6种常用抗菌中药对3株常见病原性细菌的抑菌作用检测
作者：薛建江乔海霞刘进军季建军张玉妥邱景富
【摘要】目的:建立抗菌中药对临床常见病原性细菌抑菌作用的检测方法。方法:选择6种常用抗菌中药（黄连、苦参、连翘、大黄、生地、知母)，分别采用水提法制备至质量浓度1mg/L。应用液体稀释法测定上述中药对金黄色葡
萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果:建立了中药抑菌作用的检测方法。黄连、大黄与连翘抑制细菌的作用较强，MIC值均
≤0.05mg/L，其中黄连对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强（MIC值为
0.00625mg/L）。结论:应用本方法可以进行中药抑菌作用的检测。抗菌中药对所试验菌种表现不同的抑菌作用。
【关键词】中草药；微生物敏感性试验；抗菌药；细菌
【ABSTRACT】 Objective:To establish a method to detect the antibacterial activity of traditional chinese medicine against pathegenic bacteria.Methods:Six varieties of traditional chinese medicine(Coptis etc)were selected and extracted with pure water to make concentrated with 1mg/L.Three different common pathogenic bacteria were used to determine the minimal inhibitory
concentration(MIC)in vitro with liquid dilution method to the selected medicine.Results:The methods were established to detect the antibacterial activity of traditional chinese medicine.Three herbs had inhibition effects on the strains of test,among which Coptis Chinesis had the strongest effect and MIC was 0.00625g/mL to Staphylococcus aureus.Conclusion:The methods can serve as a reference for the antibacterial activity of traditional chinese medicine.The degree of inhibition effect for different traditional chinese medicine on different bacteria were different.
【KEY WORDS】 Chinese Herb,Microbial Sensitivity Tests,Anti Bacterial Agents,Bacteria
中药几千年来为中国人民的健康做出了重大贡献，在现代预防和控制细菌性感染疾病中也发挥了积极作用。应用中药进行抗感染治疗具有副作用小，药物来源广泛，价格低廉等优势［1，2］。在清热解毒抗菌类中药中开发抗菌药物具有良好的应用前景。长期以来，对于抗菌中药作用机理的较少认识限制了其在临床中的应用。目前，尚无统一规范的中药抗菌作用评价方法。为此，本研究拟应用抗生素最小抑菌浓度检测方法，检测6种常用抗菌中药（大黄、苦参、连翘、黄连、生地、知母）对三种常见病原性细菌（金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌）的抑菌作用，建立一种可以规范的中药抗菌作用检测方法。
1 材料与方法
1.1 菌株的选择
选择三种不同病原性细菌的标准株：包括金黄色葡萄球菌ATCC29213，铜绿假单胞菌ATCC27853，大肠埃希菌ATCC29523作为受试菌株，以上菌株全部购自中国药品生物制品检定所。
1.2 中药的选择
选择常用的清热解毒类中药（大黄、苦参、连翘、黄连、生地、知母)作为本次研究所用药物。全部药物购自河北北方学院中医门诊部。
1.3 中药的提取
分别将上述中药置于37 ℃温箱烘干至易于研磨为止，准确称取50g中药于250mL蒸馏水中混匀，浸泡1h，用微火加热煮沸30min，收集煎液，用无菌滤纸过滤，继续加水250mL，同法煎制，30min后收集。将两次煎液收集合并，应用加热的方法将药液浓缩至最终质量浓度为1 g/mL[3]。
1.4 细菌的培养与稀释
将选定的实验菌株，接种普通琼脂培养基35℃孵育24h，进行菌落形态观察并进行生化反应再次鉴定后备用。菌液浓度的配制方法为，挑取菌落用2～3mL无菌生理盐水校正至0.5麦氏比浊单位，使其含菌量为
1.5×108CFU/L。
1.5 MIC的测定
按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的液体稀释法测定实验菌株的MIC值，通过琼脂平板抑菌法观察上述不同抗菌中药的MIC结果。具体应用2倍稀释法对药物进行稀释，稀释液为Mueller－Hinton液体培养基，每种中草药的剂量分别为0.100、0.050、0.025、0.0125、0.00625mg/L，在每个
试管中加入1.5×108CFU/L的细菌10μL，35 ℃培养24h，分别转种普通平板培养基，24h后无细菌生长的试管则为MIC。所有试验均在不同日期重复3遍。
2 结果
中药大黄、黄连和连翘对三种受试菌株都具有较强的体外抗菌活性，MIC值≤0.050mg/L，其中黄连对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强，MIC值为0.025mg/L。而知母、生地和苦参的抑菌作用相对较弱，MIC值＞0.100mg/L，不同中药对不同细菌表现出不同的抗菌特性。见表1。2008年6月薛建江等：6种常用抗菌中药对3株常见病原性细菌的抑菌作用检测第3期2008年6月河北北方学院学报（医学版）第3期表1 6种常用抗菌中药对3株受试菌的MIC 结果
3 讨论
抗生素的应用使人类许多严重的细菌感染性疾病得到有效控制。然而，由于抗生素的不合理使用导致了大量耐药性细菌的出现，降低了现有抗生素的应用效率，耐药性细菌感染严重地威胁着人类的健康。研究和开发抗菌中药对解决耐药菌株的产生和抗生素短缺问题具有重要意义，通过研究我们也看到，传统中药对常见病原细菌具有一定的抑制作用。
