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ML-356_脂肪酸合酶(FAS-TE)硫酯酶结构域的抑制剂_1808260-45-8_Apexbio

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不饱和脂肪酸

不饱和脂肪酸 缺乏脂肪,和缺乏其它任何一种营养一样,都会造成身体的不适。脂肪经消化后,分解成甘油及各种脂肪酸。 根据结构不同,脂肪酸分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸,其中不饱和脂肪酸根据双健个数的不同,分为单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸(PUSA)两种。单不饱和脂肪酸有油酸,多不饱和脂肪酸按照从甲基端开始第1个双键的位置及功能不同,又分为ω-6系列和ω-3系列。亚油酸和花生四烯酸属ω-6系列,亚麻酸、DAH、EPA属ω-3系列,ω-3同维生素、矿物质一样是人体的必需品,不足容易导致心脏和大脑等重要器官障碍。人体不能合成亚油酸和亚麻酸,必须从膳食中补充。 ω-3不饱和脂肪酸中对人体最重要的两种不饱和脂肪酸是DHA和EPA。EPA是二十碳五烯酸的英文缩写,具有清理血管中的垃圾(胆固醇和甘油三酯)的功能,俗称"血管清道夫"。DHA是二十二碳六烯酸的英文缩写,具有软化血管、健脑益智、改善视力的功效,俗称"脑黄金"。 ω-3 多不饱和脂肪酸,是由寒冷地区的水生浮游植物合成,以食此类植物为生的深海鱼类(野鳕鱼、鲱鱼、鲑鱼等)的内脏中富含该类脂肪酸。1970年,两位丹麦的医学家霍巴哥和洁地伯哥经过研究确信:格陵兰岛上的居民患有心脑血管疾病的人要比丹麦本土上的居民少得多。格陵兰岛位于北冰洋,岛上居住的爱斯基摩人以捕鱼为主,他们喜欢吃鱼类食品。由于天气寒冷,他们极难吃到新鲜的蔬菜和水果。就医学常识来说,常吃动物脂肪而少食蔬菜和水果易患心脑血管疾病,寿命会缩短。但是事实恰恰相反,爱斯基摩人不但身体健康,而且在他们之中很难发现高血压、冠心病、脑中风、脑血栓、风湿性关节炎等疾病。无独有偶,这种不可思议的现象同样也发生在日本的北海道岛上。当地渔民的心脑血管疾病发病率明显低于其它区域,北海道人心脑血管疾病发病率只有欧美发达国家的1/10。在我国,也有研究发现浙江舟山地区渔民血压水平较低。其实问题就在于上述这些人的膳食中以鱼类为主,鱼类富含长链的不饱和脂肪酸,这就是他们保持心血管健康的原因之一。 但是日常生活中大多数人不能像爱斯基摩人那样天天吃深海鱼,同时由于生产和加工方面的技术原因,使人对一些食品中含有的不饱和脂肪酸吸收利用率很低,因此导致体内多不饱和脂肪酸严重缺乏,而饱和脂肪酸却大量积累。 主要功效 一、不饱和脂肪酸的生理功能 1、保持细胞膜的相对流动性,以保正细胞的正常生理功能。 2、使胆固醇细化,降低血中胆固醇和甘油三酯。 3、是合成人体内前列腺素和凝血恶烷的前躯物质。 4、降低血液粘稠度,该善血液微循环。 5、提高脑细胞的活性,增强记忆力和思维能力。 二、膳食中不饱和脂肪酸盈缺和健康 1、血中低密度脂蛋白和低密度胆固醇增加,产生动脉粥样硬化,诱发心脑血管病。 2、ω-3不饱和脂肪酸是大脑和脑神经的重要营养成份,摄入不足将影响记忆力和思维力,对婴幼儿将影响智力发育,对老年人将产生老年痴呆症。 膳食中过多时,干扰人体对生长因子、细胞质、脂蛋白的合成,特别是ω-6系列不饱和脂肪酸过多将干扰人体对ω-3不饱和脂肪酸的利用,易诱发肿瘤。 三、推荐的日摄入量 多不饱和脂肪酸含量是评价食用油营养水平的重要依据。豆油、玉米油、葵花籽油中,ω-6系列不饱和脂肪酸较高,而亚麻油、苏紫油中ω-3不饱和脂肪酸含量较高。由于不饱和脂肪酸极易氧化,食用它们时应适量增加维生素E的摄入量。一般ω-6:ω-3应在4 -10:1,摄入量为摄入脂肪总量的50% -60% 。 四、食物来源 1、脂肪的热量密度(1克= 9卡路里)是碳水化合物或蛋白质(1克=4卡路里)的两倍。尽管橄榄油和菜籽油对健康有益,但它们的热量也很高(1汤匙=120卡路里)。此外,许多加工食品和快餐食品的脂肪含量也较高,尤其是饱和脂肪。 2、多不饱和脂肪存在于红花籽油、印加果油、茶油、橄榄油、阿甘油、芥花籽油、葵花籽油、玉米油和大豆油中。而饱和脂肪存在于畜产品中,例如黄油、干酪、全脂奶、冰淇淋、奶油和肥肉,以及某些植物油(椰油、棕榈油和棕榈仁油)中。经科学家最新研究发现:来自南美洲亚马逊流域天然无污染的肥沃土壤中的印加果堪称世界植物营养“果王”,由此,印加果荣获巴黎世界博览会金奖。印加果油是目前世界上发现唯一含α-亚麻酸ω- 3、ω-6、ω-9三种不饱和脂肪酸高达92%的纯天然植物,独一无二,高含量亚麻酸被誉为“21世纪人类健康的加油站”,是不可忽视的生命活力素和消除亚健康的理想产品。 五、含其的植物油 可滋泉巴马火麻油是大自然中唯一能溶解于水的油料,在所有植物油中不饱和脂肪酸含量最高,同时含有大量延缓衰老的维生素E、硒、锌、锰、锗,还含有被誉为“植物脑黄金”的α-亚麻酸(ALA)。巴马火麻对自然生长环境要求极为苛刻,目前只产于巴马北部的石山,产量稀少且价格昂贵。 巴马火麻是迄今为止发现最有效的抗衰老和抗辐射植物,当地称之为“长寿麻”或“不老油”。鉴于在美容养颜和抗衰老方面的潜在价值,1999年联合国粮油调查署考察巴马火麻后向全世界特别推荐巴马火麻油为“最有开发价值的植物油”。 沙棘籽油也是典型的不饱和酸植物油,在所有植物油中不饱酸种类及含量都相当高,同时富含天然稳定剂维生素E,天

