《生物工程下游技术实验》讲义
实验项目一：“超氧化物歧化酶SOD的分离纯化技术”
实验一：植物超氧化物歧化酶（SOD）活性测量(6学时)
过程
1.每组30g绿豆,洗涤，蒸馏水浸泡过夜，倒去浸泡的水，加入300 ml蒸馏水液，匀浆
机匀浆，二层纱布过滤，离心（3000 rpm）得清液，取少量清液进行SOD活性及蛋白质含量测量，计算材料中SOD总活性单位及比活性单位（units/mg Pr）。
2.所得清液测量其总体积，缓慢加入硫酸铵至35%饱和度（查一般实验手册,约
19.4g/100ml清液），5℃冰箱中静置备用下一实验。
SOD活性的测定：（二种方法取一种，本次实验用前者，要求理解后者的原理）
●邻苯三酚自氧化法：这是最简单的一种检测方法，但干扰因素较多。
●NBT光化还原法：比较稳定，但受酚类物质干扰。
一、利用连苯三酚自氧化测SOD活性的方法
溶液配制：
1，连苯三酚：630 mg------→100 ml 10 mmol/L HCl (0.085 ml 36%的浓HCl ，用蒸馏水配成100 ml)。共配500ml.
2，pH 8.30 50 mmol/L Tric-HCl：
A) 0.1 mol/L Tris: 12.114g-----1000 ml (储备液)
B) 0.1 mol/L HCL: 浓盐酸稀释得到（8.5 ml 36%的浓HCl ，用蒸馏水配成1000 ml）(储
备液)
●0.05mol/L pH 8.3: 500ml A+199ml B-------定容到1000ml..
操作：
25?C，3 ml 50 mmol/L pH8.30 的Tric-HCL 缓冲液，加入10 μl 50 mmol/L 连苯三酚（具体加入量应每次测量前校正，加入的原则是使下面的A325变化控制在0.07 ／min左右），迅速摇匀，倒入光径1 cm的比色杯(应该用石英杯)中，每３０秒测一次Ａ３２５值，自氧化速率的变化（?Ａ）控制在0.07 ／min左右，加入酶液后再测连苯三酚自氧化速率的变化（?Ａ’），酶量的加入控制在使加样后的?Ａ’在0.035/min左右。（以上?Ａ?Ａ’的变化值不需特别严格，?Ａ只要控制在0.1以下0.04以上，?Ａ’变化在?Ａ的约一半左右即可）
一个SOD活性单位（连苯三酚单位）：在以上条件下，加入酶如果在一分钟时间能抑制连苯三酚自氧化速率的一半，此时所加的酶量就为一个SOD的酶活性单位（unit，U）。
加入酶量相当的酶活力单位（unit）＝(?Ａ-?Ａ’)/?Ａ×２
提取液的总活力（或材料总活力）（unit）=加入酶量相当的酶活力单位×(反应液总体积/取样液体积)×稀释倍数
比活(units/mgPr)=总活力（units）/总蛋白量（mg）
●思考并回答：
1，控制不加SOD时的OD值变化在0.07/分钟左右。
2，加SOD酶量控制在加酶后使OD值的变化在0.035-0.04/分钟左右。
3，理解一个酶活性单位的定义。
4，提取过程应该在每一步骤测量总活力和比活力，为什么？（总酶活及比活在酶的分离提纯过程中的意义）
二、NBT光化还原法测SOD活性（选做）
试剂母液：
A：甲硫氨酸( methionine): 215.6mg---100ml
B: NBT（氮兰四唑Nitroblue Tetrazdinna）: 9.2 mg----5 ml (一定要现配)
C: 核黄素：1.13 mg----50 ml
D: EDTA：87.68 mg------50 ml ( 一般用EDTA-Na2)
以上溶液全部用pH 7.8 0.05M的磷酸缓冲液配制.
操作：
每3ml 反应液中含有：A 2.7 ml(13 mmol), B 100 μl (63 μmol), C 100 μl (1.3 μmol), D 100 μl, 加酶液后于4000 lux 光照15分钟，以不加酶液的反应液为对照(空白A560)，以不照光不加酶液的反应液调节零点，测A560 （空白A560控制在0.5左右，加酶液量控制在使A560在0.25左右）
酶活（unit/ml）= (空白A560-A560)/空白A560*2*3/ 加样体积ml
三、Bradford法测定蛋白质的含量
实验目的:
●学习考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量的原理和方法，包括：
①熟练掌握分光光度法定量测量物质含量的技术，了解误差的来源及避免的原则；
②熟悉分光光度计的操作；
③熟悉标准曲线的绘制（电脑和手工绘制）；
④从标准曲线求得求知物质含量的方法（直接读数和根据公式计算）
⑤蛋白质含量/g样品的计算
●一定浓度溶液的配制（计算、称量和定容）
●天平的使用
●离心机的使用
●移液管、移液枪、的使用
实验原理:
●考马斯亮蓝具有红色和蓝色两种色调,在酸性溶液中其以游游离态存在时呈棕红色,当它
与蛋白质通过疏水作用结合后变为蓝色(在595 nm处有最大吸收值).该反应灵敏度很高,反应速度快,约在2 min左右达到平衡,在室温1小时内稳定.在0.001~1.0 mg蛋白质范围内,蛋白质浓度与A595值成正比,因此可用于蛋白质的定量测定.
●一些阳离子(如K+,Na+, Mg2+), (NH4)2SO4, 乙醇等不干扰测定,而大量去污剂如Triton
X-100, SDS等严重干扰测定,少量去污剂可通过用适当的对照而消除.
实验器材:
●分光光度计,试管及试管架,比色皿,移液管;移液枪
实验材料与试剂:
●考马斯亮蓝G-250 (0.01%, W/V): 100mg 考马斯亮蓝G250溶于50ml 95%的乙醇中,加入
100ml 85% 的磷酸,将溶液用水定容到1000 ml,过滤得清液于棕色瓶中备用.
●标准蛋白质溶液:牛血清蛋白(BSA)用蒸馏水配成0.1mg/ml
●待测样品液:S1,S2 (3颗绿豆—10ml水---研磨---离心2500rpm得清液),S3,S4为原液稀释
10倍（S1S2S3S4均为样品体积，S3和S4不一定做，在未知样品蛋白含量时可先设计一个浓度梯度以保证测量值在标准曲线的线性范围内）
操作方法:
1.牛血清蛋白标准曲线的制作:
●按下表加入试剂,混匀静置2分钟,以1号管为空白调零点,测下各管的A595值,以吸光值
取未知浓度的蛋白质(通过适当稀释使其浓度控制在测量有有效范围内),加到试管内,再加入G250染色液3ml混匀,测其595nm下的吸光度,对照标准曲线求出蛋白质含量,计算其浓度.（表示为mgPr/g材料）
思考题:
3.Bradford 法测定蛋白质测定蛋白质含量有什么优点?
4.你觉得Bradford法测定蛋白质含量有什么缺点？如何避免？
5.理解零点的调节
实验二：植物材料破碎及硫酸铵分级分离、透析除盐和浓缩
①植物材料的破碎；固液分离方法；
②分级沉淀------硫酸铵或有机溶剂分级分离
③粗提物的透析除盐和浓缩
过程：
1．准备透析袋：透析袋事先预处理，Na2CO3 10g/L, EDTA 1 mmol/L 煮沸30分钟，蒸馏水洗涤，并浸泡于5℃中备用。
2．实验一所得清液测量其部体积，缓慢加入硫酸铵至65%饱和度（18.4g/100ml）（过程充分搅拌），5℃静置至分层澄清，离心除去清液，得沉淀。
3．沉淀溶于水并定容到一定体积，装入透析袋，于蒸溜水中透析过夜。
4．透析后溶液用滤纸过滤得清液。重新装入透析袋中用PEG6000包埋进行浓缩。
●要求：测量沉淀和清液、浓缩液的SOD活性、蛋白质含量以计算总酶活和比活性的变化，评价本提取步骤的效率。
实验三：葡聚糖凝胶层析分离纯化SOD分离效果及产品质量
分析
上述浓缩液过滤后得清液，用葡聚糖Sephadex G100进行层析分离，层析过程参见《基础生物化学实验》（第二版，高等教育出版社）P236
1．实验目的:
①.掌握层析分离的基本技术;
②.理解凝胶排阻层析的原理,掌握葡聚糖凝胶色谱的装柱、上样、洗脱技术。
2．实验原理：
利用凝胶的网状结构根据分子大小进行分离的一种方法。其基本原理是含有尺寸大小不同分子的样品进入层析柱后,较大的分子不能通过孔道扩散进入凝胶珠体内部.较小的分子可以通过部分孔道,更小的分子可通过任意孔道扩散进入珠体内部.从而使得小分子移动最慢,中等分子次之,不同分子尺寸的分子先后顺序不同流出层析柱,达到分离的目的.
