微生物实验复习题
一、名词解释：
菌苔：如果把大量分散的纯种细胞密集地接种在固体培养基的较大表面上，结果长出的大量“菌落”已相互连成一片，这就是“菌苔”。
菌落：将单个细菌（或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时为内层），当它占有一定的发展空间处于适宜的培养条件下，该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌落。
芽孢：是一些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，壁厚、透性低、不易着色。
荚膜：是一些细菌细胞外的一层胶状粘液物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽，与染料亲和力低。
细菌：细菌是单细胞原核微生物，基本形态为球状、杆状、螺旋状。
天然培养基：是指一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。例如：牛肉膏蛋白胨、麦芽汁培养基。
合成培养基：组合培养基又称合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如：高氏一号培养基。
半组合培养基：又称半合成培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如：马铃薯蔗糖培养基。
液体培养基：一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模地培养微生物。
固体培养基：一类外观呈固体状态的培养基。根据固态的性质又可分为：固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基和滤膜。
半固体培养基：是指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基。例如：“稀琼脂”。
二、理论书内容：
1、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌各菌落的比较。
菌落特征微生物类别
单细胞微生物菌丝状微生物
细菌酵母菌放线菌霉菌
主要特征菌
落
含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥
外观形态
小而凸起或大而平
坦
大而凸起小而紧密
大而疏松或大而
致密
细
胞
相互关系
单个分散或有一定
排列方式
单个分散或假丝状丝状交织丝状交织形态特征
小而均匀，个别有
芽孢
大而分化细而分化粗而分化
参考特征
菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明
菌落与培养基结
合程度
不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样
单调，一般呈乳脂
或矿烛色，少数红
色或黑色
十分多样十分多样
菌落正反面
颜色的差异
相同相同一般不同一般不同菌落边缘一般看不到细胞
可见球状，卵圆状
或假丝状细胞
有时可见丝状细胞可见粗丝状细胞
细胞生长速度一般很快较快慢一般较快气味一般有臭味多带酒香味常有泥腥味往往有霉味
2、根霉、青霉、曲霉形态结构图。
根霉
3、培养基种类。（微生物营养）
一、按对培养基成分的了解作分类：
1、天然培养基：指一类利用动，植物或微生物包括用其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基。
2、组合培养基：也叫组合培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如：高氏一号培养基
3、半组合培养基：又称半合成培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些一类呈天然成分的培养基。例如：马铃薯蔗糖培养基
二、按培养基外观的物理状态作分类
1、液体培养基：一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模的培养微生物。
2、固体培养基：一类外观呈固体状态的培养基。可分为固化培养基，非可逆性固化培养基，天然固态培养基和滤膜。
①固化培养基：加有琼脂或明胶或海藻酸钠
②非可逆性固化培养基：血清培养基或无机硅胶培养基
③天然固态培养基：由天然固态基质直接配制成的培养基
④滤膜
3、半固体培养基：指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基，一般可在液体培养基中加入0.5%左右的琼脂制成。例如：“稀琼脂”,“直立柱”
4、脱水培养基：指除水以外的一切营养成分的商品培养基，使用时只要加入适量水分并加以灭菌，分装即可，是一类既有成分精确又有使用方便的现代化培养基。
三、按培养基对微生物的功能作分类
1、选择性培养基：一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学，物理因素抗性的原理设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛应用于菌种筛选等领域。（选择性培养基包括：①酵母菌富集培养基②Ashby无氮培养基③Martin培养基
④含糖酵母菌培养基）
2、鉴别性培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。EBM培养基。例如：EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G-细菌。
4、油镜的使用方法及与普通物镜的区别
材料：显微镜，拭镜纸，液体石蜡油，二甲苯
步骤：显微镜油镜的使用和维护
1.将显微镜平稳地安放在实验台适宜处。识别油镜头：标有100×、OIL、HI等字样。
2. 打开电源，用低倍镜对光，打开光圈，调节聚光镜的位置，使视野光线充足。
3. 标本上加镜油一滴，转动粗螺旋，使油镜头缓缓下降，用眼从侧面观察，直到油镜头浸入油中接近玻片为止。
4. 从目镜观察，同时徐徐转动粗螺旋提升，见模糊物象后再用细螺旋调节，直到见到清晰物象为止。
5. 观察完毕，粗螺旋提高镜头，取下标本片，油镜头使用后立即用擦镜纸擦净镜头上的油。如油已干，可在擦镜纸上滴少许二甲苯擦拭，并立即用另一擦镜纸擦去二甲苯，因二甲苯能溶解镜头上的固定胶以致使镜头脱落。
6.将镜头转呈“八”字，调低聚光器，对号送入柜子内存放
原理：油镜的透镜极小，工作焦距最短，光线通过玻璃和空气，由于介质密度不同发生折射，射入镜筒的光线极少，视野暗，物象不清晰。如在玻片与镜头（透镜）之间加上折光率和玻片（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515）就可减少光线的折射，加强视野的亮度，获得清晰的物象。
?注意事项：
?1、油不要滴太多
?2、在调节焦距的时候要特别注意与载玻片之间的距离不要弄坏工具
?3、调节时应该从下往上调节
?4、在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。
?5、用左眼观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。
?如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外重找时应按：低倍→高倍→油镜程序。在加油区内重找应按：低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头。
?6、油镜使用完毕，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去，然后再用干擦镜纸擦干净。
油镜的使用和维护
.使用油镜的正确操作步骤是:
（1）低倍镜观察。
（2）高倍镜观察。
（3）转出高倍镜头，滴加香柏油后用油镜观察。
在擦拭显微镜镜头时，应向一个方向擦拭。
5.如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?
首先要根据分离对象选择适宜的培养基。若要分离真菌应选用马丁- 孟加拉红选择培养基；若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。
土样采回来后，用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离，若分离细菌，一般稀至 10-8, 若分离放线菌,一般稀至 10-6；若分离真菌，一般稀至10-4。取最后三个稀释度倒平板获得单个菌落。将平板上出现的单菌落转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度，若不纯，应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。倒平板获得单菌落，转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度。反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体。
6、灭菌、消毒、防腐概念及高温灭菌种类，实际应用。
一、灭菌：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。还可分为：杀菌和溶菌。