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒说明书

货号:MS1108 规格:100管/96样脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。 测定原理: FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm 光吸收下降速率,计算FAS活性。 自备实验用品及仪器: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。 试剂组成和配制: 试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存。用前1d取出置于4℃充分解冻后混匀。 试剂二:粉剂×1瓶。临用前加入440μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入440μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 试剂四:液体20mL×1瓶, 4℃保存。 试剂五:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加入840μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加 入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心40min,取上清置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500 万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后12000g,4℃,离心40min,取上清置于冰上待测。 3.血清等液体:直接测定。 FAS测定操作: 1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。 2. 试剂四置于40℃水浴中预热30 min。 3. 在96孔板或EP管中依次加入20μL上清液、4μL试剂二、4μL试剂三、164μL试剂四和8μL试剂五,混匀后于340nm处测定吸光值,记录第30s和90s时吸光值,分别记录为A1和A2。△A测=A1-A2。 FAS活性计算: a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下 (1)按照蛋白浓度计算 第1页,共2页

不饱和脂肪酸

EPA 二十碳五烯酸,是鱼油的主要成分。虽然亚麻酸在人体内可以转化为EPA,但此反应在人体中的速度很慢且转化量很少,远远不能满足人体对EPA的需要,因此必须从食物中直接补充。 作用 1、治疗自身免疫缺陷。 2、促进循环系统的健康。Ω-3脂肪酸已经被证实能促进循环系统的健康和防止胆固醇和脂肪在动脉壁上积聚 3、有助于生长发育。保持身体里的Ω-3脂肪酸含量处于一个适当平衡的位置对正常的生长和发育是十分必要的。营养专家建议婴儿应从日常饮食和补充剂中吸收各种类型的Ω-3脂肪酸。根据这些建议的要求,婴儿在日常饮食中吸收的EPA应少于 0.1%。 4、其他的情况。Ω-3脂肪酸,包括EPA在内,对肺病、肾病、2型糖尿病、大肠溃疡和节段性回肠炎的治疗都会起到积极的作用。 5、EPA具有帮助降低胆固醇和甘油三酯的含量,促进体内饱和脂肪酸代谢。从而起到降低血液粘稠度,增进血液循环,提高组织供氧而消除疲劳。防止脂肪在血管壁的沉积,预防动脉粥样硬化的形成和发展、预防脑血栓、脑溢血、高血压等心血管疾病。 6、DHA与EPA组合具有保护眼睛,提高视网膜的发射机能作用。国家卫生部要求:DHA与EPA的配比必须在二点五比一以上。 参考摄入量 中国营养学会副理事长苏宜香教授表示,“相关研究已证实了DHA和EPA对人类的健康有更多益处”。 据联合国粮农组织专家委员会联合会商提出的报告显示,每日摄取250—2000毫克的EPA与DHA是构成人类健康饮食的重要组成部分。报告还指出,“成年男性和非孕期或哺乳期女性每天食用250毫克DHA+EPA; 目前中国成年人人均每天DHA+EPA摄入量仅有37.6毫克,不到美国医学研究院建议值(160mg/天)的四分之一,据国家权威调查数据分析显示,属严重缺乏状态。就是这样一个身体状况,对迎接宝宝的身体准备是不足的,据联合国粮农组织专家委员会联合会商提出的报告显示,孕期和哺乳期女性每日摄取DHA+EPA300毫克,是保证母亲和婴儿最佳健康发育水平的最低标准”。[3] 母乳中DHA:AA的配比均衡,帮助DHA和AA共同吸收,对0-6个月宝宝的头脑智力发育至关重要: 根据研究,中国妈妈母乳中DHA:AA的平均比例约为1:1.7,过多的DHA会抑制AA的吸收 实验证明-相比单独作用,DHA和AA共同作用更有利于支持宝宝脑部发育。 DHA/AA配比(1:1-1:2)亲和人体:帮助DHA和AA的有效利用;

