NANCHANG UNIVERSITY
功能食品学综述论文
学
院:生命科学与食品工程学院专业:食品科学与工程班
级:学号:学生姓名:廖杰
指导教师:王远兴
起讫日期:
2014年 3月至 2014年 4月
大豆异黄酮的测定方法
摘要
本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍
关键词:大豆异黄酮;测定方法
Abstract:
In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introduced
Keywords:soy isoflavones method
目录
摘
要 ........................................................................................................................................... ........... I Abstract:................................................................................................................................. .............. I 目
录 ........................................................................................................................................... .......... II 1根据紫外吸收特性检测方
法 ......................................................................................................... 1 1.1紫外分光光度法(UV .. (1)
1.2三波长法(three–wave length UV
spectrophotometry (1)
2根据色谱原理检测方
法 ................................................................................................................. 2 2.1高效液相色谱法(HPLC ................................................................................................. 2 2.2高效液相色谱―质谱法(HPLC–MS .............................................................................. 2 2.3气相色谱法(GC ............................................................................................................. 2 2.4气相色谱―质谱法(GC–MS .. (3)
2.5毛细管电泳法(CE .........................................................................................................
3 2.6薄层扫描色谱法
(TLCS .................................................................................................. 3 2.7四标样快速测定法 . (3)
2.8双向纸层析色谱法(Two–dimensional paper
chromatography (4)
3根据医学免疫检测方
法 ................................................................................................................. 4 3.1时间分辨荧光免疫分析法(TR–FIA .............................................................................. 4 3.2酶联免疫吸附法(ELISA . (4)
3.3放射免疫测定
法 (5)
4各检测方法系统归纳和分
析 ......................................................................................................... 5附:各国际组织采用的检测方法及标准 ........................................................................................ 6参考文献 ........................................................................................................................................... .. 7
大豆异黄酮 (Soybean isoflavones , ISO 是一种从大豆中分离提取活性成分, 具有异黄酮类化合物典型结构, 包括三种游离型异黄酮苷元和九种结合型大豆异黄酮。
根据大豆异黄酮分子结构, 可用特征显色及荧光反应对其定性定量检测。目前主要检测方法有:利用紫外吸收特征,可采用紫外分光光度法(UV 、三波长法等进行大豆异黄酮定量检测; 利用色谱原理检测大豆异黄酮方法为:高效液相色谱法(HPLC 、高效液相色谱―质谱法(HPLC – MS 、气相色谱法(GC 、气相色谱―质谱法(GC – MS 、毛细管电泳法(CE 、四标样快速测定法、薄层扫描色谱法(TLCS 、双向纸层析色谱法等。此外,医学上荧光免疫法:分辨荧光免疫分析法(TR – FIA 和酶联免疫吸附法(ELISA 等也是检测大豆异黄酮重要方法。至今我国尚未制定统–标准规范 ISO 检测方法, 现对大豆异黄酮测定多采用 HPLC 法或气相色谱―质谱(GC – MS 联用法,
且毛细管电泳法 (CE 将逐渐成为替代 HPLC 方法, 广泛应用于大豆异黄酮主要组分(大豆苷元和染料木素等测定。本文根据检测大豆异黄酮原理不同, 暂归纳为三大类进行阐释,并对各种检测大豆异黄酮方法进行系统比较分析 1根据紫外吸收特性检测方法
1.1紫外分光光度法(UV
大豆异黄酮结构中羟基和芳香环形成共轭体系具有较强紫外光吸收特性, 大豆异黄酮各组分最大吸收波长相差不大, 峰数目较少。如染料木素在紫外区有很强吸收带, 最大吸收波长为 260nm ; 大豆苷元最大吸收波长为 256nm , 在 310 nm 处有–个很小肩峰,这使紫外吸收作为评价指标成为可能。王哲等〔 1〕用紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量, 以大豆苷元作标准品绘制标准曲线, 建立回归方程,相关系数 R2=0.9941、方法回收率 100.4%、变异系数 0.25%,证明此法可靠性好、回收率高、重现性高。
1.2三波长法(three – wave length UV spectrophotometry