3．实验基本操作：
①.葡聚糖的预处理：
●水中膨化：根据其吸水率加入适量（略大于吸水率）蒸馏水，在20℃条件下需24h；
如果加热煮沸，膨化时间会大大缩短，一般在4 h即可完成，而且煮沸也可以去除
凝胶颗粒中的气泡。应注意尽量避免在酸或碱中加热，以免凝胶被破坏。吸水率
较大的凝胶(即型号较大、排阻极限较大的凝胶)膨化时间则较长。
●排除凝胶中气泡：膨化处理后，通过抽气或加热煮沸的方法排除气泡
②.装柱：
●先向柱内加满洗脱剂，检查是否漏水；再打开出液口，排出里面的气泡，特别是
要排除床底支持物上的气泡。关闭出液口，使柱中洗脱剂的体积约占总柱体积的
15％。
●调节有利于装柱的凝胶浆稀稠度，适当稀释有利于装柱过程中气泡的排除。但稀
释度太高则一次装柱的高度不够。
●将一根直径稍小的玻璃棒插入层析柱底部，沿玻璃棒将胶浆徐徐注人柱内，一边
灌胶，一边提起玻棒。注意避免产生气泡。柱要一次装完。
●柱装好后，停10min，然后打开出液口，排出过量洗脱剂。
●柱内胶面上部保留2～3cm洗脱剂。再将恒压洗脱剂瓶与柱上端相连。流过至少2
倍住体积的洗脱剂之后，流速开始稳定下来（层析柱平衡过程,1ml/min,1.5h）。
●调节恒压洗脱剂瓶的高低位置，得到理想流速。（1ml/min）
③.加样：
上述浓缩液过滤后得清液加样，要尽量快速、均匀。一般分级分离时加样体积约为凝胶柱床体积的1％～5％(质量分数)左右.（这里用5%）。加样应加于柱中心，避免沿柱壁加入。
④.洗脱：（pH 7.0, 0.02mol/l磷酸缓冲液）
洗脱速度也会影响凝胶层析的分离效果，一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法，一种是使用恒流泵，另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素，包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等，一般来讲，洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡，分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带变宽，反而会降低分辨率，而且实验时间会大大延长；（这里采用1ml/min,一般每一收集部份不大于2ml，本实验因为仪器的数量问题，每份收集4ml,收集液总体积为柱床总体积的1.2倍即完成收集）。
4．结果分析：
①.每一组分测量其A280吸收做为蛋白质含量的相对值，绘出洗脱曲线；
②.每一组份测量其SOD活性，绘出活性物质洗脱曲线；
③.根据SOD活性分布决定收集洗脱液的部分；收集活性峰及其上下各1试管的洗脱
液。
④.对SOD纯化率及得率进行分析并完成实验报告（请尽量按标准完成）。
5.附录：
●洗脱液的选择
由于凝胶层析的分离原理是分子筛作用，它不像其他层析分离方式主要依赖于溶剂强度和选择性的改变来进行分离，在凝胶层析中流动相只是起运载工具的作用，一般不依赖于流动相性质和组成的改变来提高分辨率，改变洗脱液的主要目的是为了消除组分与固定相的吸附等相互作用，所以和其他层析方法相比，凝胶层析洗脱液的选择不那么严格。由于凝胶层析的分离机理简单以及凝胶稳定工作的pH值范围较广，所以洗脱液的选择主要取决于待分离样品，一般来说只要能溶解被洗脱物质并不使其变性的缓冲液都可以用于凝胶层析。为了防止凝胶可能有吸附作用，一般洗脱液都含有一定浓度的盐.
●凝胶的保存
凝胶的保存一般是反复洗涤去除蛋白等杂质，然后加入适当的抗菌剂通常加入0．02％(质量分数)的叠氮化钠，4℃下保存。如果要较长时间的保存，则要将凝胶洗涤后脱水、干燥，可以将凝胶过滤抽干后浸泡在50％(体积分数)的乙醇中脱水，抽干后再逐步提高乙醇浓度反复浸泡脱水，至95％(体积分数)乙醇脱水后将凝胶抽干。置于60℃烘箱中烘干，即可装瓶保存。注意膨化的凝胶不能直接高温烘干，否则可能会破坏凝胶的结构。
（以下选做，本次实验因时间不够将不做以下实验）
实验四：除盐浓缩及冷冻干燥，分离效果及产品质量分析①除盐浓缩及冷冻干燥
②分离效果分析，产品质量分析
要求测量各收集部分的蛋白质相对含量（A260）及各收集部分SOD活性，制作洗脱曲线。集中SOD活性部分，测量比活力并计算纯化倍数和得率。
透析除盐，PEG6000浓缩，加入0.1%(W/V)环已糊精于冷冻干燥器中干燥，得到干品称重，测量蛋白质含量和SOD活性，计算比法力，分析SOD提纯过程的得率、效率及技术上的要点或教训。
实验报告要求：
●以论文的形成提交实验报告，作为实验考查的成绩；
●论文应包括：摘要、前言（生物物质（这里指蛋白质）分离的原理及各纯化步骤常
用的方法，我们这里采用的方法及其原理）、实验方法及实验过程、主要实验结果
及讨论（要求有详细规范的图表表示，对实验中出现的问题或得到的数据所说明的
问题进行讨论）、主要参考文献。
●所提思考题要求做答
●实验报告：实验项目一以小论文的形式提交实验报告：
实验报告几点说明：
●以下内容仅供各位撰写时作为格式参考，与实际实验过程可能有出入，请具体情况具体
描述，不要照抄；
●由于客观原因实验结果可能不理想，请如实记录并讨论，结果好坏并不影响你的得分；
●实验题目要求全部统一按照本参考格式书写
●实验报告可以打印也可手写，但应统一用A4纸。
生物工程下游技术实验—
“超氧化物歧化酶SOD的分离纯化技术”
姓名** 学号
指导老师：****；同组者：***，***，*** ；时间:（实验起始时间）
摘要（只做格式参考，请不要类同）：通过对绿豆种子的研磨破碎获得SOD粗酶，经过硫酸铵分级分离、透析除盐和浓缩等过程，除去粗酶液中的杂质及干扰蛋白，采用葡聚糖（Sephadex G-100）凝胶层析得到纯化的SOD酶.跟踪提纯过程活性的分布，并评价提取过程各步骤的效率.实验结果证实随着不断的分离提纯，总活力不断减小，比活力不断上升，总纯化倍数为**，活性得率为**%。（如实验有不合理结果请如实描述，只要有合理原因分析就不会影响你的得分，比如可这样写：“但实验过程中出现失误，在浓缩之后蛋白质含量突然增多，致使比活在上升之后降低.”原因可以在分析和讨论部份解释）
一、前言（只做格式参考，请不要类同）：超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase），简称SOD，是一种新型酶制剂，属金属酶.分布很广，几乎从哺乳动物到细菌，以及植物中均存在.在微生物中主存于需氧菌.SOD是催化超氧阴离子（O2-）歧化反应的酶类，能通过歧化反应清除生物细胞中的超氧自由基（O2.－），生成H2O2和O2.H2O2由过氧化氢酶（CAT）催化生成H2O 和O2，从而减少自由基对有机体的毒害.它的存在与生物体内的解毒作用有关，也发现与机体的衰老、肿瘤及免疫性疾病等有关.