传统的中药抑菌实验方法存在着一些弊端，主要是培养基的使用不统一，菌液制备不标准，接种量也很难控制。因此，将抗生素敏感试验方法引入中药抑菌实验之中，改变了上述不足，可以将培养基、菌液浓度以及接种量进行标准化。从而有助于该方法的推广使用。
在实验中为了避免由于中药煎液的颜色影响对结果的观察，我们在不影响实验条件与结果的前提下对MIC检测方法进行了改进。采用琼脂平板方法来观察细菌在中药作用后是否生长。即将不同浓度中药与受试细菌作用后再分别转种普通平板培养基，通过在培养基上的生长情况来进行最小抑菌浓度的判定。实验结果表明我们的研究方法可行。
本研究结果显示，黄连、大黄与连翘抑菌作用较强。而另外三种药物的体外抑菌作用则较弱。不同中药对不同细菌表现不同的抑菌作用，我们的研究结果与有关报道一致［4］。
在所检测药物中黄连对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强，目前，金黄色葡萄球菌耐药性问题是临床治疗中面临的一大难题。大量研究报道也指出，黄连对耐甲氧西林的葡萄球菌具有一定的抑菌作用［5，6］，如果能够进一步对黄连的抑菌机理进行阐述，将有助于在金葡菌感染中尝试应用中药进行治疗。从而解决金黄色葡萄球菌的多重耐药问题。
在传统中药中进行抗菌药物的发掘，将有助于发挥传统中药在临床抗感染中的应用，本研究所建立的中药抗菌作用检测方法为中药抗菌作用的进一步研究奠定了基础。
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有抑菌、杀菌作用的中草药 有抑菌、杀菌作用的中草药 ? ?临床实践和实验研究都证明有很多中草药有抑菌、杀菌作用，如黄连、黄柏、黄芩、连翘、金银花等，其不仅对多种细菌有抗菌作用，而且对某些抗生素耐药菌株也有抗菌效果 五种天然消炎中草药 1、呼吸道感染：用金银花、连翘、鱼腥草 肺炎链球菌等细菌常会造成呼吸道感染，引起感冒甚至肺炎。现代药理学发现，金银花等对上述细菌都有较好的抑制效果。 金银花能宣散风热，连翘能散结、消肿，鱼腥草可清热解毒。患者出现发热、咽痛、咳嗽、吐黄痰等症状时，一般可以选择含有金银花的药物，也可以在医生指导下使用中成药如银翘片、双黄连口服液等。 但要注意的是，出现恶寒重、发热轻、无汗、鼻塞流清涕，咳吐稀白痰等症状时不宜用。 2、肠道感染：用黄连、黄柏、白头翁 细菌性腹泻，可以用黄连、黄柏、白头翁等可清热燥湿、泻火解毒的药物。现代研究发现，黄连等对引起腹泻的上述细
菌都有较好的治疗效果。 出现粪便恶臭、便黄而黏、腹痛等时，可在医生指导下使用白头翁汤，它由黄连、白头翁、黄柏组成。也可以使用黄连素片等含有黄连的中成药。 但需提醒的是，引起腹泻的原因多种多样，患者应在明确是上述细菌引起的腹泻时才可使用。并且，如果同时出现发热呕吐等症状应马上就医。 3、尿路感染：用海金沙、车前子 尿路感染在细菌感染中较常见。海金沙、车前子等能利水通淋、清热解毒，对肠杆菌等引起的尿路感染有较好的治疗效果。 服用车前子、海金沙等组成的中药汤剂鱼败银海汤，或尿感宁冲剂、三金片等中成药，可治疗急慢性尿路感染所致的小便频急、灼热刺痛、尿黄、下腹胀痛等。但是，孕妇不宜服用。 4、皮肤感染：用马齿苋、蒲公英 马齿苋、蒲公英等能清热解毒、凉血止血，并且对金黄色葡萄球菌等引起的皮肤感染如毛囊炎、脓疱疮等有较好的治疗效果。 患者可在医生指导下使用复方马齿苋洗方，它由马齿苋、蒲公英、如意草、白矾等组成。但脾胃虚弱、大便泄泻者及孕妇不宜用。
18种抗炎症中草药的抑菌作用研究 姓名:彭斯文学号:0312403012 专业:生物工程 前言 人类自从古代就记载了许多具有杀虫或控制害虫、抗菌或杀菌作用的植物,如中国、印度等东南亚以及一些非洲国家的劳动人民积累了许多利用植物杀虫防病的经验。自从1928年Alexander Fleming 发现青霉素以来，抗生素迅速发展，直到1960年代末期，人类可用来对抗细菌的武器已不下十数种，让人类顺利地脱离1940年代前饱受传染病威胁的窘境[1]，而传统的中草药遭到冷落。但是抗生素长期使用或滥用造成了人体或动物体抗药性的急剧上升，对人类生存已造成威胁。 由于中草药有着无副作用、无抗药性的特点，部分中草药有良好的抑菌效果，有可能替代抗生素的潜能，因而再次引起了人类的重视，中草药的抑菌研究成为目前研究的热点，并取得了不少成就。几个世纪前,我国人民就已知道植物中含有抗菌物质,在许多实例中,这些化合物能以天然的抗性或防御体系来抵抗微生物或其他病害。较早用于植物病害防治的有大蒜汁、洋葱汁、棉籽饼、辣蓼、五风草等[2]。至今人们已经调查和研究了一些具有杀菌、抗菌作用的植物,大部分资源集中在菊科、唇形科、木兰科、马兜铃科蓼科、木犀科、百合科、葫芦科、莎草科、豆科、十字花科等植物中,除此之外还有樟科的肉桂、香叶树、暴马丁香、白桂等[3,4]。而其具有抑菌作用的化学成分，其结构类型涉及萜类、生物碱类、黄酮类、苷类、皂甙、醌类、香豆
素、木脂素、芪类、胺类、酯类、酚类、醛类、醇类、甾类、有机酸及精油类等化合物[5]。虽然众多的植物提取物对病菌都有抑制作用,但是同一种活性物质对不同病原菌的抑制程度不同,同一病原菌对不同的提取物敏感性亦有差异。余世望等测定60种食药两用中药的抗菌作用,其中丁香(F.caryophylli)、花椒(P.zanthoxyli)、高良姜(R.alpiniaeofficinarum)、甘草(R.glycyrrhizae)、乌梅(F.mune)在0.2%浓度时显示明显的抗菌作用,丁香、花椒、高良姜对黄曲霉、黑曲霉等表现出强的抗真菌作用,乌梅对荧光假单孢菌属细菌均有强烈抑制作用,其他大部分提取物抗菌效果很弱[6]。鱼腥草水提取物[7]、马蹄皮酸醇提取物[8]、苦参提取物[9]、苦瓜汁液[10]、柚皮提取物[11]对各种细菌、真菌具有良好的抑菌作用。 随着科学的发展，中草药有效成分的提取、分离技术也不断进步。有关中草药有效成分的提取方法很多,常用的溶剂提取法包括浸渍法、渗透法、水蒸汽蒸馏法、煎煮法、回流法、连续回流法等[12]。近年来又出现了破碎提取法、超声波提取法、微波提取法、超临界萃取法[13～19]等新方法。提取溶剂也不断的改进，传统方法常用的是水提取，近年来有用乙醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚、乙醚等不同极性的溶剂[11]。分离方法越来越多，比较普通的方法有离心、过滤、萃取、柱层析、薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)、电泳、分子筛等本文我们通过对湖南新化民间中草药医生的拜访，面对面的交流，阅读他们的有关资料，并随他们上山采药[20,21,22]。其中香薷，味腥性微寒、发毒解暑、散湿利水、温胃调中。民间主治伤暑头痛、
