斑马鱼免疫球蛋白M（IgM）ELISA试剂盒使用方法
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T
0.06ng/ml – 2.5ng/ml
使用目的：
本试剂盒用于测定斑马鱼血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白M（IgM）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中斑马鱼免疫球蛋白M（IgM）水平。用纯化的斑马鱼免疫球蛋白M（IgM）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白M（IgM），再与HRP标记的免疫球蛋白M（IgM）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白M（IgM）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中斑马鱼免疫球蛋白M（IgM）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
ELISA检测方法有哪些？ 酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）是研究蛋白抗体的重要方法。它是采用抗原与抗体的特异结合将被测物质与酶标抗体进行直接或间接结合，然后通过标记酶与底物产生颜色反应进行定性和定量分析。那么，它与其它检测方法的灵敏度及您了解吗？跟着小编往下看 ELISA通常分为四种类型：直接法、间接法、竞争法、夹心法等，直接上图： 直接法（Direct ELISA）仅需要抗原和酶标一抗，操作简便，可避免交叉反应，然而该方法要求酶标一抗有较高的特异性要求，同时也并非所有的一抗适合标记处理。直接法在实际运用中并不多见，它并不能对样本中抗体进行定量分析，因为样本中抗体是非酶标抗体，无法进行后续显色，但是该法经过改进就是竞争性ELISA方法，见后文。 间接法（Indirect ELISA）使用了二抗增加信号强度，也使抗体的选择多样化，然而间接法容易产生交叉反应。间接法只能用于测定抗体，主要用于疾病的诊断，其优点是只需要改变包被抗原，酶标抗体是通用的。 夹心法（Sandwich ELISA）分为双抗体夹心法和双抗原夹心法： 双抗体夹心法中抗原被两个抗体——捕捉抗体和检测抗体，结合于不同位点。捕捉抗体固定于载体上，检测抗体通过结合抗原进行显色分析。应用于双抗体夹心法检测的抗体需是单抗，而且对同一抗原结合位点不同，如此才能避免交叉反应或两种抗体竞争性结合同一位点。夹心法具有高灵敏度、高专一性的优势，但该法只适用于有多个结合位点的抗原检测，主要用于检测各种大分子抗原——例如在医学检测中测定HBsAg、HBeAg、AFP等。由于双抗体夹心法特异性高，在检测过程中有时会将样本和酶标抗体同时加入进行反应（一步法），此时如果样本中抗原含量过高会导致其与固相抗体和酶标抗体均有结合而不形成“夹心复合物”，
—————————————————————————鸡免疫球蛋白M（IgM）定量检测试剂盒（ELISA） 使用说明书 仅供科研使用，不得用于医学诊断。 使用前仔细阅读本说明书。 用途：用于定量检测鸡血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白M（IgM）的含量。 工作原理 本试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法（ELISA），测定样品中鸡免疫球蛋白M（IgM）的水平。向预先包被鸡免疫球蛋白M（IgM）抗体的酶标孔中加入标准品、待测样本和HRP标记的免疫球蛋白M（IgM）抗体，经过温育和洗涤，去除未结合的组分，然后再加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中鸡免疫球蛋白M（IgM）的浓度呈正相关。 试剂盒组成 30、15、7.25、3.62、1.81 需要而未提供的试剂和器材 1． 37℃恒温箱。 2．标准规格酶标仪。 3．精密移液器及一次性吸头 4．蒸馏水， 5．一次性试管 6．吸水纸 注意事项 1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标
包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差 3．建议所有标准品、样本都做双份检测。 4．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 5．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。 6．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。 洗板方法 手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中 标本要求 1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 操作程序 1．分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl；在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。轻轻晃动混匀，37℃温育60分钟。 2．弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。如此重复5次，拍干。 3．每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 4．取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 5．测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。 6．根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。 操作程序总结：
丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法） 【检验目的】 定性测定人血清（浆）中的HCV抗体，用于临床术前的初筛查检测。 【实验原理】 丙型肝炎病毒抗体诊断试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗人IgG抗体（anti-IgG Ab），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被丙肝混合抗原（Core、NS3、NS4、NS5）和人IgG抗体。检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗人IgG抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Atenti-IgG Ab-HCV Ab-HCV Ag”夹心物而凝聚显色游离金标鼠抗人IgG 抗体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色，15分钟内观察结果即可。 【样本要求】 1、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。 2、如果血清和血浆样品收集后 7天内检测，样品须放在0-4C保存；大于7天必须-20C—下冷冻保存。 3、常规抗凝剂不影响实验结果。 4、溶血、粘稠及高指标本不适于本试剂。含特殊物质的标本可能会导致检测结果不稳定， 在检测前须清除。 5、在标本中加0.1%NaN3不影响实验结果。 【试验方法】 测试条： 1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。 2、将胶体金试纸条从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。 3、用塑料滴管加1滴（10卩）样本血清或血浆，加到试纸条指示箭头下端的加样处。 4、随即滴加2滴样本稀释液（约100^）1。 5、加样后，阳性标本可在1~15分钟内检出，建议15分钟后在最终观察并记录实验结果。 测试卡： 1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。 2、将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。 3、用塑料滴管加1滴样本血清或血浆，加到测试卡上的 S孔。 4、随即滴加2滴（约100 ^）1样本稀释液到测试卡上的 D孔。 5、加样后，阳性标本可在1~15分钟内检出，建议15分钟后在最终观察并记录实验结果。 【结果判断】 阳性：试纸条/试卡在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。 阴性：试纸条/试卡只在对照线位置出现一条紫红色条带。 失效：对照区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质 损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试纸条/试卡重新测试。
ELISA检测 ----- 固相捕获法测IgM抗体 在病原体急性感染的诊断中，通常需检测IgM抗体，如急性甲型肝炎诊断的血清抗HAVIgM检测、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBc lgM检测和TORCH项目的系列IgM检测等。IgM抗体也有使用间接法测定的，如目前在市场上可见到的有些TORCH系列的IgM检测试剂盒。在使用间接法测IgM抗体时，由于临床血清样本中含有高浓度的IgG抗体，其中部分特异IgG抗体将与IgM抗体竞争与固相抗原结合，从而干扰IgM抗体的检测。 因此，在使用间接法测定IgM抗体时，通常须将血清样本用抗人IgG抗体或SPA预处理，以去除IgG的干扰。这样不但测定较为繁琐，而且影响测定的特异性和灵敏度。目前，常用的IgM抗体检测方法为捕获法，即以抗人IgM抗体(抗人u链)作为固相抗体，当加入血清标本时，其中的IgM类抗体(特异的和非特异的)即可被固相抗体捕获，再加入特异抗原，其与固相上捕获的IgM抗体结合后，加入酶标抗特异抗原的抗体，最后加入底物显色。具体操作步骤如下： 1．首先将抗人IgMbt链抗体于碳酸盐缓冲液中40c下过夜包被聚苯乙烯等固相，形成固相抗体，洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭，洗涤去除未结合的部分及杂质。 2．加入含待测IgM抗体的临床样本如血清等，温育一定时间后洗板；此时，待测样本中的IgM抗体就会与固相上的抗P链抗体反应而吸附于固相上。 3．加入特异的抗原如HAV抗原、HBcAg等，温育一定时间后洗板；此时，特异抗原就会与固相上的特异IgM抗体发生反应。 4．加入酶标记的抗特异抗原的抗体，温育一定时间后洗板；此时，在固相上即形成相应的抗原抗体复合物。 5．加入酶底物，温育显色测定 本方法要着重注意的是RF(1gM类)及其他非特异IgM的干扰。RF(1gM类)由于其能与固相抗人u 链抗体结合，并可与随后加入的酶标抗体(动物IgG)反应，从而导致假阳性反应。而非特异IgM由于其
