***含量测定
方法学确认方案日期：2016年1月
验证方案审查与批准
您下面的签字表明您已审阅此份验证方案并同意实施。
目录
1. 目的....................................................... 错误!未定义书签。
2. 范围....................................................... 错误!未定义书签。
3. 验证机构与职责............................................. 错误!未定义书签。
4. 定义....................................................... 错误!未定义书签。
5. 参考文件................................................... 错误!未定义书签。
6. 风险因素分析............................................... 错误!未定义书签。
7. 验证准备................................................... 错误!未定义书签。
8. 检测方法的描述............................................. 错误!未定义书签。
9. 验证实施................................................... 错误!未定义书签。
10. 偏差与变更............................................... 错误!未定义书签。
11. 确认结果评定与结论....................................... 错误!未定义书签。
12. 确认周期................................................. 错误!未定义书签。
13. 附录目录................................................. 错误!未定义书签。
1 目的
对苦参膜中的含量测定检测方法进行确认，确保方法的可行性，以便为有效控制苦参膜的含量提供依据。
2 范围
本方案适用于*****药业股份有限公司齐墩果酸片含量测定方法的确认。
3 验证机构与职责
3.1验证小组成员
3.2 职责
3.2.1验证小组组长职责
3.2.1.1保证确认方案及各种检查表的起草。
3.2.1.2保证在执行前完成对确认方案及各种检查表的审核和批准。
3.2.1.3负责对确认小组成员进行本方案的培训。
3.2.1.4保证完全按照确认方案实施。
3.2.1.5确保能及时发现偏差，并按照已经达成一致的偏差处理方法对其进行记录、纠
正、调查和最终确认。
3.2.1.6确保确认报告的生成、审核和批准。
3.2.2QA职责
3.2.2.1执行前完成对确认方案及各种检查表的审核。
3.2.2.2负责确认过程的监控和检查，保证确认方案的实施，参与确认结果评价。
3.2.2.3参与确认偏差的调查、处理、和评估。
3.2.2.4确认过程中，如有变更，保证按《变更处理程序》执行。
3.2.3其它成员职责
3.2.3.1执行前确认确认方案已批准，并经过培训。
3.2.3.2按确认方案实施确认，收集、整理确认数据，完成确认记录和报告。
3.2.3.3参与确认偏差的调查和处理，确认通过偏差修订和解决方案。
3.2.3.4确认确认过程中的变更在实施前已经批准。
4 定义
4.1线性：指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。4.2准确度：指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表
示。
4.3重复性：再规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行评价。
4.4中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员或用不同设备测定结果之间
的精密度，称为中间精密度。
5 参考文件
5.1 药品生产质量管理规范（2010年修订版）
5.2 药品生产验证指南
5.3 中国药典（2015年版）二部
5.4《国家药品监督管理局国家药品标准》
5.5 公司相关文件：
5.5.1苦参膜质量标准及检验规程（）
5.5.2验证管理（）
5.5.3变更控制操作规程（）
5.5.4偏差处理操作程序（）
5.5.5纠正措施与预防措施操作规程（）
5.5.62016年度验证总计划
6 风险因素分析
风险评估将采用失效模式及影响（FMEA）的工具来评估和衡量方法参数失效后对产品分析结果的影响。评估过程将参照公司质量风险管理的要求，风险等级为低、中、高级别的必须给出合理的建议措施，之后再次对建议的风险控制措施进行评估以确保风险的降低，分析、评估结果见附录1《风险评估表》。
7 验证准备
确保所有方法SOP是最新版本且经过批准，将检查结果记录在附录2《文件检查》内。
确认参与验证的人员都经过此方案和相关SOP的培训，和识别所有签字和草签本方案任何数据表的人员。将检查结果记录在附录3《培训检查和签名确认》内。
7.3确认验证过程中用到设备、计量仪器都是经过校验，并在有效期内，将检查结果记录在附录4《确认用仪器/仪表校准检查》内。
8 检测方法的描述
药品与试剂的准备
***对照品（中国药品生物制品检定院提供），***（为*****药业股份有限公司生产）；硅钨酸试液、碘化汞钾试液、苦味酸、氯仿、甲醇、浓氨、稀碘化铋钾试液、盐酸液（L）、氢氧化钠液（1mol/L）、氢氧化钠滴定液（L）、硫酸滴定液（L）、甲基红示液、磷酸、乙腈、无水乙醇。
仪器分析条件
电子天平（FA2014）、超声池（KQ-300DE）、电热恒温水浴锅（DK-98-1）、高效液相（LC-10ATVP)
8.3检测方法
显色鉴别、色谱鉴别、酸碱滴定法、高效液相色谱法
检测操作
鉴别
显色鉴别：样品连续三批，A、B两位组员各取样品1号、样品2号约，分置三支试管中，加水2ml使溶解，分别加硅钨酸试液、碘化汞钾试液及苦味酸试液1～2滴，分别生成白色、淡黄色及黄色沉淀。
薄层鉴别：样品连续三批，A、B两位组员分别取本品，加甲醇10ml使溶解，超声提取15分钟，静置，取上清液作为供试品溶液；另取苦参碱及氧化苦参碱对照品适量，加甲醇制成每1ml中各含5mg的溶液作为对照品溶液，照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，取上述三种溶液各2～3μl，分别点于同一以%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（5::）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个斑点。
酸碱滴定法：连续三批样品，两位组员分别取样品1、样品2，各10片，剪碎，取一片重两份，各精密称定，加氯仿25ml回流3次，每次1小时，合并提取液，置水浴上挥干，残渣用L盐酸液5ml使溶解，滤过，滤液置入分液漏斗中，用水10ml分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化钠约6g与1mol/L氢氧化钠液5ml,摇匀，用三氯甲烷振摇提取5次（25、20、10、10、10ml）,每次三氯甲烷提取液均用同一饱和氯化钠液5ml振摇洗涤，再依次分别通过同一装有无水硫酸钠1g的脱脂棉层滤过。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定液（L）10ml及新沸过的冷水20ml，振摇提取后，分取酸层，氯仿层再用新沸过的冷水洗涤3次，每次10ml，合并酸液与洗涤液，置水浴上加热，除去残留的三氯甲烷，放冷至室温，加甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸液（L）相当于的
C 15H
24
N
2
O
2。
本品每片含总生物碱以****%～%。相对偏差（dr%）不得超过%计算公式：
4
3
2
2
1
1
0100
100
?
?
?
??
?
?
?
?
?
-
?