蛋白酪氨酸激酶综述

蛋白酪氨酸激酶综述 目前至少已有近六十种分属20个家族的受体酪氨酸激酶被子识别。所有受体酷氨酸激酶都属于I型膜蛋白,其分子具有相似的拓朴结构:糖基化的胞外配体结合区,疏水的单次跨膜区,以及胞内的酪氨酸激酶催化结构域及调控序列。不同受体酪氨酸激酶结合,将导致受体发生三聚化,并进一步使受体胞内区特异的受体酪氨酸残基发生自身磷酸化或交叉磷酸化,从而激活下游的信号转导通路。许多肿瘤的发生、发展都与酪氨酸激酶的异常表达有着极其密切的联系,下面将对几类与肿瘤的发生发展最为密切的受体酪氨酸激酶的研究迸展做一简介。 一、表皮生长因子受体(Epidermal grovth factor receptor, EGFR)家族 EGFRPE包括EGFR、ErbB2、ErbB4等4个成员,其家族受体酪氨酸激酶(RTK)以 单体形式存在,在结构上由胞外区、跨膜区、胞内区3个部分组成,胞外区具有2个半氨酸丰富区,胞内区有典型的ATP结合位点和酪氨酸激酶区,其酪氨酸激酶活性在调节细胞增殖及分化中起着至关重要的作用。 人的egfr基因定位于第7号染色体的短臂(7p12.3-p12.1),它编码的产物EGFR由1210个氨基酸组成,蛋白分子量约为170kDa,其中,712-979位属于酪氨酸激酶区。EGFR的专一配体有EGF、TGF、amphiregulin,与其他EGFR家庭成员共有的配体有(cellulin(BTC)、heparin-binding EGF(HB-EGF)、Epiregulin(EPR) )等。 EGFR在许多上皮业源的肿瘤细胞中表达,如非小细胞性肺癌,乳腺癌、头颈癌,膀胱癌,胃癌,前列腺癌,卵巢癌、胶质细胞瘤等。另外,在一些肿瘤如恶性胶质瘤、非小细胞性肺癌、乳腺癌、儿童胶质瘤、成神经管细胞瘤及卵巢癌等中还可检测到EGFR缺失。最为常见的EGFR缺失突变型是EGFRⅧ,EGFR Ⅷ失去了配体结合区,但是可自身活化酪氨酸激酶,刺激下游信号通路的激活,而不依赖于与其配全结合。EGFR在许多肿瘤中的过表达和/或突变,借助信号转导至细胞生长失控和恶性化。另外,EGFR的异常表达还与新生血管生成,肿瘤的侵袭和转移,肿瘤的化疗抗性及预后密切相关。EGFR高表达的肿瘤患者,肿瘤恶性程度高,易发生转移,复发间期短,复发率高,患者的存活期短。 ErbB2,又名HER-2/neu,是EGFR家族的第二号成员,ErbB2通过与EGFR家族中其它三位成员构成异源二聚体,而发挥生物学作用,尚未发现能与其直接结合的配体。编码ErbB2的基因neu最早从大鼠神经母细胞瘤中分离得到,人类体细胞内neu基因的同源基因,又称为HER-2或erbB2,位于人第17号染色体的长臂(17q21.1),它编码的产物ErbB2由1255个氨基酸组成,蛋白分子量约为185Kda,其中,720-987位属于酪氨酸激酶区。 ErbB2通常只在胎儿时期表达,成年以后只在极少数组织内低水平表达。然而在多种人类肿瘤中却过度表达,如乳腺癌(25-30%)、卵巢癌(25-32%、肺静癌(30-35%)、原发性肾细胞癌(30-40%)等。过度表达的原因主要是ErbB2基因扩增(95%)或转录增多(5%)。 1987年,Slamon等人首行先报道了ErbB2扩增和乳腺癌临床预后不良之间的显著关系,其显著性高于雌激素、孕激素等指标,并在以后的研究中得到大量证实。随后,ErbB2表达水平和乳腺癌治疗效果间的关系得到广泛研究,人们发现ErbB2高表达乳腺癌患者对他莫昔芬(tamoxifen)治疗、单独的激素疗法、以及环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟脲嘧啶联合化疗产生耐受。研究还表明,ErbB2在细胞的恶性转化中发挥重要作用,并能促进恶性肿瘤转移。ErbB2受体过度表达往往提示乳腺癌恶性程度高,转移潜力强,进展迅速,化疗缓解期短,易产生化疗和激素治疗抗性,生存率和生存期短,复发率高。 和ErbB4对肿瘤的作用目前尚不清楚,但在肿瘤形成模型的临床前研究发现,ErbB3、Erb3与EGFR、ErbB2共表达后会使肿瘤恶性程度明显增加。 二、血管内皮细胞生长因子受体(Vascular endothelial growth factor receptor, VEGFR)家族VEGFR家族的成员包括:VEGFR1(Flt-1)、VEGFR2(KDR/Flk-1)、VEGFR3(Flt-4),这一家族的受体在细胞外存在着7个免疫球蛋白样的结构域,在胞内酪氨酸激酶区则含有一段亲水手插入序列。