自1968 年发现SOD 后，立刻引起科学界的高度重视，近40 年来这方面的研究进展非常迅速，它的应用领域日益拓宽，SOD 也有了产品.国外从牛红细胞中制得的超氧化物歧化酶，其商品名为Orgotein.不少人研究Orgotein的药理性质，证明它无毒，无抗原性，能抗发炎、抗超氧离子、抗病毒感染.二十世纪80 年代后期，我国关于SOD 的研究及应用也形成了热点，如今已在化妆品添加剂、饮料及医药方面显示了特殊效果.SOD作为治因而受到医药界的关注.目前中国国内已进入临床试验阶段.
本实验以绿豆为原料提取SOD，通过各步的分离提纯，应测得酶总活力逐渐减小，比活逐渐升高.通过本实验掌握物质分离纯化的实验设计过程，以及硫酸铵分离、透析除盐、浓缩和葡聚糖凝胶层析等物质分离技术.
二、实验材料与方法：
<一>材料:绿豆种子,市售新鲜绿豆种子浸泡蒸馏水24小时备用.
<二>试剂:葡聚糖（sephadexG-100或G150）, NaCl（AP）, 磷酸氢二钠（AP）, 磷酸二氢钠（AP）, 三羟甲基氨基甲烷（Tris）, 盐酸（浓盐酸），硫酸铵（AP）, PEG6000, 考马斯蓝G250 , 磷酸，乙醇（AP），牛血清蛋白BSA , 连苯三酚(焦性没食子酸), 甲硫氨酸( methionine) , NBT（氮兰四唑 Nitroblue Tetrazdinna）, 核黄素 , EDTA(钠盐) , 超氧化物歧化酶（sigma公司）,
<三>仪器:
<四>实验方法和步骤：
1．材料处理和取样
1）．25g绿豆,洗涤，蒸馏水浸泡过夜，加入250 ml pH7 0.05 mol/L pb液，匀浆机匀浆，二层纱布过滤，离心（3000 rpm）得清液，取少量清液[取样①]进行SOD活性测量，计算材料中SOD总活性单位及比活性单位（units/mg Pr）
2）实验流程图（你可不用流程图，用文字简练描述也可）
2．植物超氧化物歧化酶（SOD）活性测量
1）NBT光化还原法测SOD活性：。。。。。。。。。。。。。。。。
2）连苯三酚法测定SOD活性：。。。。。。。。。。。。。。。。。
3．考马斯蓝G-250测蛋白的方法：。。。。。。。。。。。。。。。。
4．比活力、得率及纯化倍数计算：
三、结果与讨论：
<一> SOD活性及蛋白质测定结果：
<二>硫酸铵分级分离、透析除盐和浓缩实验结果
<三> 葡聚糖凝胶层析分离纯化SOD实验结果
四、参考文献：
[1]Beauchamp, J. and I. Fridovich (1971) Superoxidedismutase; improved assays and an assay applicable toacrylamide gels. Analytical Biochemistry, 44, 276-287.。。。。。
《工程项目管理》在线作业1及答案 一、单选题（共10道试题，共60分。） V 1.（）是指将项目的总工期目标分解，确定项目范围内各工程活动的工作量、持续时间，通过逻辑关 系安排和网络分析，确定各个工程活动开始和结束时间。 A. 资源计划 B. 工期计划 C. 资金计划 D. 成本计划 满分：6分 2.项目的投资目标、进度目标和质量目标是（）的关系。 A. 对立 B. 统一 C. 矛盾 D. 对立统一 满分：6分 3.（）是项目前期决策阶段最重要的工作。 A. 项目目标设计 B. 项目构思的产生 C. 项目可行性研究 D. 提出项目建议书 满分：6分 4.BOT融资方式中的“O”代表（）。 A. 建造 B. 设计 C. 运营
D. 移交 满分：6分 5.从项目构思到项目批准正式立项的阶段称为（）。 A. 项目的前期策划阶段 B. 项目构思阶段 C. 项目目标设计阶段 D. 项目可行性研究阶段 满分：6分 6.项目组织形式的选择必须按照具体情况分析，若企业同时承担的项目(或子项目)很多，必须采用（） 的组织形式。 A. 矩阵式 B. 职能式 C. 直线型 D. 寄生式 满分：6分 7.（）指投资者(项目所有者)委派业主代表，成立项目经理部，以业主的身份开展项目的整个管理工 作，直接管理承包商、供应商和设计单位。 A. 业主自行管理 B. 混合式的管理模式 C. 代理型管理模式 D. 其他形式 满分：6分 8.工程项目的（），即项目任务的委托方式。 A. 组织结构 B. 承发包模式 C. 融资方式 满分：6分 9.工程项目通常都有特定的目标，这些目标通常不包括（）。
中国石油天然气集团公司 工程建设项目管理办法 第一章总则 第一条为加强中国石油天然气集团公司（以下简称集团公司）工程建设项目（以下简称项目）管理，规范项目建设行为，提高项目管理水平和投资效益，根据国家有关法律法规和集团公司有关规定，制定本办法。 第二条本办法适用于集团公司及全资子公司、直属企事业单位（以下称建设单位）的境内项目管理。 集团公司及建设单位控股公司的境内项目管理，应当通过法定程序贯彻执行本办法。 境外项目及国内对外合作项目管理参照本办法执行。 第三条本办法所称项目包括集团公司投资新建、改建及扩建的油气田地面、炼油化工、油气储运、加油（气）站、建构筑物等（详见附件）。 第四条项目管理应严格执行建设程序，突出质量和效益，强化风险控制，积极推广标准化设计、规模化采购、工厂化预制、模块化建设，充分应用集团公司企业资源计划（ERP）系统、项
目管理（EPM）系统，优选承包商和供应商，加强项目全过程管理，确保项目各项目标顺利实现。 集团公司对在项目管理工作中做出突出成绩的集体和个人给予表彰和奖励。 第五条集团公司工程建设项目领导小组（以下简称领导小组）负责组织制订集团公司工程建设项目管理办法和相关政策，统筹协调工程建设实施过程中的重大事项。领导小组办公室设在集团公司规划计划部，负责落实领导小组各项决定，督促相关部门和专业分公司履行项目管理相关职责。 集团公司相关部门按照权限和职能分工履行项目管理与监督职责。 第六条专业分公司履行以下职责： （一）贯彻落实国家、行业和集团公司有关工程建设法律法规、规章制度及标准规范； （二）负责权限范围内项目（预）可行性研究工作组织、项目可行性研究报告审批、项目基础设计（初步设计）审批及专项技术方案审批； （三）负责一类、二类项目管理手册备案管理和执行检查； （四）组织、指导、监督建设单位办理项目专项评价和核准、备案手续并获取所需支持性文件； （五）初审提前采购计划，审查引进设备技术方案、引进设备清单，审批或会签权限内招标方案、招标结果和可不招标事项；
《学案导学在中职对口单招英语教学中有效运用的研究》结题报告 执笔人：长珍 一、课题的提出 1.选题的理论依据 （1）建构主义学习理论建构主义学习理论强调以学生为中心，不仅要求学生由外部刺激的被动接受者和知识的灌输对象转变为信息加工的主体、知识意义的主动建构者；而且要求教师要由知识的传授者、灌输者转变为学生主动建构意义的帮助者、促进者。这就意味着教师应当在教学过程中采用全新的教学模式（彻底摒弃以教师为中心、强调知识传授、把学生当作知识灌输对象的传统教学模式）、全新的教学方法和全新的教学设计思想，因而必然要对传统的教学理论、教学观念提出挑战。建构主义提倡在教师指导下的、以学习者为中心的学习，既强调学习者的认知主体作用，又不忽视教师的指导作用。我们的“学案”教学改革，正是以该理论为基础，以求在实践中达到让学生成为信息加工的主体，知识意义的主动建构者。 （2）主体教育理论 主体教育理论提出教育活动的三个主体：即教育主体、受教育者主体、教育者主体。教育主体即教育本身的主体独立性，它是教育活动的前提；教育者主体是条件，受教育者的主体性要靠教育者的主体性来完成；受教育者主体是归宿，是核心，教育主体和教育者主体都是为其服务并受其制约的，它们的主体性只有在成全受教育者的主体性的过程中才能得到体现。 （3）素质教育理论 素质教育教学理论认为：教学就是教和学的共同活动，是学生在教师有目的、有计划的指导下，积极主动地学习，掌握系统的科学文化知识和基本技能，发展智力、能力，增强体力，逐步形成科学的世界观和优良的道德品质的一种活动。 教师的主导与学生的主体相统一的规律，是教学的最基本规律。教师在教学活动中起主导作用，学生是活动的主体；教师所传授的知识技能、施加的影响只有通过学生的观察、思考、练习和运用才能化，变成自己的东西，别人无法代替。教师主导作用和学生主体作用是相互促进的，教师的主导作用依赖于学生主体作用的发挥，学生的主动积极性越高，说明教师的主导作用发挥得越好；反过来，学生主体作用要依赖于教师的主导作用来实现。 （4）掌握学习理论掌握学习理论强调学生的主体性要靠教师的主导性来实现。它改