=
M
m
T
C
C
V
C
C
V
C
C1：硫酸滴定液的实际浓度（mol/L)；
C2：硫酸滴定液的理论浓度（mol/L)；
C3：氢氧化钠滴定液的实际浓度（mol/L)； C4：氢氧化钠滴定液的理论浓度（mol/L)；
V1：加入硫酸滴定液的体积（ml)；
V2：消耗氢氧化钠滴定液的体积(ml)；
T ：标示量（；
m：该批20片苦参膜的平均重量(g)；
M ：使用苦参膜的量（g)。 .4高效液相色谱法
色谱条件与系统适用性试验：用氨基键合硅胶为填充剂：以乙腈-无水乙醇-3%磷 酸溶液（85::）为流动相；柱温30℃，检测波长为220nm ，流速／min ，理论塔板数按氧化苦参碱峰计算，应不低于5000。
对照品溶液的制备： 取******对照品适量，精密称定，置同一量瓶中，加乙腈-无水乙醇（85:15）制成每1ml 含苦参碱和氧化苦参碱35μg 的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备： 取已剪碎的样品约，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨水，精密加入三氯甲烷25ml ，称定重量，超声处理30分钟，放冷，加三氯甲烷补足损失重量，滤过，精密吸取续滤液5ml ，水浴上挥干，用乙腈-无水乙醇（85:15）定溶至25ml 量瓶中，摇匀，用μm 滤膜滤过，即得。
测定法： 分别精密吸取对照品溶液5μl 与供试品溶液5～10μl ，注入高效液相 色谱仪，测定，即得。
本品每片含******不得少于 mg 。相对标准偏差不得过2%。 计算公式: ① 2
2
1A A A +=
② ()样品平均片重稀释倍数样品称量
对照品平均峰面积对照品浓度
样品峰面积????=
g mg C /
A : 对照品进两针的平均峰面积； 1A : 对照品第一针峰面积； 2A : 对照品第二针峰面积。 9 验证实施 线性实验
目的：在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度应符合规定。 滴定法 实验过程
同一人同时取同一批样品，各10片，剪碎，取一片重样品1、样品2、样品3、样品4、样品5，各精密称定，加氯仿25ml回流3次，每次1小时，合并提取液，置水浴上挥干，残渣用L盐酸液5ml使溶解，滤过，滤液置入分液漏斗中，用水10ml分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化钠约6g与1mol/L氢氧化钠液5ml,摇匀，用三氯甲烷振摇提取5次（25、20、10、10、10ml）,每次三氯甲烷提取液均用同一饱和氯化钠液5ml振摇洗涤，再依次分别通过同一装有无水硫酸钠1g的脱脂棉层滤过。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定液（L）10ml及新沸过的冷水20ml，振摇提取后，分取酸层，氯仿层再用新沸过的冷水洗涤3次，每次10ml，合并酸液与洗涤液，置水浴上加热，除去残留的三氯甲烷，放冷至室温，加甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸液（L）相当于的
C 15H
24
N
2
O
2。
本品每片含总生物碱以氧化苦参碱(C
15
H
24
N
2O
)计，应为标示量的%～%。相对偏差（dr%）
不得超过%。
以样品滴定过程中消耗氢氧化钠的体积为横坐标，以样品含量为纵坐标，绘制回归方程。可接受标准（相关系数dr《%）。
记录：将实验结果记录在《***滴定含量测定线性实验记录》内，见附录。
高效液相
对照品配制：取***一瓶精密称取置25ml容量瓶中、***对照品两瓶精密称取置50ml量瓶中，加乙腈：无水乙醇（85:15）溶解至刻度。分别精密量取氧化苦参碱、苦参碱5ml；氧化苦参碱1ml、苦参碱10ml；氧化苦参碱2ml、苦参碱20ml，分别置25ml容量瓶中，加乙腈：无水乙醇（85:15）至刻度。既得。
样品制备：取已剪碎的样品约，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨水，精密加入三氯甲烷25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，加三氯甲烷补足损失重量，滤过，精密吸取续滤液5ml，水浴上挥干，用乙腈-无水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，摇匀，用μm滤膜滤过，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液5μl与供试品溶液5～10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。本品每片****，不得少于 mg。
以对照品的吸取量（峰面积）为横坐标，以样品含量（峰面积）为纵坐标，绘制回归方程
可接受标准（相关系数RSD《2%）。
记录：将实验结果记录在《***高效含量测定线性实验记录》内，见附录5。
重复性实验
目的：在规定范围内，取同一批次的样品品，用5个测定结果进行评价，得到的结果RSD 应符合要求。
滴定法：
实验过程
取同一批样品，10片，剪碎，取一片重样品1、样品2、样品3、样品4、样品5各精密称定，加氯仿25ml回流3次，每次1小时，合并提取液，置水浴上挥干，残渣用L盐酸液5ml 使溶解，滤过，滤液置入分液漏斗中，用水10ml分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化钠约6g与1mol/L氢氧化钠液5ml,摇匀，用三氯甲烷振摇提取5次（25、20、10、10、10ml）,每次三氯甲烷提取液均用同一饱和氯化钠液5ml振摇洗涤，再依次分别通过同一装有无水硫酸钠1g的脱脂棉层滤过。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定液（L）10ml及新沸过的冷水20ml，振摇提取后，分取酸层，氯仿层再用新沸过的冷水洗涤3次，每次10ml，合并酸液与洗涤液，置水浴上加热，除去残留的三氯甲烷，放冷至室温，加甲基红指示液
2滴，用氢氧化钠滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸液（L）相当于的C
15H
24
N
2
O
2。
本品每片含总生物碱以****%～%。相对偏差（dr%）不得超过%。
可接受标准（相关系数dr《%）。
记录：将实验结果记录在《***滴定含量测定重复性实验记录》内，见附录5。
高效
实验过程
对照品配制：对照品溶液的制备：取苦参碱、氧化苦参碱对照品母液适量，置同一量瓶中，加乙腈-无水乙醇（85:15）制成每1ml含苦参碱和氧化苦参碱35μg的溶液，摇匀，即得。
样品制备：取同一批样品10片，剪碎并分别取样品1、样品2、样品3、样品4、样品5约，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨水，精密加入三氯甲烷25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，加三氯甲烷补足损失重量，滤过，精密吸取续滤液5ml，水浴上挥干，用乙腈-无水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，摇匀，用μm滤膜滤过，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液5μl与供试品溶液5～10μl，注入高效液相色谱仪，
测定，即得。本品每片含苦参总碱以苦参碱(C
15H
24
N
2
O)与氧化苦参碱（C
15
H
24
N
2
O
2
）的总量计，
不得少于 mg。
可接受标准（相关系数RSD《2%）。
记录：将实验结果记录在《***高效含量测定重复性实验记录》内，见附录5。
中间精密度实验
目的：含量测定中，一个实验室内不同的人、在不同时间（通常是不同天）测定得到的结果RSD应符合要求。
滴定含量
实验过程
