细胞培养中霉菌污染问题
Julius：我的细胞被污染了，表现为培养液内有浑浊，可见很多白色粉末的东西悬浮，之前发现一瓶有，就丢了，剩下的及时换液，清洗，可在传代后的第二天就又见浑浊，仍有部分细胞是贴壁的，可以看到很多”细胞“首尾相连成一条条的线状，可细胞怎会是线状生长呢？（抱歉没有拍下照片）请问是霉菌还是细菌污染呢？如何区分细菌，霉菌及真菌的污染。现在如何处理呢？污染控制区大家所说的用甲醛熏蒸，碘伏擦拭，或75％酒精擦拭，是用那种呢？时间要多长呢？
因培养箱内还有别人的细胞，现在消毒处理时剩余的细胞该怎么办呀？还应注意什么呢？
liyq_1：应该是霉菌污染.其特点正是肉眼可见白色悬浮,形态呈线状.
qxlbljys：1.细菌污染液体混浊,霉菌污染可看见霉苔但液体不混,所以你的细菌和霉菌同时污染
处理:扔掉,以免污染其他细胞
2.你说的线状生长实际上细胞已经接近死亡
3.可以将培养箱用75%的酒精擦拭,并停止细胞培养,然后用紫外消毒房间
sunandsuny：由于细菌的生长分裂呈指数级的生长方式,所以细菌污染后,培养瓶很快就是浑浊的了,但一般不像霉菌污染,霉菌有菌丝,往往呈絮状漂浮,甚至有丝状突起.因此霉菌污染和细菌污染在肉眼上有时可以大体上区分,这只是一些常规的经验,如果要具体确定,还
要通过涂片染色,看看是球菌或杆菌或是弧菌．
叶知秋：原代培养的软骨细胞，贴壁良好，长势旺盛，可霉菌悄然而至，大有疯长之势。不想放弃，该如何处理，敬请指点。
ratman：配制以下5X抗生素培养液：AMP:100ug/ml, gentamycin 100ug/ml, 两性霉素B 2ug/ml, 制霉菌素1.5ug/ml, 脱氧胆酸钠10ug/ml，进行冲击，培养时间为8小时后换液，改用1X抗生素培养液进行培养，以上配方为1x配方。每天换液。
icesugar75：别救了。霉菌是抗拒不了地，别让这瓶细胞把其它的污染了最重要。
eming43：同意楼上的，如果细胞不是珍贵的没有了，最好是放弃。你在救细胞上花的功夫还不如重新养，霉菌真的不好处理，况且放在培养箱里还有可能污染其他的细胞，更可怕的是换液时把培养基也污染了，那你就等着更多的麻烦吧！
dongshiwu：照着二楼的方法有效,我曾经仅用二性霉素就将霉菌污染的293细胞救回来过.
linbmm：细胞培养过程中，通常有意想不到的状况发生。昨天观察我的细胞时，发现皿中有黄色斑点形成，斑点边缘不是很清楚，培养液未发生变化，细胞形态也没受影响。其实这就是霉菌污染的早期现象。今天再观察时，斑点已扩散，而且皿中斑点数量也增多了。大家遇到过这种情况吗？怎样消除霉菌污染现象？
juju：如果发现霉菌污染，尽早把细胞扔了，如果是细胞培养板一孔或几孔污染，小心吸除后加高浓度氢氧化钠封闭。避免污染扩大，害及其他孔或培养瓶中细胞。已经发现污染再加两性霉素是没有用的。供参考。
jzyxynwm：霉菌污染不要吝惜细胞,坚决丢弃,复苏冻存细胞,还要注意要把孵箱和整个培养间做彻底消毒,用甲醛熏蒸,孵箱用苯酚彻底搽净!!对于两性霉素等药物的挽救措施建议你不要采用,因为任何一种外来药物对细胞都会产生不良,甚至未知的影响,包者对实验严谨
的态度,一切从新开始!!!做细胞培养要抱着平和的心态去做,不可急功近利,这样往往事半功
倍!!!!
soso_fan：一般出现霉菌污染，如果不是非常珍贵的细胞一般都是扔掉，而且连相关的容器都要做严格的处理。两性霉素B可以起到抑制霉菌的作用，一般只是培养前把标本短时间的浸泡，培养液里一般不加，因为抗真菌药物的细胞毒性还是比较大的，一旦出现了污染还是早点扔掉为好，以免污染其他细胞造成更大的损失。即使用高浓度的抗真菌药物处理过，细胞估计也不会好到哪里了。
drhl：我的细胞最近也出现了霉菌污染，不知道怎么回事。以前是偶尔有一瓶污染，现在却是大批量的污染。我初步估计实验时吸管不干净，因为那批吸管没有泡酸就高压了。
maokai123：酶菌厉害得原因是霉菌会产生孢子，孢子空气传播，比一般接触传播的细菌厉害的多，楼上同学的吸管我想不是问题，霉菌一般是人带到细胞房的，到细胞房最好换衣服换鞋。污染发生了除了常规的处理以外，一定要彻底处理污染材料，焚烧，不要留在实验室，不然容易重复污染，空气要甲醛熏蒸消毒。孢子对紫外的抗性很强。人员的个人卫生也重要，试验服洗洗晒晒吧，不留长发，常洗澡
zhizuchangle：我们是采用在水盘里加硫酸铜来预防霉菌！
wangzhua：我们几乎所有细胞均有如图片中的污染存在,开始时只有较少小黑点粘附在部分细胞上,后来几乎所有细胞身上都长满了如此的小黑点,这个周期要三两个月的时间,
小黑点长得不是很快,好象开始时对细胞状态也没有太大影响,但传代时可见瓶底有很多细
胞碎片似的东西,这个东西多了以后,细胞长势缓慢.心疼啊,哪位高手有好的办法?
前两在清理培养箱,发现箱体上有霉菌斑,送检以后说是毛霉菌,如何解决?
有时候消化细胞的时候可见到这些小东西从细胞的残骸里跑出来,很恐怖，但活动不是很剧烈,只在原位振动,这也是它长得慢的原因吧。
所有照片在Nikon倒置相差显微镜40倍物镜下用数码相机拍摄,放大倍数约800倍
哈佩雕：你这下就惨了，长了霉菌细胞只能扔了，而且整个实验室和培养箱都要消毒啊。我们实验室液发生过类似事件，我把我们处理过程告诉你，希望对你有帮助：
首先消毒培养箱，如果你们有两个或以上培养箱就好办了，如果只有一个且还有很多其他细胞就麻烦点。只能暂时的放在超净台上。具体如下，中午将空调温度打到最高（也只有31度），超净台开紫外。下午早点来关紫外，将细胞转到超净台内，用75％酒精擦洗培养箱，再用无臭氧型可移动的紫外等照射半小时，然后将细胞放回即可（切记CO2瓶子阀门要关紧啊，不然气全跑光了）。再消毒实验室，先把室内空调和消毒柜过滤网都拆下清洗，在锥形瓶内加点高锰酸钾，放在实验室地上，然后倒入甲醛，立马关门走人就可以了。2天后再开门装好东西，和往常一样开始工作了。由于2天不能做事，个人细胞要先计划好，大家都可以休息两天。
shaverwoo：确实应该仍了，否则挽救只会浪费你更多的时间。我也遇见过，还曾经挽救过，我用了制霉菌素来反复洗涤细胞，并在培养液里也加了，看着细胞长好了，还以为成功了，接着传了二代，还冻了些，可是之后，仍然不断的有霉菌污染发生，取出冻的细胞一复苏，根本不贴壁，一查，是真菌，所以赶紧消毒实验室还有你用的所有材料吧，一定要全部重新彻底消毒
jcl738：三天之内竟然发现有两瓶LB培养基出现了霉菌污染（一瓶加了氨苄），很郁闷，今天不得不把摇的菌倒掉了.使用时严格按照无菌操作了，但为什么还是被污染了呢？
我爱标标：霉菌污染是防不胜防的,你的培养基被污染了,只能说明一个问题:你的实验技术还不过关.再继续努力吧!