工程项目管理 第二次 ［单选题］涉及项目整个实施阶段的是（）的项目管理规划。 A :业主方 B :设计方 C :施工方 D:供货方 参考答案: A ［多选题］施工方项目管理规划的内容一般包括（） A :质量控制的方法和手段 B :进度控制的方法和手段 C :投资控制的方法和手段 D:安全管理的策略 E:风险管理的策略 参考答案: ABDE ［论述题］生产管理要素的意义、目的和任务是什么？参考答案:生产管理要素的意义:生产要素也称为资源，它是工程实施必不可少的前提条件。资源费用一般占工程总费用的80％以上，所以降低资源消耗是节约工程成本的主要途径。保证资源的供应，是工期计划得以实行的必要条件。 生产管理要素的任务:按照项目的实施计划，编制资源的使用和供应计划，将项目实施所需用的资源按正确的时间、正确的数量、正确的种类规格供应到正确的地点，并降低资源成本消耗。 生产管理要素的目的:实现生产要素的优化配置和动态管理，从而降低工程成本，实现工期控制要求，保证工程质量，提高经济效益。 ［论述题］试论述工程项目前期策划的一般过程和主要工作内容？参考答案:在策划阶段，项目管理者需完成下述几项工作: （1）与业主和项目班子中现有成员一道对项目大纲进行审查，确定其能够满足业主的目标要求；编制正式大纲的书面文本。（2）通过与业主和专业工程师协商，建立工程建设项目管理组织结构，确定各参与方的作用和责任，包括与业主联系的方式和途径。（3）与有关参与方密切联系，确保作出合理的安排以满足有关建筑法规的要求。（4）确保从设计阶段最初的方案设计到施工图设计过程中，都要进行多方案的技术经济分析，并视可能性采用各种行之有效的技术分析方法例如“价值工程”方法。（5）选择其他相 关参与方，并开展如下工作:编制和发布招标文件；进行评标，提供评标报告和建议；协助业主准备合同文件，作出选择和委托。（6）对工程建设项目的风险进行评估，并在项目预算中加入适当的不可预见费。制定项目实施中的风险管理程序，并将其作为一项连续性的工作。（7）确定和编制与项目目标和费用、 工期、质量、功能及财务等参数最相适应的合同形式。（8）协助业主进行场地选择、现场调查和获得土地。（9）决定某些工作，如：安装、设施占用、移交等，是否构成独立的项目，并据此进行清楚而详细地给岀工程建设项目组织结构，并描述在整个项目实施过程中相互作用的各参与方如何履行其各自的职责。同时该组织结构也阐明了监督和控制有关具体管理工作的程序和步骤。
前言 为贯彻落实国家“西部大开发”和“西电东送”战略决策，发挥资源优势，提高利用效率，加强环境保护，推进跨区联网和跨区送电，XX公司建设XX交流改接500kV输电线路工程。我们黑龙江省送变电工程公司本次负责施工XX交流改接500kV输电线路工程第1标，即古洪——石碑坪的施工。为按期完成施工任务，我公司积极地投入施工组织活动，根据本标段沿线的路径情况，并结合以往工程的经验和本工程的实际情况，认真编制本《项目管理实施规划》。施工中，我公司将严格按照本《项目管理实施规划》精心组织施工，认真履行合同，实现工程安全、质量和进度等各项目标，确保工程“零”缺陷移交，“达标投产、达到国家优质工程标准工程”。 本《项目管理实施规划》编制的主要依据如下： （1）XX交流改接500kV输电线路工程设计图纸； （2）本工程现场调查资料； （3）现行500kV送电线路工程相关施工及验收规程、规范和标准； （4）XX公司超高压输电公司有关制度、规定等； （5）建设部颁布的有关规程、规范和标准； （6）国家颁布的有关法律、法规； （7）本公司的质量管理体系、职业安全健康管理体系及环境管理体系文件。 1. 工程概况及特点 1.1 工程概况 本工程项目法人：XX公司超高压输电公司 设计单位： 监理单位： 建设工期：2006年6月～2007年2月 承包方式：包工、部分包料，分单价和总价包干 资金来源：自有资金及银行贷款 我公司本次负责施工的XX交流改接500kV输电线路工程1标段，起点为河沙Ⅰ回216#塔（运行号）大号侧导地线挂孔和河沙Ⅱ回222#塔（运行号）导地线挂孔至标段分界塔（72#）小号侧导地线挂孔，线路长30.5公里（同塔双回路约29公里，单回线路约1.5公里）。 1.1.1 工程特点及主要技术特性 1
分子生物学实验设计报告 绿色荧光蛋白的克隆表达 一、引言 荧光蛋白是海洋生物体内的一类发光蛋白，分为绿色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白和红色荧光蛋白。 绿色荧光蛋白是由日本学者下村修于1962年从多管水母中发现并分离得到的一种发光蛋白。它是由238个氨基酸构成的“β-桶”型三维立体结构，其中65至67位氨基酸（丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸）形成发光团，为主要的发光位置。 通过生物化学的方法将基因做小小的改变，就可以改变GFP中的氨基酸，得到变异GFP。目前应用较多的GFP的突变体-增强型绿色荧光蛋白（简称EGFP） 传统的PCR产物克隆方法主要有两种：一种是PCR引物设计时引入载体上的酶切位点，PCR产物经双酶切后定向克隆到目的载体上；另一种是TA载体连接。这两种方法费时费力，过程繁冗。 而本实验采用的无缝克隆和组装技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法，旨在克服上述缺陷，它可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA的片断的插入，而不需要任何限制性内切酶和连接酶。突破传统的双酶切再加上连接，只需要一步重组法，即可得到高效率克隆的重组载体，这个重组载体能够在一定的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代分子。 研究绿色荧光蛋白在大肠杆菌体内的基因克隆和表达。通过质粒重组形成所需要的重组质粒pET-28a-GFP，将重组质粒导入大肠杆菌体内，通过酶切、PCR及用IPTG诱导检测是否在大肠杆菌体内诱导表达成功。 < 菌液PCR是直接用菌液作为模板进行PCR的一种选取成功导入载体的菌落的方法，省
时，快捷，但容易出现假阳性。为了避免这种情况，我们需在设计引物时加上目的基因片段以及改进菌液处理方法。 三、实验步骤 1.质粒DNA的提取 实验原理： ~
中国石油天然气集团公司 建设项目档案管理规定 第一章总则 第一条为规范中国石油天然气集团公司（以下简称集团公 司）建设项目档案管理工作，充分发挥项目档案在工程建设、生 产管理、维护和改建扩建中的作用，根据《中国石油天然气集团 公司档案工作规定》，制定本规定。 第二条本规定适用于集团公司总部、全资子公司和直属企 事业单位。 集团公司直接或间接投资的控股公司参照执行。 第三条本规定所称建设项目档案，指建设项目在立项、审 批、招投标、勘察、设计、采购、施工、监理及竣工验收等全过 程中形成的，具有保存价值的应当归档保存的文字、图表、声像 等各种载体形式的全部文件。 第四条集团公司建设的项目，包括油气田开发地面建设工 程、炼油化工工程、油气储运工程、销售网络建设、装备及生产 线建设、实验室建设、民用建设、公用基础设施等建设工程。 第五条集团公司建设项目档案工作实行统一领导、分级管理。 第六条项目建设单位应统筹安排建设项目档案工作经费，
