X-系列ICP-MS初级操作
在初级操作中, 我们首先要了解如何开机预热, 启动真空系统, 点燃等离子体以及进入操作模式等, 然后要了解如何编辑基本分析方法, 如何准备样品和做各中校正, 再进一步实现从开机到得到分析结果的整个过程, 初步的能够完成一些日常分析任务。
一．日常操作
1. 开机预热
2. 制定分析方案
3. 编辑分析方法
4. 点火→进入Operate状态
5. 调节仪器最佳化
6. 仪器的Calibration
7. 样品分析
8. 熄火并返回Vacuum状态
9. 完全关机
二.其他操作
CCT模式
三. 常见故障与排除
四. 日常维护
一. 日常操作
1、开机预热
1)检查Ar气是否足够（>2瓶）
2)打开排风，检查风量
3)打开稳压电源开关，检查电源是否稳定，观察约1分钟
4)打开Ar气钢瓶的总开关（开到最大），调分压至0.6MPa(不能
大于0.7MPa）
5)取下仪器左边的盖子，从左向右打开左下方的三个电源开关
6) 盖上仪器左边的盖子, 打开电脑，待自检完成后，等候约1分
钟, 双击“P lasma Lab”图标，进入操作软件主窗口，单击Instrument →Tune,检查炬箱的三个参数：
Major →Sampling Depth 采样浓度
Minor →Horizontal 水平
→Vertical 垂直
不在两头，“▲”不为0或最大
如果为0, 则在”Configuration”中选择标准条件下的一个已经存储的条件, 将其调出, 此时以上位置应不为0。7）检查软件上方的炬箱调谐位置, LOAD和TUNE应不为0或255, 如为0, 则进入Advanced将其改为100(密码为iknowwhatiamdoing 或vgengineer), 如为255则与工程师联系。
8）单击左上角的“ON”键→YES，启动真空系统，等待约0.5―4h不等，待“Analysis”的真空显示小于6×10-7mba时，可进行下一步操作。
2、制定分析方案
1)确定样品是否适合用ICP-MS分析(ICP-MS并非万能, 主要以
微痕量分析为主)
固体样品≤0.01%
液体样品≤1ppm（最好≤100ppb）
2)确定样品分解方法（溶样方法）
尽量不用H2SO4和H3PO4
如果用HF酸的话，一定要赶尽
尽可能用HNO3或H2O2分解样品
3)配制工作曲线（混标）
浓度之间相差5—10倍
一般用2—3点
标准中包含内标.
两个常见错误: a).所有分析元素的浓度都一致, 这样省事, 但
不科学, 应该根据不同元素的浓度范围, 制
定其相应的标准溶液浓度。
b).标准曲线点与点之间相隔太近, 如2, 4, 6,
8…,完全没有必要。
4)样品准备：
稀释到合适的倍数(计数一般小于5,000,000Cps).
样品必须消解彻底，不能有混浊, 否则必须先用滤纸过滤, 但
不要抽滤
样品的固体物含量≤0.1%
样品当中包含内标
3、编辑分析方法
1)分析软件（Plasma Lab）主窗口内容简介：
1> 仪器的三种状态：
Shutdown 完全关机状态（机械泵、分子泵全关）
On↓↑Off
Vacuumn Ready 真空系统启动
On↓↑Off
Operate 完全操作状态（分析状态）
2> 仪器软件上方显示的重要参数
Neb：雾化气压力（工作状态时1.5—2.5bar）
Fwd: ICP正向功率（工作时一般为1200-1300W）
Ref: 反射功率（工作时一般≤10W）
炬箱的调谐参数：Load和Tune: 不能是0或255，否则有问题真空：EXP：两个锥之间的真空。工作状态时约为
2.0±0.2mba
Ana：分析完真空，预热时<6×10-7mba
工作时一般<1×10-6mba 分子泵状态：SPEED 分子泵转速（一般预热后为
1000H Z）
LOAD分子泵电机的电流（预热时
为1A，工作时为2A）
3> Plasma Lab软件的三个模块
Instrument仪器控制
参数设置
最佳化调节
Technician: 仪器的后台监视与错误报警
Experiment: 编制分析方法
2）编辑分析方法:
1>单击Experiment→Creat a New Blank Experiment →Continuous →OK →Default →Open
2> Set Up →Configuration Editor →忽略, 在一般操作
中, 我们不需要选择。
3> Set Up →Timings
设置最大样品提升时间, uptake: Maximum Delay(s) (30—50s)
4> Set Up →Analyte 选择分析元素（包括内标元素）
5> Set Up →Acquisition Parameters(数据采集条件)
一般选择Main Peak Jump
Cnannels=3
改变Sweeps使采集时间在合适的范围内, 一般Acquisition Time=10—60秒
6> Set Up →Internal Standards
先定内标→
Technique →选定内标元素
7> Set Up →Isitope Ratio →忽略
8> Instrument Calibrations →忽略
9> Calibrations Method →Method →Fully Quant
10> QC Setup →忽略, 在基本操作中不介绍。
11> Sample list →Sample list √增加一个样品
12> Sample list →Fully Quantitare Concentrations 设
置标准点的浓度
13> 单击左上角的Files →Save As →选定文件名和子目
录→Save 方法编制完毕。
4、点火→进入Operate状态
1>检查Ar 气是否足够，标准和样品是否备好
2>打开水循环开关，观察压力和温度是否正常
3>装好蠕动泵管，压下泵管夹
4>确认排风工作正常
5>把进样毛细管插入纯水中
6>单击ON →YES，此时仪器将自动进入Operate状态
5、调节仪器最佳化
1>将进样毛细管放入1ppb Tune Solution
2>单击Instrument →Tune
检查炬箱的三个参数：
Major →Sampling Depth 采样浓度
Minor →Horizontal 水平
→Vertical 垂直
不在两头，“▲”不为0或最大
3>检查Global下面的检测器电压
Analogue Detector: 1800V-2500V
PC Detector:3000—4500V
4>调节Tune →Minor下的炬箱位置，使显示的信号最大，
一般用（Co59,In115和U238来看）
5>调节Tune →Minor下的Nebulizer使信号最强，RSD最
小
6>可以检查其它离子镜是否在最佳位置，然后Save条件。
6、仪器的Calibration:
Mass Calibration
Detector Cross Calibration
Detector Plea???all Calibration
1>做Mass Calibration
a.将进样毛细管放入1ppb Tune Solution 中，调节最佳化。
b.单击Experiment →Open An Exiting Experiment →OK
→选择Instrument Calibration子目录→选择Mass
Calibration →Open
c.单击Sample List →Sample List
d.增加一个样品（注意样品类型为Instrument Setup）
e.单击样品最左边方框使其变黑→单击样品表上方的Show
Advanced →单击样品表下方的Instrument Calibration
→在Mass Calibration前的方框内打√→一般选择
√Update Mass Calibration
f.单击Queue键→Append →OK →开始进行质量标准
g.待其完成后，单击OK，如果样品变为黄色，则成功.
