热等多种功能。20世纪70年代初，国内开始将穿心莲的茎叶或全草提取后，制成了穿心莲片等普通口服制剂。普通制剂对细菌、病毒虽然具有一定的抑制作用，但其威力不足。 穿心莲内酯是从穿心莲中提取的有效成分，单体纯度高，产品质量和药理作用较穿心莲更具有优势。目前SFDA已批准生产穿心莲内酯片剂、胶囊、软胶囊、滴丸等口服剂型。其缺点是穿心莲内酯为二萜类内酯化合物，难溶于水，通常仅能口服给药。针对临床上病毒感染急症的需求，将其结构中引入不同的亲水基团，增强其水溶性，提高疗效。在我国，自七十年代开始对穿心莲内酯水溶性衍生物进行研究，开发了一系列注射剂，其中穿琥宁、炎琥宁、莲必治、喜炎平占据市场主导地位。 1.穿心莲内酯类注射剂品种 穿琥宁是穿心莲内酯经酯化、脱水、成盐而制成的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯单钾盐；炎琥宁是穿琥宁与氢氧化钠的简单反应而得的脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯钠钾盐；莲必治是穿心莲内酯和亚硫酸氢钠发生加成反应制得的水溶性磺酸盐；喜炎平是穿心莲总内酯通过磺化得到的磺酸盐，喜炎平具有国家专利，属于江西青峰制药厂独家产品。 这4个品种的母体均为穿心莲内酯，只是引入的亲水基团或盐不同。客观分析有关这四个品种性能比较的文献资料，结构上的细微变化并没有对药理作用、药代动力学以及不良反应等方面带来质的改变，因此当前市场上穿琥宁、炎琥宁、莲必治和喜炎平“四驾马车并驱”。 穿心莲内酯注射剂具有较好的疗效，临床广泛用于治疗高热[2]、呼吸道感染[3]、儿童秋季腹泻[4]、流行性腮腺炎[5]等病毒性疾病，为中医院急诊科(室)必备纯中药制剂之一，打破
穿心莲内酯的提取、分离、鉴定及亚硫酸氢钠加成物的制备 穿心莲为爵床科植物穿心莲(Andjrographis panicalata (Burmf)Ness)的全草或叶。具清热解毒，凉血消肿作用，用于治疗急性菌痢、胃肠炎、咽喉炎、尿路感染等。穿心莲中含有多种苦味素，属二萜类化合物，主要为穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯、高穿心莲内酯、新穿心莲内酯、穿心莲烷、穿心莲酮等。其中穿心莲内酯、新穿心莲内酯是穿心莲抗菌消炎的主要有效成分。 鉴于穿心莲内酯在水中的难溶性，将穿心莲内酯进行磺化、亚硫酸氢钠加成和琥珀酸酐酯化等水溶性衍生物合成研究，克服了穿心莲内酯不溶于水的特性。 穿心莲中主要成分的结构及其性质 1．穿心莲内酯(andrographolide)：C 20H 30O 6，又称穿心莲乙素，为无色方型或 长方型结晶，mp 230~232℃，[α]D 20 -126。 。味极苦，可溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶，微溶于氯仿、乙醚，难溶于水及石油醚。 2．脱氧穿心莲内酯(14-deoxy-andrographolide)：C 20H 30O 4，又称穿心莲甲素，为无色片状或长方型结晶， mp l75~176.5℃，[α]D -36(1％，氯仿)。味稍苦，可溶于甲醇、乙醇，丙酮、吡啶、氯仿、乙醚、苯、微溶水。 3．新穿心莲内酯（neo-andrographolide )：C 26H 40O 8，又称穿心莲丙素、穿心莲新苷，为无色柱状结晶，mp l67~168℃。无苦味，可溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶，微溶于氯仿和水，不溶于石油醚。 O O CH 2OH HO HO O O CH 2OH HO O O CH 2O-Glu 穿心莲内酯 脱氧穿心莲内酯 新穿心莲内酯 O O CH 2OH HO HO Na 一、实验目的 1. 掌握穿心莲内酯类二萜化合物的理化性质和提取分离方法。 2. 学习氧化铝柱色谱的原理和操作方法。 3. 通过穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成，掌握使脂溶性产物转化为水溶性产物的一种方法。 二、实验原理（综合性实验） 穿心莲中的内酯类化合物易溶于甲醇、乙醇．丙酮等溶剂，故利用此性质选用乙醇提取之，穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色法除去叶绿素类杂质；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在氯仿中溶解度不同，初步将二者分离；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯结构上的差异，用氧化铝柱分离二者，将穿心莲内酯制成亚硫酸氢钠加成物以增加其在水中的溶解性。 三、实验内容 1．仪器和试剂 玻璃色谱柱（2×30cm ）及配套分液漏斗，滤纸，50ml 三角瓶数个， 恒温水浴锅，蒸发皿，玻璃板（5×20cm ），色谱缸，玻璃漏斗，铁架台，500ml 园底烧瓶，抽滤瓶，布氏漏斗，冷凝器，旋转蒸发仪，硅胶薄层板，显色试剂喷瓶，电吹风，锥形瓶(50m1)等。 穿心莲粗粉，95％乙醇，活性炭，丙酮，氯仿，甲醇，正丁醇，亚硫酸氢钠，无水乙醇，0.3％亚硝酰铁氰化钠，10％的正丁醇氢氧化钠溶液，3，5-二硝基苯甲酸碱性溶液，50％氢氧化钾甲醇试液。