确保建设项目档案工作正常开展。 第二章档案管理职责 第七条集团公司办公厅是集团公司建设项目档案工作的归口管理机构，其主要职责是： （一）组织制订集团公司建设项目档案工作管理制度； （二）负责集团公司建设项目档案管理工作的统筹规划、组织协调和监督指导； （三）负责集团公司建设项目档案验收工作； （四）参加集团公司建设项目竣工验收； （五）组织集团公司建设项目档案业务交流与培训工作； （六）负责总部建设项目档案管理。 第八条项目建设单位档案管理机构是本单位建设项目档案工作的归口管理机构，其主要职责是： （一）执行集团公司建设项目档案工作管理制度，制订本单位建设项目档案管理办法； （二）负责本单位建设项目档案管理工作的规划、组织协调和监督指导； （三）负责本单位建设项目档案验收工作； （四）参加本单位建设项目竣工验收； （五）组织本单位建设项目档案业务交流与培训工作；
清怡中学“学案导学，自主探究”课堂教学模式研究课题结题研究报 李素香?2010年6月3日10:58 浏览数：107 | 评论数： 清怡中学?? 吕新敏 、课题提出的背景 1、课题的核心概念。学案导学，自主探究”课堂教学模式， 是在和谐教学整体建构的教学思想和建构主义、系统论教育理论的指导下，师生教学活动诸要素依据一定教学目标、教学内容及学生认知特点，所形成的一种稳定而又简约化的教学结构。也就是按照什么样的教育思想、理论来组织你的教学活动进程，它是教育思想、教学理论、学习理论的集中体现。 2、课堂教学模式改革的必要性。新一轮基础教育课程改革，以提高民族素质为宗旨，突出培养学生的创新精神和实践能力，倡导学生主动参与、探究发现、合作交流的学习方式，课程着眼于学生的终身学习和能力发展，促进学生的可持续发展，课堂着重于师生的有效教学行为，以此大面积提高教学质量。在调查中我们发现，有些教师课堂教学效率不高，没有理解教学内容的编排内涵，将整体化的教学内容分割成支离破碎的枝叶，师生课堂教与学出现了许多无效行为，致使许多应该在课堂完成的教学任务实际完不成，只得课内损失课外补，校内损失校外补，靠多布置课外作业来提高教学成绩，加重了学 生的负担。现在中学生学业负担过重已经成为普遍存在的教育共性问题，羁绊了素质教育的推行，严重影响了学生的身心健康，制约了学校的发展。 能不能找到一种有效的教学方法或策略，使学生在轻松、愉快的状态下高效率的学习，使师生在课堂上高效完成教学任务，课后不布置或少布置作业，把课外时间还给学生，让学生充分发展自己的特长和爱好，实施真正的素质教育。这一问题已经是目前我们课堂教学改革中迫切需要解决的问题，也是我们进一步全面提高学生素质和教学质量的瓶颈，从课堂教学模式的研究入手，激活课堂、构建高效课堂, 将有效地解决这一问题，而我们进行的“学案导学，自主探究”课堂 教学模式研究正是帮助我们解决这些问题的良方，它研究的是课堂教学行为的问题，解决的是学生学习效率、能力培养的问题，它与新课改的精神、目标和任务是相一致的。
500kV输电线路工程项目管理实施规划
目录 1 编制依据 (1) 1.1法律法规 (1) 1.2国家电网公司有关规程、通用制度及规定 (1) 1.3技术、质量标准 (2) 1.4安全标准 (4) 1.5档案信息标准 (4) 2 工程概况与工程实施条件分析 (5) 2.1工程概述 (5) 2.2工程设计特点、工程量 (6) 2.3施工实施条件、自然环境分析及现场调查情况说明 (10) 3 项目施工管理组织结构 (13) 3.1项目管理组织结构 (13) 3.2项目管理职责 (15) 3.3工程主要负责人简介 (18) 4 工期目标和施工进度计划 (22) 4.1工期目标及分解 (22) 4.2施工进度计划及编制说明 (22) 4.3进度计划图表 (23) 4.4进度计划风险分析及控制措施 (26) 4.5 图纸供应计划 (28) 5质量管理体系 (30) 5.1质量目标及分解 (30) 5.2质量管理组织机构 (32) 5.3质量管理主要职责 (34) 5.4质量保障技术措施 (38) 5.5质量薄弱环节及预防措施 (49) 5.6质量保修承诺 (50) 6安全管理体系 (52) 6.1安全目标承诺、安全管理组织机构 (52) 6.2安全管理主要职责、安全管理制度 (54) 6.3安全组织技术措施、实施方案、考核办法、管理方法 (56) 6.4重要施工方案及特殊施工工序的安全过程控制 (57) 7环境保护与文明施工体系 (62) 7.1文明施工、水土保持及环境保护目标 (62) 7.2环境因素分析及控制措施 (62) 7.3水土保持措施 (67) 7.4文明施工标准化措施 (68)
分子生物学实验 院系：生命科学与技术学院 专业：生物科学（基地） 班级： 201101班 学号： 姓名： 分子生物学基础实验 分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。为提高学生在分子生物学技术方面的动手能力，生物技术综合实验室主要开设常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包括质粒DNA的制备；DNA的重组；PCR基因扩增等等。 实验一质粒DNA的小量制备 一、实验原理 要把一个有用的外源基因通过基因工程手段，送进细胞中去进行繁殖和表达，需要运载工具，携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体（vector）。载体的设计和应用是DNA体外重组的重要条件。作为基因工程的载体必须具备下列条件:(1)是一个复制子，载体有复制点才能使与它结合的外源基因复制繁殖；（2）载体在受体细胞中能大量增殖，只有高复制率才能使外源基因在受体细胞中大量扩增；（3）载体DNA链上有1到几个限制性内切酶的单一识别与切割位点，便于外源基因的插入；（4）载体具有选择性的遗传标记，如有抗四环素基因（Tc r），抗新霉素基因（Ne r）等，以此知道它是否已进入受体细胞，也可根据这个标记将受体细胞从其他细胞中分离筛选出来。细菌质粒具备上述条件，它是基因工程中常用的载体之一。 质粒（plasmid）是一种染色体外的稳定遗传因子，大小在1～120kb之间，具
有双链闭合环状结构的DNA分子，主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。质粒具有自主复制和转录能力，能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数，可表达它携带的遗传信息。它可独立游离在细胞质内，也可以整合到细菌染色体中，它离开宿主的细胞就不能存活，而它控制的许多生物学功能也是对宿主细胞的补偿。 质粒在细胞内的复制，一般分为两种类型：严密控制型（stringent control）和松弛控制型（relaxed control）。前者只在细胞周期的一定阶段进行复制，染色体不复制时，它也不复制。每个细胞内只含有1个或几个质粒分子。后者的质粒在整个细胞周期中随时复制，在细胞里，它有许多拷贝，一般在20个以上。通常大的质粒如F因子等，拷贝数较少，复制受到严格控制。小的质粒，如ColE Ⅰ质粒（含有产生大肠杆菌素E1基因），拷贝数较多，复制不受严格控制。在使用蛋白质合成抑制剂－氯霉素时，染色体DNA复制受阻，而松弛型ColEⅠ质粒继续复制12－16h，由原来20多个拷贝可扩增至1000－3000个拷贝，此时质粒DNA占总DNA的含量由原来的2％增加到40％－50％。本实验分离提纯化的质粒pBR322、pUC19就是由ColE Ⅰ衍生的质粒。 所有分离质粒DNA的方法都包括三个基本步骤:培养细菌使质粒扩增；收集和裂解细菌；分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可破坏菌体细胞壁，十二烷基硫酸钠（SDS）可使细胞壁解，经溶菌酶和阴离子去污剂（SDS）处理后，细菌染色体DNA 缠绕附着在细胞壁碎片上，离心时易被沉淀出来，而质粒DNA则留在清液中。用乙醇沉淀、洗涤，可得到质粒DNA。 质粒DNA的相对分子量一般在106－107范围内，如质粒pBR322的相对分子质量为2.8×106，质粒pUC19的相对分子质量为1.7×106。在细胞内，共价闭环DNA（covalently closed circular DNA，简称cccDNA）常以超螺旋形式存在。如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂，分子就能旋转而消除链的张力，这种松弛型的分子叫做开环DNA（open circular DNA，简称ocDNA）。在电泳时，同一质粒如以cccDNA形式存在，它比其开环和线状DNA的泳动速度快，因此在本实验中，自制质粒DNA在电泳凝胶中呈现3条区带。 二、实验目的 1．掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法。 2．了解制备原理及各种试剂的作用。 三、实验材料和试剂