DHA+与+EPA+合成超长链多不饱和脂肪酸的效率比较

【通讯作者】吴峥峥 DHA与EPA合成超长链多不饱和脂肪酸的效率比较 余 曼,陈 波,张瑞帆,吴峥峥 (四川省医学科学院?四川省人民医院眼科,四川成都610072) 【摘要】 目的 比较在ELOVL4蛋白酶催化作用下,DHA和EPA合成超长链多不饱和脂肪酸VLC-PUFA的效率。方法 构建携带ELOVL4基因和绿色荧光蛋白的重组腺病毒,转入培养的PC12细胞,通过qRT-PCR定量分析ELOVL4基因的表达量,WB检测ELOVL4蛋白的表达;1∶1加入DHA和EPA,孵育48h之后进行脂肪酸提取,通过气相质谱GC-MS分析超长链脂肪酸的成分。结果 GC-MS检测到分别用DHA及EPA处理后的PC12+Ad-ELOVL4的细胞中有n3VLC-PUFA的表达,34:5n3和36:5n3分别为0畅85%和1畅11%;34:6n3和36:6n3分别为0畅16%和0畅29%;EPA所产生的五烯酸总和是DHA所产生的六烯酸总和的4倍。结论 EPA合成VLC-PUFA的效率远远高于DHA,为患者提供更高比例的EPA,而非DHA,可能是治疗STGD3疾病的方式之一。 【关键词】 二十二碳六烯酸;二十碳五烯酸;ELOVL4基因;Stargardt病;超长链多不和脂肪酸【中图分类号】R77 【文献标志码】A 【文章编号】1672-6170(2014)05-0024-04 ComparisonofelongationefficiencybetweenDHAandEPAinsynthesisofverylongchainpolyunsaturatedfattyacids YUMan,CHENBo,ZHANGRui-fan,WUZheng-zheng (DepartmentofOph- thalmology,SichuanAcademyofMedicalSciences&SichuanProvincialPeople摧sHospital,Chengdu610072,China) 【Correspondingauthor】 WUZheng-zheng 【Abstract】 Objective TocomparetheelongationefficiencybetweenDHAandEPAforsynthesisofverylongchainpolyunsat-uratedfattyacid(VLC-PUFAs)undercatalyticactionofELOVL4protease.Methods PC12cellsweretransducedwithrecombinantadenovirustype5carryingmouseElovl4andgreenfluorescentprotein(GFP).GFP-expressingandnon-transducedcellswereusedascontrols.ELOVL4geneexpressionwasquantifiedbyqRT-PCRs.ELOVL4proteinwasanalyzedbyWestern-Blot(WB).ThetransducedcellsweretreatedwithDHAorEPA(1:1).After48hofincubation,cellswerecollected,andfattyacidmethylesterswerepreparedfollowingtotallipidsextraction.Thefattyacidwasanalyzedbyusingagaschromatography-massspectrometry(GC-MS).Results GC- MSanalysisshowedthattheDHAandEPAtreatedPC12+ Ad-ELOVL4hadn3VLC-PUFAsinwhich34:5n3and36:5n3were0畅85%and1畅11%,respectively;34:6n3and36:6n3were0畅16%and0畅29%,respectively.TotalamountofpentaenoicssynthesizedfromEPAwasalmostfourtimesthanthatofhexaenoicssynthesizedfromDHA.Conclusion ElongationefficiencyofVLC-PUFAsfromEPAismuchhigherthanthatfromDHA.Therefore,dietarysupplementationofmoreEPAratherthanDHAmayprovidesometherapeuticbenefitsforpatientswithStargardts摧disease(STGD3). 【Keywords】 Docosahexaenoicacid(DHA),Eicosapentaenoicacid(EPA),ELOVL4gene,Stargardts摧disease,Verylongchainpolyunsaturatedfattyacid(VLC-PUFA) 以DHA和EPA为代表的n3PUFAs(polyunsat-uratedfattyacids,PUFAs)是指含有两个或两个以上双键的一类脂肪酸,通常按照第一个双键的位置把多不饱和脂肪酸分类,其中n3PUFAs,即从甲基端数第1个双键的位置在第3碳位的多不饱和脂肪酸,如二十二碳六烯酸(22:6n3,DHA)和二十碳五烯酸(20:5n3,EPA)。在哺乳动物神经系统中,n3PUFAs不但是重要的结构组分,而且是重要的营养 因子[1] 。DHA被认为是功能最强的n3PUFAs, DHA与人类多种神经性疾病,例如阿尔默茨症[2] 。 Stargardt病(Stargardt-likemaculardystrophy,STGD)是一种发生于青少年期的遗传性黄斑营养不良,目前尚无有效的治疗方法。近年来的研究又发现,ELOVL4基因第VI外显子上突变导致了人类的 常染色体显性遗传STGD3的发病[3] 。ELOVL4属 于超长链脂肪酸延伸酶(elongaseofELOngationofverylongchainfattyacids,ELOVL)家族,已被证实参与多不饱和脂肪酸(verylongchainPUFA,VLC-PU- FA)的C28-C38碳链延长的生化过程[4] 。McMahon等发现,ELOVL4基因突变的STGD3小鼠模型的视 网膜中的C32-C36酰基磷脂酰胆碱的水平下降[5] ,VLC-PUFA水平减少还会导师ERG波幅的下降,因此,治疗STGD3的策略之一可能是通过食物供给方式将VLC-PUFA送到视网膜组织。然而,由于VLC-PUFA结构的不稳定性,使得其很能被大量生产,那么另外一种方式就是通过提供VLC-PUFA的前体物质,体内合成VLC-PUFA。图1显示n3PUFAs的合成通路,我们看到DHA和EPA均为VLC-PUFA的前体脂肪酸,尤其是DHA占有在感光体外部节段磷 脂中大约50%的脂肪酸[6] ,它在神经系统以及视网膜中的作用曾受到广泛的关注。本研究将转基因ELOVL4蛋白在PC12细胞中过量表达,等浓度加入 4 2 实用医院临床杂志2014年9月第11卷第5期