丙型肝炎病毒抗体检测试剂（胶体金法） 说明书 【产品名称】 通用名称：丙型肝炎病毒抗体检测试剂（胶体金法） 【包装规格】 条型单人份：50人份/盒；板型单人份:40人份/盒。 【预期用途】 本产品用于定性检测人血清.血浆样本中的丙型肝炎病毒（HCV）抗体。 丙型肝炎病毒是一种很小的.具有包膜的单股正链RNA病毒，是主要引起非肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒，据文献报道，90%以上非肠道传播的非甲非乙型肝炎（NANBH）和25%以上急性散发性肝炎均为HCV感染所致，且35-50%的非甲非乙型肝炎发展为慢性肝炎，与肝癌的发生相关。HCV主要传播通过血源传播，此外还可以其他方式如通过母婴垂直传播，家庭日常接触和性传播等。 【检验原理】 本试剂采用高度特异性的抗体抗原反应原理及胶体金标记免疫层析分析技术，试剂含有被预先固定于膜上检测区（T）的包被用HCV重组抗原。 检测时，样本滴入试剂加样处于预包被的胶体金颗粒结合的标记用HCV重组抗原反应。然后，混合物再毛细效应下向上层析。如是阳性，标记用HCV重组抗原金标粒子在层析过程中先于样本中的HCV重组抗体结合，随后结合物会被固定在膜上的包被用HCV重组抗原结合，在检测区内（T）会出现一条紫红色条带。这条带是包被用HCV重组抗原-HCV抗体-标记用HCV重组抗原金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，则检测区内（T）将没有紫红色条带。无论HCV抗体是否存在于样本血样中，一条紫红色条带都会出现在质控区内（C）.质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够样本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂内控标准。 【主要组成成分】 丙型肝炎病毒抗体检测试剂：包被用HCV重组抗原，标记用HCV重组抗原。羊抗鼠IgG，硝酸纤维素膜，玻璃纤维； 缓冲液：成份为氯化钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钠； 25ul吸管 检测记录表 各组份的包装数量如下： 说明：不同批号试剂中各组份不能够互换使用，以免产生错误结果。
ELISA（酶联免疫吸附测定，enzyme linked immunosorbent assay）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。 基本原理： ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。 ③在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 ④加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 双抗夹心法 夹心法常用于检测大分子抗原，一般的操作步骤为: ①将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体； ②加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结； ③洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结； ④洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结； ⑤洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果。 间接法 间接法常用于检测抗体，一般的操作步骤为： ①将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原。
②加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。 ③洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结。 ④洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。 竞争法 竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为： ①将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体； ②加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结； ③加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。 ④洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅。 注：当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA。
免疫球蛋白IgM测定 1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2原理 免疫透射比浊法 抗免疫球蛋白M抗体和样本中的抗原形成抗原抗体复合物，出现凝集，进行透射比浊检测。通过加入PEG可促使反应迅速达到终点，可增加灵敏度，降低样本中抗原过剩导致假阴性的风险。 3标本要求 3.1使用新鲜血清,不使用血浆. 3.2在采集血液后2h分离血清. 3.3 8h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置―150C――200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次. 3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.
