第四章浸提、分离、精制、浓缩与干燥
一、最佳选择题
1、以下关于喷雾干燥的叙述，错误的是
A.喷雾干燥产品为疏松粉末，溶化性较好
B.喷雾时进风温度较高，多数成分极易因受热而破坏
C.喷雾干燥是流化技术用于液态物料的一种干燥方法
D.进行喷雾干燥的药液，不宜太稠厚（相对密度1.35～1.38）
E.喷雾时喷头将药液喷成雾状，液滴在热气流中被迅速干燥
2、颗粒剂湿颗粒的干燥最好采用
A.冷冻干燥
B.吸湿干燥
C.鼓式薄膜干燥
D.沸腾干燥
E.喷雾干燥
3、下列关于浓缩的叙述错误的是
A.减压浓缩增大了传热温度差，蒸发效率提高
B.生产上自然蒸发浓缩最为常用
C.蒸发效率与传热温度差及传热系数成正比
D.提高加热蒸汽压力，有利于提高传热温度差
E.薄膜蒸发因能增加药液的汽化表面，故有利于提高蒸发效率
4、血浆、血清等生物制品适宜用的干燥方法是
A.微波干燥
B.沸腾干燥
C.喷雾干燥
D.冷冻干燥
E.鼓式干燥
5、能用于分子分离的滤过方法是
A.微孔滤膜滤过
B.薄膜滤过
C.板框压滤法
D.垂熔滤器滤过
E.超滤法
6、盐析法主要适用于药物的有效成分是
A.黏液质
B.鞣质
C.蛋白质
D.淀粉
E.多糖
7、下列有关浸出方法的叙述，错误的是
A.渗漉法适用于有效成分含量低的药材浸出
B.渗漉速度是影响制剂浓度高低的因素之一
C.渗漉法适用于新鲜及无组织性药材的浸出
D.浸渍法适用于黏性及易于膨胀的药材的浸出
E.渗漉法适于需制成较高浓度制剂的药材浸出
8、渗透或扩散的推动力是
A.扩散面积
B.扩散时间
C.浓度差
D.温度
E.药材粒度
9、下列哪一项措施不利于提高浸出效率
A.恰当地升高温度
B.加大浓度差
C.选择适宜的溶剂
D.浸出一定的时间
E.一般将药材粉碎成极细粉
10、不宜采用超滤膜滤过的药液是
A.中药注射剂
B.中药合剂
C.口服液
D.酊剂
E.酒剂
11、浸提过程中，溶剂通过哪一个途径进入药材组织中
A.毛细管的作用
B.与蛋白质结合
C.与极性物质结合
D.药材表皮
E.细胞壁破裂
12、溶剂能否使药材表面润湿，其无关的因素
A.浓度差
B.药材性质
C.浸提压力
D.溶剂的性质
E.接触面的大小
13、冷冻干燥又可称为
A.低温干燥
B.真空干燥
C.固态干燥
D.升华干燥
E.冰点干燥
14、有关喷雾干燥叙述正确的是
A.干燥温度高，不适于热敏性药物
B.可获得硬颗粒状干燥制品
C.能保持中药的色香味
D.相对密度为1.0～1.35的中药料液均可进行喷雾干燥
E.须加入助溶剂以增加干燥制品的溶解度
15、下列对于流化干燥的叙述不正确的是
A.适用于颗粒性物料的干燥
B.热利用率高
C.高节省劳力
D.干燥速度快
E.热能消耗小
16、下列属于辐射干燥的方法是
A.减压干燥
B.红外干燥
C.喷雾干燥
D.烘干干燥
E.鼓式干燥
17、对减压干燥叙述正确的是
A.干燥温度高
B.适用热敏性物料
C.干燥时应加强翻动
D.干燥时间长
E.干燥产品较难粉碎
18、下列哪一种干燥方法不适用于药剂工业生产
A.吸附干燥
B.减压干燥
C.流化干燥
D.喷雾干燥
E.冷冻干燥
植物内生菌分离方法 植物内生菌分离方法 匿名提问 2009-02-18 20:04:53 发布 自然科学学术 6个回答 回答 曲恋| 2009-02-18 20:45:40 有0人认为这个回答不错| 有0人认为这个回答没有帮助 植物内生放线菌是一类大有开发潜力的微生物资源。目前使用的分离条件和技术尚不完善，容易被外源菌和内生真菌、细菌污染，因此内生放线菌尤其是稀有内生放线菌的选择性分离技术至少是今后一段时间研究的重点。介绍了植物内生放线菌选择性分离方法并提出值得研究的问题。( 添加评论(0) nk0226 | 2009-07-25 11:13:09 有0人认为这个回答不错| 有0人认为这个回答没有帮助 植物病毒与病毒防治 Plant Virology& Control of Plant Virology 32学时2学分 一、课程性质、地位和任务 植物病毒与病毒防治是研究病原病毒与植物病毒病害相互关系的生物学科。本课程重点讲授植物病毒相关生物学特性与研究进展：病毒侵染寄主植物生理效应与抗病免疫；植物亚病毒病原等基础理论知识。同时，根据植物病毒基础研究需要，课程理论讲授与实验技能训练并重。通过本课程的学习，使学生进一步熟悉病毒病原与其它相关病原的区别要点，病害宏观及微观鉴定基本技术、方法、手段，并能在实践中应用。为独立开展植物病毒及病毒病害研究奠定基础。 二、课程教学的基本要求 要求学生重点掌握以下内容： （1）植物病毒的传播途径及传毒机制；
（2）病毒侵染植物内部症状，侵染增殖过程； （3）植物受病毒侵染的生理效应与抗病免疫； （4）植物亚病毒病原的基本特性； （5）植物病毒与病毒病害诊断鉴定的程序与方法。 三、课程理论教学大纲及学时分配 1. 绪论（2学时） 1.1 病毒的发现与病毒学的发展 1.2 研究病毒的意义与任务 1.3 植物病毒与其他病毒的关系 1.4病毒与其他微生物的区别 2. 病毒的分类与命名（3学时） 主要介绍病毒分类和命名的基本原则相关指标。重点：植物病毒的命名和分类系统。 2.1 病毒命名和分类的发展 2.2 病毒命名的系列 2.3 病毒分类的系列 2.4 植物病毒的命名和分类系统 3. 病毒侵染植物与增殖与增殖过程及遗传与变异（5学时） 主要讲授植物病毒侵染方式，在寄主体内的增殖过程，病毒遗传变异的本质。难点:病毒进入寄主细胞的方式及粒体装配。 3.1病毒粒体的吸附与侵入 3.2病毒粒体的脱壳与生物合成 3.3病毒粒体的装配与释放 3.4病毒的遗传与变异 3.5病毒的体外重新组与生物活性 4. 植物病毒的传播途径及传毒机制（5学时） 主要讲授病毒的介体传播和非介体传播的两大途径，以及不同介体传播机制与病害发生流行关系，难点：介体持久性传毒（口针传毒）与非持久性传毒（巡回传毒）机理。 4.1介体传毒 4.2非介体传毒 4.3种子与花粉传毒 4.4传毒机制 5. 病毒侵染植物生理效应与抗病免疫（5学时） 主要介绍病原侵染植物的内部症状（内含体）、病毒在植物体内的运转及生理活性物质改变与寄主抗病机理。难点：病毒侵染植物的生理变化与寄主的免疫反应。 5.1病毒侵染植物内部症状（内含体及其类型） 5.2病毒在植物体内的运输