三波长法于 1980年–经提出, 便很快在岛津 UV – 250分光光度计上被采用, 形成–种新方法。该法原理为:根据大豆异黄酮在 240nm 、 260nm 、 280nm 三个波长处吸光值,分别计算△ A ,计算方法为:△ A=A260-(A240+A280 /2。根据三角形相似原理推得△ A 与待测物浓度成正比, 进而求得待测物质浓度。鞠兴荣等〔 2〕采用三波长紫外分光光度法测定大豆异黄酮含量,有效消除随浓度不同发生本底漂移、油脂等干扰物质、及吸收峰不对称给定量分析造成不良影响。此法简便、灵敏,最低检出浓度为1μg/mL,加样回收率>99%;证明该
法具有良好准确性和精密度,适于大批量样品测定和产品生产质量控制及监测。 2根据色谱原理检测方法
2.1高效液相色谱法(HPLC
高效液相色谱法是在经典色谱法基础上, 于上世纪 60年代后期引用气相色谱理论所建立检测方法, 可广泛应用于大豆异黄酮检测。在技术上, 色谱柱是以特殊方法用小粒径且均匀填料填充而成, 小颗粒具有高柱效, 从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万 ,但会对仪器产生高阻力,为此,流动相改为高压输送(最高输送压力可达 4.9×107Pa ;同时,柱后联有高灵敏度检测器, 可对流出物进行连续检测。与 HPLC 配备的检测大豆异黄酮仪器主要是紫外分光光度仪(UV 和质谱分析仪(MS 。
建立高效液相色谱法 (HPLC 测定保健食品中大豆异黄酮含量方法。运用二极管阵列检测器(PDA 建立 4种大豆异黄酮组分:染料木素、大豆苷元、黄豆黄素和黄豆苷光谱库, 采用 PDA 检测, C18反相柱, 以甲醇∶水∶醋酸 (HAC =55∶ 45∶1(V/V/V为流动相,测定 4种大豆异黄酮组分响应值之比。该法变异系数小于 5%,回收率在 92.5%~99.3%之间,检测速度快,精密度及准确度在允许范围内,可作为测定保健食品中大豆异黄酮方法。
超声波辅助提取(UAE 可提高有机化合物提取有效率,徐颖〔 3〕采用高效液相色谱法结合具有提取时间短和工艺简化等优点超声提取法测定异黄酮含量。吴周和等〔 4〕建立反相高效液相色谱法测定豆制品中大豆苷元和染料木素方法,采用
Hypersil BDS C18(250mm ×4.6mm ID , 5μm 色谱柱,以甲醇、 0.5%乙酸水溶液为流动相, 流速为 1ml/min, 柱温为 35℃, 检测波长为 260nm ; 样品制备经真空干燥、正己烷脱脂、 80%甲醇加热提取、离心、过滤等过程, 大豆苷元和染料木素加样回收率分别为 99.1%和 98.8%, RSD 分别为 1.3%和 0.5%。
2.2高效液相色谱―质谱法(HPLC – MS
高效液相色谱―质谱法是 HPLC 与 MS 相结合检测方法, –般–级 MS 是对从HPLC 中出来所有物质进行质谱分析,也就是包括 HPLC 谱图中所有峰;二级 MS 是将通过–级 MS 得到带电离子进–步击碎,这样可得到更多分子结构信息,可对物质进行进–步结构定性。该法检测大豆异黄酮最大优点是能迅速、准确确定液相色谱图中各色谱峰归属,还可解决因标样缺乏而造成定性分析难题。 HPLC – MS 主要适于临床上大豆异黄酮代谢产物分析〔 5~6〕。
2.3气相色谱法(GC
气相色谱法是–种物理分离方法,利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次分配, 使原只有微小性质差异产生很大效果, 从而使不同组分得以分离。孙艳梅等〔 7〕采用气相色谱法,选取 ATSE – 30毛细管柱,在柱温为恒温 260℃时, 测黄豆苷元保留时间为 21min ,确定出黄豆苷元标准工作曲线方程为 Y=71519x -85913,相关系数
R2=0.99370。精密度研究发现,连续进样 6次,标准方差 (SD 小于 7%。
2.4气相色谱―质谱法(GC – MS
气相色谱―质谱法是气相色谱法延伸, 定性能力更强, 是用气相色谱法分离并定性与用质谱法定性相联用分析方法。该法广泛应用于研究血浆、尿液及粪便中大豆异黄酮体内变化〔 8〕 ,及蔬菜和坚果中大豆黄素含量测定〔 9〕。
2.5毛细管电泳法(CE
毛细管电泳法是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力, 依据样品中各组分之间淌度和分配行为上差异而实现分离的电泳分离分析方法。该法作为 HPLC 替代方法, 已用于多种化合物测定, 逐渐成为测定植物雌激素 (尤其是大豆苷元和染料木素常规方法之– ,该法也是分离检测大豆异黄酮最为先进–种方法。 Vanttinen 等〔 10〕采用毛细管电泳法对处理过大豆粉和豆腐中大豆黄素等异黄酮成分进行测定。 Mcleod 等〔 11〕采用毛细管电泳法对食物中大豆黄素和金雀异黄素的电离常数进行测定, 系统采用石英玻璃毛细管柱, 单波长紫外检测器, 检测波长为 210nm , 两样品测定间用 1mol/LNaOH 洗脱 5min , 去离子水洗脱 3min ,测试用电解质洗脱 5min 。
2.6薄层扫描色谱法(TLCS
薄层扫描是薄层色谱定量方法, 可检测大豆异黄酮单体组分, 它利用各组分对同–吸附剂吸附能力不同,使在移动相(溶剂流过固定相(吸附剂过程中, 连续产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各组分互相分离目的。此法可对大豆异黄酮单体成分进行检测, 但其薄层显色剂用量很难准确控制。赵世萍等〔 12〕报道葛根中异黄酮成分含量薄层光密度测定法。用甲苯―甲醇― 10%甲酸(7∶ 3∶0.02和乙酸乙酯―甲醇― 50%甲酸(8∶ 2∶ 0.2为展开剂,在硅胶 G 薄层上分离大豆苷元、大豆苷、葛根素和大豆苷元–4′, 7′–二葡萄糖甙, 并用 CS – 910双波长薄层扫描仪进行定量测定,变异系数为 1.5%~1.6%,可采用该法测定生药和片剂样品中含量。
2.7四标样快速测定法
四标样快速测定法需要四个不同标准品,并分别制作标准曲线,然后根据
G=(Cge +Cde +Cg +Cd ×10/W计算,其中 G 为样品中大豆异黄酮百分含量, W 为样品称样量(mg , Cge 、 Cde 、 Cg 、 Cd 分别为样品中染料木素、大豆苷元、染料木苷、黄豆黄苷四种组分出峰面积折算为标准品毫克量。该法可准确定性、定量检测大豆异黄酮粗提物纯度,且样品处理简单、操作容易,特别适于生产中物料快速检测,以便及时控制生产工艺参数。何继春等〔 13〕采用高效液相色谱仪, C18
反相柱(4.6mm ×250mm , 5μm , Waters515泵, Waters2487双波长检测器;流动相:甲醇∶水 =95∶ (5V ∶ V ,流速:1ml/min,柱温:35℃, 检测波长:260nm ,进样量:10μm ,灵敏度达 0.02AUFS 。
2.8双向纸层析色谱法(Two – dimensional paper chromatography
该法以纸为载体色谱法, 可对 ISO 进行定性测定。固定相–般为纸纤维上吸
附水分, 流动相为不与水相溶有机溶剂; 也可使纸吸留其它物质作为固定相, 如缓冲液, 甲酰胺等。将试样点在纸条–端, 然后在密闭槽中用适宜溶剂进行展开, 当组分移动–定距离后,各组分移动距离不同,最后形成互相分离斑点。在没有高效液相色谱仪条件下,双向纸层析色谱法也是–种较为理想定性分析方法,该法能很好了解异黄酮提取工艺中每–个流程中异黄酮变化。彭义交等〔 14〕采用双向纸层析色谱法对大豆粕甲醇提取液中大豆异黄酮组分进行分析, 并对吸收峰面积在 1%以上组分进行液相色谱―质谱(LC – MS 分析,其苷元与纸层析色谱结果基本吻合。
3根据医学免疫检测方法
3.1时间分辨荧光免疫分析法(TR – FIA