两名实验人员分别在不同时间（通常是不同天）各取同一批号苦参膜10片，精密称定，剪碎，各精密称取本品3份（每份约），加氯仿25ml回流3次，每次1小时，合并提取液，置水浴上挥干，残渣用L盐酸液5ml使溶解，滤过，滤液置入分液漏斗中，用水10ml分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化钠约6g与1mol/L氢氧化钠液5ml,摇匀，用三氯甲烷振摇提取5次（25、20、10、10、10ml）,每次三氯甲烷提取液均用同一饱和氯化钠液5ml振摇洗涤，再依次分别通过同一装有无水硫酸钠1g的脱脂棉层滤过。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定液（L）10ml及新沸过的冷水20ml，振摇提取后，分取酸层，氯仿层再用新沸过的冷水洗涤3次，每次10ml，合并酸液与洗涤液，置水浴上加热，除去残留的三氯甲烷，放冷至室温，加甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（L）滴定。每1ml的硫酸
液（L）相当于的C
15H
24
N
2
O
2。
可接受标准（同一人实验结果RSD%≤%；两人间的RSD%≤%）
记录：将实验结果记录在《***滴定含量测定中间精密实验记录》内，见附录5。
高效
两名实验人员用同一批对照品分别在不同时间（通常是不同天）各取同一批号苦参膜10片，精密称定，剪碎，各精密称取本品3份（每份约），置具塞锥形瓶中，加浓氨水，精密加入三氯甲烷25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，加三氯甲烷补足损失重量，滤过，精密吸取续滤液5ml，水浴上挥干，用乙腈-无水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，摇匀，用μm滤膜滤过，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液5μl与供试品溶液5～10μl，注入高效液相色谱仪，
测定，即得。本品每片含苦参总碱以苦参碱(C
15H
24
N
2
O)与氧化苦参碱（C
15
H
24
N
2
O
2
）的总量计，
不得少于 mg。
可接受标准（同一人实验结果RSD%≤%；两人间的RSD%≤%）。
记录：将实验结果记录在《***高效含量测定中间精密度实验记录》内，见附5。
含量测定准确度实验
目的：含量测定中，用已确定的方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示，得到的结果RSD应符合要求。
实验过程
精密称取同一已知含量的供试品9份（每份约），分别置于圆底烧瓶中，分成三组，分别向第一组的每一份供试品中加入浓度为（35μg/ml）的氧化苦参碱对照品2 ml；向第二组的每一份供试品中加入浓度为（35μg/ml）的氧化苦参碱对照品5ml；向第三组的每一份供试品中加入浓度为（35μg/ml）的氧化苦参碱对照品7 ml。加氯仿25ml回流3次，每次1小时，合并提取液，置水浴上挥干，残渣用L盐酸液5ml使溶解，滤过，滤液置入分液漏斗中，用水10ml分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，加氯化钠约6g与1mol/L氢氧化钠液5ml,摇匀，用三氯甲烷振摇提取5次（25、20、10、10、10ml）,每次三氯甲烷提取液均用同一饱和氯化钠液5ml振摇洗涤，再依次分别通过同一装有无水硫酸钠1g的脱脂棉层滤过。合并三氯甲烷液，精密加硫酸滴定液（L）10ml及新沸过的冷水20ml，振摇提取后，分取酸层，氯仿层再用新沸过的冷水洗涤3次，每次10ml，合并酸液与洗涤液，置水浴上加热，除去残留的三氯甲烷，放冷至室温，加甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（L）滴
定。每1ml的硫酸液（L）相当于的C
15H
24
N
2
O
2。
测定法
将测得的总含量减去供试品中已知含量，计算每组的回收率。
可接受标准（实验结果回收率%～%）。
记录：将实验结果记录在《***滴定含量测定准确度实验记录》内，见附录8。
高效
对照品制备：对照品溶液的制备：取苦参碱、氧化苦参碱对照品母液适量，置同一量瓶中，加乙腈-无水乙醇（85:15）制成每1ml含苦参碱和35μg的溶液，摇匀，即得。
供试品制备：
精密称取同一已知含量的供试品9份（每份约），置具塞锥形瓶中，加浓氨水，精密加入三氯甲烷25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，加三氯甲烷补足损失重量，滤过，精密吸取续滤液5ml，水浴上挥干，用乙腈-无水乙醇（85:15）定溶至25ml量瓶中，摇匀，用μm滤膜滤过，即得。分成三组（每组3份样品），分别向第一组的每一份供试品中加入浓度为（每1ml含苦参碱和氧化苦参碱35μg的溶液）的对照品2 ml；向第二组的每一份供试品中加入浓度为（每1ml含苦参碱和氧化苦参碱35μg的溶液）的对照品5ml；向第三组的每一份供试品中加入浓度为（每1ml含苦参碱和氧化苦参碱35μg的溶液）的对照品7 ml。分别精密吸取对照品溶液5μl与供试品溶液5～10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
测定法
将测得的总含量减去供试品中已知含量，计算每组的回收率。
可接受标准（实验结果回收率%～%）。
记录：将实验结果记录在《***效含量测定准确度实验记录》内，见附录8。
10 偏差与变更
验证偏差
当该方案的某一部分无法实施或实际情况无法达到可接受标准时，需要进行偏差报告。当偏差出现时，首先要进行全面调查以确定该偏差是由什么引起的，之后再确定相应的解决措施。
将验证过程中产生的偏差记录在《偏差处理单》中，并作为验证记录附件。
10.2变更控制
所有在验证过程中产生的变更都需记录，确保所有的变更得到评估和批准，验证的结果达到预定的目的和要求。
将验证过程中产生的变更记录在《变更处理单》记录中，并作为验证记录附件。
11 确认结果评定与结论
验证小组负责对确认结果进行综合评审，做出确认结论。
对确认结果的评审应包括：
确认实施是否有遗漏？
确认实施过程中对确认方案有无修改？修改原因、依据以及是否经过批准？
确认记录是否完整？
确认试验结果是否符合标准要求？是否需要进一步补充试验？
12 附录目录
附录1 风险评估报告
附录2 文件检查
附录3 培训检查和签名确认
附录4 确认用仪器/仪表校准检查
附录5 ***滴定含量测定操作记录
附录5 ***高效含量测定操作记录
残留溶剂方法学验证方案
阿莫西林残留溶剂分析方法验证方案文件编号： VP-01-06-00-041 方案起草 方案审核 方案批准
生效日期：年月日 1、概述 在阿莫西林制备工艺中，使用了甲醇与丙酮两种对人体具有危害的二类溶剂，我公司为了确保阿莫西林原料中甲醇与丙酮的残留在国家要求范围内，开发了阿莫西林胶囊中甲醇与丙酮残留的检测方法，按照《中国药典》2015年版的要求对此检测方法进行方法学验证。 2、验证目的 证明本方法能满足阿莫西林原料中甲醇与丙酮的残留溶剂测定，确保阿莫西林原料中甲醇与丙酮的残留溶剂检测方法准确、重现并耐用，检测结果数据真实可靠。 3、验证范围 本验证方案适用于阿莫西林中甲醇与丙酮的残留溶剂检验方法验证。 4、确认小组成员及职责
5、验证前的风险评估 5.1 验证小组人员按照《质量风险管理规程》，对分析方法进行了风险评估，确定了需进行方法确认的项目。 5.1.1严重性（S ）： 危害可能产生后果的程度。严重程度分为五个等级。 5.1.2可能性（P ） 影响检测结果的事件发生的可能性频率或概率，建立以下五个等级：
5.1.3可检测性（D）检测到异常情况存在的能力的程度，定义如下： 5.2风险优先数量等级判定（RPN） 5.2.1风险等级判定标准的确定 RPN是事件发生的严重程度、可能性和可探测性三者乘积，用来衡量可能的仪器缺陷，以便采取可能的预防措施。 RPN = Severity(严重程度)×Possibility(发生的可能性)×Detection(可探测性) 5.2.2风险评价和处理
注：当RPN≤8，但严重性S为5时，仍需按中等以上风险进行后续控制。
***含量测定 方法学确认方案日期：2016年1月
验证方案审查与批准 您下面的签字表明您已审阅此份验证方案并同意实施。
目录 1 目的 (4) 2 范围 (4) 本方案适用于*****药业股份有限公司齐墩果酸片含量测定方法的确认。 (4) 3 验证机构与职责 (4) 4 定义 (5) 5 参考文件 (5) 6 风险因素分析 (5) 7 验证准备 (6) 8 检测方法的描述 (6) 8.1 药品与试剂的准备 (6) 9 验证实施 (8) 11 确认结果评定与结论 (14) 12 附录目录 (14)