2>做Detector Cross Calibration
a.确认仪器已处于最佳化
b.将进样毛细管放入20—30ppb Tune Solution 中
c.单击Experiment →Open an Exiting Experiment →OK
→Instrument Calibration子目录→Mass Calibration →Open
d.单击Sample List →Sample list
e.增加一个样品，单击左边使其变黑
f.Show Advanced→Instrument Calibration→
√Detector Calibration
g.单击Queue →Append →OK即开始进行
7、样品分析
1>打开已经准备好的分析的方法
2>单击Queue →Append →OK 然后按照提示将进样毛细管
放入相应瓶中，单击Continue进行测定
8、熄火并返回Vacuum状态
1>确认所有样品已分析完成
2>单击Off →YES
3>松开蠕动泵管夹
4>冷却约5min后，关闭循环水
5>关闭电脑
9、完全关机
1>确认短时间内没有样品, 一般每周测定一次以上请不要关
机。
2>单击Off →YES, 此时仪器会关闭机械泵和分子泵, 等侯
30分钟以上.
3>关闭电脑.
4>取下仪器主机的盖子, 从由向左依此关闭仪器左下方
的三个电源开关.
5>关闭排风开关.
6>关闭稳压电源开关.
7>关闭配电盘开关.
二.其他操作
仪器的其他操作主要包括: 碰撞室技术, XI接口, 冷等离子体屏蔽技术, 热等离子体屏蔽技术, 有机进样技术, 色谱联用技术, 激光进样, 膜去溶进样等.
这些技术的逐渐使用, 极大的拓宽了ICP-MS的应用范围, 这些使用都要以日常操作部分为基础, 最大的不同只是在调节仪器最佳化上, 编辑分析方法, 分析样品和各种校正都是基本相同的, 由于时间原因, 本次我们只介绍CCT的操作步骤.
1.碰撞室技术(CCT)
CCT技术的主要作用是减少多原子离子的干扰, 其原理在仪器结构部分已经介绍, 通过不同种类气体的引入, 能够使质量数80以下(包括80)的多原子离子的干扰程度得到极大的降低, 从而提高灵敏度和准确性, 具体的操作步骤如下(以7%氢+93%氦混合气为例).
1>打开He气钢瓶（要求纯度≥99.999%的）调气压至0.1MPa.
2>在Instrument →Configurations中选择标准模式，调
出一组参数.
3>按正常模式点燃等离子体，进入Operate状态.
4>将进样毛细管插入1ppb调节液中, 检查标准条件下的信
号情况, 如灵敏度, RSD等.
5>在Instrument →Tune –Add Gas中打开CCT1的气体，
调流量至7ml/min，等待约10min.
6>将进样毛细管插入1ppb In溶液中.
7>在Instrument →Configurations →选择√CCT Ch1,
然后在下面的选框内打√的位置重新打√.
8>调节碰撞气流量和仪器参数，使在纯水中Ar（80）的计数
小于200，同时In的灵敏度大于20000/ppb.
9>编辑分析方法，选择数据库为Default CCT.
10>分析样品.
11>在Tune 中取消80和56等严重干扰的质量数.
12>返回标准模式.
13>熄火
三. 常见故障与排除
问题一：点火时显示RF错误
原因1：点火时氩气压力降低，检查氩气气路，在打开冷却气时压力是否下降，将钢瓶阀门开到最大。
原因2：炬箱位置处于0位，往往在完全关机又重新开机时出现，此时调一组以前存储的参数即可。
问题二：点火时显示水流太低
原因1：水循环未打开（检查压力，温度）。
原因2：等离子体门没关好。
原因3：电源中J19接触不良。
问题三：不点火
原因1：匹配箱调谐位置（Load 和Tune）在0和255。
原因2：分析室真空为1E10-8。
问题四：无信号
原因1：检测器高压为0（往往在完全关机又重新开机时出现），设置高压后即可正常。
原因2：分析室真空为不够。
T code： MM01 创建物料（初始屏幕） 物料，手工填写，外部采购 物料内部，不用填（这一次不用填） M 机械工程 ROH：原材料 基本数据12 采购 工厂12 会计12 成本12 工厂1000 库存0001 物料号码自动弹出 输上物料描述（名字） 计量单位：pc 回车 物料组:0001 旧物料号 数据二回车 采购采购组100 会计1 评估类3000 原材料1 价格控制S 标准价格：7（做成本分析用）回车是保存 扩充: /nmm01 输入物料号码，回车重新进入勾选，就有MRP1234了 MRP1： MRP类型：pd MRP控制者001 批量大小ex 回车 MRP2: 计划交货时间，leadtime: 3 即采购提前期0
外部采购仓储地点：0001 计划边际码：000回车回车 是保存 再重新搜索的时候就有MRP1234了 MM60 搜索输入自己的工号点击闹钟按钮 后勤，采购，主数据，供应商，中央的。 （采购--MK01基础数据和采购数据 中央的—XK01 多一个公司代码。 财务供应商--FK01） 回车进入创建页面 公司代码：1000 采购组织1000 账户组：0001 回车 标题：公司 名称：TEST02 搜索项：TEST 国家：CN 语言ZH 回车 供应商控制页面回车 交易支付页面回车 联系人页面回车 会计信息页面统驭科目：160000 现金管理组：A1 回车付款条件0001 回车 回车采购数据订单货币CNY 付款条件0001勾选：基于收货的发票验证回车 合伙人功能：发票，送货，付款供应商信息的填写。 OA 订货地址100273
回车保存供应商号码弹出 供应商0000100383 对于公司代码1000 采购组织1000 已被创建 消息号F2175 /NMKVZ供应商清单：采购 检索项：8048 账户组：0001 点击闹钟 帮助做搜索 包含TEST 则输入：*TEST* 以TEST开头，则：TEST* 以TEST结尾：*TEST 简称里面：TEST 创建采购申请： 路径：后勤管理→物料管理→采购→采购申请→建立[ME51N] 说明文件可以关闭 层级界面 凭证类型：NB 采购申请（控制编码范围，控制屏幕格式）编码(自动给号)货源确定（自动勾选）抬头文本（可选项描述） 项目概览展开按钮：输入物料号码2875数量4 交货日期不输入就是当前日期工厂1000 回车保存之前点击检查按钮点击保存 采购申请被创建记住采购申请号码 点击其他部门需求，到达显示界面，要修改就点击笔按钮。 后勤物料管理采购订单ME21N 关闭说明输入供应商编号（地址与供应商主数据关联）回车 抬头：采购组织1000 采购组100 公司代码1000 XK03 供应商主数据勾选地址回车