细菌耐药性检测方法 1、细菌耐药表型检测：判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据 NCCLS 标准，通过测量纸片 扩散法、肉汤稀释法和 E 试验的抑菌圈直径、 MIC 值和 IC 值获得。也可通过以下方法进行 检测： （1）耐药筛选试验：以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验，临床 上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、 万古霉素中介的葡萄球菌、 耐万古霉素肠球菌及氨基糖 苷类高水平耐药的肠球菌等。 （ 2）折点敏感试验：仅用特定的抗菌药物浓度（敏感、中介或耐药折点 MIC ），而不使用 测定 MIC 时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性，称为折点敏感 试验。 （3）双纸片协同试验：双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱B 兰 阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。若指示药敏纸片在朝向阿莫西林 扩大现 象（协同），说明测试菌产生超广谱B -内酰胺酶 （ 4）药敏试验的仪器化和自动化：全自动细菌鉴定及药敏分析仪如： Microscan 等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的 MIC 值。 2．B -内酰胺酶检测： 主要有碘淀粉测定法 （ iodometric test ）和头孢硝噻吩纸片法 （ nitrocefin test ）。临床常用头孢硝噻吩纸片法，B -内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟 菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。如B -内酰胺酶阳性，表示上述细菌对青霉素、 氨苄西林、 阿莫西林耐药； 表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素 （包括氨基、 羧基和脲基青霉素） 耐 药。 3．耐药基因检测：临床可检测的耐药基因主要有：葡萄球菌与甲氧西林耐药有关的 MecA 基因，大肠埃希菌与B -内酰胺类耐药有关的 blaTEM 、blaSHV 、blaOXA 基因，肠球菌与万古 霉素耐药有关的 vanA 、 vanB 、 vanC 、 vanD 基因。检测抗菌药物耐药基因的方法主要有： PCR 扩增、PCR-RFLP 分析、PCR-SSCP 分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术 、自动 DNA 测序 4．特殊耐药菌检测 （1 ）耐甲氧西林葡萄球菌检测：对 1u g 苯唑西林纸片的抑菌圈直径W 10伽，或其MIC > 4u g/ml 的金黄色葡萄球菌和对 1u g 苯唑西林纸片的抑菌圈直径W 17 mm,或MIC > 0.5u g/ml 的凝固酶阴性葡萄球菌被称为耐甲氧西林葡萄球菌（ MRS ）。对MRS 不论其体外药敏试验 结果，所有的B -内酰胺类药物和B -内酰胺/B -内酰胺酶抑制剂均显示临床无效；绝大多数 的 MRS 常为多重耐药,耐药范围包括氨基糖甙类、大环内酯类、四环素类等。 （2） 耐青霉素肺炎链球菌检测：当对 1u g 苯唑西林纸片抑菌圈直径〈20 mm 或MIC > 0.06 u g/ml 均应视为耐青霉素肺炎链球菌 （PRSP ）。临床治疗显示 PRSP 对氨卞西林、氨卞西林 /舒巴坦、头胞克肟、头胞唑肟,临床治疗疗效很差,但应检测对头胞曲松、头胞噻肟和美 洛培南等的 MIC 以判断是否对这些抗生素敏感。 （3） 耐万古霉素肠球菌检测： 肠球菌对30 g 万古霉素纸片抑菌圈直径W 14 mm 或MIC > 32 u g/ml 被称为耐万古霉素肠球菌（VRE ）。针对多重万古霉素药物目前尚无有效治疗方法， 但对青霉素敏感的 VRE 可用青霉素和庆大霉素联合治疗,若对青霉素耐药而不是高水平耐 氨基糖甙类可用壁霉素 +庆大霉素。 （4） 产超广谱B -内酰胺酶的肠杆菌科细菌检测： 超广谱B -内酰胺酶是一种能水解青霉素、 -内酰胺酶（ESBLs ）革 /克拉维酸方向有抑菌圈 Vitek-2 、BD-Pheonix 、
细菌鉴定及检测方法 一、启动条件 1、目的样出现坏包，若批次相同，取表现性状相同的任意一包进行细菌初步鉴 定。若批次不同则分别进行细菌初步鉴定。 2、随机样出现坏包，必须进行细菌初步鉴定。 二、胀包 1、记录批次。 2、及时用72%的酒精对样品的外表进行消毒，尽量不损坏封合待以后检查。在 超净台内以无菌操作剪开包装，再避开横竖封处剪开一个圆形或三角形。3、对样品进行微生物划线培养。 3.1采用普通营养琼脂培养基做细菌的划线培养36±1℃、48小时。 3.2分别吸取10毫升样品到两个无菌的小试管中，，分别在80和100℃的水 浴中加热10分钟，冷却用营养琼脂分别做芽孢（36±1℃、72小时） 和耐热芽孢（55±1℃、72小时）的划线培养。 3.3采用普通营养琼脂培养基或快速检测培养基做嗜冷菌/低温菌的划线培 养（4—6℃ 10天或21±0.5℃ 25小时）。 3.4 必须用高盐察氏或虎红琼脂培养基做霉菌和酵母菌的划线培养 （25—28℃ 5--7天） 4、对样品做感官检测。 5、用PH计检测样品的PH值。 6、将样品倒掉，进行包装密封性检查，并进行记录。 7、记录菌落特征。 8、选区不同形态的单一菌落进行坚定。 8.1 革兰氏阴性菌和阳性菌的鉴定： 8.1.1涂片、革兰氏染色、镜检。或结晶紫染色、镜检、氢氧化钾拉 丝试验。 8.1.2革兰氏染色、结晶紫染色方法见《微生物检测》 8.1.3氢氧化钾拉丝试验 在微生物载物片上滴一滴3%氢氧化钾，用接种针从培养皿上的
菌落中挑取微生物，放在氢氧化钾溶液中用力搅拌。7—10秒后，抬 起针头，观察针头和玻片之间是否有丝状物，如果15—20 秒后二者 之间无丝状物，停止搅拌。 判定：无丝状物阳性；有丝状物阴性。 8.2 过氧化氢酶试验（或过氧化氢酶试纸）（产气试验）： 试剂：10%过氧化氢溶液 步骤：在微生物载物片上滴一滴10%过氧化氢，用接种针从培养皿上的菌落中挑取微生物，放在过氧化氢溶液中看是否有气体产生。 判定：产气阳性；不产气阴性。 8.3氧化酶试验 试剂：含1%四甲基双噻二胺和99%的乙醇溶液。 步骤：用上述试剂将一张滤纸浸透（或直接采用氧化酶试纸条），然后进行细菌培养物的涂片试验。 判定：30秒内使显色物质变为深蓝色阳性，不变色阴性。 三、酸包 1、发现酸包后，及时将料液快速转入无菌瓶中。 2、记录批次 3、其它项目检测同胀包。