二、消毒：消毒就是消除毒害，这里的“毒害”专指传染源或致病菌。消毒是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害的措施。
例如：一些常用的对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒的方法，对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行的巴氏消毒法。
三、防腐：防腐就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。
①低温：4℃以下
②缺氧：抽真空、充氮或二氧化碳、加除氧剂
③干燥：晒干、烘干或红外线干燥
④高渗：盐腌（15%以上）和糖渍（70%以上）
⑤高酸度：泡菜
⑥高醇度：用白酒或黄酒。例如：醉蟹、醉笋
⑦加防腐剂：防腐剂、防霉剂
高温灭菌的种类：
1、干热灭菌法
①火焰灼烧法：接种环、接种针的灭菌或带病原体的材料、动物尸体的烧毁。
②烘箱内热空气灭菌法
2、湿热灭菌法
①常压法
a.巴氏消毒法：对牛奶、啤酒、果酒或酱油的低温消毒方法
1)低温维持法：用于牛奶消毒只要在63摄氏度下维持30min即可
2)高温瞬时法：用于牛奶消毒时只要在72~85摄氏度下保持15s或120~140
摄氏度下保持2—4s即可。
b.煮沸消毒法：采用在100摄氏度下煮沸数分钟的方法。例：日常的饮用水消毒。
c.间歇灭菌法：适用于不耐热培养基的灭菌。例：培养硫细菌的含硫培养基就可
采用此方法。
②加压法
a.常规加压蒸汽灭菌法：适用于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵工厂
中对培养基及多种器材或物料的灭菌。
b.连续加压蒸汽灭菌法：仅适用于大型发酵厂的大批培养基灭菌。
7、化学杀菌剂、消毒剂的使用浓度、机制及应用
类型名称及使用浓度作用机制应用
AgNO3：0.1%~1% 沉淀蛋白质，使其变性皮肤，滴新生儿眼睛
重金属盐类
CuSO4：0.1%~0.5% 与蛋白质的基结合使失活杀植病真菌与藻类
石碳酸：3%~5% 蛋白质变性，损伤细胞膜地面，家具，器皿酚类
煤酚皂(来苏尔)：2% 蛋白质变性，损伤细胞膜皮肤
蛋白质变性，损伤细胞膜，脱
皮肤，器械醇类乙醇：70%~75%
水，溶解类脂
物品消毒，接种箱，接种室的熏醛类甲醛：0.5%~10% 破坏蛋白质氨基或氢键
蒸精密仪器等的消毒高锰酸钾：0.1% 氧化蛋白质的活性基团皮肤，尿道，水果，蔬菜
氧化剂
过氧乙酸：0.2%~0.5% 氧化蛋白质的活性基团皮肤，塑料，玻璃，人造纤维表面活性剂新洁尔灭：0.05%~0.1% 蛋白质变性，破坏膜皮肤，黏膜，手术器械染料龙胆紫：2%~4% 与蛋白质的羧基结合皮肤，伤口
最低抑制浓度：评定某化学药物药效强弱的标志，指在一定条件下，某药物毒性完全抑
制特定微生物生长的最低浓度。
半致死剂量：是评定某药物毒性强弱的标志，指在一定条件下，某化学药剂能杀死50%试验动物时的剂量。
最低致死剂量：是评定某药物毒性的另一指标，指在一定条件下，某化学药物能引起试验动物群体100%死亡率的最低剂量。
8、用固体培养基分离微生物纯培养的三种方法。
（一）稀释倒平板法（pour plate method）
先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、
1:10,000......），然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。
（二）平板划线法（streak plate method）
指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的
（三）单细胞挑取法（spread plate method）
从样品中直接分离所需的微生物细胞或孢子，获得其纯培养。
一．使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是锅内加水，灭菌物体装锅，对称上紧密封螺帽将锅密封，加热升温，排尽锅内冷空气，升温至灭菌工艺条件{一般为 98kpa}，在工艺条件下保压计时{一般为30 分钟} ，到时间后切断热源，降温，出锅
二．革兰氏原理：当用结晶紫初染后，所有细菌都被染成初染剂的兰紫色，碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫-碘复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理
时，两类细菌的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要有舦聚糖形成的网状结构组成，壁厚，类脂含量低，用酒精脱色时细胞壁脱水，使舦聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的兰紫色。革兰氏阴性细菌则不同，由于其细胞壁舦聚糖层较薄，类脂含量较高，，所以当脱色处理时，类脂质被酒精溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。
实验步骤：
1、制片涂片——干燥——固定
2、初染滴加结晶紫染色1——2分钟，水洗；
3、媒染用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟；
4、脱色滴加95%酒精脱色，25-30秒，立即水洗；
5、复染用番红液复染约2分钟，水洗；
6、镜检干燥后，用油镜观察。
细菌经革兰氏染色后，革兰氏正反应菌呈_紫色______，革兰氏负反应菌呈__红色_。
革兰氏染色的操作程序是涂片，干燥，固定，结晶紫染色 1 分钟，水洗, 碘液媒染 1 分钟，水洗， 95% 的乙醇脱色 25 秒，水洗，蕃红复染 3-5 分钟，水洗，晾干
革兰氏染色反应与细菌细胞壁的结构和组成有关。在革兰氏染色过程中，当用 95% 酒精处理后，就放在显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈__紫____ 色，而革兰氏阴性菌呈___无____ 色。
细菌在革兰氏染色过程中,最后用蕃红复染因是G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后，菌体紫色脱去，故需用蕃红复染，这样在光镜下才能见到红色的菌体
两个典型的革兰氏正反应细菌和革兰氏负反应细菌经革兰氏染色后都呈阴性反应往往是由于酒精脱色时间过长_ 和___菌体培养时间太长___ 引起
三．芽孢原理
芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染色剂亲和力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈现不同的颜色而加以区别。芽孢具有厚而致密的壁，因此想要将芽孢染色需要在较高的温度（煮沸）的条件下，用强染色剂（孔雀绿）将菌体和芽孢同时染色。而同时，实验利用了孔雀绿可经水洗脱色的特点，通过水洗将菌体的着色洗脱，而芽孢因具有致密的壁而不会被水将染色洗脱。接下来用番红染色，将菌体染为红色，而在常温下品红无法将芽孢着色，因此在显微镜下形成了芽孢为绿色而菌体为红色的现象。而实验中如果要观察芽孢在菌体中的着生位置，一定要根据各菌的特点来确定培养时间。
实验步骤
1.制片：将枯草芽孢杆菌涂片并干燥固定。
2.染色：撕取一块比载玻片略窄的吸水纸，覆盖在涂片出，在吸水纸上滴加孔雀绿直至饱和。用酒精灯加热是染液保持微沸，其间不断添加适量孔雀绿染液，保持吸水纸湿润，染色5min。
3.水洗：待玻片冷却后，用镊子出去吸水纸，再用水瓶轻轻冲洗至孔雀绿不再褪色为止。
4.复染：用番红染液染色1-2分钟，水洗。
5.镜检：涂片干燥后，滴加香柏油置于油镜下观察。
6.清理：用二甲苯与干净擦镜纸擦净镜头，将涂片放入废片缸，将固体垃圾放入垃圾桶，液体垃圾倒入废液缸，无腐蚀性毒性液体可倒入下水道，用酒精棉球擦洗器材将溅出的染料擦除。
芽胞染色的操作程序是涂片，干燥，固定，孔雀绿加热染色 15 分钟，水洗，复红染色 2-3 分钟，水洗，晾干
用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时，可使菌体呈__红_ 色，使芽胞呈___绿__ 色
芽胞染色的关键操作是孔雀绿加热染色适当。
四．简单染色的操作程序是涂片，干燥，固定，复红染色1-2 分钟，水洗，晾干
细菌经简单染色后呈__所染染料的颜色_______。
高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于玻片置反，和菌体着色太浅_ 引起。
细菌的生理生化反应
【实验原理】
通过测定微生物校内某些酶类的有无、对某些第五的利用能力、代谢产物的类型等来研究微生物带血的多样性。某些细菌产生色氨酸酶，能分解培养基蛋白胨中的色氨酸，产生吲哚，吲哚与对二甲基氨基苯甲醛发生反应，形成红色的玫瑰吲哚，为吲哚反应阳性。微生物发酵葡萄糖成丙酮酸，2分子丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱性条件下与肌酸类物质反应，生成红色化合物为V.P.反应阳性。有些细菌发酵糖类产生有机酸较多，使发酵液的pH下降到4.2以下，当加入甲基红试剂后，时发酵液变红色，为甲基红反应阳性。某种微生物能以某种糖类为碳源，产酸产气，则判断为发酵这种糖。
【实验方法】
（一）V-P反应