时尚实业展会展览操作规程（提案） 1．0参展目的及原则 2．0展会信息收集 3．0参展前准备工作 3．1信息调研 3．2真实性调查及风险防 3．3询价和议价 3．4财务预算 3．5订立合同 4．0展会策划 4．1展位选择 4．2展台布置 4．3广告信息发布 4．4潜在客户邀请 4．5展品及布件的运输和保管 5．0参展人员 5．1参展人员的分工 5．2参展人员行为规和培训 6．0展会总结 6．1效果分析 6．2信息收集 6．3总结报告 附件： 1．年度展会信息收集表格 2．参展信息及参展提案 3．展会预算表 4．参展方案模板 5．展会信息收集概要 6．客户信息登记表 7．总结报告模板 /.本<展会操作规程>将作为公司参展的指导性文件，其中部分细节虽参展经验的增加可进行调整升级。/
1．0 参展目的及原则 时尚实业参展目的：企业形象和品牌推广、产品展示、市场宣传、即时促销和信息收集 时尚实业参展原则： 1．参加展会应本着严谨、经济、实效、符合市场战略的原则。避免盲目的、冲动的、铺浪费的参展行为。 2．参展前应认真了解展会信息，仔细阅读参展商手册，并做好真实性调查等风险防工作3．参加展会应做详细周密的策划, 包括展位的选择、展台的布置方案、广告软文的发布、目标客户的邀请等。 4．除布展工作外，应强调参展人员的作用，做好明确的职责分工和展前培训，展示公司团结、专业的形象，并能即时把握商机，实施销售。 5．展会应与市场拓展紧密集合，地区性展会应为我公司拓展市场区域，展会后应及时跟进，做好后续宣传和客户开发工作。 6．展会结束后应做效果分析并提交总结报告，积累参展活动经验。 2．0 展会信息收集 市场管理部应在每年初1月份进行本年度各地展会的信息进行收集，并整理为《展会信息报告》，发给各部门，具体由市场调研负责。 展会信息渠道为：互联网、专业和行业杂志、户外广告和行销信息、行业协会活动等 对收集后的展会信息应做初步的评价，对其相关性、影响力、往期信誉和效果进行分析，以作为参展决策参考。 3．0 参展前准备工作 3．1 信息调研
Western Blot Western Blot 采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE 分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄（NC ）膜或聚偏二氟乙烯（PVDF ）膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术广泛应用于检测蛋白水平的表达。 流程：蛋白样品的提取→蛋白样品定量与变性→PAGE 凝胶电泳→转膜→丽春红染色→封闭→抗体孵育→底物显色。 实验器材和试剂： 一． 蛋白提取试剂 1.10% SDS 裂解液： 称取10g SDS 粉末加入双蒸水至90mL ，充分溶解，定容至100ml 室温保存。 2.RIPA 裂解液 1ml 裂解液工作液配方： 10ul 100mmol/L PMSF (1mM) 0.2ul 10mg/ml Aprotinin (2ug/ml) 5.0ul 1mg/ml Leupeptin (5ug/ml) 0.9848ml 裂解液 0.5ml 裂解液工作液配方： 5ul 100mmol/L PMSF (1mM) 0.1ul 10mg/ml Aprotinin (2ug/ml) 2.5ul 1mg/ml Leupeptin (5ug/ml) 0.4924ml 裂解液 PMSF 必须摇匀至无结晶时才可与裂解液混合 3．蛋白酶抑制剂：100mmol/L PMSF ： 17.4mg PMSF 粉末溶于1ml 异丙醇(AR)，分装250ul 每管后－20℃保存。使用终浓度为1 mmol/L 。【PMSF ：在溶液中不稳定，应在临用前从储存液中现加于裂解液中。PMSF 剧毒，严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险一旦眼睛或皮肤接触了PMSF ，应立即用大量的水冲洗。凡被PMSF 污染的衣物应予丢弃。】 二． 蛋白定量试剂： 1. BCA 蛋白定量试剂盒 2. 10ml 0.9%的生理盐水（90mg NaCl 溶于10ml 去离子水中） 三． 上样用试剂： 6×SDS 上样缓冲液： 取一个离心管，秤取2.0g SDS 粉末，6mg 溴酚蓝(BromopHenolblue;Albutest)粉末，然后用枪头加入5mL 1.5mol/L Tris-HCl (pH 6.8)，用移液管加入10mL Glycerol(甘油，丙三醇)，枪头加入2mL β -mercapteethanol （β -巯基乙醇）充分混匀，加双蒸水定容至20ml ，涡旋溶解。4℃避光保存。
学生成绩管理系统 我将把我的实现步骤完整的写出来，我是在VC 6.0版本下用MFC实现的。 我创建的基于单文档的应用程序，过程不介绍，大家都会。下面的是我系统菜单： 思路： 刚进入系统时，只有“登录”菜单可用，其他三个菜单项都是灰色不可用的。当用户点“进入系统”菜单项时，用户输入用户名、密码和用户类型，系统将根据相应的用户权限使相应的菜单可用，并且“进入系统”菜单项变为不可用。如：如果用户类型是学生，那么只有学生权限菜单可用，而“教师权限”和“管理员权限”都不可用，同时“进入系统”变为不可用。 “学生权限”下只有“查询成绩”，因为学生只可以查询自己相应的成绩；“教师权限”下有“查询学生成绩”和“增改删学生成绩”两个菜单项，因为教师除了可以查询学生成绩还可以增加、修改和删除学生成绩；“管理员权限”下有“管理学生”和“管理教师”两个菜单项。 整体设计： 因为我们要设置系统菜单的状态，所以必须在CMainFrame中添加相应的函数和代码，具体步骤如下： 【步骤1】由于系统要使用ODBC类操作数据库，所以需要在stdafx.h中加入代码： #include