“学案导学”课题研究计划 一、研究目标 1、探求总结出实施“学案导学”的具体方法和一般模式，赋予“因材施教”这一古老的教育理论以新的生命活力，让不同层次的每个学生都在原有基础上得到提高和发展。 2、在课堂教学中，积极探索和实践“学案导学”，激发学生的学习兴趣，调动学生学习的积极性和主动性，发挥学生的主体作用。变“学会”为“会学”，从“会学”到“会用”，变负担为兴趣，形成肯思考、肯钻研的学习习惯。培养学生的数学意识，提高他们的数学能力，从而为主动学好数学形成优良的思维个性品质。 3、培养学生自学能力，形成再学习能力。要求学生掌握科学的学习方法和养成良好的思维习惯，更好地适应社会的发展；要有对新知识的理解掌握和进一步内化过程，将知识进行整合为知识体系，形成再学习的能力。 4、通过实验实践，培养一支精通业务、勇于创新、积极探索的高素质的教师队伍。 二、研究内容 1、在研究“学案导学”基础上，根据他人的研究成果并结合农村初中数学课堂教学实际,运用相关理论进一步构建和完善“学案导学分层教学法”； 2、通过问卷调查和具体的教学实验，整理并分析实施“学案导学分层教学法”之后所带来的变化； 3、根据分析研究结果，得出若干结论并有针对性地提出一些尚待解决的问题，为广大数学教师在今后实施“学案导学”时提供依据或借鉴。 4、研究的重点：①根据“学案导学”的基本目标进一步找寻“学案导学”的合适的支撑理论；②进一步研究数学学案的编写方法，提高学案导学的可操作性；③进一步完善和优化“学案导学分层教学法”的操作程序，增强其实用性。 三、研究思路 1、进行课堂教学模式及学生学习能力、方式的现状调查；收集整理相关方面的资料，组织教师进行学习，加强课题组成员的理论修养和科研水平。 2、课题组定期（每周）开展研讨活动，学习交流研究心得，提交相关论文、计划，完善研究方式。 3、采用“走出去，请进来”的办法，不定期请有关专家作指导，在适当的时候出去学习交流，坚持以课堂为研究的主阵地，跟踪调查学生导学案使用情况。 四、研究方法 1、自然实验法。实验教师在教学实践活动中，朝着实验目标根据实验安排施加实验因子。各实验班均进行“对学生有效分层”、“教材处理”和“教法选择”的“学案导学分层教学法”实验、研究，只是侧重的不同，各子课题成果互相利用、互为补充、有机结合。 2、经验总结法。实验教师在实验过程中，不断地总结经验教训，总结得失，敏锐地抓住实践中的“灵感”和“顿悟”，并不断地学习相关理论，相互渗透，有机结合，进一步充实和修订实验方案，改进实验的操作方法、手段。 3、调查、比较法切实调查学生在实验的初始状态及实验各阶段的情况和变化趋势，认真比较，进行统计分析，看学生的变化是朝着实验所希望的方向发展还是事与愿违，并及时调控。 五、研究过程设计（阶段时间划分、阶段达成目标、阶段研究内容、阶段成果形式、阶段负责人）本课题研究分四个阶段进行，即准备阶段、实施阶段、准备结题阶段、成果总结阶段，周期两年(2017年3月——2018年12月)。 (一)准备阶段(2017年3月——2017年7月) 1、学习新课程理论及有关该课题方面的理论。 2、进行现状调查，制定实施方案。 3、将准备阶段的各种资料归拢建档。
输电线路工程施工项目管理模式探究 发表时间：2018-06-19T15:12:53.907Z 来源：《电力设备》2018年第4期作者：邵军童波 [导读] 摘要：随着电力行业的快速发展，输电线路工程项目管理是一个复杂的工程，由于项目投资大、工期往往要求急等各种制约因素众多，因此面临的风险也比较多。 (国网新疆电力有限公司奎屯供电公司新疆奎屯 833200) 摘要：随着电力行业的快速发展，输电线路工程项目管理是一个复杂的工程，由于项目投资大、工期往往要求急等各种制约因素众多，因此面临的风险也比较多。本文在全面详细介绍输电线路工程施工项目管理内容的前提下，分析目前电力企业在管理工程中出现的问题，并针对性的提出有效的解决措施。以完善输电工程施工方法和流程，提高项目施工的可行性和科学性。 关键词：输电线路工程；施工项目；质量管理；安全管理 引言 经济的快速发展，推动着我国电力行业的发展，输电线路与人们的生活息息相关，是人们日常生活用电的保障。输电线路建设是电力工程中最重要的一项工程，施工质量好坏直接影响整个电网系统的稳定，加强对输电线路的施工管理尤为重要。 1输电线路工程施工项目管理的基本内容 输电线路施工项目主要是一个以成本控制为前提，对施工质量、进度、安全管理的过程。 1.1质量管理 （1）输电线路工程建设的设计图纸，施工方案是工程建设的重要环节，是保证项目工期、质量、投资。运行安全的可靠关键。在施工前期准备时，应组织设计、施工单位、监理对设计图纸和施工方案进行严格审核。以便及时发现存在问题，并跟进纠正。（2）在输电线路工程建设工程中确保施工质量：①提高施工人员的施工技能；②根据工程项目的实际需求，制定严格的施工流程和技术标准，选择合理科学的施工技术，加强施工技术管理。（3）将工程项目的主体部门、隐藏工程和主要机构都纳入现场施工的重点管理中，并全面检查施工原材料、技术措施、施工工艺等，并在整个施工工程中严格规范现场施工操作，保证工程质量。 1.2进度管理 输电线路工程施工进度管理是工程项目管理中最为重要的环节之一，工期计划涉及的因素很多，需综合平衡。且工程进度会直接影响到项目的完成时间。在对工程量和施工单位生产率综合估算的基础上，具体考虑施工资源、施工条件、施工环境、施工人员等各种因素的对工期的影响，进而制定合理的工程项目工期。 1.3安全管理 输电线路工程施工项目本身就是一个复杂的、多专业的系统工程，涉及了建设方、承包方和设计、监理、施工单位等，预先对项目风险因素分析、识别和评估，制定科学的控制措施，以“预防为主”为核心，避免一起失误和防止事故发生，是施工安全管理的硬性要求。（1）实施“项目负责人”安全责任制，以项目经理为安全第一负责人，项目总工全面负责安全生产技术，各施工队和班组长分别对负责各自管理模块的安全监督和管理工作。（2）施工前做好安全技术交底，确保每一位施工人员清楚了解施工的安全注意事项，施工技术要求和施工流程；施工工程中加强规范施工操作，坚决杜绝人为操作失误引发安全事故；加强对施工材料、施工工具使用、电气设备操作及施工现场防火等全面检查工作，发现安全隐患立即整改。树立了一切风险可以防范或降低的安全风险管理，做到由事后处理向事前控制的根本性转变。 2强输电线路施工项目管理的对策 2.1建立完整的施工管理机制 在输电线路施工管理过程中，有必要建立一套完整的施工管理方案。合理分配各部门工作任务，促进整个施工有序进行，各部门之间默契衔接，严格按照施工管理机制。例如，采购部门在进行原材料购买前，需提前和审计部门、财务部门对工程预算和工作费用开销进行审阅、核算，充分配合，企业内部设立责任机制，保证施工有序稳定进行。 2.2做好材料管理工作 对于出入施工现场的所有原材料，必须数量、规格统计，严格按照施工标准。