转基因植物生产超长链多不饱和脂肪酸研究进展

植物学通报 Chinese Bulletin of Botany 2007, 24 (5): 659?666, https://www.doczj.com/doc/4c10899751.html,
.专题介绍.
转基因植物生产超长链多不饱和脂肪酸研究进展
石娟, 朱葆华, 潘克厚 *
中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室, 青岛 266003
摘要
超长链多不饱和脂肪酸(VLCPUFAs)对人类健康非常重要。日常摄入一定量的VLCPUFAs能够补充人体自身合成的
不足, 并对某些疾病起到明显的预防和治疗作用。VLCPUFAs主要源自深海鱼油, 但由于市场需求的迅速增长和海洋可捕捞 鱼类资源的日益减少, 该途径已经远远不能满足市场的需要, 寻找更为持续且稳定的VLCPUFAs来源已经成为当务之急。最 近, 人们已经克隆了VLCPUFAs生物合成相关的去饱和酶和延伸酶基因, 并希望在植物特别是油料作物中共表达这些基因, 使 其成为生产VLCPUFAs的 “绿色细胞工厂” 。目前已有多个研究小组在进行转基因植物合成VLCPUFAs的探索, 并取得了突 破性的研究成果。本文综述了相关的研究进展, 并对存在的问题和解决策略进行了探讨。
关键词 DHA, EPA, 转基因植物, 超长链多不饱和脂肪酸
石娟, 朱葆华, 潘克厚 (2007). 转基因植物生产超长链多不饱和脂肪酸研究进展. 植物学通报 24, 659?666.
超长链多不饱和脂肪酸(VLCPUFAs)是指含有 20 或 22个碳原子及4-6个亚甲基间隔的顺式双键的脂肪 酸链(Abbadi et al., 2004), 包括花生四烯酸(AA, 20: 4n6)、 二十碳五烯酸(EPA, 20:5n3)和二十二碳六烯酸 (DHA, 22:6n3)。 多不饱和脂肪酸(PUFAs)可分为n6系 列和 n3 系列。AA 属于 n6 PUFAs; EPA 和 DHA 属于 n3 PUFAs。 研究表明, VLCPUFAs 对人类健康非常重 要。AA 和 EPA 是哺乳动物细胞膜的组分, 也是生成前 列腺素、白三烯和血栓素等激素的前体(Funk, 2001)。 EPA 在凝血、免疫和抗炎症等各种生理反应中起重要 作用(Simopoulos, 2002)。DHA 对胎儿神经系统的形 成至关重要(Uauy et al., 2001), 还影响着视网膜视紫 红质的活性(Giusto et al., 2000), 并与某些疾病如关节 炎、动脉硬化、抑郁症的预防和治疗有关(Horrocks and Yeo, 1999; Marszalek and Lodish, 2005)。 人体合成 EPA 和 DHA 的效率极低, 在日常饮食中
补充足够的 EPA 和 DHA 对维持身体健康极为重要。 目 前该类脂肪酸的主要来源是深海鱼油, 但是鱼类自身并 不能合成 VLCPUFAs, 而是通过摄食富含 VLCPUFAs 的海藻等进行有限的积累; 另外, 过度捕捞使海洋鱼类资 源日益减少, 该途径已经远远不能满足迅速增加的市场 需求。 此外, 由于环境污染等原因导致鱼油中的重金属 含量越来越高, 寻找更为持续、稳定、安全的 EPA 和 DHA来源成为当务之急(Tonon et al., 2002; Domergue et al., 2005a)。已知某些微生物如真菌和海洋微藻能 够从头合成 VLCPUFAs 且含量丰富(Sayanova and Napier, 2004); 然而现已开发出的商业化的海藻油和真 菌油, 由于其产量低和提取成本高限制了这类资源的大 规模应用。 鉴于植物油的提取工艺非常成熟, 许多研究 者已经将目光转向油料作物的代谢工程, 探索如何利用 转基因植物作为 “绿色细胞工厂 ”生产 V LC PU FA s (Truksa et al., 2006)。近年来国外一些研究小组已在
收稿日期: 2006-10-24; 接受日期: 2007-04-09 基金项目: 973 重大基础研究前期研究专项(No. 2005CCA02400) * 通讯作者。E-mail: khpan@https://www.doczj.com/doc/4c10899751.html, 缩写词: AA: arachidonic acid; ALA: α-linolenic acid; DGLA: dihomo-γ-linolenic acid; DHA: docosapentaenoic acid; EDA: eicosadienoic acid; EPA: eicosapentaenoic acid; ER: endoplasmic reticulum; ETA: eicosatetraenoic acid; GLA: γ-linolenic acid; LA: linoleic acid; LPCAT: lyso-phosphatidycholine acyltransferase; OA: oleic acid; PC: phosphatidycholine; PDAT: phospholipid diacylglycerol acyltransferase; PUFAs: polyunsaturated fatty acids; SDA: stearidonic acid; TAG: triacylglycerol; TPA: tetracosapentaenoic acid; VLCPUFAs: very long-chain polyunsaturated fatty acids