时间分辨荧光免疫分析法是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物 (代替荧光物质、同位素或酶 ,标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞,待反应体系(如:抗原抗体免疫反应等发生后,用时间分辨荧光仪测定最后产物中荧光强度, 据此判断反应体系中被测物质浓度。该法主要用于医学上检测生物体血液和尿液中大豆异黄酮,但该法具有抗体不易制备缺点。 Uehara 〔 15〕等通过时间分辨荧光免疫分析法对人尿样中植物雌激素 (包括黄豆苷和染料木苷进行快速分析。
3.2酶联免疫吸附法(ELISA
ELISA 是–种经典免疫测定方法,主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体表面并保持其免疫活性, 抗原或抗体与酶形成酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化活性基本原理。其主要试验步骤可概括为包被、洗涤、与特异性抗体反应、与酶抗抗体反应、显色和测定, 根据颜色反应深浅进行定性或定量分析。 Creeke 等
〔 16〕采用 ELISA 法对人血浆中大豆黄素和其代谢物 equol 进行测定, 其中大豆黄素和 equol 分析缓冲液检测限分别为 21pg/孔、 70pg/孔。大豆异黄酮作为–种具有特殊生理功能天然活性物质,其独特功效和利用潜力近年获得世人极大关注, 开发利用大豆异黄酮作为保健食品或美容用品基料和添加剂前景广阔。高效检测方法是大豆异黄酮研发基础, 目前应用检测方法具有不同特点及使用范围, 研究者可根据不同检测需要加以选择。寻求–种简便、高效、快速、成本低廉检测大豆异黄酮方法仍是科研人员今后继续研发方向。
3.3放射免疫测定法
放射免疫测定法是–种高灵敏度、快速高效的测定方法。肠 pciko 等对大豆黄酮进行放免法测定 , 该试验是在单克隆抗体与大豆黄酮–4–O–(梭甲基–乙基–牛血清白蛋白反应的基础上建立的。除 4–大豆黄酮的衍生物外 , 二氢大豆黄酮、染料木素、生原禅宁 (biochanin A 和雌马酚 (e-quol与单克隆抗体的交叉反应几率分别为 2.4%、 1.3%、 1.5%和 1.6%。
4
各检测方法系统归纳和分析
附:各国际组织采用的检测方法及标准
美国分析化学家协会 AOAC 公布的大豆及大豆食品中异黄酮的测定方法分为提取、皂化和 HPLC 测定 3个过程。测试样品用甲醇 -水提取液 (V(甲醇 :V(水
=80: 20 在 65℃提取 2h 。提取物在室温下用氢氧化钠溶液皂化 , 之后进行酸化 , 过滤。滤液用甲醇 -水 (V甲醇:V(水 =50:50 进行稀释。提取物离心澄清并通过 HPLC 法进行分析测定。异黄酮葡萄糖苷和苷元在 C18反相柱上以甲醇 -水为流动相分
离 , 在紫外 260nm 处检测。通过计算 , 结果以异黄酮苷元和相应葡萄糖苷形式的苷元等价物 (均以苷元为单位的含量表示。
中国国家标准 GB/T26625-2011规定了利用高效液相色谱法测定大豆异黄酮(大豆甙、黄豆黄素、染料木甙、大豆黄素、黄豆黄素甙元、染料木素含量的原理、试剂与材料、仪器与设备、试剂制备与保存、操作步骤、结果计算与表
示、精密度的要求。适用于大豆、豆奶粉、豆豉中大豆异黄酮含量的测定。最低检测限为 2.5mg/kg。
参考文献
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大豆异黄酮提取工艺 和药理功效 一、提取工艺 每100克大豆样品中含有异黄酮128毫克，可分离约102毫克。 大豆异黄酮的提取可以采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯等溶剂进行浸提。 不同的溶剂其提取工艺也不同。现以乙醇为例，介绍其浸提工艺。 (1)原料制备将脱脂豆粕进行粉碎。如果采用大豆为原料，需要先进行脱脂，使豆粕残油率<1%，干燥后粉碎备用。 (2)提取采用乙醇为浸提液，先在豆粕粉中加入含0.1～1.0摩尔/升(mol/l)的盐酸，再在95%的乙醇溶液中进行回流提取，过滤收集滤液。 (3)回收提取溶剂将滤液进行减压蒸发，回收乙醇，得到大豆异黄酮的粗水溶液。 (4)纯化将粗水溶液中加入0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液，调节pH值至中性。这时，中性溶液中将出现沉淀，然后过滤，得到的沉淀物即为含大豆异黄酮的产物。 (5)精制将上述产物溶解于饱和的正丁醇溶液中，加于氯化铝吸附柱上进行吸附，然后用饱和的正丁醇溶液淋洗，洗出大豆异黄酮的不同组分 各种大豆制品中异黄酮含量和种类分布不同，不仅与大豆品种和栽培环境有关，还与大豆制品的加工工艺密切相关。水处理、热处理、凝固、发酵等加工环节和方法显著地影响了大豆制品中异黄酮的含量和种类分布，特别是大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白的不同提取方法其中异黄酮含量影响极大。 1）水处理：浸泡使10%的异黄酮流失于浸泡水中，且水处理后的大豆中游离型异黄酮增加，这是因为豆类自身存在的β-glucosidases酶水解葡萄糖苷的结果。
2）加热：水煮加热增加了异黄酮向外渗透速率，使大量异黄酮因渗入加热水中而丢失，同时热处理还显著改变了豆制品中异黄酮种类的分布，因为热处理时β-glucosidases酶活性增强，使异黄酮葡萄糖苷水解为游离型异黄酮，因而制品中游离型异黄酮较原料大豆或大豆粉中的有所增加。 3）凝固：在豆腐生产中，凝固使一部分异黄酮丢失于乳清中，丢失率为44%。 4）发酵：发酵不影响异黄酮的含量，但改变了异黄酮种类的分布，发酵后的产品以游离型异黄酮为主要存在形式，这是因为在发酵过程中，真菌产生的大量β-glucosidases水解酶使异黄酮葡萄糖苷大量水解，从而导致游离型的异黄酮显著增加。 5）加工提取方法：提取方法对大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白中异黄酮含量的影响非常大。如用湿热水洗法去除可溶性碳水化合物所得浓缩蛋白的异黄酮含量与原料豆中的相近，而用60\%-65\%的酒精水溶液洗涤浓缩法提取的大豆浓缩蛋白的异黄酮仅为原料中的1/10。二、药理作用 延缓女性衰老、改善更年期症状、骨质疏松、血脂升高、乳腺癌、前列腺癌、心脏病、疏松症、心血管疾病等。 大豆提取物作为营养补充食品使用，此外，大豆异黄酮显著的降低了乳腺癌的发病率，产生这种结果被认为是与它的产物植物雌激素有关。研究还指出在平时多食用富含大豆异黄酮的食物有助于抑制前列腺癌细胞的生长，那些多吃低脂肪，富含大豆蛋白食品的人患(前列腺癌)的概率会更低。 抗氧化作用 金雀异黄素（genistein）含5.7.4三个酚羟基，大豆甙元含7.4二个酚羟基。酚羟基作为供氧体能与自由基反应使之生成相应的离子或分子，熄灭自由基，终止了自由基的连锁反应。大豆异黄酮对整体动物也有比较明确的抗氧化作用，大豆异黄酮提取物对阿霉素引起的小鼠过氧化水平提高和抗氧化酶活性的降低也有明显的抑制作用。 雌激素样作用
大豆异黄酮的性质与研究进展 王梦瑶 2011级生物技术专业生命科学学院四川大学成都四川 610065 摘要：异黄酮是一类具有重要生物活性的化合物，在大豆和大豆制品中含量丰富。本文综述了大豆异黄酮的理化性质、生理功能、提取方法、生物活性、主要的药物作用以及大豆异黄酮在保健食品中的应用，分析了目前大豆异黄酮的市场状况，以及大豆异黄酮的研究前景。关键词：大豆异黄酮；化学结构；生理功能；提取方法 1 概述： 大豆异黄酮的英文名是Soybean Extract Powder 或Soybean Isoflavones(SIF)[1]。它是从天然植物大豆中提取的一种生物活性物质，主要分布于大豆种皮、胚轴、子叶中。大豆异黄酮属类黄酮化合物，是双酚类的结构。其分子结构与人体内分泌的雌激素雌二醇很相似，对人体可起到与雌二醇相似的作用，同时又没有药物雌二醇的副作用，故又被叫做天然植物雌激素。天然植物中存在的异黄酮多以含葡萄糖苷的形式存在，在体内经葡萄糖水解酶的作用可水解为不含葡萄糖苷的甙元，通过小肠和大肠，特别是在小肠中被吸收利用，再经过肝脏中酶的作用形成硫酸盐或葡萄糖醛酸结合物，最后经胆汁及尿液排泄[2]。 2 大豆异黄酮的理化性质 2.1 化学组成和结构 大豆中天然存在的大豆异黄酮约有12种,可以分为3类,即染料木素(金雀异黄素，genistein),大豆黄素(daidzein)和黄豆黄素(glycitein),以游离型、葡萄糖苷型、乙酰基葡萄糖苷型、丙二酰基葡萄糖苷型等4 种形式存在(其结构式见图1 和图2)。 2.2 大豆异黄酮的物理性质 大豆异黄酮在通常情况下为固体,熔点大都在100℃以上,常温下其性质稳定,呈黄白色，粉末状，无毒，有轻微苦涩味，在醇类、酯类和酮类溶剂中有一定溶解度,不溶于冷水,易溶于热水,难溶于石油醚、正己烷等。 2.3 大豆异黄酮的化学性质