frederick：可能是周围的空气中有霉菌，你那操作台附近最近有没有搬过什么中大型的东西，或移动了什么。我们这里前几天移了一下冰箱，那个星期的平板摇瓶全染霉菌了，
所以你在接种或培养的的时候千万要注意环境的变化，霉菌就是在不经意见进入了你的摇瓶或平板。
jcl738：我配的培养基不是我一个人用，我实验室人都用啊！我是新手，可能是我的问题！没有搬过什么东西，不过我们的超净台就在门口附近。实验室用紫外照可以杀霉菌么？
趙子植：LB被霉菌污染的原因有
1、制作时灭菌不完全,可以增加灭菌的时间到40分钟试试看
2、灭菌完全但是灭菌后无适当保存,可以将LB保存在4度的环境要使用时再回温并且注意瓶盖是否有完全密闭
3、操作不当,操作时未按照无菌操作原则保持无菌环境或者是操作人员双手未先以70%的酒精消毒
4、菌种受到污染,所种的菌种已经受到霉菌的污染,建议换掉菌种
5、不论是受到何种因素污染皆可以利用简单的对照组实验来找出污染的原因为何,建议可以自己试试看
freechange：我作了这么多次还没有被霉菌污染过，可能使我侥幸。但我想主要原因是因为我注意了一下操作：
1、我操作的时候，总是在灭菌同时超净台外侧窗口处，喷一些医用酒精，以控制周围附近的空气中漂浮菌。
2、在做完试验后，超净台里喷一遍医用酒精，然后严格按照紫外灭菌等操作。
3、还有，超净台长时间使用了的话，要把里面的防尘过滤网拆下来，用吸尘器或者其他东西吸净，洗净。
wang_gost：培养箱中放一些饱和硫酸铜溶液可以防止霉菌污染细胞
Reesei我做的是霉菌，我也很担心染菌，不过我是担心把别人的培养基染上我的菌，呵呵
有霉菌的话紫外杀菌要长一些，三十分钟左右；超净工作台霉菌与细菌最好分开用，如果超净工作台系统染菌的话，恐怕要进行一次彻底杀菌了；培养基ph值可以适当调高一些，霉菌一般喜欢偏酸性。
mjing：我觉得还有可能是你们实验室还有人正在做霉菌的,如果产孢子的话,紫外消毒的时间应相对长些.还有你可以加青霉素或链霉素在培养基中,效果可能会更好.
gleydream：有一个方法可以试试紫外开的时间久一些同时一定要有些间隔比如开20分钟，然后关掉10分钟再开20分钟记得我得老师以前说过的因为有时候孢子可能没有完全杀死两次这样的话就可以了。还有就是，尽量不要再太潮湿的空气操作，同时不要裸手经过瓶口。最好是能直接放在无菌室。一般很少染菌吧。我得LB没有加氨卞的，放了1个月都不长菌。可能和就放在无菌室有关，或是超净台
neighboour：我养的VM总是出问题，原代培养后1-2天内没有什么问题，换液一次后1天毛病开始出现。
（1）加血清的VM细胞出现丝状漂浮物质，生长快速，培养液不混浊，细胞生长差。贴图1
（2）不加血清培养的VM细胞没有出现这种情况；
（3）两者均出现散在的黑色“细胞形状”的物质，（贴图2）经观察未见明显增长和数量增多。
我师姐说可能是霉菌污染，并告知我严重的后果，我不知道是不是
我的血清有问题？但是我师姐也用同一大瓶分装的血清，她没有这种情况出现。而且上次出现过一次污染之后，我抛弃了我原有的DF12和血清，重新配置和分装（2）是否为我换液过程中操作不慎？我以前在其他试验室也是如此操作，没有出现过问题的呀。（3）黑色的小颗粒物质是否和使用酒精灯过火玻璃吸管有关？我师姐的细胞有时也出现过这种情况。在以前的培养室（用液化气）内没有出现过这种情况。我不敢肯定这次的污染是否和这些物质有关。（4）如果是霉菌污染，该如何消毒呀？？
fancychen_78：你的真的是真菌污染，链状的菌珠是真菌的菌丝，你的培养液中加了双抗吗，一般双抗终浓度为：青霉素100U/ml ,链霉素100u/ml，市售的青霉素为80万U/瓶，溶于4ml体积内，每1000ml培养液中取0.5ml，链霉素为100万u/ml，溶于5ml体积内，每1000ml培养液中取0.5ml。污染严重时可以采用5-10倍的冲击剂量。已经吸取过细胞或培养液的吸管不要放在过分烧，甚至可以不少，否则，蛋白烧后，会释放有毒物质
midas：建议可以先把液体过滤一下，在悬浮细胞，如果还有问题的话，就怀疑是在操作中有问题－－这时最好先看看别人的操作！
neighboour：midas是说我把DF12过滤，还是说把培养皿内的培养液过滤，另外，如果是真菌感染的话，双抗是否没有作用呀。
midas：当然是把加了血清的DF12过滤！
生物迷：介绍点我的经验：真菌大多悬浮于液体表面,如果发现有少量真菌污染可用大量PBS或D-HANKS冲洗,加含有双抗的培养基培养观察3天,然后看有没有真菌.我用这种方法救了一瓶非常宝贵的细胞(用GIBCO胎牛血清外加FGF-2培养了一个月的MSC).
seaman_wang：如果你霉菌污染，有两种方法，一种是你制备一些小鼠的饲养细胞加入板上，一起培养，让饲养细胞中的巨噬细胞吃到霉菌。第二种，在培养基中加入制菌霉素。
PINX：是真菌污染，可以用两性酶素B试试看，不要用国产的，因为试剂不纯，有较大毒性，GIBCO有商品化的两性酶素，我师妹用过效果不错。
heimukai13：请问:我先配置DMEM,然后过滤,吸3ml检菌三天,若无菌,添加FBS和双抗,过滤后贮存备用.(不知这样对否?因为我是从别的实验室学的,我连续几次配,检菌时都发现培养基表面有一层薄薄的如雪花形状的东西,它在配完培养基第二天下午六七点还看不到,而到九十点就能看到好多,非常迅速,但往后几天却又不怎么长了,培养液一直是清澈的,很纳闷,不知是什么东西,)
若配置DMEM后不检菌,而直接加FBS和双抗,成为全培养基,过滤备用,可以吗?
asd1191：双抗要在配DMEM时就要加，然后过滤！过滤后最好在DMEM中加一点血清在培养，这样长菌的话快！过滤前是不加血清的，因为血清是很难过滤的！培养基表面的如雪花形状的东西可能是长菌的，你摇晃一下瓶子，若浑浊了，则很有可能污染了！另外培养基最好不要反复过滤！这样营养成分会丢失的！另外反复过滤的话会偏碱！
heimukai13：哦,原来要先加双抗的!加了双抗,还需要检菌吗,我想一般就生不了细菌了吧!我不加血清都有漂浮物了,会不会是真菌呢,是的话,怎么防止呢?那些雪花状的东东,摇一下,还是在表面荡来荡去,培养液清澈.(见图)我过滤加FBS后的培养液很好过滤的!怎么回事呢?
hualey：加双抗也只是防止一般染菌，但像支原体等污染就很难起作用，所以加了双抗之后还是要验菌的。感觉你那东西像染菌，因为1）你没加双抗；2）开始没有，第二天才出现（除非你的培养基pH发生大的变化，一般不可能）。鉴于你每次都出现这种情况，你是否可考虑环境或操作有问题，你也没说具体，所以只能作为建议。小牛血清不好滤是相对的，我滤过小牛血清，只是比不加血清的培养基难滤，有时含血清培养基用久了，我还用滤器滤过呢！
heimukai13：我第一次配时没有发现这种情况,后面三次操作都一样,而且用的都是刚灭过菌的东西,而出现照片上这种东西了,会不会是培养液里的氨基酸什么的析出来了呢,因为
这雪花样东西过上几天还是这么多,是菌的话应该长疯了吧!而如果是支原体的话,应该肉眼
看不见的了.
scp：应该不是氨基酸析出，若是氨基酸析出的话沉淀是在底部的。漂浮在上面会不会是霉菌呀？你有没有用这种培养基养过细胞呀？不妨尝试一下看看有没有污染，如果没有污染的话，大可继续使用。还有。双抗一定要在过滤之前就加上，血清最好也是这样（虽然过滤速度会慢一些）。
heimukai13：应该不是霉菌吧,霉菌是丝丝连连的,绒球球样,长起来好多就悬浮在培养液里了,有一瓶细胞曾经污染过,这个就不一样了!我试试看用它来培养细胞!
