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显微镜的种类及其使用方法

显微镜的种类及其使用方法

一、光学显微镜

光学显微镜是一种精密的光学仪器。当前使用的显微镜由一套透镜配合,因而可选择不同的放大倍数对物体的细微结构进行放大观察。普通光学显微镜通常能将物体放大1500~2000倍(最大的分辨力为0.2μm)。(一)光学显微镜的基本结构(附图-1)

1.光学部分包括目镜、物镜、聚光器和光源等。

(1)目镜:通常由两组透镜组成,上端的一组又称为“接目镜”,

下端的则称为“场镜”。两者之间或在场镜的下方装有视场光

阑(金属环状装置),经物镜放大后的中间像就落在视场光

阑平面上,所以其上可加置目镜测微尺。在目镜上方刻有放

大倍数,如10×、20×等。按照视场的大小,目镜可分为普

通目镜和广角目镜。有些显微镜的目镜上还附有视度调节机

构,操作者可以对左右眼分别进行视度调整。另有照相目镜

(NFK)可用于拍摄。

(2)物镜:由数组透镜组成,安装于转换器上,又称接物镜。通

常每台显微镜配备一套不同倍数的物镜,包括:①低倍物镜:

指1×~6×;②中倍物镜:指6×~25×;③高倍物镜:指25×~

63×;④油浸物镜:指90×~100×。其中油浸物镜使用时需

在物镜的下表面和盖玻片的上表面之间填充折射率为1.5左

右的液体(如香柏油等),它能显著地提高显微观察的分辨

率。其他物镜则直接使用。观察过程中物镜的选择一般遵循

由低到高的顺序,因为低倍镜的视野大,便于查找待检的具

体部位。

显微镜的放大倍数,可粗略视为目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。

(3)聚光器:由聚光透镜和虹彩光圈组成,位于在载物台下方。聚光透镜的功能是将光线聚焦于视场范围内;透镜组下方的虹彩光圈可开大缩小,以控制聚光器的通光范围,调节光的强度,影响成像的分辨力和反差。使用时应根据观察目的,配合光源强度加以调节,得到最佳成像效果。

(4)光源:较早的普通光学显微镜借助镜座上的反光镜,将自然光或灯光反射到聚光器透镜的中央作为镜检光源。反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成。不用聚光器或光线较强时用凹面镜,凹面镜能起会聚光线的作用;用聚光器或光较弱时,一般都用平面镜。

新近出产的显微镜一般直接在镜座上安装光源,并有电流调节螺旋,用于调节光照强度。光源类型有卤素灯、钨丝灯、汞灯、荧光灯、金属卤化物灯等。

显微镜的光源照明方法分为两种:透射型与反射(落射)型。前者是指光源由下而上通过透明的镜检对象;反射型显微镜则是以物镜上方打光到(落射照明)不透明的物体上。

2. 机械部分包括镜座、镜柱、镜壁、镜筒、物镜转换器、载物台和准焦螺旋等。

(1)镜座:基座部分,用于支持整台显微镜的平稳。

(2)镜柱:镜座与镜臂之间的直立短柱,起连接和支持的作用。

(3)镜臂:显微镜后方的弓形部分,是移动显微镜时握持的部位。有的显微镜在镜臂与镜柱之间有一活动的倾斜关节,可调节镜筒向后倾斜的角度,便于观察。

(4)镜筒:安装在镜臂先端的圆筒状结构,上连目镜,下连接物镜转换器。显微镜的国际标准筒长为160 mm,此数字标在物镜的外壳上。

(5)物镜转换器:镜筒下端的可自由旋转的圆盘,用于安装物镜。观察时通过转动转换器来调换不同倍数的物镜。

(6)载物台:镜筒下方的平台,中央有一圆形的通光孔。用于放置载玻片。载物台上装有固定标本的弹

簧夹,一侧有推进器,可移动标本的位置。有些推动器上还附有刻度,可直接计算标本移动的距离以及确定标本的位置。

(7)准焦螺旋:装在镜臂或镜柱上的大小两种螺旋,转动时可使镜筒或载物台上下移动,从而调节成像系统的焦距。大的称为粗准焦螺旋,每转动一圈,镜筒升降10mm;小的为细准焦螺旋,转动一圈可使镜筒仅升降0.1mm。一般在低倍镜下观察物体时,以粗准焦螺旋迅速调节物像,使之位于视野中。在此基础上,或在使用高倍镜时,用细准焦螺旋微调。必须注意,一般显微镜装有左右两套准焦螺旋,作用相同,但切勿两手同时转动两侧的螺旋,防止因双手力量不均产生扭力,导致螺旋滑丝。

(二)普通光学显微镜的基本成像原理

光线→(反光镜)→遮光器→通光孔→镜检样品(透明)→物镜的透镜(第一次放大成倒立实像)→镜筒→目镜(再次放大成虚像)→眼。

(三)普通光学显微镜的使用过程

1.镜检前的准备

室内应清洁而干燥,实验台台面水平,稳固无震动,显微镜附近不应放置腐蚀性的试剂。

从显微镜柜或镜箱内取出显微镜时,要用右手紧握镜臂,左手托住镜座,平稳地取出,放置在实验台桌面上,置于操作者左前方,距实验台边缘约10cm,镜臂朝自己,镜筒朝前。实验台右侧放绘图用具。2.调节光源

如需利用外置光源,宜采用散射的自然光或柔和的灯光。直射的太阳光会对观察者的眼睛造成伤害。

转动转换器,使低倍镜正对通光孔,将聚光器上的虹彩光圈开到最大,观察目镜中视野亮度,同时调节反光镜角度,使光照达到最明亮最均匀。

自带光源的显微镜,可通过调节电流旋钮来调节光照的强弱。

3.装置待检玻片

将待观察的样品制作成临时或永久装片,放在载物台上,用弹簧夹固定,有盖玻片的一面朝上。移动推进器,调节待检样品至通光孔的中心。

4.低倍镜观察

将低倍镜对准通光孔,缓缓转动粗准焦螺旋,将物镜与装片的距离调至最近。注意不要压碎盖玻片。通过目镜观察,同时用粗准焦螺旋缓慢调节,直至物像出现,再用细准焦螺旋微调,同时调节光源亮度与虹彩光圈的大小,使物像达到最清晰的程度。并利用推进器把需要进一步放大观察的部分移至视野中央。

如果使用双筒目镜,应在观察前先调整双筒距离,使两眼视场合并。

5.高倍镜观察

转动转换器,选择较高倍数的物镜,用细准焦螺旋调节焦距,到物像清晰为止。

6.油镜观察

油浸物镜的工作距离(指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离)很短,一般在0.2 mm以内,且一般光学显微镜的油浸物镜没有“弹簧装置”,因此使用油浸物镜时,调焦速度必须放慢,避免压碎玻片,并使物镜受损。

(1)在低倍镜下找到观察目标,中、高倍镜下逐步放大,将待观察部位置于视野中央,调节光源和虹彩光圈,使通过聚光器的光亮达到最大。

(2)转动粗准焦螺旋,将镜筒上旋(或将载物台下降)约2 cm,加一小滴香柏油于玻片的镜检部位上。(3)将粗准焦螺旋缓缓转回,同时注意从侧面观察,直至油镜浸入油滴,镜头几乎与标本接触。

(4)从目镜中观察,用细准焦螺旋微调,直至物象清晰。

(5)镜检结束后,将镜头旋离玻片,立即清洁镜头。一般先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油滴。再用擦镜纸蘸少许乙醚-酒精混合液(2:3),擦去残留油迹,最后再用干净的擦镜纸擦净(注意向一个方向擦拭)。

7.还原显微镜

关闭内置光源并拔下电源插头,或使反光镜与聚光器垂直。旋转物镜转换器,使物镜头呈八字形位置

与通光孔相对。再将镜筒与载物台距离调至最近,降下聚光器。罩上防尘罩,将显微镜放回柜内或镜箱中。

二、几种特殊的光学显微镜

(一)暗视野显微镜

暗视野显微镜不具备观察物体内部的细微结构的功能,但可以分辨0.004μm以上的微粒的存在和运动。因而常用于观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。