1 目的 对苦参膜中的含量测定检测方法进行确认，确保方法的可行性，以便为有效控制苦参膜的含量提供依据。 2 范围 本方案适用于*****药业股份有限公司齐墩果酸片含量测定方法的确认。 3 验证机构与职责 3.1验证小组成员 3.2 职责 3.2.1验证小组组长职责 3.2.1.1保证确认方案及各种检查表的起草。 3.2.1.2保证在执行前完成对确认方案及各种检查表的审核和批准。 3.2.1.3负责对确认小组成员进行本方案的培训。 3.2.1.4保证完全按照确认方案实施。 3.2.1.5确保能及时发现偏差，并按照已经达成一致的偏差处理方法对其进行记录、纠 正、调查和最终确认。 3.2.1.6确保确认报告的生成、审核和批准。 3.2.2QA职责 3.2.2.1执行前完成对确认方案及各种检查表的审核。 3.2.2.2负责确认过程的监控和检查，保证确认方案的实施，参与确认结果评价。 3.2.2.3参与确认偏差的调查、处理、和评估。 3.2.2.4确认过程中，如有变更，保证按《变更处理程序》执行。
有关物质（包括已知杂质）检查方法验证标准操作规程 1.目的 为保证检测工作的可靠性和可重现性，在未知样品的检测前必须对检测方法进行验证以证明所采用的检测方法适合于相应的检测要求。 2.范围 建立药品质量标准时、药品生产工艺变更时、制剂组分发生变更时、原分析方法修订时均应进行有关物质检测的方法学的验证。 3.责任人 检测员、项目负责人、各级项目经理：要求系统、全面验证含量测定方法并记录整理验证数据。 4.程序 4.1验证内容：杂质检测方法的建立基于方法学研究，主要包括专属性试验、检测限试验、溶液稳定性试验等内容，如果定量检测杂质则需进行线性、精密度、稳定性、重现性及回收率等试验，从不同的角度、层面验证分析方法的可行，从而保证药品中的杂质能够有效地检测。 4.2 杂质检测方法建立验证及可接受标准 1）专属性试验主要通过破坏性实验实现。 破坏性试验，也称为强制降解试验（stressing test），它是在人为设定的特殊条件下，如酸、碱、氧化、高温、光照等，引起药物的降解，通过对降解产物的测定，验证检测方法的可行性，分析药物可能的降解途径和降解机制。每项破坏性试验通常包括以下内容：酸降解一般采用0.1mol/L－1mol/L盐酸或硫酸；碱降解采用0.1mol/L－1mol/L的氢氧化钠溶液；氧化降解采用合适的过氧化氢溶液。以上三种试验，为了加快反应或者提高降解强度，必要时可以加热或提高浓度；高温试验通常温度高于加速试验温度的10℃，如50℃、60℃等，对于原料药有时需考虑水溶液或混悬液的降解，或者考虑在不同的pH值条件下的降解；光照试验条件可采用4500LX。破坏性试验的具体条件，与具体药物密切相关，需结合具体药物的特点，选择合适的条件，使药物有一定量的降解，并对可能的降解途径和降解机制进行分析，保证实验的意义。 药物经强力破坏产生的降解产物通常采用色谱法测定，需结合药物和可能降
一、准确度 准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％)表示。准确度应在规定的范围内测定。 1.化学药含量测定方法的准确度 原料药采用对照品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加人已知量的被测物对照品进行测定，或用所建立方法的测定结果与已知准确度的另一种方法测定结果进行比较。准确度也可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。 2.化学药杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂处方量空白辅料中加人已知量杂质进行测定。如不能得到杂质或降解产物对照品，可用所建立方法测定的结果与另一成熟的方法进行比较，如药典标准方法或经过验证的方法。在不能测得杂质或降解产物的校正因子或不能测得对主成分的相对校正因子的情况下，可用不加校正因子的主成分自身对照法计算杂质含量。应明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（％) 或面积比（％ )。 3.中药化学成分测定方法的准确度 可用对照品进行加样回收率测定，即向已知被测成分含量的供试品中再精密加人一定量的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。在加样回收试验中须注意对照品的加人量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。 回收率：％= (C - A ) /S X 100% 式中：A为供试品所含被测成分量；B 为加入对照品量； C 为实测值。 4.校正因子的准确度 对色谱方法而言，绝对（或定量）校正因子是指单位面积的色谱峰代表的待测物质的量。待测定物质与所选定的参照物质的绝对校正因子之比，即为相对校正因子。相对校正因子计算法常应用于化学药有关物质的测定、中药材及其复方制剂中多指标成分的测定。校正因子的表示方法很多，本指导原则中的校正因
分析方法验证报告 2019QQHJKX01 分析方法：《水质石油类的测定紫外分光光度法(试行)》(HJ970-2018) 验证人员： 验证时间：2019年01月23日—25日 乌拉特前旗环境保护监测站
1参加人员情况 2仪器、标准物质情况 3 工作曲线的测定 3.1 工作曲线的测定条件 分析日期：2019年01月23日 温度：20℃湿度：18% 测定波长：225nm 3.2 工作曲线的测定
3.2 标准曲线的绘制 4 方法检出限的测定 依据《环境监测分析方法标准制修订技术导则》(HJ168-2010)附录A 方法特性指标确定方法。 方法检出限的一般确定方法： 按照样品分析的全部步骤，重复n（≥7）次空白试验，将各测定结果换算为样品中的浓度，计算n次平行测定的标准偏差，按公式A-1计算，方法检出限按公式A-2计算。
标准偏差S= （A-1） 式中：n —— 样品的平行测定次数 X i —— 单次测定值 X —— 测定平均值 MDL=t （n-1，0.99）×S (A-2) 式中：MDL —— 方法检出限 n —— 样品的平行测定次数 t —— 自由度为n -1 ，置信度为99%时的t 分布 S —— n 次平行测定的标准偏差 ( ) 1 1 2 - ? ? ? ? ? - ∑ = n X x n i i
5 精密度、准确度测试 分别对标准浓度为0.4mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L和有证标准物质BW022四个浓度进行6次测定，测定结果见表5-1。
6 评价与验证结论 6.1 评价 根据《水质石油油类的测定紫外分光光度法(试行)》(HJ970-2018)对本实验的检出限、精密度、准确度进行相关评价。 6.1.1 空白值最低检出限评价 根据《水质石油油类的测定紫外分光光度法(试行)》(HJ970-2018)中的检出限为0.01 mg/L，本实验石油类的检出限为0.004mg/L，符合标准方法要求。 6.1.2 精密度评价 本次实验分别对油浓度为0.4 mg/L、0.8 mg/L、1.0 mg/L和有证标准物质BW022进行测试，相对标准偏差分别为4.6%、2.9%、4.7%、5.0%，符合标准方法要求。 6.1.3 准确度评价 根据方法条件，本次实验测定的加标回收率为96%-104%，平均值为99.75%，对标准浓度为0.4 mg/L、0.8 mg/L、1.0 mg/L和有证标准物质BW022的测定，相对误差分别为 2.5%、-1.2%、0.0%、5.0%，其结果均在标准范围内。 6.2 结论 通过对上述指标的验证，证明本站具备按照《水质石油油类的测定紫外分光光度法(试行)》(HJ970-2018)进行监测的能力，该项目可在本监测站正常开展。 分析者：复核者：审核者： 报告编写时间：2019年01月26日
1.0目的 1.1确立海南国瑞制药有限公司方法学验证标准操作规程，使方法学验证规范化。 2.0范围 2.1本标准适用于新的检验方法、检验方法变更的相应检测要求。 2.2本标准适用于采用《中国药典》及其他法定标准未收载的检验方法、法规规定的其他需要验证的检验方法的相应检测要求。 2.3清洁验证方法的验证。 3.0职责 3.1QC负责对适用范围内的分析方法进行验证； 3.2质量管理部负责监督本规程的实施； 4.0定义 4.1用户需求（URS）：使用方根据使用目的、环境、用途等，对制药机械的性能、技术、使用、服务等提出的要求。 4.2准确度：准确度系指该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。一般以回收率（%）表示。 4.3精密度：精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。一般以偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。 4.4专属性：专属性系在可能其它成分（如杂质、降解物、辅料等）存在的条件下，采用的方法能正确测定待测物的特性。如方法不够专属，应采用多个方法予以补充4.5检出限：检出限是限度试验的参数，指试样中被测物能被检测出的最低量。定量分析的检出限必须经过分析适量的在检出限附近的样品或分析按检出限条件配制的样品的方法进行验证。 4.6定量限：定量限系指样品中被测物能被定量测定的最低值，其结果应具有一定的准确度和精密度。定量分析的定量限必须经过分析适量的在定量限附近的样品或分析按定量限条件配制的样品的方法进行验证。 4.7线性：线性系指在设计的范围内，测试结果与被测物浓度呈正比关系的程度。4.8范围：范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 4.9稳定性：稳定性系指在正常实验条件下，供试品或对照品溶液在分析过程中的稳定程度。
