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人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒说明书

人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒说明书
人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒说明书

人谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

厦门慧嘉生物科技有限公司

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中谷胱甘肽(GSH)的含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷胱甘肽(GSH)水平。用纯化的人谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的谷胱甘肽(GSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人谷胱甘肽(GSH)的含量。

样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上

清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心

20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程

中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/

分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备

用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上

进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤:

1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标

准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60 ng/L,40 ng/L,20 ng/L,10 ng/L,5 ng/L)。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此

重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止

液后15分钟以内进行。

注意事项:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释

倍数,即为样品的实际浓度。

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%

检测范围:

0.78 ug/ml-50 ug/ml

灵敏度:

0.195 ug/ml

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

谷胱甘肽简介

谷胱甘肽 1.定义 谷胱甘肽(glutathione GSH)CAS号:70-18-8。谷胱甘肽是一种存在于自然界中的氨基酸复合物,由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸等三种氨基酸组合而成的寡肽。谷胱甘肽在体内以两种形态存在,即还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,简称GSSG)。通常人们所指的谷胱甘肽是还原型谷胱甘肽。还原型谷胱甘肽很容易被氧化,两分子谷胱甘肽的活泼巯基氧化脱氢后以二硫键相连得到的二聚体,即是氧化型谷胱甘肽。其中只有还原型谷胱甘肽才具有生理活性,而生物体内的氧化型谷胱甘肽需经还原后才能发挥生理功能。 2.结构和理化性质 谷胱甘肽是一种白色晶体,化学名为γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,其结构如图1所示。相对分子质量为307.33,熔点是192~195 °C (分解),等电点为5.93。比旋光度[α]D20为+17.60°(C=0.05,H2O),易溶于水、稀醇、液氨和二甲基甲酰氨,不溶于乙醚和丙酮。谷胱甘肽固体较为稳定,而水溶液在空气中易被氧化,谷胱甘肽在高水分活度下不易保存,只有将水分活度控制在0.3以下才能长期稳定保存。 3.生理功能

谷胱甘肽是细胞内存在最丰富的小分子硫醇类化合物,其分子中含有一个特异的γ-肽键,由谷氨酸的γ-羧基与半胱氨酸的α-氨基缩合而成,并且半胱氨酸侧链基团上连有一个活泼巯基,是谷胱甘肽许多重要生理功能的结构基础。 3.1抗氧化作用 还原型谷胱甘肽结构中含有一个活泼的巯基—SH,易被氧化脱氢。它在体内能够保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基不被如自由基等有害物质氧化,让蛋白质和酶等分子发挥其生理功能。同时清除自由基。 机体内新陈代谢产生的许多自由基会损伤细胞膜,毁坏免疫系统,侵袭生命大分子,促进机体衰老,并诱发肿瘤或动脉粥样硬化的产生。由此,谷胱甘肽具有抗衰老和强化免疫系统等作用。 3.2整合解毒作用 谷胱甘肽半胱氨酸上的巯基为其活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH),易与碘乙酸、芥子气(一种毒气)、铅、汞、砷等重金属盐或致癌物质等相结合,并促进其排出体外,起到中和解毒作用。4. 应用 4.1 谷胱甘肽在临床上的应用 谷胱甘肽在临床上有广泛的作用,对细胞有保护作用,可防止红细胞溶血,从而减少高铁血红蛋白的损失;抑制脂肪肝的形成,改善中毒性肝炎和感染性肝炎的症状;对丙烯腈、氟化物、一氧化碳、有机溶剂、重金属等中毒具有解毒作用;对缺氧血症的不适、恶心、呕

elisa试剂盒

elisa试剂盒 Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM 抗体ELISA检测。 目录 1elisa试剂盒简介 2优点 3回收率 4发展 5使用方法 6制备方法 7影响 8检测原理 9操作步骤 10试剂器材 elisa试剂盒简介 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 2优点 一、高效、灵敏、特异的抗体; 二、稳定的重复性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 五、节省实验经费。