暗视野显微镜的基本原理是丁达尔效应。当一束光线透过黑暗的房间,

从垂直于入射光的方向可以观察到空气里出现的一条光亮的灰尘“通路”,

这种现象即丁达尔效应。暗视野显微镜在普通的光学显微镜上换装暗视野

聚光镜后,由于该聚光器内部抛物面结构的遮挡,照射在待检物体表面的

光线不能直接进入物镜和目镜,仅散射光能通过,因而视野是黑暗的。操

作者通过目镜观察到的,是检物体的衍射光图像(附图1-2)。

暗视野显微镜的基本使用方法如下:

1.安装暗视野聚光器(或用厚实的黑纸片制成遮光板,放在普通显微

镜的聚光器下方,也能得到暗视野效果)。

2.选用强光源,一般用显微镜灯照明,以防止直射光线进入物镜。

3.在聚光器和玻片之间加一滴香柏油,避免照明光线于聚光镜上进行

全反射,达不到被检物体,而得不到暗视野照明。

4.进行中心调节,即水平移动聚光器,使聚光器的光轴与显微镜的光

轴严格位于一直线上。升降聚光器,将聚光镜的焦点(图2中圆锥

光束的顶点)对准待检物。

5.选用与聚光器相应的物镜,调节焦距,按普通显微镜的方法操作。

(二)体视显微镜

体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜,其成像为正立三维的空间影像,

并具有立体感强、成像清晰宽阔、长工作距离(通常为110 mm)以及连续放

大观看等特点。生物学上常用于解剖过程中的实时观察(附图1-3)。

普通光学显微镜的光源为平行光,因而形成的是二维平面影像;而体视

显微镜采用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束具有一定的夹角--体视角

(一般为12º-15º),因而能形成三维空间的立体图像。

体视显微镜与普通光学显微镜的使用方法相近,但更为便捷。二者的主

要区别在于:

1.体视显微镜的镜检对象可不必制作成装片。

2.体视显微镜载物台直接固定在镜座上,并配有黑白双面板或玻璃板,

操作者可根据镜检的对象和要求加以选择。

3.体视显微镜的成像是正立的,便于解剖操作。

4.体视显微镜的物镜仅一只,其放大倍数可通过旋转调节螺旋连续调节。

(三)荧光显微镜

荧光显微镜是利用细胞内物质发射的荧光强度对其进行定性和定量研究的一种

光学工具。细胞内的荧光物质物质有两类,一类直接经紫外线照射后即可发荧光,

如叶绿素等;另有一些物质本身不具这一性质,但如果以特定的荧光染料或荧光抗

体染色,经紫外线照射后亦可发荧光(附图1-4)。

荧光显微镜的原理为利用一个高发光效率的点光源(如超高压汞灯),经过滤色

系统发出一定波长的光(如紫外光3650λ或紫蓝光4200λ)作为激发光,激发标本内的

荧光物质发射出各色的荧光后,再通过物镜后面的阻断(或压制)滤光片的过滤,最

后经由目镜的放大作用加以观察。阻断滤光片的作用有二:一是吸收和阻挡激发光

进入目镜以免干扰荧光和损伤眼睛;二是选择并让特定的荧光透过,表现出专一的荧光色彩。

荧光显微镜按照光路原理可分为两种:

1.透射式荧光显微镜:较为旧式的荧光显微镜,其激发光源通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光。其优点是低倍镜时荧光强,而缺点是随放大倍数增加其荧光减弱。所以它

仅适用于观察较大的标本材料。

2.落射式荧光显微镜:激发光从物镜向下落射到标本表面,即用同一

物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜(附图1-5)。光路中需加上

一个双色束分离器(分色镜),它与光轴呈45º角,激发光被反射

到物镜中,并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表

面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,返回到双色束分离器,

使激发光和荧光分开,残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同

的激发滤片/双色束分离器/阻断滤片的组合插块,可满足不同荧

光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀,成像

清晰,放大倍数愈大荧光愈强。

(四)相差显微镜

相差显微镜是能将光通过物体时产生的相位差(或光程差)转变为振幅(光强度)变化的显微镜。主要用于观察活细胞、不染色的组织切片或缺少反差的染色标本。

人眼只能鉴别可见光的波长(颜色)和振幅的变化,不能鉴别相位的变化。而大多数生物标本高度透明,光波通过后振幅基本不变,仅存在相位的变化。相差显微镜基本把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路,同时被延迟了1/4λ(波长),如果再增加或减少1/4λ,则光程差变为1/2λ,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减下,提高反差(见图6)。

从结构上看,相差显微镜与普通光学显微镜不同之处在于:

1.环形光阑

具有环形开孔的光阑,安装在光源与

聚光器之间,作用是使透过聚光器的光线

形成空心光锥,聚焦到标本上。

2.相位板

相差显微镜在物镜内部增加了涂有氟

化镁的相位板,作用是将直射光或衍射光

的相位推迟1/4λ。相板上有两个区域,直

射光通过的部分叫“共轭面”,衍射光通过

的部分叫“补偿面”。相位板按工作效果分

为两种类型:

(1)A+相板:将直射光推迟1/4λ,两组光波合轴后光波叠加,振幅加大,标本结构比周围介质更加明亮,形成亮反差(或称负反差)。

(2)B+相板:将衍射光推迟1/4λ,两组光线合轴后光波相减,振幅变小,标本结构比周围介质更加暗淡,形成暗反差(或称正反差)。

带有相板的物镜叫相差物镜,常在物镜外壳上标以“Ph”字样。

3.合轴调节望远镜

相差显微镜配备有一个合轴调节望远镜(在外壳上标有“CT”符号),用于调节环状光阑的像与相板共轭面完全吻合,以便实现对直射光和衍射光的特殊处理。使用时拨去一侧目镜,插入合轴调节望远镜,调节合轴调节望远镜的焦点,视野中会呈现两个圆环,分别是明亮的环状光阑圆环与较暗的相板上共轭面圆环。再转动聚光器上的环状光阑的两个调节螺旋,使两环完全重叠。如明亮的光环过小或过大,可调节聚光器的升降旋钮,使两环完全吻合。如果聚光器已升到最高点或降到最低点而仍不能矫正,说明玻片太厚了,

应更换。调好后即可取下合轴调节望远镜,换回目镜。

4.绿色滤光片

用于调整光源的波长。照明光线的波长不同,会引起相位的变化,为了获得良好的相差效果,相差显微镜要求使用波长范围比较窄的单色光,通常是用绿色滤光片来调整。

相差显微镜的使用步骤如下:

(1)根据待检标本的性质及要求,挑选适合的相差物镜。

(2)将标本玻片放到载物台上,进行光轴中心的调整。

(3)使用合轴调节望远镜,调整环状光阑与相板上的共轭面圆环完全重叠吻合后,换回目镜。在观察过程中,每次更换物镜倍数时,必须重新进行环状光阑与相板共轭面圆环吻合的调整。

(4)加绿色滤光片,按普通光学显微镜的操作步骤进行观察。

(五)倒置显微镜

倒置显微镜的结构和普通显微镜基本相同,只不过物镜与照明系统位置交换,前者在载物台之下,后者在载物台之上。主要用于观察培养的活细胞,需配制相差物镜。

(六)偏光显微镜

偏光显微镜可用于检测具有双折射性的物质,如染色体、胶原、纤维

丝等(附图1-7)。和普通显微镜不同的是:

①偏光显微镜光源前配备偏振镜(起偏器),使进入显微镜的光线为偏振

光。

②镜筒中有检偏振镜(检偏器,一个偏振方向与起偏器垂直的的起偏器)。

③使用旋转载物台。

当载物台上放入单折射的物质时,无论如何旋转载物台,由于两个偏

振片是垂直的,显微镜里看不到光线,而放入双折射性物质时,由于光线

通过这类物质时发生偏转,因此旋转载物台便能检测到这种物体。

④配备补偿器或相位片;

