金黄色葡萄球菌耐药的现状及临床治疗对策
孙宏莉徐英春
单位：中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院
摘要：金黄色葡萄球菌，尤其是甲氧西林或苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）是引起院内感染的多重耐药菌。目前MRSA已逐渐成为全世界院内感染的主要病原菌。目前在许
多国家仍在增长，MRSA几乎对所有?-内酰胺类抗生素耐药，甚至累及到红霉素，环丙沙
星和庆大霉素。本文对金黄色葡萄球菌的耐药现状、耐药机制以及金黄色葡萄球菌感染的
危险因素和治疗对策进行了简要介绍。
关键词：金黄色葡萄球菌耐药现状耐药机制危险因素治疗对策
答
1. 甲氧西林或苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（ MRSA ）是引起院内感染的多重耐药菌。是吗？
A.是
B.不是
2. 根据 NCCLS 判定标准，对于金黄色葡萄球菌，万古霉素的MIC≤4ug/ml 时为敏感。对吗？
A.不对
B.对
金黄色葡萄球菌，尤其是甲氧西林或苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（ MRSA ）是引起院内感染的多重耐药菌。在第一个耐青霉素酶的β－内酰胺类抗生素甲氧西林用于临床治疗葡萄球菌感染不久， 1961 年在英国发现了世界首例 MRSA 。从此， MRSA 逐渐成为全世界院内感染的主要病原菌。目前在许多国家仍在增长， MRSA 几乎对所有β- 内酰胺类抗生素耐药，甚至累及到红霉素，环丙沙星和庆大霉素。 1996年在日本首次发现了MRSA对万古霉素敏感性下降的菌株，即万古霉素中介的金黄色葡萄球菌（VISA）。VISA 的出现预示着万古霉素治疗葡萄球菌感染的临床疗效下降，随之万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌（VRSA）临床株是否会分离到，成为人们监测和关注的热点。如果葡萄球菌一旦对万古霉素耐药，临床将如何治疗？
所以连续监测金黄色葡萄球菌的耐药现状，了解葡萄球菌的耐药机制，感染的危险因素及其治疗对策具有重要的临床意义。
金黄色葡萄球菌的耐药现状：我院细菌室从 1988～2003 年连续监测金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药性变迁，结果见表 1 。
表 1. 金黄色葡萄球菌对 7 种常用抗生素的耐药性变迁
表 1 显示金黄色葡萄球菌对青霉素高度耐药，耐药率 >90% ，除万古霉素未见耐药菌株外，对苯唑西林，庆大霉素，环丙沙星和红霉素的耐药性明显的上升了，尤其是 MRSA ，从 80 年代末发现到 2000 ～2003 年上升至 66.9% 。深入分析 2000 ～ 2003年1250株MRSA对常用抗生素的耐药性，结果发现四环素为90%，头孢唑林为93%，青霉素为100%，庆大霉素为93.4%，环丙沙星为94.8%，红霉素为94.1%。这些结果提示，我院 MRSA 为多重耐药菌株，对β- 内酰胺类、红霉素、庆大霉素和环丙沙星均耐药，临
床没有机会选择这些抗生素治疗 MRSA感染。治疗MRSA的首选为糖肽类抗生素，我院至今未发现万古霉素耐药的MRSA。
据美国 CDC 报道，全世界每年约有 100 ， 000 人感染 MRSA ，并在不断地增加。 MRSA 中虽只有很少比例为社区 MRSA （ CA-MRSA ），但有增长趋势。 CA-MRSA 菌落生长较院内 MRSA 小，多表现为异质性耐药； CA-MRSA 毒力较强，由于可产生葡萄球菌肠毒素 B 和葡萄球菌肠毒素 C，可导致中毒性休克综合征； CA-MRSA 比院内 MRSA 繁殖快。所以 CA-MRSA 对社区人们健康已构成威胁，美国、澳大利亚已有报道。
金黄色葡萄球菌的耐药机制：
一．金黄色葡萄球菌对β－内酰胺类耐药机制，主要包括
1.产β－内酰胺酶：青霉素耐药而苯唑西林敏感的葡萄球菌对β－内酰胺酶不稳定的青霉素类（主要包括阿莫西林，氨苄西林，羧苄西林，替卡西林，哌拉西林，美洛西林）是耐药的，但对酶稳定的青霉素类（主要包括甲氧西林，苯唑西林，氯唑西林，双氯西林，奈呋西林），加β－内酰胺酶抑制剂类，头孢菌素类和碳青霉烯类是敏感的，提示这类菌株单产β－内酰胺酶。
2.青霉素结合蛋白（PBP2a）突变：MRSA几乎对所有的β－内酰胺类抗生素是耐药的。根据 2004年美国临床实验室标准化委员会（ NCCLS）筛选MRSA的新标准规定：头孢西叮（30ug/片）抑菌环直径￡ 19mm 为MRSA，抑菌环直径￡ 24mm则为苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌。 MRSA的耐药机制:1）mecA耐药决定子：金黄色葡萄球菌（SA）对苯唑西林低水平耐药，是由于细菌产生过量的β－内酰胺酶或PBPs 过量表达，或PBP与苯唑西林亲和力下降所致。SA对苯唑西林高水平耐药，则是由于产生一种新的PBP，即PBP2a。PBP2a与β－内酰胺类抗生素亲和力极低，很少或不被β－内酰胺类抗生素结合。当其它PBP 与β－内酰胺结合而活性受到抑制时，PBP2a就可替代它们起到合成细胞壁的作用，从而产生耐药性。2）MecA编码表达PBP-2a需有以下二个条件：①有β-内酰胺类抗生素存在；②在调控基因mecI与mecRI的作用下，mecI编码产生mecI蛋白，是一个抑制子(repressor)；mecRI基因编码产生MecRI蛋白，为辅助诱导因子(coinducer)。当诱导剂β-内酰胺类抗生素存在时，MecRI蛋白能与诱导剂结合而被激活，活化了的MecRI蛋白能移去抑制子MecI对mecA基因的抑制作用，结果mecA在去抑制的条件下转录表达产生了PBP-2a蛋白。近代研究表明除mecA为主要结构基因外，femA，blaA分别在调控基因femI，femRI和blaI，blaRI作用下也有编码产生PBP-2a的可能性。
二．金黄色葡萄球菌对大环内酯类和克林霉素的耐药机制，主要包括泵出和核糖体突变，结果见表 2：表 2. 金黄色葡萄球菌对大环内酯类和林可霉素的耐药机制
左图为msrA 介导的红霉素泵出耐药右图为erm 介导的诱导型克林霉素和红霉素耐药
金黄色葡萄球菌感染的危险因素：金葡菌能导致多种疾病，如皮肤感染、骨感染、肺炎、严重威胁生命的血行感染等。 MRSA 可寄居于人的鼻前庭、会阴、皮肤，一旦皮肤屏障被破坏或损伤，就可能引起 MRSA 感染。 MRSA 常发生于医院内患者或接受医疗器械治疗的患者。尤其年老、体弱、免疫抑制的疾病（如艾滋病）、有开放性创伤（如褥疮）或使用导管（如导尿管或静脉导管）的住院患者。另外，先前抗生素应用的选择压力，入住 ICU 病房，外科手术，长期住院，与 MRSA 携带者接触，携带 MRSA 于鼻前庭，但并未发病等也常常是感染 MRSA 的危险因素。 CA-MRSA 与近年抗生素的应用，交叉污染，皮肤疾病，居住拥挤等因素有关。
MRSA 多发生于皮肤感染，所以伤口感染标本（如活组织检查、脓等）必须做细菌培养及药敏试验。对于持续、反复发生的抗生素治疗失败，渐进或严重的皮肤感染尤应引起注意，是否为 MRSA 感染。多数MRSA 所致皮肤感染通过引流而未用抗生素也能起到缓解治愈的作用。但是，如果已用抗生素，就应全程用药以达治愈。 MRSA 携带者（如医护人员）不需治疗。
金黄色葡萄球菌感染的治疗对策：金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，常引起败血症，导管源性感染，肺炎，伤口感染，全身性感染，毒素休克综合症，烫伤样皮肤综合症，心内膜炎，胃肠炎等。