公路运输详细操作流程 流程梗概： 接单：公路运输主管从客户处接受（传真）运输发送计划。公路运输调度从客户处接出库提货单证。核对单证。 登记：运输调度在登记表上分送货目的地，分收货客户标定提货号码。司机（指定人员及车辆）到运输调度中心拿提货单，并在运输登统本上确认签收。 调用安排：填写运输计划。填写运输在途，送到情况，追踪反馈表。电脑输单。 车队交接：根据送货方向，重量、体积、统筹安排车辆。报运输计划给客户处，并确认到厂提货时间。 提货发运：按时到达客户提货仓库。检查车辆情况。办理提货手续。提货，盖好车棚，锁好箱门。办好出厂手续。电话通知收货客户预达时间。 在途追踪：建立收货客户档案。司机及时反馈途中信息。与收货客户电话联系送货情况。填写跟踪记录。有异常情况及时与客户联系。 到达签收：电话或传真确认到达时间。司机将回单用EMS或FAX传真回盛华公司。签收运输单。定期将回单送至客户处。将当地市场的住处及时反馈给客户。 回单：按时准确到达指定卸货地点。货物交接。百分之百签收，保证运输产品的数量和质量与客户出库单一致。了解送货人对客户产品在当地市场的销售情况。 运输结算：整理好收费票据。做好收费汇总表交至客户，确认后交回结算中心。结算中心开具发票，向客户收取运费。 1．配送功能要素 (1)备货。是配送的准备工作或基础工作，备货工作包括筹集货源、订货或购货、集货、进货及有关的质量检查、结算、交接等。配送的优势之一，就是可以集中用户的需求进行一定规模的备货。备货是决定配送成败的初期工作，如果备货成本太高，会大大降低配送的效益。 (2)储存。配送中的储存有储备及暂存两种形态。 配送储备是按一定时期的配送经营要求，形成的对配送的资源保证。这种类型的储备数量较大，储备结构也较完善，视货源及到货情况，可以有计划地确定周转储备及保险储备结构及数量。配送的储备保证有时在配送中心附近单独设库解决。 另一种储存形态是暂存，是具体执行日配送时，按分拣配货要求，在理货场地所做的少量储存准备。由于总体储存效益取决于储存总量，所以，这部分暂存数量只会对工作方便与否造成影响，而不会影响储存的总效益，因而在数量上控制并不严格。 还有另一种形式的暂存，即是分拣、配货之后，形成的发送货载的暂存，这个暂存主要是调节配货与送货的节奏，暂存时间不长 (3)分拣及 配货。是配送不同于其它物流形式的有特点的功能要素，也是配送成败的一项重要文持性工作。分拣及配货是完善送货、支持送货准备性工作，是不同配送企业在送货时进行竞争和提高自身经济效益的必然延伸，所以，也可以说是送货向高级形式发展的必然要求。有了分拣及配货就会大大提高送货服务水平，所以，分拣及配货是决定整个配送系统水平的关键要素。 (4)配装。在单个用户配送数量不能达到车辆的有效载运负荷时，就存在如何集中不同用户的配送货物，进行搭配装载以充分利用运能、运力的问题，这就需要配装； 和一般送货不同之处在于，通过配装送货可以大大提高送货水平及降低送货成本，所以，配装也是配送系统中有现代特点的功能要素，也是现代配送不同于已往送货的重要区别之处。 (5)配送运输。配送运输属于运输中的末端运输、支线运输，和一般运输形态主要区别在于：配送运输是较短距离、较小规模、额度较高的运输形式，一般使用汽车做运输工具。
详细操作步骤 一、供应商注册信息填写（企业） 1、进入注册界面：通过登录网址https://www.doczj.com/doc/2511610407.html,进入采购平台门户首页，在页面右下方点击“供应商注册”按钮进行填写注册信息； （图1：注册按钮） 2、注册须知阅读：为所有供应商提供一个公正、公平、公开的平等互利的采购平台，需要严格遵守宁夏建材采购平台的规定的各项规章制度，同时，也是为了保护每位供应商的自身利益和系统的可持续发展，请详细阅读注册须知。 （图2） 3、注册信息填写：如果同意宁夏建材采购平台的注册须知，点击页面最下方的“开始注册”按钮进行填写注册信息。
目前供应商注册性质分为企业和个人两种，一种的是以企业名誉进行注册的，填写企业的相关信息；企业信息主要分两部分信息：基本信息和联系人信息，页面中带* 号的是必输信息，请按企业的实际情况进行填写：以下具体详细介绍： 基本信息 *性质：选择企业； *公司名称：填写真实的公司名称，以营业执照上的公司名称进行填写； 注册地址：根据企业实际情况填写，此项不是必填项； 工厂地址：根据企业实际情况填写，此项不是必填项； *经营地址：按企业实际经营地址进行填写，越详细越好，便于以后业务往来； *公司邮箱：按实际情况进行填写； 公司电话：按实际企业联系电话填写，需要能联系到业务联系人的座机，具体填写格式如： *法人代表：按企业营业执照上的法定代表人姓名进行填写； *经营范围：按企业营业执照上的经营范围内容填写； *是否统一社会信用代码证：根据实际情况进行选择； *社会信用代码证号：根据实际情况进行填写； *组织机构代码证号：根据实际情况进行填写。
（社会信用代码证号或组织机构代码证号，是校验注册的唯一标识，同一编号不能重复注册） （图3：基本信息填写，数据为虚拟演示数据）联系人信息 *联系人：填写业务往来的主要联系人姓名； *证件类型：证件类型主要四种类型，二代身份证，港澳通行证、台湾通行证、护照,默认是的二代身份证，请按实际证件类型选择； 联系人证件号：根据选择的证件类型填写对应的证件号； *手机号：根据实际联系人的手机号进行填写，供日后业务往来与重要信息接收； *联系人邮箱：根据实际情况填写联系人邮箱，如有企业邮箱，需填写企业邮箱地址，供以后业务信息接收。
Word操作基本操作步骤 Word操作基本操作步骤 运用word进行文档排版时，我们一般情况按以下步骤进行： 启动word字处理软件 新建一个word空白文档（打开已有的word文档） 在文档中添加对象（文字、图片） 运用各种工具对对象进行设置，以达目的或要求 保存 （保存贯穿3、4之中） 打开文件： 步骤：单击“文件”---->单击“打开”----->单击c:→单击“my documents”→单击“打开”→单击“知识实体在符号与规则的结合中诞生”---->单击“打开” 将文件另存为以自己姓名命名的WORD文档，存在我的文档(即my documents)中。 步骤: 1.单击“文件”→单击“另存为”→选保存位置为我的文档(即my documents) →输入文件名为自己的姓名→单击保存 一、给文档添加页脚"河南省中小学教师计算机考试卷"，居中排列。将自己的考号、姓名设置为页眉 步骤: 1.单击视图/页眉和页脚