朱晶：：双抗一定在要滤之前加，对于DMEM培养基我建议在-20冻存后，如果想用最好提前一天化出来，放到4度里放一天再用，这样比较好，因为这种培养基极愿意产生一些析出物，放置一天会就会溶开了。而且我觉得血清最好还是不要过滤，里面含有一些大分子的营养成份，如果过滤的话对血清本身来说是一种损失。
szmengjie：我第一次培养T淋巴细胞，加了PHA刺激其生长。发现显微镜下它们长得特别快，昨天还是密度适中的圆圆，亮亮的小豌豆一样的游离的细胞。细胞中间有些聚集成团的颜色较深的象一堆血小板一样的东西。今天一看，已是长得平铺了一视野的密密麻麻的看不出单个细胞的形态，大小。呈向心性分布，即中间密度尤高，而越到边缘，则稀疏点。在稀疏处可看到圆圆，亮亮的小豌豆一样的游离的细胞。肉眼培养液里有白色絮状物。白色絮状物究竟是污染还是细胞数太多？
菊花与刀：是不是霉菌感染呢，我前段时间培养的细胞最后就是感染霉菌了，就是一团一团的漂在上面，中间密度高，周围稀疏，高倍镜下可以看到菌丝。
szmengjie：我想霉菌污染是有可能，我用的是24孔培养板，因为标本是断断续续地来，一次只能用其中几个，将那些细胞悬液吸走后，因还有没用过的孔，舍不得丢掉培养板。过一天，看那些曾用过的孔，孔底部长出象雪花一样的，也可说象海藻一样，每个枝象细胞生物学上分子筛的图像一样。我想问：1 细胞太多能出现白色沉淀吗？2 霉菌污染除开看到菌丝，还有其他方法证明其存在吗？早期有什么补救措施吗？3我对细胞培养时出现的污染实在没有概念。有没有哪里提供图谱，让我们这些新手认认敌人的面貌呢？
culture-spirit：1、可以，镜下可见此处细胞程大团分布
2、如果霉菌污染已经到了出现白色沉淀的时候，一般能够看到菌丝了，镜下相当明显
3、这个我也没有找到，好象一些细胞培养的书付页里有，可以请教其他战友
qjzhou2000：
1、不会是沉淀的，仔细看应该还是可以看到细胞形态的，你用的是不是olmpus的相差境？那种倒置境的相差效果很好，细胞看起来有点象珍珠。
2、霉菌看到菌丝的时候就很厉害了，早期不容易发现，可以加两性霉素之类的抗霉菌的抗生素，具体请在该区搜索，很多都讲到了。
3、现在还没找到，不过一些描述还是很直观的。
midas：细胞数太多会出现片状的脱落，所以白色絮状物污染的可能性大些！
独上高楼：霉菌污染后细胞多生长很慢，象你这种情况，细胞一夜就长满，霉菌污染的可能性不大。另外，霉菌污染也不能一下就看出白色絮状物，而是先在镜下看到较稀少的短小黑色分枝串珠，再看到较密集的短小黑色分枝串珠，最后才能肉眼看到白色絮状物，这个过程大约要1个星期左右，而且在这期间细胞几乎不生长。
szmengjie：前段时间我老被这种在细胞培养液中白色的象一片白膜的东西困扰。40倍镜下同“细胞污染讨论区”贴出的图片一样。上周我送了个培养，结果证实是真菌污染。显微镜下（100倍油镜）染色后可见到一颗颗象红色的南瓜子一样的东西（真菌孢子）。据细菌室的老师说还可在这些“红南瓜子”间见到丝一样的东西。可能就是菌丝了。
我已经非常注意实验器材的消毒灭菌，操作应该也没问题。于是将试剂一个一个吸取了放在显微镜下观察，发现是洗细胞的HANK'S液被真菌污染了!现在我已经换了HANK'S 液，这种污染可以说被控制了。
yoyo781206：我想应该是污染了，因为我也遇到过，过几天就看到放射状的菌丝了
topgun：象霉菌的菌丝，但应该观察其数量是否增多？因为霉菌污染在2-3天内可见大量的菌丝！如果是不小心带进去的棉絮则不会有数量的增加且培养基也不会变混浊。
yuandong：我想应是霉菌，白色，絮状，培养基变成了黄色。
apple800828：不象霉菌污染。前两天我培养的内皮细胞被霉菌感染了，好典型的树枝分叉样。象抽丝一般。
chenting100：是霉菌，我们的细胞就经常出现这种污染，实验室老师说霉菌有好多种变异呢。
huvec：其中有多细胞真菌污染的特征性标志：菌丝！
wujinghui：我得细胞培养液中不知道是什么东东，它漂浮生长，在瓶底是白色的，在低倍境下就能看到，在培养瓶里边呈葡萄状，还有的呈树枝状，刚开始时候生长的不快，但是很快就长得很快。不知道这个东西是什么东西，英文名字怎么写，最好能告诉以下如何控制！
ya2cyto：霉菌感染。霉菌是以孢子在空气中传播，细胞肯定是不能要的了，一旦污染很难控制
用环氧乙酸熏蒸培养箱，最后再对培养箱进行无菌实验方可使用
wujinghui：不是霉菌，因为霉菌不用显微镜就能看得到的。我这个不用显微镜是看不到。
shyaroom：不信？你再放个三天，肯定就能用肉眼看到啦，呵呵。不过建议你换个地方放，别把其它细胞再给污染了。
ylh1976：霉菌，树枝状的东西是菌丝，葡萄状是霉菌。赶紧处理掉细胞，培养箱、操作台还有整个培养室好好消毒一下。梅雨季节要千万小心，空气中到处都有霉菌孢子。
深谷幽兰：各位，有时鸡胚成纤维细胞也连在一起，呈树枝分叉状，而正常的细胞单个散在，这是怎么回事？
junny999：我的一个同事养的细胞被霉菌污染，我与她共用一个培养箱，为防止交叉污染，我想在我的培养基里加点抗霉菌的药，请教加哪一种药物比较好？剂量怎样添加？我养的是MSC
XTYang：Invitrogen公司的Fungizone, 1%(v/v)的用量。对有些细胞有毒害作用。
renjiaqiang：我觉得你最好不要加，我加过抗霉菌药物后细胞生长很慢，而且形状也发生改变，不得已重新买了一株细胞，你现在可以先把细胞冻存，将培养箱消毒后继续进行实验。
lingzhiting：最好不要用吧！我用过nystatin，40Iu/mL。霉菌没长起来，不过也许是不溶的缘故，细胞生长很慢，而且还引入了不明杂质，洗了几次，才逐渐洗去。
wuguojun680510：如果没有长真菌就不要加抗真菌药物，因抗真菌药物有较强的细胞毒性，加了结果会适得其反。最好能把环境处理一下。
qianyimei：星期一复苏了一支细胞株，养到星期三还好好的。心太急。老希望它能长的快些，所以，将一瓶配成三瓶用，结果倒好，今天早上一来，就发现里面长了很多成团的碎片状的东西，众师兄都说是霉菌，叫我倒掉，好可惜，好郁闷！早知道就不换液了，这一换，全军覆没。那位能有更好的办法吗。
zhaoqingshan：用含双抗的PBS洗几遍，换上好的培养液（比如用点好的胎牛血清）；每天洗1-2次，只要细胞状态还好，洗几天，就能把霉菌去除。然后，检查霉菌污染的原因，清除污染源。zjuaxiu：根据经验霉菌污染了用双抗的pbs冲洗基本是没什么作用，只能是浪费双抗pbs时间
zhaoqingshan：那只是说明你的经验，不巧的很，我的细胞(细胞很娇贵，培养液价值约10元/ml)去年七月霉菌污染了一次，全部抢救过来。不可否认很多时候是抢救不回来，前提条件是早发现污染，霉菌对细胞还没有构成太大伤害时候，是可能抢救回来的。当然，最重要的是不要有污染了，预防最重要，即无菌观念要强。
flyingpumc：用3微克每毫升的两性霉素杀杀试试!!!