1.试管标记取5只装有葡萄糖蛋白胨水培养基的试管，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。
2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应试管的培养基中。空白对照不接种。置37度恒温培养箱中培养24-48h。
3.观察记录去除以上培养物，分别取出2ml培养液加入另外5支相应编号的空试管中，加入与培养液等量的V-P试剂，充分震荡2min。放置37度恒温培养箱中培养30min观察记录结果。
（二）甲基红实验
于V-P实验留下的培养液中，分别加入2-3滴甲基红指示剂，立即观察培养液的颜色变化
（三）吲哚实验
1.试管标记取5只装有蛋白胨水培养基的试管，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌和空白对照。
2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应试管的培养基中。空白对照不接种。
置37度恒温培养箱中培养24-48h。
3.观察记录在培养基中加入乙醚1-2ml，经充分振荡使吲哚萃取至乙醚中，静置片刻后乙醚层浮于培养液的上面，此时沿试管壁缓慢加入5-10滴吲哚试剂。观察记录结果
（四）糖发酵试验
1.试管标记取分别装有葡萄糖、蔗糖、乳糖发酵培养液试管各4支，分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌和空白对照。
2.接种培养以无菌操作分别接种少量菌苔至上述相应试管的培养基中。空白对照不接种。置37度恒温培养箱中培养24-48h。
3.观察记录
【实验结果与分析】
（一）V-P
大肠产气枯草变形对照
结果—+ ———
产气肠杆菌结果为阳性，其余为阴性。
（二）甲基红
大肠产气枯草变形对照
结果+ + +——
大肠杆菌、产气肠杆菌、枯草芽孢杆菌结果为阳性，变形菌为阴性。
（三）糖发酵
大肠产气变形对照
葡萄糖颜色+ —+ —
是否产气+ ———
乳糖颜色+ —+ —
是否产气+ ———
蔗糖——+ —
是否产气——+ —
大肠杆菌可以利用葡萄糖和乳糖，并且产气；普通变形菌可以利用葡萄糖、乳糖和蔗糖并且在蔗糖中产气。
（四）吲哚实验
大肠产气枯草变形对照
结果+ ——+ —
大肠杆菌和普通变形菌结果为阳性，其余为阴性。
灭菌及无菌操作
灭菌原理与方法
灭菌(sterilization）是指利用物理或化学方法，杀灭或去除物料或设备中所有微
生物的技术或工艺过程。
（一）、化学物质灭菌
通过改变微生物细胞膜的渗透性，或者损伤细胞膜，影响微生物细胞的正常代谢。
不适合于培养基的灭菌，只适合于局部空间或某些器械的消毒。
4.有机化合物
乙醇：脱水、使蛋白质变性和沉淀，70~75%最有效。
(二)、辐射灭菌
1.紫外线：诱导胸腺嘧啶二聚体的形成，从而抑制了DNA的复制；空气在紫外线照射下产生臭氧，臭氧也具有一定的杀菌作用。
（四）、干热灭菌
1.火焰灼烧法
2.干热空气灭菌法：140~160℃维持2~3h。
（五）、湿热灭菌
湿热灭菌条件为121℃维持20~30min。
巴氏杀菌（Pasteurization）低温消毒法，主要应用于生产酸奶乳制品。目前国际上通用的巴氏
高温消毒法主要有两种：
1.一种是将牛奶加热到62~65℃，保持30分钟。采用这一方法，可杀死牛奶中各种生长型致病菌，灭菌效率可达97.3%~99.9%，经消毒后残留的只是部分嗜热菌及耐热性菌以及芽孢等，但这些细菌多数是乳酸菌，乳酸菌不但对人无害反而有益健康。
第二种方法将牛奶加热到75~90℃，保温1 5~16秒，其杀菌时间更短，工作效率更高。但杀菌
的基本原则是，能将病原菌杀死即可，温度太高反而会有较多的营养损失。
无菌操作
三、实验操作步骤
灭菌：高温蒸汽灭菌锅20 MIN，120 ℃
标记：用记号笔对待接试管斜面培养基进行标记，写上待接菌种名称、接种日期、组别。稀释菌：酒精灯附近进行
混合菌液和熔化冷却至培养50-60 ℃（手触可接受温度）以下的培养基倒平板
培养：平板倒置培养基面在上放37℃培养箱中培养24-36小时。
四、实验过程中的注意事项
1.无菌接种技术
无菌操作需在火焰旁进行，手不可触摸试管口端，以防烫伤；接种时接种环不要碰触试管口边，
防止污染；塞盖不可放在桌面上，应该用右手手缘或右手指间夹住，或玻璃盖放后火焰灭菌盖上。操作台及不可高温蒸汽灭菌物品使用前和使用后用75%酒精消毒。
2平板分离技术
倒平板时，培养皿边缘不要沾染培养基，摇匀培养基时要轻，以防培养液溅到皿盖或溢出培养皿；平板培养微生物时一定要倒置培养。
七、实验结果
1．记录液体培养基和固体斜面培养基上，细菌的生长状况。
2．记录菌种分离培养的结果。
无菌操作台：
一般来说有以下几个步骤
1、放入物品（菌种除外），打开紫外灯消毒，一般20-30分钟
2、关闭紫外灯，打开风扇通风（如果比较暗还需打开照明灯）
3、用消毒液（75%酒精等）进行台面擦拭消毒
4、实验操作
5、收拾台面，关闭风扇，关闭总电源（如果不想实验菌扩散，也可开紫外半小时后再关闭）不同型号可能有所不同，具体看看说明书
3.1从土壤中分离和纯化微生物实验方法和步骤
（1）采土样
选择较肥沃的土壤，铲去表土层，挖5-20cm深度的或特殊要求的地方土壤数10g，装入灭过菌的牛皮纸袋内，封好袋口，做好编号记录，携回实验室供分离用。
（2）制备土壤稀释液
称取土样1.0g放入盛99mL无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，置摇床振荡5min使土样均匀分散在稀释液中成为土壤悬液（10-2）。用1mL的无菌吸头从中吸取0.5mL土壤悬液注入盛有4.5mL无菌水的试管中，吹吸3次，振荡混匀（10-3）。然后再用同一支1mL吸头，从此管中吸取0.5mL注入另一盛有4.5mL无菌水的试管中（10-4），依此类推制成10-5，10-6，10-7各种稀释度的土壤溶液。
3.2涂布
用一支1mL无菌吸头分别从稀释度10-7、10-6和10-5的土壤稀释液中各吸取0.1mL对号放入已写好稀释度的肉汤蛋白胨培养基平板上，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻地涂布均匀。涂布时从低浓度到高浓度分别在培养基表面轻轻地涂布，可转动皿底一定角度，继续涂布，直至均匀。每个浓度做3个平板。
3.3培养
将平板倒置于37℃温箱中培养48h。统计每个平板长出的平均菌落数。根据下面菌落计数方法，算出每克土壤中的细菌含量。
3.4菌落计数方法
第一章绪论 一、名词解释 1、微生物 2、微生物学 二、填空题 1、微生物学的先驱者是____，微生物学的奠基人是_____，细菌学的奠基人是_____ 。 2、微生物都是些个体微小、构造简单的低等生物，包括属于原核类的细菌(____和古生菌)、放线菌、蓝细菌、____、立克次氏体、____；属于真核类的真菌（____、____和蕈菌）、原生藻类和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和____（____、拟病毒和____）。 3、微生物由于其体形都极其微小，因而导致了一系列与之密切相关的五个重要共性，即体积小，____；____，____；生长旺，繁殖快；____，____；____，____。 4、微生物的种类多主要体现在________、生理代谢类型的多样性、代谢产物的多样性、________、________等五个方面。 5、微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、________、________和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学。 6、按是否具有细胞结构，微生物可分为________型微生物和________型微生物。 7、细胞型微生物根据其细胞结构特征又可分为________微生物和________微生物。 8、按照Carl Woese 的三界论，微生物可分为________、________和________。 9、原核微生物主要包括________、________、________、________、________、________和________。 10、微生物的主要特点有：________、________、________、________和________。 三、选择题 1、适合所有微生物的特殊特征是( )。 A.它们是多细胞的 B.细胞有明显的核 C.只有用显微镜才能观察到 D.可进行光合作用 2、第一位观察到微生物的科学家是( )。 A. Robert Hooke B. Louis Pasteur C. Joseph Lister D. James T.Watson 3、细菌学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 4、Louis Pasteur对微生物学的贡献在于他( )。 A. 发现了病毒 B. 提出了自然发生说理论 C. 抨击了进化论 D. 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性 5、Louis Pasteur采用曲颈瓶试验来( )。 A. 驳斥自然发生说 B. 证明微生物致病 C. 认识到微生物的化学结构 D. 提出细菌和原生动物分类系统 6、微生物学中铭记Robert Koch是由于( )。 A. 证实病原菌学说 B. 在实验室中成功地培养了病毒 C. 发展了广泛采纳的分类系统 D. 提出了原核生物术语 7、微生物学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 四、是非题