微生物限度检测方法学验证方案文件编号：YZ-WJ-001-0
批准签字页
目录 1.目的 (4) 2.责任者及职责 (4) 3.验证简介 (4) 4．验证过程 (5) 5．结果判断 (5) 6．结论和建议 (5) 7．再验证 (5) 8．附件 (5) 附件1：培养基的灵敏度复核 (6) 附件2：稀释液的无菌性检查 (7) 附件3：方法验证 (8) 附件4：培养基厂家报告 (9)
1.目的 按照中国药典2015版（第四部）规定，确认所采用的方法适合该药品的沙门菌的测定。照此检测法和检验条件进行沙门菌检查，能保证结果的准确、可靠。 2.责任者及职责 3.验证简介 验证时，按供试液的制备控制菌检查法所规定的方法及要求进行，验证实验至少进行3次独立平行实验。 3.1验证用菌株 3.2样品名称及数量 3.3实验用品
3.4培养基 检查人：复核人：检查日期： 4．验证过程 4.1试验器具准备 试验前，将先前已准备的适量稀释液和培养基灵敏度复核检查合格的培养基、检品和所用仪器一同放入无菌室的传递厨内。用消毒剂对无菌室进行消毒，并擦拭超净台，打开超净工作台风机及紫外灯灭菌1小时以上。 4.2测定 4.2.1 按照无菌室更衣程序更衣，进入无菌室。 4.2.2 用70%酒精棉球擦拭工作台面与待测品表面。 4.2.3菌液制备：沙门菌菌数控制在10~100cfu/ml 4.2.4取胰酪大豆胨液体培养基两份，分别加入10ml供试液及1ml10~100cfu/ml沙门菌菌悬液，混匀，30~35℃培养18~24小时。取上述各培养物0.2ml，接种至木糖赖氨酸脱氧胆算盐琼脂培养基平板上。沙门菌在木糖赖氨酸脱氧胆算盐琼脂培养基平板上生长良好，菌落为淡红色或无色透明或半透明，中心有或无黑色。未接种的木糖赖氨酸脱氧胆算盐琼脂培养基平板作为空白对照。用接种针挑选疑似菌落于三铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养18~24小时，或采用其他适宜方法进一步鉴定。 5．结果判定 若木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上有疑似菌落生长，且三糖铁琼脂培养基的斜面为红色、底层为黄色，或斜面为黄色、底层为黄色或黑色，应进一步进行适宜鉴定试验，确证是否为沙门菌。如果平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或三糖铁琼脂培养基的斜面未见红色、底层未见黄色；或斜面黄色，底层未见黄色或黑色，判定供试品未检出沙门菌。 6．结论和建议 此项中将根据实际测试的结果给出运行确认的结论，有异议的将给出建议。 7．再验证 如该验证的试验方法或试验相关试剂发生改变，需再验证。 8．附件 8.1附件1 培养基灵敏度检查记录 8.2附件2 稀释液无菌检查记录 8.3附件3 微生物方法学验证记录 8.4附件4 培养基厂家报告
槐花药材的含量测定及方法学验证 姓名：廖卓* 学号:11071105 一、实验目的 1、掌握比色法测定槐花药材中总黄酮含量的方法及原理。 2、熟悉槐花药材的含量测定的方法学验证。 二、实验原理 槐花为豆科植物SophorajaponicaL的干燥花及花蕾[1]。夏季花开放或花蕾形成时采收，及时干燥，除去枝，梗及杂质。前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。槐花药材的主要有效成份是黄酮类化合物，其中芦丁的含量最高，所以槐花药材的鉴别及含量测定均以芦丁为指标成分。 芦丁（C27H30O16,610.51） 黄酮类化合物在碱性条件下与铝盐发生配位反应，生成红色的配位化合物，使得最大吸收波长红移至可见光区，且具有较高的吸收系数。黄酮类与铝盐的配位反应是定量完成的，因此可采用比色法测定槐花药材中总黄酮的含量，避免其他非黄酮成分对测定准确度的影响[2]。 三、仪器与试药 仪器：紫外—可见分光光度计,100ml容量瓶，25ml容量瓶、10ml移液管，超声波清洗器、漏斗、玻璃棒 试剂：槐花药材，芦丁对照品，5%亚硝酸钠溶液，10%硝酸铝溶液，氢氧化钠试液，乙醇。 四、实验步骤 总黄酮含量测定
（1）对照品溶液的制备： 取芦丁对照品50mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加60%乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀。精密量取10ml,置于100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得浓度为0.2mg/ml的芦丁对照品溶液。 （2）检测波长的选择： 取A对照品溶液，在400～600nm波长进行光谱扫描，发现光谱图最大吸收，选定波长 说明：一般选择待测样品化合物吸收度最大，即吸收曲线最高点为测定波长。化合物的最大吸收峰λmax或该化合物经显色后的最大吸收峰，通过分光光度计进行扫描后确定或通过二极管阵列检测来确定，并与该化合物文献值相比较应一致。在最大吸收峰处测定时灵敏度高，误差小。因此一般情况下选择最大吸收波长作为检测波长。 （3）标准曲线的制备： 配制不同浓度的A对照品溶液，考察线进样量与峰面积的性关系、线性范围、相关系数等。以进样量为横坐标峰面积为纵坐标做标准曲线： 标准曲线的制备步骤： 精密量取对照品溶液1ml,2ml,3ml,4ml,5ml与6ml，分别置于6个25ml量瓶中，各加水使成6.0ml，精密加5%亚硝酸钠溶液1.0ml，摇匀，放置6分钟，再加10%硝酸铝溶液1.0ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10.0ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟，不加对照品溶液同法配制空白溶液，按照紫外可见分光光度法，在500nm波长处测定各溶液的吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 浓度C（mg/ml）0.000 0.008 0.016 0.024 0.032 0.040 0.048 吸光度A
方法学验证方案
***含量测定方法学确认方案 日期： 1月
验证方案审查与批准 您下面的签字表明您已审阅此份验证方案并同意实施。
目录 1. 目的........................................................................................ 错误!未定义书签。 2. 范围........................................................................................ 错误!未定义书签。 3. 验证机构与职责 .................................................................... 错误!未定义书签。 4. 定义........................................................................................ 错误!未定义书签。 5. 参考文件................................................................................ 错误!未定义书签。 6. 风险因素分析 ........................................................................ 错误!未定义书签。 7. 