建立相关材料管理标准机制，明确材料的规格、数量、型号等要求。进出材料数量，需要物资部门登记审核。采购部需对材料进行统一招标采购，严格按照采购标准。和材料供应商，签署合同，对于不合格材料，坚决予以退还。 2.3加大施工单位项目经理部的监管力度 项目经理部必须加强管理人员的凝聚力，使其能代表企业切实履行施工合同，做到对发包人和项目产品负责。在对劳务分包企业的用工上，应当给予项目经理部充分的管理权限，包括队伍的选择、调度和清理；有条件的企业应建立自己的劳务分包公司，通过有条件筛选的准入机制，形成相对稳定的劳务人员，同时提供相应的培训和考核，以改善行业用工环境。 2.4质量管理方面 （1）在可行性研究阶段时集思广益，经多方面、多层次的反复论证，尽可能请丰富经验，实力的工程咨询公司协助制定和专门的专家论证。在初步设计和施工图设计阶段，找到强有力的设计单位进行初步设计或施工图设计，并慎重对比后选择设备，对项目施工的质量的控制和控制建设项目造价能起到稳妥的保证作用，避免出现重大修改而增加造价。（2）施工材料和设备的采购需兼顾经济性和有效性，并按工程的生命周期去选择设备，以有效地降低工程项目费用成本，且可以保证项目顺利实施和安全完成，并有利于设备的安全可靠运行。（3）加强施工人员队伍素质的培养，全面提升施工人员的技能水平和职业素养，将责任落实到个人，以保证项目施工的质量。（4）全面完善和提升输电线路工程项目管理评价机制，以对工程项目竣工验收后对整个项目涉及的初期设计、中期施工生产及后期投运等过程全面的科学分析和评价，同时保证高度的公平性和客观性。（5）建立和完善项目管理体系，实行工程资源、人力资料等共享并进行合理的调配，以节约施工成本和提高工程质量。 2.5安全管理 （1）科学合理地安排施工项目中的各项工作顺序，并根据项目的工作清单、约束条件、项目的资源数量和质量要求等，对项目的工期进行估算，以保证工期的现实、有效且安全、有质量。（2）建立安全生产责任制，并实行分级负责管理，并制定严格的考核标准，以“安
一、名词解释 1.分配常数：又称分配系数，是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析：确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志，分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶：指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交：在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR：是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达：外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除：是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因，从分子水平上设计实验，将该基因从动物的原基因组中去除，或用其它无功能的DNA片断取代，然后从整体观察实验动物表型，推测相应基因的功能。 8.物理图谱：人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对(bp，kb，Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分开后，到检测器被检测并记录下来，经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90度角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。
11.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)：是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移：用电泳技术将凝胶中的蛋白质，DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物，形成印迹。 15.多重PCR：是在一次反应中加入多对引物，同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map)，它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合
附件 中国石油天然气集团公司 工程建设项目质量管理规定 第一章总则 第一条为加强和规范中国石油天然气集团公司（以下简称集团公司）工程建设项目质量管理，认真贯彻“诚实守信，精益求精”的质量方针，提高工程建设项目质量水平，增强核心竞争力，根据国家工程建设法律法规和集团公司有关规定，制定本规定。 第二条本规定适用于集团公司及其全资子公司、直属企事业单位（以下简称所属企业）对新建、扩建、改建等工程建设项目的质量管理工作。抢险救灾和临时性工程建设项目以及油气田工程技术服务和炼油化工检维修作业的质量管理工作不适用本规定。 集团公司及所属企业控股公司的工程建设项目质量管理，应当通过法定程序贯彻执行本规定。境外工程建设项目质量管理按照项目所在国的法律法规，参照本规定执行。 第三条本规定所称工程建设项目包括油气田地面、油气储运、销售和炼油化工等石油石化专业工程项目以及矿区建设等其他工程项目。
第四条集团公司质量与标准管理部负责工程建设项目质量的综合管理与监督，主要履行以下职责： （一）贯彻执行国家工程建设质量管理法律法规，制订集团公司工程建设质量管理相关规定； （二）组织和指导所属企业建立健全工程建设项目质量管理体系，并监督检查体系运行情况； （三）负责集团公司工程质量监督业务管理工作，归口管理石油天然气工程质量监督总站和各监督站（以下简称集团公司工程质量监督机构）； （四）组织集团公司对工程建设项目的质量检查，负责工程质量信息管理，掌握质量动态； （五）归口管理工程建设重要产品、设备驻厂监造工作； （六）协调处理集团公司及所属企业与外部用户、专业分公司之间发生的重大工程质量纠纷，组织调查处理特大工程质量事故以及涉及两个或两个以上专业分公司的工程质量事故。 集团公司总部机关其他有关部门在其职责范围内负责工程建设项目质量管理相关工作。 第五条专业分公司负责本专业工程建设项目质量管理工作，主要履行以下职责： （一）贯彻执行国家工程建设质量管理法律法规，组织落实集团公司工程建设质量管理规定，制定本专业工程建设项目质量管理的实施细则；
施工文件 施工管理 1. 施工项目管理实施规划（施工组织设计）及报审 2. 施工方案(技术措施、作业指导书)及报审 3. 施工技术交底记录 4. 工程进度计划（调整计划）及报审 设计变更 1. 工程设计变更单及报审 2. 变更设计联系单及报审 3. 工程设计变更执行报验单 4. 设计变更单及工程联系单汇总表 5. 材料、零部件、设备代用审批 杆塔及基础 开工文件 1. 开工报告 2. 开工报审 质量验评划分 1. 质量验评划分及报审 2. 工程质量等级评定及汇总表（分部分项）
土石方工程 1.分部工程开工报审 2.路径复测记录表及报审 3. 普通基础分坑及开挖检查记录 4. 掏挖式基础分坑检查记录 5. 灌注桩基础分坑检查记录 6. 施工基面及电气开方检查记录 7. 其它 基础工程 1. 分部工程开工报审 2. 现浇铁塔基础检查及评级记录 3. 现浇铁塔拉线基础（含锚杆拉线）检查及评级记录 4. 装配式基础检查及评级记录 5. 混凝土电杆塔基础检查及评级记录 6. 岩石、掏挖铁塔基础检查及评级记录 7. 灌注桩基础检查及评级记录 8. 灌注桩群桩基础检查及评级记录 9. 贯入桩基础检查及评级记录 10.隐蔽工程（基础浇前、支模）签证记录 11.隐蔽工程（基础浇制）签证记录 12.隐蔽工程（基础拆模）签证记录 13.隐蔽工程灌注桩(挖孔桩)签证记录