中药提取分离纯化 中草药提取液或提取物仍然是混合物，需进一步除去杂质，分离并进行精制。具体的方法随各中草药的性质不同而异，以后将通过实例加以叙述，此处只作一般原则性的讨论。 一、溶剂分离法： 一般是将上述总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步进行提取分离。水浸膏或乙醇浸膏常常为胶伏物，难以均匀分散在低极性溶剂中，故不能提取完全，可拌人适量惰性填充剂，如硅藻土或纤维粉等，然后低温或自然干燥，粉碎后，再以选用溶剂依次提取，使总提取物中各组成成分，依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。例如粉防己乙醇浸膏，碱化后可利用乙醚溶出脂溶性生物碱，再以冷苯处理溶出粉防己碱，与其结构类似的防己诺林碱比前者少一甲基而有一酚羟基，不溶于冷苯而得以分离。利用中草药化学成分，在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化，是最常用的方法。 广而言之，自中草药提取溶液中加入另一种溶剂，析出其中某种或某些成分，或析出其杂质，也是一种溶剂分离的方法。中草药的水提液中常含有树胶、粘液质、蛋白质、糊化淀粉等，可以加入一定量的乙醇，使这些不溶于乙醇的成分自溶液中沉淀析出，而达到与其它成分分离的目的。例如自中草药提取液中除去这些杂质，或自白及水提取液中获得白及胶，可采用加乙醇沉淀法；自新鲜括楼根汁中制取天花粉素，可滴人丙酮使分次沉淀析出。目前，提取多糖及多肽类化合物，多采用水溶解、浓缩、加乙醇或丙酮析出的办法。 此外，也可利用其某些成分能在酸或碱中溶解，又在加碱或加酸变更溶液的pH 后，成不溶物而析出以达到分离。例如内酯类化合物不溶于水，但遇碱开环生成羧酸盐溶于水，再加酸酸化，又重新形成内酯环从溶液中析出，从而与其它杂质分离；生物碱一般不溶于水，遇酸生成生物碱盐而溶于水，再加碱碱化，又重新生成游离生物碱。这些化合物可以利用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取分离。一般中草药总提取物用酸水、碱水先后处理，可以分为三部分：溶于酸水的为碱性成分（如生物碱），溶于碱水的为酸性成分（如有机酸），酸、碱均不溶的为中性成分（如甾醇）。还可利用不同酸、碱度进一步分离，如酸性化台物可以分为强酸性、弱酸性和酷热酚性三种，它们分别溶于碳酸氢钠、碳酸钠和氢氧化钠，借此可进行分离。有些总生物碱，如长春花生物碱、石蒜生物碱，可利用不同rH值进行分离。但有些特殊情况，如酚性生物碱紫董定碱（corydine）在氢氧化钠溶液中仍能为乙醚抽出，蝙蝠葛碱（dauricins）在乙醚溶液中能为氢氧化钠溶液抽出，而溶于氯仿溶液中则不能被氢氧化钠溶液抽出；有些生物碱的盐类，如四氢掌叶防己碱盐酸盐在水溶液中仍能为氯仿抽出。这些性质均有助于各化合物的分离纯化。 二、两相溶剂萃取法： 1．萃取法：两相溶剂提取又简称萃取法，是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法。萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取，如果有效成分是偏于亲水性的物质，在亲脂性溶剂中难溶解，就需要改用弱亲脂性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁醇等。还可以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增大其亲水性。提取黄酮类成分时，多用乙酸乙脂和水的两相萃取。提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取。不过，一般有机溶剂亲水性越大，与水作两相萃取的效果就越不好，因为能使较多的亲水性杂质伴随而出，对有效成分进一步精制影响很大。
生物工程综合实验溶菌酶的提取、分离纯化及其活性测定 实验报告集 班级生工1411 学号 组别7 姓名
实验室学生守则 一、严格遵守实验室各项规章制度和管理措施，服从教师及实验技术人员 的指导。 二、严格按照实验要求，做好实验预习,实验之前5分钟进入实验室，及时、 准确地完成实验任务，实事求是地完成实验报告，杜绝弄虚作假。 三、严格执行操作规定，爱护仪器设备及工具。凡不按教师的指导擅自操 作引起仪器、设备损坏者，应予赔偿。 四、爱护实验室公共财物，节约水电、材料和试剂。未经允许不得随便挪 动非实验需用的其他仪器，不得随便拆装仪器或将仪器、工具带至室 外。 五、持实验室的严肃安静，不得大声喧哗、嘻闹，严禁在实验室内抽烟和 吃东西。 六、严防事故，确保实验室安全，发现异常情况，应及时向有关教师和管 理人员报告。 七、每次实验结束后，主动整理好仪器设备，归还所借器材，关闭电源、 水源，按指导老师的要求做好实验结束工作及室内外的清洁卫生工作，经指导老师许可后，方可离开。
预习报告（手写，可自行续页）