验证准备................................................................................ 错误!未定义书签。 8. 检测方法的描述 .................................................................... 错误!未定义书签。 9. 验证实施................................................................................ 错误!未定义书签。 10. 偏差与变更 .......................................................................... 错误!未定义书签。 11. 确认结果评定与结论 .......................................................... 错误!未定义书签。 12. 确认周期.............................................................................. 错误!未定义书签。 13. 附录目录.............................................................................. 错误!未定义书签。
验证编号 XX中基因毒性杂质XX测定方法学验证报告
验证报告审批
变更记载
目录 1.概述 (5) 2.参考文献 (5) 3.验证的结果与结论 (5) 4.验证所需要的仪器、试剂及样品信息 (5) 5.方法学验证内容 (6) 5.1专属性 (6) 5.2定量限与检测限 (7) 5.3线性与范围 (7) 5.4系统适用性 (7) 5.5进样精密度 (8) 5.6重复性 (8) 5.7中间精密度 (9) 5.7准确度 (9) 5.8溶液稳定性 (9) 5.9耐用性 (10) 5.10****测定结果 (11)
1. 概述 此报告总结了基因毒性杂质****测定分析方法验证的试验过程与结论。 2. 参考文献 《中国药典》2015版通则9101《药物质量标准分析方法验证指导原则》 恒瑞研究院DP-041 基因遗传毒性杂质研究的一般要求 3. 验证的结果与结论 表1 基因毒性杂质测定方法学验证总结 4. 验证所需要的仪器、试剂及样品信息 表2 验证使用的主要仪器
5.方法学验证内容 5.1 专属性 1）空白溶剂干扰： 在**方法色谱条件下，对空白溶剂（****）进样分析，结果表明空白在****出峰位置没有干扰峰，相关图谱见图****。 2）分离试验： 在**方法色谱条件下，对各工艺中间体**、**…与已知杂质**、**、**…进行进样分析，结果表明各杂质均可以与****完全分离，混合进样色谱图见图**。 或： 在**方法色谱条件下，对各残留溶剂进行进样分析，结果表明各残留溶剂对****测定均无干扰，混合进样色谱图见图**。 3）样品中其他杂质干扰： 在**方法色谱条件下，对本品粗品（批号****）进样分析，结果表明在GTIs出峰位置无其他干扰峰。色谱图见图**。 4）强制降解： 将样品按照下表进行强制降解试验，试验结果见表5
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析 姓名：王芳 药物分析中药品检验基本程序包括：鉴别、检查、含量测定、写实验报告等步骤 检查项下包括反映药品安全性有效性的试验方法和限度、均一性、纯度等制备工艺要 求等内容。药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用或者影响药物的稳定性、 疗效,甚至对 人体的健康有害的物质。杂质的来源可由生产和贮藏过程中引入：①生产过程中主要是由 于所用原料不纯或者原料反应过程中反应未完全 ，以及反应的中间产物、 反应的副产物等 造成药品原料中杂质的存在；或者是由原料生产过程中反应的溶媒、催化剂等溶剂的残留 所造成的药物的杂质。②贮藏过程引入主要是受温度、 湿度、日光、空气等外界条件的 影响或者受微生物的作用产生的杂质。 在药物的研究、 生产、贮存和临床应用等方面，必 须保持药物的纯度，降低药物的杂质，这样才能保证药物的有效性和安全性。 原料药和制剂主要是对药物中的微量杂质进行纯度检查，以判断药物纯度是否符合杂 质限量的规定要求，而生物制品的杂质检查除包括一般杂质检查，特殊杂质检查外还应对 其进行安全性检查。杂质定量、定性检查方法主要是根据药物和特殊杂质在理化性质上的 差异来进行的，可以采用容量分析法，光谱法分析法，色谱分析法等，各种检测方法所需 的方法学验证的指标包括准确度，精密度，专属性，线性，范围，检测线、定量线，耐用 性八项指标，但采用不同方法所需的指标不尽相同，杂质限量检查一般需要验证专属性， 检测线，耐用性。而杂质定量分析方法除检测限外其它指标一般都需验证 ⑷。 不同实验应该根据不同实验目的对对各项指标进行验证，下面就杂质种类及近年来检 测杂质最常用的检测方法进行分析： 1、 特殊杂质 特殊杂质是指在药物制备和贮存过程中 ， 或 合成过程中产生的副产物等，多指有机杂质, 性的对 映体。 HPLC 法测定萘普生缓释片有关物质的含量： 该缓释片主药是萘普生，特殊杂质为(6 —甲氧基—2—萘乙酮)，方法采用高效液相色谱法(HPLC)法；色谱柱：以十八烷基硅烷键 合硅胶为学号: 由于药物性质不稳定而产生的降解产物 也包括残留溶剂和手性化合物中无特殊毒
目录 1?引言 2. 参考文件 (2) 3. 仪器与器皿 (2) 4. 验证步骤 (3) 5. 结论 (10) 6. QA 评价 (11) 1引言
1.1概述 卡培他滨换盐酸厄洛替尼的公用设备中转罐S3101、对接反应罐S3102、对接浓缩罐S3103 中转罐S3104萃取脱水罐S3105、过滤器S3109、过滤器S3110成品精制罐S3107、离心机S3111双锥真空干燥机S3112摇摆式颗粒机S3113过滤器S3120过滤器S3180共线残留为卡培他滨，公用设备清洁确认是为了检测设备清洁后，设备直接接触药物表面的卡培他滨残 留量是否符合要求，以确保设备中残留的卡培他滨不会对盐酸厄洛替尼的产品质量产生影响。 设备清洁后，按照不同设备分别用擦拭法、淋洗法、TOC进行取样。现采用模拟取样法 试验确定综合回收率，以HPLC检测，建立卡培他滨的清洁验证样品检测方法。因《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R ）中已完成了专属性、定量限、线性的项目，但卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度（11.58卩g/25cm2）低于《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R ）中的可接受限度（75.75卩g/25cm 2），淋洗法可接受理论最大限度（0.44卩g/ml ）低于《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》 （QC-V-A030-00R ）中的可接受限度（2.8卩g/ml），现对卡培他滨换盐酸厄洛替尼公用设备清洁方法验证中卡培他滨残留检测方法的系统适用性、溶液稳定性和综合回收率做验证，考察 用于公用设备上卡培他滨残留检测的分析方法的可行性。 卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度为11.58卩g/25cm 2（10ml全部溶解出残留后浓度为1.158卩g/ml），淋洗法可接受理论最大限度（0.44卩g/ml），现选此限度进行模拟取样检测试验，确定擦拭法和淋洗法的回收率作为实际检测中样品浓度计算的参数。 1.2目的 用以证明此方法能准确的检测出卡培他滨共线设备中的残留量，为盐酸厄洛替尼及其他产 品使用前清洁确认提供有效、稳定的数据。 范围 适用于卡培他滨换盐酸厄洛替尼公用设备清洁方法中卡培他滨残留量的检测。 2.参考文件