外科护理学分类模拟题6 A1/A2型题 1. 等渗性脱水患者补液治疗首先应输入的是 A.右旋糖酐 B.5%葡萄糖溶液 C.5%碳酸氢钠 D.10%葡萄糖溶液 E.5%葡萄糖盐水 答案：E [解答] 等渗性脱水患者既失水也失钠，应补充含钠的等渗液体。 2. 高钾血症患者静脉注射葡萄糖酸钙的主要目的是 A.补充钙剂 B.纠正酸中毒 C.对抗钾离子对心肌的抑制作用 D.降低神经肌肉的应激性 E.降低血钾 答案：C [解答] 因钾离子对心肌具有抑制作用，故高钾血症可导致心肌收缩力降低、心搏徐缓和心律失常，严重者心脏可在舒张期停搏。静脉注射葡萄糖酸钙可对抗钾离子对心肌的抑制作用。 3. 高渗性脱水患者补液治疗应首先输入 A.平衡液 B.5%葡萄糖溶液 C.林格液
D.右旋糖酐 E.生理盐水 答案：B [解答] 高渗性脱水缺水多于缺钠，血清钠大于150mmol/L，细胞外液渗透压增高，应及时降低细胞外液的渗透压，故应首先输入葡萄糖溶液。 4. 不适宜实施营养支持的患者是 A.高代谢状态的患者 B.急性重症胰腺炎患者 C.骨髓移植患者 D.休克患者 E.化疗患者 答案：D [解答] 营养支持用于营养不良或有营养不良风险的患者，当患者处于体液失调、出凝血功能障碍以及休克时，应优先处理上述问题，暂不宜实施营养支持。 5. 在休克治疗中，应用血管扩张药物前应注意 A.控制酸中毒 B.控制感染 C.控制原发病 D.补足血容量 E.放置正确体位 答案：D [解答] 血管扩张药可以解除小动脉痉挛，关闭动静脉短路，改善微循环，但可使血管容量相对增加而血压有不同程度地下降，从而影响重要脏器的血液供应；故只有当血容量已基本补足而患者发绀、四肢厥冷、毛细血管充盈不良等循环状
病理生理学作业1 一、名词解释 1.基本病理过程：：是指在多种疾病过程中出现的共同的功能、代谢和形态结构的病理变化。 2.病因：凡是能引起致疾病发生的体内外因素都称为致病因素，简称为病因。 3.疾病：是指在一定病凶的损害作用下，因机体自稳调节紊乱而发生的异常生命活动过程。 4.低容量性高钠血症(高渗性脱水)：是指失水多于失钠，血Na+浓度>150mmol ／L，血浆渗透压>310mmol／L的脱水。 5.代谢性碱中毒：是指以血浆HCO 浓度原发性升高和pH呈上升趋势为特征的酸碱平衡紊乱。 2.肺心病：慢性肺源性心脏病的简称，由肺部疾病、胸廓运动障碍和肺血管疾病引起肺动脉高压，导致以右心肥厚扩张、衰竭为特征的心脏疾病。 二、单项选择题 1.能够促进疾病发生发展的因素称为D．疾病的诱因 2.疾病的发展方向取决D．损伤与抗损伤力量的对比 3.死亡的概念是指C．机体作为一个整体的功能永久性的停止 4.全脑功能的永久性停止称为C．脑死亡 5.体液是指B．体内的水与溶解在其中的物质 6.高渗性脱水患者尿量减少的主要机制是B．细胞外液渗透压升高，刺激ADH 分泌 7.下列哪一类水与电解质代谢紊乱早期易发生休克A．低渗性脱水 8.判断不同类型脱水的分型依据是C．细胞外液渗透压的变化 9.给严重低渗性脱水患者输入大量水分而未补钠盐可引起C．水中毒 10.水肿时造成全身钠、水潴留的基本机制是C．肾小球－肾小管失平衡 11.下列哪一项不是低钾血症的原因B．代谢性酸中毒 12.低钾血症时，心电图表现为A．T波低平 13.下列何种情况最易引起高钾血症D．急性肾衰少尿期 14.高钾血症和低钾血症均可引起D．心律失常
穿心莲内酯分析 简介 穿心莲为爵床科植物穿心莲的干燥地上部分。原产十印度，我国华东、中南及西南等地有栽培。又名一见喜、苦草、榄核莲等，味苦，性寒，归心、肺、大肠、膀胧经。具有清热解毒，凉血消肿之功效。用十感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泻泄痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤。 结构 3-[2-[decahydro-6-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-5,8a-dimethyl-2-methy lene-1-napthalenyl]ethylidene]dihydro-4-hydroxyl-2(3H)-Furanone 特点 穿心莲内酯属于二萜内酯类化合物，具有内酯环反应特征，对Legal 试剂、Kedde试剂或50%氢氧化钾显紫红色。 构效关系 穿心莲内酯由二萜双环和五元内酯环两部分通过两个碳原子连接构成。在二萜内酯基本结构上有羟基和双键官能团。 穿心莲内酯在醋酐作用下，得三乙酰化合物（32），证明存在三个羟基，羟基分别位于3α, 14α, 19-位，三乙酰化合物（32）在Al (Hg)的作用下发生氢解得化合物（33），证明了14-位是烯丙型羟基，同时14-位羟基又位于不饱和内酯羰基的β-位，所以较易失去，形成脱水穿心莲内酯。紫外光谱: λ223nm (lgε= 4.1)证明分子中有不饱和γ_内酯结构。红外光谱显示分子max 中除了γ-内酯环以外，尚有环外次甲基的存在。双键分别位于12（13), 8 （17)-位，双键均为环外双键，其中一个双键是五元内酯环的环外双键，同时也是烯丙醇的一部分，它与内酯环上的酯羰基共轭，构成了环外α,β-