NANCHANG UNIVERSITY 功能食品学综述论文 学 院:生命科学与食品工程学院专业:食品科学与工程班 级:学号:学生姓名:廖杰 指导教师:王远兴
起讫日期: 2014年 3月至 2014年 4月 大豆异黄酮的测定方法 摘要 本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍 关键词:大豆异黄酮;测定方法 Abstract: In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introduced Keywords:soy isoflavones method 目录 摘 要 ........................................................................................................................................... ........... I Abstract:................................................................................................................................. .............. I 目 录 ........................................................................................................................................... .......... II 1根据紫外吸收特性检测方 法 ......................................................................................................... 1 1.1紫外分光光度法(UV .. (1)
大豆异黄酮的生理功能 XXXX大学 摘要：本文主要介绍大豆异黄酮的结构、理化性质以及它的各种功能特性，最后再简要介绍了一下大豆异黄酮在国内外的应用前景。 关键词：大豆异黄酮生理功能应用前景 Abstract:The purpose of this paper is that introduces structure,physical and chemical properties,various of physiological functions about soy isoflavones;then,we can get some brief acknowledge which is about the applicational prospects of soy isoflavons at home and abroad markets. Key words:Soy isoflavones physiological functions applicational prospects 我国大豆产量仅次于美国、巴西，大豆是营养价值极高的农产品之一，它不仅含有丰富的油脂，还含有很多活性成分，如大豆异黄酮、大豆蛋白、大豆磷脂、、大豆皂甙、大豆甾醇、大豆低聚糖、大豆膳食纤维等。本文主要讨论的是大豆异黄酮的生理活性。目前有很多实验证明大豆异黄酮有抗癌、抗氧化、防止心血管疾病等各种功能。 1大豆异黄酮结构、理化性质和人体代谢 1.1大豆异黄酮的结构和理化性质 大豆异黄酮(soy-bean isoflavones)主要分布于大豆种子的子叶和胚轴中，种皮含量极少。80%一90%存在于子叶中，浓度为0.1%一0.3%。大豆及其加工制品中存在的一类异黄酮类植物雌激素，其中含量占优势的是大豆黄酮和染料木素两种。胚轴中所含异黄酮种类较多且浓度较高，为1%一2%。目前发现的12种大豆异黄酮中，游离型的糖苷配基(Agloycon)占总量的2%一3%，包括染料木素(又叫金雀异黄素)(Cenistein，5，7，4’一三羟基异黄酮)、大豆苷原(Daidzein，7，4’一二羟基异黄酮)和大豆黄素(Glyeitein，7，4’一二羟基一6一甲氧基异黄酮)。这些异黄酮类化合物在天然大豆中的主要存在方式为结合了糖基的糖苷大豆异黄酮，即糖苷大豆黄酮(daidzin)和糖苷染料木素(genistin)。结合型的糖苷(Glucoside)约占总量的97%一98%，主要以丙二酞染料木苷、丙二酞大豆苷、染料木苷(genistin)和大豆苷(daidsin)形式存在。 1931年，Walz用90%的甲醇从豆奶中提取出大豆异黄酮：5，7，4’一三羟
第一、二章 1.天然产物提取工艺学的特点：多学科性、多层次多方位性、复杂性。 2天然产物提取过程的选择：细胞破碎、初步纯化、高度纯化、成品加工。 3天然产物提取利用建议：1）要注意生物资源多样性和用途多功能性，进行综合利用2）充分利用先进科学技术，生产高技术天然产物产品3处理好利用与资源保护、环境保护的矛盾，使其处于良性循环状态4）面向市场生产适销对路产品 4破坏细胞膜和壁的方法：风干法、加热干燥法、机械法、非机械法。 5原料的前处理：除杂、干燥、粉碎、发酵、脱脂、水解。 7提取法原理：提取又称浸出、固液萃取，是应用有机或无机溶剂将固体原料中的可溶性组分溶解，使其进入液相，再将不溶性固体和溶液分开的操作。渗透溶解分配扩散 萃取法原理：是利用混合物中各成分在两种无不相容的溶剂中分配系数的不同进行分离的方法。 微波提取的原理和特点：由于物质分子偶极振动同微波振动具有相似的频率，在快速振动的微波磁场中，被辐射的极性物质分子吸收电磁能，以高速振动而产生热能。 特点：投资少、设备简单、适用范围广、重现性好、选择性高、操作时间短、溶剂耗量少、不产生噪声、不产生污染。 超声波提取的特点：1提取时不需要加热，2提取提高了药物有效成分的提取率3溶剂用量少，节约溶剂4提取时一个物理过程，不影响大多数药物有效成分的生理活性5提取物有效成分含量高有利于进一步精制。提取原理：机械效应空化效应热效应 8结晶的方法：盐析法有机溶剂法等电点结晶法利用温差结晶法 9为什么多孔性固体物质具有吸附能力？ 这是因为固体表面分子所处的状态与固体内部分子或原子所处的状态不同。固体内部分子受到邻近四周分子的作用力是对称的，作用力总和为零，所以分子处于平衡状态，但在界面上的分子同时受到不相等的两相等的两相分子的作用力，因此界面分子所受力是不对称的作用力不为零，合力方向指向固体内部，所以处于表面层的固相分子始终受到一种里的作用。 10吸附的三种类型：物理吸附化学吸附交换吸附 第三章 1.固体可分为多孔和非多孔性物质 3.吸附三种类型：物理吸附（吸附剂与吸附物之间作用力是分子间引力），化学吸附（通过生成化学键来吸附），交换吸附（也叫极性吸附，通过带相反电荷离子的交换来吸附） 5.吸附分离：利用适当吸附剂在一定条件下，使提取液中有效成分被吸附然后再用适当洗脱剂将其解吸下来，达到浓缩和提纯的目的。 6.吸附等温线：在等温情况下，吸附剂的吸附量与吸附物质的压力（或浓度）的关系曲线（图及类型见书79） 8.膜的性能：通常指膜的物化稳定性（膜的抗氧化、抗水解性能，膜的耐热性和机械强度）和膜的分离透过性（反渗透膜，超过滤膜，微孔过滤）。 9.膜过滤设备要求：具有尽可能大的有效过滤面积；为膜提供可靠的支撑装置；提供引出滤过液的路径；尽可能清除或减弱浓差极化现象。 11.分子蒸馏原理：依据液体分子受热会从液面逸出，不同种类分子逸出后在气相中其运动平均自由程不同这一性质实现。其特点是：操作温度低、无需沸腾，蒸馏压强低，受热时间短，分离程度高。 12.超临界流体萃取：利用超临界流体即温度和压力略超过或靠近超临界温度和压力，介于气体和液体之间的流体做萃取剂，从固体或液体中萃取成分以达到分离和纯化目的。最常用CO2，原因：临界温接近室温，临界压力处于中等，无毒无味不腐蚀价格便宜。 14.色谱：利用混合物中各组分的物化性质差异，基于被分离物质分子在两相中分配系数的差别进行分离。 15.层析法分类：吸附层析，分配层析，凝胶过滤层析，离子交换层析等。常用吸附剂：氧化铝，硅胶，活性炭，聚酰胺。 16.分配系数：当一种溶质分布在两互不相溶熔剂中在固定相和流动相的浓度之比。