实验报告 溶菌酶的提取、分离纯化及其活性测定 一、目的 对从鸡蛋清中提取并分离纯化出溶菌酶进行活性测定 二、原理 鸡蛋是溶菌酶的主要来源，等电点约为10.5~11，最适温度50℃，最适pH为6~7左右。 1、溶菌酶分离纯化原理： （1）等电点法利用溶菌酶等电点较高，在酸性条件下除去一些杂蛋白 （2）阳离子树脂柱层析法进一步除去杂蛋白 2、溶菌酶鉴定分析 （1）考马斯亮蓝法测蛋白含量 （2）分光光度法测定酶活性 （3）使用SDS-PAGE 鉴定溶菌酶纯度 三、实验材料与方法 1、实验材料与试剂 鸡蛋清，PBS缓冲液，40%甘油、冰醋酸、氢氧化钠，D152大孔弱酸性阳离子交换树脂、透析袋，考马斯亮蓝G250、牛血清蛋白、乙醇、磷酸，溶菌酶标准品、底物微球菌粉，蛋白质分子量Marker 、SDS、聚乙二醇-20000等 2、实验仪器 低速离心机、高速冷冻离心机、离心管、分光光度计，玻璃层析柱，Bio-Rad垂直电泳系统，移液枪、移液管，培养皿、玻璃棒、普通漏斗、滤纸、量筒、刻度试管及试管架、冰箱、摇床、烧杯、止水夹等。 3、实验方法 1.新鲜鸡蛋清的制备与粗分离 2. 树脂柱层析分离纯化 （1）D152树脂处理(2)湿装法装柱(3) 上柱离子交换吸附(4) 冲平(5) 洗脱 3.透析与浓缩 (1) 透析除盐(2) 聚乙二醇浓缩 4.蛋白质含量的测定 5.溶菌酶纯度的测定（SDS凝胶电泳）
病毒的分离培养标准操作规程 1．目的：规范病毒分离及鉴定培养操作流程，保证试验结果的重复性和稳定性。 2．术语：EID50/0.1ml，ELD50/0.1ml，TCID50/0.1ml，CPE 3．操作程序与方法： 3.1 采样：对于病死或剖杀动物，采集病毒主要聚集组织部位，一般为淋巴结、脾脏、肺脏、血液等；对于活体动物，可用无菌棉拭子采集含病毒量最多部位（口腔、鼻腔、生殖道、肛门等）的分泌液。采集样品如不能立即处理，应冻存与-20℃备用。长 途运输应用冰盒或4℃低温保存。 3.2 样品处理：组织块可用剪刀剪碎并研磨，加入10倍体积含300-500UI/ml青、 链霉素的生理盐水（PBS），反复冻融2-3次。棉拭子可直接混于3-5倍体积含300-500UI/ml 青、链霉素的生理盐水（PBS），反复冻融2-3次。8000rpm离心15min，取上清液用0.22μm滤膜过滤，透过液即为病毒原液，收集保存，短期保存4℃，长期保存用液氮。 3.3接种培养：将病毒原液接种与特定细胞单层中，连续盲传4-6代，观察细胞是 否产生特异性CPE，并计算及TCID50/0.1ml。禽源类病毒可接适当日龄鸡胚或鸡胚成纤维细胞进行扩增和鉴定，并计算及EID50/0.1ml和ELD50/0.1ml。 3.4 病毒纯化：采用“有限梯度稀释法”结合“噬斑纯化法”对病毒进行纯化； 3.5 动物回归实验：分离培养并纯化好的病毒回归接种动物，观察动物病变是否为该病毒引起及病变特征是否典型。 3.6分子生物学鉴定：基因组提取并设计特异性引物，对分离病毒保守区基因片段 进行特异性扩增，并测序，从分子水平对其进行鉴定。 3.7血清学鉴定：用标准阳性血清与分离病毒作用一段时间后再次接种特异性细胞 或鸡胚验证病毒特异性。或者用荧光标记抗体与病毒作用后荧光显微镜下观察其特异性。 4.注意事项 4.1采样过程应做好自身防护，烈性病不得随意分离。 4.2 实验动物应及时焚烧或深埋等处理，避免病毒扩散到环境中。 4.3 纯化好毒种应及时做好扩毒并建立毒种库。 1
第四章浸提、分离、精制、浓缩与干燥 一、最佳选择题 1、以下关于喷雾干燥的叙述，错误的是 A.喷雾干燥产品为疏松粉末，溶化性较好 B.喷雾时进风温度较高，多数成分极易因受热而破坏 C.喷雾干燥是流化技术用于液态物料的一种干燥方法 D.进行喷雾干燥的药液，不宜太稠厚（相对密度1.35～1.38） E.喷雾时喷头将药液喷成雾状，液滴在热气流中被迅速干燥 2、颗粒剂湿颗粒的干燥最好采用 A.冷冻干燥 B.吸湿干燥 C.鼓式薄膜干燥 D.沸腾干燥 E.喷雾干燥 3、下列关于浓缩的叙述错误的是 A.减压浓缩增大了传热温度差，蒸发效率提高 B.生产上自然蒸发浓缩最为常用 C.蒸发效率与传热温度差及传热系数成正比 D.提高加热蒸汽压力，有利于提高传热温度差 E.薄膜蒸发因能增加药液的汽化表面，故有利于提高蒸发效率 4、血浆、血清等生物制品适宜用的干燥方法是 A.微波干燥 B.沸腾干燥 C.喷雾干燥 D.冷冻干燥 E.鼓式干燥 5、能用于分子分离的滤过方法是 A.微孔滤膜滤过 B.薄膜滤过 C.板框压滤法 D.垂熔滤器滤过 E.超滤法 6、盐析法主要适用于药物的有效成分是 A.黏液质 B.鞣质 C.蛋白质 D.淀粉 E.多糖 7、下列有关浸出方法的叙述，错误的是 A.渗漉法适用于有效成分含量低的药材浸出 B.渗漉速度是影响制剂浓度高低的因素之一 C.渗漉法适用于新鲜及无组织性药材的浸出 D.浸渍法适用于黏性及易于膨胀的药材的浸出 E.渗漉法适于需制成较高浓度制剂的药材浸出 8、渗透或扩散的推动力是 A.扩散面积 B.扩散时间 C.浓度差 D.温度 E.药材粒度 9、下列哪一项措施不利于提高浸出效率 A.恰当地升高温度 B.加大浓度差 C.选择适宜的溶剂 D.浸出一定的时间 E.一般将药材粉碎成极细粉
题目：浅谈常用中药的提取分离纯化技术摘要：为了使中药业不断地发展，本文主要对常用中药的传统提取方法和现在提取方法都做了介绍，对中药的分离纯化技术业做了简单介绍。主要是为中药制剂的研究提供参考依据。 关键字：提取；分离纯化；中药
discuss the commonly Chinese medicine extraction and purification technology Abstract: In order to make the pharmaceutical development unceasingly, this article mainly are introduced the traditional Chinese medicine extracting method and extracting method, the separation and purification of Chinese medicine technology made simple introduction. Mainly to provide a reference basis of traditional Chinese medicine preparation research. Keywords:E xtraction; Separation and purification; Traditional Chinese medicine