⑤使用专用无应力物镜。

三、电子显微镜

电子显微镜是利用高速运动的电子束来代替光波的一种显微镜。光学显微镜下只能清楚地观察大于0.2 µm的结构。而小于0.2 µm的结构称为亚显微结构(submicroscopic structures)或超微结构(ultramicroscopic structures;ultrastructures)。要想看清这些更为细微的结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。电子束的波长要比可见光和紫外光短得多,并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比,也就是说电压越高波长越短。因此电子显微镜的分辨率远高于光学显微镜,目前可达0.2 nm,放大倍数可达80万倍。

电子显微镜的基本要结构包括镜筒、真空系统和电源柜三部分。镜筒主要由电子枪、电子透镜、样品架、荧光屏和照相机构等部件,自上而下地装配成一个柱体;真空系统包括机械真空泵、扩散泵和真空阀门三部分,并通过抽气管道与镜筒相联接;电源柜由高压发生器、励磁电流稳流器和各种调节控制单元组成。

电子透镜是电子显微镜镜筒中的关键部件。现代电子显微镜大多采用电磁透镜,由稳定的直流励磁电流通过带极靴的线圈产生的强磁场使电子聚焦。

电子枪的作用是发射并形成速度均匀的电子束,由灯丝(阴极)、栅极和阳极(加速极)构成。阴极管发射的电子通过栅极上的小孔形成射线束,经阳极电压加速后射向聚光镜,起到对电子束加速、加压的作用。使用中加速电压的稳定度要求不低于万分之一。

电子显微镜按结构和用途可分为透射式电子显微镜、扫描式电子显微镜、反射式电子显微镜和发射式电子显微镜等。其中生物学研究中使用最为广泛的是透射式和扫描式电子显微镜。前者常用于观察那些用普通显微镜所不能分辨的细微物质结构;后者主要用于观察固体表面的形貌。

(一)透射式电子显微镜

透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)的组件包括:

1.电子枪发射电子,由阴极、栅极、阳极组成。

2.聚光透镜即电子透镜,将电子束聚集,可用于控制照明强度和孔径角。

3.样品室放置待观察的样品,并装有旋转台,用以改变试样的角度,还有装配加热、冷却等设备。

4.物镜为放大率很高的短距透镜,作用是放大电子像。物镜是决定透射电子显微镜分辨能力和成像

质量的关键。

5.中间镜为可变倍的弱透镜,作用是对电子像进行二次放大。通过调节中间镜的电流,可选择物体

的像或电子衍射图来进行放大。

6.透射镜为高倍的强透镜,用将二次放大后的中间像进一步放大后在荧光屏上成像。

7.二级真空泵对样品室抽真空。

8.照相装置用以记录影像。

由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量,必须制备更薄的超薄切片,通常为50~100 nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。通常用薄切片法或冷冻蚀刻法制备:

(1)薄切片法通常以锇酸和戊二醛固定样品,以环氧树脂包埋,以热膨胀或螺旋推进的方式推进样品切片,切片厚度20~50 nm,采用重金属盐染色,以增大反差。

(2)冷冻蚀刻法亦称冰冻断裂法。将标本置于-100˚C的干冰或-196˚C的液氮中冰冻后,以冷刀急速断开标本。断裂的标本升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出断面结构,称为蚀刻。蚀刻完成后,向断面以45º角喷涂一层蒸气铂,再以90º角喷涂一层碳,加强反差和强度。然后用次氯酸钠溶液消化样品,剥下碳和铂的膜,称为复膜,能显示标本蚀刻面的形态。在电镜下观察得到的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。

(二)扫描式电子显微镜

扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)于20世纪60年代问世,目前分辨力可达6~10 nm。其工作原理是由电子枪发射的精细聚焦电子束经两级聚光镜、偏转线圈和物镜射到样品上,扫描样品表面并激发出次级电子,次级电子的产生量与电子束入射角有关,即与样品的表面结构有关。次级电子经探测体收集后,由闪烁器转换为光信号,再经光电倍增管和放大器转变为电信号来控制荧光屏上电子束的强度,显示出与电子束同步的扫描图像。图像为立体形象,反映了标本的表面结构。

扫描电镜的标本在检验前,需进行固定、脱水处理,再喷涂上一层重金属微粒,重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。

显微镜种类及使用方法

显微镜的种类及其使用方法 一、光学显微镜 光学显微镜是一种精密的光学仪器。当前使用的显微镜由一套透镜配合,因而可选择不同的放大倍数对物体的细微结构进行放大观察。普通光学显微镜通常能将物体放大1500~2000 倍(最大的分辨力为0.2μm)。 (一)光学显微镜的基本结构(附图1) 1.光学部分包括目镜、物镜、聚光器和光源等。 (1)目镜通常由两组透镜组成,上端的一组又称为“接目镜”,下端的则称为“场镜”。两者之间或在场镜的下方装有视场光阑(金属环状装置),经物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面上,所以其上可加置目镜测微尺。在目镜上方刻有放大倍数,如10×、20×等。按照视场的大小,目镜可分为普通目镜和广角目镜。有些显微镜的目镜上还附有视度调节机构,操作者可以对左右眼分别进行视度调整。另有照相目镜(NFK)可用于拍摄。 (2)物镜由数组透镜组成,安装于转换器上,又称接物镜。通常每台显微镜配备一套不同倍数的物镜,包括:①低倍物镜:指1×~6×; ②中倍物镜:指6×~25×;

③高倍物镜:指25×~63×;④油浸物镜:指90×~100×。 其中油浸物镜使用时需在物镜的下表面和盖玻片的上表面之间填充折射率为 1.5 左右的液体(如香柏油等),它能显著地提高显微观察的分辨率。其他物镜则直接使用。观察过程中物镜的选择一般遵循由低到高的顺序,因为低倍镜的视野大,便于查找待检的具体部位。显微镜的放大倍数,可粗略视为目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 (3)聚光器由聚光透镜和虹彩光圈组成,位于在载物台下方。聚光透镜的功能是将光线聚焦于视场范围内;透镜组下方的虹彩光圈可开大缩小,以控制聚光器的通光范围,调节光的强度,影响成像的分辨力和反差。使用时应根据观察目的,配合光源强度加以调节,得到最佳成像效果。 (4)光源较早的普通光学显微镜借助镜座上的反光镜,将自然光或灯光反射到聚光器透镜的中央作为镜检光源。反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成。不用聚光器或光线较强时用凹面镜,凹面镜能起会聚光线的作用;用聚光器或光较弱时,一般都用平面镜。新近出产的显微镜一般直接在镜座上安装光源,并有电流调节螺旋,用于调节光照强度。光源类型有卤素灯、钨丝灯、汞灯、荧光灯、金属卤化物灯等。 显微镜的光源照明方法分为两种:透射型与反射(落射)型。前者是指光源由下而上通过透明的镜检对象;反射型显微镜则是以物镜上方打光到(落射照明)不透明的物体上。 2. 机械部分包括镜座、镜柱、镜壁、镜筒、物镜转换器、载物台和准焦螺旋等。 (1)镜座基座部分,用于支持整台显微镜的平稳。 (2)镜柱镜座与镜臂之间的直立短柱,起连接和支持的作用。 (3)镜臂显微镜后方的弓形部分,是移动显微镜时握持的部位。有的显微镜在镜臂与镜柱之间有一活动的倾斜关节,可调节镜筒向后倾斜的角度,便于观察。 (4)镜筒安装在镜臂先端的圆筒状结构,上连目镜,下连接物镜转换器。显微镜的国际标准筒长为160 mm,此数字标在物镜的外壳上。 (5)物镜转换器镜筒下端的可自由旋转的圆盘,用于安装物镜。观察时通过转动转换器来调换不同倍数的物镜。 (6)载物台镜筒下方的平台,中央有一圆形的通光孔。用于放置载玻片。载物台上装有固定标本的弹簧夹,一侧有推进器,可移动标本的位置。有些推动器上还附有刻度,可直接计算标本移动的距离以及确定标本的位置。 (7)准焦螺旋装在镜臂或镜柱上的大小两种螺旋,转动时可使镜筒或载物台上下移动,从而调节成像系统的焦距。大的称为粗准焦螺旋,每转动一圈,镜筒升降10mm;小的为细准焦螺旋,转动一圈可使镜筒仅升降0.1mm。一般在低倍镜下观察物体时,以粗准焦螺旋迅速调节物像,使之位于视野中。在此基础上,或在使用高倍镜时,用细准焦螺旋微调。必须注