几种家庭常见细菌性食物中毒的临床表现及预防措施 1. 沙门氏菌属食物中毒 沙门氏菌食物中毒，主要发生的夏秋季节外，全年都可发生引起中毒的食物主要为肉类、禽类、蛋类和奶类，豆制品和糕点有时也发生。沙门氏菌属食物中毒的临床表现有5种类型。 1）胃肠炎型：前驱症状有头痛、头晕、恶心、腹痛、寒战。以后出现呕吐、腹泻、发热。大便为黄色或黄绿色、带粘液和血。因呕吐、腹泻大量失水，一般急救处理是补充水份和电解质。对重症、发热和有并发症患者，可用抗菌素治疗。一般3～5天可恢复，病死率在1%左右。主要是儿童和老人或体弱者治疗不及时所致。 2）类霍乱型：起病急、高热、呕吐、腹泻次数较多，且有严重失水现象。 3）类伤寒型：胃肠炎症状较轻。但有高热并出现玫瑰疹。 4）类感冒型：头晕、头痛、发热、全身酸痛、关节痛、咽峡炎、腹痛、腹泻等。5）败血症型：寒战、高热持续1～2周，并发各种炎症、肺炎、脑膜炎、心内膜炎、肾盂肾炎。败血症型主要由霍乱沙门氏菌引起。 2. 副溶血弧菌临床表现 潜伏期自1小时至4天不等，多数为10小时左右。起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒及发热。腹痛多呈陈发性绞痛，常位于上腹部、脐周或回盲部。腹泻每日3-20余次不等，大便性状多样，多数为黄水样或黄糊便。约2%-16%呈典型的血水或洗肉水样便，部分病人的粪便可为脓血样或粘液血样，但很少有里急后重。由于吐泻，患者常有失水现象，重度失水者可伴声哑和肌痉挛，个别病人血压下降、面色苍白或发绀以至意识不清。发热一般不如菌痢严重，但失水则较菌痢多见。近年来国内报道的副溶血弧菌食物中毒，临床表现不一，可呈典型、胃肠炎型、菌痢型、中毒性休克型或少见的慢性肠炎型。 本病病程自1-6日不等，可自限，一般恢复较快。本病的诊断，在副溶血弧菌食物中毒的流行季节，根据进食可疑食物（腌渍品、海产品）、集体发病、潜伏期短而起病急骤、发热和腹痛均较其他肠道传染病为严重、腹泻物呈血水样、失水多见等特点，临床诊断即可成立，对可疑食物进行培养，有时可分离出和粪便中相同的副溶血弧菌。本病应与葡萄球菌性食物中毒、产肠毒素性大肠杆菌类、沙门氏菌食物中毒、急性菌痢和霍乱等鉴别。 3. 葡萄球菌性食物中毒 是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，其特征为潜伏期短，病例暴发集中，来势凶猛，呕吐剧烈，伴失水及虚脱，但恢复迅速，预后良好。发病以夏秋两季为多，各年龄组均可患病，痊愈后不产生明显的免疫力，本病无传染性。 被本菌污染的食品主要为淀粉类(如剩饭、米面、粥等)、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物在室温20℃-22℃放置5小时以上时，病菌大量繁殖，并产生肠毒素。 本病起病急骤，病例暴发非常集中，一般于进食2-5小时发病，很少超过6小时，病人有不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之。呕吐物可呈胆汁性，或含血及粘液。腹痛主要位于中上腹，剧烈吐泻每导致虚脱、肌肉痉挛及严重失水等。体温大多正常或略高。部分病例尚有发热、头晕、出汗、四肢麻木等症状，别病例可出现酸中毒与休克。一般在数小时至1-2日内迅速恢复。 本病的诊断，主要根据进食可疑食物、集体发病、症状严重而短促等而作出初步诊断；食物中检出金黄色葡萄球菌(每克食物含菌可达数亿)，诊断即可成立。需要注意的是，由于金黄色葡萄球菌普遍存在于自然界中，正常人粪便中也可分离出此菌，因此，单从病人粪便与食物中分离出此菌不一定有诊断意义；另一方面，金黄色葡萄球菌肠毒素有相当的耐高温性，即使食物于食前100℃水中煮30分钟仍未被破坏，细菌虽已死亡，仍有可能中毒，此时标本培养虽为阴性，而未能排除金黄色葡萄球菌性食物中毒的可能性。因此，本病的诊
具有抗菌消炎作用的中草药 20090109310065 郑婷婷 1.黄连：有消热解毒、抗菌（如大肠杆菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌、流感病毒等） 作用。对皮肤真菌、螺旋体及某些原虫也有抑制作用。可治疗细菌性痢疾、急性肠胃炎、仔猪白痢、消化不良、腹泻等。常与黄柏、黄芩配合内服。煎剂获散剂，内服，牛、马20.0~30.0g，猪、羊5~10g，家禽0.3~0.6g，兔0.4~0.7g。2ml的硫酸黄连素针含20mg黄连，相当于生药50mg。肌肉注射，牛、马0.15~0.40g，猪、羊0.05~0.10g。 2.板蓝根：有清热解毒、抗菌消炎作用。对多种革兰氏阳性菌、阴性菌及流感 病毒均有抑制作用。可治咽喉炎、支气管炎、肺炎、家畜流感、脑炎及其他全身感染。煎剂或散剂，内服，牛、马30~90g，猪、羊15~30g，家禽1~2g。2ml 板蓝根针剂相当于生药1g。肌肉注射，牛、马30~40ml，猪、羊4~6ml。2ml大青叶针剂相当于生药2g，肌肉注射，牛、马30~40ml，猪、羊4~6ml。 3.大蒜：有清热解毒、温肾健脾和杀虫抗菌作用。对革兰氏阳性菌、阴性菌的 大部均有抑杀作用，对真菌和某些原虫也有效。可治肠炎、下痢、仔猪白痢、仔猪副伤寒及食欲下降、瘤胃臌气等。大蒜泥，内服，牛、马50~100g，猪、羊10~20g，家禽2~4g，兔3~5g。大蒜酊（40%），内服，牛、马50~100ml，猪、羊20~20ml，家禽2~4ml，兔5~10ml。注意要临用时加水稀释。 4.金银花：有清热解表、解毒抗菌作用。对多种细菌有效，对流感病毒也有抑 制作用。用于家禽流感、呼吸道及外伤感染，常与板蓝根、黄芩配伍。煎剂或散剂，内服，牛、马15~60g，猪、羊10~15g，家禽0.5g。其藤量则加倍。针剂1ml相当于生药1g。肌肉注射，猪10~30ml。 5.穿心莲：有清热解毒、消肿止痛、抗菌抗病毒功效。用于家禽肠道细菌感染 （肠炎、急性菌痢、仔猪白痢、仔猪副伤寒、鸡白痢等）及呼吸道、泌尿道和其他细菌及病毒感染，感染创亦可用。煎剂或散剂，内服，牛、马60~120g，猪、羊30~60g，家禽1~2g，兔2~3g。片剂，相当于生药1g/片，内服量同上。1ml 针剂相当于生药1g。肌肉注射，牛、马40~60ml，猪、羊10~20ml。外用可将干粉调匀敷于患部或鲜叶捣烂后外敷。 6.连翘：有清热解毒、散结消肿、抗菌之痛作用。对多数细菌及流感病毒、钩 端螺旋体等均有抑制作用。可治呼吸道及癀肿，常与金银花合用治感冒，煎剂或散剂，内服，牛、马25~60g，猪、羊10~15g。 7.黄花地丁：具有清热解毒、散结消肿、凉血利尿、抗菌等功效。可治疗乳腺 炎、肝炎、尿路感染和疮疖等，也可用于消化不良、便秘等。煎剂或散剂，内服，牛、马25~60g，猪、羊6~12g，家禽1.5~3.0g。鲜蒲公英，捣烂、外敷。 8.马齿苋：具有杀虫解毒、消热散血和抑菌作用。其乙醇液能抑制多种肠道杆