2.在页眉处输入自己的考号、姓名,在页脚处输入"河南省中小学教师计算机考试卷" 3.选中"河南省中小学教师计算机考试卷", 单击格式/段落, 在对齐方式中选"居中", 单击确定 最后在文挡的中间双击鼠标左键. 二、将要编辑的文本另起一页显示 步骤: 1.定位光标: 将光标定在将要编辑的文本的开始处 2.单击插入/分隔符→选分页符→确定 三、将首行缩进两个字符 步骤: 1.定位光标: 将光标定在首行 2.单击格式/段落→选特殊格式为"首行缩进", 度量值为"2字符"→确定 四、设置文档页面纸型为A4，左右页边距为3厘米，上下页边距为2厘米。 步骤: 1. 单击文件/页面设置→单击纸型,选纸型为A4(16开) →单击页边距,调整左右页边距为3厘米，上下页边距为2厘米→确定 注: 在页面设置中,可选择方向为:纵向或横向 五、设定文本的标题为黑体二号粗体字，加下划线，居中排列,背
猎头公司的详细操作流程： 第一步接触 首先，瑞涯猎头公司专业的猎头顾问与客户进行初步的沟通，了解客户的初步的招聘需求情况，判断客户所需求的职位是否需要通过猎头的方式进行操作。向客户初步介绍瑞涯猎头公司服务的基本情况、收费标准、服务流程和猎头服务优势。 第二步相互交流 猎头顾问会和客户进行接触和充分的沟通，深入了解客户公司的详细情况，如企业文化、经营状况、组织结构、发展战略、管理风格等，透彻了解客户所需要的职位薪酬待遇、工作职责、素质技能要求和职业发展前景。并一道和企业制订企业委托猎聘详细说明。 第三步职位评估分析 在与客户进行充分的沟通以后；双方都有非常深厚的了解，瑞涯猎头还会就客户要求寻访的职位进行前期人才模型建立、人才资源调查、职位难易度评估等以便确定寻访的难度和时间，以及整个猎头项目的可行性。 第四步签约 在以上的工作完成后，瑞涯猎头与客户猎头项目相关的收费等具体问题和条件进行协商，达成一致意见后，双方签署合约。 第二阶段：寻访阶段 在与客户达成协议以后，瑞涯猎头便开始进入正式的寻访阶段。 第一步选定寻访范围 首先，根据客户要求的职位确定寻访范围。一般会通过两个渠道，一个是猎头本身的高级人才库，另外通过我们广泛的兼职猎头队伍和合作伙伴，从相关行业中进行寻访。对一些重大的委托项目，做出该行业的研究报告。 寻找目标人选，首先会确定一个范围，将自己认为最有可能的目标企业和目标人选列入自己的寻访名单，一般会在40-80个目标之间。 猎头有着近万的HR经理人关系渠道，信息来源非常广泛，这些信息渠道为猎头顾问提供非常准确和有价值的信息。这一阶段集中体现猎头服务的专业水平，这也是瑞涯猎头的优势所在。 第二步初步筛选 在确定搜寻的目标以后，瑞涯猎头便会通过各种办法，对目标人选进行初步的背景调查，以确定其资历的大致可靠性，并与他们进行接触交流，了解候选人的状况和跳槽的意向。对于不适合的人选迅速排除，根据委托职位的不同，一般留下5-10人左右的人选进行下一步的会谈。 第三步面谈和测试 瑞涯猎头会与筛选出来的候选人面谈，保持候选人紧密的接触，进一步把握候选人的情况。同时也让候选人逐步了解瑞涯猎头和客户的情况，争取候选人的信任，以便进行下一步的工作。 对于某些情况，如有必要且有可能，瑞涯猎头会尽量说服候选人接受相应的专业面试和
3.2博星电子商务模拟B2B实验 3.2.1实验一：掌握B2B正常购买流程 3.2.1.1实验概述 电子商务B2B交易模式。大家都知道是企业对企业的交易，因为我们平时都是作为个人来体验网上消费的，所以这这种交易模式方面的练习有所欠缺，而博星教学实验系统独到的设计，简单大方而又不失优美的界面，易于操作又能够详细涉及B2B交易模式的要点，并且全方位的涉及了B2B流程的前台购买到后台处理。很好的给同学们提供了一个学习知识的机会，一个网上无法体验的而又趋于真实的流程。本次实验设计了B2B 交易模式，使同学们完全体会真实的B2B交易流程，从而达到学习的目的。 3.2.1.2实验目标 1.了解B2B交易模式的意义。 2.掌握B2B交易流程。 3.思考B2B交易模式与B2C交易模式的区别。 3.2.1.3实验任务 1.登陆博星电子商务教学系统，按照分配的小组，参考实验说明书进行实验。 2各小组配合，根据日志提示进行B2C正常交易流程。 3.完成实验流程，填写实验报告，并提交给老师。 3.2.1.4实验步骤 在进行B2B交易模拟实验正式购买流程之前，有一些准备工作需要先做。 1.企业用户销售方： 企业用户销售方，登陆以后，首先添加商品，发布供应消息。具体操作见下面所述。 企业用户登陆以后，进入下图3.2.1.4.1所示界面：
图3.2.1.4.1 企业用户登陆以后，同B2C商城用户操作一样，首先要注册银行，注册商场用户，然后再登 陆，注册完成登陆以后，可以进入后台，界面如下图3.2.1.4.2所示。 图3.2.1.4.2 点击“产品管理”，查看所有的产品，如果没有产品，系统会提示添加产品。按照提示完成 产品添加并修改商品库存不为0。 点击“产品分配”，将会把添加好的产品分配给同组已经注册好的货场。如下图 3.2.1.4.3 所示界面。
科目三考试详细操作流程 一、上车准备 1、上车：打开车门坐进主驾驶位，双手把身份证递交给安全员，听到语音“身份验证完毕，请开始考试”之后，打开车门下车，逆时针（先车尾后车头）方向绕车走一圈（车头和车尾各有一个黑色的感应探头，听到电脑播报说有人通过后才能上车，如不响用手晃一晃）。 2、准备：来到左车门前，观察前后交通情况，确认安全后，左手拉开车门，同时用右手扶着车门边角上车，关上车门。调整座椅及靠背位置，调整左中右后视镜，系好安全带，检查手刹（应该拉着），检查挡位（置于空挡）。检查完毕后，拧钥匙发动汽车，向考官示意准备完毕。 二、灯光模拟 （车载电脑语音播报：“请关闭所有灯光，下面将进行模拟夜间行驶场景灯光使用的考试，请按语音指令5秒内做出相应的灯光操作”。） 语音：请开启近光灯。操作：开启近光灯。 语音：夜间会车。操作：开启近光灯。 语音：同方向近距离跟车行驶。操作：开启近光灯。 语音：在有路灯，照明条件良好条件下行驶。操作：开启近光灯。 语音：通过坡路、拱桥、急弯、人行横道、交通路口。操作：开启近光灯，闪两下。语音：超越前方车辆。操作：开启近光灯，闪两下。语音：请开启远光灯。操作：开启远光灯。 语音：夜间在没有路灯或照明条件不良条件下行驶。操作：开启远光灯。 语音：在道路上发生故障或交通事故，防碍交通又难以移动。操作：开启近光灯，开启双闪灯。 语音：路边临时停车。操作：开启近光灯，开启双闪灯。 语音：雾天行驶。操作：先打开雾灯，开启双闪灯。 （车载电脑语音播报：“模拟考试完成请关闭所有灯光，请起步继续完成考试。） 三、起步 1、车辆起步：一踩（踩离合器刹车），二挂（挂一档）、三打（向下打开左转向灯）、四按（鸣三下喇叭）、五看（观察左、中、右后视镜，要明显看出摆头的动作）、六松（松开驻车制动）、七抬（慢抬离合器）。起步时，一定要不断看左后视镜，直到进入车道且车身摆正，再关左转向灯。 2、正常行使：车身正之后提速至10码以上，踩离合挂二档，然后慢松离合，慢加油，将速度提高至20码过一点。（注：离合松完后脚不要放离合器上） 四、变更车道 1、在考试过程中，考生根据实际路况选择向左或向右变更车道。 2、变更车道前，要观察左右后视镜（头部动作是左右上下，所有需观察时都是这个动作），确保车外两侧安全之后，打开对应位置的转向灯（向左变道打左灯，向右变道打右灯），缓打方向变道。变道完毕关闭转向灯。