4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司IgM试剂盒,国械注进20142405056 YZB/GER 5724-2014） 4.1.1 试剂组成 R1:TRIS 缓冲液：20 mmol/l，pH 8.0；氯化钠：200 mmol/L；PEG：3.6%；防腐剂和稳定剂。 R2:抗人免疫球蛋白M抗体（羊）：取决于滴度；TRIS缓冲液：20 mmol/l；氯化钠：150 mmol/L；防腐剂 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8°C下保存期限：见试剂标签上的有效期。机上稳定期：90天。 4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。 4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的IgM校准品对自动分析仪进行校准 4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤 6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。 6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。 6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。 6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。 7 质量控制
浅谈人免疫球蛋白M（IgM）的研制 杨向有1李月2 （1上海新兴医药股份有限公司上海200135; 2山西康宝生物制品股份有限公司山西长治046011) 【摘要】目的：从人血浆中分离IgM；方法：采用低温乙醇法从人血浆中分离出组份Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀（含有大多数种类的人免疫球蛋白）；通过改变条件先把人免疫球蛋白中含量最多的IgG分离出去，而后上柱层析分离出分子量最大人免疫球蛋白IgM；配制除菌后制成冻干制剂。采用S/D灭活法和干热灭活法对产品进行病毒灭活。结果：制成纯度大于95％的IgM冻干制剂结论：此方法可以很好的从人血浆中提取出IgM，制备人免疫球蛋白M（IgM）能更充分的利用血浆中的有效成分，具有很好的药用价值和广阔的市场前景。 Abstract Objective:Separate IgM from human plasma;Methods:It was isolated from human plasma component precipitationⅠⅡⅢby low temperature ethanol(With most types of human immunoglobulin) First one by changing the conditions of the most abundant immunoglobulin IgG separated, Then isolated by chromatography on the molecular weight of the largest human immunoglobulin IgM, Made lyophilized after the preparation and sterilization. Use of S / D inactivation and dry heat-inactivated virus inactivation method products;Results: Made more than 95% of the IgM purity of lyophilized Conclusion: This method can well be extracted from human plasma IgM, preparation of human immunoglobulin M (IgM) to the full utilization of the active ingredient in plasma, with good medicinal value and broad market prospects. 【关键词】人免疫球蛋白M（IgM），低温乙醇法，层析，病毒灭活 Key words:Human Immunoglobulin, Low temperature ethanol method,chromatog raphy, inactivation of virus 1. 人免疫球蛋白M（IgM）的简介 1.1人免疫球蛋白M（IgM） 免疫球蛋白由重链和轻链组成，根据重链(Heavy chain，H链)恒定区化学结构的不同，相应的免疫球蛋白被划分为多种类型，分别为免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白E(IgE)$1免疫球蛋白G(IgG)。[1-2] 人免疫球蛋白M (IgM) 存在于人的血清中，占血清免疫球蛋白总量的5~10%，血清浓度约1mg/ml，[3-4]主要由脾脏中浆细胞合成，一个IgM分子由5个单体通过J链连接成五聚体，有较高抗原结合价，也是五类免疫球蛋白（IgA、IgD、IgE 、IgG、IgM）中分子量最大的，其分子量为950k道尔顿，故又称为巨球蛋白。IgM 对防止菌血症起主要作用。[4] 1.2人免疫球蛋白M（IgM）与其他人免疫球蛋白各种性质的比较 表1：人免疫球蛋白M（IgM）与其他人免疫球蛋白各种性质的比较[2]