目录 第一章引言 (3) 第二章中药的提取技术 (3) 2.1传统的提取技术 (3) 2.2现在的提取技术 (3) 2.2.1 超临界流体萃取技术 (3) 2.2.2生物酶解提取技术 (4) 2.2.3半仿生提取技术 (4) 2.2.4超声提取技术 (4) 2.2.5微波提取技术 (5) 第三章中药的分离纯化方法 (6) 3.1几种应用广泛的传统分离纯化方法 (6) 3.1.1色谱分离技术(chromatography)： (6) 3.1.2两相溶剂萃取法 (7) 3.1.3沉淀法 (7) 3.1.4结晶与重结晶法 (8) 3.1.5盐析法 (8) 3.2 目前引进中药领域并发展较成熟的几种新兴纯化方法 (8) 3.2.1 大孔树脂分离技术(MacroAbsorptionResin) (8) 3.2.2膜分离技术(Membrane Seperation Technology) (9) 3.2.3高速逆流色谱分离(High-speed Countercurrent Chro--matography，HSCCC) (9) 3.2.4微波分离法(microwave extraction) (9) 3.2.5分子蒸馏法 (9) 第四章小结 (10) 参考文献 (10)
中药的浸提、分离与精制 一、单项选择题 1.提取生物碱所用乙醇的浓度为 A.20% B.40% C.80% D.50-70% 2.专品专用的浸渍容器是 A.铅制品 B.陶瓷制品 C.木制品 D.玻璃制品 3.能用于分子分离的滤过方法是 A.微孔滤膜滤过法 B.离心分离法 C.超滤法 D.压滤法 4.影响浸提的决定因素是 A.粉碎度 B.浸提温度 C.浸提时间 D.浓度差 5.下列关于药材浸提溶剂的陈述，错误的是 A.浸提溶剂应最大限度地浸出有效成分 B.用水煎煮药材，亦会煎出脂溶性成分 C.高浓度乙醇能够浸出较多的强极性成分 D.溶剂中加入表面活性剂能提高浸出效率 6.影响浸出效果的最关键因素是 A.药材粒度 B.浸提温度 C.浸提时间 D.浓度梯度 7.下列关于浸渍法特点的陈述，错误的是 A.浸渍时溶剂是相对静止的 B.浸渍法的浸提效率较渗漉法低 C.适于遇热易破坏和易挥发成分的提取 D.当溶剂的量一定时，浸提效果与浸提次数无关 8.乙醇含量在50%-70%时，适于浸提 A.挥发油 B.叶绿素 C.生物碱 D.树脂 9.当药液中含醇量达到50%-60%时，可主要除去哪一类杂质 A.淀粉 B.蛋白质 C.鞣质 D.水溶性色素 10.用碱作为浸提辅助剂时，应用最多的是 A.氢氧化钠 B.氢氧化铵 C.碳酸钠 D.碳酸钙 11.下列关于浸提辅助剂的陈述中，错误的是 A.加酸可使生物类成盐促进浸出 B.加甘油可增加鞣质稳定性与浸出 C.加表面活性剂可促进药材的润湿 D.浸提辅助剂宜分次加入溶剂中 12.用下列方法浸提时，能保持最大浓度梯度的是 A.浸渍法 B.渗漉法 C.煎煮法 D.回流热浸法 13.下列关于渗漉法的陈述，错误的是 A.适用于贵重药材的提取 B.适用于毒性药材的提取 C.适用于树脂类药材的提取 D.可直接制备高浓度的制剂 14.下列关于渗滤法的陈述，正确的是 A.为了提高浸提效率，药材宜粉碎成细粉 B.药材粉碎后即可装入渗漉筒中 C.药材装筒后，加入浸提溶剂即可收集漉液 D.快速渗漉20g和2kg药材，所需时间无显著差异 15.下列关于微孔滤膜的陈述，错误的是 A.膜的孔隙率高，孔径均匀 B.膜的质地薄，滤过时吸液少 C.滤过速度快且不易堵塞 D.滤过时无介质脱落污染药液 16.能用于分子分离的方法是 A.垂熔漏斗滤过法 B.离心分离法 C.微孔滤膜滤过法 D.超滤膜滤过法 17.下列不能提高药液滤过效率的措施是 A.增大滤过面积 B.降低料液温度 C.加压或减压 D.加助滤剂
常用的分离纯化手段 分离 发布日期:2012-8-1有效日期至:2013-1-28查看联系方式 发布单位: 杭州哲博化工科技有限公司分析检测中心查看该会员所有的供求信息查看该会员所有的产品信息 常用的分离纯化手段 资深专家团队---专业检测机构---精准分析服务----先进仪器设备--雄厚技术实力赵老师18 96 8197 425 哲博检测中心，浙大国家大学科技园提供【各种精细化工和高分子材料性能检测，成分分析，配方还原，工艺失效分析】【名校科研院所博士领衔、专业分析专家】 关键词：分离纯化配方分析成分分析 1. 化学分离法 蒸馏与分馏 分离沸点与挥发度相差较大组分的有效方法。有常压蒸馏，减压蒸馏，水蒸气蒸馏。适用于混合液体及液固的分离。 萃取 利用物质在不同溶剂中溶解度的不同和分配系数的差异，使物质达到相互分离的方法。适用于液固，液液的分离。 提取 利用不同的溶剂，从固体样品的基体中，使某种组分得到分离和浓缩。主要利用索氏提取器。如高聚物与填料，高聚物材料中微量助剂的提取与浓缩处理。缺点：①易引起热不稳定的组分变质②溶剂中的杂质也被浓缩③溶剂用量大 结晶与沉淀（溶解沉淀法） 利用样品中各组分在溶剂中的溶解度差异，使某些组分从浓溶液中生成结晶分离出来，是纯化物质的一种有效的方法。适用与高聚物的分离。 过滤与膜分离 过滤是分离液-固非均一体系常用的分离方法。适用于>1μm的颗粒。 膜分离适用于分离< 1μm的胶体颗粒。