显微镜的构造和使用方法

显微镜的构造和使用方法 一、显微镜的构造 显微镜的种类很多,我们常用的为普遍光学显微镜。显微镜可分为两个部分:机械部分和光学部分。 (一)机械部分 1、镜座为显微镜最下面的马蹄形铁座。其作用是支持显微镜的全部重量。使其稳立于工作台上。 2、镜柱镜座上的直立短柱叫做镜柱。 3、镜臂镜柱上方的弯曲的弓形部分叫做镜臂,是握镜的地方。镜臂和镜柱之间有一个能活动的倾斜关节,可使显微镜向后倾斜,便于观察。 4、镜筒安装在镜臂上端的圆筒叫做镜筒。镜筒长度一般为160毫米,上端安装目镜,下端连接转换器。 5、转换器镜筒下端的一个能转动的圆盘叫做转换器。其上可以安装几个接物镜,观察时便于调换不同倍数的镜头。 6、载物台镜臂下端安装的一个向前伸出的平面台叫做载物台。用于放置观察用的玻片标本,载物台中央有一圆孔,叫通光孔。通光孔左右两旁一般装有一对弹簧夹,为固实玻片之用,有的装有移片器,可使玻片前后左右移动。 7、准焦螺旋镜臂上装有两种可以转动的螺旋,能使镜筒上升或下降,称为准焦螺旋。大的螺旋转动一圈。镜筒升降10毫米,用于调节低倍镜,叫做粗准焦螺旋。小的螺旋围动一圈,镜筒升降0.1毫米。主要用于调节高倍镜,叫做细准焦螺旋。 (二)光学部分 1、反光镜位于马蹄形镜座之上方。一个可以转动的圆镜,叫做反光镜。反光镜具两面,一面为平面镜,一面为凹面镜。其用途是收集光线。平面镜使光线分布较均匀。凹面镜有聚光作用,反射的光线较强,一般在光线较弱时使用。 2、集光器位于载物台下方。由二、三块透镜组成,其作用是聚集来自反光镜的光线,使光度增强,并提高显微镜的鉴别力,集光器下面装有光圈(可变光阑),由十几张金属薄片组成,可以调节进入集光器光量的多少。若光线过强,则将光圈孔口缩小,反之则张大,集光器还可以上下移动,以调节适宜的光度。 3、接物镜又称物镜,由数组透镜组成,安装在转换器上,能将观察的物体进行第一次放大,是显微镜性能高低的关键性部件。每台显微镜上常备有几个不同倍数的物镜,物镜上所刻8×、10×、40×等就是放大倍数,习惯上把10-20倍的叫做低倍物镜;40-60倍的叫帮高倍物镜;90-100倍的叫做油镜。从形态上看,接物镜越长,放大倍数越高。 4、接目镜又称目镜,由二、三片透镜组成,安装在镜筒上端,其作用是把物镜放大的物体实像进一步放大。在目镜上方刻有5×、10×、20×等为放大倍数。从外表上看,镜头越长放大倍数越低。 显微镜的放大倍数,粗略计算方法为接目镜放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。如观察时所用接物镜为40×、接目镜为10×,则物体放大倍数为40×10=400倍。 二、显微镜的成像原理 显微镜的光学系统中,有两组重要的透镜,一组是接目镜。这两组透镜虽然结构很复杂,但它们的作用都相当于一个凸透镜。凸镜的成像原理,也就是显微镜放大成像的光学原理。只不过是通过两次放大而已,其成像原理和光路图如图所示。 接物镜的焦距较短,会聚能力较强,接目镜的焦距较长,会聚能力较弱。物体AB必须放在物镜(O1)的下焦点F1之外而小于二倍焦距(2f)的地方,这样就在物镜(O1)上方形成一个倒立的放大实像A1B1。这个实像正好位于目镜(O2)下焦点F2之内。而且距焦点F2极近的位置。A1B1通过目镜(O2)折射放大后形成一个放大的虚像A2B2。这个虚像A2B2相对于原来的物体AB来说,它是一个倒立而放大的虚像。 三、显微镜的使用步骤进行 1、安放安放显微镜要选择临窗或光线充足的地方。桌面要清洁、平稳,使用时先从镜箱中取出显微镜。右手握镜臂,左手托镜座,轻放桌上,镜筒向前,镜臂向后,然后安放目镜和物镜。用纱布拭擦镜身机械部分。用擦镜纸或绸布试控光学部分,不可随意用手指试擦镜头,以免影响观察效果。 2、对光扭转转换器,使低倍镜正对通光也,打开聚光器上的光圈,然后左眼对准接目镜注视,右眼睁开,用手翻转反光镜,对向光源,光强时用平面镜,光较弱时用凹面镜。这时从目镜中可以看到一个明亮的圆形视野,只要视野中光亮程度适中,光就对好了。 3、放玻片将要观察的玻片标本,放在载物台上,用弹簧夹或移光器将玻片固定。将玻片中的标本对准通光

光学显微镜的常用分类及操作规程

光学显微镜的常用分类及操作规程光学显微镜的常用分类 光学显微镜有多种分类方法:按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜;按图像是否有立体感可分为立体视觉和非立体视觉显微镜;按察看对像可分为生物和金相显微镜等;按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜等;按光源类型可分为一般光、荧光、紫外光、红外光和激光显微镜等;按接收器类型可分为目视、数码(摄像)显微镜等。所以在选购显微镜前,确定要确定哪种显微镜适合本身。常用的光学显微镜有生物显微镜、体视显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、相衬显微镜、倒置显微镜等。 1、生物显微镜 生物显微镜放大倍数一般在40X—2000X之间,光源为透射光。生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、讨论所用于微生物、细胞、

细菌、组织培育、悬浮体、沉淀物等的察看,同时可以察看其他透亮或者半透亮物体以及粉末、细小颗粒等物体。可连续察看细胞、细菌等在培育液中繁殖分裂的过程等。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛,是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证的必备检验设备。 2、体视显微镜 体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜,是一种具有正像立体感的目视仪器。体视显微镜放大倍数在7X—45X左右,也可以放大到90X,180X,225X。在生物、医学领域广泛用于切片操作和显微外科手术;在工业中用于微小零件和集成电路的观测、装配、检查等工作。它利用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束不是平行,而是具有确定的夹角——体视角(一般为12度——15度),为左右两眼供应一个具有立体感的图像。它实质上是两个单镜筒显微镜并列放置,两个镜筒的光轴构成相当于人们用双目察看一个物体时所形成的视角,以此形成三维空间的立体视觉图像。

光学显微镜的种类和使用方法

光学显微镜的种类和使用方法光学显微镜是一种常用的实验室设备,它可以帮助我们观察微 小的物质结构。不同种类的光学显微镜有着不同的特点和用途, 了解它们的特点和使用方法可以帮助我们更好地使用它们,提高 观察效果。本文将介绍常见的几种光学显微镜的种类和使用方法,让读者更好地了解它们。 一、简单光学显微镜 简单光学显微镜是最基本的光学显微镜,由镜头、光源、物镜、目镜、舞台等组成。它适用于初学者,用于观察大致结构和简单 器官。使用简单光学显微镜时,首先需要将样本放在舞台上,然 后通过旋转物镜和目镜缩放以获得最清晰的图像。使用时需要注 意光源的亮度和样本和物镜之间的距离。 二、复合光学显微镜 复合光学显微镜是一种更高级的光学显微镜,它由两个或多个 光学系统组成,可以通过投影、照射等方式观察样本。它的功能 非常全面,适用于观察更复杂的结构和细胞。使用时,可以通过