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 生活常识分享免疫球蛋白igm偏高的原因是什么 导语：免疫球蛋白img是人血浆内免疫蛋白球五种中的的一种，又称免疫蛋白m。免疫球蛋白igm是人血浆内不可缺少的免疫细胞。但是并不代表免疫球蛋白i 免疫球蛋白img是人血浆内免疫蛋白球五种中的的一种，又称免疫蛋白m。免疫球蛋白igm是人血浆内不可缺少的免疫细胞。但是并不代表免疫球蛋白igm含量越多越好，这种看法是错误的。免疫球蛋白img偏高会影响身体健康。下面就为大家介绍一些导致免疫球蛋白img 偏高的原因，希望能对大家有所帮助。 球蛋白偏高与慢性肝病机体免疫系统有关人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白（γ-球蛋白）中可分为五类即免疫球蛋白G （IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D （IgD）和免疫球蛋白E（IgE）其中IgG是最主要的免疫球蛋白约占人血浆丙种球蛋白的70分子量约15万含糖2～3IgG分子由4条肽链组成其中分子量为2.5万的肽链称轻链分子量为5万的肽链称重链轻链与重链之间通过二硫键（-S-S-）相连接免疫球蛋白是机体受抗原（如病原体）刺激后产生的其主要作用是与抗原起免疫反应生成抗原-抗体复合物从而阻断病原体对机体的危害使病原体失去致病作用另一方面免疫球蛋白有时也有致病作用在慢性乙肝患者长期白、球比例倒置警惕有肝硬化迹象 1.临床上的过敏症状如花粉引起的支气管痉挛青霉素导致全身过敏反应皮肤荨麻疹（俗称风疹块）等都是由免疫球蛋白制剂能增强人体抗病毒的能力可作药用.如注射人血清或人胎盘中提取的丙种球蛋白制剂可防治麻疹传染性肝炎等传染病. 2.偏高说明是过敏性体质。体内有过敏源。用些增强体质的中成药
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢巨细胞病毒igm抗体偏高介绍 导语：虽说巨细胞病毒是一种古老的病毒，到现在已经有很长一段的研究时间，但是每一个人的感染率还是很高的。这种病毒感染后的具体表现是和感染者 虽说巨细胞病毒是一种古老的病毒，到现在已经有很长一段的研究时间，但是每一个人的感染率还是很高的。这种病毒感染后的具体表现是和感染者的体质、免疫力和年龄都有关系。如果孕妇感染了这种病毒，轻者影响宝宝的发育，严重的话会直接导致腹中胎儿死亡。 新生儿的巨细胞病毒感染可在分娩过程中经过母亲产道时的接触而感染，或通过母乳喂养感染，还可通过多次输血感染。大多数新生儿感染巨细胞病毒后多无不良反应，但对早产儿和体弱儿有较大的危险，以神经肌肉受损为主要特点。幼儿与儿童感染后多无明显症状，偶见肝脾肿大、肝功能异常和呼吸道疾病。青少年与成人感染多无症状，少数可出现发热、肝炎、全身淋巴结肿大或各种疹子，少见的并发症有肺炎、心肌炎、心包炎、神经炎、神经根炎、脑炎；细菌性脑膜炎、血小板减少性紫癜、溶血性贫血和视网膜炎。巨细胞病毒是一种疱疹病毒组DNA病毒。分布广泛，其他动物皆可遭受感染，引起以生殖泌尿系统，中枢神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染，从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。巨细胞病毒亦称细胞包涵体病毒，由于感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体，故名。 新生儿生命力还不是很旺盛，但是他们感染这种病毒的机率和成年人一样的。因此如果新生儿感染了这种病毒的话，那么能够治愈的概率是低之又低。父母在孩子出生后一定要多注意他们的身体状况，确保他们是健康的。而且也要确保妈妈的健康，因为这种病毒也会通过母乳传染。 预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏
igm和igg的区别 IgM和IgG均属于免疫球蛋白家族。免疫球蛋白是机体在抗原物质刺激下由浆细胞产生的一类能与抗原特异性结合的血清活性成分。根据其分子结构和抗原特异性的不同，将免疫球蛋白分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。 免疫球蛋白的种类一般情况下，在被病毒感染后，机体会产生一系列的变化来抵御这种入侵，其中免疫球蛋白的含量会发生如所示变化：抗原初次进入机体后，经过一定的潜伏期产生浆细胞并合成分泌抗体。最早出现的是IgM，但该抗体维持时间短，消失快，在血中持续数日至数周。其次出现的是IgG。 感染过程中IgM与IgG的含量变化IgG是免疫球蛋白的主要成分，是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白，在IgM接近消失时，IgG的含量达到高峰，并在血中持续较长时间。当数月乃至数年再次接触相同抗原时，最初原抗体量稍有下降，可能是由于一部分原有抗体被再次进入的抗原所结合，从而暂时降低了抗体含量，但短期内抗体含量迅速增加，可能比原来抗体含量高数倍至数十倍，以IgG为主，在体内持续时间也长，IgM很少增加。本次疫情中，我们通过对COVID-19患者进行研究发现，病毒侵入人体后，IgM抗体大约需要5~7天产生，IgG抗体在10~15天时产生。IgM与IgG同属于免疫球蛋白，有何区别，我们从含量、产生时间及对临床诊断作用等方面对二者区别做IgG是免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG，IgG)的缩写，是血清主要的抗体成分，约占血清Ig的75%，IgG是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白。IgG的功能作用主要在机体免疫中起保护作用，大多数抗菌、抗病毒;IgM是免疫应答中首先分泌的抗体，不能通过胎盘，IgM占血清免疫球蛋白总量的5%~10%，Igm是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，血清中检出IgM，提示新近发生感染，可用于感染的早期诊断。