2014微生物实验复习题 一、名词解释： 菌苔：如果把大量分散的纯种细胞密集地接种在固体培养基的较大表面上，结果长出的大量“菌落”已相互连成一片，这就是“菌苔”。 菌落：将单个细菌（或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时为内层），当它占有一定的发展空间处于适宜的培养条件下，该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌落。 芽孢：是一些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，壁厚、透性低、不易着色。 荚膜：是一些细菌细胞外的一层胶状粘液物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽，与染料亲和力低。 细菌：细菌是单细胞原核微生物，基本形态为球状、杆状、螺旋状。 天然培养基：是指一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。例如：牛肉膏蛋白胨、麦芽汁培养基。 合成培养基：组合培养基又称合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如：高氏一号培养基。 半组合培养基：又称半合成培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如：马铃薯蔗糖培养基。 液体培养基：一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模地培养微生物。 固体培养基：一类外观呈固体状态的培养基。根据固态的性质又可分为：固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基和滤膜。 半固体培养基：是指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基。例如：“稀琼脂”。
二、理论书内容： 1、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌各菌落的比较。 菌落特征微生物类别 单细胞微生物菌丝状微生物 细菌酵母菌放线菌霉菌 主要特征菌 落 含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥 外观形态 小而凸起或大而平 坦 大而凸起小而紧密 大而疏松或大而 致密 细 胞 相互关系 单个分散或有一定 排列方式 单个分散或假丝状丝状交织丝状交织形态特征 小而均匀，个别有 芽孢 大而分化细而分化粗而分化 参考特征 菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明 菌落与培养基结 合程度 不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样 单调，一般呈乳脂 或矿烛色，少数红 色或黑色 十分多样十分多样 菌落正反面 颜色的差异 相同相同一般不同一般不同菌落边缘一般看不到细胞 可见球状，卵圆状 或假丝状细胞 有时可见丝状细胞可见粗丝状细胞 细胞生长速度一般很快较快慢一般较快气味一般有臭味多带酒香味常有泥腥味往往有霉味
第十一章微生物学实验试题 一、选择题 111818.革兰氏染色的关键操作步骤是： A. 结晶紫染色 B. 碘液固定 C. 酒精脱色 D. 复染 答:( ) 111819.放线菌印片染色的关键操作是： A. 印片时不能移动 B. 染色 C. 染色后不能吸干 D. A和C 答:( ) 111820.高氏培养基用来培养： A. 细菌 B. 真菌 C. 放线菌 答:( ) 111821.肉汤培养基用来培养: A. 酵母菌 B. 霉菌 C. 细菌 答:( ) 111822.无氮培养基用来培养: A. 自生固氮菌。 B. 硅酸盐细菌 C. 根瘤菌 D. A、B 均可培养 E. A、B、C 均可培养 答:( ) 111823.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A. 二甲苯 B. 水 C. 香柏油 答:( ) 111824.常用的消毒酒精浓度为: A. 75% B. 50% C. 90% 答:( ) 111825.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A. 20ml/M3 B. 6ml/M3 C. 1ml/M3 答:( ) 111826.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A. 121℃/30min B. 115℃/30min C. 130℃/30min 答:( ) 111827.巴氏消毒的工艺条件是:
A. 62-63℃/30min B. 71-72℃/15min C. A.B. 均可 答:( ) 111828.半固体培养基的主要用途是: A. 检查细菌的运动性 B. 检查细菌的好氧性 C. A.B. 两项 答：( ) 111829.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A. 1% B. 0.5% C. 0.1% 答:( )。 111830.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A. 排冷气彻底 B. 保温时间适当 C. 灭菌完后排气不能太快 D. A-C 答:( )。 111831.目镜头上的“K”字母表示: A. 广视野目镜 B. 惠更斯目镜 C. 补偿目镜 答:( ) 111832.目镜头上的“P”字母表示: A. 平场目镜 B. 广视野目镜 C. 平场补偿目镜 答:( ) 111833.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 答: ( ) 111834.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A. 无荧光物镜 B. 照相物镜 C. 相差物镜 答:( ) 111835.镜头上标有“TC”字母的镜头是: A. 相差调整望远镜 B. 摄影目镜 C. 相差目镜 答:( ) 111836.“PA”表示: A. 马铃薯培养基 B. 高氏培养基 C. 肉汤培养基 答: ( ) 111837.无菌室空气灭菌常用方法是: A. 甲醛熏蒸 B. 紫外灯照射 C. 喷石炭酸
微生物检验考试题 实习班） 1．真核细胞型微生物的特点是 A. 典型的核结构 B.体积微小 C.有细胞壁 D.无完整细胞器 E.对抗生素敏 感 2. 细菌的基本结构不包括 A. 细胞膜 B.细胞质 C.核质D细胞壁E.菌毛 3. 质粒是细胞的 A. 核质DNA B.胞质DNA C.核质RNA D胞质RNA E.极体 4. 血xx 上的溶血环不包括 A. 潞血 B. a溶血 C. B溶血 D. Y容血 E.双环溶血 5?细菌L型的特点错误的是 A. 对青霉素敏感性降低 B. 对表面活性剂敏感性增高 C. 革兰染色均为阳性 D. 高度多形性. E. 抗原性改变 6. 与细菌致病性无关的结构是 A. 荚膜 B.菌毛 C. 磷壁酸 D.脂多糖
E.异染颗粒 7. 与细菌侵袭力无关的物质是 A. 荚膜 B.菌毛 C.芽胞 D.血浆凝固酶 E.透明质酸酶 8. 细菌的分解代谢产物不包括 A. CO 2和水B.各种酸类C.细菌素D.氨E. H 2S 8. 杀灭物体上所有微生物的繁殖体和芽胞的方法称为 A.消毒 B.灭菌C防腐D无菌E.杀菌 9. 紫外线的杀菌机制是 A. 破坏细菌细胞壁 B. 损害细胞膜 C. 损伤细菌核酸 D. 破坏核糖体 E. 破坏细菌中介体 10. xx 的获得属于 A.毒力变异 B.形态变异 C.荚膜变异 D.耐药性变异 E.抗原性变异 11. 细菌的遗传物质包括 A.核质和质粒 B.核质、质粒和中介体 C.核质、质粒和前噬菌体 D. 核质和前噬菌体 E.核质、中介体和前噬菌体 12. 关于外毒素，下列正确的是
A. 多由G菌产生 B. 化学成分是脂多糖 C. 抗原性弱 D. 经甲醛处理后可变成类毒素 E. 耐热 13．细菌分类的基本单位是 A. n B.目 C.科 D.属 E.种 14. 以下关于标准菌株不正确的是 A. 细菌分类依据 B. 细菌鉴定依据 C. 细菌命名依据 D. 细菌大小依据 E. 质量控制的标准 15. 能使白喉棒状杆菌菌落呈黑色的培养基是 A. 血液xx平板 B. xx血清斜面培养基 C伊红xx培养基 D. 亚碲酸钾培养基 E. 庆大霉素培养基 16. 下列为胞内寄生菌的是 A. 大肠xx B.痢疾xx