eweiren：如果不是唯一的一管细胞，我觉得没有必要费这么大力气去挽救，因为有了霉菌，基本上是无法去除的，通过换液只能达到抑制真菌的生长，在镜下看不到不代表不存在，只是由于少或者芽孢看不到，一段时间后它可能还会出来，耽误试验啊！
zhaoqingshan Re:碧海娃娃
双抗PBS是指含有双抗(青链霉素)PBS（磷酸盐缓冲液，也不能杀死霉菌，杀霉菌应该用两性霉素或制霉菌素），使用双抗PBS冲洗仅仅是预防其它细菌的污染而已。
Re:eweiren ，你说的是很对的，真正严格的实验是不应该有污染的。
细胞株拿来后，传代几次，细胞多了，就应该冻存一些，一方面以免细胞传代次数多了变成非二倍体或者其它变异，另外就是以防污染。如果自己培养的原代细胞，可以挽救一下试试，大部分情况是难以回天的，看运气了。
不过，我那次污染正是霉季，一般实验室在这个时候，可能就不养细胞了，我们实验室是我们院里无菌观念最严格的一个实验室，在这以前，细胞从来没有污染过。那时候可能是因为空调很久没有擦洗消毒了，而我又太大意，因此感染霉菌了。不过，那次我还真的就救回来了，因为我的培养液中，营养条件特别好，而且我每天洗几次，换液，细胞没有任何
的受影响的表现，我做的是原代细胞传代到第三代，刚好该做实验，因此就全部用来做了同一批的实验。
避免真菌污染的几个措施：
1、严格的无菌操作;
2、无菌间定期打扫、消毒，保持干燥；
3、各种培养液、培养器皿的严格消毒；
4、温箱中消毒水中放置过饱和的消毒的磷酸氢二钠或者硫酸铜。
eyeball：霉菌污染了用双抗的pbs冲洗基本是没什么作用，只能是浪费。关键是液体一定要保持无菌。培养液过滤后要取一点先放培养箱预培养三天，无菌生长后再用。
dongshiwu：我曾经就回来过遭霉菌污染了的细胞。如果细胞好养或有存货的话，干脆从头作起，要是舍不得可以用PBS液洗3遍，在新的培基中加两性霉素。
XTYang：最好弃掉，要不在以后的培养基中加Invitrogen公司的Fungizone，多换几次后也可。
wangfx_vet：我最近养的细胞总是出现空泡并且不断死光。改变血清浓度也没有用，不知道怎样解决
俺来了：是不是排出污染，比如霉菌包子感染可能这样，因为我的前面一批细胞就这样，培养基不混，细胞内有很多空泡，且可见一些比细胞大得多无明显细胞结构的“圆形细胞”里面有很多小的空泡，如果是这样的话，那就是霉菌污染，但愿你的不是，否则，什么都得重来！
wangfx_vet：对对！就是楼上老师说得那样！那末说我的细胞是污染霉菌了！！！？？？那我就惨了，这是引进的细胞哎，没了就永远没了！没有拯救的办法吗？
hkai97：霉菌污染是很烦的问题,试试杀霉菌的药物.这只能是死马当活马医了.重要的是预防.常做清洁和消毒,保持实验室的洁净度.否则还会出现细胞污染.
doctormeng：谁知道细胞培养血清中出现黑焦虫，该怎么办？有没有专门对付他的东东，比如抗生素之类？我养的细胞中出现了：中间一个黑黑的东西，其四周包围有象棉花样的的东西，不知是不是黑浆虫。其周围的东东，有点类似于菌落。
杀菌消毒专家周立法先生认为：控制霉菌污染，首先要了解霉菌的生长环境、污染食品的条件。在此基础上，方可以提出合理的防控措施，提高食品卫生质量。 一、霉菌的生长环境 1、生产车间的墙壁，比较潮湿部位容易生长霉菌。 2、加工设备存在冷凝水的管路、机壳等容易生长霉菌， 3、空气中所包含的水蒸气，在冷凝、液化时最容易产生霉菌，如车间中温度最低的部位，含天花板、地面、设备表面、墙面等温度低的部位， 4、车间内无法保证正常换气，无法让车间湿度保持在55%情况下时，容易生长霉菌。 5、车间忽冷忽热，容易产生冷凝水的地方，容易遭到霉菌侵害。 6、离墙近的设备、制冷风机容易产生冷凝水，容易产生霉菌。 7、温度相对较低的车间速冻库门，请一直保持关闭状态。如果这些温度较低车间的门没有关闭的话，那么旁边车间传过来的热空气涌进行，就形成很高的湿度，从而在空气冷却的时候形成液化，容易生长霉菌。 8、车间的空调系统、净化管道系统等，其自身容易产生霉菌。
二、霉菌的生长习性 与霉菌的生长繁殖关系密切的有水份、温度、基质、通风等条件，为此，只有充分的了解霉菌的生长习性，才能为下一步控制霉菌提供理论依据。 1、水份霉菌生长繁殖主要条件之一是必须保持一定的水份，当食品中的水分活性值为0.98时，霉菌最易生长繁殖；当水分活性值降为0.93以下时，霉菌繁殖受到抑制，但依然仍能生长；当水分活性值在0.7以下时，霉菌的繁殖受到真正的抑制，可以阻止产毒的霉菌繁殖。 2、温度温度对霉菌的繁殖及产毒均有重要的影响，不同种类的霉菌其最适温度是不一样的，大多数霉菌繁殖最适宜的温度为25～30℃，在0℃以下或30℃以上，不能产毒或产毒力减弱。如黄曲霉的最低繁殖温度范围是6-8℃，最高繁殖温度是44～46℃，最适生长温度37℃左右。但产毒温度则不一样，略低于生长最适温度，如黄曲霉的最适产毒温度为28-32℃。 3、食品基质与其它微生物生长繁殖的条件一样，不同的食品基质霉菌生长的情况是不同的，一般而言，营养丰富的食品其霉菌生长的可能性就大，天然基质比人工培养基产毒为好。 三、霉菌污染食品的条件
如何预防细胞培养中的黑胶虫污染 污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视，防止污染，否则会前功尽弃，不仅浪费时间，而且浪费人力、物力，甚至造成无法弥补的损失。细胞培养中常见的生物污染类型有7种，分别是细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真菌污染、病毒污染以及非细胞污染。他们在细胞培养中污染的特点如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 2、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。 3、黑胶虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。 4、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 5、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。 6、病毒：组织细胞培养过程中，如果没有除去潜在的病毒，就会产生病毒污染。目前，从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。尽管病毒污染的细胞不影响原代培养，但生产疫苗是不安全的。因此，潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题 7、非同种细胞污染：即是细胞交叉污染，由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开，往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前，世
饲料中常见的霉菌曲霉菌属黄曲霉1、昆虫抗微生物肽《昆虫抗真菌肽基因的分泌型表 达及活性鉴定》《昆虫抗真菌肽》 2、AFP对青霉属、曲霉属和镰刀霉属都具有明显的 抗真菌效应《产抗真菌蛋白菌株筛选与抗真菌蛋白分 离纯化》 3、几丁质酶《东北林业大学硕士学位论文》 4、杜仲抗真菌肽《杜仲抗真菌肽对黄曲霉的抑制作 用》 5、巨曲霉AFP《巨曲霉中的抗真菌蛋白质AFP能抑 制大麦上不同镰刀菌的二次生长》 6、菌株X-42《禾谷镰刀菌拮抗菌的筛选与鉴定》 7、解淀粉芽孢杆菌《一株拮抗储粮真菌的细菌菌株 鉴定和初步研究》 8、《萎缩芽抱杆菌抑制黄曲霉的作用研究》 9、《乳酸菌对食品中常见霉菌的抑制和黄曲霉素的 去除》 10、《抗镰刀菌芽袍杆菌的分离、筛选、鉴定及其抗 菌机理初步研究》 11、《鱼腥草内生真菌分离及其抑菌活性研究》 12、《白藜芦醇抗真菌作用及其机制研究》 寄生曲霉 赭曲霉 镰刀菌属禾谷镰刀菌 三线镰刀菌 大刀镰刀菌 雪腐镰刀菌 粉红镰刀菌 串珠镰刀菌 轮状镰刀菌 尖孢镰刀菌 黄色镰刀菌 木贼镰刀菌 青霉菌属圆弧青霉菌 黄绿青霉、 绿青霉 扩展青霉菌 橘青霉 疣孢青霉菌 麦角菌属麦角菌