丙型肝炎病毒抗体是什么 在生活中有很多疾病对我们身体的危害很大，特别是肝炎，肝炎对人们的危害特别大，如果肝炎不好好治疗，那么肝硬化的几率就大了，而肝硬化恶化成为肝癌的几率就更大了，所以面对这个肝炎的时候我们必须要及时做治疗，肝炎的类型有很多种，有种肝炎叫做丙型肝炎，那么这个丙型肝炎病毒抗体是什么很多人不知道，下面我们来给大家介绍一下相关内容。 丙肝病毒抗体呈现阳性的话，说明感染了丙肝病毒。丙肝病毒抗体呈阴性，那证明是健康的。所以做丙肝病毒抗体的检查是相当重要的，能够正确的判断出是否有丙肝病症的出现。 丙肝抗体是由于人体免疫细胞对丙肝病毒感染所做出的反 应而产生的，抗体在血液中循环而且可以检测到存在。丙肝抗体检验就是通过检验丙肝抗体的存在，来确定丙肝病毒的存在，而不是检验病毒本身 能否及时有效的检查出丙肝抗体的存在，是关乎到患者能否好转的关键，因此患者在做检查时，一定要选择准确率高的检查技术，可以一次性准确的检查出患者的体内是否有丙肝病毒的存
在，极大的增加了丙肝患者好转的几率。 一旦查出丙肝抗体阳性，只能说明曾经感染过，但是现在体内是否还有病毒，则需要进行 HCV-RNA的测试。HCV-RNA是探测血液中丙肝病毒的实际存在情况。这是一个很灵敏的测试，可以在感染两星期内检测到病毒。因此患者一定要定期的到医院做检查，根据患者病情的不同，可以间隔3个月或者半年检查一次，如果病情严重就需哟经常的检查。 HCV-RNA是表示体内感染HCV的直接指标，因其较丙型肝炎抗体出现早，故是丙型肝炎病原学诊断和判断传染性的一项有用的指标，一旦HCV-RNA呈阳性状况就一定是丙肝病毒感染了。 对于丙肝病毒抗体有了初步的认识了，最后肝病专家提醒，如果被诊断出丙肝，就要积极的配合医生的治疗，不要对此病忽视了。因为丙肝不积极的及时的治疗，后果是相当严重的。因为在丙肝的患者中百分之20的人会转化为肝硬化，所以对于丙肝的治疗是相当重要的。 如果体内有这个肝炎的抗体，那么我们就不容易患上这样的疾病，抗体对人们来说是很好的，虽然说有抗体，但是要检查抗体是阳性还是阴性，这个也代表不同的抗体，对人们的保护力也
ELISA双抗体夹心法检测抗原 实验时间：实验地点：实验人： 1实验目的 1.阐述ELISA（酶联免疫吸附测定）的原理，列举ELISA类型 2.完成ELISA的基本操作 3.学会分析实验结果 4.能根据需要设计相应的ELISAS实验流程 2实验原理 ELISA：是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 ELISA双抗体夹心法常用于检测抗原。将已知道抗体吸附于固相载体上，加入待检含相应抗原的标本使之结合反应。然后洗涤，再加入酶标抗体和底物进行测定。但该方法只适用于检测多价大分子抗原，不适合检测小分子半抗原。 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。通过加入与酶反应的底物后显色，根据颜色的深浅可以判断样品中物质的含量，进行定性或定量的分析，可以间接放大免疫反应结果。所以说ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。 酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果,还可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。 3实验材料 1.酶标反应板（包被有抗CEA抗体） 2.CEA标准品（0ng/ml，5ng/ml，10ng/ml，20ng/ml，40ng/ml，80ng/ml） 3.样品1和样品2 4.酶标抗体（酶结合物） 5.底物液A和底物液B（显色剂A和B） 6.终止液 7.洗涤液
梅毒螺旋体IgM抗体检测的临床意义 作者：李步荣，贺军涛，张毅，岳天海，李丽华，张小玉 【Abstract】 AIM: To evaluate the clinical significance of detection of IgM antibody against Treponema pallidum in diagnosing syphilis. METHODS: The serum samples of 90 syphilitic patients were collected and treated with IgG/RF immunoabsorbent, then were detected for TP IgM with Treponema pallidum particle agglutination(TPPA) assay. The serum samples were also detected for TP DNA by RT PCR method. RESULTS: The TP IgM positive rates were 75.9%, 100% and 77.8% in primary syphilis, secondary syphilis and latent syphilis, respectively. The total positive rate of TP IgM was 81.1%(73/90) in syphilis sera. The positive rates were statistically different between the 3 different syphilis groups（χ2=90.20, υ=2, P<0.05）. The TP DNA positive rate was 78.9%（71/90）. There was no significant difference between the positive rates of TP IgM and TP DNA(χ2=0.5, υ=1, P>0.05). CONCLUSION: The detection of IgM antibody against Treponema pallidum in serum is important for the clinical diagnosis of syphilis. 【Keywords】syphilis; IgM antibodies; treponema pallidum