审评四部黄晓龙 摘要：本文介绍了在对含量测定所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。 关键词：含量测定分析方法验证可接收标准 在进行质量研究的过程中，一项重要的工作就是要对质量标准中所涉及到的分析方法进行方法学验证，以保证所用的分析方法确实能够用于在研药品的质量控制。为规范对各种分析方法的验证要求，我国已于2005年颁布了分析方法验证的指导原则。该指导原则对需要验证的分析方法及验证的具体指标做了比较详细的阐述。但是文中未涉及各具体指标在验证时的可接受标准，国际上已颁布的指导原则中也未发现相关的要求。另一方面，大多数药品研发单位在进行质量研究时，已逐步认识到分析方法验证的必要性与重要性，大都也在按照指导原则的要求进行分析方法验证，但验证完后却因没有一个明确的可接受标准，而难以判断该分析方法是否符合要求。本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对含量测定方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。 1．准确度 该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。 可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。 2．线性 线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为： 在80％至120％的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。 可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.998，Y轴截距应在100％响应值的2％以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。 3．精密度 1）重复性 配制6份相同浓度的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于2.0%。 2）中间精密度 配制6份相同浓度的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于2.0%。 4．专属性 可接受的标准为：空白对照应无干扰，主成分与各有关物质应能完全分离，分离度不得小于2.0。以二极管阵列检测器进行纯度分析时，主峰的纯度因子应大于980。 5．检测限 主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。 6．定量限 主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。另外，配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液主峰的保留时间的相对标准差应不大于2.0%。 7．耐用性 分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、流速相对值变化±20％时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离；各条件下的含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%。 8、系统适应性 配制6份相同浓度的供试品溶液进行分析，主峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%，主峰保留时间的
纯化水系统的验证方案文件编码：SOP-YZ-017-00
验证方案审批表
目录1.引言 1.1概述 1.2主要技术参数 2验证目的 3.验证小组成员组成及其职责 4.验证计划 5.验证内容 5.1运行确认 5.2性能确认 6.再验证 7.验证结果评定与结论 8.附录
1.引言 1.1概述 该纯化水系统产水量2000L/h，原水：饮用水。制取工艺：饮用水→软水器→原水箱→机械过滤器→活性炭过滤器→加阻垢剂→精密过滤器→一级高压泵→一级RO装置→中间水箱（淡水箱）→加碱→二级高压泵→二级RO装置→超滤装置→纯化水箱→紫外线杀菌器→各用水点。纯化水箱及循环泵材质均为304不锈钢。 为了保证水系统的日常监测，在单台设备的进、出口均设有取样阀。为了保证过滤器效率及使用寿命，在软化器及RO处增设再生系统和PH 值调节系统。为了保证测试准确，系统中主要仪器仪表元件均为进口和国产名牌元件。管路配送系统采用304不锈钢。整个管路安装采取循环方式布置。 纯化水的用途：主要作为一车间、二车间生产的工艺用水、设备的清洗用水及质量部质量检验用水。 1.2主要技术参数 —本系统纯化水产量: 2000L/h —一级纯化水电导率：≤3.0μs/ cm —二级纯化水电导率:：≤2.0μs/ cm 2验证目的 2.1确认该系统设备的各种仪器仪表经过校正且合格。 2.2确认该系统的各种控制功能符合设计要求。 2.3确认该系统设备在稳定的操作范围内能稳定的运行且能达到设计标准。
2.4确认系统生产的水质能达到设定的质量标准。 2.5检查该系统设备的文件资料齐全且符合《医疗器械生产质量管理规范》（GMP）要求。 2.6为设备检修改造和再验证提供数据资料。 3.验证小组成员组成及其职责 4.验证计划 5.验证内容 5.1预确认 5.1.1目的：确认所选定的设备是否符合工艺及GMP要求。 5.1.2预确认的验证方法：预确认的要求与验证方法见表一。 表一：预确认的要求与验证方法
促甲状腺素（TSH）检测系统/方法的分析性能验证评价 验证的内容：正确度、精密度、线性范围的确认、临床可报告范围的验证、干扰物质及参考区间的确认 验证人员：王爱林马力张卫李琳 一、检测系统信息 项目：TSH 仪器名称全自动电化学发光免疫分析仪 仪器型号Cobas e601 试剂及厂商：德国罗氏诊断有限公司 检测方法：双抗体夹心法 二、厂商提供的相关参数 三、验证过程 1、正确度： 目的：评价仪器测量结果与真值的一致程度。通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性 评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准 最近一次参加卫生部室间质评 正确度验证试验数据记录表
2精密度(Precision) 批内精密度 目的：考察仪器检测方法的随机误差 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度 方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）20份，测量前先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，计算SD，CV，得到批内精密度。 标本来源：高低值标本均为混合血清 结果：本室TSH批内精密度低值CV为：1.3% 高值CV为：0.88% 结果判断方式：依据卫生部临床检验中心室间质量评价标准的总误差（CV总差）为评判标准重复性精密度验证试验数据记录表
日间精密度： 目的：考察目前实验室检测方法批间精密度 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。 方法：新鲜混合血清（高值、低值）分装20份冷冻，每天取两份随标本连续测定10天，测定前定标做质控，计算CV，SD，得到日间精密度。 结果：本室TSH日间精密度平均低值CV：8.3% 平均高值CV：3.2%
方法验证学习方案1理论学习 1．1重点梳理 1.2标准学习 1.2.1、方法类作业指导书12个 1.2.2、仪器类作业指导书16个 1.2.3、《分析方法证实与确认及可接受标准作业指导书》 2、相互学习 2.1 对标学习，对照标准案例学习； 2.2 师带徒学习，由经验丰富的师傅指导学习； 2.3 共创学习，对解决不了的难题，展开研讨，在解决难题的时候提升技能。3实践学习 3.1、基本流程
说明：①方案设计：根据不同的分析方法提前规划方案； ②溶液配制：计算、称量、溶解、转移、洗涤、定容、摇匀（七步法）； ③仪器操作：参照大型精密仪器作业指导书； ④数据处理：参考《分析方法证实与确认及可接受标准作业指导书》； ⑤材料编写：参考《18种邻苯二甲酸酯分析方法证实或确认报告》模板。 3.2以GC/MS 分析SHJ 为例，明确分析方法过程 3.2.1特异性 ① 溶液配制： 准确量取混标母液至容量瓶中，用60%乙醇稀释定容得中间使用液，摇匀备用；同时向空白样中加入一定量母液，得测试样。 ② 仪器操作：取上述液体，上机（GC/MS ）进样，编辑序列等系列操作； ③ 质谱分析：比较测试样离子比例与标准离子比例，比较测试样保留时间与标准样保留时间； ④ 结果确定：离子比例和保留时间差异在要求范围内，特异性满足要求。 3.2.2 灵敏性 ① 溶液配制：向空白样品中加入标样，配制线性最低浓度； ② 仪器操作：取上述试样，上机（GC/MS ）进样，编辑序列实现该样重复测试10次； ③ 结果分析：计算10个结果得标准偏差，用3δ/S 和10δ/S 分别表示方