1.单产生β－内酰胺酶的葡萄球菌：对β－内酰胺酶不稳定的青霉素类耐药，主要包括阿莫西林，氨苄西林，羧苄西林，替卡西林，哌拉西林，美洛西林等，但对β－内酰胺酶稳定的青霉素类敏感，主要包括甲氧西林，苯唑西林，氯唑西林，双氯西林，奈呋西林，以及加β－内酰胺酶抑制剂类，头孢菌素类和碳青霉烯类均敏感的。这类菌株单产β－内酰胺酶，首选耐青霉素酶的青霉素类± 利福平或庆大霉素治疗，替换用抗生素为一（头孢拉定，头孢唑林），二代头孢菌素（头孢丙烯，头孢呋辛），加β－内酰胺酶抑制剂复合药（阿莫西林－克拉维酸），如果患者对β－内酰胺类过敏可选择氟喹诺酮类，克林霉素，大环内酯类或磺胺类治疗。
2.发生青霉素结合蛋白（PBP2a）突变的菌株：MRSA对所有的β－内酰胺类抗生素是耐药的，因此，实验室仅测试青霉素和苯唑西林就可以推测一大批β－内酰胺类抗生素的敏感性和耐药性。 MRSA 常见的敏感抗生素为万古霉素，替考拉宁，利奈唑烷，复方磺胺，利福平，链阳霉素。糖肽类抗生素是治疗 MRSA 感染非常有效的一类抗生素，长期应用万古霉素对 MRSA 的治疗导致 90 年代临床发现了对万古霉素耐药的凝固酶阴性葡萄球菌（ VRCoNS ）及 VISA 和 VRSA 的出现。目前为止，世界上已报道多例由 VISA 感染及 2 例 VRSA 感染的病例。
金黄色葡萄球菌对糖肽类抗生素耐药现状及其耐药机制：根据 NCCLS判定标准对于金黄色葡萄球菌，万古霉素的MIC≤4ug/ml时为敏感，即VSSA；在MIC为8-16ug/ml时为中度敏感，即VISA；MIC≥32ug/ml时为耐药，即VRSA。金黄色葡萄球菌对万古霉素的敏感性下降机制尚不清楚，据文献报道，有几种观点：在第一例临床分离的 VISA报道前，Daum等人在实验室培养出VISA。他们发现该菌株的细胞壁比万古霉素敏感的金黄色葡萄球菌厚得多。另有研究表明，耐药株细胞壁成分中交联的肽聚糖很少，而万古霉素只能与交联的肽聚糖结合。由于细胞壁增厚、细胞壁成分改变，而导致万古霉素与细胞壁亲和力下降，从而阻断万古霉素的作用。但实际上，万古霉素并没有失活，只是与细菌隔离开来，同时，该耐药株仍可与其他抗生素结合。
1996 年，日本报道世界首例 VISA ，该患者是一位由于 MRSA 致伤口感染而接受万古霉素治疗，最后又由于 VISA 导致伤口感染治疗失败的男婴，该株 VISA 对万古霉素的 MIC=8 ug/mL 。在接下来几年里，美国、韩国、泰国、法国、英国、希腊、意大利、南非和巴西先后报道在其国内发现 VISA 。
体外实验已证实在肠球菌中编码万古霉素耐药的 vanA 基因可转移至SA，即VRSA。粪肠球菌可产生一种性信息素，促进质粒编码的 van的转移。10年前美国疾病控制和预防中心的Tenover教授发现医院病人粪便中肠球菌的20%携带van A基因，预告MRSA迟早会获得van A基因。 2002年6月自美国密歇根州报告世界第一例 VRSA 。该患者为 40 岁男性，患糖尿病、周围血管炎、慢性肾衰，接受多种抗生素治疗，包括万古霉素。在其透析管处感染 MRSA ( 苯唑西林的 MIC >16 μg/mL ， VA 的 MIC >128 μg/mL ，替考拉宁的 MIC > 32 μg/mL) ，含 vanA 和 mecA 基因，但对氯霉素、利奈唑烷、四环素、复方磺胺敏感，采用复方磺胺从而得到治愈。世界第 2 例 VRSA 来自 2002 年美国宾夕法尼亚州，患者患慢性足溃疡、骨髓炎，足溃疡培养出 SA ， Van 纸片法抑菌圈直径 12mm ，肉汤稀释法 MIC=32 μg/mL ，经检测该 VRSA 含 mecA 和 vanA ，但对氯霉素、利奈唑烷、米喏环素、链阳菌素、利福平、复方新诺明敏感，从而感染得到控制。
这两例VRSA 只是偶发的，发生机率很小，或者基因结合可以发生，以后几年内不一定再发生，第1 例患者同时感染万古霉素耐药的肠球菌，提示如果很多万古霉素耐药的肠球菌和MRSA 聚集在一起，就会有更大机会出现VRSA 。如果VRSA 成为主要的流行株，那么革兰阳性菌的感染将成为严重的医疗问题。
金黄色葡萄球菌的耐药性分析 目的：了解医院住院患者金黄色葡萄球菌感染分布及耐药情况，为临床合理用药提供参考依据。方法：收集2013年1月至2014年12月临床分离的106株金黄色葡萄球菌，采用纸片扩散法（K-B法）测定15种抗菌药物的敏感情况。结果：106株金黄色葡萄球菌，其中MRSA为66株（62.3%），MSSA40株（37.7%），金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物呈普遍耐药。结论：MRSA对大部分抗菌药物具有较高的敏感性，而MSSA表现为多重耐药性，未发现耐万古霉素MRSA菌株，医院金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物耐药。 标签：金黄色葡萄球菌；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；耐药性 金黄色葡萄球菌是重要的医院感染菌，能引起皮肤软组织[1]、内脏器[2]、全身感染[2]。由于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）同时对多种抗生素耐药，使治疗由它所引起的感染和控制其传播变得十分困难。本文将分析我院近2年中106株金黄色葡萄球菌医院感染病历的临床分布及药敏情况。 1 材料与方法 1.1 菌株来源 106株金黄色葡萄球菌来自2013年1月至2014年12月本院临床各科室送检的住院患者的标本，包括呼吸道分泌物、创面分泌物、尿液、胸水、腹水等。 1.2 分离鉴定 按照《全国临床检验操作规程》第3版进行细菌的分离鉴定，药敏纸片及M-H琼脂均为法国生物梅里埃公司配套产品。 1.3 药敏试验 采用K-B琼脂纸片扩散法检测对15种抗生药物的耐药性。 1.4 质控菌株 金黄色葡萄球菌ACTT25923购于内蒙古临床检验中心。 2 结果 2.1 标本分布 106株金黄色葡萄球菌主要来自呼吸道分泌物（占53.5%），创面分泌物（占21.4%）、尿液（占9.4%）、胸水（占8.6%）、腹水（占4.0%）、其它（占3.1%）。
金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片 金黄色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。而对于金黄色葡萄球菌在速冻食品中的存在量，卫生部于2011年11月24日公布食品安全国家标准《速冻面米制品》，允许金葡菌限量存在。 目录 简介 流行病学 引发病症 球菌检验 球菌控制 感染处理 限量存在 简介 金黄色葡萄球菌细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，相反，阴性菌没有细胞壁结构，所以紫色被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源。当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了，于是发现了青霉素。而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显。这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，被称作超级细菌，几乎能抵抗人类现在所有的药物，但是万古霉素可以对付它。典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm 左右，显微镜下排列成葡萄串状。