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书

大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。ELISA法 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上, 然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180 ng/ml,90 ng/ml,45 ng/ml,22.5 ng/ml,11.25 ng/ml, 5.63 ng/ml,2.82 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。 如配制90 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有 0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液:1×20ml。 4. 检测稀释液A:1×10ml。 5. 检测稀释液B:1×10ml。 6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张 12. 使用说明书:1份 自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管 3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

阿拓莫兰(注射用还原型谷胱甘肽)

阿拓莫兰(注射用还原型谷胱甘肽) 【药品名称】 商品名称:阿拓莫兰 通用名称:注射用还原型谷胱甘肽 英文名称:Reduced Glutathione for Injection 【成份】 主要成分:还原型谷胱甘肽,化学名:N(N-L-r谷氨酰基-L—半胱氨酰基)甘氨酸 【适应症】 用于:①化疗患者:包括用顺氯铵铂、环磷酰胺、阿霉素、红比霉素、博来霉素化疗,尤其是大剂量化疗时;②放射治疗患者;③各种低氧血症:如急性贫血,成人呼吸窘迫综合症,败血症等;④肝脏疾病:包括病毒性、药物毒性、酒精毒性及其它化学物质毒性引起的肝脏损害。⑤亦可用于有机磷、胺基或硝基化合物中毒的辅助治疗。 【用法用量】 1.给药途径①静脉注射:将之溶解于注射用水后,加入100ml生理盐水中静脉滴注,或加入少于20ml的生理盐水中缓慢静脉注射;②肌肉注射给药:将之溶解于注射用水后肌肉注射。2.用量:①化疗患者:给化疗药物前15分钟内将1.5g/m2本品溶解于100ml生理盐水中,于15分钟内静脉输注,第2~5天每天肌注本品600mg。使用环磷酰胺(CTX)时,为预防泌尿系统损害,建议在CTX 注射完后立即静脉注射本品,于15分钟内输注完毕;用顺氯铵铂化疗时,建议本品的用量不宜超过35mg/mg顺氯铵铂,以免影响化疗效果。②肝脏疾病:每天肌肉注射本品300 mg或600mg。③其它疾病:如低氧血症,可将1.5g/m2 本品溶解于100ml生理盐水中静脉输注,病情好转后每天肌肉注射300~600mg维持。3.疗程:肝脏疾病一般30天为一疗程,其它情况根据病情决定。

【不良反应】 偶见脸色苍白,血压下降,脉博异常等类过敏症状,应停药。偶见皮疹等过敏症状,应停药。偶有食欲不振、恶心、呕吐、胃痛等消化道症状,停药后消失。注射局部轻度疼痛。【禁忌】 对本品过敏者禁用。 【注意事项】 ①在医生的监护下,在医院内使用本品。②注射前必须完全溶解,外观澄清、无色;溶解后的本品在室温下可保存2小时,0~5 ℃保存8小时。③放在儿童不易触及的地方。【特殊人群用药】 儿童注意事项: 新生儿、早产儿、婴儿和儿童应谨慎用药,尤其是肌内注射。 妊娠与哺乳期注意事项: 老人注意事项: 老年患者应适当减少用药剂量。并在用药过程中严密监视。 【药物相互作用】 本品不得与维生素B12、甲萘醌、泛酸钙、乳清酸、抗组胺制剂、磺胺药及四环素等混合使用。 【药理作用】 还原型谷胱甘肽(GSH)是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,为维持细胞生物功能已呈有重要作用。它是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及丙糖脱氢酶的辅酶,参与体内三羧酸循环及糖代谢。本品能激活多种酶[如巯基(-SH)酶等],从而促进糖、脂肪及蛋白质代谢,并

人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被瘦素(LEP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。

