微生物学实验复习题
一、选择题
1.革兰氏染色的关键操作步骤是：
A. 结晶紫染色
B. 碘液固定
C. 酒精脱色
D. 复染
2.放线菌印片染色的关键操作是：
A. 印片时不能移动
B. 染色
C. 染色后不能吸干
D. A和C
3.高氏培养基用来培养：
A. 细菌
B. 真菌
C. 放线菌
4.肉汤培养基用来培养:
A. 酵母菌
B. 霉菌
C. 细菌
5.无氮培养基用来培养:
A. 自生固氮菌。
B. 硅酸盐细菌
C. 根瘤菌
D. A、B 均可培养
E. A、B、C 均可培养
6.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加:
A. 二甲苯
B. 水
C. 香柏油
7.常用的消毒酒精浓度为:
A. 75%
B. 50%
C. 90%
8.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是:
A. 20ml/M3
B. 6ml/M3
C. 1ml/M3
9.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是:
A. 121℃/30min
B. 115℃/30min
C. 130℃/30min
10.巴氏消毒的工艺条件是:
A. 62-63℃/30min
B. 71-72℃/15min
C. A.B. 均可
11.半固体培养基的主要用途是:
A. 检查细菌的运动性
B. 检查细菌的好氧性
C. A.B. 两项
12.半固体培养基的琼脂加入量通常是:
A. 1%
B. 0.5%
C. 0.1%
13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:
A. 排冷气彻底
B. 保温时间适当
C. 灭菌完后排气不能太快
D. A-C
14.目镜头上的“K”字母表示:
A. 广视野目镜
B. 惠更斯目镜
C. 补偿目镜
15.目镜头上的“P”字母表示:
A. 平场目镜
B. 广视野目镜
C. 平场补偿目镜
16.物镜头上的“PL”字母表示:
A.正低相差物镜
B.正高相差物镜
C.负高相差物镜
17.物镜头上的“UVFL”字母表示。
A. 无荧光物镜
B. 照相物镜
C. 相差物镜
18.镜头上标有“TC”字母的镜头是:
A. 相差调整望远镜
B. 摄影目镜
C. 相差目镜
19. “PA”表示:
A. 马铃薯培养基
B. 高氏培养基
C. 肉汤培养基
20.无菌室空气灭菌常用方法是:
A. 甲醛熏蒸
B. 紫外灯照射
C. 喷石炭酸
D. A.B. 并用
21.干热灭菌的关键操作是:
A. 灭菌物不能有水
B. 保温过程中不能开箱门
C. 降温不能太快
22.霉菌水浸制片的关键操作是：
A. 菌丝要分散
B. 菌丝首先要用50% 的乙醇浸润
C. 盖盖玻片不能有气泡
D. A-C
23.加热法染芽胞的染料通常是:
A. 孔雀绿
B. 结晶紫
C. 复红
D. 蕃红
24.复红法染鞭毛的关键操作是:
A. 玻片干净
B. 染料新鲜
C. 菌体活化适当
D. A、B、C
25.镀银法染鞭毛的关键操作是:
A. 玻片干净
B. 染料无沉淀
C. 加热适当
D. 菌体活化适当
E. A-D
26.进行简单染色使用的染色液通常是:
A. 复红
B. 蕃红
C. 结晶紫
D. 孔雀绿
E. A-D 均可
27.物镜头上的“APO”字母代表:
A. 消色差物镜
B. 复消色差物镜
C. 半消色差物镜
28.物镜头上的“Ach”字母表示:
A. 平场物镜
B. 超平场物镜
C. 消色差物镜
29.物镜头上的“NH”字母表示：
A. 正相差物镜
B. 负相差物镜
30.物镜头上的“0.17”表示：
A. 要求的盖玻片厚度
B. 要求的载玻片厚度
C. 镜头浸油的深度
31.镜头上标有“NFK" 字母的镜头是：
A. 照相目镜
B. 荧光目镜
C. 相差目镜
32.目镜头上的“PK”字母表示：
A. 平场目镜
B. 补偿目镜
C. 平场补偿目镜
33.物镜头上的"Splan" 字母表示:
A. 超平场物镜
B. 平场物镜
C. 消色差物镜。
34.物镜头上的"Splan Apo" 表示:
A. 超平场复消色差物镜
B. 超平场半消色差物镜
C. 超平场物镜
35.物镜头上的"Plan Apo" 表示:
A. 超平场物镜
B. 平场物镜
C. 平场复消色差物镜
36.物镜头上的"Plan" 字母表示:
A. 平场物镜
B. 消色差物镜
C. 超平场物镜
37.目镜头上的"WF" 字母表示:
A. 广视野高眼点补偿目镜
B. 高眼点目镜
C. 广视野目镜
38.目镜头上的"SWK" 字母表示:
A. 超广视野目镜
B. 高眼点补偿目镜
C. 平场补偿目镜
39.目镜头上的"WHK" 字母表示:
A. 超广视野目镜
B. 广视野高眼点目镜
C. 平场补偿目镜
40.物镜头上的"F.L" 字母表示:
A. 消色差物镜
B. 半消色差物镜
二、判断题
1.无菌吸管上端塞入棉花是为了过滤口中的有菌空气。
2.无菌吸管上端塞入棉花的目的是为了防止菌液吸入口中
3.稀释平板测数时，放线菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300 个之间的稀释度进行计数。
4.稀释平板测数时，细菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300 个之间的稀释度进行计数。
5.稀释平板测数时，细菌，放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在 30-300 个的稀释度进行计数。
6.稀释平板测数时，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100 个的稀释度进行计数。
7.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100 个的稀释度进行计数。
8.用混菌法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是1ml。