分为固体高分子膜，阳离子膜，阴离子膜。 灰化，酸化，微波消解—用于无机物的分离。 2. 色谱分离法： 柱色谱法—分离有机化合物的有效手段。分为： 硅胶填充柱—适用于分离大多数弱极性，中等极性和较强极性的化合物。 氧化铝填充柱—适用于分离非极性，弱极性化合物 聚酰胺填充柱—可用于染料，表面活性剂的分离。 阳离子交换柱—分离阳离子，适用于阳离子表面活性剂。 阴离子交换柱—分离阴离子，适用于阴离子表面活性剂。 凝胶色谱法 分为： 凝胶过滤色谱（GFC）—用于分离水溶性大分子。 凝胶渗透色谱（GPC）—用于有机溶剂中可溶的高聚物分子量分布分析及分离。 薄层色谱法—适用于有机化合物的分离。 纸色谱法—主要用于强极性和水溶性化合物，如氨基酸，糖类，有机酸及盐等的分离，亦可用于多种金属阳离子，阴离子的分离与鉴定。 气相色谱法—热稳定好，易挥发的中，小分子量的有机化合物的分离。
综述中药提取方法 摘要以中药提取方法的本质和影响提取作业的因素为理据，分析国内中药厂提取方法 关键词中药提取方法 1前沿 近年来有关中药提取方法的论述有很多，然而有效成分的提取率仍然是现今国内中药制药工业现代化的瓶颈。尽管近年来国内在中药提取生产中推出了一些新工艺，如超声场强化提取、微波提取、超临界流体提取等，但当下的主流仍是浸提技术。浸提技术是应用溶剂提取固体原料中某一或某类成分的提取分离操作，又称固液萃取。目前在中药生产过程中，常用的中药浸提方法有煎煮法、浸渍法、渗漉法、回流法、水蒸气蒸馏法等。 面对众多中药提取方法如何抉择是一个复杂的问题，因为它牵涉到生产设备和生产条件等许多因素。加上如今中药提取的规模较大，尤其考虑到连续生产，即使在实验中取得成果，在实际情况下还要经过长时间的实践检验。还有前面提到过的提取新工艺，其提取物往往是化学结构明确的物质，与传统中药生产完全是两回事，所以生产传统中药的厂家下不了决心去尝试新工艺，生产者情愿随大流，以避免风险。 提取方法的不同，提取等量有效成分所需原料和能源也不尽相同，资源和能源对世界经济和人类生存环境的影响越来越被重视。可持续发展经济和资源节约型社会的概念已经被全世界广泛认同，中国也不例外。在市场竞争激烈异常的今天，生产成本的控制就是企业的生命，而对世界能源价格上涨的现实，生产者应该节约每一滴水，每一度电。中药生产厂家必须努力挑选出最好的中药提取方法，改变目前中药提取效率低、高能耗、高污染所造成的负面影响。 2选择原则 和所有的工程项目一样，选择中药提取方法必要考虑的条件也是：被处理物料的性质、数量，产品的价值操作人员的技术水平，现实的设备安装场地，生产成本的控制，投资的预算。所追求的目标也是最高的投资回报率，最低的能耗，最简单的操作，最理想的提取率。降低生产成本，提高产品质量，从而提升本企业的市场竞争力。舍此不会有 良好的后果。 3中药提取本质 中药提取本质上是一种固液萃取作业，任何化工原理教科书和化工手册对固液萃取的机理都有详尽的阐明。为了便于分析国内中药厂现有提取装置的状况，有必要将其与中药提取有关的结论摘录于此。 （1）固液萃取的速度取决于二相接触介面的面积和吸附力，溶质扩散到介面的距离，溶剂的粘度和扩散系数、对溶质的选择性，萃取的温度、压力。 （2）固液萃取的萃取率取决于萃取时间、级数（同一份固相被萃取的次数）和溶剂的数量。（3）在多级萃取作业中，固液萃取的级效率取决于固相底流的反混量，以及固液二相接触的均匀程度。 （4）萃取率既定时，多级固液萃取的溶剂使用量取决于萃取过程的形式：并流、错流或逆流。（5）所谓并流是指被萃取的固体物料在每一级萃取作业中都被同一份溶剂萃取，液相的移动方向与固相在级间移动的方向相一致的作业方式。实际上是一种移动的单级萃取作业。为了保证最终的萃取推动力，萃取液成品的浓度必须相当低，所以整 个萃取过程的溶剂需用量相当大。 （6）所谓错流是指被萃取的固体物料在每一级萃取作业中都使用新鲜溶剂进行萃取，每一级都要将固液二相分离。然后把这些浓度逐次降低的各级提取液混合在一起作为成品。
开题报告 生物科学 黄海葵毒素的分离纯化及鉴定 一、论述海葵杀虫多肽毒素的研究现状，说明选题的依据和意义 动物毒器(Venom gland)是动物界亿万年进化过程中为生存(防卫和捕食)形成的高度特化的器官，其产生的毒液中有丰富多样的生物活性专一的多种毒素分子。近年的研究证明，动物毒液是有重要研究价值的生物活性物质的“富矿区”，在生物和人类医学研究中占重要地位，其中对于动物毒素中的多肽类成分的研究日益受到关注。在陆生动物中，蛇，蜂类，蝎及蜘蛛等动物的毒素是人们研究的重点；而在海洋生物中，芋螺，海葵，海兔，海绵等低等海洋动物的毒素因其分子结构新颖，活性强而同样受到重视。目前已有越来越多的毒素多肽成为开发抗肿瘤，抗病毒，镇痛肽，杀虫肽等药物或工具试剂的先导分子，在医学，药学，神经生物学等各研究领域发挥着越来越重要的作用。因此，动物毒素基因及其编码的活性蛋白质、多肽和其他毒素分子资源正面临许多国家及跨国制药与生物制品公司的激烈争夺。 海葵多肽毒素的研究是天然动物毒素的一个重要领域，当前对海葵多肽毒素研究已成为继蛇毒、蝎毒，芋螺毒研究之后的又一个天然毒素研究的热点。对于海葵毒素的研究具有以下几个方面的意义：①作为新型生物医药的分子模板；②作为药物靶点的探针；③神经生物学研究的工具试剂；④新型生物杀虫剂的先导分子；⑤蛋白质工程的框架分子和研究基因形成，突变和进化的理想模型。 海葵又名海菊花、海淀根, 属于腔肠动物门( Coelenterata) 、珊瑚虫纲(Anthozoa) 、六放珊瑚亚纲(Hexacorallia) 。其下有三个目, 包括海葵目( Actiniaria) 、群体海葵目( Zoanthidea) 和角海葵目( Ceriantharia) [1]。海葵种类繁多, 目前有报道的已超过1000种,广泛分布于世界各海区，中国海葵品种约占世界的1/10。海葵的触手及身体均含有大量的刺细胞，每个刺细胞里都有一个特殊囊状的细胞器, 名为刺丝囊，内储存着毒液, 刺丝管盘曲在刺丝囊内, 刺丝