显微图像 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1~2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 流行病学 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。 金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位，常成为污染源。 一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不密封，运输过程中受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：
宁城县中蒙医院 SOP文件金黄色葡萄球菌危害评估报告 一．危害程度分类 金黄色葡萄球菌是最常见的化脓性球菌，因排列的规则形似葡萄状，故称之为金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌为需氧或兼性厌氧，广泛分布于自然界中。如空气，土壤，水以及日用物品，在卫生部公布的《人间传染的病原微生物名录》中将其列为第二类病原微生物，属高致病性病原微生物，引起人和动物的化脓性疾病。 二．背景资料 金黄色葡萄球菌呈球形，直径微米，无鞭毛、无芽孢，革兰氏染色呈阳性，对营养要求不高，在普通培养基上生长良好，最适生长温度37度，PH为，耐盐性强，培养24小时出现，表面光滑、湿润，有光泽，不透明菌落（1-2mm），产不同色素，如金黄、白色、柠檬色，对湿热敏感，在100度煮沸5分钟后杀死，浓汁中，紫外线敏感致病性和感染数量：金黄色葡萄球菌之所以能引起疾病是其产生多种毒素和酶，主要有a溶血毒素b杀白细胞素c肠毒素d剥脱性毒素e凝固酶f其他物质引起的局部的蜂窝组织炎等化脓性感染，还可引起如肺炎，心包炎，骨髓炎，肾盂肾炎等重症者可发展呈脑膜炎，败血症，脓毒血症，目前，耐药性菌株的增多，已成为医院内交叉感染的一个急待解决的问题 金黄色葡萄球菌有多种传播途径，主要为吸入带菌的飞沫及接触
带菌的感染伤口引起肺炎及伤口化脓性感染，传染源为带菌的物品，空气等。传播途径主要为接触。金黄色葡萄球菌对实验室人员以及其他可能暴露在实验室传染性气溶胶中的人员是一种危害，尤其是有伤口暴露在空气中，其传染的实验室人员发病率比其他人群高。三．实验活动及及其危害性与预防措施 四、实验室实验活动危害评估本实验室主要从事金黄色葡萄球菌微生物学的实验内容有： 1、金黄色葡萄球菌的培养与耐药检测，生化分型实验 2、金黄色葡萄球菌的涂片染色 金黄色葡萄球菌培养传代，药物敏感实验，生化分型、涂片、染色等工作中可产生气溶胶，培养物制剂的溅出，泼洒和容器的破碎等也可造成严重污染。 拟采取防护措施： 1在工作台面应当放置一块浸有消毒液的布或吸有消毒液的纸，使用后将其高压灭菌或按感染性废物处理。避免感染性物质的扩散。 2 为了避免转移物质洒落，微生物接种环的直径应为2~3mm并完全封闭，手柄的长度应小于6cm以减小振动，或者采用一次性灭菌棉签。 3 用封闭式微型电加热器消毒接种环能够避免在本生灯的明火上加热所引起的感染性物质爆溅。 4 样品容器应当坚固，正确地用盖子或塞子盖好后应无泄漏。在容器外部不能有残留物。
金黄色葡萄球菌耐药的现状及临床治疗对策 孙宏莉徐英春 单位：中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院 摘要：金黄色葡萄球菌，尤其是甲氧西林或苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）是引起院内感染的多重耐药菌。目前MRSA已逐渐成为全世界院内感染的主要病原菌。目前在许 多国家仍在增长，MRSA几乎对所有?-内酰胺类抗生素耐药，甚至累及到红霉素，环丙沙 星和庆大霉素。本文对金黄色葡萄球菌的耐药现状、耐药机制以及金黄色葡萄球菌感染的 危险因素和治疗对策进行了简要介绍。 关键词：金黄色葡萄球菌耐药现状耐药机制危险因素治疗对策 答 1. 甲氧西林或苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（ MRSA ）是引起院内感染的多重耐药菌。是吗？ A.是 B.不是 2. 根据 NCCLS 判定标准，对于金黄色葡萄球菌，万古霉素的MIC≤4ug/ml 时为敏感。对吗？ A.不对 B.对 金黄色葡萄球菌，尤其是甲氧西林或苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（ MRSA ）是引起院内感染的多重耐药菌。在第一个耐青霉素酶的β－内酰胺类抗生素甲氧西林用于临床治疗葡萄球菌感染不久， 1961 年在英国发现了世界首例 MRSA 。从此， MRSA 逐渐成为全世界院内感染的主要病原菌。目前在许多国家仍在增长， MRSA 几乎对所有β- 内酰胺类抗生素耐药，甚至累及到红霉素，环丙沙星和庆大霉素。 1996年在日本首次发现了MRSA对万古霉素敏感性下降的菌株，即万古霉素中介的金黄色葡萄球菌（VISA）。VISA 的出现预示着万古霉素治疗葡萄球菌感染的临床疗效下降，随之万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌（VRSA）临床株是否会分离到，成为人们监测和关注的热点。如果葡萄球菌一旦对万古霉素耐药，临床将如何治疗？
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。它在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因此，它很容易就能够污染一些食物来源，从而引发疾病。特别是金黄色葡萄球菌肠毒素，它是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，中国金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件也时有发生。误食金葡菌污染的食品,可引起呕吐和腹泻等症状。因此，在本篇文献中，我们选取了关于金黄色葡萄球菌肠毒素的一部分内容进行了较为细致的思考。 文中提到，肠毒素能够引起人和哺乳动物肠胃道毒性反应。但是，金葡菌肠毒素同时也是一种典型的超级抗原。在免疫反应中，只需极微量，就能通过一种独特的机制，使之产生大量细胞因子和细胞毒性物质。从而抑制异常分裂的癌症细胞生长而可能起到治疗癌症的效果。 那么，肠毒素治疗肿瘤的机制是什么呢？ 首先，肠毒素是一种超级抗原。超抗原是一类只需极低浓度就能激活大量T细胞克隆或B细胞克隆、产生极强免疫效应的物质。它远超普通抗原的多克隆激活能力，可视其为具非特异性免疫原性但无免疫反应性的抗原。它在体内能够活化CD4 + T细胞，这种细胞能分泌多种细胞因子。它们不仅能够直接或间接地杀伤肿瘤细胞，而且可以增加肿瘤细胞表达MHC 抗原分子，增强肿瘤细胞刺激宿主免疫系统的能力; 另一方面，这些细胞因子又刺激T细胞进一步增殖分化，而增殖分化的T细胞又将产生更多的细胞因子与细胞毒作用，共同导致肿瘤细胞的破坏溶解，从而形成级联效应，达到对肿瘤的治疗作用。 除了对肿瘤的治疗作用，肠毒素在一定浓度和不同途径给予时，还具备着非特异性促进人和哺乳动物细胞的有丝分裂效果。特别是对损伤部位的组织有促进分裂和生长作用，能够致使损伤组织快速愈合。故有利于对损伤组织的治疗。但这种反应作用的机制我们小组尚且还无法解释，希望在之后的课程中能够有所启发。