选择不同的光源和目镜来调整放大倍数和观察角度,以获得需要的图像。 三、荧光显微镜 荧光显微镜是一种使用特殊光源照射样本,产生荧光效应的显微镜。这种显微镜可以帮助科学家观察细胞内的活性成分,如细胞核、蛋白质和DNA等。使用荧光显微镜时,需要光源产生特定波长的荧光来照射样本,然后通过特定的荧光滤镜观察荧光的颜色和强度,以确定样本的结构和性质。 四、原位杂交显微镜 原位杂交显微镜是一种通过分子探针寻找细胞中特定序列的显微镜。它可以帮助科学家诊断疾病、研究细胞基因表达。使用原位杂交显微镜时,需要首先将探针与样本DNA杂交,然后使用荧光或其他显微镜观察样本以确定探针的定位和结构。 五、成像荧光显微镜

成像荧光显微镜是一种新型的显微镜,其灵敏度和分辨率比传统显微镜更高。它通常配备高速摄像机和计算机软件,可以实时捕捉样本的荧光信号并对图像进行处理和分析。成像荧光显微镜广泛应用于细胞生物学、分子药理学等领域,可以帮助科学家深入研究生命科学中的各种细胞和分子过程。 结语 光学显微镜已经成为现代实验室不可或缺的重要工具,不同种类的光学显微镜有着不同的特点和用途,熟悉它们的特点和使用方法可以帮助我们更好地使用它们并提高观察效果。当然,这里介绍的只是几种常见的光学显微镜,科学家们在实践中还会不断创造出新型的光学显微镜,以满足越来越高的研究需求。

显微镜的分类原理及应用

显微镜的分类原理及应用 1. 概述 显微镜是一种利用光学原理来放大微小物体的仪器。它通过光学系统将被观察 的物体放大,使其变得更加清晰可见。显微镜在科学研究、医学诊断、材料分析等领域都有广泛的应用。本文将介绍显微镜的分类原理及其应用。 2. 显微镜的分类 根据放大方式和原理的不同,显微镜可以分为以下几类: 2.1 光学显微镜 光学显微镜是使用光学透镜系统放大被观察物体的显微镜。它主要由物镜、目 镜和光源等组成。光学显微镜可以进一步分为以下两类: •单光学系统显微镜:使用单个透镜的显微镜,例如简单显微镜。 •复合显微镜:使用多个透镜组合的显微镜,例如高倍显微镜。 2.2 电子显微镜 电子显微镜使用电子束来代替光线,通过电磁透镜系统来放大被观察物体。电 子显微镜可以达到更高的放大倍数和更好的分辨率。电子显微镜主要包括以下两类:•透射电子显微镜(TEM):通过透射电子来观察被观察物体内部的结构和形貌。 •扫描电子显微镜(SEM):通过扫描电子束来观察被观察物体的表面形貌。 2.3 原子力显微镜(AFM) 原子力显微镜是利用探针和样品表面之间的相互作用力来观察被观察物体表面 的一种显微镜。AFM可以达到原子级别的分辨率,广泛应用于纳米材料研究和表 面形貌分析。 3. 显微镜的应用 显微镜在各个领域都有重要的应用,主要包括以下几个方面:

3.1 科学研究 显微镜是科学研究中不可或缺的工具之一。它可以帮助科学家观察微小的生物细胞结构、微生物、纳米材料等,并进一步研究它们的特性和相互关系。显微镜在生物学、化学、物理学等领域的研究中起着重要的作用。 3.2 医学诊断 医学中的显微镜有助于医生观察和诊断疾病。例如,显微镜可以在血液样本中观察血细胞的形态和数量,从而帮助医生判断病人的健康状况。此外,显微镜也用于病理学上观察组织切片等。 3.3 材料分析 显微镜在材料科学中有广泛的应用。它可以帮助科学家观察材料的微观结构和形貌,从而研究材料的性质和特性。显微镜可以用于金属材料、聚合物、陶瓷等各种材料的分析和表征。 3.4 生物医学工程 显微镜在生物医学工程领域也有重要的应用。它可以帮助工程师观察和分析生物材料、生物器官和生物组织等,以便设计和改进医疗器械和生物医学工程设备。 4. 结语 显微镜的分类原理及应用广泛,涵盖了科学研究、医学诊断、材料分析、生物医学工程等多个领域。通过不同类型的显微镜,人们可以更好地观察微小物体,揭示微观世界的奥秘,促进科学技术的发展。

初中生物知识点梳理之显微镜的基本构造和使用方法

初中生物知识点梳理之显微镜的基本构造和使用方法 显微镜的基本构造 光学显微镜由目镜,物镜,粗准焦螺旋,细准焦螺旋,压片夹,通光孔,遮光器,转换器,反光镜,载物台,镜臂,镜筒,镜座,聚光器,光阑组成。 显微镜分类 光学显微镜 通常皆由光学部分、照明部分和机械部分组成。无疑光学部分是最为关键的,它由目镜和物镜组成。早于1590年,荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。光学显微镜的种类很多,主要有明视野显微镜(普通光学显微镜)、暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、激光扫描共聚焦显微镜、偏光显微镜、微分干涉差显微镜、倒置显微镜。 电子显微镜 电子显微镜有与光学显微镜相似的基本结构特征,但它有着比光学显微镜高得多的对物体的放大及分辨本领,它将电子流作为一种新的光源,使物体成像。自1938年Ruska发明第一台透射电子显微镜至今,除了透射电镜本身的性能不断的提高外,还发展了其他多种类型的电镜。如扫描电镜、分析电镜、超高压电镜等。结合各种电镜样品制备技术,可对样品进行多方面的结构或结构与功能关系的深入研究。显微镜被用来观察微小物体的图像。常用于生物、医药

及微小粒子的观测。电子显微镜可把物体放大到200万倍。台式显微镜,主要是指传统式的显微镜,是纯光学放大,其放大倍率较高,成像质量较好,但一般体积较大,不便于移动,多应用于实验室内,不便外出或现场检测。 便携式显微镜 便携式显微镜,主要是近几年发展出来的数码显微镜与视频显微镜系列的延伸。和传统光学放大不同,手持式显微镜都是数码放大,其一般追求便携,小巧而精致,便于携带;且有的手持式显微镜有自己的屏幕,可脱离电脑主机独立成像,操作方便,还可集成一些数码功能,如支持拍照,录像,或图像对比,测量等功能。 数码液晶显微镜,最早是由博宇公司研发生产的,该显微镜保留了光学显微镜的清晰,汇集了数码显微镜的强大拓展、视频显微镜的直观显示和便携式显微镜的简洁方便等优点。 扫描隧道显微镜 扫描隧道显微镜亦称为扫描穿隧式显微镜、隧道扫描显微镜,是一种利用量子理论中的隧道效应探测物质表面结构的仪器。它于1981年由格尔德宾宁(G.Binning)及海因里希罗雷尔(H.Rohrer)在IBM位于瑞士苏黎世的苏黎世实验室发明,两位发明者因此与恩斯特鲁斯卡分享了1986年诺贝尔物理学奖。 它作为一种扫描探针显微术工具,扫描隧道显微镜可以让科学家观察和定位单个原子,它具有比它的同类原子力显微镜更加高的分辨率。此外,扫描隧道显微镜在低温下(4K)可以利用探针尖端精

显微镜的使用方法与说明

显微镜的使用方法与说明 显微镜是一种高精密的光学仪器,广泛应用于研究和教学领域。它可以放大细胞、组织、物种、晶体等微小结构,帮助我们深入 了解自然界的奥妙。 一、显微镜的种类 根据其放大倍数和结构形式,显微镜可分为多种类型。一般使 用的显微镜主要有以下三种: 1. 光学显微镜 光学显微镜是一种利用透明度材料的折射率差来放大样本的显 微镜。它由物镜、目镜和对焦平台组成,常常配备有光源提供照明。通过调节物镜与目镜的距离和对焦平台的高低,可以放大和 观察样品。 2. 电子显微镜