大豆异黄酮开发及研究进展 [摘要]大豆异黄酮是大豆中的一类具有广泛营养学价值和健康保护作用的多酚化合物，引起了国内外学者的广泛关注。研究表明，大豆异黄酮作为一种植物性雌激素，具有类雌激素和抗雌激素双重作用，并且在抗肿瘤、预防绝经期妇女骨质疏松症以及预防心血管疾病等方面的作用也得到了流行病学和实验数据的有力支持。本文对近年来国内外大豆异黄酮的生理功能的相关研究报道进行了分析整理，同时对大豆异黄酮的结构、代谢以及发展前景做了介绍。大豆异黄酮是大豆生长过程中形成次生代谢产物，具有多种生物活性；近年来，大豆异黄酮已成为大豆最引人注目功能成分之一，也是食品与营养学研究热点之一。该文介绍大豆异黄酮的结构、性能、分布、提取分离、检测技术，糖苷水解方法及大豆异黄酮国内研究现状，且分析大豆异黄酮市场状况及研究前景。 [关键字]大豆异黄酮；大豆异黄酮糖苷；大豆；功能性食品 1 大豆异黄酮概述 1.1 大豆异黄酮组成及结构 大豆含有大量活性成分，被人们称为“功能性成分宝库”。大豆异黄酮是大豆生长中形成一类次生代谢产物，属于黄酮类化合物中异黄酮类成分，主要是指以3–苯并吡喃酮为母核化合物。迄今为止，从大豆中共分离出12 种大豆异黄酮异构体，分为游离型苷和结合型糖两类，其中苷元占总量2%~3%，包括染料木素（Genistein）、大豆苷元（Daidzein）和黄豆黄素（Glycitein）三种。结合型糖苷由三种苷元衍生而成，占总量97%~98%，主要以染料木苷（Genistin）、大豆苷（Daidzin）和6”–O–丙二酰基染料木苷等九种形式存在（Philippe 等，2004；Chung 等，2005）。其中主要成分有三种，染料木素、大豆苷元和黄豆黄素，它们具有共同母核结构，染料木素为母核5、7、4 位被羟基取代三羟异黄酮，大豆苷元和黄豆黄素均为7、4 被取代二羟异黄酮，其中黄豆黄素母核6位存在甲氧基。在天然状态下，这三种异黄酮母核与葡萄糖以β–糖苷键连接，以异黄酮葡萄糖苷形式存在于大豆中，分别称为染料木苷（Genistin）、大豆苷（Daidzin）和6–甲氧基黄豆苷（Glycitin）。大豆在加工、发酵或体外水解时，糖苷基脱离可释放出游离异黄酮糖苷配基〔1〕。Hosny等曾从大豆醇法提取乳清中分离鉴定出三种新的异黄酮，使大豆中异黄酮数量增加到15种。但由于它们不是从大豆中直接分离而出，是否是大豆特征成分还有待进一步证实〔2〕。 1.2 大豆异黄酮来源及分布 大豆异黄酮是生物黄酮一种。自然界中异黄酮资源十分有限，主要来源于豆科植物荚豆类、葛根等少数植物〔3〕，其中以大豆含量较高，为0.1%~0.5%；并且大豆又是唯一含有异黄酮，且含量在营养学上有意义的食物资源，其变化范围约为0.5~0.7 mg/g 干大豆，不同大豆品种其大豆异黄酮含量不同。大豆中异黄酮主要分布于大豆种子子叶和胚轴，子叶约含0.1%~0.3%，胚轴所含异黄酮种类较多，且浓度较高，所占比例却很少（10%~20%）；种皮中异黄酮含量极少〔4-5〕。 1.3 大豆异黄酮理化性质 纯大豆异黄酮呈无色、具苦涩味晶体状物质，染料木素为无色片状结晶，大豆苷元为无色针状结晶，工业上大豆异黄酮产品为白色或淡黄色粉末，品尝时具
一、化学结构与理化性质 大豆异黄酮（soybean isoflavone）是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物，属天然黄酮类物质，具有异黄酮类化合物的典型结构，其基本骨架是3-苯基苯并二氢吡喃。大豆异黄酮是大豆中主要的植物雌激素（photoestrogen）之一。 目前已经发现的大豆异黄酮共12种，分为3种游离型的苷元（aglycon）和9 种结合型的糖苷（glucoside）。三种苷元即三羟异黄酮（genistein, CAS号为 446-72-0，亦称染料木素或金雀异黄素）、二羟异黄酮（daidzein,CAS号为486-66-8，亦称黄豆苷元）和二羟甲氧基异黄酮（glycitein，CAS号为40957-83-3，亦称大豆黄素）。这三种苷元分别与葡萄糖、乙酰基葡萄糖、丙二酰基葡萄糖结合形成9种异黄酮糖苷。一般而言，大豆异黄酮的苷元的形式比糖苷形式的活性要高，尤其是燃料木素的活性更高。通常大豆中的苷元占总量的2%~3%，糖苷占总量的97%~98%。 大豆异黄酮通常为淡黄色粉末，具有苦涩味和收敛性，大豆异黄酮苷元比糖苷具有更强大的不愉快风味。大豆异黄酮在常温下性质稳定，耐热（120℃加热30min不变，180℃加热30min残留80%），耐酸（pH2.0情况下仍稳定）。可溶于醇类、酯类和酮类，不溶于水，难溶于石油醚、正己烷等。异黄酮分子中有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液及吡啶中。大豆异黄酮与钠汞齐在酸性条件下反应生成红色化合物，与醋酸镁甲醇溶液反应显褐色。 二、主要来源与生产制备方法 主要来源：自然界中异黄酮资源十分有限，大豆是唯一含较多异黄酮且其含量又营养学意义的食物资源，干大豆中含量为0.5~0.7mg/g，主要分布于大豆种子的子叶和胚轴中。不同品种大豆中的异黄酮含量及存在形式有所差异。 生产制备方法：大豆异黄酮的制备方法包括天热提取法（溶剂萃取法、碱提取酸沉淀法、活性炭吸附法、离子交换树脂法和柱层析法）、化学合成法和微生物发酵法等。 三、生理功能及作用 （抗）雌激素样活性：大豆异黄酮的双羟基酚结构与动物和人体内雌激素的结构类似，故具有弱雌性激素活性（约为内源性雌二醇活性的 1/100,000~1/1,000），可竞争性地与雌激素受体结合。大豆异黄酮还可表现出2种相反的生物学活性，即雌激素活性和抗雌激素活性的双相作用。当体内或细胞内雌激素活性较强时，它主要显示拮抗作用；而当体内或细胞内雌激素水平低下时，它则显示类雌激素活性。故大豆异黄酮能缓解妇女更年期因此激素分泌量的急剧下降而引起的更年期综合征症状。有报告表明，绝经后妇女每天摄入大豆类食品（异黄酮总量大于260mg/d），连续12周，其血中三羟异黄酮浓度增加22倍，绝经症状积分降低50%，“潮热”症状积分降低54%，阴道干燥症状积分降低60%。