饲料中常见的毒素蓝色为饲料中 检出率100% 黑色为90% 产生毒素的霉菌 能降解毒素的基因文献研究 黄曲霉毒素黄曲霉菌、寄生曲霉和软毛 青霉 1、《泰山枯草芽抱杆菌的分离鉴定 及其对黄曲霉毒素B1的降解研究》玉米赤烯酮禾谷镰刀菌、三线镰刀菌、尖 孢镰刀菌、黄色镰刀菌、串珠 镰刀菌、木贼镰刀菌、燕麦镰 刀菌、雪腐镰刀菌 2、《一株地衣芽胞杆菌S1．1对赭 曲霉毒素A的吸附和降解研究》 3、《香菇多糖及其衍生物抑制 AFB;合成及其抑制机理研究》 4、《降解赭曲霉毒素A微生物菌株 的筛选及其降解机制的研究》 呕吐毒素镰刀菌属 赭曲霉素赭曲霉和纯绿青霉
胞培养中的污染分为两类，化学污染和生物污染。 化学污染 化学污染是一些对细胞有毒性的或对细胞产生刺激的化学物质。这些污染一般来自于没有洗净的器皿、不纯的化学试剂和质量较差的蒸馏水等。 化学污染中比较引人注意的是细菌内毒素。它是革兰氏阴性细菌细胞死亡后解体释放出的疏水性的细胞壁组成物质，对塑料等疏水性强的物质有很强的吸附能力。细菌内毒素可刺激部分细胞产生一些激素或细胞因子，对细胞生长和实验结果产生影响。细菌内毒素是临床上的最主要的热原（即注射到动物体内会导致动物发热），所以通过细胞培养生产的疫苗、细胞因子等用在临床上的药品的生产过程中更是要避免细菌内毒素的污染。 生物污染 生物污染包括比较容易发现的细菌、霉菌和酵母的污染，和较难发现的病毒、支原体和其他细胞的污染。 细菌、霉菌和酵母到处存在，它们能在合适的环境中非常快速的生长。这些污染比较容易观察到，它们往往会使其污染的培养液产生可见的变化，或者通过显微镜观察就可以看见。 由于病毒有种属特异性，所以病毒污染的概率比较小。但是病毒污染难于发现，因为病毒颗粒特别微小，一般的实验室都没能力检查细胞培养中污染的病毒。由于病毒一般潜伏在细胞内，对整个细胞培养不是致死的，所以它可能会使研究人员长期得到受病毒影响的细胞的实验结果。 1956 年 Robinson 及其同事首次发现细胞培养中的支原体污染。90年代初美国的一个调查发现，在该国的细胞培养中，至少有15%被支原体污染。由于支原体没有细胞壁，在细胞培养液中几乎是透明的，同时对常用于细胞培养中的抗生素不敏感，不引起 pH 变化，不使培养液浑浊，所以支原体污染不容易被发现，但是其存在会影响实验的结果。 细胞的交叉污染在细胞培养中发生的严重程度大大超过人们的想象：1981 年对ATCC 细胞株的调查显示：超过 60 标记为其他细胞株的细胞居然是 HeLa 细胞。
食品霉菌的污染及预防研究 食品霉菌的污染及预防研究 【摘要】近年来，随着食品安全问题的曝光，人们对食品安全关注度也越来越高。霉菌作为污染食品安全的毒素，严重危及到人体健康及生命安全。本文就食品霉菌污染途径及危害性进行简要分析，并提出有效的预防措施。 【关键词】食品霉菌污染预防 一、前言 霉菌主要由培养基棉絮状或者绒毛状的菌丝体形成的一种真菌。霉菌与酵母、细菌相比，其酸碱度与温度变化幅度较大，当其在农作物或者食物上不断生长与繁殖时，将导致农作物出现严重病害，或者食物出现发霉变质现象，甚至产生霉菌毒素，对人体健康及生命安全造成严重威胁。因此，如何有效预防食品霉菌污染，成为现阶段研究的重要课题。 二、食品霉菌污染途径及其危害 （一）污染途径 由于霉菌污染食品的途径有很多，因此霉菌毒素形成率也相对较高。在适宜的环境下，即温度与湿度相对较高情况下，食物可能会出现霉变现象。实验研究表明，果类、粮食、加工制品及豆类等食物中，例如黄豆、大米、水果、发酵食品、饲料级奶制品等，都存在一定的霉菌毒素。菌种不相同的霉菌，可在各类食品中生长和繁殖，花生、面粉等属于发酵食品，可能含有大量的黄曲霉和黄曲霉毒素；玉米、小麦则可能含有大量的镰刀菌和镰刀菌毒素；大米可能含有大量的青霉与青霉毒素，对食物造成严重污染。再者，霉菌在对食品进行污染时，将导致食品发霉变质，食用价值大大降低，或者无食用价值。据有关研究表明，全球每年大约有2%左右的农作物因霉菌污染变质而无法食用。 （二）污染危害性 霉菌及其毒素对食品造成污染之后，不仅使食品发霉变质，同时
以食品作为传播源，导致人体中毒或者致病，严重危害到人体健康及生命安全。因此，食品业职工人员（从业人员），必须正确认识到食品霉菌污染的危害性，掌握食品霉菌污染的途径及预防方法，才能有效减少食品霉菌污染现象。食品霉菌毒素而引发的人体中毒事件，主要是霉菌对发酵食品、油料及粮食等造成严重污染后，患者在进食后产生的。同时霉菌毒素引发的中毒事件具有季节性及地方性的特点，尤其是在我国南方地区较为潮湿，加上梅雨季节的影响，导致霉菌毒素食品污染中毒发生率不断升高。若人体或动物进食时，吞入多种不同的霉菌毒素，将会出现明显的中毒症状，对人体健康造成严重危害。 三、食品霉菌污染预防对策 （一）确保食品储存合理性 做好食品储存工作，是预防食品发霉变质的重要手段。发酵食品、油料及粮食等储存仓库管理中，不仅要对仓库温度、相对湿度及氧气进行有效的控制，同时要采取先进性的食品储存模式，确保食品储量的合理性，同时食品储存时间不宜多长，以避免其出现发霉变质现象。如果食品，如果类、大米、豆类、油料等出现严重的发霉变质现象时，不可轻易食用，以避免中毒或者致病问题的产生。同时要求食品生产单位、食品加工单位及食品供应单位，必须树立良好的食品霉菌污染危害意识，做好食品安全教育工作，在食品采购过程中，不可购买已经发霉变质的食品，而食品加工人员也不能对已经发霉变质的食品进行加工，以减少食品霉菌污染，使食品安全得到有效保障。 （二）有效去除食品毒素 当食品受到霉菌及霉菌毒素污染时，可将霉菌毒素有效去除或者破坏，以防止食品发霉变质面积继续扩大。食品毒素去除方法主要是在花生或者玉米中的发霉颗粒去除或者进行碾压加工，而大米则可用水搓洗和挑拣。再者，借助白陶土将玉米油或者花生油内存在的霉菌毒素吸附出来，以达到良好的毒素去除效果。 （三）种植抗霉菌较强的粮食 种植抗霉菌较强的粮食，也是食品霉菌污染预防的一个重要措施。随着我国农业技术快速发展，抗霉菌性粮食得到广泛的推广。例如，金皇后与杜单12号玉米品种，其与普通玉米相比，具有良好的
细胞培养常见污染的判别及应对措施 2011-01-02 10:19:04| 分类：实验| 标签：污染无菌细胞培养基灭菌|字号大中小订阅 一、避免细胞培养污染的措施： 污染是细胞培养中一个大敌，一旦污染，前功尽弃！决定要进行细胞培养，首先一定要有强烈的无菌意识！操作中要遵守严格的操作规程，不要怕麻烦，越细心越好！注意以下几点，大部份的污染是可以避免的： 1. 每次开始实验前，先用紫外照无菌台和实验室20分，用酒精擦手，台面和不消毒的器械（如移液枪等）；实验中，如允许，尽量多过火，开起或盖盖都靠近火焰或在无菌台深处；使用无菌台后，再用酒精擦台面，紫外照20分！ 2. 滴管不要接触瓶口，吸取废液及加入新鲜培养基时都要注意不要滴在瓶口上等等。 3. 凡是接触瓶口后都要用酒精灯烧烧。 4. 提取组织时，往往头会距离组织很近，所以带口罩很重要！还要换无菌衣（紫外照过的白大褂）。 5. 注意配制完全培养基时不要发生污染，在使用前一定要做无菌培养，因为一般应用污染后的培养基培养细胞后，很快就会发生特别严重的污染。 6. 操作时一定按照实验室的要求，切忌粗心大意。 7. 使用完的东西尽快移出无菌台！另外无菌台上的器械，试剂摆放，也尽量遵循一定的顺序！依污染可能程度依次向外摆。 二、常见的细胞培养污染： 下面是几种细胞培养过程中常见的污染： 1. 支原体污染： 传说中的黑焦虫，长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。
图1 支原体污染的光镜检测（圆圈所示，×10倍） 图2 支原体污染的光镜检测（×20倍）
图3 支原体污染的荧光检测
图4 支原体污染的电镜检测（×30k，煎蛋状和其他形状）