注射用还原型谷胱甘肽说明书

注射用还原型谷胱甘肽 以下内容仅供参考,请以药品包装盒中的说明书为准。 妊娠:在医疗监护下使用 儿童:新生儿、早产儿、婴儿和儿童应谨慎用药,尤其是肌内注射 注射用还原型谷胱甘肽说明书 【说明书修订日期】 核准日期:2007年01月30日 修改日期:2013年01月04日 【药品名称】 注射用还原型谷胱甘肽 【英文名】 Reduced Glutathione for Injection 【汉语拼音】 Zhusheyong Huanyuanxing Guguanggantai 【成份】

本品主要成份:还原型谷胱甘肽 化学名称:N-(N-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰基)甘氨酸 辅料:氢氧化钠 【性状】 本品为白色多孔的块状物或粉末。 【适应症】 ①化疗患者:包括用顺氯铵铂、环磷酰胺、阿霉素、红比霉素、博来霉素化疗,尤其是大剂量化疗时;②放射治疗患者; ③各种低氧血症:如急性贫血,成人呼吸窘迫综合症,败血症等;④肝脏疾病:包括病毒性、药物毒性、酒精毒性(包括酒精性脂肪肝、酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化、急性酒精性肝炎)及其他化学物质毒性引起的肝脏损害;⑤亦可用于有机磷、胺基或硝基化合物中毒的辅助治疗;⑥解药物毒性(如肿瘤化疗药物,抗结核药物,精神神经科药物,抗抑郁药物,扑热息痛等)。 【规格】 0.3g、0.6g、0.9g、1.0g、1.2g、1.5g、1.8g、2.0g 【用法用量】

1.给药途径:①静脉注射:将之溶解于注射用水后,加入100ml、250~500ml生理盐水或5%葡萄糖注射液中静脉滴注。 ②肌内注射给药:将之溶解于注射用水后肌内注射。 2.用量:①化疗患者:给化疗药物前15分钟内将1.5g/m2本品溶解于100ml生理盐水中,于15分钟内静脉输注,第2~5天每天肌注本品0.6g。使用环磷酰胺(CTX)时,为预防泌尿系统损害,建议在CTX注射完后立即静脉注射本品,于15分钟内输注完毕;用顺氯铵铂化疗时,建议本品的用量不宜超过35mg/mg顺氯铵铂,以免影响化疗效果。②肝脏疾病的辅助治疗。对于病毒性肝炎,1.2g,qd,iv,30天;重症肝炎:1.2-2.4g,qd,iv,30天;活动性肝硬化:1.2g,qd,iv,30天;脂肪肝:1.8g,qd,iv,30天;酒精性肝炎:1.8g,qd,iv,14-30天;药物性肝炎:1.2-1.8g,qd,iv,14-30天;滴注时间为1~2小时。③用于放疗辅助用药,照射后给药,剂量1.5g/ m2,或遵医嘱。④其他疾病:如低氧血症,可将1.5g/m2本品溶解于100ml生理盐水中静脉输注,病情好转后每天肌内注射0.3~0.6g维持。 3.疗程:肝脏疾病一般30天为一疗程,其他情况根据病情决定。 【不良反应】