电子显微镜是一种利用电子束与样品相互作用来观察和放大微 小结构的显微镜。它由电子枪、透镜系统和检测器组成,可以放 大1000倍以上,适用于观察原子级别的微小结构。 3. 接触式扫描显微镜 接触式扫描显微镜是一种能够放大高分辨率图像和地形的显微镜。它由探针、扫描电子和控制单元组成,可以放大30万倍以上,其分辨率可以达到纳米级别。 二、显微镜的使用方法 1. 准备样品 首先需要在载玻片或平板上贴上待观察的样品,然后根据需要 在样品表面加一层薄膜或染色,以增加样品的对比度。使用前要 确保样品完全干燥,并且没有异味。 2. 调整镜头

使用显微镜前,需要确认物镜和目镜都处于正常工作状态。通常,物镜应该是指定倍率的,如4倍、10倍等,而目镜是10倍或15倍。接下来,应将载玻片放在对焦平台上,并使用对焦 knob 调整上下平台的高度,使物镜与载玻片的距离适当。 3. 调整对焦 在调整镜头之后,需要调整对焦,使样品的表面清晰可见。首先,应调整目镜焦距,然后缓慢旋转物镜,调节载玻片与物镜的距离和位置,直到能够清晰观察到样品细节。 4. 调整照明 为了增强样品的对比度和亮度,需要调整照明。大部分显微镜都配备了高亮度的光源,可以使用控制平台上的开关来调整照明条件。在调整之后,需要检查样品的边缘和细节是否清晰可见。如果有一个清晰的对比度,就可以开始深入研究样品。 三、显微镜的维护方法

显微镜的基本知识与使用

显微镜的基本知识与使用 显微镜是一种用来观察微小物体的重要工具。它可以放大物体,使我 们能够看到肉眼无法察觉的细小结构和细胞。以下是关于显微镜的基本知 识与使用的详细说明。 1.显微镜的种类: (1)光学显微镜:它主要由物镜、目镜、光源和放大倍率调节器组成。光线经过物镜放大物体后,再经过目镜投射到人眼上。 (2)电子显微镜:它使用电子束而非光线来放大物体。根据电子束 的加速方式,可以进一步分为透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)两种。 2.主要部件: (1)物镜:它是显微镜最重要的部件,可以放大被观察物体的图像。物镜的放大倍率一般为4×、10×、40×和100×等。 (2)目镜:也称为眼镜,是位于显微镜顶部的一组镜片。它可以进 一步放大物镜产生的物体放大图像。 (3)光源:用于照亮被观察物体。常见的光源有白炽灯、荧光灯和LED灯等。光源的亮度对观察物体的影响很大。 (4)舞台:放置被观察物体的平台。 (5)焦调节器:用于调节物镜与被观察物体之间的距离。 3.显微镜的使用:

(1)准备:确保显微镜以及被观察物体的表面都是干净的,以保证 图像的清晰度。 (2)调节光源:找到光源的开关,在观察之前,根据需要调节光源 的强度。 (3)放置样本:将被观察物体放在舞台上,确保物体位于物镜下方。 (4)调焦:将物镜缓慢地向下或向上移动,直到观察到清晰的图像。可以使用焦调节器微调焦距。 (5)调整放大倍率:根据需要,可以通过更换不同放大倍率的物镜 和目镜来调整放大倍率。 (6)观察和记录:观察被放大的图像,注意细节,并使用笔记本或 照相机记录下来。 (7)保养:使用后,清理显微镜,确保它处于干燥的环境中,并避 免碰撞或震动。 4.注意事项: (1)避免触摸物镜和目镜,因为手指上的油脂会导致光的折射和减 弱图像的亮度。 (2)在调节焦距时要小心,以免物镜或目镜与被观察物体接触。 (3)使用显微镜时要保持良好的体姿,以确保观察的舒适度和准确性。 (4)避免将显微镜暴露在湿度和尘埃较大的环境中,以防止零件受 损或生锈。

显微镜的使用方法及步骤

1.确定目标:首先要明确观察的目标是什么,确定所需要的放大倍数。这将有助于选择合适的镜头和校准显微镜。 2.校准显微镜:使用显微镜前,需要进行校准以确保准确的观察结果。对于普通显微镜,可以进行调节以确保镜头垂直于被观察的样本。对于高级显微镜,可能需要调整一些参数以适应所需的放大倍数。 3.样品制备:准备需要观察的样品,并确保其在显微镜下的清晰度。清洁样品以去除尘埃和杂质,使用卡尺或者切片刀来获得更细致的结构。 4.放置样品:将样品放置在显微镜的平台上,使用夹子或者固定卡紧固样品以确保它们不会移动或者晃动。 5.调节镜头:调节镜头直到样品清晰可见。这包括对焦、改变放大倍数和对样品进行移动以获得所需的视角。 6.观察样品:通过显微镜的镜头观察样品,并在需要时拍照或记录所见的内容。 7.维护显微镜:在使用完成后,要清洁样品台,镜头和其他部件以保持显微镜的正常工作状态。同时,要注意显微镜的保养和维护,定期清洁并涂抹防护剂以延长其使用寿命。 8.使用不同类型的显微镜:不同类型的显微镜有不同的使用方法和步骤。例如,光学显微镜需要使用光源以照明样品,并使用镜头调节焦距;电子显微镜则需要将样品放置在真空室中,并使用电子束以获得更高的放大倍数。

9.使用附件:一些显微镜还配备了附件,如滤镜、偏振器、相差干涉仪等。这些附件可以帮助观察特定类型的样品或者获取更多的信息。 10.安全注意事项:在使用显微镜时,需要注意安全事项,如不要直接观察强光源、使用手套或其他保护措施以避免污染样品、不要触碰显微镜的镜头以避免刮伤等。 总之,显微镜是科学研究中不可或缺的工具之一,能够帮助我们观察微小的结构、细胞、细菌等,从而深入了解物质和生命的本质。正确的使用方法和步骤能够确保观察结果的准确性,同时也能保护显微镜的使用寿命。

显微镜的操作流程及使用方法

显微镜的操作流程及使用方法 1. 简介 显微镜是一种用来观察微观物体的仪器,它能够放大细小的样本,以便更清晰 地观察。本文将介绍显微镜的操作流程及使用方法。 2. 准备工作 在使用显微镜之前,需要进行一些准备工作,以确保显微镜的正常运行:•清洁工作台:将工作台擦拭干净,并准备好放置显微镜的平稳表面。 •调整光线:确保工作区域有足够的光线,同时避免过度的光线,以免影响观察。 •准备玻片:将待观察的样本放置在玻片上,并用盖玻片遮盖。 3. 显微镜的基本部件 在开始操作显微镜之前,首先了解显微镜的基本部件是非常重要的。常见的显 微镜部件包括: •目镜:用于观察样本的镜头,一般位于显微镜顶部。 •物镜:位于目镜下方,用于放大样本图像的镜头,通常有多个可切换的物镜可供选择。 •调焦轮:用于调节物镜与样本之间的距离,以实现清晰的观察。 •光源:通常是位于显微镜底部的灯源,用于照亮样本。 •台面:用于放置样本的平台。 •机械阶梯:用于移动样本,以便查看更大范围的图像。 4. 操作流程 接下来,我们将详细介绍显微镜的操作流程: 步骤一:调节光源 1.打开显微镜底部的开关,启动光源。 2.使用光源亮度调节器调整光线的亮度,确保样本区域能够被清晰照亮。 步骤二:放置样本 1.将玻片平稳地放置在显微镜台面上。 2.将待观察的样本放置在盖玻片上,确保样本位于光线的中心。