吸循环的不利影响,注意持续气腹压不宜太高及监测血气变化。②气腹形式应缓慢,使老年患者对CO 2气腹有一适应过程。③腹壁穿刺时应防止皮下气肿,术毕挤压腹部排尽腹腔内C O 2气体,可有效地预防高碳酸血症。④术毕应保持呼吸道通畅,继续监测呼吸循环功能,防止肺部感染。⑤LC 应由配合熟练、经验丰富的医师进行,尽可能缩短手术和麻醉时间。 214 术后护理 21411 一般护理:LC 通常采用全麻,术后应严密监测血 压、心率、呼吸、血氧饱和率等变化。术毕回房后按全麻术后观察护理,3小时内注意不让病人入睡,以防止“麻醉后作用”导致病人窒息等严重并发症。输液总量及速度宜控制,避免因输液量过多,速度过快而导致病人出现急性心肺功能不全。 21412 合并心血管疾病患者的护理;术后2～3d 应行心电 监护,检查血压并通过干预保持血压稳定,高血压患者恢复服降压药,如病情不允许口服,则可静滴硝酸甘油等控制血压,如为起搏心律,则应观察起搏信号后有无QRS 波伴随及漏波现象,出现心律失常及血压变化及时通报医生处理。 21413 合并呼吸系疾病患者的护理:呼吸系疾病大多有病 史长,反复发作的特点,多数病人常认为是老毛病而未加重视,术后应鼓励病人积极排痰,作有效咳嗽,协助病人翻身、拍背,保持呼吸道通畅,必要时给予祛痰药物、雾化吸入等促进排痰,严密观察呼吸频率血氧饱和度,口唇、肢端紫绀情况,视缺氧情况合理给氧,一般给予低流量吸氧,严重者应监测血气,如氧分压低于60kPa,CO 2分压高于 50kpa,结合呼吸、血氧饱和度、紫绀等,则应考虑呼吸衰竭, 及时报告医生,及时处理。 总之,尽管合并心肺功能疾患的病人行LC 难度较大,但只要做好术前处理,术中及术后监测,具备熟练的LC 技术,LC 不失为老年人胆石症病人的优秀手术方式,是一种损伤小,安全可靠,恢复快的微创手术,我们认为老年胆囊切除更适合于LC 。 参考文献 [1] 费庆铨.老年胆道疾病的外科治疗[J ].中华外科杂志, 1989127:150～152. [2] 孙石.肝胆胰外科杂志,1999,11(1):6. 收稿日期:2005-09-12 文献综述 关于大豆异黄酮的研究综述 蒋蔡滨 (贵阳中医学院2003级研究生,贵州贵阳 550002) 内容提要:本文综述了大豆异黄酮的组成结构、吸收和代谢、物理和化学性质、含量测定方法、药理作用,分析了目前大豆异黄酮的市场状况,以及我国大豆异黄酮的研究前景。 关键词:大豆;大豆异黄酮;吸收和代谢;物理和化学性质;含量测定方法;药理作用 中图分类号:R961 文献标识码:A 文章编号:1002-1108(2006)02-0049-02 1 大豆异黄酮的结构和含量分布 大豆异黄酮[1](s oybeanis oflavones,SiF )是多酚类混合物,大豆异黄酮的组成、存在形式主要包括染料木素(金雀 异黄素,genistein )、大豆黄素(daidzein )和黄豆黄素(gly 2citeln )。天然情况下它们大多以β-葡萄糖苷形式存在,近年来发现发生乙酰化、丙二酰化、琥珀酰化转变的异黄酮苷。其中起到生理功效的主要是染料木素、大豆黄素及其苷。 通常,在天然状态下,大豆中只有少量异黄酮以游离苷元形式存在,90%以上是以β-葡萄糖苷的形式存在。现已确证了3种SI F 苷元和9种SI F 葡萄糖苷,共12种SI F 。其中部分SI F 葡萄糖C6位上的羟基还可被乙酰基或丙二酰基取代生成酰化SI F 。成熟大豆中[2]总异黄酮的含 量常因其品种、产地、生长环境和储存条件而各不相同,一般为0.2%～014%。其中,以大豆胚轴(包括胚芽和胚根)含量最高,其百分比含量约为子叶(大豆瓣)的6倍。不同大豆品种中,黄皮大豆的总SI F 含量最高,黑皮大豆次之,绿皮大豆最低。大豆中不同异黄酮成分的比例以染料木黄酮为主。约占50%～60%,黄豆苷元为30%～35%而大豆黄素只占5%～15%。2 吸收和代谢 大豆经加工,微生物发酵或人体摄取后在肠道细菌葡萄糖苷酶的作用下,异黄酮的糖苷配基脱离,释放出有生物活性钓三羟异黄酮(genistein ),二羟异黄酮(daicbeh )、6-甲氧基大豆素(glyeitein )。它们在成人体内可被肠道细菌进一步转化为雌马酚(eguol ),对乙苯酚(p -ethyl penol ) ? 94?第28卷 第1期 2006年3月 贵阳中医学院学报J GC TCM No .2 Vol .28 March 2006
大豆分离蛋白的提取 ——紫苏 摘要：本文综述述了大豆分离蛋白的碱提酸沉法、双极膜法、泡沫分离法的分离原理，并讨论了其生产中影响提取率的因素。 关键词：大豆分离蛋白碱提酸沉法双极膜法泡沫分离法 大豆蛋白含量较高而且营养丰富，含有8种人体必需氨基酸，且比例比较合理。目前大豆蛋白已成为一种重要的蛋白资源，特别是大豆分离蛋白含蛋白质90%以上，是一种优良的食品原料。 目前大豆分离蛋白的生产应用较多的是以下几种： 1. 碱提酸沉法 大豆分离蛋白的传统提取方法是碱提酸沉法，主要利用大豆蛋白在大豆蛋白在高pH时溶解度最大，在等电ｐＨ条件下溶解度最小的原理，使之凝聚沉淀。一般分3个步骤：弱碱萃取蛋白质、酸沉淀、喷雾干燥。如图[1] 影响等电沉淀的因素较多： ①原料——原料豆粕应是低温或闪蒸脱脂后的低变性豆粕。这种豆粕含杂质少，蛋白含量较高，蛋白变性程度低，适于大豆分离蛋白生产[2]。 ②水分——浸提时，加水量越多，蛋白质的提取率就越高；但是加水太多，酸沉时蛋白的损失量增高；加水太少，大豆蛋白的溶出率大大下降，还会增加后续各工序的难度。试验得出,浸提时脱脂豆粕与水的比例为1∶10~12最适合提取[3]。 ③pH——蛋白质的溶解度与浸提pH有很大的关系，pH太低的时候，蛋白组分解离; pH 太高，易发生“胱赖反应”，生成有毒物质。 ④温度——温度的高低对蛋白收率、纯度及色泽有显著影响。浸提温度过高，会使蛋白变性，而且粘度增加，分离困难，耗能提高[4]。经试验认为等电酸沉温度控制在40~45℃为宜[1]。 ⑤时间——一般来说浸提时间越长，蛋白的溶出率就越高。但一定的时间后，蛋白得率随浸提时间的延长而无显著的变化。生产中要综合考虑能源消耗、生产周期、工艺成本等各种因素来确定合理的时间[4]。 ⑥另外，当浆料粒度太细反而会使蛋白得率和浸提效果下降，同时增加了过滤分离的难度。加酸速度和搅拌速度控制不好容易出现虽到等电点,但蛋白质凝集下沉缓慢,上清液混浊[1]。 ⒉双极膜电解法 双极性膜是一种新型离子交换复合膜,它通常由阳离子交换层和阴离子交换层复合而成,中 间是亲水界面层,结构如图1所示[5]： 双极膜由3层组成：阴离子交换膜和阳离子交换膜以及阴阳离子交换膜中间的亲水层。在电流作用下，水分子在双极膜上电离为H+和OH-，离子在电势的驱动下，通过膜选择透过阴离子或阳离子，导致溶液的pH值降低，达到大豆蛋白质的等电点而使蛋白质沉淀。这种方法不需要加入酸或碱调整蛋白质溶液的pH值，避免分离得到的大豆蛋白质中混入盐离子，并且可保护大豆蛋白质的功能性。[3]
大豆异黄酮提取 【摘要】首先论述了大豆异黄酮8种提取与纯化工艺的原理和应用情况。它们分别是有机溶剂萃取法、超声波法、酸解法、酶解法、高效逆流色谱法、大孔树脂吸附法、高速离心分离法和超临界萃取法。指出了各技术目前存在的主要问题和今后的主要研究方向。在此基础上利用正交试验得到了乙醇溶液萃取大豆异黄酮的最佳工艺条件:乙醇浓度80%,萃取温度70℃,萃取时间4h,料液比1∶20。 异黄酮是黄酮类化合物的一种,主要存在于大豆科植物中,是大豆生长中形成的一类次生代谢物。大豆异黄酮主要存在于大豆种子的子叶和胚轴中,种皮含量极少。目前已经发现的大豆异黄酮共有12种,分为游离型的甙元和结合型的糖甙两类。甙元为其中的生物活性成分并且含量极少,占总含量的2%～3%,分别为大豆黄素、黄豆黄素及染料木素。对应的β-葡萄糖苷形式为:大豆黄苷、黄豆黄苷、染料木苷。 另外还有较少的葡萄糖苷的乙酰基化合物和丙二酰基化合物。研究表明,大豆异黄酮具有预防癌症、心血管疾病、骨质疏松症和降低妇女更年期综合症等生理功能。该产品具有广阔的开发前景和新的应用价值。目前最常见的异黄酮分离及纯化方法有:有机溶剂萃取法、超声波辅助法、酸解法、酶解法、高速逆流色谱法、大孔树脂吸附法、高速离心法、超临界萃取法。下面就这些方法的原理以及各自的特点分别进行介绍 有机溶剂萃取法 此法是国内外提取异黄酮使用最广泛的方法,常用的有机溶剂主要有:乙醇、甲醇、乙酸乙酯以及它们的水溶液。本法主要用于提取脂溶性基团占优势的黄酮类化合物,因为异黄酮的特殊分子结构,决定了其较大的分子极性,根据相似相溶的原理,该物质可以被这些极性溶剂溶出,进入溶液相,为下一步的纯化处理提供了条件。在有机溶剂萃取法中最常用的溶剂是乙醇,即醇提法。提取过程中, 乙醇的浓度对提取结果有较大的影响。一般认为,乙醇浓度的提高有利于异黄酮的提取,但这还跟异黄酮物质的某