9.用涂抹法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是0.1ml。
10.用油镜镜检时应将聚光器升至最高。
11.使用高倍镜时, 可将聚光器升至最高。
12.为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水。
13.稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。
14.观察根霉，青霉只需用低倍镜观察即可。
15.实验室通常使用血球计数板测微生物的总菌数。
16.浸油的油镜头可用软的卫生纸擦净。
17.为了节省时间，可直接在染色涂片上滴加香柏油后, 直接用油镜观察。
18.使用油镜的正确操作步骤是:
（1）低倍镜观察。
（2）高倍镜观察。
（3）转出高倍镜头，滴加香柏油后用油镜观察。
19.在擦拭显微镜镜头时，应向一个方向擦拭。
20.显微镜镜头的放大倍数越大，它的数值孔径值越大，其镜口角也越大。
21.稀释平板测数通常是采用十倍稀释法。
22.稀释平板测数通常采用的是二倍稀释法。
23.做稀释平板测数时，只需一支吸管从头稀释到尾即可。
24.做稀释平板测数时，每做一个稀释度都必须更换一支无菌吸管。
25.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法, 每个平皿中的菌液加入量都是 1ml。
26.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法，每个平皿中的菌液加入量都是 0.1ml。
27.实验室做固体培养基时，常加 1.8% 的琼脂作凝固剂，做半固体培
养基时, 琼脂加入量通常是 0.5%。
28.实验室做固体培养基，常加 2% 的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是 1%。
29.E. coli经革兰氏染色后，菌体呈红色，它是革兰氏正反应细菌。
30.在光学显微镜下，根霉的孢子囊是透明的。
31.使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气。
32.所有苏云金杆菌的芽胞在菌体的中央。
33.所有真菌菌落的表面干燥，呈绒毛状。
34.所有放线菌菌落表面干燥，呈粉粒状。
35.所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。
36.镜台测微尺每小格的实际长度是10 微米。
37.目镜测微尺每小格的实际长度是 10μm。
38.镜台测微尺每小格的实际长度是 10nm( 纳米)。
39.血球计数板两边的平台比计数区高 0.1cm。
40.血球计数板两边的平台比计数区高 0.1mm。
41.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的 2/3。
42.棉花塞入试管的长度应为棉塞全长的 1/2。
43.摆斜面的长度应不超过试管长度的 2/3。
44.摆斜面的长度应不超过试管长度的1/2。
45.血球计数板计数区的面积是 1 mm2。
46.用血球计数板计数时，任数 5 个大方格(80 个小格) 的菌数即可。
47.在使用细菌计数板计数时，为了防止计数偏大，计数区四周压线的菌只能数两边。
48.目镜测微尺每格的实际长度是未知的，需用长度已知的镜台测微尺校正。
49.测微生物的细胞大小时, 需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度。
50.测微生物细胞大小时，需要校正的是目镜测微尺每格的实际长度。
51.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。
52.血球计数板计数区共有400 个小格，每小格的面积是 1/400 cm2。
53.用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。
54.琼脂的熔化温度是 80℃以上，凝固温度是 45℃以下。
55.琼脂的熔化温度是 95℃以上，凝固温度是 45℃以下。
56.玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。
57.细菌计数板每小格的体积是 1/20000 mm3。
58.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000cm3。
59.无菌室用甲醛熏蒸消毒后可喷氨水以减少甲醛的刺激。
三、填空题
1.霉菌水浸片的制片程序是_________, ____________, ___________, _____________,_____________, _________________。
2.放线菌印片染色的操作程序是_______________, _____________,
_____________, _______________, ____________, ________________。
3.固体培养基常用__________ 作凝固剂，普通固体培养基的用量一般为__________ ，半固体培养基的用量一般为_____________。
4.简单染色的操作程序是_____________, ___________, ___________, __________, __________, __________。
5.使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是__________, __________, __________, _________,___________, __________, ___________, __________, ___________, ____________。
6.实验室配制固体培养基的操作程序是______ __、____________、