步骤三:调节目镜 1.将目镜调节到最低放大倍数,即1x。 2.通过调整眼睛到目镜的距离,获得清晰的观察图像。 3.如果需要,根据个人视力调节目镜的瞳孔间距,以使两个目镜的图像 重叠。 步骤四:调节物镜 1.选择一个合适的物镜放大倍数,通常从4x到100x不等。 2.使用调焦轮将物镜与样本之间的距离调整到最小,然后观察目镜中的 图像。 3.缓慢调节调焦轮,直到观察到清晰的图像。 4.如果需要更高的放大倍数,切换到另一个物镜,并重复步骤2和3。 步骤五:调整对焦和观察 1.使用调焦轮继续微调对焦,使图像更加清晰。 2.使用机械阶梯移动样本,以便查看更大范围的图像。 3.通过目镜观察样本,并注意任何感兴趣的细节。 4.如有需要,可以使用显微镜上的游标盘来测量样本的大小。 步骤六:关闭显微镜 1.关闭光源开关,将显微镜关机。 2.清洁显微镜的镜片和台面,确保下次使用时仪器干净。 5. 注意事项 在操作显微镜时,需要注意以下几点: •避免触碰镜片:镜片非常易损坏,因此要小心地操作显微镜,避免触碰镜片表面。 •轻轻调节:在调节光源和焦距时要小心,不要用力扭动,以免损坏显微镜的各个部件。 •保持台面平稳:保持显微镜台面的稳定,架设在平稳的表面上,以免震动对观察造成干扰。 •定期清洁:定期清洁镜片和台面,以确保显微镜的正常运行和观察效果。 通过正确的操作流程和使用方法,您可以充分发挥显微镜的功能,观察微观世界中的奇妙事物。

七年级生物显微镜知识点

七年级生物显微镜知识点 显微镜是生物学研究中非常重要的工具。通过显微镜,我们可以观察到细胞、细胞器、细菌等微小生物和结构。在七年级生物学的学习中,了解显微镜的原理和使用方法是非常重要的。本文将介绍七年级生物学中常见的显微镜知识点。 一、显微镜的种类 显微镜有光学显微镜和电子显微镜两种。光学显微镜使用可见光对样本进行检测,可以看到细胞、细胞器等结构;电子显微镜使用电子束对样本进行检测,可以看到更小、更具体的细胞结构和分子结构。 二、显微镜的原理 光学显微镜的原理是利用透镜对光进行聚焦,使观察者可以看到被放置在显微镜下的样本。样本由明亮部分和暗部分组成,它们对光的反射和吸收不同,通过镜片把这些光聚集到观察镜中就可以得到图像。

电子显微镜的原理是使用电子束对样本进行成像。电子显微镜具有比光学显微镜更高的分辨率,更能够看到微小的结构。 三、显微镜的使用方法 使用显微镜需要注意以下几点: 1. 准备样本:样本需要制备好,通常使用载玻片将样本准备出来。 2. 调整光源:显微镜需要足够的光源才能使样本看得更清晰。调整合适的角度和亮度可以取得更好的效果。 3. 调整目镜与物镜:目镜和物镜需要进行配合,调整合适的倍数,使得图像更清晰。 4. 调整焦距:借助焦平面或调节物镜镜头的位置来获得清晰图像。亦可使用卡片、毛玻璃板等来快速调节焦距。 四、显微镜的维护

使用显微镜需要注意它的维护。以下是一些常见的维护方法: 1. 保持干燥清洁:显微镜需要保持干燥和清洁,不能受到灰尘 和水滴的污染。 2. 将显微镜盖子盖上:使用完毕后需要将显微镜盖子盖上以防 止附着在镜片上不必要污物,腐蚀物也会伤害电镜中的真空环境。 3. 用专业清洁纸擦拭:使用专业清洁纸对显微镜的镜头进行擦拭。 总之,了解显微镜的原理、使用方法和维护是非常重要的。通 过显微镜的应用,我们可以更好地观察生命的微观世界,进一步 深化对生命科学的认识和理解。

显微镜的使用方法与步骤

显微镜的使用方法与步骤 显微镜是一种科学实验工具,可以放大细小物体,帮助我们观察和研 究微小的结构和细胞。使用显微镜需要一定的技巧和步骤,下面将详细介 绍显微镜的使用方法: 第一步:准备工作 1.选择合适的显微镜:根据实验的需求和要观察的物体大小,选择适 合的显微镜,可以选择光学显微镜、电子显微镜等。 2.平台清洁:使用干净的软布或纸巾清除平台上的灰尘和污垢。 3.物体准备:将要观察的物体(标本)准备好,可以是细胞样本、植 物切片、昆虫等。确保标本的干净和完整性。 第二步:装载标本 1.取出载玻片:取出玻片并清洁,确保完全干净,不带有指纹或灰尘等。 2.准备标本:将标本放在玻片上,可以使用草屑、涂片等。 3.加入显微镜液:滴入一到两滴适当的显微镜液,可使标本更加清晰。 第三步:装载玻片 1.调焦手轮:在显微镜镜头和平台之间使用调焦手轮打开调焦装置, 使平台向上移动,以便放入玻片。 2.放入玻片:将装有标本的玻片轻轻放入,保持平,使标本中心与光 轴平行。

3.轻轻调整:使用调焦手轮将玻片轻轻调整至合适位置,使标本对焦。 第四步:调整显微镜 1.调整光源:打开显微镜的光源,可以是自然光或人工光源。将光源 调整到合适的位置,以确保光线均匀透过标本。 2.调节放大倍数:选择合适的物镜头,通常从低倍到高倍逐渐调整, 开始时选择较低倍数,然后逐渐增加,以使标本更加清晰。 3.调节光圈和瞳孔:通过调节光圈和瞳孔的大小,可以增加或减少光 线的数量,以获得更好的对比度和清晰度。 第五步:观察和调焦 1.观察:将眼睛对准眼镜,调整合适的眼距和目镜调焦,以使双眼看 到清晰的图像。 2.调焦:使用细调手柄或调焦手轮,缓慢调整焦距,直到标本变得清晰。同时,调整目镜的调焦器使图像更加清晰。 第六步:注意事项 1.避免观察时间过长:长时间连续观察显微镜可能会导致眼睛疲劳和 不适,可以适时休息。 2.调整亮度:宜选择合适的光亮度观察,过强或过弱的光线可能会影 响观察效果。 3.小心操作:在使用显微镜时要小心操作,避免碰撞或将显微镜倒置等,以免损坏设备。

显微镜的结构及使用方法

显微镜的结构及使用方法 (1)普通光学显微镜的构造 (2)各部分的作用 镜座:稳定镜身。 镜柱:支持镜柱以上的部件。 镜臂:握镜的部位。 载物台:放置玻片标本的地方。中央有通光孔,两旁各有一个压片夹。 镜筒:上端安装目镜,下端有转换器。 转换器:可以转动的圆盘,上面安装物镜。 粗准焦螺旋:转动时可以大幅度升降镜筒。 细准焦螺旋:转动时,镜筒升降幅度较小,可以使物像更清晰。 目镜:接近眼睛的镜头。 物镜:接近物体的镜头。 遮光器:上面有大小不等的圆孔叫做光圈。不同的光圈可以调节光线的强弱。(大光圈光线弱时使用) 反光镜:一面是平面镜(光线强时使用),一面是凹面镜(光线弱时使用)。转动反光镜可以使光线经过通光孔反射上来。(小光圈光线强时使用) (3)注意:在移动标本时,像总是朝相反的方向移动;从目镜内看到的物象是倒像;目镜与物镜放大倍数的乘积就是所成像的放大倍数。(高倍显微镜下,所见的细胞数目少)(低倍显微镜下,所见的细胞数目多)