不饱和-γ-内酯，由于环内张力，这种内酯结构较不稳定，极易在碱性条件下水解开环，穿心莲内酯在碱性条件下，生成化合物（34），化合物的开环，说明了穿心莲内酯存在有内酯的结构。环外双键也易发生重排，进入内酯环内形成更为稳定的α，β-不饱和-γ-内酯。另外一个双键位于二萜双环(反式十氢萘构型)上。这种结构类型决定了穿心莲内酯化学性质较不稳定和相对活泼的特点。 各种名称 穿心莲别名：一见喜、万病仙草、四支邦、槛核莲、苦胆草、斩龙剑、日行千里、四方莲、金香草、金耳钩、春莲夏柳、印度草、苦草等。 来源 穿心莲植物适于生长在亚热带，泰国、马来西亚、斯里兰卡、印度以及巴基斯坦也有穿心莲资源分布，我国广西、广东出产的穿心莲，内酯含量最高，达到4%左右。 理化性质 穿心莲内酯主要来源于爵床科植物穿心莲的全草或叶，是中药穿心莲的主要有效成分之一。穿心莲内酯又称穿心莲乙素，为二萜内酯类物质，无色方形或长方形结晶，口味极苦，分子式C20H30O5，分子量350.44，易溶于乙醇、丙酮、吡啶，微溶于水和氯仿，几乎不溶于乙醚。熔点230~231 ℃，UVλ(EtOH)max 225nm；IRγ(KBr)max cm-1：3400，3390~2979(0H)，1828，1647，979 (C=CH2)。 稳定性 以穿心莲超分子提取物为样品建立含量测定方法，主要测定其中含量
穿心莲中穿心莲内酯的提取 摘要：从药用植物穿心莲中提取穿心莲内酯。150克穿心莲粗粉甲醇回流提取，水沉去杂质，二氯甲烷脱酯,活性碳脱色，结晶得穿心莲内酯精品1.5克，收 率为1%，其含量为98.5%。 关键词：穿心莲；穿心莲内酯；提取工艺 Abstract：Withdraws the Andrographis Paniculta lactone from themedicinal plant Andrographis Paniculta．Uses the methyl alcoholbackflow to withdraw，the water sinks ，the methylenechloride escapes the ester，the activated carbon decolorizes，thecrystallization results in the Andrographis Paniculta lactonehigh-quality goods 1.5 grams，the returns-ratio is 1%, its content is98.5%．Key word：Common Andrographis Herb ，Andrographolide ，Extract method 1．前言 穿心莲为爵床科穿心莲属植物，药用叶或全草，秋初茎叶盛时采割，晒干。在中药里归为凉性药物。穿心莲在亚洲，几个世纪以前就用于治疗胃肠道和呼吸道感染、发热、疱疹、咽喉痛和各种细菌性感染。在中医里，穿心莲是一种治疗感冒的重要草药，它用于退热、驱毒[1]。穿心莲不仅能抑HIV-1，还能抑制HIV-1对细胞的毒性和在细胞间的传播，从多途径抑制HIV-1，因而能防止HIV-1抗药性突变的形成。穿心莲价格低廉，且经过修饰的穿心莲内酯衍生物具有更强的抗HIV-1活性[2]。因而穿心莲及其衍生物用于艾滋病的治疗具有广阔的前景。 由于穿心莲内酯是穿心莲的主要有效成分，穿心莲内酯的含量，与其产地、收期、部位和提取工艺有很大的关系。与茎、果相比，穿心莲叶中含穿心莲内酯最高；穿心莲内酯为酯类结构，在水溶液中易水解、开环、异构化，故影响药物稳定性。在对穿心莲内酯的稳定性研究中发现，在不同温度、不同pH值环境、不同的生物样品及不同有机溶剂中，穿心莲内酯稳定性都有较明显的差异。温度越低，穿心莲内酯的稳定性越好；在碱性条件下不稳定，且随着碱性强度的增加，其不稳定性增强；在pH值为7的条件下，该药并不稳定，其最稳定的pH值为3～5；在酸性条件下，该药较稳定，但并非酸性越强，稳定性就越好。目前已经发现穿心莲内酯具有以下药理作用：抗菌消炎、解热作用；抗癌和免疫调节作用；病毒和免疫增强作用；心血管作用；保护肝脏。[3-7] 正由于穿心莲内酯具有这样广泛的药理作用，也使得人们对穿心莲内酯的提取工作发