金黄色葡萄球菌的危害程度评估报告 一、生物学特性 金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属，可引起多种严重感染。金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。 二、危害程度分类 根据中华人民共和国卫生部制定《人间传染的病原微生物名录》该菌危害程度为第三类。 三、致病性和感染剂量 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶，有报道目前出现越来越多的耐药菌株，MRSA即耐甲氧西林金黄色葡萄球，菌致病性也随着变强。 四、暴露的潜在后果 暴露后可能引起感染，菌量大时可使实验人员出现皮肤软组织感染、全身性感染、呼吸道感染、中毒、肠炎等。被感染后，成为传染源，可能对周围及环境造成污染，应及时得到治疗和控制。 五、感染途径 通过污染食品和水源经口传播，也可通过呼吸道和接触传播。 六、微生物在环境中的稳定性 葡萄球菌是无芽胞菌中抵抗力最强者，而干燥可达数月，加热80℃30min才被杀死。5％石炭酸，0.1％升汞10～15min死亡。1:100000～1:200000龙胆紫溶液能抑制其生长。对磺胺增效剂、青霉素、红霉素等较敏感，但耐药株逐年增多，MRSA即为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。 七、浓度和浓缩标本的容量
金黄色葡萄球菌的耐药性研究 一、金黄色葡萄球菌的分离及培养 称取10g土样，在无菌条件下，放入无菌的三角瓶中，加入90ml的蒸馏水，再加入0.2mg复方磺胺甲恶唑振荡10min，使土样充分混合，利用金黄色葡萄球菌对磺胺类药物敏感性低的特性，杀死其他细菌。从三角瓶中取1ml上清液放入一支无菌试管（15*150mm）中按10倍梯度稀释成10-5的土壤稀释液后，分别取200μL涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上，置于37℃培养箱中恒温培养24h。利用高盐培养基抑制其它细菌的生长，从而分离得到金黄色葡萄球菌。 二、金黄色葡萄球菌的鉴定 1.菌落形态：菌落较小，圆形，直径1-2mm，较湿，较透明，边缘整齐，隆起，略带淡绿色。 2.染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阴性菌，显微镜下呈单个或葡萄状排列，无芽孢、荚膜，单个菌体直径为0.5-1μm。 革兰氏染色： 1.涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10μL待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂步成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。 2.干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烧枯而变形。 3.固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒钟，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉得烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。 4.初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约为1min。
5.水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。 6.媒染：用100-1000μL移液枪吸取300μL碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。 7.水洗：重复步骤5。 8.脱色：斜置载玻片，滴加95％的乙醇脱色，至流出的乙醇不显紫色为止，大约需时20-30s，随即水洗。 9.复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。 10.水洗：重复步骤5。 11.干燥、观察：用吸水纸吸掉水分，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目的物后，滴一滴浸油在玻片上，用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色为革兰氏阳性菌，红色为革兰氏阴性菌。 三、实验中所需培养基配方及制法 （1）科玛嘉金葡萄球菌显色培养基：琼脂15.0g/L 蛋白胨及盐分65g/L 色素2.5g/L PH 6.9+0.2 金黄色葡萄球菌在科玛嘉黄色葡萄球菌显色培养基上，菌落颜色为紫红色、粉色或粉红色。 （2）广东环凯显色培养基：蛋白胨大豆胨和酵母粉氯化钠琼脂显色剂 金黄色葡萄球菌在广东环凯显色培养基上，菌落颜色为粉红——紫红色。 （3）13％NaCl牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏5g 蛋白胨10g 氯化钠130g 琼脂15g 水1000ml PH 7.4-7.6 （4）MH肉汤培养基：乳糖5g 胰蛋白胨20g SDS 0.5g 氯化钠5g 磷酸氢二钠（无水）5.74 磷酸二氢钾（无水）1g 微量元素溶液0.5mL 蒸馏水1000mL
金黄色葡萄球菌的概况 摘要：本文旨在讲述金黄色葡萄球菌的目前现状，以及其主要检测方法，代谢物肠毒素检测方法，耐药检测和幼儿园发病原因，这些对金葡菌的检测、治疗和预防起到了很好的帮助。关键词：金黄色葡萄球菌；检测；肠毒素；耐药；发病 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，SA）是食品卫生标准中规定不得检出的常见食物中毒致病菌，是食品卫生微生物常规检测项目之一[1]。SA是葡萄球菌属，革兰染色阳性，呈葡萄状排列。当衰老、死亡、被吞噬后常转为阴性。无鞭毛、无芽胞、体外培养一般不形成荚膜。在浓汁及液体培养基中常单个、成对、或短链状排列。在普通培养基上即可生长，当加入血液或其他营养物质生长的更好。需氧或兼性厌氧。最适pH7.4，最适温度28-38℃，致病菌在37℃生长最好。某些菌株耐盐性特强，在100-150g/L氯化钠培养基中都能生长。在某些影响细胞壁形成物质的作用下可形成L型。触酶试验阳性。多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气，致病菌株可分解甘露醇。SA能产生大量核酸酶，该酶可耐受100℃30min不破坏，降解DNA和RNA的能力较强。此酶对检测葡萄球菌的致病性与血浆凝固酶具有同等价值。 由于致病金黄葡萄球菌能分泌肠毒素，因此一旦细菌污染食品，并在合适的温度环境下，细菌可以大量繁殖并产生肠毒素，从而引起消费者食物中毒[2]。金黄色葡萄球菌是一种能引起食物中毒的重要细菌。根据美国疾病控制中心的一些报告，由SA引起的食物中毒居第二位，仅次于大肠杆菌，在细菌性食物中毒中的比例为33％。加拿大的发生率更高，占细菌性食物中毒的45％[3]。中国每年发生SA中毒事件也屡见不鲜，因此造成每年的经济损失相当惨重，目前世界各国都把SA定为重要的食品卫生法定检测项目。在1960年，人们将一种半合成的青霉素-甲氧西林第一次应用于临床，而且仅仅一年之后，在英国就发现了首例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistance Staphylococcus aureus,MRSA），再后来，在世界范围内MRSA便以惊人的速度蔓延开去，继而发展成为医院内最最常见的微生物病原菌，与乙型肝炎、艾滋病同为当今世界三大感染顽疾[4]。