北京中医药大学蔡程科 【学习目的要求】 掌握： 1.浸提原理及其影响因素 2.常用的浸提方法及应用 3.常用的精制方法原理及应用 4.各种分离方法的特点应用 熟悉： 1.中药浸提、分离、精制目的 2.浸提常用设备构造、性能与保养 3.浸提常用溶剂和辅助剂 第一节概述 二、浸提、分离与精制目的 缩小体积、减小剂量 保证有效成分（相对性）不损失 提高疗效及稳定性 前处理应注意： ?根据中药复方多成分综合疗效的整体效应选择前处理方法； ?符合生产实际，便于生产 第二节中药的浸提 F 应以不同药材、不同溶剂选择适宜粒度： 溶剂为水：宜粗粒、薄片； 溶剂为醇：宜粗粉(10-20目) 疏松药材：粗末或不粉碎 坚硬药材：粗粉(20目) 动物药材：绞碎 粘性药材：使D减小 （二）药材成分 ?扩散系数D得知，分子小的成分出于分子半径小(r)，运动速度快，而有较大的扩散系数(D值)，比大分子成分易于浸出； ?药材的有效成分多属于小分子物质，大分子成分多属无效成分； ?药材成分的浸出速度还与其溶解性(或与溶剂的亲和性)有关，易溶性物质的分子即使大，也能先浸出来。
（四）浸提时间t ?ds与dt成正比，以扩散达到平衡的时间t即可。 ?太长时间会导致有效成分酶解、大量杂质溶出或发霉等。 （五）浓度差 增大dc/dx，提高浸出效果，增加浓度差的办法： ?搅拌 ?更换新溶剂 ?溶剂循环流动 ?流动溶剂（渗漉） （八）新技术的应用－强化浸提 提高浸提效率、提高制剂质量，浸提时间大大缩短。 ◆超声浸提 ◆胶体磨浸提 ◆电磁场浸提 ◆电磁振动浸提（微波） ◆超临界萃取 三、常用浸提溶剂 一、选择溶剂的要求： 应对有效成分溶解度大、对无效成分溶解度小； 安全，毒性小、稳定； 廉价易得。 二、常用浸提溶剂 常用水、乙醇、混合溶剂等。 1. 水: ◆价廉易得 ◆大极性：浸出范围广（包括成分间助溶）、选择性差 ◆难过滤 ◆易霉变、水解、不宜久贮 ◆色泽差 2. 乙醇: 两亲性溶剂，利用与水的不同浓度可选择性浸提不同成分。 ◆20% ：防腐 ◆40% －50%：延缓酯类、苷类水解；可沉淀部分大分子水溶性杂质，增强稳定性
物质的分离与提纯练习 题及答案解析 LEKIBM standardization office【IBM5AB- LEKIBMK08- LEKIBM2C】
(本栏目内容，在学生用书中以活页形式分册装订！) 一、选择题 1．(2009年海淀高一检测)下列实验操作中错误的是() A．使用分液漏斗分液时，应将漏斗颈上的玻璃塞打开 B．蒸馏实验必须使用温度计 C．用CCl4萃取碘水中的碘 D．过滤(如图)时，可将悬浊液从烧杯直接倒入漏斗中 【解析】制蒸馏水时，因水的沸点是100 ℃，即沸腾产生的气体为水蒸气，故不需温度计。过滤要用玻璃棒引流。 【答案】BD 2．下列分离物质的方法中，不正确的是() A．利用分馏的方法从石油中分离出汽油和煤油 B．利用分液的方法将水和酒精分离开来 C．利用结晶的方法除去硝酸钾中混有的少量氯化钾 D．利用过滤的方法除去水中的泥沙 【解析】水和酒精互溶，不分层，故无法分液。 【答案】 B 3．现有三组溶液：①汽油和氯化钠溶液②39%的乙醇溶液③氯化钠和单质溴的水溶液，分离以上各混合液的正确方法依次是() A．分液、蒸馏、萃取B．萃取、蒸发、分液 C．分液、萃取、蒸馏D．蒸馏、萃取、分液 【解析】①分层，②互溶，乙醇与水的沸点不同，③单质溴能溶于水，更易溶于有机溶剂，故分离以上三种混合液应选A。 【答案】 A 4．通过溶解、过滤、蒸发等操作，可将下列各组混合物分离的是() A．硝酸钠、氢氧化钠B．氧化铜、二氧化锰 C．氯化钾、二氧化锰D．硫酸铜、氢氧化钙 【解析】A项，NaNO3和NaOH都溶于水，无法用过滤法分离；B项，CuO和MnO2都不溶于水；D项CuSO4、Ca(OH)2溶于水后两者会发生反应；而KCl和MnO2可用过滤法分离，然后蒸发滤液即可得到KCl。 【答案】 C 5 物质熔点沸点密度 水中溶解 性 甲－ 98 ℃ ℃ g·cm－3可溶 乙－ 84 ℃ 77 ℃ g·cm－3可溶 A．萃取法B．过滤法C．蒸馏法D．分液法
第六章中药的浸提、分离与精制 第一节药材成分与疗效的关系 一、中药材成分的类型 1、有效成分与有效部位 2、辅助成分 3、无效成分 4、组织物质 药材成分与疗效的关系 根据中医药理论，采用复方治病是中医用药的一大特点。绝大多数的中药材制剂是复方（由几味药或数十味药组成），成分的构造极其复杂。中药复方的临床疗效为复方配伍的综合作用和整体效应上。所以对药材的有效成分和无效成分不是绝对地划分。 例如：鞣质 在注射剂中为杂质应除去； 在五倍子和没食子中被认为具有收敛作用的成分； 在大黄中是辅助成分； 在桂皮及其他多数药材中则是无效成分； 第二节浸提（出）原理与影响因素 一、浸提过程 1、含义：系指溶剂进入细胞组织溶解其可溶性物质后变成浸出液的全部过程。 2、原理：浸出过程包括——溶质由药材固相向液相中的传递过程；系以扩散 原理为基础。可分为以下几个阶段： 浸润与渗透阶段 解吸与溶解阶段 浸出成分扩散阶段 1）浸润与渗透阶段 该阶段的影响因素主要有： 溶剂的性质；