中药的抑菌作用及其抗菌谱 2005版中国药典中规定微生物限度检查和无菌检查需要做验证,对于绝大部分化学类药物来说,它们抑菌性的有无及抗菌谱比较容易判断;然而,对于中药制剂来说,却无法准确判断,给验证和检查工作带来了极大的不便.针对这种情况,本人查阅了《药用植物学》、《生药学》及部分其他文献资料,把有抑菌作用的中药及其抗菌谱整理如下,希望对大家有所帮助，同时敬请各位同仁多加指正,补充,谢谢! 艾叶对多种致病细菌及真菌有轻度抑制作用 白矾对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、炭疽杆菌、痢疾杆菌、伤寒及副伤寒杆菌、白色念珠菌、链球菌、肺炎双球菌、白喉杆菌等多种细 菌有抑制作用 白果白果酸能抑制结核杆菌的生长，体外对多种细菌及皮肤真菌有不同程度的抑制作用 白蔹水浸剂对同心性毛癣菌，奥杜盎氏小胞癣菌、腹股沟和红色表皮癣菌等皮肤真菌，有不同程度的抑制作用。5%煎剂在体外对金黄色葡萄球菌亦 有抑制作用。 萆薢抗真菌 荜茇对白色及金黄色葡萄球菌和枯草杆菌、痢疾杆菌有抑制作用 萹蓄对葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、绿脓杆菌以及须疮癣菌、羊毛状小芽胞菌、皮肤霉菌等均有抑制作用。 柴胡煎剂对结核杆菌有抑制作用； 蟾皮蟾蜍总甙注射液对变形杆菌、绿脓杆菌、四联球菌、白色葡萄球菌、卡他球菌有抑制作用；蟾酥还有镇痛作用 葱白对白喉杆菌、结核杆菌、痢疾杆菌、葡萄球菌、链球菌有抑制作用，对皮肤真菌也有抑制作用。 大黄有抗感染作用，对多种革兰氏阳性和阴性细菌均有抑制作用，其中最敏感的为葡萄球菌和链球菌，其次为白喉杆菌、伤寒和副伤寒杆菌、肺炎 双球菌、痢疾杆菌等；对流感病毒也有抑制作用； 大蓟对人型结核杆菌有抑制作用。 大蒜挥发油、浸出液及大蒜素对多种致病细菌、真菌、阿米巴原虫及阴道滴虫等具有明显的抑菌或杀菌作用 地榆体外抑菌试验对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、志贺氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、人型结核杆菌以及某些致病真菌均有作用 远志人型结核杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌，伤寒杆菌 白芷对大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌有一定抑制作用；水浸剂对奥杜盎小芽胞癣菌等致病真菌有一定抑制作用。 龙胆绿脓杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌等 海藻对人型结核杆菌有抗菌作用，并对流感病毒及皮肤真菌亦有抑制作用 丹参多种细菌及结核杆菌
细菌数量的测定方法 1、计数器测定法： 即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。本法简便易行，可立即得出结果。 本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。 2、电子计数器计数法: 电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。 该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。因此，要求菌悬液中不含任何碎片。 3、活细胞计数法 常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。 广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。 4、比浊法 比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。 此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。 5、测定细胞重量法 此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重
中 药 抗 菌 作 用 辨 析 吴立夫 (贵州大学生物技术学院动物医学系,贵州贵阳550025) 在药物的抗感染机理中,抗菌作用是一项十分重要的内容。基于清热类中药良好的抗感染作用,早在上个世纪30年代,人们就开始了此类中药抗菌作用的研究,70年代时,这一研究达到了高潮。通常认为清热药中大多数均有不同程度的抗菌作用,尤以清热解毒和清热燥湿药较为突出[1]。此外,非清热类中药的抗菌作用也受到广泛关注。 由于中药自身的复杂性、中药抑菌试验方法上存在的差异以及迄今为止尚未有判断中药抗菌作用的统一标准等原因,人们对中药抗菌作用的认识还很不一致并存在明显的误区。一些作者往往用“有抗菌作用”、“有不同程度的抗菌作用”、“有一定的抗菌作用”、“有明显的抗菌作用”等含混的提法表述中药的抗菌作用,甚至认为“清热解毒药临床上可作为中药中的抗生素看待”[1]。中药究竟有多强的抗菌作用?这种抗菌作用在其对感染性疾病的疗效中到底占据什么地位?这些都是中药药理学必须明确解答的问题。为此,本文试图根据文献报道和作者自身的试验结果就上述问题阐明自己的看法,以和同道商榷。 1 中药究意有多强的抗菌作用? 中药抗菌作用的研究多围绕清热药进行,人医方面的学者在这方面进行了大量的研究工作。上海第一医学院王荣福等研究了四季青、穿心莲、鱼腥草和新桉叶等4种中药针剂对肺炎球菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌和大肠杆菌的体外抗菌作用,发现这些中药针剂对上述细菌的最低抑菌浓度(M in i m al Inh ib ito ry Concen trati on,M I C)分别为1 4～1 32、1 2～1 8、1 2～1 8和1 2～1 8,四季青煎剂比针剂抑菌作用稍强,但也仅为1 26～1 211[2]。以下二则报道部分地印证了上述试验的结果:采用穿心莲煎剂进行的抑菌试验表明,它对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌的抑菌浓度分别高达5%、20%和40%[3];侯远生等抽取8家制药厂的鱼腥草注射液样品,运用管蝶法和试管两倍稀释法测定其抑菌作用,结果8样品原液对大肠杆菌、短小芽孢杆菌和枯草杆菌均无抑菌圈,将这些样品稀释成1 4浓度时,金黄色葡萄球菌和大肠杆菌即可生长[4]。有关蒲公英抑菌试验的结果也基本一致。孙淑卿等采用纸片扩散法观察了蒲公英对枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用,发现25%、50%和100%的蒲公英煎剂对它们均无抑菌圈[5]。刘锡光等报道蒲公英煎剂对金黄色葡萄球菌的M I C仅为1∶2[6]。