法检出限和方法定量限。 3.2.3 精密度 ① 浓度确定：取一样品，重复检测9次，得到其浓度； ② 溶液配制：根据上述待测样浓度，计算并添加高、中、低浓度，算出其理论值。 ③ 仪器操作：上机分析上述加标样，每个样品平行做三次； ④ 结果分析：计算检测结果得均值即绝对值，进而计算得到相对偏差。根据数据，评判是否满足分析要求。 3.2.4 准确度 ① 浓度确定：取一样品，重复检测9次，计算均值，得到其浓度； ② 溶液配制：根据上述待测样浓度，计算并添加高、中、低浓度，算出其理论值。 ③ 仪器操作：上机分析上述加标样，每个样品平行做三次； ④结果分析：根据(加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%计算得到加标回收率，并根据技术要求，判定是否符合要求。 3.3 智慧库（包括分析验证和日常分析知识点汇总、经验萃取、解决方案等） 3.3.1 仪器篇（详见word ） 3.3.2 方法篇（详见word ） 3.3.3 试剂篇（详见word ）
一、准确度 准确度系指采用该方法测定得结果与真实值或参考值接近得程度 ,一般用回收率(％)表示、准确度应在规定得范围内测定。 1、化学药含量测定方法得准确度 原料药采用对照品进行测定,或用本法所得结果与已知准确度得另一个方法测定得结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中,加入已知量被测物对照品进行测定、如不能得到制剂辅料得全部组分,可向待测制剂中加人已知量得被测物对照品进行测定,或用所建立方法得测定结果与已知准确度得另一种方法测定结果进行比较、准确度也可由所测定得精密度、线性与专属性推算出来。 2、化学药杂质定量测定得准确度 可向原料药或制剂处方量空白辅料中加人已知量杂质进行测定、如不能得到杂质或降解产物对照品,可用所建立方法测定得结果与另一成熟得方法进行比较,如药典标准方法或经过验证得方法。在不能测得杂质或降解产物得校正因子或不能测得对主成分得相对校正因子得情况下,可用不加校正因子得主成分自身对照法计算杂质含量。应明确表明单个杂质与杂质总量相当于主成分得重量比(％) 或面积比(% )。 3。中药化学成分测定方法得准确度 可用对照品进行加样回收率测定,即向已知被测成分含量得供试品中再精密加人一定量得被测成分对照品,依法测定。用实测值与供试品中含有量之差,除以加入对照品量计算回收率、在加样回收试验中须注意对照品得加人量与供试品中被测成分含有量之与必须在标准曲线线性范围之内;加入对照品得量要适当,过小则引起较大得相对误差 ,过大则干扰成分相对减少,真实性差。?回收率:％= (C- A ) /S X １0０％?式中:Ａ为供试品所含被测成分量;B 为加入对照品量 ; Ｃ为实测值。 4、校正因子得准确度 对色谱方法而言,绝对(或定量 )校正因子就是指单位面积得色谱峰代表得待测物质得量。待测定物质与所选定得参照物质得绝对校正因子之比,即为相对校正因子、相对校正因子计算法常应用于化学药有关物质得测定、中药材及其复方制剂中多指标成分得测定。校正因子得表示方法很多,本指导原则中得校正因
目录 1.引言 (2) 2.参考文件 (2) 3.仪器与器皿 (2) 4.验证步骤 (3) 5.结论 (10) 6.QA评价 (11) 1.引言
1.1概述 卡培他滨换盐酸厄洛替尼的公用设备中转罐S3101、对接反应罐S3102、对接浓缩罐S3103、中转罐S3104、萃取脱水罐S3105、过滤器S3109、过滤器S3110、成品精制罐S3107、离心机S3111、双锥真空干燥机S3112、摇摆式颗粒机S3113、过滤器S3120、过滤器S3180共线残留为卡培他滨，公用设备清洁确认是为了检测设备清洁后，设备直接接触药物表面的卡培他滨残留量是否符合要求，以确保设备中残留的卡培他滨不会对盐酸厄洛替尼的产品质量产生影响。 设备清洁后，按照不同设备分别用擦拭法、淋洗法、TOC进行取样。现采用模拟取样法试验确定综合回收率，以HPLC检测，建立卡培他滨的清洁验证样品检测方法。因《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R）中已完成了专属性、定量限、线性的项目，但卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度（11.58μg/25cm2）低于《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R）中的可接受限度（75.75μg/25cm2），淋洗法可接受理论最大限度（0.44μg/ml）低于《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R）中的可接受限度（2.8μg/ml），现对卡培他滨换盐酸厄洛替尼公用设备清洁方法验证中卡培他滨残留检测方法的系统适用性、溶液稳定性和综合回收率做验证，考察用于公用设备上卡培他滨残留检测的分析方法的可行性。 卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度为11.58μg/25cm2(10ml全部溶解出残留后浓度为1.158μg/ml)，淋洗法可接受理论最大限度（0.44μg/ml），现选此限度进行模拟取样检测试验，确定擦拭法和淋洗法的回收率作为实际检测中样品浓度计算的参数。 1.2 目的 用以证明此方法能准确的检测出卡培他滨共线设备中的残留量，为盐酸厄洛替尼及其他产品使用前清洁确认提供有效、稳定的数据。 1.3 范围 适用于卡培他滨换盐酸厄洛替尼公用设备清洁方法中卡培他滨残留量的检测。 2.参考文件 3. 仪器与器皿
NO. 编号：Analytical Method Validation Standard Operation Procedure 分析方法验证标准操作规程 Table of Contents
目录 1 Purpose 目的 (2) 2 Scope 范围 (3) 3 EHS 环境健康安全 (3) 4 Definition 定义 (3) 5 Responsibility 职责 (5) 6 Flow Chart 流程图 (5) 7 Procedure 程序/要求 (6) 7.1 Requirement 要求 (6) 7.2 Procedure 步骤 (9) 8 References 参考 (18) 9 Annexures 附件索引 (18) 10 Revision History 版本历史 (18) 1.Purpose 目的 描述分析方法的验证步骤，确认分析方法达到使用要求。为以下试验的验证提供指导和参考。 ?鉴别试验； ?杂质的定量测试或限度检查； ?原料药和制剂中有效成分含量测定； ?制剂中其它成分（如防腐剂等）的测定；
?制剂溶出度、释放度等检查中，其溶出量等； ?微生物限度。 2.Scope 范围 本程序适用的化学方法和微生物方法的验证，这些检测方法用于以下目的： 2.1 进行稳定性研究从而建立产品的有效期； 2.2 商业用途及临床用途的产品及其生产过程、清洁过程的放行检测。 另外，根据需要，本程序也可适用于在使用的上市产品、赋形剂、和原料产品的新方法的开发和验证。3.EHS 环境健康安全 不适用。 4.Definition 定义 4.1空白样品 不含被测物的特定样品。 4.2赋形剂 在剂型配方中除原料药以外的其他成分。 4.3安慰剂 和药品组成基本相同但不含活性成分或用惰性成分替代活性成分的制剂，或由药品赋形剂组成的混合物，其用量等同于药品制剂中的用量。 4.4准确度 真实值或认可的参考值与测量值之间的相近程度。 4.5检测限（DL） 一个分析规程的检测限是指样品中的被测物能被检测到的最低量，但此最低量不一定要定量到某一确定的数值。等同于检测限度（LOD）。 4.6定量限（QL） 分析规程的定量限是指样品中的被分析物能被精确和准确定量的最低量。定量限是样品组成中低水平化合物的定量分析的参数，尤其应用于杂质和/或降解产物的测定。等同于最低定量限（LOQ）。 4.7专属性（选择性） 指在一些可能存在的组分，如杂质、降解物、基质等存在时，对被分析物准确可靠测定的能力。如果一个分析方法缺乏专属性，可由其他辅助的分析方法作补充。 4.8线性 分析规程的线性是指（在给定的范围）所获得的测试结果与样品中被分析物浓度（数量）呈比例关系的能力。 4.9范围 分析规程的范围是样品中被分析物最高和最低浓度（数量）之间（包含最高和最低浓度）的间隔，已证明在此范围内分析规程具有适宜的精密度、准确度和线性。 4.10精密度 分析方法的精密度是指在规定条件下自均质样品的多次取样所获得的一系列测量之间的接近程度。精密度可从三个水平考虑：重复性、中间精密度和重现性。采用均质的，可信的样品进行精密度的研究。