微生物复习题 一、单选题 1．关于共生相关概念下列哪一个是错误的C A、互利共生是指两种生物在一起生活，相互依赖，双方互利 B、共生是指两种生物在一起生活的现象 C、共栖是指两种生物在一起生活，双方互不侵害互不受益 D、共栖、互利共生和寄生是根据两种共生生物之间的利害关系来分的 E、寄生指一种生物生活在另一种生物的体内或体表，获取营养并使对方受害2．用来测量细菌大小的单位是C A.厘米(cm) B.毫米(mm) C.微米(μm) D.纳米(nm) E.微微米(pm) 3．有完整细胞核的微生物是B A、细菌 B、真菌 C、放线菌 D、衣原体 E、支原体 4．正常微生物（菌）群是E A、无侵袭力的细菌 B、不产生毒素的细菌 C、健康人的致病菌 D、健康带菌者所携带的细菌 E、在人体内长期存在的有益或无害的细菌5．机体受病原菌侵入后不出现或仅出现不明显临床症状的感染过程称为C A、带菌者 B、局部感染 C、隐性感染 D、显性感染 E、潜在性感染6．下列哪种消毒灭菌方式不合适E A、空气—紫外线 B、牛奶—巴氏消毒法 C、接种环—烧灼法 D、皮肤—碘酒 E、血清—高压蒸气灭菌法 7．肉眼直接观察细菌有无动力常选用C A、液体培养基 B、固体斜面培养基 C、半固体培养基 D、固体平板培养基 E、选择培养基 8．革兰氏染色的步骤是C A、结晶紫-酒精-碘液-复红 B、复红-碘液-酒精-结晶紫 C、结晶紫-碘液-酒精-复红 D、复红-酒精-碘液-结晶紫 E、结晶紫-复红-酒精-碘液 9．哪一项不是细菌质粒的特点E A、化学性质是环状双链DNA B、可在细菌间转移 C、非细菌所必需的遗传物质 D、能自主复制 E、是细菌的特殊构造 10．在细菌生长曲线中菌数增加最快的是：B A、迟缓期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 E、全部生长过程 11．溶原性细菌是指A A、带有前噬菌体的细菌 B、带有R质粒的细菌 C、带有毒性噬菌体的细菌 D、带有F质粒的细菌 E、带有Col质粒的细菌 12. 关于原核细胞型病原生物的基因转移，下列陈述哪项正确D A、转化与转导具有相同的转移途径 B、接合是质粒转移的非自然方式 C、转化与接合的不同在于后者依靠F+菌，前者依靠温和噬菌体 D、转化是真核生物与原核生物共同拥有的基因转移方式 E、溶原性转换是由溶原性噬菌体引起的转化现象 13．细菌的遗传物质不包括C
一、概念题： 病毒：没有细胞结构，专性寄生在活的宿主体内，大小在0.2 微米以下的超微小微生物。 原核微生物：指核质和细胞质之间不存在明显核膜，其染色体由单一核酸组成的一类微生物。（原核微生物的核很原始，发育不全，只有DNA链高度折叠形成的一个核区，没有核膜，核质裸露，与细胞质没有明显界限，叫拟核或似核。 原核微生物没有细胞器，只有由细胞质膜内陷形成的不规则的泡沫体系，如间体核光合作用层片及其他内折。也不进 行有丝分裂。） 真核微生物：细胞核发育完全具有核仁核膜 , 能进行有丝分裂 , 细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞器的微小生 物 , 都称为真核微生物。（真核微生物由发育完好的细胞核，核内由核仁核染色质。由核膜将细胞核和细胞质分开，使两 者由明显的界限。有高度分化的细胞器，如线粒体、中心体、高尔基体、内质网、溶酶体和叶绿体等。进行有丝分裂。） 原生动物：最原始、最低等、结构最简单的单细胞动物。 光能自养：指利用光能将大气中的二氧化碳和土壤中的水合成有机物的营养类型。 光能异养：指以二氧化碳作为主要碳源或唯一碳源，利用有机物作为供氢体，利用光能将二氧化碳还原成细胞物质营 养类型。 化能自养：通过氧化无机物释放出的能量还原二氧化碳成为细胞有机物的营养类型。 化能异养：指用有机物分解时释放的能量，将有机物分解的中间产物合成新的有机物的营养类型。 芽孢某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗透性休眠体 等电点：在某一 PH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，此时的溶 液的 PH值称为该氨基酸的等电点。 好氧呼吸 :有外在最终电子受体O2存在时，对底物（能源）的氧化过程。 无氧呼吸：又称厌氧呼吸，是一类电子传递体系末端的受氢体为外源无机氧化物的生物氧化。 质粒:在原核微生物中除染色体外，还含有另一种较小的，携带少量遗传基因的环状DNA 分子，称为质粒，也叫染色 体外的 DNA。他们在细胞分裂过程中能复制，将遗传性状传给后代。 自净容量 :指在水体正常生物循环中能够净化有机污染物的最大数值。 二、简述题： 1）细菌的一般结构 细菌是单细胞的。所有的细菌均有如下结构：细胞壁、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核质。 2）细菌细胞壁的生理功能 a、保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用； b、维持细菌形态（可用溶菌酶处理不同的细菌细胞壁后，菌体均呈现圆形得到证明）； c 、细胞壁是多孔结构的分子筛，阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质（革兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域）； d 、细胞壁为鞭毛提供支点，使鞭毛运动。 3）酶的活性中心 酶的活性中心是指酶的活性部位，酶蛋白分子中直接与底物结合，并与酶的催化作用直接有关的部位 4）真菌的种类 酵母菌，霉菌，以及各种伞菌。 5）酵母菌的一般特征 个体一般以单细胞状态存在；多数以出芽方式繁殖，也有的可进行裂殖或产子囊孢子；能发酵糖类而产能；细胞壁常 含有甘露聚糖；喜在含糖较高、酸性的水生环境中生长。 6）在病毒中，蛋白质的功能 蛋白质的功能：保护病毒使其免受环境因素的影响。决定病毒感染的特异性，使病毒与敏感细胞表面特定部位有特异 亲和力，病毒可牢固的附着在敏感细胞上。病毒蛋白质还有致病性、毒力和抗原性。动物病毒有的含DNA，有的含 RNA。植物病毒大多数含RNA，少数含 DNA。噬菌体大多数含DNA，少数含 RNA。病毒核酸的功能是：决定病毒遗传、变异和 对敏感宿主细胞的感染力。
微生物检验考试题（实习班） 1．真核细胞型微生物的特点是 A．典型的核结构 B. 体积微小C．有细胞壁 D. 无完整细胞器E．对抗生素敏感 2.细菌的基本结构不包括 A．细胞膜 B. 细胞质C．核质 D. 细胞壁 E. 菌毛 3.质粒是细胞的 A．核质DNA B．胞质DNA C．核质RNA D. 胞质RNA E．极体 4．血琼脂上的溶血环不包括 A. δ溶血 B. α溶血C．β溶血 D. γ溶血E．双环溶血 5.细菌L型的特点错误的是 A. 对青霉素敏感性降低 B．对表面活性剂敏感性增高 C．革兰染色均为阳性 D. 高度多形性． E．抗原性改变 6.与细菌致病性无关的结构是 A．荚膜 B. 菌毛 C．磷壁酸 D. 脂多糖 E．异染颗粒 7.与细菌侵袭力无关的物质是 A．荚膜 B. 菌毛C．芽胞D．血浆凝固酶E．透明质酸酶 8.细菌的分解代谢产物不包括 A．CO和水B．各种酸类C．细菌素 D. 氨 E. HS 228.杀灭物体上所有微生物的繁殖体和芽胞的方法称为 A．消毒 B. 灭菌 C. 防腐 D.无菌E．杀菌 9.紫外线的杀菌机制是 A．破坏细菌细胞壁 B．损害细胞膜 C．损伤细菌核酸 D. 破坏核糖体 E．破坏细菌中介体 10.卡介苗的获得属于 A．毒力变异 B.形态变异C．荚膜变异 D.耐药性变异E．抗原性变异 11.细菌的遗传物质包括 A．核质和质粒B．核质、质粒和中介体C．核质、质粒和前噬菌体 D. 核质和前噬菌体E．核质、中介体和前噬菌体 12.关于外毒素，下列正确的是 -菌产生多由GA. B．化学成分是脂多糖 C．抗原性弱 D. 经甲醛处理后可变成类毒素 E．耐热 13．细菌分类的基本单位是
第一章绪论 一、填空题 1．世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人安东?列文虎克，他的最大贡献不在商界，而是利用自制的____显微镜___发现了微生物世界。 2．微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德，他对微生物学的建立和发展作出卓越的贡献，主要集中体现__彻底否定了“自生说”学说___、__免疫学--预防接种__和__证实发酵是由微生物引起的___；而被称为细菌学奠基者是_德__国的_____柯赫____,他也对微生物学建立和发展作出卓越贡献，主要集中体现____建立了细菌纯培养技术___和__提出了柯赫法则____. 3．微生物学发展史可分为5期，其分别为史前期、初创期、___奠基期____、______发展期和成熟期；我国人民在史前期期曾有过重大贡献，其为制曲酿酒技术。 4．微生物学与___数___、___理____、___化___、信息科学和技术科学进一步交叉、渗透和融合，至今已分化出一系列基础性学科和应用性学科,如化学微生物学、分析微生物学、生物生物工程学、微生物化学分类学和微生物信息学等。 5．微生物的五大共性是指体积小，面积大、吸收多，转化快、生长旺，繁殖快、适应性强，易变异、分布广、种类多 . 二、问答题: 1．“微生物对人类的重要性，你怎么强调都不过分。”试用具体事例来说明这句话的深刻意义. （从四个方面具体的事例来说明人类与微生物的关系。) (1) 物质和能量循环（2）人体生理屏障（3）提供必需物质 (4)现代生物技术等方面。2．简述科赫原则.(如何判定某种微生物是病原菌?） 3．微生物有哪五大共性?其中最基本的是哪一个？为什么？ 4．什么是微生物，微生物学?学习微生物学的任务是什么? 5．简述微生物对生命科学基础理论研究有何重大贡献？ 