地锦草也是清热解毒药,其煎剂对金黄色葡萄球菌的M I C仅为1 16,对大肠杆菌和枯草杆菌均无抑制作用[7]。板蓝根和大青叶煎剂杀灭钩端螺旋体的最低浓度仅为1∶100[3]。知母、栀子的抗菌作用也极其微弱,用平板挖沟法测得知母煎剂对伤寒杆菌、副伤寒杆菌、痢疾杆菌和大肠杆菌的抑菌浓度高达1∶1,用试管法测得栀子煎剂对金黄色葡萄球菌和伤寒杆菌的M I C也分别为1∶8和1∶2[8]。 有关黄连、黄柏、秦皮等清热燥湿药的抑菌作用也有不少报道。黄连煎剂对金黄色葡萄球菌的M I C 为1∶128[6],对福氏痢疾杆菌、斯密兹氏痢疾杆菌、志贺氏痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌的M I C为1∶50～100,对肠炎杆菌、鼠伤寒杆菌的M I C则高达1∶5[7]。用连续稀释法测得黄柏水煎液对志贺氏痢疾杆菌和福氏痢疾杆菌的杀菌浓度分别为10%和25%[7]。用含药平板法测得秦皮煎剂对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌的抑菌浓度为1∶50,对大肠杆菌的抑菌浓度为1∶20[1]。 单味清热药的抑菌作用如此,复方清热药的作用又如何呢?四川医学院林志靖等测定了对金黄色葡萄球菌有抑制作用的黄连、黄柏、大黄等7种中药组成的各种复方的抑菌作用。由这些药物组成的11种二味药复方抑菌作用较单方增强二倍的有5方,增强四倍的有1方,5种三味药复方抑菌作用增强二倍的有1方,10种四味药复方抑菌作用增强二倍的有4方,3种五味药复方抑菌作用增强二倍的有2方,1种六味药复方抑菌作用未见增强[7]。由此可见,中药复方抑菌作用即使较单方有所增强,其增强作用也是十分有限的。邢富强等观察了银翘解毒口服液对肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用,其对两种细菌的M I C仅分别为1∶87和1∶238[9]。赵文忠等研究了由半枝莲、虎杖、败酱草和蒲公英制成的热炎宁冲剂对金黄色葡萄球菌、乙型溶血链球菌、肺炎双球菌和大肠杆菌的抑菌作用,其对上述细菌的M I C分别为1∶80～1∶320、1∶20、1∶20～1∶80和1∶5～1∶10[10]。 95 中国兽医杂志2002年(第38卷)第4期 学术讨论
[18]Simotas AC.Nonoperative tr eatment for lumbar spinal stenosis[J].Clin Orthop2001,384:153~161. [19]T homas N WM,Rea GL,Pikul BK,et al.Q uantitat ive outcome and r adiogr aphic comparisons betw een laminecto my and laminotomy in the treatment of acquir ed lumbar stenosis[J].N eurosurg,1997,41:567~575. [20]俞 伟,费 骏,严建武,等 退行性腰椎管狭窄症术后 疗效不佳的原因分析[J] 骨与关节损伤杂志,2002,17 (4):293 [21]孙荣华,杨维权,周 菲,等 小切口手术治疗腰椎管狭 窄症[J] 骨与关节损伤杂志,2004,19(4):222 [22]朱建平,于晓华,刘云鹏,等 退行性腰椎管狭窄症椎板 减压术后远期随访分析[J] 中国脊柱脊髓杂志,2002, 12(1):55~57 (编辑 王健华) 收稿日期:2005-12-26中药抗菌作用的研究进展 曾春兰,钟振国 (广西中医学院,广西南宁 530001) 关键词:中药;抗菌作用;综述 中图分类号:R285 5 文献标识码:A 文章编号:1008-7486(2006)01-0051-03 抗生素的使用使人类许多严重的细菌感染性疾病得到有效控制。然而,由于抗生素的不合理使用导致了耐药菌株的增加,降低了现有抗生素的效率,严重地威胁着人类的健康。减少耐药菌株的生成和研制新的抗菌药物已成为21世纪医学界的重要课题。尽管科学家努力研究和制造更广谱、作用更强的抗生素,但新抗生素的产生明显跟不上耐药菌株形成的速度,而且研制一个新的抗生素所化费的时间和成本都非常之大。中药几千年来为中国人的健康作出了重大贡献,在现代预防和控制细菌性感染疾病方面也发挥了积极作用。由于中药的特殊性,细菌较少对中药产生耐药;因此,研究和开发抗菌中药对解决耐药菌株的产生和抗生素短缺问题具有重要意义,且费用低廉。此就2000年来中药抗菌作用的实验研究和临床应用情况作一综述,以供参考。 1 中药复方的抗菌作用 采用中药复方治疗细菌感染性疾病取得了不少成效。用于治疗上呼吸道感染的中药复方对导致上呼吸道感染的常见病菌均具有抑制作用。如复方双花口服液(金银花、穿心莲、连翘、麻黄、辛夷等)体外试验对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型和甲型溶血性链球菌等均具有不同程度的抑制作用[1]。由鱼腥草、玄参、野菊花、大青叶组成的喉肺清口服液可减少感染了致死量 型溶血性链球菌和金黄色葡萄球菌小鼠的死亡率,在体外可抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌[2]。黄心分散片(黄芩苷,穿心莲内酯)琼脂二倍稀释法测定结果显示,黄心分散片对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、溶血链球菌、阴沟杆菌、产气杆菌、嗜血流感杆菌、克氏肺炎杆菌、皮形杆菌有效,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌感染的小鼠有保护作用[3]。中药三类新药鼻渊净颗粒(辛夷、苍耳子等)对临床分离致病菌株共106株(其中多数菌株对青霉素和链霉素耐药)及标准菌株3株均具有不同程度的抑菌作用[4]。解热毒注射液(大青叶、射干、千里光、丹皮、连翘、金银花、青蒿、石菖蒲)临床对小儿肺炎疗效显著;采用试管两倍稀释法测定解热毒注射液对314株临床分离致病菌的作用,结果表明,解热毒注射液在体外可抑制多种革兰氏阳性和阴性致病菌的生长,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、克氏肺炎杆菌、痢疾杆菌有杀灭作用;体内实验表明,该药皮下注射对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌致死性感染小鼠具有保护作用[5]。 治疗消化系统感染的中药复方对致消化道感染的常见致病菌也具有抗菌作用。葛根芩连微丸(葛根、黄芩、黄连、炙甘草等)用于成人及小儿病毒性、细菌性腹泻,发热,恶心呕吐诸症疗效确切。该药对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎球菌、变形链球菌、白色念珠菌均有一定的抑菌作用,且对金黄色葡萄球菌和变形链球菌的作用更强[6]。丹柏四逆颗粒剂是在四逆散基础上加入清热解毒、活血化瘀药物经提取加工而成;豚鼠含药血清在体外杀菌实验结果显示该药对大肠杆菌均有一定抑制作用,对胆汁中需氧菌的抑制作用也较明显[7]。 在治疗泌尿系统感染方面,中药复方也发挥了重要作用。复方石韦片(石韦、蓄、黄芪、苦参等)体外实验证明,该药对引起泌尿系统感染的常见细菌 变形杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希氏菌均有较好的抑菌作用;对小鼠体内大肠埃希氏菌O111B4致死感染和对小鼠体内感染致死量变形杆菌有一定的保护作用[8]。三芪参丸 51 2006年第9卷第1期 广西中医学院学报