病理生理（一） 一、选择题： 1、疾病的概念中下列哪项陈述较确切：是机体在一定病因损害下，因自稳调乱而发生的异常生命活动。 2、下列哪项陈述是正确的：没有病因存在，疾病肯定不会发生。 3、疾病发生必不可少的因素是：疾病发生的原因。 4、典型的疾病过程不包括下列哪期：恢复期。 5、下述哪项不符合完全康复的标准：遗留有基本病理变化，通过机体的代偿来维持内环境相对稳定。 6、不完全康复时：基本病理变化尚未完全消失。 7、死亡是指：机体作为一个整体的功能永久性停止。 8、全脑功能的永久性停止称为：脑死亡。 9、下列哪项不宜作为脑死亡的标准：心跳。 10、细胞内外液成分不同，它们之间渗透压的关系是：细胞内外液基本相等。 11、组织液和血浆两者含量的主要差别是：蛋白质。 12、决定细胞外液渗透压的主要因素是：Na+。 13、细胞内液中含量最多的阳离子是：K+。 14、血浆中含量最多的阴离子是：Cl-。 15、机体通过下述哪项的移动来维持细胞内外渗透压的平衡：水。 16、何种类型的水与电解质失衡最易发生外周循环衰竭：低渗性脱水。 17、决定脱水类型的因素为：细胞外液透压。 18、下述哪一情况可引起低渗性脱水：大量体液丢失后只补水。 19、低渗性脱水的特征是：失钠＞失水，血浆渗透压＜280mmol/L，血钠＜130mmol/L。 20、一小儿严重腹泻，只补充葡萄糖溶液，最易引起何种水与电解质平衡紊乱：低渗性脱水。 21、高渗性脱水时体液分布改变的特点：细胞内外液均减少，但以细胞内液减少为主。 22、高热患者不作任何处理，易发生：高渗性脱水。 23、低渗性脱水时的主要失水部位是：细胞外液。 24、某病人反复呕吐、腹泻伴高热2天，最易发生何种水与电解质低谢紊乱：高渗性脱水。 25、低钾血症最常见的原因是：经消化道失钾。 26、高渗性脱水患者最早晨出现的表现：口渴。 27、哪种类型的水、电解质平衡紊乱可导致颅内出血：高渗性脱水。 28、下述哪项不是水中毒时的基本特征：抗利尿激素分泌减少。 29、严重高钾血症对心肌的影响：兴奋性降增高，传导性降低，自律性降低。 30、急性低钾血症引起神经肌肉兴奋性降低的主要机制是：静息电位负值增大。 31、输入大量库存过久的血液易导致：高钾血症。 32、下列哪项不是高钾血症和低钾血症均可引起的改变：心肌自律性增高。 33、下列哪项与急性低钾血症的描述不相符：心肌兴奋性降低。 34、高钾血症对机体的最大危害是：心室纤颤和停跳。 35、机体在分解代谢过程中产生的最大量的酸性物质是：碳酸。 36、机体代谢过程中产生的挥发酸是指：碳酸。 37、血浆中最重要的缓冲对是：NaHCO3/H2CO3。 38、对挥发酸进行缓冲的主要缓冲对是：血红蛋白缓冲对。
穿心莲内酯的提取分离和鉴定 一、目的要求 学习中药中内酯类成分的提取分离及检识，通过实验要求： 1.掌握从穿心莲中提取、分离穿心莲内酯的操作方法。 2.熟悉穿心莲内酯类成分的性质和检识方法。 3.了解去除叶绿素的方法。 二、实验原理 穿心莲中的内酯类化合物易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂，故利用性质选用乙醇提取之；穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色除去叶绿素类杂质；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在乙酸乙酯中溶解度不同，初步讲两者分离；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯结构上的差异，用氧化铝柱分离二者。 三、实验仪器与试剂 仪器：圆底烧瓶、旋转蒸发仪、冷凝管、烧杯、天平、胶头滴管、试管、量筒、薄层板等 试剂：穿心莲粗品、穿心莲对照品、乙醇、乙酸乙酯、活性炭、碳酸钠、水等 四、实验过程 （一）提取分离流程图
穿心莲粗粉20克 0.01%、8倍量的碳酸钠煎煮2次，每次2 h 合并提取液 提取液用25%HCl调节PH至6-7 10%活性炭脱色，蒸发(1/4-1/5) 中性氧化铝柱色谱 乙醇洗脱 95%乙醇溶解 精制穿心莲内酯 五、注意事项 1、穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而树脂化。因此所提取的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降至极低，难以提取得到。 2、水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来，水提取出膏率较高，但穿心莲内酯水溶性较低，不适合穿心莲的提取。 3、穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较好。当溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶。 4、加入的活性炭不能过多，否则会吸附穿心莲内酯，使产率降低。 六、思考题