ELISA操作步骤

Envirology ELISA试剂盒说明书 试剂盒内容物: ●Cry1Ab/Cry1Ac 抗体包被固相板 ●Cry1Ab/Cry1Ac 阳性对照组 ●Cry1Ab/Cry1Ac 酶结合物 ●底物 未提供的物品: ●TPBS清洗缓冲液(PBS/0.05% Tween-20 wash buffer),常温保存,最多一年,然后丢弃。 ●萃取缓冲液(PBS0.55% Tween-20)。可以将0.5 ml Tween-20加入到100 ml 上一步的TPBS 缓冲液内制得。不使用时放在冰箱内冷藏,ELISA分析时升至室温使用。 ●HCL(1 Mol/L) 终止液。将83 ml盐酸溶液(37%)到917ml蒸馏水或去离子水中制的。 配置过程在通风橱内操作。室温下保存可使用2年。 ●一次性吸管,可调节排气移液枪,记号笔,parafilm膜等。 实验步骤: ●此步在15min内完成。加50ul 到板孔内,随即在相应板孔内进行如下操作,加50ul 萃取缓冲液作为空白对照,加50ul Cry1Ab阳性对照,加50ul样品萃取物到板孔内。 ●在桌面上晃动96孔板20~30秒,使内容物充分混匀。注意勿使内容物溅出! ●盖上盖子勿使水分蒸发,并在室温下孵化1~2小时。如果有孔板摇床,可在200 rpm速 度下摇动孔板。注意:根据组织萃取方法,用户应该决定一个合适的孵化时间,以使得到最佳结果。 ●孵化结束后,小心移去盖子并将孔内液体甩到废水池内,要剧烈甩弃,尽量甩尽孔内液 体。用TPBS清洗缓冲液清洗板孔(300ul/孔),然后甩尽缓冲液,3次重复。 ●每孔加100ul底物。 ●在桌面上晃动96孔板20~30秒,使内容物充分混匀。盖上盖子室温下孵化15~30分钟。 ●加100ul HCL(1 M)终止液,并且混匀。此步能使孔内物质变黄。注意:在加入终止液 后30分钟内读板。 读板: ●调节读板仪波长到450nm。如果读板仪有双波长功能,可依据文献选600、630或者 650nm作为备选波长。 ●设置读板仪空白项到空白对照孔。

人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA检测试剂盒说明书

人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA检测试剂 盒说明书 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆 樊克生物专业供应: 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)含量。 试验原理: CX3CR1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CX3CR1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板 内进行检测。先将CX3CR1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合 的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CX3CR1的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗CX3CR1抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀 释 底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1.蒸馏水。 2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

GSH注射用还原型谷胱甘肽说明书

注射用还原型谷胱甘肽说明书 【药品名称】 通用名:还原型谷胱甘肽 商品名: 英文名:Reduced glutathione for Injection 汉语拼音:Zhusheyong Huanyuanxing Guguanggantai 其主要成份为还原型谷胱甘肽 其结构式为: 分子式:C10H18O6N3S 分子量:308.33 【性状】 【药理毒理】 还原型谷胱甘肽(GSH)是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,为维持细胞生物功能已呈有重要作用。它是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及丙糖脱氢酶的辅酶,参与体内三羧酸循环及糖代谢。本品能激活多种酶[如巯基(-SH)酶等],从而促进糖、脂肪及蛋白质代谢,并能影响细胞的代谢过程;它可通过巯基与体内的自由基结合,可以转化成容易代谢的酸类物质从而加速自由基的排泄,有助于减轻化疗、放疗的毒副作用,对化疗、放疗的疗效无明显影响,如保护肾小管免受顺铂损害的主要机制为肾小管细胞内含谷胱肽解毒时所需的r-谷酰氨转肽酶,而痛细胞却无此酶,故在不影响本品的细胞毒效应同时保护了,正常组织但器官。且对放射性肠炎治疗效果较明显;对于贫血、中毒或组织炎症造成的全身或局部低氧血症患者应用,可减轻组织损伤,促进修复。通过转甲基及转丙氨基反应,GSH还能保护肝脏的合成、解毒、灭活激素等功能,并促进胆酸代谢,有利于消化道吸收脂肪及脂溶性维生素(A、D、E、K)。 【药代动力学】 小鼠肝注约5小时达血浓峰位,t1/2约24小时,在肝、肾、肌肉分布最多。 【适应症】 用于: ①化疗患者:包括用顺氯铵铂、环磷酰胺、阿霉素、红比霉素、博来霉素化疗,尤其是大剂量化疗时;