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)

货号:QS1108-25 规格:25管/24样脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒说明书 紫外分光光度法 注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。 测定原理: FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm 光吸收下降速率,计算FAS活性。 自备实验用品及仪器: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。 试剂组成和配制: 试剂一:液体25mL×1瓶,-20℃保存。用前1 d取出置于4℃充分解冻后混匀。 试剂二:粉剂×1支,4℃保存。临用前加入550 μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 试剂三:粉剂×1支,4℃避光保存。临用前加入550 μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 试剂四:液体25mL×1瓶,4℃保存。 试剂五:粉剂×1支,4℃避光保存。临用前加入1050 μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约 0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心40min,取上 清置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的 比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后12000g,4℃,离心40min,取上清置于冰上待测。 3.血清等液体:直接测定。 FAS测定操作: 1. 分光光度计预热30min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。 2. 试剂四置于40℃水浴中预热30 min。 3. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、20μL试剂二、20μL 试剂三、820μL试剂四和40μL试剂五,迅速混匀后于340nm处测定吸光值,记录第30s和90s时吸光值,分别记录为A1和A2。△A测=A1-A2。

浙江大学医学院研究生分子生物学-分子医学1复习题

分子生物学复习题 名词解释 1.Tunneling nanotubes(通道纳米管):在压力刺激下,不同细胞间产生的直径 在50-200nm之间,用于传递信息和交流物质细膜通道。 2.Hippo signalingpathway (Hippo 信号通路):正常的Hippo 信号通路通过高 度保守的蛋白激酶Hpo磷酸化蛋白激酶Wts的核心激酶级联反应维持细胞增殖、促进细胞凋亡、参与压力应答,从而维持组织器官的正常大小。 3.SD序列(Shine-Dalgarno sequence):原核生物中mRNA起始密码子AGU 上游8个碱基处存在的一个可以与核糖体小亚基16SrRNA 3’末端序列互补结合的序列,使得翻译起始复合物准确定位于翻译起始部位。 4.内部核糖体进入位点序列(Internal ribosome entry site, IRES):它的存在能够 使蛋白质翻译起始不依赖于5’帽结构,从而使直接从信使mRNA中间起始翻译成为可能,一般来讲,内部核糖体进入位点通常位于RNA病毒基因组的5’端非翻译区,这样病毒蛋白的翻译就可以不依赖于5’帽子结构,常用构建于真核生物双顺反子,第一个蛋白通常靠5’帽子结构起始翻译,而第二个蛋白则依靠IRES起始翻译。IRES前后的两个蛋白的表达通常是成比例的,因此可以根据其中一个报告基因的表达情况来反映另外一个蛋白的表达情况。 5.分子伴侣(chaperone):能够识别并结合到不完整折叠或装配的蛋白质,帮 助这些多肽正确折叠、转运或防止他们聚集,其本身不参与最终产物的形成。

6.核定位信号(nuclear localization signal, NLS):蛋白质的一个结构域,通常为 一短的氨基酸序列,与入核载体相互作用,使蛋白能被转运进细胞核。7.共翻译转位(co-translational translocation):膜结合核糖体上合成的蛋白质, 在 它们进行翻译的同时就开始了转运,主要是通过定位信号,一边翻译,一边进入内质网, 然后再进行进一步的加工和转移。由于这种转运定位是在蛋白质翻译的同时进行的,故称为共翻译转运。 8.等电点(isoelectric point, pI):在某一pH的溶液中,氨基酸或蛋白质解离成 阳离子和阴离子的趋势或程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时溶液的pH值称为该氨基酸或蛋白质的等电点。 9.蛋白质双相电泳(2-dimension electrophoresis):是等电聚焦电泳和SDS-PAGE 的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。 10.染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP):在活细胞状态下 固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。 11.复制子:从一个复制起始点开始所复制的DNA分子或DNA片段是一个基 本的复制单位,成为复制子。 12.Paramutation:同一位点的两个等位基因之间的相互作用,导致其中一个等位 基因发生一个稳定可遗传的变化。