食源性传染病 1、食源性疾病包括三个要素： ①播疾病的媒介——食物； ②致病因子——食物中的病原体 ③临床特征——急性中毒性或感染性表现 （二）食物中毒（Food poisoning ） 2、原因：①致病性微生物；②有毒化学物质混入食物，并达到中毒剂量；③食品本身在一定条件下含有有毒成分（如：木薯、河豚鱼、马铃薯）；④误食（如：毒蕈、桐油） 3、分类：①细菌性食物中毒；②有毒动植物中毒；③化学性食物中毒；④真菌毒素和霉变食品中毒； 4、发病特点√ ①潜伏期短，病势急，很快形成发病高峰，可以在短时间内出现大量病人。 ②有三个相同点：相同的食物；基本相似的临床症状；相同的进食地点 ③没有流行余波 ④引起中毒的食物是在正常数量。人与人之间无直接传染。 食物中毒的流行病特点 ①发病的季节性特点：5到10月 ②地区性特点： ③食物中毒原因分布特点
④食物中毒病死率特点：较低 ⑤食物中毒发生场所分布特点 二、细菌性食物中毒 （一）细菌性食物中毒特点： ①发生比重大；②引起中毒的食品以动物性食物多见；③有明显季节性，多发季节在5月～10月；④病死率较低（肉毒中毒除外）； ⑤发生规律：先是食品被污染→微生物在食物中大量繁殖→食前加热不彻底； （二）沙门菌食物中毒 1、病原学特点：沙门菌属在外界的生活能力较强，最适的生长繁殖温度为20～30℃。 水中可生存2～3周，在粪便中可生存2～3个月。耐冷耐寒。不耐热，60 ℃15～30分钟或100 ℃数分钟即被杀灭。 2、流行病学特点 ①好发季节：6～9月 ②好发食品：主要为动物性食品，特别是畜肉类及其制品 ③食品中沙门菌的来源：家畜、家禽的生前感染和宰后污染；未经彻底消毒的鲜奶；禽蛋在经泄殖腔排出时蛋壳表面被污染；熟制食品生熟交叉污染； 3、临床表现 前驱症状：恶心、头痛、发热、面色苍白、发冷 胃肠炎症状：呕吐、腹泻、腹痛、黄绿色水样便、发热38℃～40℃
细菌耐药性监测及预警机制 多重耐药菌感染已成为延长患者住院时间、增加医疗费用和导致患者死亡的重要原因。为了加强对多重耐药菌感染监控与细菌耐药预警，更好地为临床合理使用抗菌药物提供科学依据，依照卫生部卫办医政发（2011）5号《多重耐药菌医院感染预防与控制技术指南（试行）》、卫生部（卫生令第84号）《抗菌药物临床应用管理办法》及卫办医政发（2009）38号《关于抗菌药物临床使用管理有关问题的通知》的精神，结合我院具体情况，现就建立完善细菌耐药监测与预警机制相关工作要求如下，请科室立即遵照执行。 一、临床科室 （一）对多重耐药菌感染患者或定植高危患者要进行监测，高危患者：（如1、长期住院患者；2、在ICU内；3、高龄、营养不 良及慢性疾病病人；4、机体免疫低下；5、前期使用多种抗生 素；6、外科手术、创伤及烧伤；7、侵袭性诊断；8、使用呼 吸机；）通过对无感染症状患者的标本（如鼻试纸、咽试纸、 伤口、气道内、肛试纸或大便）进行培养、监测，发现MDRO 定植患者；及时采集有关标本送检，并追踪结果，以及时发现、早期诊断多重耐药感染患者。属医院感染，应在24小时内填 《医院感染上报表》报告感控科。 （二）科内及科间告知制度： 1、主管医生发现或接到检验科室多重耐药菌感染病例报告，应立即开“特殊疾病护理”医嘱，报告科室主任及科室感控员。
2、感控员应在早交班上告知全科医护人员。 3、护士感控员落实消毒、隔离措施，并填报《耐药菌控制措施督查表》。 4、责任护士负责告知家属及陪护人员相关隔离常识。 5、主管医生根据患者治疗情况判断解除隔离的时机，如果患者转科/转院或死亡，护士做好多重耐药菌患者床单元的终末消毒。 6、转床、转科、送医技科室辅助检查或需要手术治疗时应告知相关科室的接诊医生或护士，做好消毒隔离。 7、感控员及时对耐药感染预防控制措施的有效性进行追踪总结。（三）科室短时间内发生特殊耐药表型或3例以上名称相同、耐药表型相同的耐药菌病例，应立即向感控科报告。班外时间、 节假日报院总值班，院总值班通知感控看负责人。 （四）科室应按《多重耐药菌管理流程》落实相关院感防控措施。（五）应了解医院前五位目标细菌及科室（重点科室）前五位目标细菌名称及耐药率，根据细菌耐药性情况分析和耐药预警报 告，指导经验性使用抗菌药物。 二、检验科 （一）应及时对临床送检标本进行细菌培养及药敏，发现多重耐药菌应填写《多重耐药菌病人交接班登记本》并及时通知 临床科室，及感控科。 （二）一旦发现特殊耐药表型或短时间内某一病区有3例及以上某耐药表型相同病原菌，应立即通知感控科及相关临床科
细菌总数的测定法 一、细菌数测定的基本概念 药品细菌数测定是微生物的定量检查，是用来判断药品被细菌污染程度和卫生质量评价的重要指标，也是检测药品质量的重要指标之一。细菌计数是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH 位、培养温度和时间等）每1g、lml、l0cm2供试品液经培养后所生长的菌落数。所谓一定条件是按我国药典规定，在需氧条件下，30～35℃，一般培养48h,在营养琼脂培养基平板上生长的细菌菌落数。细菌数的测定方法有多种：平板法、薄膜过滤法、涂抹法。 药品细菌数测定是活菌计数，最常用的平板法是以平板菌落计数为依据，即每个菌落代表个菌细胞，但有的菌落也可能是多个菌细胞形成，如双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌等，很可能是多个菌细胞在一起。故准确地说，细菌数测定值实际上是菌落形成单位数( CFU)。 平板法菌落计数法，是受一定条件的限制：如供试液是否均质，供试液中的细菌是否充分分散；培养基的质量、培养温度及培养时间的影响；有繁殖能力的菌细胞才能形成菌落，死菌及某此受损伤的细菌或营养要求苛刻的细菌在规定的培养基上不能生长，因而不被计数。在试验操作中应考虑到这此问题。 二、设施、设备、仪器及器皿 1、设施 细菌数测定全过程应严格遵守无菌操作，在环境洁净净度l0000级和局部洁净度100 级单向流空气区域内进行，以防止再污染。 