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院内重要感染的致病菌，其发病率和病死率在世界各地均很高，美国疾病控制中心在2003年做了大量工作，根据统计了解，每年因为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染，大约有数十万人住院接受治疗，在医院内由SA引起耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染，其分离程度已经高达80%以上，而且呈向社区扩散的趋势[5]。1996年，日本报告了第一例对万古霉素敏感性下降的金葡菌[6] ，人们把万古霉素认为是治疗SA的最后防线，最为经济有效的药物，不过在20世纪90年代后期又出现了耐万古霉素的SA，开始表现为万古霉素中介金黄色葡萄球菌（vancomycin intermediate-susceptible staphylococcus aureus ，VISA），美国、英国、德国、意大利、韩国等相继报道检出了VISA[7]，；1997年美国分离了2例VISA[8]同期，在欧洲与亚洲多个国家均有类似报到[9]。 国内外对SA的检测方法，主要有传统分离培养及生化鉴定、显色培养基鉴定、酶联免疫(ELISA)、PCR、美国3M公司的petrifilm培养片等方法。现行国标检测食品中的SA主要是采用传统的分离培养之后进行生化鉴定，整个检测过程获得最终结果需时5天左右。而且免疫学的ELISA法所用的抗体基本上全部依赖国外进口，试剂也相对昂贵；但传统的PCR法却需要提取DNA，加大了人力、物力的消耗，成本提高。对于SA的检测，很多研究者都来检测致使其食物中毒的肠毒素基因[10]，尤其是用于食物中毒事故的调查，所以对于研发一种快速、便捷的检测方法是目前食品安全检测的当务之急。 SA的常规检验检验程序：检样处理→增菌→分离→分纯→溶血试验→革兰染色镜检→血浆凝固酶试验→肠毒素检验[11]。常规检验具有操作简便，所需设备简单，成本相对较低的优点，但其操作繁琐，检测时间较长，且灵敏度较低[12]。
金黄色葡萄球菌 一、生物学性状 1、形态与染色 革兰阳性，球形，呈葡萄串状排列。无芽孢、无鞭毛，体外培养时一般不形成荚膜，少数菌株的细胞壁外层可见有荚膜样黏液物质。在某些化学物质（如青霉素）作用下，可裂解或变成L型。 2、培养特性 需氧或兼性厌氧。营养要求不高，在普通培养基中，37℃生长良好。属内不同菌种可产生金黄色、白色或柠檬色等不同颜色的脂溶性色素并使菌落着色。致病性葡萄球菌菌落呈金黄色，于血琼脂平板上生长后，在菌落周围还可见完全透明溶血环（β溶血环）。 3、生化反应 多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气。致病性菌株能分解甘露醇，产酸。触酶阳性，可与链球菌相区分。 4、抗原 （1）葡萄球菌A蛋白（SPA）：90%以上金黄色葡萄球菌细胞壁表面存在SPA 蛋白。在体内，SPA与IgG结合后所形成的复合物还具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。 （2）荚膜多糖：利于细菌黏附道细胞或生物合成材料表面（如生物性瓣膜、导管、人工关节等）。 （3）多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁。金黄色葡萄球菌中可提出A群的多种抗原，其化学组成为磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺核糖醇残基。 5、抵抗力 葡萄球菌对外界理化因素的抵抗力较强。在干燥的脓汁或痰液中科存活2～3个月；加热60℃1小时或80℃30分钟才能将其杀死；耐盐，于100～150g/LNaCl 培养基中仍能繁殖。对青霉素、金霉素、红霉素和庆大霉素高度敏感，对链霉素中度敏感，对磺胺、氯霉素敏感性差。该菌易产生耐药性，对青霉素G的耐药菌株已达90%以上，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），已成为医院感染最常见的致病菌。耐药性的产生机制与细菌的质粒或与细菌细胞壁成分改变和合
金黄色葡萄球菌的耐药性分析 [摘要]目的了解金黄色葡萄球菌的耐药性，便于临床合理用药。方法采用WHONET软件对临床标本中分离的545株金黄色葡萄球菌的耐药情况进行回顾性分析。结果MRSA的检出率为50.83％。金黄色葡萄球菌对青霉素G、阿奇霉素、红霉素的耐药率分别为91％、80.7％、80.4％；对万古霉素和替考拉宁的耐药率为O％和1.8％。MRSA与MSSA对头孢西丁、左旋氧氟沙星、苯唑西林等的耐药性差异有显著性(P＜0.01)。结论金黄色葡萄球菌对青霉素、阿奇霉素、红霉素耐药严重；未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌；对于金黄色葡萄球菌感染的治疗，应根据实验室药敏试验结果选用抗菌药物。 [关键词]金黄色葡萄球菌；MRSA；耐药性；药敏试验 金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus，sAU)引起的社区感染和医院感染一直是临床上的重要难题。自20世纪60年代出现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant stphylococcus aureus。MRSA)以来，SAU的耐药率和MRSA 的检出率越来越高。为了解本地区SAU的耐药性，便于临床合理用药，对武汉大学中南医院2006年1月至2007年1月临床标本中分离的545株SAu的耐药情况进行分析，现将结果报告如下。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1菌株来源2006年1月至2007年1月从武汉大学中南医院临床标本中分离出545株sAU。其中痰液标本中分离出254株，伤口分泌物分离出50株，血液中分离出38株，咽拭子中分离出36株，脓液和尿液中各分离出11株，其他标本中分离出145株。545株SAU来自门诊病人62株，占11.4％(62/545)；来自住院部病人483株，占88.6(483/545)。 1.1.2药敏纸片四环素30μg/片、左旋氧氟沙星5μg／片、加替沙星5μg ／片、头孢西丁30μg/片、庆大霉素10μg片、复方新诺明23．75μg片、环丙沙星5μg片、氯霉素30μg／片、青霉素G 10 IU／片、万古霉素30μg片、替考拉宁30μg片、苯唑西林1μg/片、红霉素15μg/片、克林霉素2μg/片、阿奇霉素15/μg 片，均为北京天坛药物生物技术开发公司的产品。 1.1.3培养基Mueller-Hinton琼脂，北京天坛药物生物技术开发公司的产品。 1.1.4KB法抑菌圈测量仪北京先驱威锋技术开发公司产品。 1.2方法 1.2.1SAU鉴定所有菌株按照全国临床检验操作规程鉴定。