阿拓莫兰(还原型谷胱甘肽片)说明书

阿拓莫兰(还原型谷胱甘肽片)说明书 【阿拓莫兰药品名称】 通用名:还原型谷胱甘肽片 商品名:阿拓莫兰 英文名:Reduced glutathione Tablets 汉语拼音:Huanyuanxing Guguanggantai Pian 【阿拓莫兰成份】 阿拓莫兰主要成份为还原型谷胱甘肽,其化学名为N-(N-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰基)甘氨酸。 【阿拓莫兰性状】 阿拓莫兰为薄膜衣片,除去包衣后显白色。 【阿拓莫兰产品介绍】 阿拓莫兰的主要成分是还原型谷胱甘肽(GSH),GSH是哺乳动物细胞内含量丰富的低分子量多肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸残基组成,对人体具有十分重要的生理功能:解酒精毒性、保护肝脏; 解药物毒性(抗肿瘤药、抗结核药、中枢神经药物、对乙酰氨基酚等中毒),防止抗癌药物的副作用,预防和治疗放射线损害;对抗自由基,抗氧化;提高机体免疫力。 人体在许多状态下都可以使细胞内GSH生物合成能力降低,含量下降,尤其是在病理状态下。外源性GSH的补充,可以预防、减轻、中止、组织细胞的损伤,改变病理生理过程。药理毒理研究表明: 阿拓莫兰的主要成分(还原型谷胱甘肽)是含有巯基(SH)的三肽类化合物,在人体内具有活化氧化还原系统,激活SH酶、解毒作用等重要生理活性。参与体内三羧酸循环和糖代谢,促进体内产生高能量,起到辅酶作用。还原型谷胱甘肽是甘油醛磷酸脱氢酶的辅基,又是乙二醛酶及磷酸丙糖脱氢酶的辅酶。还原型谷胱甘肽能激活体内SH酶等,促进碳水化合物、脂肪及蛋白质的代谢,以调节细胞膜的代谢过程。还原型谷胱甘肽参与多种外源性、内源性有毒物质结合生成减毒物质。 【阿拓莫兰适应症】 1)肝损伤:病毒性肝病,药物性肝病,中毒性肝损伤,脂肪肝,肝硬化等; 2)肾损伤:急性药物性肾损伤,尿毒症; 3)化放疗保护; 4)糖尿病:并发症,神经病变; 5)缺血缺氧性脑病;各种低氧血症。 【阿拓莫兰用法用量】 成人常用量为每次口服400mg(4片),每日三次。疗程12周。 【阿拓莫兰不良反应】 1、过敏症:偶有皮疹等过敏症状,应停药。

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试 剂盒 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒 产品规格:96T/48T。 供应商:上海乔羽生物有限公司 上海乔羽有限公司,有elisa试剂盒,抗体,培养基 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒其主要特点如下 专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。 灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 1.标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL 样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。 2.20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒试剂的准备: 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 ELISA试剂盒的优势: 全面——混合8 种不同的常见抗原,对自身免疫性疾病进行全面筛查。

谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)试剂盒使用说明

谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)试剂盒使用说明 微量法注意:正是测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC1195 规格:100管/96样 产品内容: 试剂一:液体×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体×1支,-20℃保存。 混合试剂配制:临用前,在试剂二中加入试剂一20mL,充分震荡溶解后加入全部试剂三,混匀。(注意:必须现配现用,当天使用完) 试剂四:液体×1瓶,4℃保存。 产品说明: GSH-Px是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-Px不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与ROS反应,生成氧化型谷胱甘肽GSSG,从而保护生物膜免受ROS的损害,维持细胞的正常功能;而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。 GSH-Px催化H2O2氧化GSH,产生GSSG;谷胱甘肽还原酶(GR)催化NADPH还原GSSG,再生GSH,同时NADPH氧化生成NADP+;NADPH在340nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。 自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 操作步骤: 一、粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取0.1g组织, 加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心10min,取上清置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量104个:试剂一体积(ml)500~1000:1的比例,建议500万细 胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(率300w,超声3s,间隔7s,总时间3min)然后10000rpm,4℃,离心10min,取上清置冰上待测。 3.血清等液体:直接测定。 二、测定操作: 1.分光光度计预热30min,调节波长到340nm,蒸馏水调零。 2.混合试剂在25℃或者37℃(哺乳动物)水浴中预热30min以上。 3.空白管:依次在1mL石英比色皿中加入20μL蒸馏水、160μL预热的混合试剂,20μL 试剂四,迅速混匀后于340nm处测定第10s和第190s的吸光值,分别记为A空1和A空,△A空白管=A空1﹣A空2。 4.测定管:依次在1mL石英比色皿中加入20μL上清液、160μL预热的混合试剂,20μL 试剂四,迅速混匀后于340nm处测定第10s和第190s的吸光值,分别记为A测1和A测2,△A测定管=A测1﹣A测2。 注意:空白管只需测定一次。 三、GSH-Px活性计算:

人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA检测试剂盒,ELISA试剂盒说明书

人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA检测试剂 盒,ELISA试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆 上海乔羽生物专业供应: 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)含量。 试验原理: Bcl-2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Bcl-2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行 检测。先将Bcl-2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合 物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Bcl-2的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗Bcl-2抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀 释 底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1.蒸馏水。 2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振荡器及磁力搅拌器等。 安全性

谷胱甘肽的化学与医疗作用

谷胱甘肽的化学与医疗作用 卢 薇 (江苏职工医科大学 南京 210029) 摘要 谷胱甘肽(glutathione,GSH)在体内以氧化型(GSSG)和还原型(GSH)2种形式 存在。GSH分子中的巯基容易失氢氧化,因而可以消除体内的活性氧,具有保护酶和蛋白 质免受氧化,保护脏器免受损伤的功效。人工合成的GSH已广泛用于临床。 关键词 谷胱甘肽 活性氧 酶 解毒作用 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是体内最早发现的天然的游离三肽,普遍存在于动物组织中,如肝、肾、心肌、脾、肠、脑和红细胞等,细胞内浓度为0.5mmol/L~10mmol/L;血浆内浓度仅1μmol/L~5μmol/L,约为细胞内浓度的千分之一。 GSH是由谷氨酸(G lu)、半胱酸(Cys)和甘氨酸(G ly)组成的非蛋白巯基化合物,含有γ-羧基形成的酰胺键,其化学结构及合成反应如图1。 2分子GSH脱氢氧化成为GSSG,后者又可通过磷酸戊糖代谢通路中所产生的还原型辅酶Ⅱ(NADPH)和GSH还原酶的作用,还原成GSH。 还原型谷胱甘肽分子中最重要的结构是巯基(-SH),-SH容易失氢发生氧化,因此,GSH可以保护一些含-SH的蛋白质及酶免受氧化剂的损害;同时,-SH中的氢容易被自由基提取,如下式所示: -SH+?R-S?+HR 因而具有清除自由基的能力。 还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽在细胞内维持一定的比值(GSH/GSSG=100/1),GSH的含量随年龄、营养状况及内分泌的不同而变化,如甲状腺机能低下或肝脏疾病、药物中毒等情况下会引起GSH水平降低。GSH/GSSG保持稳态关系对维护组织细胞、多种蛋白质、酶的结构及其功能有重要意义。 1 谷胱甘肽的生理功能 1.1 清除体内的过氧化物及自由基 GSH可在含硒过氧化物酶(GSHpx)的催化下将体内有害的过氧化物、自由基(O2-?、HO?)加以化解和清除,如下式所示: 2GSH+ROOH GSHpx GSSG+2ROH ROOH和自由基不仅氧化某些具有重要生理作用的含巯基的酶和蛋白质,使之丧失活力,而且还将细胞膜磷脂分子中多不饱和脂肪酸氧化生成过氧化物;而生成的过氧化脂质又通过自身的催化连续生成大量过氧化物,因此GSH通过自身氧化能中止脂质过氧化的连锁反应。

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)-ELISA试剂盒说明书

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号:E-EL-M0314 (本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!) 声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Col I浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。 *: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)