大豆异黄酮（Isoflavone）编码食物英文名称食物名称Total黄豆苷原染料木黄铜6-甲氧基大豆素code English name foodname Daidzein Genistein Glycitein 19-grain bread全麦面包0.020.010.01 2Alfalfa seeds,sprouted,raw苜宿芽（紫花）0000 3Alfalfa seeds,sprouted,raw,mixed with clover seeds,sprouted,raw苜宿芽（紫花+三叶草）0000 4Beans,black,mature seeds,raw黑豆000 5Beans,great northern,mature seeds,raw大豆（北方）000 6Beans,kidney,all types,mature seeds,raw芸豆0.060.020.04 7Beans,kidney,all types,mature seeds,cooked,boiled,without salt芸豆（煮，不加盐）000 8Beans,kidney,red,mature seeds,raw芸豆（红）0.010.010 9Beans,kidney,red,mature seeds,cooked,boiled,without salt芸豆（红，煮，不加盐）000 10Beans,navy,mature seeds,raw菜豆0.210.010.20 11Beans,pink,mature seeds,raw豆（粉红色）000 12Beans,pinto,mature seeds,raw豆（杂色）0.270.010.26 13Beans,red,mature seeds,raw豆（红色）0.3100.31 14Beans,small white,mature seeds,raw小白豆0.7400.74 15Beans,snap,green,raw食荚菜豆（绿）000 16Beans,snap,green,cooked,boiled,drained,without salt食荚菜豆（绿，煮，不加盐）000 17Broadbeans(fava beans),mature seeds,raw蚕豆0.030.020 18Broadbeans,fried蚕豆（炸） 1.290 1.29 19Chickpeas(garbanzo beans,bengal gram),mature seeds,raw鹰嘴豆0.100.040.06 20Clover sprouts,raw苜宿芽（三叶草）0.3500.35 21Country rye bread,Finland黑麦面包（芬兰）000 22Cowpeas,common(blackeyes,crowder,southern),mature seeds,raw豇豆0.030.010.02 23Crackers,crispbread,rye黑麦薄脆饼干0.010.010.01 24Flax seed,raw亚麻籽000 25GREEN GLANT,HARVEST BURGER,Original Flavor,All Vegetable ProteinPatties,frozen大丰收肉饼（含植物蛋白，冷冻）9.30 2.95 5.28 1.07 26Infant formula,ENFAMIL NEXT STEP,powder,soy formula,notreconstituted美赞臣婴儿配方豆粉25.007.2314.75 3.00 27Infant formula,MEAD JOHNSON,GERBER soy,with iron,powder,notreconstituted美赞臣婴儿配方豆粉（强化铁）25.098.0813.90 3.12 美赞臣婴儿配方饮品（强化铁） 6.03 1.10 2.22 28Infant formula,MEAD JOHNSON,PROSOBEE,with iron,liquid concentrate,not reconstituted 29Infant formula,MEAD JOHNSON,PROSOBEE,with iron,powder,not reconstituted美赞臣婴儿配方粉（强化铁）24.947.0514.94 2.95 30Infant formula,MEAD JOHNSON,PROSOBEE,with iron,ready-to-feed美赞臣婴儿即食配方食品 3.89 1.71 2.18 31Infant formula,ROSS,ISOMIL,with iron,powder,not reconstituted罗氏婴儿配方粉（强化铁）20.99 6.0312.23 2.73 32Infant formula,ROSS,ISOMIL,with iron,powder,reconstituted frompowder,as fed罗氏婴儿配方粉（加铁） 2.710.78 1.580.35 33Infant formula,ROSS,ISOMIL,with iron,ready-to-feed罗氏婴儿即食配方粉（强化铁） 4.17 1.91 2.26 34Infant formula,WYETHAYERST,NURSOY,with iron,liquid concentrate,not reconstituted惠氏婴儿配方饮料（强化铁） 4.02 1.02 2.820.35 35Infant formula,WYETHAYERST,NURSOY,with iron,powder,notreconstituted惠氏婴儿配方粉（强化铁）26.00 5.7013.55 2.05 36Infant formula,WYETHAYERST,NURSOY,with iron,ready-to-feed惠氏婴儿即食配方食品（强化铁） 2.630.75 1.600.28 37Instant beverage,soy,powder,not reconstituted速溶豆粉饮料109.5140.0762.1810.90 38Lentils,mature seeds,raw小扁豆0.0100 39Lima beans,large,mature seeds,raw利马豆（大）0.030.020.01 40Lima beans,large,mature seeds,cooked,boiled,without salt利马豆（大，煮，不加盐）000 41Lima beans,thin seeded(baby),mature seeds,raw利马豆（小，嫩）000 42Miso豆面酱42.5516.1324.56 2.87 43Miso soup mix,dry豆面酱粉60.3924.9335.46 44Mung beans,mature seeds,raw绿豆0.190.010.18 45Natto(soybeans,boiled and fermented)大豆（煮，发酵）58.9321.8529.048.17 46Oil,canola and soybean豆油0000 47Oil,soybean,salad or cooking色拉油0000 48Peanut,all types,raw花生0.260.030.24 49Peas,split,mature seeds,raw豌豆 2.42 2.420 50Pigeon pess(red gram),mature seeds,raw鹰嘴豆（红）0.560.020.54 51Snacks,granola bars,hard,plain格兰诺拉麦片0.130.050.08 52Soybean butter,full fat,Worthington Foods,Inc大豆黄油（全脂）0.570.220.300.05 53Soy cheese,unspecified大豆干酪31.3211.2420.08 