答案要点：1）微生物是生命科学研究的理想材料; 2）利用酵母菌细胞制剂进行酒精发酵研究，不但阐明了生物体内糖的复杂转化过程，且为近代生物化学领域的酶学奠定了基础； 3)比德尔（Beadle）用脉胞菌进行突变试验，阐明了基因和酶的关系，提出了“一个基因 一个酶”的假说,开创了生化遗传学新学科； 4）遗传的物质基础是用微生物证实的； 5）遗传密码的被揭露、中心法则的确定、基因对酶的调节控制在分子生物学的基本原理都与微生物学有密切关系； 6）遗传工程的主角：①作为遗传工程中表达DNA所携带的遗传性状的载体,今天依然以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌等微生物为主,基因工程药物的生产几乎都是微生物；②在基因工程的操作中用于切割DNA取得所需基因的“手术刀”的限制性内切酶都来自微生物；③基因的载体是病毒、噬菌体、质粒；④动植物细胞培养和发酵技术； 7）微生物技术向微生物科学的整个领域扩散。 第二章微生物细胞的结构与功能 一、填空 1．微生物包括的主要类群有原核微生物、真核微生物和非细胞生物。 2．细菌的基本形态有球状、杆状和螺旋状。 3．根据分裂方式及排列情况,球菌分有单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、和葡萄球菌等，螺旋菌又有螺旋体菌、螺旋状__和__弧状__，及其它形态的菌有星形、方形、柄杆状和异常形态. 4．细菌的一般构造有____细胞壁____、___细胞膜____、___细胞质____和___核区___等,特殊构造又有鞭毛、菌毛(或性菌毛）、荚膜和____芽孢___等。 5．引起细菌形成异常形态的主要原因是受环境条件的影响,比如培养时间、____培养温度和培养基的组成和浓度等。 6．细菌的染色方法有①__简单染色法____、②___鉴别染色法____、③___负染色法___，其中②又可分为革兰氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法和姬姆萨染色法。
兽医微生物学实验复习题 1、兽医微生物实验室注意事项是什么？ 答：①防止病原微生物的散布；②防火；③节约；④标记；⑤记录；⑥安全；⑦清洁与秩序 2、观察细菌常用什么显微镜？它主要有哪几部分组成？ 答：光学显微镜光学部分:目镜、物镜、反光镜、聚光器；机械部分：镜座、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器。 3、油镜用毕后，为什么必须把油镜擦净？ 答：油镜的原理是通过香柏油的光路折射能更加清晰的观察微生物，油具有粘附性，且不溶于水，所以，在观察完后，香柏油会粘附在镜头上，不擦去的话，风干后镜头就变得模糊不清，甚至报废了，又因为是油所以简单的用擦镜纸擦拭是擦不干净的，二甲苯属于有机溶剂， 4、用过多的二甲苯或酒精乙醚混合液擦拭镜油有什么危害？ 答：过多的二甲苯或酒精乙醚混合液容易脱胶，使油镜脱落。 5、使用油镜时用什么作为物镜与玻片间的介质，有几种？ 答：可用与玻璃的折光系数相近的油类，有7种，如柏木油。 6、观察细菌时显微镜的操作步骤是什么？主意事项是什么？ 答：将显微镜物镜镜头转为油镜对好光线（开高集光器，开大光圈，调好反光镜）使亮度最强在载物台上放上载玻片，并在玻片上放一滴香柏油将标本移至载物台正中转动粗准焦螺旋，使油镜浸入油滴中左眼由目镜注视镜内，慢慢地转动细准焦螺旋，直至物像清晰为止 注意事项：1.调节粗准焦螺旋的时候要慢 2.观察完后要用二甲苯擦拭油镜 7、微生物绘图要求有哪些？ 答：①绘出一个视野，圆形。 ②细菌大小比例合理，必须标明名称。 ③标名显微镜的放大倍数，标明菌名。 ④绘图一律用铅笔。 8、制备细菌染色标本片时应注意哪些事项？ 答：①干燥好的抹片固定时，使抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热，以不烫手为度进行固定。 9、涂片固定的意义何在？固定时应注意什么问题？有哪些固定方法？答：意义：涂片固定可将涂片上的细菌杀死，使之固定而不会到处漂移，并且死菌比活菌更容易着色，为后面染色做准备。 注意：若用火焰固定时，抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热。固定方法：火焰固定和化学固定。 10、细菌染色的原理是什么？ 答：细菌的等电点较低，约在pH 2～5之间，故在中性、碱性或弱碱性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷，易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合，使细菌被染成紫色或红色。 11、试述细菌革兰氏染色法的步骤及结果。革兰氏染色的原理是什么？ 答：原理：G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈蓝紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
微生物学实验复习提纲 1.研究微生物学的基本技术有哪些（显微镜技术、无菌技术、纯种分离技术和纯种培养技术） 2.细菌培养基的配制过程？ 答：配制培养液→调节PH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面 3.制造接种环、接种针的金属常用铂或镍,原因是软硬适度，能经受火焰反复灼烧，又易冷却. 4.灭菌吸管的包装的注意事项：（1）吸管必须干燥;(2)在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段约1.5cm 长的棉花（不能用脱脂棉）。作用是避免外界及口中杂菌吸入管内，并防止菌液等吸入口中。 5.空的玻璃器皿一般用干热灭菌，若用湿热灭菌。则要多用几层报纸包扎，外面最好加一层牛皮纸或铝箔。 6.接种环在用前必须烧灼灭菌，用后也应立即烧灼。 7.酵母的死细胞和活细胞可通过哪些方式鉴别？ 答：1.、用美蓝液对酵母菌染色后，活细胞为无色，死细胞为蓝色2、平板菌落计数法 8.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落各有何特点？ 答：细菌：湿润、光滑、透明、粘稠、易挑起、质地均匀、菌落各部位的颜色一致等。 放线菌：质地致密、丝绒状或有皱折、干燥，不透明，上覆盖有不同颜色的干粉（孢子），菌落正反面的颜色常不一致，基内菌丝与培养基结合较紧，难以挑起。 酵母菌：菌落与细菌的相仿，比细菌菌落大而且厚，菌落表面湿润、粘稠、易被挑起，其颜色多为乳白色，少数为红色。同时会散发出悦人的酒香味。 霉菌：菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取，菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等。 9.培养基按化学成分、物理状态、用途划分可分为哪几种类型？ 答：化学成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基物理状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基用途：基础培养基、鉴别培养基、选择培养基 10.实验常用的凝固剂是哪一种？固体培养基、半固体培养基及液体培养基加凝固剂琼脂的量为多少？琼脂在什么温度下溶化？什么温度下凝固？ 答：常用凝固剂是琼脂，分别为1—2%，0.5% 96°C下融化，40°C凝固 11.配制培养基时应遵循哪些原则？配制培养基的一般方法和步骤是什么？配制培养基时不可用铜锅或铁锅，原因是什么？调pH一般用什么试剂调？配制pH低的琼脂培养基时，应怎样配制？ 答：原则：目的明确、营养协调、理化适宜、经济节约方法：生态模拟、参阅文献、精心设计、试验比较 用磷酸缓冲液和碳酸钙做调节剂 12.培养基分装时，液体分装高度以试管的多少为宜，三角瓶的多少为宜？固体分装高度以试管的多少为宜，三角瓶的多少为宜？半固体分装高度以试管的多少为宜？ 答：液体：试管高度的1\4,三角瓶的试管高度的1\2,固体：试管高度的1\5，三角瓶的1\2，半固体：试管高度的1\3 13.培养基灭菌时外用牛皮纸包扎的目的是什么？ 答：防止灭菌时冷凝水润湿棉塞 14.摆斜面的正确方法是什么？ 答：试管口搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。 15.棉塞的作用是什么？正确的棉塞要求是什么？棉塞的长度多少在管口外，多少在管内为
XX大学XX系微生物试卷A 命卷人：一、填空题（每空1分，共6小题25分） 1细菌基本形态可以分为、和。 2.霉菌菌丝有两类，一类是，如和，另一类是，例如。 3.在某些原核生物细胞壁外，会着生一些特殊的附属物，包括、、、等。 4.根据营养物质在机体中生理功能的不同，可以将它们分为、、、、______5大类。 5.微生物的系统命名采用法，即加。 6.病毒粒子衣壳对称体制包括：、和。 7.霉菌的菌丝体分为两类，它们分别是_______和________。 二、选择题（每小题1分，共25小题25分） 1. 产生假根是（）的形态特征。 A.根霉 B.酵母菌 C.青霉 D.曲霉 2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是（）。 A.蛋白质 B.肽聚糖 C.脂多糖 D.磷壁酸 3.微生物从糖酵解途径获得（）ATP分子。 A.2个 B.4个 C.36个 D.38个 4.处于对数生长期的细菌其特点是（）。 A.生长缓慢 B.生长迅速 C.大多数死亡 D.繁殖代时长 5.深层穿刺接种细菌到试管半固体培养基中（）。 A.可以观察细菌是否能运动 B.除去代谢废物的一个机会 C.增加氧气 D.增加钾和钠离子的数目 6.加压蒸汽灭菌锅灭菌参数是（）。 A.100℃,30min B. 180℃,10min C. 121℃,20～30min D. 160℃,60min 7.霉菌适宜生长的pH范围为（）。 A.＜4.0 B.4.0-6.0 C.6.5-8.0 D.8.0 8.str R是（）的一种菌株。 A.丙氨酸营养缺陷型菌株 B. 抗链霉素突变株 C.异亮氨酸营养缺陷型菌株 D. 抗庆大霉素突变株 9.微生物是生产以下食品时的一个重要因素，除了（）之外。 A.酸菜 B. 朝鲜泡菜 C.纯牛奶 D.酸奶 10.苏云金孢杆菌作为（）广泛用于现代生物学中。 A.乳酸菌 B.干酪和干酪产品的生产者 C.水系统的净化者 D. 生物杀虫剂 11.通常链霉菌可通过以下方式进行繁殖 A. 出芽繁殖; B. 分生孢子; C. 孢囊孢子; D. 芽孢子 12.自然界中分离到的细菌, 形态各种各样, 其中种类最多的是: A. 球菌; B. 螺旋菌; C. 放线菌; D. 杆菌 13.细菌的细胞核是: A 裸露的DNA 分子; B DNA 与组蛋白结合的无核膜包围的染色体.