_____________、_______________、___________________、_____ ________________、
___________________。
7.有荚膜的细菌用负染色法染色后, 荚膜为____ 色，菌体为_____ 色。
8.细菌经革兰氏染色后，革兰氏正反应菌呈_______，革兰氏负反应菌呈________。
9.细菌经简单染色后呈_________。
10.显微镜的光学系统由_________,_________,__________和__________ 组成。
11.显微镜的机械部分包括__ _______、____ _____、___________、
____________、____________、___________、______________、____ ______、____________等九部分组成。
12.高氏培养基通常用来培养_________ ，其 pH 值为__________。
13.PA 培养基通常用来培养_________，其 pH 值为___________。
14.牛肉膏、蛋白胨培养基通常用来培养____ 菌，其pH 值为________。
15.干热灭菌的工艺条件是_____________________。
16.使用显微镜低倍镜观察时, 聚光器应该__________，使用显微镜高倍镜观察时，聚光器应该____________________。
17.革兰氏染色的关键操作是_____________________。
18.显微镜的放大倍数越大，焦深________ ，调焦应该_____________。
19.按培养基的形态, 可将培养基分为____________、______ ____、
__________三种类型。
20.配制常规培养基时通常用________________水。
21.干热灭菌通常用来灭菌 _____________，培养基的灭菌通常用________________。
22.细菌稀释测数通常采用___________ 稀释法，稀释用试管无菌水为__________ 毫升。
23.配制培养基时常用__________ 和 ____________ 调节 pH 值。
24.按培养基的特殊用途, 可将培养基分成 __________、_________、
________________ 等。
25.选择培养基可用来分离培养我们所需的特殊微生物类群，例如我们要从土壤中分离纤维分解菌，可以利用 ________作唯一碳源来筛选 _________；要分离产蛋白酶的微生物，可以利用 __________ 作唯一氮源分离__________。
26.革兰氏染色的操作程序是__________, __________, ___________, __________, ________________, _____________, ____________, _____________, ____________, ____________, ___________, ____________。
27.培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或_________ 的
营养基质。按营养物质的不同来源可分为 ___________、_____________、_____________ 三大类。
28.高倍镜头的数值孔径通常为_________，放大倍数为____________。
29.油镜头的数值孔径通常为_____________，放大倍数为____________。
30.低倍镜头的数值孔径通常是__________，放大倍数为____________。
31.穿刺接种使用的接种工具为_________，斜面接种使用的接种工具为_________。
32.进行稀释测数使用的主要器材有_________、______________、___________、_________。
33.用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时，可使菌体呈_____ 色，使芽胞呈_______ 色。
34.用日光灯作光源时, 通常用_________反光镜，用自然光作光源时，通常用_______ 反光镜。
35.无菌室杀菌通常采用____________ 和___________相结合的方法。
36.半固体培养基通常用来检查____________________。
37.摆试管斜面的基本操作方法是________、 ________、 ____________。
38.不能加热灭菌的液体培养基应采用_______________ 除菌，通
常用的器皿有_____________和______________。
39.蓝细菌的培养可用___________________ 培养基。
40.分离酵母菌时为了抑制细菌的生长，通常用________ 培养基。
41.从土壤中分离真菌时, 通常在培养基中加入________和__________ 抑制细菌的生长。
42.测微生物大小使用的主要工具是_____________、_____________和
________ __。
43.进行酵母菌的显微计数使用的主要工具是____________ 和_______________。
44.进行细菌的显微计数时使用的主要工具是___________和_____________。
45.普通光学显微镜测酵母菌的大小的操作程序是________________ _________________、_______________、_______________、_______________、________________、 ________________、、 __________________、 ____________________。
46.显微计数的操作程序是_____________________、 __________________、