关于细胞污染的一些总结和心得 概述 凡混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染，细胞污染不能完全被消除，但能减少其发生的频率和后果的严重性。细胞污染根据污染源主要可以分为物理性，化学性和生物性污染。 物理性污染的来源、危害及预防：物理性污染常常被人们所忽视或被笼统地归为化学性污染。物理性污染通过影响细胞培养体系中的生化成分，从而影响细胞的代谢。培养环境中的物理因素，如温度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光)会对细胞产生影响。细胞、培养液或其它培养试剂暴露于放射线、辐射或过冷过热的温度中，可以引起细胞代谢发生改变，如细胞同步化、细胞生长受抑制甚至细胞死亡。通过实验室的合理设计及建立规范的操作规程，可以减少环境中物理因素对细胞的影响。孵箱应放在温度较恒定的环境中，周围不能放置能引起机械振动的设备，如离心机。培养液及培养试剂应放在固定的位置，为避免光照试剂不能放在玻璃门的冰箱中，试剂周围不能放同位素。培养液从冰箱中取出后应在室温中放置一段时间后再进行实验，以避免过冷的温度对细胞的影响。 化学性污染的来源、危害及预防培养环境中许多化学物质都可以引起细胞的污染。化学物质并不总是抑制细胞的生长，某些化学物质如激素就可促进细胞的生长。不同细胞对化学物质污染的反应是不一样的。未纯化的物质、试剂、水、血清、生长辅助因子及储存试剂的容器都可能成为化学性污染的来源。细胞培养的必需养分，如氨基酸，若浓度超过了合适的范围，也会对细胞产生毒性。同样，不同细胞系其最佳培养条件下对血清和缓冲液的要求是不一样的，在培养中应严格控制。玻璃制品清洗过程中残留的变性剂或肥皂(通常残留在瓶盖的内表面)是最常见的化学性污染。水是唯一一种在凝固时膨胀的化合物。因此在选择冻存细胞的容器时应考虑到这个因素。容器因水的膨胀而发生破裂是引起试剂污染的重要原因。为了避免金属离子、有机分子、细胞内毒素等物质对水的污染，在配制液体，清洗容器时必须使用不含杂质的超纯水。需要注意的是，超纯水放置过久其纯度会下降。在高压蒸气灭菌及蒸馏水时水经常被污染，因为高压蒸气锅及纯水机的常规维护后可能有少量的化学物质残留。为了保证水的纯度，我们应采取措施尽量避免化学物质的残留。动物血清是细胞培养中常用的天然培养基，但血清又是潜在的生物及化学污染的来源。由于血清采集于多个动物，而且不同厂商的生产工艺及质量各不相同，因此血清中许多成分的浓度存在很大的变异。血清对不同细胞的促生长能力及毒副作用取决于这些细胞的分化功能、组织来源及培养基的成分等因素。在进行一系列实验时，为了保证实验的可重复性，最好选用同一批次的血清。培养液、培养附加成分、试剂培养液、培养附加成分、试剂都可能成为化学性污染的来源。细胞培养使用的所有物质都应是高纯度的，并经过权威机构的鉴定，实验者本人也应对上述成分进行纯度鉴定。同时，正确配置和储存培养液及试剂也是非常重要的，应该采取标准的操作步骤，避免液体体积计算错误，混用类似化合物等错误。培养
坚果类食品霉菌污染防治措施 简介 坚果含有较多的蛋白质、钙以及多种维生素，可以为人体提供大脑、身体所需的多种营养。因具有高营养价值在最近几年成了人们最喜欢的零食。《中国2017年零食消费趋势》报告称，未来坚果市场仍将呈现高速发展趋势。然而，国家相关部门组织的监督抽检结果显示，坚果产品的质量安全已成为影响行业前进的重要因素，尤其是微生物项目，需要引起企业的高度警惕。 坚果类食品霉菌污染 虽然坚果营养丰富，对人体好处颇多，但很多坚果容易受到霉菌的侵染，霉菌是丝状真菌的俗称，意即“发霉的真菌”。霉菌和酵母在自然界很常见，在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料，称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝，可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。称霉菌孢子。霉菌可使食品腐败变质，破坏食品的色、香、味，降低食品的食用价值，是一种微生物。根据《GB19300-2014坚果与籽类食品》中规定，熟制坚果与籽类食品及直接食用的生干坚果与籽类食品中霉菌不能超过25cfu/g。 导致坚果类食品霉变的原因分析 导致坚果霉变的原因很多，如生产过程中杀菌不彻底、没有充分干燥等，在微量氧气或高湿度环境下，微生物繁殖，易导致发霉、霉变、涨袋的问题。其次是原料或包装材料受到污染，产品在生产加工过程中卫生条件控制不到位，生产工器具等设备设施清洗消毒不到位，特别可能由于杀菌工艺无法达到预设要求等都可能会造成霉菌的污染。不管哪种上述哪种原因，它们都有着与水份、温度、基质、通风等条件密切的关系，为此，只有充分的了解在生产过程中霉菌的污染方式，才能为下一步控制霉菌提供理论依据。 1）高湿度和水汽引起的霉菌污染 高湿度场所的霉菌污染，湿度高于85-90%的环境，霉菌会生长很快。坚果在加工过程中常产生大量水汽，易造成墙壁潮湿及冷凝水形成的情况。木质及混凝土结构的建材也会附着霉菌，故食品工厂内，宜少用木质的物体。 2）空气流动传播的霉菌污染 霉菌通过空气流动传播，生产车间空气净化效果不理想导致外界霉菌入侵。在建筑物的构造中，应保持通风才不易产生霉菌。在一些通风不良的地方，由于原料附着以及使用易吸湿的混凝土、木材及纤维等材质时，一旦有霉菌生长时，霉菌孢子会四散飞扬，其蔓延速度非常快速，直接或间接的污染成品、输送带、机械与操作人员手指等处。 3）水环境中的霉菌污染 在生产用水中，一些水槽、水桶、水管、自来水的水龙头、自来水管、地板与底板等处,由于长期贮水,所以污染情形特别常见。如，车间地面、明沟、气帽有积水潮湿;冷凝水的管路、墙壁、天花板、空调口等;生产过程产生的液体废弃物未及时清理出车间;离墙离地近的设备表面、潮湿墙面、冷风机容易产生冷凝水滋生霉菌。 4）人员、物料不洁的霉菌污染 操作人员和物料也是霉菌的污染源。包材的污染，如瓦楞纸箱，包装或坚果包装袋等生产过程防护不当造成的霉菌污染，进入车间的人员手部消毒不彻底、不洁净衣物、物料不洁净带入霉菌。
第十一章细胞培养的污染和排除 组织培养细胞被有害物污染是组织培养工作的大敌。应用组织培养进行研究工作，除需要好的实验设计和技术方法外，成败的关键还在于能否避免污染。一项好的研究,或建成的满意细胞系，往往由于遭受污染而前功尽弃。因此，一个组织培养工作者,要始终注意防止污染。 培养细胞被污染，人们最注意的是真菌、细菌和病毒等微生物。现在看来已经不够，当前“污染”一词的概念应该是，凡混入培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物，都应视为污染。从这一概念考虑，组织培养污染应包括以下几个方面： 微生物：真菌、细菌、支原体和病毒 化学物质：影响细胞生存的非细胞所需的化学成分 细胞：非同种的其它细胞 当然在培养中以微生物污染最为多见，化学污染较少；但近年随细胞种类增多,不同种细胞交叉污染却屡有发生，以致在ATCC接受入库细胞中特设同工酶检测一项，目的在于证明是否有HeLa等细胞的交叉污染。但细胞交叉污染只要工作细心，是容易防止的，而微生物污染在实际工作中却是最难防止和易发生的。 第一节污染途径 各种污染主要通过以下途径和媒介发生： 一.空气 空气是扩散微生物的主要途径。由于空气流动性大，在操作场地与外界隔离不严和消毒不充分的情况下，外界不洁空气很容易侵入造成污染。因此，培养设施不宜置于通风场所。现各实验室普遍应用净化工作台，能产生无菌的屏障气流，可防止不洁空气污染。净化工作台使用过久，过滤层受尘埃堵塞情况下，工作时不带口罩或外界