细菌的形态与结构 一、单选题 1.细菌单位是 A. dm B. cm C. mm D.um E. nm 答案：D 2.对下列细菌大小表述错误的是 A. 葡萄球菌体直径约1um C.阴沟肠杆菌宽约0.3~0.5um B.大肠埃希菌长约 D.霍乱弧菌体长 2~3um 2~3um E.布鲁菌长2~3um 答案： E 3.下列细菌菌体形态呈链状排列的是 A. 卡他布兰汉菌 B. 屎肠球菌 C.腐生葡萄球菌 D.肺炎克雷伯菌 E.淋病奈瑟菌 答案： B 4.下列细菌菌体形态呈螺旋形排列的是 A. 表皮葡萄球菌 B.产酸克雷伯菌 C.克氏耶尔森菌 D.鼠咬热螺菌 E.鲍氏志贺菌 答案： D 5.下列不属于细菌基本结构的是 A. 细胞壁 B.芽胞 C.细胞膜 D.核质 E.细胞质 答案：B 6.不属于革兰阴性细菌细胞壁成分的是 A 脂蛋白 B.聚糖骨架 C.四肽侧链 D. 五肽交联桥 E.脂多糖答案：D 7.革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是 A. 外膜 B.肽聚糖 C.磷壁酸 D. 聚糖骨架 E.五肽交联桥 答案： C 8.下列菌有细胞壁外膜层的是 A. 粪肠球菌 B.溶血葡萄球菌 C.新型隐球菌 D. 产酸克雷伯菌 E.克柔假丝酵母菌 答案： D 9.下列不属于细菌细胞质基本成分的是 A. 水 B. 聚糖骨架 C.无机盐、糖 D. 蛋白质、脂类 E.核酸 答案：B 10.控制细菌某些特定遗传性状的是 A. 核质 B.胞质颗粒 C.质粒 D. 核糖体 E.蛋白质 答案：C 11.细菌细胞质中决定菌体嗜碱性的物质是 A. 核糖核酸 B. 质粒 C.蛋白质 D. 双链闭环DNA E.脂类 答案：A 12.细菌的主要遗传物质是 A. 核糖核酸 B.脂类 C.质粒 D. 核质 E.蛋白质
医学微生物学考试试卷（A） (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（A卷/B卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、Ａ型选择题 （由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共90个选择题） 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构，无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁： A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合，干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合，干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述，错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生（都是阳性） B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900～1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后，菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色
微生物实验复习题 一、名词解释： 菌苔：如果把大量分散的纯种细胞密集地接种在固体培养基的较大表面上，结果长出的大量“菌落”已相互连成一片，这就是“菌苔”。 菌落：将单个细菌（或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时为内层），当它占有一定的发展空间处于适宜的培养条件下，该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌落。 芽孢：是一些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，壁厚、透性低、不易着色。 荚膜：是一些细菌细胞外的一层胶状粘液物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽，与染料亲和力低。 细菌：细菌是单细胞原核微生物，基本形态为球状、杆状、螺旋状。 天然培养基：是指一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。例如：牛肉膏蛋白胨、麦芽汁培养基。 合成培养基：组合培养基又称合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如：高氏一号培养基。 半组合培养基：又称半合成培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如：马铃薯蔗糖培养基。 液体培养基：一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模地培养微生物。 固体培养基：一类外观呈固体状态的培养基。根据固态的性质又可分为：固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基和滤膜。 半固体培养基：是指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基。例如：“稀琼脂”。
二、理论书内容： 1、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌各菌落的比较。 菌落特征微生物类别 单细胞微生物菌丝状微生物 细菌酵母菌放线菌霉菌 主要特征菌 落 含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥 外观形态 小而凸起或大而平 坦 大而凸起小而紧密 大而疏松或大而 致密 细 胞 相互关系 单个分散或有一定 排列方式 单个分散或假丝状丝状交织丝状交织形态特征 小而均匀，个别有 芽孢 大而分化细而分化粗而分化 参考特征 菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明 菌落与培养基结 合程度 不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样 单调，一般呈乳脂 或矿烛色，少数红 色或黑色 十分多样十分多样 菌落正反面 颜色的差异 相同相同一般不同一般不同菌落边缘一般看不到细胞 可见球状，卵圆状 或假丝状细胞 有时可见丝状细胞可见粗丝状细胞 细胞生长速度一般很快较快慢一般较快气味一般有臭味多带酒香味常有泥腥味往往有霉味
江南大学微生物习题 Revised final draft November 26, 2020
名词解释 1997 1原生质体2芽孢3菌落4诱导酶5生长因素6回复突变7诱导8拮抗9血清学反应10巴斯德效应? 1998 1芽孢2菌落3质粒4回复突变5生长因子6诱导酶7拮抗8巴斯德效应9光复活作用10活性污泥? 1999? 1原生质体2菌落3质粒4芽孢5诱导酶6生长因子7巴斯德效应8营养缺陷型9B O D10血清学反应? 2000? 1温和性噬菌体2巴斯德效应3艾姆斯试验（Amestest）4ELISA?5PCR? 2001? 1类毒素2暗修复作用3巴斯德效应4诱导酶? 2002? 1转化2半抗原3活性污泥4回复突变5P C R 填空1997? 1微生物生长的特点是：_____
2微生物的学名是由_和_所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是_。影响染色的主要因素是_和_，革兰氏染色后为红色的是_ 4酵母菌是_，其无性繁殖方式是_和_，有性繁殖是_ 5霉菌产生的无性孢子有___ 6噬菌体的特点是___，其生长繁殖过程包括_____五个步骤。7培养基按用途可分为_____ 8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于_，大多数霉菌属于_ 9影响微生物生长的延滞期长短的因素有___等10光复活作用是指____四种情况11染色体畸变是指____四种情况12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_ 13影响微生物的抗热性的因素是_____ 14B O D是指_ 15在空气中能较长时间的微生物类群是__特点是_ 16培养时，培养皿倒置是为了_和_ 17平板菌落计数法结果表达中常用的“c l u”的意思是_ 1998?