水、电解质代谢紊乱 综合练习 一、单项选择题 1、低渗性脱水时 A．血钠浓度↑，细胞外液↓ B．血钠浓度↓，细胞外液↑ C．血钠浓度↓，细胞外液↓ D．血钠浓度↓，细胞内液↓ E．血钠浓度↑，细胞内液↓ 2、最易引起口渴、少尿的是 A．低渗性脱水 B．高渗性脱水 C．水中毒 D．水肿 E．等渗性脱水 3、易出现休克倾向的水、钠代谢紊乱是 A．高渗性脱水 B．低渗性脱水 C．等渗性脱水 D．水中毒 E．水肿 4、严重腹泻患者，皮肤弹性差，眼窝凹陷，血钠<130mmol/L, 脉搏快，血压88/ 69mmHg ，其水、电解质平衡紊乱的类型是 A．休克 B．水中毒 C．高渗性脱水 D．等渗性脱水 E．低渗性脱水 5、某肺炎患者，高热，口渴明显，少尿，尿钠浓度高，血清钠＞150mmol/L，其水、电解质平衡紊乱的类型是 A．休克 B．水中毒 C．高渗性脱水 D．等渗性脱水 E．低渗性脱水 7、昏迷病人易发生 A.低渗性脱水 B.高渗性脱水 C.等渗性脱水 D.水中毒 E.水肿 8、哪一类水、电解质失衡会发生脱水热 A.低渗性脱水 B.高渗性脱水 C.等渗性脱水 D.水中毒 E.水肿 9、盛暑行军时只大量饮用纯净水可引起 A.低渗性脱水 B.高渗性脱水 C.等渗性脱水 D.水中毒 E.水肿 10、判断脱水类型的主要依据是 A.体液丢失的总量 B.细胞外液丢失的总量 C.细胞内液丢失的总量 D.细胞外液的渗透压 E.细胞内液的渗透压
11、高钾血症是指血清钾高于 A．2.0 mmol/L B．3.5mmol/L C．4.5 mmol/L D．5.5mmol/L E．6.5 mmol/L 12、低钾血症可引起 A．血pH↑，尿pH↑ B．血pH正常，尿pH正常C．血pH↓，尿pH↓ D．血pH↓，尿pH↑E．血pH↑，尿pH↓ 13、高钾血症可引起 A．血pH↑，尿pH↑ B．血pH正常，尿pH正常C．血pH↓，尿pH↓ D．血pH↓，尿pH↑E．血pH↑，尿pH↓ 14、下列哪项原因既可引起低钾血症，又使机体缺钾 A．醛固酮 B．碱中毒 C．肾上腺素 D．胰岛素 E．低钾性周期性麻痹 15、低钾血症时心肌电生理的变化是 兴奋性传导性自律性收缩性 A．↑↓↓↑ B．↑↓↑↑ C．↓↑↑↓ D．↓↓↑↑ E．↑↑↓↓ 16、高钾血症时心肌电生理特性的改变是 兴奋性传导性自律性收缩性 A ．↓→↑↑↑↑ B．↑↓↑↑ C．↓↓↓↓ D．↑→↓↓↓↓ E．↑→↓↑↑↑ 17、大量输入库存过久的血会导致 A．高钠血症 B．低钠血症 C．低镁血症 D．低钾血症 E．高钾血症 二、多项选择题 1、大量出汗后可发生的水、电解质紊乱有 A．低渗性脱水 B．高渗性脱水 C．等渗性脱水 D．高钠血症 E．低钠血症 2、低渗性脱水患者早期临床表现有 A．口渴 B．皮肤弹性差 C．血压降低 D．脉细速 E．少尿 3、高渗性脱水患者早期临床表现有
穿心莲内酯提取工艺 1 设备与仪器 I．I 设备多功能提取罐 1．2 仪器：Agilent-1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)； Hypersil ODS 色谱柱250×4.6mm，5 7 m ；TV-1221型紫外-可见分光光度计，北京普析制造；Sartorius BS210S电子天平(德国塞多利斯股份公司)；ZF-2型三用紫外仪(上海安亭电子仪器厂)；超声波清洗器 (上海科导超声仪器有限公司) 2 提取工艺 2．1 工艺： ① 粉碎：取穿心莲叶，粉碎机上安装孔径为8ram的筛网粉碎成粗粉。 ②提取：穿心莲粗粉用4倍量95 乙醇回流提取两次，第 -次2小时，第二次1．5小时。合并回流液，滤过，回收乙醇浓缩至每 lml含2g药材．冷却10℃-20℃，静止12小时析出结晶，滤取结晶物。 ③ 重结晶：结晶物加入lO-15倍量的95%乙醇(以结晶物重量计)，搅拌溶解，加0.5 活性炭(以结晶物重量计)加热回流3O分钟，过滤，滤液回收乙醇，静止l2小时以上，滤取结晶物。 ④ 干燥：结晶物在50-70℃ 减压干燥6-8小时。 ⑤ 粉碎：干燥物经100目筛粉成细粉。 ⑥ 检测水份，含量合格后包装入库。 2．2 工艺研究：根据穿心莲内酯L2]的化学性质，在沸乙醇中溶解，在甲醇、乙醇中略溶，在水或乙醚中不溶。我们选择用不同浓度的乙醇做溶媒回流提取穿心莲内酯考察对回流提取时间、提取次数对产品收率的影响。 2．2．1 提取次数的考察：穿心莲粗粉(检测含量)。称取六份，每份 lkg，分成三组，分别加入4倍量(以药材重量计)95 乙醇，第-组回流提取-次，第二组回流提取两次，第三组回流提取三次。每次提取时间 2小时，分别合并提取液，回收乙醇，浓缩至500ml，测定体积做为储备液。 ① 出膏率的测定精密吸取储备液10ml于恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥至恒重，移置干燥器中冷却0.5小时，称重，计算即得。 ② 含量测定将上述储备液冷却至l0-20℃ ，静止12小时以上，有结晶析出，滤取结晶物于6O-7O℃ 减压干燥6-8小时，干燥物称重，按照WS-10001-(HD-0971)-2002穿心莲内酯含量测定项下的方法测定含量，并计算药材中穿心莲内酯的转移率。由上表可知，提取次数的增加，出膏率、转移率呈上升趋势，1组出膏率和转移率较低，原因是提取次数少，提取不完全。二组和三组的出膏率和转移率比较接近，从能源消耗和乙醇消耗等经济方面考虑，选择二组即提取两次比较合理。 2．2．2 提取时间的考察：见表2。穿心莲粗粉(检测含量)，称取六份(每个实验平行操作两份)，每份lkg，分成三组，分别加入4倍量(以药材重量计)95 乙醇，回流提取两次。第-组回流提取两次，每次时间为1小时。第二组回流提取