酪氨酸激酶体系顺口溜

酪氨酸激酶体系:胰岛素,生长激素,促红细胞生成素 记忆:为了生计老暗算别人一刀,简直是个畜生 血沉ESR加快:纤维蛋白质,球蛋白,胆固醇 记忆:单纯(胆固醇)少女求(球蛋白)签(纤维蛋白)问红尘(红细胞血沉) 单核细胞:3-8%,中性粒50-70%,淋巴20-40% 记忆:单身三八,中年无(5)妻(7),聆听儿诗 红细胞生成素调节:BPA(爆式促进激活物),促红细胞生成素,性激素,生长激素,甲状腺素 记忆:一个畜生(促红细胞生成素)居然对生(生长激素)怀六甲(甲状腺素)的女人实施性(性激素)暴力, 性激素:雄激素是正性,雌激素负性 铅中毒:动力性肠梗阻,卟啉症 记忆:铅可抑制ALA脱水酶和亚铁鳌合酶的活性 蛋白质大部分是由肝脏合成的,除了Y-球蛋白是由浆细胞合成的 记忆:将(浆)在外(Y),君令有所不受 失读症:角回受损-->独角戏(歌名)

感觉性失语症:颞上回受损-->驱赶余孽 运动性失语症:Broca区-->洞与B联系起来,或Bro像brother,brother爱运动啊 快痛-->传入纤维是A*纤维,慢痛C纤维, 记忆:形状像豆芽,豆芽长的快,C纤维-->chronic是慢的意思 凝血因子:IV->钙离子,V->易变因子 记忆:武艺盖世 凝血辅因子:IV,V,III,VIII 记忆:我师傅三八 被消耗的因子:II,V,VII,VIII 记忆:浩霸占我妻儿 内源性凝血:启动因子12,慢,单独凝血因子12,11,9,8,4, 外源性凝血:启动因子3,快,单独凝血因子,3,4,7 记忆:123,3+4=7

生理性抗凝血酶III:丝氨酸酶抑制物-->9-12因子 记忆:3+9=12 VitA的活性形式:视黄醇,视黄醛,视黄酸 记忆:看(视)黄色的电影是看A片 几乎所有的血浆蛋白均为糖蛋白,除了清蛋白,清蛋白与胆红素结合 记忆:因为清蛋白清高,不愿与糖为伍, 清蛋白-->清扫有毒物质-->与胆红素结合-->肝脏-->胆红素与Y,Z蛋白结合 对凝血酶敏感的凝血因子:I,V,VIII,XIII 蛋白质C系统:蛋白质C(PC),凝血酶调节蛋白,蛋白质S,蛋白C抑制物 蛋白质C (PC):灭活Va,VIIIa,抑制Fx及凝血酶原激活 记忆:我爸(5,8)嫖娼(P,C) 蛋白C抑制物与PC形成APC 肝脏是储存维生素A,E,B12,K的主要场所 记忆:干(肝)脆罢课(BAKE) 氨基酸的记忆: 中性氨基酸:中性氨基酸:谷氨酰胺,天冬酰胺,酪氨酸,丝氨酸,色氨酸,苏氨酸,胱氨酸,蛋氨酸 记忆:(中)国(股东老实)好(色输)成穷(光蛋)

多不饱和脂肪酸功能与应用综述

编号 食品分离技术(综述)题目:多不饱和脂肪酸功能与应用综述食品学院营养与卫生学专业 班级食硕1005 学号s100109030 学生姓名张锦 二〇一一年一月

多不饱和脂肪酸功能与应用综述 摘要:概述了多不饱和脂肪酸的种类、来源、营养和生理功能的相关研究,包括n-6系列多不饱和脂肪酸、n-3系列多不饱和脂肪酸。阐述了膳食合理比例的n-6/n-3 多不饱和脂肪酸是保持身体健康的关键。 关键词:多不饱和脂肪酸;营养;生理功能 Abstract:The kinds of polyunsaturated fatty acid including n-6 and n-3 fatty acids, nature resources, nutrition and biological functions are summarized. The balance intake n-6 and n-3 PUFA is important for keep health but not absolute amounts of PUFA. Key words:polyunsaturated fatty acid; nutrition; biological functions 多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)是指有2个或2个以上不饱和双键结构的脂肪酸,也称多烯脂肪酸。根据第一个不饱和键位置不同,可分为n-6、n-3两大类。n-6 PUFA包括亚油酸(linoleic acid C18: 2n-6, LA) 、γ-亚麻酸(gamma-linolenic acid C18:3 n-6 ,GLA) 花生四烯酸(arachidonic acid C20:4 n-6, AA)等,n-3 PUFAs除α-亚麻酸(alfa-linolenic acid C18:3 n-3 ,LNA)外主要有二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid C20:5 n-3, EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid C22:6n-3,DHA)等长链PUFA。由于人类与其它哺乳类动物自身不能合成这些脂肪酸,必需由食物提供,所以称为必需脂肪酸。脊椎动物不能在离甲基端7 个碳原子之内形成双键。所以,动物体内所有的代谢转化不能改变n-6 或n-3 双键的甲基末端的分子数。因此一旦被消化,n-3 和n-6 脂肪酸不能相互转化这些脂肪酸是不可变的并且有不同的生物化学作用。 PUFA 对人体生理作用的研究源于二十世纪二十年代末必需脂肪酸缺乏症的研究,其后沉寂了多年。五、六十年代以后,随着前列腺素(prostaglandins PGE)、白细胞三烯(leukotrienes LTB0、血栓烷素(thromboxanesTXB)等一系列PUFA代谢产物的研究取得极大的进展,PUFA 得到了更为深入的研究,其作用和功能也日益受到人们的重视[1]八十年代以后,随着流行病学研究发现心血管疾病发病率与PUFA 摄入量呈负相关的现象,PUFA 开始成为以功能性食品为首的许多领域的热点,PUFA 的研究得到了进一步的深化和拓展,特别是九十年代以后,研究发现AA 和DHA 等长链PUFA 在脑功能、婴幼儿智力及视功能发育等方面的重要意义,为PUFA 的研究和应用开辟了更广阔的天地。目前PUFA在医药、食品、精细化工、饲料等许多行业和领域都得到了广泛的应用,而且发展极为迅速,已受到越来越多行业人士的关注。 1.PUFA的分类 PUFA按照n编号系统(也ω编号系统),即从甲基端开始第1个双键的位置不同,可分为n-3组、n-6组、n-7组、n-9组。每一组成员都可转化为多不饱和或链更长的脂肪酸,其中具有重要生物学功能的是n-3组、n-6组。α-亚麻酸和亚油酸分别是n-3组、n-6组PUFA 的前体,在体内经过一系列的碳链延长和脱饱和作用衍化生成其它的PUFA。 n-3 PUFA同维生素、矿物质一样是人体的必需品,摄人不足容易导致心脏和大脑等重要