金黄色葡萄球菌的耐药机制研究现况 近年来，耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)感染的耐药率和多重耐药菌株不断增长，导致临床抗感染治疗难度增加。金黄色葡萄球菌是引起化脓性感染和医院感染的常见病原菌。数十年来，由于细菌的进化和抗生素的滥用，该菌的耐药性逐渐增强，特别是甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌。为了及时了解该菌的耐药情况，本文从分子水平阐明了其对几种常见抗菌药物耐药机制，对于医务人员从分子生物学角度对临床耐药性加以研究，治疗金黄色葡萄球菌引起的感染，指导临床合理用药，减少耐药性的产生具有重要意义。 1甲氧西林耐药机制 甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌是指表达mecA基因或具有其它甲氧西林耐药机制的金黄色葡萄球菌J。目前，实验室利用苯唑西林或头孢西丁代替甲氧西林进行MRSA检测。临床微生物实验室检测MRSA，常利用药敏纸片法(K—B 法)，该法将30片头孢西丁纸片贴在培养基上，35℃培养24 h，当抑菌环大于或等于22 mm判为苯唑西林敏感金黄色葡萄球菌，小于或等于21 HnTI则为苯唑西林耐药金黄色葡萄球菌。 青霉素结合蛋白(PBP)是金黄色葡萄球菌细胞壁主要成分肽聚糖合成过程中所必需的转肽酶，其催化细胞外五肽侧链的交联而构成肽聚糖网状立体结构。金葡菌正常的PBP有PBP1、PBP2、PBP3和PBP4 [1]，B-内酰胺类抗生素通过与PBPs结合抑制其酶活性，从而阻碍细胞壁肽聚糖交联，使得细菌细胞壁合成被破坏而死亡。而MRSA能产生一种新的特殊的PBP2a。PBP2a常由B一内酰胺类抗生素诱导，对大多数8-内酰胺类抗生素亲和力低，由于其可替代高亲和力的正常PBPs催化肽聚糖交联，使细菌得以逃逸B-内酰胺类抗生素的作用而表现出耐药性[2]。治疗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌，首选药物为万古霉素。然而，目前国际上已经出现了万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。 2万古霉素耐药机制 万古霉素为糖肽类抗生素，主要抑制细胞壁的合成。细胞壁前体D一丙氨酰一D一丙氨酸是万古霉素的作用靶位。万古霉素通过与五肽交联前体的C端D一丙氨酰一D一丙氨酸结合形成复合物，阻断肽聚糖合成中的转糖基酶、转肽酶及D，D一羧肽酶的活性，从而阻止细胞壁的合成，导致细胞死亡。 自1997年日本报道了世界上第一株临床分离的万古霉素中介金黄色葡萄球菌以来，欧美多个国家都相继有VISA菌株的报道，至2002年6月，在美国证实的VISA感染已达8例。金黄色葡萄球菌对万古霉素的MIC小于或等于2µg／ml为敏感，MIC 4—8µg／ml为中介，MIC大于或等于16µg／ml为耐药。任何万古霉素MIC大于或等于8µg／ml的金黄色葡萄球菌都应送往参考实验室。金黄色葡萄球菌对万古霉素的耐药机制可能有耐药基因转移、细胞壁增厚及改变、抗生素选择性压力和基因突变。
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 生活常识分享金黄色葡萄球菌感染的病因有哪些 导语：金黄色葡萄球菌感染是皮肤化脓性感染的最常见致病菌，也是四种最常见的医院获得性感染的病原之一。其传播方式在医院内部主要是经健康医务人 金黄色葡萄球菌感染是皮肤化脓性感染的最常见致病菌，也是四种最常见的医院获得性感染的病原之一。其传播方式在医院内部主要是经健康医务人员暂时寄居细菌的手进行传播，尤其是在新生儿童症监护病房(NICU)金葡菌是最常见的毒力最强的致病原。那么金黄色葡萄球菌感染的病因有哪些呢？看过下面的文章相信你就会明白。 金黄色葡萄球菌脑膜炎是指由金黄色葡萄球菌引起的脑膜炎，起病急，常有全身感染中毒症状，如畏寒、发热，伴持久而剧烈的头痛，颈强直较一般脑膜炎明显，除有脑膜炎症状外，尚有局部感染病灶，败血症患者还有其他迁徙性病灶，出现皮疹，如荨麻疹样、猩红热样皮疹或小脓疱疹，皮肤可见出血点，很少融合成片。 金黄色葡萄球菌引起的脑膜炎多继发于金葡菌败血症，尤其多见于合并左心内膜炎的患者，通过细菌栓子经血流侵袭脑膜。面部痈疖并发海绵窦血栓性静脉炎可进一步导致脑膜炎，颅脑损伤、颅脑手术后及腰椎穿刺时消毒不严也可并发脑膜炎。脑膜附近的感染病灶如中耳炎，乳突炎、鼻窦炎等亦可引起本病，新生儿脐带和皮肤的金葡菌感染也可继发脑膜炎，发病时间多在产后2周左右。 金黄色葡萄球菌感染的病因有哪些呢？上面的内容已经让我们知道了答案.为了您和家人的健康，如有发现类似感染的症状请及时就医，如果您还有什么需要咨询的请随时向我们提问，我们的专家24小时在线回答您的问题接军您的疑惑给您提供一个最佳的治疗方案，相信一定能给您满意的答复。
金黄色葡萄球菌耐药性研究进展 金黄色葡萄球菌简介 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。”，细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，阴性菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。 金黄色葡萄球菌的流行病学 金葡菌是引起人类食物中毒最常见的病原菌，在全球范围内具有很高的发病率和病死率，是全球公共卫生与医疗健康领域中的重要话题。金葡菌能分泌20多种毒性蛋白质，其产生的毒素主要有肠毒素、杀白细胞毒素、表皮剥脱毒素和和中毒休克综合征毒素-1，侵袭性酶类主要有血浆凝固酶、脱氧核糖核酸酶、脂肪酶、磷酸酶、透明质酸酶、胶原酶和溶纤维蛋白酶等。些毒素可引起全身非特异性炎症反应，可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等疾病，甚至会导致败血症、脓毒症等全身性感染，严重者可造成多器官功能障碍甚至死亡；其致病力的强弱主要取决于产生毒素和侵袭性酶的能力。 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因此，食品受到污染的机会很多。美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，中国金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件也时有发生。 新型耐药金黄色葡萄球菌 新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，被称作超级细菌，几乎能抵抗人类所有的药物，但是万古霉素可以对付它。典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4，干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径0.5~1.0mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物、青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性，原因是由于这些菌株产生青霉素酶等。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制生长。 抗生素滥用及金黄色葡萄球菌耐药性 随着一种半合成青霉素- 甲氧西林在1960 年被首次应用于临床以来，仅仅一年之后，在英国就发现了首例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistance Staphylococcus aureus，MRSA），之后MRSA以惊人的速度在世界范围内蔓延，成为医院内最常见的病原菌，由MRSA 引起的感染在世界许多国家具有很高的发病率和病死率。从20 世纪90 年代开始，院内MRSA 有向社区扩散的趋势，社区感染MRSA 的现象与报道日益增多，这种MRSA 经常在没有医院经历和院内感染可能的健康人群分离获得，而且呈日益增长的趋势。 金葡菌的耐药状况 目前，MRSA已经在世界范围内普遍存在，在院内感染革兰氏阳性菌高居首位。同时，其分离率在大多数地区呈逐年增加的趋势。在美国，1975 年MRSA 在临床分离出的金葡菌中仅占2.4％,而1991年则迅速增至29％，2002年则占到30％-50%。在欧洲，MRSA的分