_________________________、 _____ _____________、 _____________________、
_____________________、 _____________________、 __________________________。
47.荚膜染色法的操作程序是__________________、 ___________________、
_______________________、 ______________________、 ______________________、
_______________________、 ________________________。
48.芽胞染色的操作程序是___________________、 _____________________、
_____________________、 ______________________、 _________________________、
_____________________、 ______________________、 _________________________。
49.芽胞染色的关键操作是_____________________。
50.放线菌印片染色的关键操作是___________________。
51.用负染色法染荚膜的关键操作是____________________。
52.摇床振荡培养通常用来培养___________ 微生物，享格特的厌氧操作方法通常用来培养______________菌。
53.革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_________ 和_________有关。在革兰氏染色过程中，当用 95% 酒精处理后，就放在显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈______ 色，而革兰氏阴性菌呈_______ 色。
54.血球计数板与细菌计数板的主要差别是_______________。
55.制霉菌水浸片时加棉兰染色液可使菌体呈_____________色。
56.Anabaena azotica的异型胞通常是________ 生，在光学显微镜下它是_________ 的，细胞两端有 _______ 。它能控制 ________________ 的进入，保持异型胞内 ____________，以利于 ____________。
57.配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是______________。一般而言, 当C : N ≥5 : 1 时, 有利于________；当 C : N ∠5 : 1 时有利于___________。
58.由于各种微生物对某种化合物如抗生素、染料的敏感性不同，可以利用这一特征来从土壤中分离出不同类群的微生物。如在培养基中加入_________ ，会杀死或抑制____________ 的生长而分离出___________；在培养基中加入__________ ，有利于分离到革兰氏阴性菌。
59.细菌在革兰氏染色过程中,最后用蕃红复染因是_____________________, _______________________, _________________________。
60.高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于____________ 和_______________ 引起。
61.微生物在培养基中生长时，由于其____________ 而使培养基___________ 发生改变；所以在配制培养基时，为维持该条件的相对恒定，常在培养基中加入缓冲物质如____________或____________。
62.一般而言, 微生物在含糖基质上生长，会产__________ ，而使_____________；微生物分解蛋白质或氨基酸会产____________ ，而使_____________。
63.在微生物培养过程中使用的培养皿首先是被__________ 采用的，因此又称培养皿为_______dish。 _________ 在其妻子的启发下，将固体培养基使用的凝固剂由明胶改为_____________。
64.显微镜的微动螺旋每转一圈升降距离为___________________。
65.两个典型的革兰氏正反应细菌和革兰氏负反应细菌经革兰氏染色后都呈阴性反应往往是由于___________________ 和____________ 引起。
66.检查乳品和饮料是否含有__________ 等肠道细菌，可采用_______________ 培养基，在这种培养基平板上____________ 会形成具有__________光泽的紫黑色小菌落。
67.细菌鞭毛经镀银法染色后呈_________ 色。
68.细菌鞭毛经李夫森法染色后呈_____________ 色。
69.由于升汞(HgCL2) 有腐蚀作用, 所以不能用于__________ 消毒，特别是___________ 制品。
70.无氮培养基通常用来培养____________ ，其氮源来自_______________。
四、名词解释
1.电子显微镜
2.普通光学显微镜
3.合成培养基
4.培养基
5.天然培养基
6.半合成培养基
7.革兰氏染色法。
8.简单染色。
9.稀释平板计数法
10.显微直接计数法
11.巴氏消毒
12.间歇灭菌
13.消毒
14.灭菌
15.过滤除菌
16.湿热灭菌
17.干热灭菌
18.选择培养基
19.加富培养基
20.鉴别培养基
21.数值孔径
22.分辨力
23.超净工作台
24.纯培养技术
25.焦深
26.暗视野显微术
27.荧光显微术
28.负相差
29.正相差
五、问题
1.试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。
2.以测苏云金杆菌工业菌粉中的活菌数为例，试述稀释平板计数的基本方法。
3.试述划线分离的操作方法。
4.如何检查细菌的运动性?