14. 隐蔽工程灌注桩（挖孔桩）基础承台（连梁）签证记录 杆塔工程 1. 分部工程开工报审 2.自立式铁塔组立检查及评级记录 3. 拉线铁塔组立检查及评级记录 4. 混凝土电杆组立检查及评级记录 5. 杆塔拉线压接管施工检查及评级记录 质量保证资料 1. 水泥出厂证明（合格证、检验报告）、复试报告、跟 踪台帐及报审 2. 砂、石、非饮用水等试验报告、跟踪台帐及报审 3. 混凝土配合比试验报告、跟踪台帐及报审 4. 砂浆配合比试验报告及报审 5. 混凝土掺合料、外加剂试验报告及报审 6. 预拌（商品）混凝土出厂资料 7. 混凝土试块试压报告、混凝土试块抗压强度检验报告及报审 8. 砂浆抗压强度试验报告及报审 9. 钢材出厂证明（合格证、检验报告）、复试报告、跟踪台帐及报审 10.钢筋焊接接头力学性能检测报告、钢筋混凝土用钢筋性能检测报告及报审 11.土壤击实试验报告及报审 12.桩基检测报告及报审 13.灰土地基检测报告 14.地脚螺栓、角钢等出厂证明文件、焊接试验报告及报审
学案导学课题研究中期总结报告
导学案课堂教学评价的研究中期报告 为了全面推行课堂教学模式改革，转变教师的教学方式，优化课堂教学流程，减少无效或低效的教学活动。自从课题成立以来，学校做了很多工作，加强教研组、备课组的建设，搭建备课组合作共享的实践平台，促进教师的专业发展和团队水平的整体提升；为了提高学生的综合素质，改善学习方式，拓展学习时空，力求在减轻学生课业负担的同时提高教育教学质量。学校在课堂教学模式上进行了有益的探索，进行高效课堂导学案模式的教学。 实践证明，本课题达到了初期目标：通过提高课堂教学的效率，减轻学生的课业负担，逐步做到两个“还给”：一是把课堂时间“还给”学生，意味着教师少讲或不讲，体现学生的主体性；二是把课外时间还给学生，意味着少布置或不布置课后作业。让学生有充分的时间自己思考和探索，实施素质教育。 每学期开学初，教研组定出教学计划，安排好各位教师具体任务；每周二在教研会上进行集体备课，研讨本周的上课内容和存在的问题，先由主备人说设计思路，提供备课稿，再由备课组成员合议，整合资源，编写导学案，并在实践中不断完善、修改导学案。在本学科模式下研究不同课型的教学模式，如：新授课、复习课、习题课、试卷讲评课、等各种课型。 导学案是学生学习的重要依托，我校精心设计导学案模板，相互借鉴取长补短，精心设计导学案知识点及流程，先学后教，疑难处师生讨论研究，教师点拨，每节课还设有达标检测。一份导学案一般包括：学习目标、学习重难点、知识链接、学法指导、课堂探究、达标检测、学习小结。以导学案为载体，以导学为方法，学生的自主学习为主体，小组合作完成学习任务的导学案模式，充分体现了学生的主体作用，挖掘了学生的最大潜力。我认为这是对传统教学方式的革命，尤其是在我们数学教学工作中，它的效果显著。主要优点有：（一）以学生自主学习为主，体现了对学生主体的尊重。 （二）传统课堂中提问的随意性和琐碎性，提高了课堂的学习效率。年级数学教学成绩在期末考试中同比增长幅度大。 （三）导学案对教师的业务、集体备课中的协作意识增高了。 试行之初，我们的课堂教学发生了惊人的变化，也立刻显现出导学案教学模式的优越性：课堂上老师讲的少了，学生的学习兴趣浓厚多了，学生的思维
奥鹏17春16秋东财《工程项目管理》在线作业一 一、单选题（共10 道试题，共40 分。） 1. 整个工程项目的管理，是以（）为中心的专家管理。 A. 业主 B. 承包商 C. 咨询工程师 D. 消费者 正确答案： 2. ____说明生产过程正常，质量稳定 A. 对称型 B. 左右缓坡型 C. 锯齿型 D. 孤岛型 正确答案： 3. 对施工图负全部责任的单位是： A. 主管单位 B. 设计单位 C. 审核单位 D. 投资单位 E. 施工单位 正确答案： 4. ____是工程项目的永久性技术文件，是进行维修、改进、扩建时的重要依据，也是必要时对工程进行复查的重要依据。 A. 开工执照 B. 工程档案 C. 竣工报告 D. 竣工工程一览表 正确答案： 5. 《招投标法规定》招标人收到投标文件后，应当签收保存，不得开启。投标人少于（）的招标人应当重新招标 A. 2个 B. 3个 C. 4个 D. 5个 正确答案： 6. 项目合同的履行分为实际履行和____ A. 强制执行
C. 必须履行 D. 违约赔偿 正确答案： 7. 我国从哪年开始实施项目法人责任制 A. 1978 B. 1985 C. 1992 D. 1997 E. 2000 正确答案： 8. 在设计阶段，投资控制的任务是____ A. 通过搜集类似项目投资数据和资料,协助业主指定项目投资规划 B. 根据项目总工期的要求,协助业主确定合理的设计工期要求 C. 根据设计的阶段性输出,由粗而细地制定项目进度计划,为项目进度控制提供前提和依据 D. 了解业主建设要求,协助业主指定项目质量目标规划 正确答案： 9. ____是对各种建筑工程项目提供全面保障的险种。 A. 建筑工程一切险 B. 安装工程一切险 C. 货物运输险 D. 人身意外险 正确答案： 10. 投资决策要尊重客观规律，要按科学的决策程序办事，要运用科学的决策方法符合____原则 A. 科学化决策原则 B. 民主化决策原则 C. 系统性决策原则 D. 合理性决策原则 正确答案： 东财《工程项目管理》在线作业一 二、多选题（共15 道试题，共60 分。） 1. 工程项目的系统特点包括____ A. 新颖性 B. 复杂性 C. 不确定性
输电线路工程施工项目部工作总结 输电线路工程施工项目部工作总结 一、2013年工作回顾 兰州东～天水～宝鸡750kV双回路送电线路工程是西北750kV主网架的重要组成部分，是连接甘肃和陕西电网的主要电力高速通道。我项目部负责施工的兰天宝750kV线路工程Ⅰ标段，在甘肃省电力公司、建设公司和青海送变电工程公司领导的关怀下，在业主、监理及其他单位的大力支持下，认真落实建设公司对建设工程的总体部署，参建人员紧密围绕我项目部年度完成目标，克服道路浮土、大风等环境，突破政策协调的重重包围，攻坚克难、精心组织、灵活运用施工方法，完成了导地线展放任务，并取得了一些成绩，现将总结如下，不足之处敬请批评指正。 （一）主要指标完成情况 项目部在兰天宝750kV线路工程建设中继续发扬青藏线五个特别精神，全体参建人员参与工序策划、相互交流、择优施工方法，用项目部的凝聚力攻克了重重困难，坚决执行甘肃省电力公司、建设公司、青海送变电工程公司及业主、监理项目部的各项决策，按照上级安全管理提升、质量月等活动要求，项目部积极组织深入工地传达活动精神，全面推进工程建设。兰天宝项目部全体人员在公司总经理杨记宁的
精心领导和公司工程建设部门的全力支持下，全体人员同心协力，顺利完成了项目部制定的年度目标，主要完成工作如下： 1.2013年9月14日完成全部81基铁塔基础浇制，共计完成混凝土量10765.1m³； 2.2013年10月15日完成全部81基铁塔组立，其中角钢塔75基，钢管塔6基； 3.2013年11月14日完成架线施工2*20.67km。 （二）主要完成重点工作任务（工作亮点） 自开工建设以来，项目部根据管理规范性、技术先进性、质量优良性、运行可靠性、全寿命周期成本合理性的创优总体要求，以高起点、高目标、高标准完成对各工序的精心策划和准备，大力推广三新技术应用，把工程安全质量工作作为核心，认真组织编制方案、措施，完成逐级审批，坚持进度服从质量，质量服从安全的原则，合理组织施工，控制关键工序，积极采取有效措施，使工程安全质量工作一直处于受控状态，主要工程建设亮点总结如下： 1.引进钢筋直螺纹连接设备 项目部为了提高施工效率、节约原材料、减少环境污染、推广三新技术应用，在基础钢筋连接中采用机械连接，减少了加工焊接的工作量，提高了施工工效，较焊接节省了大量的原材料，经济效益明显。