药材表面状态、毛细孔状态、大小、分布； 比表面积； 压力等 2）、解吸与溶解阶段 关键是选择最适当的溶媒，溶解有效成分，使渗透压升高，从而进入更多的浸出溶剂，使细胞膨胀、破裂。 常用溶媒： 水：为最常用的溶剂之一。极性大，溶解范围广。选择性差，易霉变。 乙醇：常用溶剂之一。半极性溶剂，溶剂性能界于极性与非极性溶剂之间。 具有药理作用，价格较贵，易燃。 其它溶媒：乙醚、氯仿、丙酮等。 3）、浸出成分扩散阶段 高渗形成扩散点，不停地向周围扩散，以平衡其渗透压。这就是浸出的动力——浓度差（药材组织内的浓度与外面周围溶液的浓度差）。 物质的扩散速率可用FICK‘S第一扩散公式来说明。 ds/dt=-DFdc/dx ds/dt为扩散速度；F为扩散面积； dc/dx为浓度梯度；D为扩散系数； 根据FICK‘S方程，提高扩散速度的有效方法是提高溶质的浓度梯度。 方法主要有: 用浸出溶剂或稀浸出液随时置换药材周围的浓浸出液. 创造最大的浓度梯度是浸出方法和浸出设备器械设计的关键问题。 注: 有些教科书亦将其划分为另一阶段即:置换浸出阶段. 二、影响浸出的因素 1、浸出溶剂 要求：浸出溶剂应对有效成分具有较大的溶解度，而对无效成分少溶或不溶，安全、无毒、价廉、易得。 常用的有：水、乙醇、不同乙醇浓度的溶液。p99
昆虫病毒怎样分离与纯化 不同病毒的分离纯化过程并不相同，但所采用的技术大同小异，通过39蜂疗网调查发现病毒分离纯化主要是以下几种常用的通用技术。 1.差速离心 所谓差速离心，就是对同一份样品，用高速、低速循环交替离心，高速使病毒沉淀；沉淀饴浆再悬浮，低速除去污染杂质，最终获得较纯净的病毒粗提物。差速离心，可以除去大部分比病毒粒子大或小的杂质。但与病毒粒子大小相似的颗粒却难以除尽，并且由于杂质的吸附作用，实际病毒获得量低，这是本法的缺点。 差速离心的高速、低速是相对而言的；所需的时间也因溶液的密度、黏度的不同而有变化。 2.密度梯度离心 〔1）蔗糖密度梯度区带离心事先于离心管内分层注入不同密度（浓度）的蔗糖溶液，密度大的位于管底部，密度小的在顶部，形成一个蔗糖密度梯度。将需离心分离的混合液置梯度的顶部，离心过程中，不同密度的粒子，移行到与本身密度相同的蔗糖密度部位，即不再向下移行，达到平衡状态，形成致密的沉淀带。有时不同密度粒子尚未移到各自密度相同的梯度部位，但根据粒子大小、密度不同，沉降速度不同，已分别形成清晰的区带，亦可达到良好的分离目的，离心结束后，各区带可按次分部收集。 （2）平衡密度梯度离心将待分离的混合物，均匀地悬浮于适当浓度的重金属盐溶液中（如CsCl、RbCl等），经长时间离心，重金属盐溶液建立起稳定而连续的密度梯度。待分离的粒子被离心力场驱入溶液密度与粒子本身密度相同的区域内，即达到平衡，从而获得了良好的分离效果。 3. 判断沉淀纯度 可以根据紫外吸收光谱判断。各沉淀组分（或沉淀带），稀释到一定浓度，分别置紫外分光光度计中，在波长200～300nm的范围内测定其紫外吸收值。看其是否具有核蛋白的特征性光谱。核蛋白的特征光谱为：最小吸收值在245nm左右，最大吸收值在260nm左右，260nm 于280nm吸光度的比例大干1，小于2，越接近2，纯度越高。
题目：浅谈常用中药的提取分离纯化技术 摘要：为了使中药业不断地发展，本文主要对常用中药的传统提取方法和现在提取方法都做了介绍，对中药的分离纯化技术业做了简单介绍。主要是为中药制剂的研究提供参考依据。 关键字：提取；分离纯化；中药
discuss the commonly Chinese medicine extraction and purification technology Abstract: In order to make the pharmaceutical development unceasingly, this article mainly are introduced the traditional Chinese medicine extracting method and extracting method, the separation and purification of Chinese medicine technology made simple introduction. Mainly to provide a reference basis of traditional Chinese medicine preparation research. Keywords:E xtraction; Separation and purification; Traditional Chinese medicine
目录 第一章引言 (3) 第二章中药的提取技术 (3) 2.1传统的提取技术 (3) 2.2现在的提取技术 (3) 2.2.1 超临界流体萃取技术 (3) 2.2.2生物酶解提取技术 (4) 2.2.3半仿生提取技术 (4) 2.2.4超声提取技术 (4) 2.2.5微波提取技术 (5) 第三章中药的分离纯化方法 (6) 3.1几种应用广泛的传统分离纯化方法 (6) 3.1.1色谱分离技术(chromatography)： (6) 3.1.2两相溶剂萃取法 (7) 3.1.3沉淀法 (7) 3.1.4结晶与重结晶法 (8) 3.1.5盐析法 (8) 3.2 目前引进中药领域并发展较成熟的几种新兴纯化方法 (8) 3.2.1 大孔树脂分离技术(MacroAbsorptionResin) (8) 3.2.2膜分离技术(Membrane Seperation Technology) (8) 3.2.3高速逆流色谱分离(High-speed Countercurrent Chro--matography，HSCCC) (9) 3.2.4微波分离法(microwave extraction) (9) 3.2.5分子蒸馏法 (9) 第四章小结 (10) 参考文献 (10)