丙肝抗体检测 什么是丙肝抗体检测 1、丙肝抗体是由于人体免疫细胞对丙肝病毒感染所做出的反应而产生的。抗体在血液中循环而且经常性检测到存在。丙肝抗体检验就是通过检验丙肝抗体的存在，来确定之前病毒的存在，而不是检验病毒本身。 2、丙肝抗体对身体没有任何的保护作用，如果丙肝抗体呈阳性，并不一定就代表患有了丙肝。是否患有丙肝的判断依据是血液中是否含有丙肝病毒，所以丙肝抗体呈阳性的患者不要过于担心，可以进一步的检查来加以确定。 3、丙肝通过母婴垂直方式进行传播，被丙肝病毒感染的母亲主要是在新生儿出生或者哺乳期将丙肝病毒传染给孩子。而目前随着医学的进步，丙肝的母婴阻断措施日渐完善，通过垂直方式传播丙肝的机会越来越小。 4、丙肝抗体检测可以判断患者是否感染丙肝病毒。在丙肝抗体检查中丙肝抗体是阴性，说明患者目前没有感染丙肝病毒。丙肝抗体是阳性，说明曾经感染过丙肝病毒，目前体内可能还存在病毒。 丙肝抗体检测阴性 1、丙肝是病毒性肝炎的一种，与乙肝具有着很多相同点有着很多不同点。丙肝抗体其正常值是1000，如果丙肝抗体的值大于1000，预示着丙肝抗体已呈阳性，从而丙肝抗体阳性也说明了丙肝病毒的出现。丙肝不同于其它的疾病，因此，丙肝患者应时刻提高警惕，以防病情发生恶化。 2、丙肝抗体阴性一般是指没有感染丙型肝炎病毒。相对于丙肝抗体阴性，丙肝抗体阳性患者的血中含有丙型肝炎病毒，具有传染性，其丙型肝炎的发生率显著高于输丙肝抗体阴性者的血。 3、我们对丙肝抗体阴性也要有所了解，以便更好的预防丙肝。肝病专家介绍说感染丙型肝炎病毒的初期，患者没有任何不舒服的感觉。在5-12周的潜伏期后，只有大约四分之一的病人会出现食欲差、疲倦、黄疸等症状;而大部分的患者却没有任何感觉。而且，感染后大约要经过二十年左右才会出现肝硬化。因此，有很多人根本不知道自己已经被感染。 4、对于丙肝抗体阴性要具体问题具体分析，要想知道自己有没有感染上，最重要的办法是查看血液中是否有病毒。病人在急性感染后的数天内，血清中会出现病毒RNA，并且在产生抗体前一直会存在几个月，所以通过检查病毒抗原或病毒RNA可以帮助早期诊断。 5、目前用的试剂是利用丙型肝炎病毒基因所产生的病毒蛋白做成的，所以，并不能直接检查。而且，由于血液中的丙型肝炎数量相当少，有时甚至测不出。这并不表示没有丙型肝炎了，只是代表病毒当时的活性很低。 丙肝抗体检测阳性 丙肝抗体阳性也分为假阳性和弱阳性：
丙肝感染诊断中采取丙肝核心抗原联合丙肝抗体检测的应用效果研究 发表时间：2018-11-14T09:36:51.290Z 来源：《健康世界》2018年18期作者：苏鸿凯徐新华 [导读] 研究分析在丙肝诊断过程中采用丙型肝炎病毒 RNA（HCV-RNA）、丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg） 苏鸿凯徐新华 中山大学肿瘤防治中心检验科华南肿瘤学国家重点实验室肿瘤医学协同创新中心 510060 摘要：目的研究分析在丙肝诊断过程中采用丙型肝炎病毒 RNA（HCV-RNA）、丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）、丙型肝炎抗体（HCV-Ab）联合诊断的效果。方法选取在本院能接受治疗的住院患者作为研究对象，选取时间段为2016年1月至2018年1月，共计1200例，均行ELISA法开展HCV-cAg与 HCV-Ab 的联合检测，针对存在有单项、两项阳性患者开展HCV-RNA检测。结果在行联合检测之后存在单项、两项阳性患者共计49例，经HCV-RNA 阳性作为分组标准，HCV-cAg以及HCV-Ab均有着较高的检出率，两种方式联用对HCV的检出率效果良好。结论临床上在丙肝感染诊断中，运用HCV-cAg以及HCV-Ab检测效果良好，可相互补充，优势显著，有利于减低丙肝漏检率。 关键词：丙型肝炎病毒；丙肝病毒核心抗原；丙肝抗体；效果 丙型肝炎是丙型肝炎病毒（HCV）引起的一种严重传染病，在全世界范围内的危害都很巨大，国内人群感染率达到了3%左右，有很多的早期丙型肝炎病苏鸿凯徐新华毒感染都不具备疾病特异性，即使出现一些症状也都比较隐蔽[1]，而且该病很容易转变为慢性病，如果不能及时有效的采取治疗，逐步发展可能成为肝癌或者肝硬化，给患者的生命健康和生活质量都带来巨大的影响。丙型肝炎病毒属于单股正链RNA病毒，传播途径主要是密切接触和注射、输血等，因此如果能够早检出早发现病毒感染，就能有效采取措施进行治疗，对阻断丙型肝炎的传播具有重要意义[2]。本次研究选取患者进行丙型肝炎抗体（HCV-Ab）和丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）联合检测，对检测结果呈现单项阳性或者双项阳性的患者继续病毒RNA的检测，进一步探究和分析联合检测方法在早期疾病诊断上的实际应用价值，现将报道整理如下。 1临床资料和方法 1.1基础资料 选取在本院能接受治疗的住院患者作为研究对象，选取时间段为2016年1月至2018年1月，共计1200例，其中男性683例，女性517例，年龄在18岁至70岁之间。 1.2试剂和方法 丙型肝炎病毒核心抗原检测使用相关HCV-cAg ELISA试剂盒，仔细阅读说明书根据所述步骤完成检测，阳性结果经二次复检。丙型肝炎抗体检测同样使用HCV ELISA试剂盒，方法和步骤同上。丙型肝炎病毒RNA检测要用到荧光定量PCR仪，拷贝数如果超过1.0*103，评定为阳性[3]。 1.3仪器 本次研究中用到的仪器包括MK3酶标仪，DA-7600PCR扩增仪和恒温水浴箱[4]。 