检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠Col I抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的Col I会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠Col I抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠Col I抗体与结合在包被抗体上的小鼠Col I结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Col I浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中Col I的浓度。 标本收集: 1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。 2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检测。避免使用溶血,高血脂标本。 3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。 4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5.其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测 (具体处理方法可参考:https://www.doczj.com/doc/4c15348412.html,/news2.asp?tid=477 ) 6.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 7.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,避免反复冻融, 1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 8.如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做 预实验,以确定稀释倍数)。 试验所需自备物品: 1.酶标仪(450nm波长滤光片) 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 3.37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水 4.吸水纸

人表皮生长因子elisa试剂盒使用方法

人表皮生长因子elisa试剂盒使用方法 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 25pg/ml-480pg/ml 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本表皮生长因子(EGF)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人表皮生长因子(EGF)水平。用纯化的人表皮生长因子(EGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入表皮生长因子(EGF),再与HRP标记的表皮生长因子(EGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的表皮生长因子(EGF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人表皮生长因子(EGF)浓度。 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 操作程序总结: 计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未

还原型谷胱甘肽的作用机制

还原型谷胱甘肽的作用机制 ( 摘要)肝脏疾病是临床常见疾病,研究还原型谷胱甘肽( Glutathione,GSH) 在 肝细胞中的作用机制,进而描述氧化应激在肝细胞损伤中的作用,着重讨论了还原型谷胱甘肽的本质及其作用机制。结果表明GSH作为抗氧化剂和细胞代谢剂,成为临床中重要的治疗和辅助治疗药物。 (关键词) 氧化应激还原型谷胱甘肽肝损伤 (Abstract) liver disease is common clinical disease of reduced glutathione (Glutathione, GSH) in the mechanism of liver cells, and then describe the oxidative stress in the liver cell injury, focusing on the prototype of glutathione also glycylglycine nature of its mechanism. The results showed that GSH as an antioxidant and cell metabolism of drugs, to become an important clinical treatment and adjuvant drugs. (Key words) oxidative stress; reduced glutathione; liver injury 还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成的一种三肽,广泛存在于哺乳动物体内,参与体内三羧酸循环及糖代谢,使人体获得高能量,是细胞内主要的巯基(—S H)和含量最丰富的低分子多肽,是细胞内主要的代谢调节物质,其对生物体氧化还原系统和巯基酶有活化作用,可清除组织中的氧自由基。肝脏是体内GSH主要的合成和消耗场所,其受有毒物质或射线等损害时,可诱导产生大量氧自由基;GSH可提供活性巯基或在酶催化下直与自由基结合,保护和恢复肝细胞功能。GSH能激活多种酶。如巯基(—SH) 酶一辅酶等,从而促进糖类、脂肪及蛋白质代谢。并能影响细胞的代谢过程,是一种细胞内重要的调节代谢物质。GSH由于其广泛的生物效应。临床上除应用于肝脏疾病外,还应用于恶性肿瘤、神经、泌尿、消化、等多种疾病。 现将G S H的作用机制及临床应用综述如下。 一氧化应激损伤肝细胞的机制 肝细胞损伤是各种肝病共同的病理基础,其中氧化应激在肝细胞损伤中占有很重要地位。因此,对氧化应激导致肝细胞损伤的研究便成为治疗肝脏疾病的一个重要途径。机体存在着正常的自由基清除体系。生理情况下,活性氧簇( Reactive Oxygen Species ROS ) 的产生与清除保持平衡,不出现细胞损伤;病理情况下,体内ROS产生过多或抗氧化体系不足,即出现促氧化物与抗氧化物之间的动态平衡失调,过多的ROS 可引起肝细胞膜、线粒体膜、微粒体膜及溶酶体膜发生的脂质过氧化,产生脂质过氧化物( 1ipoperoxides,LPO) 及其降解产物( 如丙二醛MDA等),LPO不仅使ROS增加,毒性增强,而且可抑制抗氧化系统,削弱细胞防御机制,增加其对外源性过氧化物毒害的敏感性。因此,体内ROS 的过渡激活、脂质过氧化反应的引发和持续是肝细胞损伤的重要病理基础之一。 二GSH的作用机制 还原型谷胱甘肽(GSH)广泛存在于正常细胞,谷胱甘肽作为一种抗氧化剂,能活跃肝脏代谢,保护肝细胞膜,增强肝脏解毒功能,通过外源性补充谷胱甘肽,可增强肝细胞的解毒功能,促进损伤的肝细胞修复、再生,防止胆汁瘀积,促进黄疸消退及肝功能恢复。GSH是非酶性抗氧化剂。通过其巯基氧化一还原态的转换,作为可逆的供氢体。其分子特点是具有活性巯基(-SH)和y-谷氨酰键。其中巯基是GSH最重要的功能基团。巯基参与机体内多种重要生化反应,保护体内重要酶蛋白巯基不被氧化、灭活而保证能量代谢和细胞利用。在GSH代谢途径中,在GSH转移酶( GST )、谷氨酰转肽酶( Y-GTP )、GSH-过氧化