5.简述配制培养基的基本原则:
6.试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。
7.试述显微计数的基本方法。
8.标本片上的某一物象，第一次看到后如何再次找到它?
9.试述在光学显微镜下所看到的Anabaena azotica的主要特征。
10.革兰氏染色反应的成败关键是什么? 为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?
11.如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?
12.察氏培养基的组成为: 蔗糖:30 克, 磷酸氢二钾: 1.0 克, 硝酸钠:2
克, 硫酸镁 0.5 克, 氯化钾: 0.5 克, 硫酸亚铁: 0.01 克,蒸馏水: 1000 ml. 试述:
(1)该培养基的 C 源, N 源各是什么物质。
(2)除 C 源和 N 源外的其它物质起什么作用:
(3)该培养基为什么不加生长因子?
微生物学实验复习题答案
一、选择题
1.C
2.D
3.C
4.C
5.D
6.C
7.A
8.B
9.A
10.C
11.C
12.B
13.A
14.C
15.A
16.A
17.A
18.A
19.A
20.D
21.A
22.D
23.A
24.D
25.E
26.A
27.B
28.C
29.C
30.A
31.A
32.C
33.A
34.A
35.C
36.A
37.C
38.A
39.B
40.B
二、判断题
1.对。
2.错。
3.对。
4.对。
5.错。
6.对。
7.错。
8.对。
9.对。
10.对。
11.错。
12.对。
13.对。
14.错。
15.错。
16.错。
17.错。
18.对。
19.对。
20.对。
21.对。
22.错。
23.错。
24.对。
25.错。
26.错。
27.对。
28.错。
29.错。
30.错。
31.错。
32.错。
33.错。
34.错。
35.错。
36.对。
37.错。
38.错。
39.错。
40.对。
41.对。
42.错。
43.错。
44.对。
45.对。
46.错。
47.对。
48.对。
49.错。
50.对。
51.对。
52.错。
53.对。
54.错。
55.对。
56对。
57.对。
58.错。
59.对。
三、填空题
1.加一滴水于载玻片中央，用解剖针挑取菌丝少许, 将菌丝用50% 的酒精浸润，将菌丝用蒸馏水水洗，将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散，盖上盖玻片
2.印片 , 干燥 , 固定 , 复红染色 2-3 分钟 , 水洗 , 晾干
3.洋菜( 琼脂) ， 1.5-2.0%， 0.5%
4.涂片，干燥，固定，复红染色1-2 分钟，水洗，晾干
5.锅内加水，灭菌物体装锅，对称上紧密封螺帽将锅密封，加热升温，排尽锅内冷空气，升温至灭菌工艺条件{一般为 98kpa}，在工艺条件下保压计时{一般为30 分钟} ，到时间后切断热源，降温，出锅
6.照配方称取药品，将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸，将琼脂按量称取后用水浸湿，将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中，待琼脂全部融化后调节 pH 值，补充损失的水分，分装培养基入不同的容器中
7.无色，红色
8.紫色，红色
9.所染染料的颜色
10.反光镜 , 聚光镜 , 物镜 , 目镜
11.镜座，镜臂，载物台，转换器，镜筒，推动器, 粗动螺旋 ,微动螺旋，聚光镜升降螺旋
12.放线菌，7.5-8.0
13.真菌，5-6
14.细菌、6.8-7.2
15.160-170℃ /2h
16.降低，适当升高
17.酒精脱色
18.越小，越小心
19.液体，固体，半固体
20.自来
21.玻璃器材，高压蒸汽灭菌
22.10 倍 , 9
23.1 mol NaOH、 1 mol HCL
24.选择培养基，加富培养基，鉴别培养基
25.纤维素，纤维分解菌，酪蛋白，蛋白分解菌
26.涂片，干燥，固定，结晶紫染色 1 分钟，水洗, 碘液媒染 1 分钟，水洗， 95% 的乙醇脱色 25 秒，水洗，蕃红复染 3-5 分钟，水洗，晾干
27.积累代谢产物，天然培养基，合成培养基,，半合成培养基
28.0.65， 40x
29.1.25， 100x 或90x
30.0.25， 10x 或 8x
31.接种针，接种环
32.酒精灯， 1ml 无菌吸管， 9ml 试管装无菌水， 9cm 的无菌平皿
33.红色，绿色
34.平面，凹面
35.紫外灯照射，喷洒化学药剂( 如酚)
36.细菌的运动性
37.将摆斜面用特制木条放在桌面上，将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆成斜面，斜面长度不得超过试管长度的 1/2，将试管棉塞部分用灭菌报纸盖上，以防空气中微生物落到棉塞上引起污染