金黄色葡萄球菌 生物学特性： 1.球菌，直径0.8-1.0μm左右，显微镜下排列成葡萄串状 2.无芽胞、鞭毛，无荚膜 3.革兰氏染色阳性 4.化能异养菌，呼吸代谢和发酵代谢 5.高度的耐盐性（10-15%NaCl肉汤中生长） 培养特性： 1.营养要求不高 2.需氧或兼性厌氧，在好氧环境下生长最好 3.最适生长温度37°C，干燥环境下可存活数周 4.最适生长pH 7.4 5.菌落光滑、低凸、闪光、奶油状、并且有完整的边缘。 6.血平板菌落周围形成透明的溶血环 生化特性： （1）可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。 （2）金黄色葡萄球菌在厌氧条件下分解甘露醇产酸（非致病性菌则无此现象） （3）许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
（4）具有较强的抵抗力，磺胺类药物敏感性低，对青霉素、红霉素 等高度敏感 金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶 体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素可破坏人的白细胞和巨噬细胞 c.血浆凝固酶当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维 蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡 萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来 作为依据鉴定金黄色葡萄球菌 e.肠毒素金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠 毒素，分为A、B、C、D、E及F五种血清型。 此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。 培养基菌落形态 甘露醇氯化钠琼脂 金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有黄色环，菌落直径0. 7?lmm 卵黄氯化钠琼脂 金黄色，圆形凸起，边缘整齐，外围有卵磷脂分解的乳浊圈，菌落直径l?2mm
金黄色葡萄球菌 百科名片 金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），可引起多种严重感染。有“嗜肉菌"的别称。 [编辑本段]菌类介绍 细菌按形态可分为:球菌,杆菌,和螺旋菌.金黄色葡萄球菌就是球菌的一种.它是革兰 氏阳性菌的代表.革兰氏阳性菌就是可以被结晶紫初染,碘液媒染,乙醇处理,沙黄(红色)复染后呈现紫红色的细菌.而革兰氏阴性菌则呈现红色.这些差别源于金黄色葡萄球菌细胞壁的组成和结构不同.金黄色葡萄球菌细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸.其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密,造成了不同的染色结果.金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源.当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了,于是发现了青霉素.而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳 性菌作用明显.这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的. [编辑本段]生物学特性 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。 显微图像 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1~2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl 肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏 感。 [编辑本段]流行病学
金黄色葡萄球菌研究现状 前言 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ,金葡菌)是一种革兰氏 阳性球菌,广泛分布于自然界,可以引起人和动物的感染。在人体主要寄殖于鼻前庭粘膜、腹股沟、会阴部和新生儿脐带残端等部位，偶尔也寄生于口咽部、皮肤、肠道及阴道口等，是医院感染常见的病原体之一。在医院里，耐甲氧西林和其它抗生素的金葡菌广泛流行，对万古霉素不敏感的菌株也有所增加，给临床治疗带来了很大的困难。金葡菌除了引起感染外，其产生的肠毒素可污染食物而致食物中毒，为人类带来非常严重的公共卫生负担。本文拟对金葡菌感染的临床症状，流行病学研究，病原学，分型，检测及预防等方面做简要综述。 1.病原学 1.1形态与染色 典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列 成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜。革兰染色阳性,衰老或死亡后可转为阴性。 1.2培养特性 金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37 ℃,最适生长pH7. 4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1～2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10～15 %NaCl 肉汤中生长，因此利用它的这个特性进行污染标本分离。
1.3抵抗力 抗干燥:在干燥环境中存活数月；空气中存在,但不繁殖;耐热:加热70 ℃1h ,80 ℃30min 不被杀死；耐低温:在冷冻食品中不易死亡[1，2 ];耐高渗：在含有50 %～66 %蔗糖或15 %以上食盐食品中才可被抑制,能在15 %NaCl 和40 %胆汁中生长. 2．流行现状 2.1院内感染及耐药 金黄色葡萄球菌是院内感染的常见细菌之一，许多国家都设有专门机构，应对金葡菌的院内感染问题。随着?-内酰胺类抗生素的广泛应用，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 随之增加，且引起的感染和病死率有逐年增加的趋势。MRSA 可通过接触途径进行传播, 即易感人群从携带者或感染者身上获得MRSA , 导致传播流行。 美国第一例MRSA 发现于1968 年, 1975 年MRSA 在临床分离出的金葡菌中仅占2. 4% , 而1991 年则迅速增至29% [3 ]。现在美国的某些医院MRSA 在临床分离出的金葡菌中可以占到30%-50%。同样在欧洲的葡萄牙和意大利，MRSA 在临床分离出的金葡菌中占50%；土耳其和希腊>30%[4]。荷兰非常低，只有2%，这归功于荷兰人行之有效的控制策略[5]。在欧洲的调查中，瑞士的流行率最低（1.8%）[4]，这主要由于他们在医院内实行了一些新的干预行为，如坚持医护人员的手部卫生管理，以减少MRSA的传播[6]。在北欧国家MRSA 在临床分离出的金葡菌中不足1%[7]。在芬兰MRSA是非常少见的，直到20世纪90年代医院的病人中只有散发的病例[8][9]，