穿心莲提取工艺研究 【摘要】目的对穿心莲的水提和醇提工艺进行对比研究，对穿心莲的叶、茎两个有效部位进行提取研究，尝试摸索出使用合格药材就能达到提取效果的提取工艺，并对药材的含量限度 进行研究。结果加水16倍，短时间加热回流水提含量损失最少，随温度升高，减少率呈现 增加的趋势。结论穿心莲药材45%乙醇提取工艺下，对药材限度要求低，提取率较高，可以 尝试应用到生产中。 【关键词】穿心莲；水提；醇提；提取工艺 【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-07-434-03 本品为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分。秋初茎 叶茂盛时采割，晒干。本实验采用水加热回流提取法[3]对穿心莲的不同药用部位进行提取[4]，并对其提取工艺进行优化[1]。 1.仪器与试药 SatiousCPA224电子天平（赛多利斯）；回流提取装置五套，电加热套（上海精密科学仪器 有限公司）。穿心莲产自安徽，亳州市永刚饮片厂有限公司，批号为20160102，经鉴定为爵 床科植物穿心莲的干燥地上部分。 2.水提方法与结果 2.1穿心莲水提取液热稳定性研究 用大锅煎煮穿心莲药材适量，煎煮两次，每次10分钟，合并煎液，冷却后留用做热稳定性 试验。取1000ml穿心莲提取液置于1000ml三角瓶中，用橡胶塞打孔插入温度计封口，放入 水浴中，分别在60℃、65℃、70℃、80℃、90℃进行穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量变化 的检测，见图表1。 根据图表1中数据比较可知，穿心莲内酯含量、脱水穿心莲内酯含量和其总量随着温度的升高，其减少率也在逐渐增加，由于90℃只进行了2小时的测量，所以减少率要低于部分进行 了5个小时监测的温度条件。（预测在受热初期，穿心莲内酯存在分解和转化两个过程，一 部分分解掉，另一部分转化为脱水穿心莲内酯，故在受热初期，脱水穿心莲内酯的含量减少 不明显，而后面随着穿心莲内酯的含量减少量，脱水穿心莲的转化量下降，显示的减少量就 增加了。） 由于高温下穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量减少率随着温度增高而变大，那么在浓缩过 程中只需要根据最高温度，通过计算最大减少量来计算最低药材含量限度。 2.2水浸泡提取研究 根据热稳定性试验结果发现，在受热时穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量减少损失较大，故 尝试采用浸泡的方法替代加热回流的方法，使在损失较小的情况下尽可能的提取出有效成分。 取各部位药材适量，按照药材质量倍数进行加水，加水后保证水能完全没过药材，开始进行 浸泡提取。提取的温度为常温下，40℃和80℃的水浴锅中，间隔取样时间和记录情况如下表2。 根据图表2的三组数据可知，常温和40℃时浸泡提取4H后含量不再增加，而80℃含量在浸泡提取3H时最大，4H时反而开始下降。记录提取的最大量。
穿心莲内酯 穿心莲内酯，分子式C20H30O5，天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。 基本信息 【产品名称】穿心莲内酯 【英文名称】Andrographolide 【别名】穿心莲乙素，雄茸内脂 【C A S 号】5508-58-7 【化学名称】293H)-Furanone,3-[2-[decahydro-6-hydroxy-5- (hydroxy-methyl)-5,8a-dimethyl-2-methylene-1-naphthalenyl] ethylidene]dihydro-4-hydroxy- 【植物来源】爵床科植物穿心莲Andrographis Paniculata(Burm.f) Ness的全草或叶。 【分子式】C20H30O5; 【结构式】 【分子量】350.44 【成分分类】二萜内酯类 【执行标准】WS-10001-(HD-0971)-2002 【规格】穿心莲内酯含量99% 2物理性质 白色方棱形或片状结晶（乙醇或甲醇），无臭，味苦。在沸乙醇中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，极微溶于氯仿，在水或乙醚中几乎不溶。熔点230～231℃，（α）17D -126.6±2°（冰醋酸）,[α]D –112.7 (c,0.53,MeOH)，与碱性2% 3,5－二硝基苯甲酸试剂，显紫红色，异羟肟酸铁反应呈阳性。密度(21℃）1.2317g/cm3。UVλEtOHmax nm （ε）,223(12300); IRvKBrmax cm-1: 3448,3390～?279(OH),1828,1647,906 (C=CH2),1727 （α，β-不饱和γ-内酯）,1672 （共的C=C)；13CNMR。