38.过滤法，蔡氏细菌过滤器，滤膜
39.无氮
40.酸性
41.孟加拉红，链霉素
42.显微镜，镜台测微尺，目镜测微尺
43.显微镜血球计数板。
44.显微镜细菌计数板。
45.将镜台测微尺置载物台上，调焦找到台尺，在低倍镜下校正目镜测微尺每格的长，在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长，去掉台尺换上待测样本片，在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数，将校正值乘入，算出十个酵母菌的平均宽和平均长，以平均宽Xμm ×平均长 Yμm 表示酵母菌的大小。
46.将待测菌进行适当的稀释，将计数板置于载物台上 , 在低倍镜下找到计数区, 将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五点取样法计数五个大方格的菌数,计算每小格的含菌数，计算出单位体积( 如每 ml) 中的含菌数。
47.涂片，风干，加复红染色 3-5 分钟，水洗，晾干，加墨素涂抹，风干。
48.涂片，干燥，固定，孔雀绿加热染色 15 分钟，水洗，复红染色2-3 分钟，水洗，晾干。
49.孔雀绿加热染色适当
50.印片时不能移动
51.涂抹墨素要薄
52.好气，专性厌氧
53.结构，组成，紫，无
54.前者计数区的深度是后者的五倍
55.浅兰
56.间生，透明，极节，氧气，低氧分压，固定分子氮
57.C:N 比 ( 碳氮比 )，菌体生长，积累代谢产物
58.青霉素( 链霉素)，细菌和放线菌，真菌，结晶紫
59.G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后，菌体紫色脱去，故需用蕃红复染，这样在光镜下才能见到红色的菌体。
60.玻片置反，菌体着色太浅
61.新陈代谢， pH 值，碳酸盐(CaCO3)，磷酸盐
62.酸， pH 下降, 碱， pH 上升
63.Petri， Petri， Hesse ，琼脂。
64.0.1毫米
65.酒精脱色时间过长，菌体培养时间太长
66.大肠杆菌(E.Coli)，伊红-- 美兰，大肠杆菌(E.Coli)，金属
67.褐
68.红
69.金属器皿，铝
70.自生固氮菌，空气中的 N2。
四、名词解释
1.电子显微镜是利用电子波波长短，分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。
2.用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。
3.由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。
4.人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。
5.由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯, 麸皮等配制而成的培养基。
6.由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。
7.革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法，细菌首先用结晶紫染色，再用碘液固定，然后用 95% 的酒精脱色,最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后，又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌；凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色，也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。
8.用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。
9.将一定量的样品经十倍稀释后，用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后，计数出某一稀释度的菌落数后再乘
以稀释倍数，即为样品中的含菌数。
10.利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后，再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。
11.巴氏消毒是法国微生物学家巴斯德发明的一种消毒方法。是在 62-63℃的条件下，保温半小时杀死微生物的营养体 ( 主要是病原菌) 的方法。