2、设备、仪器 恒温培养箱（30～35℃）、微波炉、匀浆仪（4000～10000r / min ）、康氏振荡器、恒温水浴、电热干燥箱（250～300℃）、电冰箱、空调、高压蒸汽灭菌器（使用时要进行灭菌效果验证并应定期请有关部门检定） 菌落计数器、显微镜（1500X）、电子天平（感量0.1g）、pH 值系列比色计、全封闭可拆卸或开放式的薄膜过滤器。 3、器皿 锥形瓶（250～300ml ）、培养皿（∮9cm）、量筒（100ml）、试管（18×18mm）、刻度吸管（l ml , 10ml）、载玻片、玻璃或搪瓷、不锈钢消毒缸（带盖）。 玻璃器皿用前应洗涤干净，无残留抗菌物质。吸管上端距0 .5 cm 处塞入约2 cm 左右的适当疏松棉花，装入吸管筒内或牛皮纸口袋中。锥形瓶、量筒、试管塞（硅氟塑料塞），再用牛皮纸包扎。使用的器皿应采用经验证合格的方法进行灭菌。 4、用具 大、小橡皮乳头（置干净带盖的容器中并应定期用5%来苏尔溶液浸泡），无菌衣、帽、口罩、手套（洗净后用布袋或牛皮纸包严）灭菌，备用。也可使用一次性无菌衣、帽、口罩。接种环(白依金或镍铬合金）、乙醇（酒精）灯、乙醇棉球或碘伏锦球、灭菌剪刀、镊子或灭菌的手术刀、不锈钢药匙、试管架、火柴、记号笔等。 二、培养基、稀释剂 除另有规定外一般使用营养肉汤琼脂培养基, 可按处方配制亦可采用干燥脱水培养基。 主要稀释剂有0. 9％无菌氯化钠一蛋白胨缓冲液（供试品稀释用），0.9%无菌氯化钠溶液（对照菌稀释用）。 三、检验方法 1、试验前的准备 1）、将试验用灭菌的器皿、稀释剂及供试品外包装去掉，内包装消毒后移至无菌室内。每
食源性疾病 食源性疾病是指通过摄食而进入人体的有毒有害物质（包括生物性病原体）等致病因子所造成的疾病。一般可分为感染性和中毒性，包括常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染病、寄生虫病以及化学性有毒有害物质所引起的疾病。食源性疾患的发病率居各类疾病总发病率的前列，是当前世界上最突出的卫生问题。 疾病概述 世界卫生组织认为，凡是通过摄食进入人体的各种致病因子引起的，通常具有感染性的或中毒性。 食源性疾病的一类疾病，都称之为食源性疾患。即指通过食物传播的方式和途径致使病原物质进入人体并引发的中毒或感染性疾病。从这个概念出发当不包括一些与饮食有关的慢性病、代谢病，如糖尿病、高血压等，然而国际上有人把这类疾病也归为食源性疾患的范畴。顾名思义，凡与摄食有关的一切疾病(包括传染性和非传染性疾病)均属食源性疾患。 1984年WHO将“食源性疾病”（foodborne diseases）一词作为正式的专业术语，以代替历史上使用的“食物中毒”一词，并将食源性疾病定义为“通过摄食方式进入人体内的各种致病因子引起的通常具有感染或中毒性质的一类疾病。 疾病病原
5、食源性真菌毒素中毒 6、动物性毒素中毒 7、植物性毒素中毒 按发病机制分类 1、食源性感染 2、食源性中毒 疾病防治 目前一些发达国家和国际组织已经很少使用食物中毒的概念，经常使用的是“食源性疾患”。近20年来，他们对食源性疾患的定义、流行因素、危害程度、预防措施及其对社会经济发展的影响等的研究有了较大的进展。我国历来重视食物中毒的防治工作，已形成了一整套的食物中毒的报告管理制度。《食品卫生法》已明确规定了食物中毒和其他食源性疾患的食品卫生监督管理的内容。由于历史原因，由食物传播的肠道传染病、腹泻病的报告管理仍属传染病报告的范围。对人畜共患病的报告尚不健全。因此，食物中毒仅是食源性疾患的一部分，不能全面、真实地反映因食物不卫生、食品污染对健康造成的危害。如何加强对食源性疾患的统一管理，统一报告，从预防和控制措施上与国际接轨，将是食品卫生工作者长期的任务。 疾病预防 1.避免在没有卫生保障的公共场所进餐。
China Licensed Pharmacist Mar. 2016，Vol. 13 No.3 2015年全国细菌耐药监测网（CARSS）成员单位共有1 427所医院，其中上报数据医院共1 338所。上报数据的成员单位中二级医院359所，三级医院979所；经过数据审核，纳入数据分析的医院共有1 143 所，其中二级医院272所，占纳入数据分析医院总数的23.8%，三级医院871 所，占76.2%。 2015年度监测时限为2014年10月至2015年9月，此期间上报非重复细菌总数为2 400 786株，其中革兰阳性菌695 066株（占28.9%），革兰阴性菌1 705 720株（占71.1%）。 革兰阳性菌排前五位的是：金黄色葡萄球菌223 758株（占32.2 %），表皮葡萄球菌88 593株（占12.8%），粪肠球菌67 432株（占9.7%），肺炎链球菌64 791株（占9.3%）和屎肠球菌61 961株（占8.9%）。 革兰阴性菌排前五位的是：大肠埃希菌510 140株（占29.9%），肺炎克雷伯菌336 829株（占19.8%），铜绿假单胞菌219 630株（占12.9%），鲍曼不动杆菌183 178株（占10.7%），阴沟肠杆菌73 136株（占4.3%）。 位居前三位标本来源的分别为痰标本993 205 株（占41.4%）、尿标本372 161株（占15.6%）和血标本224 481株（占9.4%）。 重要与特殊耐药菌检出率根据CLSI 2014标准按全国及各省、直辖市及自治区进行分析，结果如下： 一、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率 MRSA全国检出率为35.8%，各地区MRSA检出率为20.3% ～47.0%，其中上海市最高，为47.0%，山西省最低，为20.3%（图1）。 二、甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率 MRCNS全国检出率为79.4%，各地区MRCNS 检出率为66.1% ～84.3%，其中新疆维吾尔自治区最高，为84.3%，海南省最低，为66.1%（图2）。 编者按：为贯彻落实《抗菌药物临床应用指导原则》，加强医疗机构抗菌药物临床应用的监督和管理，国家卫生计生委合理用药专家委员会和全国细菌耐药监测网日前发布了《2015年全国细菌耐药监测报告》，现予全文刊登，以促进合理用药，提高抗菌药物临床应用水平。 2015年全国细菌耐药监测报告 国家卫生计生委合理用药专家委员会 全国细菌耐药监测网 2015年12月12日 doi：10.3969/j.issn.1672-5433.2016.03.001 China Antimicrobial Resistance Surveillance System Report2015 Committee of Experts on Rational Drug Use, National Health and Family Planning Commission of the P.R.China, China Antimicrobial Resistance Surveillance System