1.血浆凝固酶试验： 原理:金黄色葡萄球菌能产生结合型血浆凝固酶，可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白，附着于细菌表面，在玻片上形成凝集颗粒；游离型的血浆凝固酶则可使试管中血浆发生凝固。 大多数致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，而非致病株一般不产生。因此，血浆凝固酶试验是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。葡萄球菌产生的血浆凝固酶有两种，一种是结合凝固酶（用玻片法测试），另一种是游离凝固酶（用试管法检测）。 方法：（1）玻片法：在1张洁净玻片中央加1滴9g／L氯化钠(生理盐水)溶液，用接种环取待检培养物与其混合（设阳性和阴性对照）制成菌悬液，若经10～20s内无自凝现象发生，则加入兔新鲜血浆1环，与菌悬液混合，观察结果。（如出现颗粒状凝集现象即为阳性。如不立即发生凝集，可稍待一，二分钟，并轻轻摇动玻片，加速反应，若无凝集时则为阴性。） （2）试管法：用生理盐水将新鲜兔血浆4倍稀释，取0．5ml于试管再加0.5ml 待测菌浓菌悬液（需做阳性对照及阴性对照。），混匀后置37℃水浴中，每30min 观察1次结果。若3小时内试验管和阳性对照管出现凝固，阴性对照管（即浓菌液管）不凝固，为阳性；若阴性，继续观察到24小时，不凝固者为阴性。 （观察结果，将试管微微倾斜，血浆成冻胶样凝块者为阳性，血浆仍为液状者为阴性。）【结果判断】（1）玻片法：5～10s内出现凝集者为阳性。（2）试管法：如有凝块或整管凝集出现为阳性。4h后无上述现象出现，则放置过夜后再观察。【注意事项】（1）最好使用EDTA抗凝的兔血浆，因为如果使用枸缘酸盐抗凝血浆会产生假阳性结果（2）玻片法：10秒内观察结果，如超过10 秒可出现假阳性，因此必须用试管法验证凝聚因子试验。 2. 耐热核酸酶试验 原理：致病性葡萄球菌能产生一种耐热核酸酶，它能分解DNA，使含甲苯胺蓝核酸琼脂显示粉红色 玻片法：取融化好的甲苯胺蓝DNA琼脂3ml均匀浇在载玻片上，待琼脂凝固后打上6-8个孔径为2-5mm的小孔，各孔分别加一滴经沸水浴3分钟处理过的待检葡萄球菌和阳性阴性对照葡萄球菌培养物，35℃大气环境孵育3小时，观察有无粉红色圈及其大小。 划线刺种法：将葡萄球菌24小时肉汤培养物沸水浴处理15分钟，用接种环划线刺种于甲苯胺蓝DNA琼脂平板上，36℃±1℃培养24小时，观察刺线周围有无淡粉红色出现。 结果：玻片法孔外出现粉红色圈的为阳性；划线刺种法在刺种线周围出现淡粉红色为阳性。金黄色葡萄球菌耐热核酸酶阳性，表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌耐热核酸酶阴性。 3. 葡萄球菌肠毒素的测定方法 （一）反向间接血凝法（RPHA）的原理 先将各型肠毒素抗血清通过化学试剂吸附或偶联于绵羊、鸡和人“O”红血球表面，然后再加入被检的含有相应肠毒素的标本，出现血细胞凝集即为阳性。该试验简便、快速，检出灵敏度高，可达1ng/ml，1h-3h小时即可判定结果。（三）检验程序
金黄色葡萄球菌 生物学性状 1、形态与染色 革兰阳性，球形，呈葡萄串状排列。无芽孢、无鞭毛，体外培养时一般不形成荚膜，少数菌株的细胞壁外层可见有荚膜样黏液物质。在某些化学物质（如青霉素）作用下，可裂解或变成L型。 2、培养特性 需氧或兼性厌氧。营养要求不高，在普通培养基中，37℃生长良好。属内不同菌种可产生金黄色、白色或柠檬色等不同颜色的脂溶性色素并使菌落着色。致病性葡萄球菌菌落呈金黄色，于血琼脂平板上生长后，在菌落周围还可见完全透明溶血环（β溶血环）。 3、生化反应 多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气。致病性菌株能分解甘露醇，产酸。触酶阳性，可与链球菌相区分。 4、抗原 种类多，结构复杂，以葡萄球菌A蛋白较为重要。 （1）葡萄球菌A蛋白（SPA）：90%以上金黄色葡萄球菌细胞壁表面存在SPA 蛋白。在体内，SPA与IgG结合后所形成的复合物还具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。 （2）荚膜多糖：利于细菌黏附道细胞或生物合成材料表面（如生物性瓣膜、导管、人工关节等）。 （3）多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁。金黄色葡萄球菌中可提出A 群的多种抗原，其化学组成为磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺核糖醇残基。 5、分类 （1）按色素、生化反应等表型分类，分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌三类。 （2）根据有无凝固酶分型：可分为凝固酶阳性菌株和凝固酶阴性菌株。 6、抵抗力 葡萄球菌对外界理化因素的抵抗力较强。在干燥的脓汁或痰液中科存活2～
3个月；加热60℃1小时或80℃30分钟才能将其杀死；耐盐，于100～150g/LNaCl 培养基中仍能繁殖。对青霉素、金霉素、红霉素和庆大霉素高度敏感，对链霉素中度敏感，对磺胺、氯霉素敏感性差。该菌易产生耐药性，对青霉素G的耐药菌株已达90%以上，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），已成为医院感染最常见的致病菌。耐药性的产生机制与细菌的质粒或与细菌细胞壁成分改变和合成的量有关。 二、致病性 葡萄球菌中金黄色葡萄球菌毒力最强，通过与宿主体内的增殖、扩散和产生有害的胞外物质（酶和毒素）引起宿主疾病。 1、致病物质 （1）葡萄球菌的毒力因子包括：①酶：凝固酶和其他酶（纤维蛋白溶媒、耐药核酸酶、透明质酸酶、酯酶等）；②毒素：细胞溶素（α、β、γ、δ）、杀白细胞素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等；③细菌的一些表面结构蛋白，如黏附素、荚膜、细胞肽聚糖和SPA等。 （2）凝固酶和葡萄球菌的致病力关系密切。凝固酶阳性菌株进入机体后，使周围血液或血浆中的纤维蛋白等沉积于细菌表面，阻碍吞噬细胞的吞噬或胞内消化作用，还能保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏。葡萄球菌繁殖引起的周围纤维蛋白沉积和凝固使感染易于局限化和形成血栓。 （3）葡萄球菌产生的四种溶素中，对人类有致病作用的主要是α溶素，对白细胞、血小板、肝细胞、皮肤细胞等有损伤破坏作用。α溶素为外毒素，抗原性好。其作用机制可能是毒素分子插入细胞膜疏水区，破坏膜的完整性导致细胞溶解。 （4）杀白细胞素攻击中性粒白细胞和巨噬细胞，白细胞的死亡成分可以形成脓栓，加重组织损伤。 （5）肠毒素作用机制可能是毒素与肠道神经细胞受体作用，刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎，称为食物中毒。 （6）表皮剥脱毒素在新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人中，可引起烫伤样皮肤综合征，又称剥脱性皮炎。患者皮肤呈弥漫性红斑和水疱，继以表皮上层大片脱落，受损部位的炎症反应轻微。