常用中药提取分离纯化技术 1 提取技术提取是中药制剂生产过程中最基本最重要的环节之一，提取的目的是最大限度地提取药材中的药效成分，避免药效成分的分解流失和无成分的溶出。提取技术的优劣直接影响到药品质量和药材资源的利用率和生产效率及经济效益。煎煮法、渗漉法、浸渍法、回流法、水蒸汽蒸馏法等方法是中药提取的常用方法，这些方法不同程度的存在有效成分提取不完全。提取过程有效成分损失较大。提取物中存在较多无效成分等缺点。导致药效不明显。影响中药制剂的开发。为了解决中药提取过程存在的问题。一些新技术、新方法开始应用。 1.1 超临界流体萃取技术是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对中药有效成分进行萃取的新型技术。超临界流体是物质处于超临界温度和临界压力以上的体，性质介于气体和液体之间。有与液体相接近的密度，与气体相接近粘度及高的扩散系数。故具有很高的溶解能力及好的流动、传递性能。可代替传统的有毒、易燃、易挥发的有机溶剂。在中药生产领域应用最多的是SF「CO技术。因其临界条件温和。对大部分物质显化学惰性，有效地防止热敏性成分和化学不稳定性成分高温分解与氧化；易于控制、不污染样品，易于安全地从混合物中分离出来。目前。通过调节温度、压力、加入适宜夹带剂等方法，SFE-CO己成功地从中药中提得挥发油、生物碱、苯丙素、黄酮类、有机酚酸、苷类、萜类以及天然色素等成分。超临界流体萃取技术用于中药有效成分提取的研究很多，但主要局限于单味中药有效成分的提取，其中能够实现工业规模生产的仅是少数。超临界流体萃取装置属高压设备，其工程化面临着基础研究薄弱，以及设备压力高、投资大等问题。因此，要
加强复方超临界流体萃取的工艺研究和超临界流体萃取过程中的放大研究及其配套设备的开发，以推动超临界流体萃取过程的工程化。 1.2 生物酶解提取技术生物酶解提取的原理是利用酶反应的高度专一性，将细胞壁的组成成分水解或降解，破坏细胞壁，从而提高有效成分的提取率。酶法处理一方面通过降解植物细胞壁使有效成分更易提取从而达到提高提取收率或减低溶剂消耗量的目的；另一方面可以针对植物药中的大多数杂质（淀粉、果胶、蛋白质等）选择性降解。以利于提取分离更易进行。同时还综合利用药渣。变废为宝。目前。用于中药提取方面研究较多的酶是纤维素酶，大部分中药材的细胞壁主要是由纤维素类物质构成的，植物的有效成分往往包裹在细胞内部。用纤维素酶酶解可以使植物细胞壁破坏。有利于对有效成分的提取。实验人员以黄芪提取液的总糖和还原糖为考察指标。确定纤维素酶处理工艺，探讨纤维素酶处理的效果。结果纤维素酶处理与对照工艺相比得率由24．4％提高至30．3％。而多糖的质量分数基本不变，扫描电镜观察表明，纤维素酶明显地分解了黄芪原料中的部分结构多糖，药渣中的网状结构变得十分清晰。说明纤维素酶处理有助于黄芪多糖的提取，能显著提高黄芪多糖的得率。酶解提取要求酶有极高的活性、高度的专一性和温和反应条件。酶解提取的效果主要取决于酶的种类、用量、酶解时间、温度、酸碱度、物料细度、搅拌等多种因素，应针对具体药物，研究确定酶反应的最佳工艺条件。生物酶解提取技术对设备无特殊要求，适用于工业化生产。 1．3 半仿生提取技术 半仿生提取技术（SBE）是将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，从生
蓖麻毒素的分离与提纯 近年来,从蓖麻中提取分离蓖麻毒素又是一个新的研究热点。首先,是因为蓖麻毒素有很好的药用价值,如用于医药、农药,特别是用于抗肿瘤的靶向药物。其次,在检测中制备标准样品是必备的。 前人在研究蓖麻毒素的分离与提纯方法时，提出了不同的分离与提纯方法。 温燕梅等在“蓖麻不同部位杀虫活性成分蓖麻碱的提取及含量”一文中提出了用微波辅助提取蓖麻不同部位的蓖麻碱。蓖麻的提取:蓖麻不同部位在鼓风干燥箱50 ℃下烘至恒重，粉碎，用乙醚回流提取2 h，去除其中的油脂和色素，自然晾干备用。按照参考文献[5]方法，称取30 g，以料液质量比1∶20加入水，在微波炉以中高火作用15 min，趁热过滤，将滤渣重复上述步骤再提取1次。将两次的粗提取液合并，搅拌均匀，用旋转蒸发仪浓缩，然后用鼓风干燥箱于70 ℃下烘干成膏状，用索氏提取器加入乙醇回流提取2 h并浓缩至30 mL 左右，让其缓慢冷却析出结晶。 郑成在“蓖麻碱的提取、纯化、改性及其杀虫活性研究”一文中也是用微波辅助的方法进行提取蓖麻碱。 赵丹在“蓖麻毒蛋白的提纯及杀虫效果研究”一文中提出用Nicolson等的方法提纯毒蛋白。称取40.0g脱壳蓖麻籽，120ml0.lmol/L pH7.2磷酸缓冲液匀浆，4℃冰箱中抽提24小时，4000rm/min离心20min，小心去除表面脂肪层取上 清液，上清液中加入固体(NH 4) 2 SO 4 至30%饱和度，4o C冰箱过夜。4O00rm/min离 心20min，取上清。上清液中加入固体(NH 4) 2 SO 4 饱和度50%，4o C冰箱保存8h， 4000rm/min离心20min，弃上清液。将沉淀用适量001mol/L pH.72磷酸缓冲液溶解，在001mol/L pH.72磷酸缓冲液中透析去盐。用PEG10000覆盖透析袋至于4℃冰箱中过夜，浓缩得粗提取液。选用2*25cm层析柱，将Sepharose 4B缓慢装入层析柱中，避免产生气泡和断层，以0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液平衡12h，用核酸蛋白检测仪检测28Onm波长的吸收峰。将浓缩的粗毒液缓慢加入层析柱中，动作轻柔避免破坏胶面。使蓖麻毒素充分吸附在柱上。用0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液洗脱，核酸蛋白检测仪检测280nm波长下吸收峰，直至吸光值下降至0.1以下。用0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液透析收集液除去半乳糖，EPG10000适当浓缩后，备用。用0.01mol/LpH7.2磷酸缓冲液平衡并洗脱，蛋白检测仪检测28Omn 吸光值，收集吸收峰。 高宝岩在“蓖麻毒蛋白的提取及分析”一文中也是此方法提纯收集毒蛋白的。