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)

货号:QS1108-10 规格:10 管/9 样脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性试剂盒说明书 紫外分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。 测定原理: FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm 光吸收下降速率,计算FAS活性。 自备实验用品及仪器: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。 试剂组成和配制: 试剂一:液体10mL×1瓶,-20℃保存。用前取出置于4℃充分解冻后混匀。 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入275 μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入275 μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 试剂四:液体10 mL×1瓶,4℃保存。 试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入525 μL试剂四,充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加 入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心40min,取上清置冰上待测。 2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500 万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后12000g,4℃,离心40min,取上清置于冰上待测。 3.血清等液体:直接测定。 FAS测定操作: 1. 分光光度计预热30min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。 2. 试剂四置于40℃水浴中预热30 min。 3. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、20μL试剂二、20μL试剂三、820μL 试剂四和40μL试剂五,迅速混匀后于340nm处测定吸光值,记录第30s和90s时吸光值,分别记录为A1和A2。△A测=A1-A2。 FAS活性计算公式: (1)按照蛋白浓度计算 活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADPH 为1个酶活单位。 FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T 第1页,共2页

不饱和脂肪酸对健康的影响

不饱和脂肪酸与人体健康关系探讨 摘要:本文系统的介绍了各种不饱和脂肪酸对人体健康的有利和不利影响,为人们合理的摄取油脂提供了科学依据。 关键词:长链多不饱和脂肪酸;共轭脂肪酸;反式脂肪酸;健康 膳食中油脂的来源主要有动物性脂肪和植物油,陆生动物脂肪的脂肪酸三甘油酯含高比例的饱和脂肪酸,室温下呈固态;绝大部分植物油的脂肪酸三甘油酯含较多不饱和脂肪酸,室温下呈液态;某些海洋鱼油中,其脂肪酸三甘油酯含高比例多不饱和脂肪酸,室温下也呈液态?。食品脂质中的不饱和脂肪酸的双键大都是顺式构型,氢原子在双键的同一侧,植物油氢化后熔点提高,氢化过程在加热、加压、通氢气和催化剂存在下进行,部分氢化能使脂肪酸的顺式双键转变为反式构型,反式酸键角小,致使熔点升高,食品中反式酸主要来自氢化植物油为基料制成的人造奶油和起酥油[1]。 1 不饱和脂肪酸对人体健康的影响 1.1 长链多不饱和脂肪酸对人体健康的影响 长链多不饱和脂肪酸(简称LCPUFAs)又叫多烯酸,是指分子结构中含有两个或两个以上不饱和双键且碳原子数目在20个以上的脂肪酸。与人体健康密切相关的多不饱和脂肪酸主要有两类:一类是n-3系多不饱和脂肪酸(n-3PUFAs);另一类是n一6系多不饱和脂肪酸(n一6PUFAs)。前者主要包括一亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA);而后者主要包括亚油酸、v一亚麻酸和花生四烯酸,它是生长发育、生殖及保持皮肤健康所必需的[2]。营养学家在研究脂质对人类健康影响时,发现膳食及体内保持一定的n一6PUFAs/n一3PUFAst:g例平衡很重要。PUFAs与类脂质结构、代谢及精子的形成等有关。 多不饱和脂肪酸是组成组织细胞生物膜必不可少的成份,它在体内参与磷脂的合成,并以磷脂的形式出现在线粒体和细胞膜中。 1.1.1 n一3PUFAs对人体的生理作用 对心血管系统:多项研究表明,i"1—3PUFAsH‘L够促进人体防御系统功能,使血液中的脂肪酸谱向着对人体健康有利的方向发展,能抑制血栓形成,降低血脂,

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