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒使用说明书

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆 樊克生物专业供应: 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本8羟基脱氧鸟苷 (8-OHdG)含量。 试验原理: 8-OHdG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知8-OHdG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板 内进行检测。先将8-OHdG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合 的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中8-OHdG的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗8-OHdG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀 释 底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1.蒸馏水。 2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振荡器及磁力搅拌器等。 安全性

谷胱甘肽

定义 谷胱甘肽(glutathione GSH) CAS号:70-18-8 EINECS 200-725-4 [1]谷胱甘肽是一种由3个氨基酸组成的短肽,存在于几乎身体的每一个细胞.不过,谷胱甘肽必须有产生的细胞及其前体(维生素C和阿尔法硫辛酸)的条件下,才可以有效地在人体中工作. 在场的谷胱甘肽能帮助保持正常 的免疫系统的功能.这已是其众所周知的关键作用之一,在繁殖淋巴细胞(细胞介导特异性免疫)发生的有效的免疫反应.此外,细胞中的免疫系统产生很多oxiradicals,由于它们的正常运转,因此需要较高浓度的抗氧化剂.谷胱甘肽就发挥了重要作用,这是实现这一要求的关键. 编辑本段原理 加强人体免疫系统你体内的免疫活性,涉及乘法畅通淋巴细胞和抗体 生产需要维护正常水平的谷胱甘肽内淋巴细胞. 抗氧化剂和自由基清除剂谷胱甘肽具有环保护作用的有害影响,包括细菌,病毒污染物和自由基. 调节其他抗氧化剂 -谷胱甘肽其他重要的抗氧化剂如维生素C和E不能做好他们的工作,充分保护您的身体免受疾病. 谷胱甘肽是属于含有巯基的、小分子肽类物质,具有两种重要的抗氧化作用和整合解毒作用。谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合而成的三肽,半胱氨酸上的巯基为其活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH),易与碘乙酸、芥子气(一种毒气)、铅、汞、砷等重金属盐络合,而具有了整合解毒作用。谷胱甘肽(尤其是肝细胞内的谷胱甘肽)具有非常重要的生理作用就是整合解毒作用,能与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、重金属)等结合,参与生物转化作用,从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质,排泄出体外。 谷胱甘肽有还原型(G-SH)和氧化型(G-S-S-G)两种形式,在生理条件下以还原型谷胱甘肽占绝大多数。谷胱甘肽还原酶催化两型间的互变。该酶的辅酶为磷酸糖旁路代谢提供的NADPH。 编辑本段谷胱甘肽的主要生理作用 谷胱甘肽的另一主要生理作用是做为体内一种重要的抗氧化剂,它能够清除掉人体内的自由基,清洁和净化人体内环境污染,从而增进了人的身心健康。由于还原型谷胱甘肽本身易受某些物质氧化,所以它在体内能够保护许多蛋白质和酶等分子中的巯基不被如自由基等有害物质氧化,从而让蛋白质和酶等分子发挥其生理功能。人体红细胞中谷胱甘肽的含量很多,这对保护红细胞膜上蛋白质的巯基处于还原状态,防止溶血具有重要

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