专利检索详细操作流程介绍 专利检索是专利申请前的一个程序，它不是必须的，却是有必要的，一份有效检索报告可以让申请人避免所要保护的权利不与在先申请的专利权利相同或相近，保证所申请的专利是有效的。那么如何进行专利检索呢？下面我们就给大家带来了专利检索详细操作流程介绍。 1、选择适合的专利数据库 为什么要选择合适的专利数据库?因为专利具有地域性，若创造发明者的技术或是技术延伸商品想要在某一个国家”排除他人”使用、出售与制造等，那么就需要在该国申请专利保护。此外，由于专利资讯是一种鼓励创造发明的技术揭露，因此各国家均会在该国申请或是已经核准的创造发明专利公开，也因此有了各国免费资料库的出现。 然而，专利申请与布局常牵涉到数个国家。因此在不同免费专利数据库分别检索不仅浪费时间，还会因为不同资料库所使用语言与语法的不同而有所误差(每一国资料库所使用语法均不相同)。所以选择综合性强、数据资料多的源文件库就显得尤为重要了 2、一般专利数据库所包含的内容 以专利分析系统佰腾(BaiT eng Patent Search)为例，其中包含的专利资料库为美国USPTO(公开库、授权库的英文资料全文)、欧盟EPO、日本JPO、韩国KPO、中国SIPO、德国(DE)、英国(GB)、法国(FR)与瑞士(CH)(英文书目资料)、与WIPO PCT等，而上述的专利资料查询均可在统一的检索语法与架构下进行。 总而言之，这些专利数据库藉由建构一个统一的检索介面，让使用者可以同步检索多国
专利，因此也让专利检索与分析工作变的较为简单一些。 3、一般专利数据库中所涉及的检索语法 我们以一例说明，例如「(car or auto*) and (Siemens or Hyundai).ap. and navigation.ab. and @ad>=19860301<=19931010」即是”(car or auto*)”出现在全部栏位，”(Siemens or Hyundai)”出现在专利权人，”navigation”出现在摘要，且申请时间介于1986年03月01日与1993年10月10日之间的专利，其余相关进阶检索可利用此模式进一步演练与扩展。 4、专利检索过程中的基本步骤(拟定关键词) 第二阶段所需要进行的工作即在于拟定关键字，其中”拟定关键字”方式包括五项。分别为1. 基本关键字拟定(研究者)、2. 同义字扩充(研究者)、3. 上位用语扩充(专利工程师)、4. 公司名称合并(IT工程师)与5. 时间与技术分类限缩(专利检索人员)。上述五项中，括号内的人表示应该主要由哪一角色的扮演主轴，例如基本关键字拟定，我们认为应该由研究人员提供，上位用语扩充应由专利工程师提供等。 此外，在上述五个主要工作项目中，原则上仍是由专利检索人员进行相关工作的执行与操作(当然也可以由研究人员自行进行检索)，其中专利检索人员所需要扮演的角色在于，协同不同专家以完成专利检索与分析的工作，相关细部操作技巧我们将会在往后专栏中进一步说明。
螺纹钢套期保值方案 1.总体思路 假设某一螺纹钢贸易企业常备库存1000吨，流转库存3000吨，2014年7月7日，螺纹钢现货价格3145元/吨。为了规避该企业在采购和销售阶段的价格风险。我们利用螺纹钢期货建立该贸易企业的套保方案： （1）在下跌行情中，建立螺纹钢期货空头头寸，对螺纹钢库存进行卖出保值； （2）在上升行情中寻找适当低位买入螺纹钢期货，建立虚拟库存，对未来购入螺纹钢进行买入套保。 2.保值合约 根据螺纹钢期货的特点，一年只有 3 个主力合约，分别为 1 月、5 月和 10 月合约，当前主力合约为 Rb1501，为规避流动性风险和冲击成本，当前宜在主力合约 Rb1501 上建立期货头寸，若随着时间推移，主力开始移仓换月，则可在Rb1505 上建仓。 （二）套保策略 （1）卖出保值 结合企业库存情况和近期螺纹钢走势情况，在适当价位卖出Rb1501合约，对企业常备库存进行完全保值。流转库存可以保值适当比率（假设为30%），即需要保值的螺纹钢为1900吨（1000+0.3*3000），即190手Rb1501合约。 1.建仓 采用多重目标价位法，避免一次性介入期市造成风险，设立多个保值目标价位，分步、分期在预先设定的不同目标价位上按计划地进行保值操作。 近期螺纹主力合约Rb1501下跌至3100点附近，短期来看，价格主要在3000至3200之间。因此在3150点之上建仓效果应该比较好，企业可以在3100至3150之间建仓70手，在3150-3200之间建仓120手。 2.减仓策略 根据企业库存的情况，持仓随着企业流转库存变化而变化，如果7月7日该公司出售螺纹钢500吨，即流转库存减少500吨，则相应的持仓应减少15手。 3.执行过程
操作步骤详细篇 软件安装一定要正确，后续检查好各方面参数设置后，仍出现无法解决的问题时，有可能是软件安装不正确。软件安装严格按照破解说明进行。 1 滑坡剖面图导入geostudio 方法一：CAD中剖面图保留地形线、滑动面、最好保留175m时初始地下水位线，方便geostudio中画出时控制水力坡度角大小、坐标轴等信息，打印为bmp格式。Geostudio 在full license状态下新建seep，通过sketch pictures 按钮insert保存的bmp格式剖面图。用scale按钮选择已知坐标的横纵坐标上两点，调整geostudio中剖面坐标，apply 后完成坐标校正。Sketch polylines描绘剖面图中滑体、滑带、滑动面及滑床分隔线，sketch axes 完成坐标轴绘制，sketch text插入文字，其中字体大小调整通过view preferences and fonts完成。完成上述操作后，应用modify objects 按钮delete原bmp格式剖面图，即完成了CAD剖面图导入geostudio工作。 方法二：将CAD格式的剖面图只保留地表线和滑动面（亦最好保留175m时初始地下水位线），并进行闭合操作，闭合操作为:输入pe命令—enter—选择要闭合的图形—出现下图所示的命令，点击C即可。要确保图形已经闭合，否则后续无法进行导入，将鼠标放在图形上，若为一整体即表示已经闭合。将剖面图以坐标轴交叉点为基点，移动到CAD页面上对应点（使用move命令），CAD另存为dxf格式, 在geostudio中点击file- import regions进行导入, 导入后点击region绘制边界区域。 2 175-159m工况中滑体水力学参数、边界条件、初始地下水位的设置及浸润线分布特征，渗流分析结果耦合入slope计算稳定性结果 选择draw regions按钮按照Sketch polylines 绘制好的分隔线生成闭合的有限元区域。对不同的滑体、滑带及滑床区域定义相应的材料属性，从keyin下拉菜单中选择material