1.4统计学方法 研究中全部数据均采用SPSS18.0软件进行分析，计量资料采用均数±标准差表示，接受t检验，计数资料率接受X2检验，在P<0.05时提示数据差异具有统计学意义。 2结果 2.1分析HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA的检测情况 研究对全体患者的经过HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA的检测情况见表1。 3讨论 病人在感染丙型肝炎后通常情况下症状都是比较轻的，如果不经过仔细的检测很难发现，所以很多患有丙型肝炎的患者并不知道自己患病，疾病在人体内长久蛰伏逐渐转变为慢性，最常见的诊断丙型肝炎的方法是实验室检查法，而常规检测技术就包括上述的丙型肝炎抗体和丙型肝炎病毒RNA。但是相关技术还没有完全成熟，在部分方面还存有一定的局限性。检测并型病毒抗原时采取的抗－HCV 酶联免疫吸附试验法，特异度强，灵敏度高，操作比较简单，可是这种方法存在一个明显弊端，在感染病毒70天或者数月后才会出现抗-HCV，所以即便检测结果为阳性也无法判断是近期感染还是既往感染，此外免疫抑制和血液透析患者的丙型肝炎抗体会持续呈现阴性也无法检出。而丙肝病毒RNA检测结果如果呈现阳性则说明病毒处于复制阶段，和前一种方法相比此方法的窗口期短，但是设备昂贵，技术要求很高，不适合在基层全面推广[5]。 临床上的丙肝病毒核心抗原检测和RNA检测标准符合率可以达到70%左右，因此我们可以认为丙肝病毒核心抗原检测能够作为抗体检
间接ELISA法检测血清抗体 1. 仪器耗材 （1）仪器：洗板机，酶标仪，恒温箱 （2）耗材：96孔酶标板（NUNC或海门），加样槽 2. 试剂及配制 （1）包被缓冲液： A. PBS (500ml，pH=7.2±0.1)：NaCl 4.25g， NaH2PO4·2H2O 0.178g，Na2HPO4·12H2O 1.386g，溶解定容至500ml，测量pH在7.1-7.3（若超出此范围则不能使用）。常温可保存一周。 B. 1×碳酸盐缓冲液（100ml，pH=9.6）：Na2CO3 0.2756g，NaHCO3 0.6216g，溶解定容 至100ml水，测量pH在9.5-9.7之间（若超出此范围则不能使用）。4℃可保存一个月。 （2）洗液：0.5%PBS’T（1L）：每1L PBS（pH=7.2±0.1）加入Tween-20 5ml，充分混匀。 （3）封闭液： A. 2.5%drymilk/PBS’T（100ml）：将2.5g drymilk 溶解于100ml PBS’T中，短期保存于4℃，长期保存于-20℃。 B. 10%FBS/PBS’T（100ml）：10ml FBS于90ml PBS’T混合，短期保存与4℃。（4）稀释缓冲液： A. 2.5%drymilk/PBS’T：配方同上。 B. 10%FBS/PBS’T：配方同上。 C. 2.5% dry milk EDTA/EGTA PBS’T： C-1：EDTA/EGTA PBS’T：1.117g EDTA加入至100ml PBS’T中，搅拌至溶解（大约15min）；1.141g EGTA加入至100ml PBS’T中，搅拌（大约15min），待部分溶解后，用10N 的NaOH调节pH至7.0；上述两种溶液以1：1的比例混合，测量其pH值在6.3±0.5
免疫球蛋白M（IgM）测定试剂盒(免疫比浊法) 适用范围：用于体外定量测定人体血清中免疫球蛋白M的含量。 1.1 试剂盒包装规格 试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml； 试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml； 试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：1×10L，试剂2：1×2L； 试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。 校准品（选配）：1×1ml，1×1.5ml，1×3ml。 1.2试剂盒主要组成成分
2.1 外观 液体双试剂：试剂1无色澄清液体；试剂2浅黄至微红色液体。 校准品：无色至淡黄色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度 在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。 2.4 分析灵敏度 测定浓度为0.35g/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.01~0.10）范围内。 2.5 线性范围 在（0.20，4.00）g/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.995。在（1.00，4.00）g/L区间内线性相对偏差不大于±10%；在（0.20，1.00]g/L区间内线性绝对偏差应不大于±0.10g/L。
2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。 2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。 2.8 准确度 相对偏差：相对偏差应不大于±10%。 2.9 校准品溯源性 依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至IRMM生产的有证参考物质（ERM-DA470k）。 2.10 稳定性 效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为15个月，取失效期的试剂盒进行检验，试验结果满足2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。