HPLC法测定穿心莲注射液中穿心莲内酯的含量 目的建立穿心莲注射液中穿心莲内酯的高效液相色谱法含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定含量，色谱柱：Agilent TC-C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（50∶50）；检测波长：224 nm；流速：1.0 ml/min。结果穿心莲内酯在0.02 022～0.1011 mg/ml（r=0.9999）内呈良好的线性关系，平均回收率（n=6）为99.1%（RSD=1.1%）。结论建立的测定穿心莲内酯的方法准确有效，有助于进一步完成穿心莲注射液的质量控制方法。 [Abstract]Objective To establish the HPLC method for determination of Andrographolide content in Chuanxinlian Injection.Methods HPLC was used in content determination，the chromatographic column was Agilent TC-C18 （4.6 mm×150 mm，5 μm），the mobile phase consisted of methanol-water （50：50），the detection wavelength was 224 nm and the flow rate was 1.0 ml/min.Results The good linear relation was maintained when Andrographolide was from 0.02 022 to 0.1011 mg/ml （r=0.9999）.The average recovery was 99.1% （n=6，RSD=1.1%）.Conclusion The method of determination of Andrographolide is accurate and effective，which can help to complete the quality control method of Andrographolide Injection. [Key words]HPLC method；Chuanxinlian Injection；Andrographolide；Content 穿心莲注射液是由穿心莲的乙醇提取物制成的注射液，收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册，具有清热解毒的功效，主要用于咽喉肿痛、肺热咳嗽、热痢，亦可用于上呼吸道感染、细菌性痢疾等。穿心莲注射液中的主要有效成分穿心莲内酯（Andrographolide），是爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata （Burm.f.）Nees的有效成分之一，具有抗菌、消炎、止咳平喘、清热解毒、凉血消肿等作用，广泛用于上呼吸道、消化道细菌感染所引起的各种疾病[1-6]。现行质量标准采用紫外分光光度法测定穿心莲内酯含量，操作繁琐，且显色时间的长短对测定结果影响较大。本实验采用HPLC法对穿心莲注射液中有效成分穿心莲内酯的含量进行测定，通过大量实验研究，建立了穿心莲内酯的HPLC分析方法，方法准确有效，现报道如下。 1仪器与试药 Agilent1100型高效液相色谱仪含真空脫气机、低压四元泵、自动进样器和VWD检测器（美国安捷伦公司）；AUW120D型电子天平（日本岛津公司）；SK8200LH型超声仪（昆山超声仪器有限公司）；穿心莲内酯对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110797-201509）；穿心莲注射液（海南制药厂有限公司，批号：150104、150201、150914）。甲醇（色谱纯），水（超纯水）。 2方法与结果
穿心莲提取工艺研究 发表时间：2016-06-24T14:52:45.340Z 来源：《系统医学》2016年第2卷第7期作者：朱金会1 李雨辰2 [导读] 对穿心莲的水提和醇提工艺进行对比研究，对穿心莲的叶、茎两个有效部位进行提取研究. 1.青岛华仁太医药业有限公司山东青岛 266111 【摘要】目的对穿心莲的水提和醇提工艺进行对比研究，对穿心莲的叶、茎两个有效部位进行提取研究，尝试摸索出使用合格药材就能达到提取效果的提取工艺，并对药材的含量限度进行研究。结果加水16倍，短时间加热回流水提含量损失最少，随温度升高，减少率呈现增加的趋势。结论穿心莲药材45%乙醇提取工艺下，对药材限度要求低，提取率较高，可以尝试应用到生产中。 【关键词】穿心莲；水提；醇提；提取工艺 【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-07-434-03 本品为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分。