一、制胶 1、注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干 2、玻璃板干净后，对着与胶接触的面对其靠拢，整齐的夹到绿色架子里，再按照说明书，配制分离胶（分为两块的配制与一块的配制），其中PAGE（解冻现拿现用，聚丙酰胺（4度冰箱冷藏），在加入分离胶之前用水检验是否漏水 3、用枪头，对好玻璃板的边缘打下去，注意快速不要漏出去，液面要平，根据插梳子的位置，加入到一定高度，最后在加满纯水覆盖其上，封胶 4、静置40min,将分离胶上的水倒出，观察分离胶是否有较好的制作好 5、配制浓缩胶（分为两块的配制与一块的配制），配制好后迅速的加入到玻璃板内，，并插上梳子，静置30min 6、结束后，将玻璃板取下，放入纯水的盒子里，放入到4度冰箱内备用 二、提取蛋白 1、取出六孔板，吸取原培养液丢弃，靠边加入PBS洗涤（500ml），轻晃，吸取废液丢弃，洗涤三次 2、加入蛋白裂解液（视细胞数量而定）加入裂解液之后，调小移液枪量程，反复摧打至培养皿底部全透明
3、将产物吸入1.5ml的EP管，用震荡机振荡30s，冰浴10min，反复三次，取的两支EP管标注蛋白名字） 4、振荡离心13000转，4度，5min 5、用移液枪取离心后的上清液至新取的EP管，1.5ml 2支，注意名称的对称 6、放入—80度冰箱储存 三、蛋白定量测定 1、准备工作：BCA工作液、蛋白标准液、96孔板、冰盒、提取的蛋白 2、按照说明书计算所需BCA工作液的量，A液：B液=50：1 3、在孔板盖子上标记，加标准液（8个）与样品的标记，在本子上写好浓度梯度，对着位置加入标准液浓度0，1，2，4，8，12，16，20，之后在标准样品的孔内，用pbs加满到20微升 4、加完标准液，在对应的孔里加样品20微升，最后将配好的BCA 液加入到标准液和样品中各200微升， 5、放在37度振荡培养箱内振荡孵育30分钟 6、提前将酶标仪打开 7、时间到了之后，去将孔板拿出放入酶标仪中测蛋白：步骤：session ——new——next——use default——next finish——设置波长（526）——出仓——file wizard——设置孔板数——no.of unknows——add and close——左上角results——左下方右键点
在争分夺秒的现代社会，时间就是生命、钱和效益，所以摈弃传统繁琐手工记账，代之以使用财务软件实现会计电算化势在必行。另外，使用金蝶财务软件不仅能够提高账务处理效率，更重要的是让财会人员得以解脱，本文列举金蝶软件流程，希望能够对您有够帮助。 一、采购流程: 1.外购入库：采购到货后，库管人员收货时，点击“采购入库”，在单据录入界面，优先录入“供应商”，在“摘要”处录入供应商的“送货单号”，再根据实际入库数量录入实收数量和单价，录入保管和验收，然后保存、打印“外购入库单”打印后附上原始送货单交至财务，由财务在软件中进行审核此单。 简易流程：供应链→仓存管理→采购入库单→保存→打印。 2.采购发票：财务拿到仓管上交的采购入库单据后，点击“采购入库单——维护”，过滤并审核采购入库单，然后再选中要生成发票的品种，点击“下推”生成采购发票，确认发票日期与采购入库单在同月，需要确认采购单价和税率是否正确，因为这会涉及到材料的直接采购成本和应付款金额，然后点击保存、审核、钩稽。 简易流程：供应链→采购管理→采购入库单→审核入库单→下推发票→保存→审核→钩稽。 3.采购付款：付采购货款时,在应付模块中，点击“付款单——新增”，在单据录入界面，优先在“核算项目”选入付款的供应商，再录入“实际结算金额”，进行保存，由财务审核付款单，再生成记账凭证传到账务处理模块。
简易流程：财务会计→应付款管理→付款单→新增→保存→审核→应付凭证管理→生成凭证。 4.采购退货：方法与正常收货做单一样，不过做的是红字单据。 二、销售流程： 1.销售订单：接到客户订单后，销售内勤会计进入销售管理，点击“销售订单——新增”，制作销售订单时，订单表头填写内容有日期、购货单位、部门、业务员，表体填表内容有销售的产品、数量、单价或含税单价、交货日期等，销售订单需要负责销售的领导审核。 简易流程：供应链→销售管理→销售订单新增→手工录入订单－保存→审核。 2.公司销售出库：销售发货时，销售发货内勤点击已审核的“销售订单—维护”，选中要发货出库的单据上的品种点击“下推”生成“销售出库单”，填入发货仓库、发货人、保管人等信息进行保存，并打印出来为备货单，其中一份传至仓管人员备货，若实现备货完毕的数量与单据数量有差异，仓管人员需要在备货的单据上进行备注实发数，再把备货单交给销售内勤，由销售内勤再根据仓管备注数量修改销售出库单的实发数量，然后再保存、打印，“销售出库单”打印后按单发货，由销售内勤会计在软件中进行审核销售出库； 简易流程：供应链→销售管理→销售订单维护→选择品种下面的销售出库单→录入→保存→打印备货单→仓管备货→修改销售出库单数量→打印正式销售出库单→审核。
M M具体操作流程 Document number【AA80KGB-AA98YT-AAT8CB-2A6UT-A18GG】