54Soy cheese,cheddar大豆干酪（切达）7.15 1.80 2.25 3.10 55Soy cheese,mozzarella大豆干酪（意大利干酪）7.70 1.10 3.60 3.00 56Soy cheese,parmesan大豆干酪（意大利干酪，脱脂） 6.40 1.500.80 4.10 57Soy drink大豆饮料7.01 2.41 4.60 58Soy fiber大豆纤维44.43NR21.687.90 59Soy flour(textured)大豆粉148.6159.6278.9020.19 60Soy flour,defatted大豆粉（脱脂）131.1957.4771.217.55 61Soy flour,full-fat,raw大豆粉（全脂）177.8971.1996.8316.18 62Soy flour,full-fat,roasted大豆粉（全脂，熟）198.9599.2798.7516.40 63Soy hot dog,frozen,unperpared热狗（豆粉，冷冻）15.00 3.408.20 3.40 64Soy meal,defatted,raw大豆粗粉（脱脂）125.8257.4768.35 65Soymilk,fluid豆浆9.65 4.45 6.060.56 66Soymilk,iced豆浆（冰冻） 4.71 1.90 2.81 67Soymilk skin or film(Foojook or yuba),cooked腐竹（熟）50.7018.2032.50 68Soymilk skin or film(Foojook or yuba),raw腐竹193.8879.88104.8018.40 69Soy noodles,flat豆粉面条8.500.90 3.70 3.90 70Soy paste豆粉空心面条31.5215.0315.217.70 71Soy protein concentrate,aqueous washed浓缩大豆蛋白（水洗）102.0743.0455.59 5.16 72Soy protein concentrate,produced bu alcohol extraction浓缩大豆蛋白（乙醇提取）12.47 6.83 5.33 1.57 73Soy protein isolate大豆蛋白提取物97.4333.5959.629.47 74Soy sauce made from hydrolyzed vegetable protein酱油（水解蔬菜蛋白）0.100.1000 75Soy sauce made from soy and wheat酱油（大豆、小麦） 1.640.930.820.45 76Soy-based liquid formula for adults,ROSS,ENGRICH罗氏成人大豆配方饮料0.540.140.40 77Soy-based liquid formula for adults,ROSS,GLUCERNA罗氏成人大豆配方饮料0.080.020.06 78Soy-based liquid formula for adults,ROSS,JEVITY ISOTONIC罗氏成人大豆配方饮料0.340.030.31 79Soybean chips豆片54.1626.7127.45 80Soybean curd,fermented腐乳39.0014.3022.40 2.30 81Soybeans Brazil,raw巴西大豆87.6320.1667.47 82Soybeans Japan,raw日本大豆118.5134.5264.7813.78 83Soybeans Korea,raw韩国大豆144.9972.6872.31 84Soybeans,Taiwan,raw台湾大豆59.7528.2131.54 85Soybeans,flakes,defatted豆片（脱脂）125.8236.9785.6914.23 86Soybeans,flakes,full-fat豆片（全脂）128.9948.2379.98 1.57 87Soybeans,immature,seeds,raw毛豆20.429.279.84 4.29 88Soybeans,immature,cooked,boiled,drained,without salt毛豆（煮，不加盐）13.79 6.85 6.94 89Soybeans,green,mature seeds,raw大豆（绿色）151.1767.7972.5110.88 90Soybeans,mature,cooked,boiled,without salt大豆（煮，不加盐）54.6626.9527.71 91Soybeans,mature seeds,dry roasted大豆（烤）128.3552.0465.8813.36 92Soybeans,mature seeds,raw(US,food quality)大豆（美国，标准的）128.3546.6473.7610.88 93Soybeans,mature seeds,raw(US,commodity grade)大豆（美国，普通的）153.4052.2091.7112.07 94Soybeans,mature seeds,sprouted,raw黄豆芽40.7119.1221.60 95Spices,fenugreek seed胡芦巴子0.020.010.01 96Sunflower seed kernels,dried葵花子仁（干）000 97Tea,green,Japan绿茶（日本）0.050.010.04 98Tea,jasmine,Twinings茉莉花茶0.040.010.03 99Tempeh印尼豆豉43.5217.5924.85 2.10 100Tempeh burger印尼豆豉馅饼29.00 6.4019.60 3.00 101Tempeh,cooked印尼豆豉（煮）53.0019.2531.55 2.20 102Tofu,MORI-NU,silken,firm豆腐27.9111.1315.58 2.40 103Tofu,dried-frozen(koyadofu,kori tofu,or tung tou-fo)豆腐干，（冻）67.4925.3442.15 104Tofu,AZUMAYA,extra firm,cooked(steamed)豆腐（蒸）22.708.0012.75 1.95 105Tofu,AZUMAYA,firm,cooked豆腐（煮）31.3512.8016.15 2.40 106Tofu,fried(aburage)豆腐（炸）48.3517.8328.00 3.37 107Tofu,pressed(Tau kwa),raw豆腐片29.5013.6013.90 2.00 108Tofu,raw,regular,prepared with calcium sulfate豆腐（用硫酸钙处理）23.619.0213.60 1.98 109Tofu,salted and fermented(fuyu)腐乳（加盐）33.1714.2916.38 5.00 110Tofu,soft,VITASOY-silken精致豆腐（强化维生素）29.248.5920.65 111Tofu,soft,prepared with calcium sulfate and nigari精致豆腐（用硫酸钙和nigari处理）31.1011.9918.23 2.03 112Tofu,yogurt豆腐酸奶16.30 5.709.40 1.20 113USDA Commodity,beef patties with VPP,frozen,cooked牛肉馅饼（含VPP，冷冻，熟） 1.860.67 1.090.10 114USDA Commodity,beef patties with VPP,frozen,raw牛肉馅饼（含VPP，冷冻，生） 1.140.350.770.02