气流过强、污染空气均可进入操作野，导致污染。又不同季节和不同地区空气内含菌数不同；炎热夏季尤其南方多雨地区空气湿度大、含菌数量多，工作应特别注意。空气是不断流动的；虽用消毒措施也难以排出空气中所有微生物，但每立方米内含菌数不应超过1～5个。 二.清洗消毒 培养器皿和容器洗刷不净残留污物、培养用液灭菌不彻底等，都可引入有害物。 三.操作 实验操作马虎、动作不准确、消毒观念不强，使用的吸管、刀、剪沾染微生物等；或封瓶口时不严，都可发生污染。同时培养两种以上细胞，操作不慎，使用同一吸管或培养用液，可能导致细胞交叉污染。 四.血清 血清也是污染细胞的来源，有的市售血清制备水平低、检测不严，常已被支原体和病毒污染。 五.组织 初代培养组织常有污染；有的是在手术中污染，有的本身可能是被污染的组织(如已经发生溃烂的肿瘤组织)；手术用碘酒消毒后，擦拭不净可能混入碘污染。 第二节污染对细胞的影响 在细胞受有害物污染时间短、污染程度轻、并能及时排除污染物的情况下，细胞有可能恢复。当污染物持续存在于培养环境中时，轻者细胞增殖生长缓慢、分裂相减少、细胞变得粗糙、细胞轮廓增强，重者细胞停止增殖，分裂相消失，细胞质中出现大量堆积物，细胞变圆或崩溃从瓶壁脱落。但根据污染物的不同，对细胞的影响有别。 有的微生物如支原体，无致死毒性，可与细胞长期共存，对细胞形态和功能的影
题目如何控制食物的霉菌生长 作者姓名：张文涛 全安平 制作单位：平昌界牌小学
摘要：日常生活中，人类的许多食物在经历一段时间的搁置后容易变质，发霉，甚至腐烂。那么，到底是什么原因引起食物的以上变化，我们做了以下的一些对比试验来一探究竟。 关键词：食物霉菌控制生长对比实验
如何控制食物的霉菌生长 一、问题的提出 一些食物十分容易发霉，像面包、蛋糕、月饼、桔子等。食物在发霉后，就有很多细菌，不能吃了，得扔掉，非常可惜。如果我们有办法让霉菌不生长，或霉菌生长的速度慢一点，买过来的食物一时吃不了，就可以过几天吃。那我们该如何抑制这些食物霉菌的生长呢？我对此进行了研究。 月饼发霉桔子发霉 二、实验的准备 1、到超市买了两袋无馅面包。 2、准备了塑料袋、水、胶布、牙签、滴管、白纸等实验工具。 3、拍摄工具：数码照像机。 三、实验的过程 实验一：与储藏地方有关的实验 我把四块面包分别用滴管滴上水放在干净的白纸上，然后放在桌子、冰箱、卫生间、阳台四个地方，观察他们的发霉情况。
第一天情况第二天情况 第三天情况
实验一的情况分析：通过以上实验，我发现冰箱里的面包三天了都没有发霉，桌子上、卫生间和阳台上的面包都有不同程度的发霉。我猜测，面包上的霉菌生长可能和水分、温度、阳光、空气有关。于是我又进行了一系列的实验： 实验二：与水有关的实验 我用牙签划一些已经发霉面包上的霉菌在一小 块新的面包里，再用滴管滴上十滴水，放入塑料袋， 用胶布密封，然后放在桌子上。另一块也一样，但 它不滴水，也把它放在桌子上，一起观察。
第一天情况第二天情况 第三天情况： 实验二的情况分析：滴了水的面包三天后有很大一部分发霉，没滴水的面包三天后只有一点点发霉，看起来食物霉菌生长与水分有关，潮湿的食物霉菌生长的快。 实验三：与温度有关的实验 接着，我做了关于温度的实验。我分别用牙签划一些霉菌嵌在两块面包里，再分别在两块面包上用滴管滴十滴水放入塑料袋，都用胶布密封，一个放在桌子上，一个放在冰箱里。
霉菌污染及其防治措施 [关键词]霉菌污染；防霉；除霉 霉菌主要通过小型干性分生孢子附着在尘埃上，形成一定粒径的生物性粒子悬浮在空气中而传播，是一种能够在温暖和潮湿环境中迅速繁殖的微生物。近年来，虽然各级食品卫生监督部门都已开展了霉菌检测项目，但霉菌污染防治措施方面的报道却较少见。本文重点介绍预防食品霉菌污染的一些基本措施。 1霉菌的主要特点 霉菌的主要特点是好湿、好氧，最适生长温度较细菌低(20～30℃)，耐低水活性、低pH、高糖(或高盐)，对紫外线、药物的抵抗力较强。根据这些特点，可以制定相应的物理和化学防霉措施。 2防霉措施 2．1物理方法除湿、控温、过滤、除氧、紫外线照射等。 2．1．1除湿霉菌的污染多发生在高湿度环境。自然界中的霉菌大部分属于好湿性霉菌，相对湿度(RH)95％～100％最适合其生长，如毛霉、根霉、镰刀霉、交链孢霉、短柄霉、木霉等；少数种类属于耐干性霉菌，在较低的RH(85％～90％)也能正常生长，如青霉、曲霉等；只有很少种类属于好干性霉菌，在很低的RH(70％左右)也能生长，如局限曲霉、Euroti-um、walleia等。由于绝大多数霉菌属于好湿菌，将RH降低到90％以下就可抑制其生长，大大降低污染；如果能将RH降低到80％以下，就可以基本控制霉菌污染的发生。控制环境的温度和食品的水份，是防霉的基本手段之一。 2．1．2控温自然界中大多数霉菌是腐生菌，其最适生长温度为加－30℃；部分人与动物致病菌如小孢子菌、须发癣菌、烟曲霉等最适生长温度稍高(35～37℃)，除少数嗜冷菌和嗜温菌外，环境和食品中常见的霉菌在20～30℃以外的温度生长速度都非常缓慢。因此，只要调节食品加工和贮存环境在20～30℃以外，将可减少霉菌的污染。 2．1．3净化霉菌孢子(2～30μm)比细菌大得多，更容易通过净化设备除去。食品加工环境安装适当的净化设备，结合其他消毒措施，可以有效地防止空气中霉菌的污染。 2．1．4除氧几乎所有的霉菌都是好氧菌(氧浓度0.2％-2％才能生长)，在缺氧状态下，不能生长发育，时间长了还会死亡。粮食的存放，就是在密封垛充填惰性气体M或G02，再加些生石灰在垛底或垛顶而达到防霉的目的。 2．1．5紫外线照射虽然霉菌孢子对紫外线抵抗力较细菌强，但达到一定
细胞培养中常见的污染情况总结如下:常见的污染如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形， 培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现 絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D 或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作 3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清 很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。 4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色 的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是 它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽 然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终
细胞培养中常见的污染情况总结如下: 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差， 用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。 其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。 预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作 3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。 用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。 4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所