临床检验试题—微生物检验考试试题及答案(1)——肝炎病毒 一、概念 1.HBsAg 2.HBcAg 3.HBeAg 二、填空题 1．肝炎病毒有、、、和五种类型。 2．肝炎病毒中，由粪-口途径传播的有、；由血液和垂直途径传播的有、、；属于DNA病毒的有；属于缺损病毒的是；已有疫苗可主动免疫的是和；可进行细胞培养的是。 3．HBV的外衣壳由、和蛋白组成，构成HBV的；内衣壳由组成；核心由和组成。 4.甲型肝炎的传染源主要为和，猩猩和猿猴作为传染源的意义不大。 5.甲型肝炎的血清抗体中，表示现症感染的抗体是，而表示既往感染的抗体是。 6.乙型肝炎表面抗原（HbsAg）阳性者血清标本，在电子显微镜下可观察到3种不同 形态结构的颗粒，其传染性也不同，即小球形颗粒和以及。 7.乙型肝炎基因组为双股环壮DNA，内含4个开放读框（ORF），分别称为S 区，C区，和。 8.乙型肝炎病毒感染主要经4种传播途径，即血液传播，日常生活密切接触传播，和。 三、单选题 1.乙型肝炎病毒的核酸类型是 A.单股RNA B.双股RNA C.双股线状DNA
D.双股环状DNA E.单股DNA 2.可致慢性肝炎或肝硬化的病毒为 A. HAV，HBV和HCV B. HBV，HCV和HDV C. HCV，HDV和HEV D. HDV，HEV和HAV E. HEV，HAV和HBV 3.可传播乙型肝炎病毒的途径有 A.分娩和哺乳 B.共用牙刷，剃须刀等 C.输血，血浆及血液制品 D.性接触 E.以上均可 4.不符合血清HBsAg（+）， HbeAg（+）和抗HBc（+）的解释是 A.急性乙型肝炎； B.慢性乙型肝炎； C.乙型肝炎恢复期； D.无症状抗原携带者； E.血清有强传染性。 5.关于HAV，错误的是 A.是单股正链RNA病毒； B.能在体外细胞中培养； C.特异性预防可接种疫苗；
《环境工程微生物学》课程综合复习资料 一、填空题 1、我国大耜提出的六界分类系统为：、、、、、。 2、病毒的分类依据有多种,按照核酸分类，病毒可分为、。 3、细菌的原生质体包括，和三大部分。 4、根据古菌的生活习性和生理特性，古菌可分为、、三大类型。 5、在《伯杰氏系统细菌学手册》中，将古菌分为五大类群：、、、、。 6、放线菌的革兰氏染色反应：除为外，其余均为。 7、在废水生物处理中起重要作用的三种原生动物包括，和。作为指示生物，指示处理效果差的是和。 8、真菌中的、和在有机废水和有机固体废物的生物处理中都起着积极作用。 9、从化学组成来看，酶可分为和两类。 10、、、、四种元素是所有生物体的有机元素。 11、微生物最好的碳源是，尤其是、，它们最易被微生物吸收和利用。 12、环境工程微生物学中,根据形态特点，细菌可分为四种形态,即、、、。 13、按培养基组成物的性质不同，可把培养基分为、、。 14、好氧活性污泥的组成中，微生物成分主要是。 15、菌种复壮法有、、三种。 16、污水生物处理法很多，根据微生物与氧的关系分为和两类。 17、原生动物可划分为四个纲，即、、和。 18、在污废水生物处理中，原生动物和微型后生动物的作用体现在：、和。 19、现在普遍接受的五界分类系统为：、、、、。 20、部分细菌有特殊结构：、、、、和。 21、20世纪70年代开始在水平上研究生物的研究生物的进化和系统发育。沃斯以的相关性，将一类有别于细菌的、在特殊环境的单独列出，与细菌和真核生物并列于系统发育树中。 22、细胞质膜的化学组成包括、、。 23、微生物学家根据rRNA序列的不同，将所有细胞生物分为三大域，即、、。 24、根据专性宿主分类，病毒可分为、、、、、。
食品微生物检验技术复 习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
名词解释 样品（sample）是指从某一总体中抽出的一部分。 食品采样（sampling）是指从较大批量食品中抽取能较好地代表其总体样品的方法。 接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 菌落总数：指一定数量或面积的食品样品，在一定条件下进行细菌培养，使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落，然后进行菌落计数所得的菌落数量。 V-P试验：某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。 生理生化试验：微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 硫化氢（H2S）试验：有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。 增殖培养基: 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。 外源性污染：食品在生产加工、运输、贮藏、销售食品过程中不遵守操作规程或不按卫生要求使食品发生污染称为外源性污染，也称为第二次污染． 环状沉淀反应：是一种定性试验方法，可用已知抗体检测未知抗原。将已知抗体注入特制小试管中，然后沿管壁徐徐加入等量抗原，如抗原与抗体对应，则在两液界面出现白色的沉淀圆环。 微生物性食物中毒：食用被微生物或微生物毒素污染的食品而引起的中毒称为微生物性食物中毒。 无菌接种操作：培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这过程叫做无菌接种操作。 菌落：指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。 细菌总数：指一定数量或面积的食品样品．经过适当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。 大肠菌群：系指一群在37度能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽胞杆菌。 淀粉水解试验：某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。 糖酵解试验：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。甲基红（Methyl Red）试验：肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至以下，使甲基红指示剂变红。 靛基质（Imdole）试验：某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。尿素酶（Urease）试验：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。氧化酶（Oxidase）试验：氧化酶亦即细胞色素氧化酶，为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶，氧化酶先使细胞色素C氧化，然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。硫化氢-靛基质-动力（SIM）琼脂试验：试验方法：以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度，置36±1℃培养18~24h，观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性，混浊或沿穿刺线向外生长为有动力，然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面，静置10min，若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部，可作为对照。选择培养基:在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。鉴别培养基: 在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。 无菌技术:指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 粪大肠菌群：系一群需氧及兼性厌氧，在℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。玻片凝集法：是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。试管凝集法：是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。常用于协助诊断某些传染病及进行流行病学调查。 沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应（Precipitation）。絮状沉淀反应：将已知抗原与抗体在试管（如凹玻片）内混匀，如抗原抗体对应，而又二者比例适当时，会出现肉眼可见的絮状沉淀，此为阳性反应。琼脂扩散试验：利用可溶性抗原抗体在半固体琼脂内扩散，若抗原抗体对应，且二者比例合适，在其扩散的某一部分就会出现白色的沉淀线。每对抗原抗体可形成一条沉淀线。有几对抗原抗体，就可分别形成几条沉淀线。大肠菌群MPN：大肠菌群MPN是采用一定的方法，应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值。 大肠菌群值：大肠菌群值是指在食品中检出一个大肠菌群细菌时所需要的最少样品量。内源性污染：凡由动物体在生活过程中，由于本身带染的微生物而造成食品的污染者，称为内源性污染，也称第一次污染．食品腐败变质：是指食品受到各种内外因素的影响，造成其原有化学性质或物理性质发生变化，降低或失去其营养价值和商品价值的过程．