秋初茎叶茂盛时采割，晒干。本实验采用水加热回流提取法[3]对穿心莲的不同药用部位进行提取[4]，并对其提取工艺进行优化[1]。 1.仪器与试药 SatiousCPA224电子天平（赛多利斯）；回流提取装置五套，电加热套（上海精密科学仪器有限公司）。穿心莲产自安徽，亳州市永刚饮片厂有限公司，批号为20160102，经鉴定为爵床科植物穿心莲的干燥地上部分。 2.水提方法与结果 2.1穿心莲水提取液热稳定性研究 用大锅煎煮穿心莲药材适量，煎煮两次，每次10分钟，合并煎液，冷却后留用做热稳定性试验。取1000ml穿心莲提取液置于1000ml 三角瓶中，用橡胶塞打孔插入温度计封口，放入水浴中，分别在60℃、65℃、70℃、80℃、90℃进行穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量变化的检测，见图表1。 根据图表1中数据比较可知，穿心莲内酯含量、脱水穿心莲内酯含量和其总量随着温度的升高，其减少率也在逐渐增加，由于90℃只进行了2小时的测量，所以减少率要低于部分进行了5个小时监测的温度条件。（预测在受热初期，穿心莲内酯存在分解和转化两个过程，一部分分解掉，另一部分转化为脱水穿心莲内酯，故在受热初期，脱水穿心莲内酯的含量减少不明显，而后面随着穿心莲内酯的含量减少量，脱水穿心莲的转化量下降，显示的减少量就增加了。） 由于高温下穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量减少率随着温度增高而变大，那么在浓缩过程中只需要根据最高温度，通过计算最大减少量来计算最低药材含量限度。 2.2水浸泡提取研究 根据热稳定性试验结果发现，在受热时穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量减少损失较大，故尝试采用浸泡的方法替代加热回流的方法，使在损失较小的情况下尽可能的提取出有效成分。 取各部位药材适量，按照药材质量倍数进行加水，加水后保证水能完全没过药材，开始进行浸泡提取。提取的温度为常温下，40℃和80℃的水浴锅中，间隔取样时间和记录情况如下表2。 根据图表2的三组数据可知，常温和40℃时浸泡提取4H后含量不再增加，而80℃含量在浸泡提取3H时最大，4H时反而开始下降。记录提取的最大量。 40℃下茎提取的试验，是早期试验，药材与常温与80℃的药材不同，含叶量的不同致使结果无可比性，但是脱水穿心莲内酯提取量仍然较低，试验结果发现，在80℃下，虽然会有受热损失，但是提取量仍然大于没有受热损失的常温浸泡提取。但是浸泡提取的脱水穿心莲含量较低，即使全用叶子提取也不能达到限度要求。 2.3水提提取时间研究 根据浸泡提取试验可以发现，温度仍然对穿心莲提取的效率影响较大，高温可以破坏药材内部结构，提取更多的有效成分，但是高温也能破坏有效成分，故尝试寻找加热过程中的含量峰值，来确定加热时间。实验结果见图表3。 根据趋势发现，当加热回流提取穿心莲，时间大于0.5H时，穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量随着提取时间增长而减少，所以提取量的最大值应出现在0.5H以内。 根据图表4、图表5、图表6所示，穿心莲的叶提取量要大于茎的提取量，叶的提取量变化更为显著，茎的提取量在前30min的变化不显著，叶的提取量在100℃后10min达到最大值，故穿心莲提取应采用短时加热回流来保存提取出来的有效成分。 2.4水提加水量研究 早时间研究实验发现，穿心莲水提加热回流提取的最佳时间是在到达100℃后提取10min，按照这个提取时间，进行两次提取，最终确定总加水量。 根据之前的提取经验，加水20倍之后提取总量不再增加，所以进行了8倍到20倍水的单次提取试验，根据试验结果所示，提取添加20倍水时，提取量最大，故第一次提取为了尽可能多的提取出穿心莲中有效成分，防止已提取出的成分受到损失，采用20倍的一半进行加水，即10倍水提取。 根据图表7可知，在加水量为10+6倍水时，提取量已经达到最大，再次进行试验，结果有重复性，故确定+加水倍数为10+6倍。 3．醇提方法和结果 3.1 由于穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在水中溶解度有限，水的提取能力也有限，造成提取效率较低，所以在穿心莲的提取方法选择上，大部分采用的是醇提[5]，所以我们对穿心莲的醇提工艺进行了研究。在醇提时由于醇溶液的沸点低，首先降低了穿心莲的有效成分损失，其次是醇的提取能力强于水[6]，我们选取了30%、45%、85%的乙醇浓度进行试验[7]，由于30%乙醇的沸点是最高的，醇含量最低，所以我们用30%的乙醇进行提取时间试验，可以保证在相同提取时间内，45%和85%的乙醇提取过程中有效成分损失少于35%乙醇提取。 根据图表8所示，30%乙醇在提取过程中的含量在10分钟时达到顶峰，并在20分钟内无显著变化，30分钟时开始降低，所以提取时间定在10分钟。