防霉菌控制程序 1. 目的： 建立防霉控制程序，为改善公司卫生条件，保障员工身体健康，减少因霉菌控制程序污染公司的原物料﹑半成品﹑成品的机会，保证公司产品的质量，控制疾病的传播.特制定本程序. 2. 范围： 适用于本公司 3. 定义： 4. 职责: 4.1 人事部负责制定防霉控制程序，并监督该程序的实施与监管。 4.2 各部门配合防霉控制程序的执行。 5. 运作程序： 5.1定期使用福尔马林彻底将工厂场所及仓库清除干净，包括墙壁，楼梯， 天花板，风扇及机器设备的内外。将37%的工业用福尔马林稀释如下：2份的福尔马林加98份的水，再令其自然风干，隔夜。擦洗变色的 墙壁，需要的话再重新油漆。请在雨季中或雨季开始时做防霉；为了 保护员工，请依照福尔马林的安全操作指示使用. 5.2每日清洁防霉措施 5.2.1用1份的漂白水加上20份的水稀释后，喷洒于物品的表面并擦干， 所使用过的毛巾在重复使用前要用漂白水清洗。 5.3包装车间的清洁防霉措施 5.3.1衣着保持整洁，使用干净的工作围裙。 5.3.2离开工作台再返回时，必须用肥皂洗手，双手必须保持非常干净， 生产线上的包装工人经常接触产品必须保持双手的清洁，尽可能地 常常洗手。 5.3.3洗手后必须使用烘干机或纸巾将双手烘干或擦拭干净，以防止手上 的水分不致于冷却凝结于产品表面起霉。 5.3.4不使用共同毛巾擦手，以防毛巾过湿使水分被员工相互之间携带至 产品表面从而引起产品表面发霉。 5.3.5每天以漂白水拖地，注意地板勿留任何积水或水滴。 5.4生产车间和包装车间等工作场所保持空气流通是很重要的。用较多的 风扇可避免停滞的空气，并注意勿将室外的灰尘带入。 5.5特殊情况可以使用防霉剂喷于产品表面以防止起霉，防霉剂卫生标 准必须符合产品进口商所在国的卫生标准且必须得到客户的批准后 方可使用。 制订：审批： 日期：
细胞培养中霉菌污染问题 Julius：我的细胞被污染了，表现为培养液内有浑浊，可见很多白色粉末的东西悬浮，之前发现一瓶有，就丢了，剩下的及时换液，清洗，可在传代后的第二天就又见浑浊，仍有部分细胞是贴壁的，可以看到很多”细胞“首尾相连成一条条的线状，可细胞怎会是线状生长呢？（抱歉没有拍下照片）请问是霉菌还是细菌污染呢？如何区分细菌，霉菌及真菌的污染。现在如何处理呢？污染控制区大家所说的用甲醛熏蒸，碘伏擦拭，或75％酒精擦拭，是用那种呢？时间要多长呢？ 因培养箱内还有别人的细胞，现在消毒处理时剩余的细胞该怎么办呀？还应注意什么呢？ liyq_1：应该是霉菌污染.其特点正是肉眼可见白色悬浮,形态呈线状. qxlbljys：1.细菌污染液体混浊,霉菌污染可看见霉苔但液体不混,所以你的细菌和霉菌同时污染 处理:扔掉,以免污染其他细胞 2.你说的线状生长实际上细胞已经接近死亡 3.可以将培养箱用75%的酒精擦拭,并停止细胞培养,然后用紫外消毒房间 sunandsuny：由于细菌的生长分裂呈指数级的生长方式,所以细菌污染后,培养瓶很快就是浑浊的了,但一般不像霉菌污染,霉菌有菌丝,往往呈絮状漂浮,甚至有丝状突起.因此霉菌污染和细菌污染在肉眼上有时可以大体上区分,这只是一些常规的经验,如果要具体确定,还 要通过涂片染色,看看是球菌或杆菌或是弧菌． 叶知秋：原代培养的软骨细胞，贴壁良好，长势旺盛，可霉菌悄然而至，大有疯长之势。不想放弃，该如何处理，敬请指点。 ratman：配制以下5X抗生素培养液：AMP:100ug/ml, gentamycin 100ug/ml, 两性霉素B 2ug/ml, 制霉菌素1.5ug/ml, 脱氧胆酸钠10ug/ml，进行冲击，培养时间为8小时后换液，改用1X抗生素培养液进行培养，以上配方为1x配方。每天换液。 icesugar75：别救了。霉菌是抗拒不了地，别让这瓶细胞把其它的污染了最重要。
细胞培养中常见的污染情况总结如下: 常见的污染如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液 一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养 液是否存在浑浊的现象！ 可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的 消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期 清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。 其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。 预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就 要注意操作 3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体 感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。 用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用 8ug/ml的浓度。 4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。
一、针对于外部环境霉菌易产生地方和原因 1．生产车间墙壁潮湿，在潮湿部位容易生长霉菌。 2．车间存在冷凝水的管路、墙壁等容易生长霉菌，水管的破裂，也会导致霉菌的产生。 3．空气中总是包含一定水蒸气，只不过大部分情况下我们看不到，不过，当水蒸气液化的时候，比如当我们沐浴或是泡澡的时候，浴室内镜子的表面就会变得潮湿，这时候我们就能够看到他们。热空气中包含很多的水分，当热空气冷却时，水分就会冷凝、液化。冷凝、液化通常是发生在房屋中温度最低的部位，比如墙壁上温度低的部位，正是在这些温度低的部位，最容易产生霉菌。 4．车间里无法保证正常的换气，无法让车间保证在规定湿度情况下，容易生长霉菌。 5．车间忽冷忽热，容易产生冷凝水的地方，容易糟到霉菌侵害。 6．离墙近的设备容易产生冷凝水，容易产生霉菌。 GAGGAGAGGAFFFFAFAF
7．温度相对较低的车间的门，请一直保持关闭状态。如果这些温度较低车间的门没有关闭的话，那么旁边车间传过来的热空气涌进行，就形成很高的湿度，从而在空气冷却的时候形成液化，容易生长霉菌。 8．保证空调的正常运转，保证车间内部空气能够达到要求指标，空调的换气程度好坏直接影响到霉菌的产生。如果车间能保证及时将含有大量水份的空气排出车间，则极大程度缩小了可能存在霉菌的可能性。 二、霉菌一旦进入食品， 影响霉菌生长繁殖及产毒的因素是很多的，与食品关系密切的有水份、温度、基质、通风等条件，为此，控制这些条件，可以对食品中霉菌分布及产毒造成很大的影响。 1．水份 霉菌生长繁殖主要的条件之一是必须保持一定的水份，一般来说，米麦类水份在14%以下，大豆类在11%以下，干菜和干果品在30%以下，微生物是较难生长的。食品中真正 GAGGAGAGGAFFFFAFAF
精心整理 作者姓名：张文涛 全安平 制作单位：平昌界牌小学 2、准备了塑料袋、水、胶布、牙签、滴管、白纸等实验工具。 3、拍摄工具：数码照像机。 三、实验的过程 ??实验一：与储藏地方有关的实验
我把四块面包分别用滴管滴上水放在干净的白纸上，然后放在桌子、冰箱、卫生间、阳台四个地方，观察他们的发霉情况。 时间 环境 第一天第二天第三天 桌子上没有发霉有一点发霉 有很大一 部分发霉 冰箱里没有发霉没有发霉没有发霉 卫生间没有发霉有一部分发霉 有很大一 部分发霉 阳台上没有发霉有一点发霉有一部分发霉 第一天情况?? ?第二天情况??? 第三天情况 实验一的情况分析：通过以上实验，我发现冰箱里的面包三天了都没有发霉，桌子上、卫生间和阳台上的面包都有不同程度的发霉。我猜测，面包上的霉菌生长可能和水分、温度、阳光、空气有关。于是我又进行了一系列的实验： 实验二：与水有关的实验? 我用牙签划一些已经发霉面包上的霉菌在一小块新的面包里，再 上。另一块也一样，但它不滴水，也把它放在桌子上，一起观察。?? 推测 实验条件现象 不变改变第一天情况第二天情况第三天情况 与水温度、水分滴水没有发霉有一部分有很大
第一天情 况??????????第二天情况? ?第三天情况：? ? 实验二的情况分析：滴了水的面包三天后有很大一部分发霉，没滴水的面包三天后只有一点点发霉，看起来食物霉菌生长与水分有关，潮湿的食物霉菌 生长的快。 实验三：与温度有关的实验 接着，我做了关于温度的实验。我分别用牙签划一些霉菌嵌在两块面包里，再分别在两块面包上用滴管滴十滴水放入塑料袋，都用胶布密封，一个放在桌子上，一个放在冰箱里。 推测 实验条件现象 不变改变第一天情况第二天情况第三天情况 与温度水分 空气 温 度 冰箱 里 没有发霉没有发霉没有发霉 分有关空气、 阳光等 发霉一部分发霉不滴没有发霉没有发霉有一点点 发霉