T c o d e： MM01 创建物料（初始屏幕） 物料，手工填写，外部采购 物料内部，不用填（这一次不用填） M 机械工程 ROH：原材料 基本数据12 采购 工厂12 会计12 成本12 工厂1000 库存0001 物料号码自动弹出 输上物料描述（名字） 计量单位：pc 回车 物料组 :0001 旧物料号 数据二回车 采购采购组100 会计1 评估类3000 原材料1 价格控制S 标准价格：7（做成本分析用） 回车是保存 扩充: /nmm01 输入物料号码，回车重新进入勾选，就有MRP1234了 MRP1： MRP类型：pd MRP控制者001 批量大小ex 回车 MRP2: 计划交货时间，leadtime: 3 即采购提前期0 外部采购仓储地点：0001 计划边际码：000 回车回车 是保存 再重新搜索的时候就有MRP1234了 MM60 搜索输入自己的工号点击闹钟按钮 后勤，采购，主数据，供应商，中央的。 （采购--MK01基础数据和采购数据 中央的—XK01 多一个公司代码。 财务供应商--FK01） 回车进入创建页面 公司代码：1000 采购组织1000 账户组：0001 回车 标题：公司 名称：TEST02
搜索项：TEST 国家：CN 语言ZH 回车 供应商控制页面回车 交易支付页面回车 联系人页面回车 会计信息页面统驭科目： 160000 现金管理组：A1 回车付款条件 0001 回车 回车采购数据订单货币CNY 付款条件 0001 勾选：基于收 货的发票验证 回车 合伙人功能：发票，送货，付款供应商信息的填写。 OA 订货地址 100273 回车保存供应商号码弹出 供应商 0000100383 对于公司代码 1000 采购组织 1000 已被创建 消息号 F2175 /NMKVZ供应商清单：采购 检索项：8048 账户组：0001 点击闹钟 帮助做搜索 包含TEST 则输入：*TEST* 以TEST开头，则：TEST* 以TEST结尾： *TEST 简称里面：TEST 创建采购申请： 路径：后勤管理→物料管理→采购→采购申请→建立 [ME51N] 说明文件可以关闭 层级界面 凭证类型：NB 采购申请（控制编码范围，控制屏幕格式）编码(自动给号) 货源确定（自动勾选）抬头文本（可选项描述） 项目概览展开按钮：输入物料号码2875 数量4 交货日期不输入就是 当前日期工厂1000 回车保存之前点击检查按钮点 击保存 采购申请被创建记住采购申请号码 点击其他部门需求，到达显示界面，要修改就点击笔按钮。 后勤物料管理采购订单 ME21N 关闭说明输入供应商编号（地址与供应商主数据关联）回车 抬头：采购组织 1000 采购组 100 公司代码 1000 XK03 供应商主数据勾选地址回车 行项目：输入物料数量价格工厂回车 保存生产采购订单号码
Western blot实验 检测蛋白表达，抗体很重要，用到的有一抗、二抗、内参抗体 WB步骤 1 蛋白样本处理： (1)一部分采用完全变性的方法（加入β-巯基乙醇）：加入适量5×SDS-PAGE loading buffer，100oC沸水加热处理5min，使蛋白充分变性，12000 rpm离心5 min，取上清备用。 (2) 一部分采用非完全变性的方法（未加入β-巯基乙醇）：加入适量5×SDS-PAGE loading buffer，100oC沸水加热处理5min，使蛋白充分变性，12000 rpm离心5 min，取上清备用。 2 分离胶浓缩胶配方如下： 分离胶的浓度要根据蛋白的大小来决定，如下表所示： SDS-PAGE分离胶浓度（%）最佳分离范围（kD） 6 50-150 8 30-90 10 20-80 12 12-60 15 10-40 不同浓度的分离胶与5%浓缩胶，配方如下： 分离胶5%浓缩胶试剂8% 10% 12% 15% 试剂体积去离子水（mL) 5.52 4.8 3.96 2.76 去离子水（mL) 4.0 30%丙烯酰胺（mL) 3.24 3.96 4.8 6.0 30%丙烯酰胺（mL) 1.0 1.5mol/lTris.cl(PH8.8)（mL) 3.0 3.0 3.0 3.0 1.0mol/lTris.cl(PH6.8) （mL) 1.0 10%SDS（mL) 0.12 0.12 0.12 0.12 10%SDS（μL)80.0 10%AP（mL) 0.12 0.12 0.12 0.12 10%AP（μL)60.0 TEMED（μL)7.2 4.8 4.8 4.8 TEMED（μL)8.0 总体积（mL) 12.0 12.0 12.0 12.0 总体积（mL) 6.0 3 制胶：加入分离胶溶液至2/3处，加水饱和正丁醇封胶，室温放置40 min后加浓缩胶至顶，插入梳子，静置10 min。 4 加样：预染蛋白marker 8 l，样品每孔上样组织蛋白。 5 电泳：80V恒压使溴酚蓝至分离胶处，恒压100V，90 min，溴酚蓝到达较底部
Gambit建模简例教程 与其他工程软件需要工作目录一样，Gambit也需要一个指定的目录来建立所需要的相关文件。 （注：文件名、工作目录及其所在路径最好全部为英文字母或数字，不用中文，如路径中出现中文可能导致程序错误。如：E:\gambitwork\examples\car1\car1.msh为正确的；E:\gambitwork\车身流场\car1\car1.msh可能导致错误。） 因此，首先建立一个文件夹（通常最好一个有限元分析模型建立一个文件夹），用来存放生成的Gambit文件和一些Gambit自动生成的点击Gambit 2.3.16出现如下窗口临时文件等，本例在E盘根目录建立 一个名为gfiles的文件夹。然后双击打开出现如下窗口。 单击Browse按钮，选择已经建立的工作目录E:\gfiles，点OK。
在Session Id栏中输入建立的工程文件名，我们这里输入car1。 （以后再次对该文件进行编辑时，在Session Id栏右侧的下拉列表中直接选取该文件即可，如遇到无法打开的情况，可将目录中的*.lok 文件删除后再试。） 单击Run后进入Gambit主界面，如下。
一、Gambit 的操作界面 如上图所示，Gambit 用户界面可分为7个部分，分别为：菜单栏、视图、命令面板、命令显示窗、命令解释窗、命令输入窗和视图控制面板。 文件栏 文件栏位于操作界面的上方，其最常用的功能就是File 命令下的New 、Open 、Save 、Save as 和Export 等命令。这些命令的使用和一般的软件一样。Gambit 可识别的文件后缀为.dbs ，而要将Gambit 中建立的网格模型调入Fluent 使用，则需要将其输出为.msh 文件(file/export)。 视图和视图控制面板 Gambit 中可显示四个视图，以便于建立三维模型。同时我们也 命令面板 菜单栏 视图