实验一用显微镜观察永久装片 (一)实验操作技能 1.安放显微镜 取镜:右手握镜臂,左手托镜座(1分) 安放:放在靠左手边,离桌边7cm左右(1分) 2.显微镜对光 遮光器:选用合适的光圈(光线好用小光圈,光线不好用大光圈)(1) 物镜、目镜的使用:选用低倍镜观察,转动转换器,不能用手扳动物镜(1) 反光镜对光:光线好用平面镜,光线不好用凹面镜。镜面对着光源(1) 3.观察永久装片 装片放置:将要观察的目标放在载物台上,并用压片夹压好(1) 使用低倍镜,下降镜筒:镜筒用粗准焦螺旋下降至物镜与装片相离2cm左右(1)调焦:用左眼观察,同时慢转粗准焦螺旋,直至看到目标后转用低准焦螺旋(1)4.说出装片的显著特征(1) 血细胞涂片:红细胞较多,没有细胞核。(若看到白细胞,要说明白细胞比红细胞大,有细胞核) 叶片结构:叶片属于植物的营养器官。叶肉属基本组织,看到一层表皮细胞排列整齐紧密,表皮属于保护组织,看到大的叶脉,叶脉属于疏导组织。 (二)实验常规和实验习惯(1) 显微镜收放:将压片夹转至后方,取走装片,将物镜转离通光孔,下降镜筒至最低,将反光镜转到与镜座垂直的位置,用右手握镜臂,左手托镜座,将显微镜放入镜箱。(取下物镜与目镜放入镜盒中) 实验二:鉴定食物的主要成分 (一)实验操作技能 1.鉴定馒头的主要成分 取材:取载玻片擦净(用纱布同方向),用镊子取馒头屑放在载玻片上(1) 鉴定:向馒头屑上滴碘酒(1) 解释现象,得出结论:馒头变蓝,说明馒头的主要成分是淀粉(1) 2.鉴定鸡蛋清的主要成分 鸡蛋清等分两份:用两个小烧杯将鸡蛋清等分,一份留用对照(1)

显微镜的主要分类、功能及应用领域一、显微镜的分类

显微镜的主要分类、功能及应用领域 一、显微镜的分类 (一)、按使用目镜的数目可分为单目、双目和三目显微镜。 单目价格比较便宜,可以作为初学爱好者的选择,双目稍贵点,观察的时候两眼可以同时观察,观察得舒适些,三目又多了一目,它的作用主要是连接数码相机或电脑用,比较适合长时间工作的人员选用。 (二)、根据其用途以及应用范围分为生物显微镜、金相显微镜、体视显微镜等。 1、生物显微镜是最常见的一种显微镜,在很多实验室中都可以见到,主要是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。 2、体视显微镜又称为实体显微镜、立体显微镜,是一种具有正像立体感的目视仪器,广泛的应用于生物学、医学、农林等。它具有两个完整的光路,所以观察时物体呈现立体感。主要用途有:①作为动物学、植物学、昆虫学、组织学、考古学等的研究和解剖工具。②做纺织工业中原料及棉毛织物的检验。③在电子工业,做晶体等装配工具。④对各种材料气孔形状腐蚀情况等表面现象的检查。⑤对文书纸币的真假判断。⑥透镜、棱镜或其它透明物质的表面质量,以及精密刻度的质量检查等。 3、金相显微镜主要是用来鉴定和分析金属内部结构组织,是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。这些

显微镜的构造原理及使用

反光镇 人的眼睛只能识别大小为0.1伽的物体。显微镜是精密的放大仪器,是生物学研究不可缺少的工具。我们用它可以观察肉眼看不见的微小生物的结构。中学最常用的是光学显微镜,为了正确操作、妥善保管和维护显微镜,使之延长使用年限,我们必须首先了解显微镜的结构和功能。一台显微镜包括机械装置和 光学系统两大部分,注意比较和识别。 (一)、显微镜的基本结构: 显微镜构造很复杂,种类很多,但基本结构是由机械和光学两大部分构成,现分述如下: 1、机械部分: 它是为光学部分服务的部件,包括以下九部分: (1)、镜座:显微镜最下面呈马蹄形或园形的部分,起稳定和支持镜身作用。 (2)、镜柱:从镜座向上直立的短柱。上连镜臂,下连镜座,可以支持镜臂和载物台。 (3)、镜臂:弯曲成马蹄形的部分,便于手持,下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节,可使镜臂倾斜,便于观察。

(4)、载物台:自镜臂下端向前伸出,放置标本用的平台,其中央有一个园孔,叫通光孔。台上有一移动器(老式的左右各有一个压片夹),用以固定和移动标本。 (5)、镜筒:和镜臂上方连接的园筒部分。有的显微镜镜筒内有一抽管,可适当抽长,一般长度是160—170毫米。镜筒上端装有目镜,下端有一个可转动的园盘,叫物镜转换器(或叫物镜旋转盘,固着在镜筒下端,分两层,上层固着不动,下层可自由转动。转换器上有2〜4个圆孔,用来安装不同倍数的低倍或高倍物镜)。作用是保护成像的光路与亮度。 (6)、调节器(也叫调节螺旋):为镜壁上两种可转动的螺旋,一大一小,能使镜筒上下移动,调节焦距。大的叫粗准焦螺旋,位于镜臂的上方,可以转动,以使镜筒能上下移动,从而调节焦距,升降镜筒较快,用于低倍镜对焦;小的叫细准焦螺旋,位于镜臂的下方,它的移动范围较粗准焦螺旋小,升降镜筒较慢,可以细调焦距。 (7)、倾斜关节:镜柱和镜臂交界处有一个能活动的关节。它可以使显微镜在一定的范围内后倾(一般倾斜不得超过45°)便于观察。但是在使用临时封片观察时,禁止使用倾斜关节,尤其是装片内含酸性试剂时严禁使用,以免污损镜体。 (8)、载物台:从镜臂向前方伸出的金属平台。呈方形或圆形,是放置玻片标本的地方。其中央具有通光孔,在通光孔的左右有一个弹性的金属压片夹,用来压住载玻片。较高级的显微镜,在载物台上常具有推进器,它包括夹片夹和推进螺旋,除夹住切片外,还可使切片在载物台上移动。 2、光学部分:由目镜、物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。 (1)、目镜:装于镜筒上方,由两组透镜构成,接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像。接目镜上刻有5X,8X,10X,15 X,25X等符号,表示放大倍数。我们所观察到的标本的物像,其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。如接物镜是1 0X,接目镜是8X,其物像的放大倍数是1 0X8 = 80倍。 在接目镜内两个透镜间的光栏上可装一根剪短的毛发,做为指针,用以指示要观察的材料。 (2)、物镜:装在镜筒下端物镜转换器的孔中,一般的显微镜有2〜4个接物镜镜头,每个镜头都是由一系列的复式透镜组成的,其上也有放大倍数记号,有4X,10X,40X及10 0X°4X及10X接物镜是低倍镜,40X是高倍镜,100X是油镜。低倍镜常用于搜索观察对象及观察标本全貌,高倍镜则用于观察标本某部分或较细微的结构,油镜则常用于观察微生物或动植物更细微的结构。 (3)、聚光器(集光器):位于载物台(通光孔)下方,由两块或数块镜组成,它能将反光镜反射来的光线集中以射入接物镜和接目镜,有的聚光器可升降,便于调光,集光器下有一可伸缩的园形光圈,叫虹彩光圈,可调集光器口径的大小和照射面,以调节光线强弱(有的显微镜只有遮光极而无集光器)。光线过强时,可缩小虹彩光圈。 (4)、反光镜:是显微镜观察时获得光源的装置,位于显微镜镜座中央,一面为平面镜,一面为凹面镜。转动反光镜,可使外面光线通过集光器照射到标本上。使用时,光线强用平面镜,光线弱用凹面镜。

光学显微镜的结构与使用方法

光学显微镜的结构与使用方法 目的要求 1、熟悉光学显微镜的主要构造及其性能. 2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法. 3、初步掌握油镜的使用方法. 4、了解光学显微镜的维护方法. 实验原理 光学显微镜lightmicroscope是生物科学和医学研究领域常用的仪器,它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途,是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具. 光学显微镜简称光镜,是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器.目前使用的光镜种类繁多,外形和结构差别较大,有些类型的光镜有其特殊的用途,如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜,倒置显微镜等,但其基本的构造和工作原理是相似的.一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成,而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件. 光镜是如何使微小物体放大的呢物镜和目镜的结构虽然比较复杂,但它们的作用都是相当于一个凸透镜,由于被检标本是放在物镜下方的1~2倍焦距之间的,上方形成一倒立的放大实相,该实相正好位于目镜的下焦点焦平面之内,目镜进一步将它放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处,在视网膜上形成一个直立的实像.显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的,该虚像看起来好像在离眼睛25cm处. 分辨力是光镜的主要性能指示.所谓分辨力resolvingpower也称为辨率或分辨本领,是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处,能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力,即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力.据测定,人眼的分辨力约为100μm.显

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