12.利用 100℃的温度杀死微生物的营养体. 每次 1 小时连续三天，中间的空隙时间让未杀死的芽胞萌发成营养体，在下一次 100℃的温度下被杀死。如此反复两次可将培养基的微生物( 包括芽胞 ) 全部杀死。该方法适用于没有高压灭菌器的地方进行灭菌处理。
13.只杀死微生物的营养体 ( 主要是病原菌 )，而不能杀死微生物的芽胞的除菌方法。
14.利用物理或化学方法杀死所有微生物包括细菌的芽胞的除菌方法称为灭菌。
15.利用一定孔径的滤膜阻止微生物的通过而除去溶液中或者空气中微生物的除菌方法。
16.利用热的蒸汽杀死微生物的灭菌方法。湿热灭菌又分常压蒸汽灭菌和加压蒸汽灭菌。
17.利用干热空气杀死微生物的方法。其灭菌工艺条件通常为160-170℃/2h 。
18.根据使用的目的，控制培养基的组成成分，使之有利于某种微生物的生长而限制其它微生物的生长，从而能从自然界混杂的群体中分离出某一种单一的微生物。如无氮培养基用来分离土壤中的自生固氮菌。
19.在基本培养基中加入血清，动植物组织液或者其它生长因子而配制出来的营养特别丰富的培养基。
20.根据微生物的代谢特点，通过指示剂的显色反应，用以鉴别不同微生物的培养基。
21.数值孔径是判断物镜和聚光镜性能的重要指标，通常用 N.A 表示。N.A = n.sinα/2( n 为介质折光率，α为镜口角)。
22.分辨力是指显微镜能够分辨出的物体两点间最小距离的能力。它与波长及物镜的数值孔径有关。
23.利用过滤除菌的原理而设计出来的一种无菌操作工作台，鼓风机鼓出的空气通过孔径很小的薄膜将空气中的微生物过滤后变成无菌空气吹向操作台，可防止周围有菌空气流入，能保证操作台始终保持无菌状态，便于无菌操作。
24.纯培养技术是培养某个单一微生物的方法。包括培养基的制作与灭菌。单一微生物的分离与纯化, 和无菌操作接种技术。
25.焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看见的物象之间的距离。它与放大倍数成反比，即放大倍数越大, 焦深越小。
26.利用暗视野聚光器能阻止光线直接照射标本，而使光线斜射在标本上。在显微镜中见到黑暗视野中明亮物象的镜检技术。27.以紫外光作光源的显微镜检技术。
28.在黑暗视野中看到明亮物体的相差镜检技术。
29.在明亮视野中看到黑暗物体的相差镜检技术。
五、问题
1.测定微生物细胞的大小主要使用目镜测微尺。其方法如下:
（1）先用长度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。校正的方法是让台尺与目尺重叠, 看台尺的 X 格正好与目尺的 Y 格重叠，然后用计算目尺每格的长. 分别校正目镜测微尺在低倍镜, 高倍镜及油镜下每格所代表的实际长度。
（2）将待测微生物制成水浸片或染色涂片置载物台上，调焦找到微生物后用目镜测微尺测量其宽几格，长几格, 然后乘上相应放大倍数下的校正值。（3）一般测 10 个微生物，然后以平均值表示。
（4）若是酵母、细菌等单细胞微生物, 通常测其宽和长，然后以平均宽 平均长表示, 单位为μm。
2.答：（1）测数前先准备好测数用的 1ml 无菌吸管,9cm 无菌平皿，9ml 试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
（2）称取10克工业菌粉加入 90ml 无菌水中置摇床上或用手振荡 20-30分钟，让菌体分散。
（3）将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到 10-8。
（4）取 9cm 无菌平板皿9 套用记号笔在平皿底编号，10-8编3 套，10-7编3 套，10-6编3 套。
（5）用 1 支 1ml 的无菌吸管，取 1ml 10-8的稀释菌液放入编号10-8的平皿中，如此将三个重复做完。同法取 10-7稀释菌液放入三个编号为10-7平皿中。同法取10-6稀释菌液放入三个编号为10-6 平皿中.( 均要按无菌操作法做)。
（6）将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至 45-50℃后，在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述 9 套平皿中，每个加入量大约 15-20ml，边加边摇动平皿,，使培养基与菌液充分混匀。
（7）待培养基凝固后,将平板倒过来，置 28-30℃下培养 48 小时后计数。
3. 答：（1）取 9ml 无菌平皿一套在火焰旁按无菌操作法倒人 15-20 ml 营养琼脂，让其冷凝成平板。
（2）左手拿上述平板,右手拿接种环在火焰上灭菌后沾取原始分离物在平板上平行划线三条。
（3）将接种环在火焰上灭菌,左手平板转动大约 70 度，用灭菌接种环通过第一次划线的地方作二次划线，亦划三条。
（4）同上法再作第三次,，第四次划线。
（5）盖上平板盖，将平板倒过来置 28-30℃下培养 2-4 天后观察结果。划的好应在第四次划线处出现单个菌落。
注: 本答案也可画图说明。
4.检查细菌的运动性有两种方法:
（1）镜检法
将待检样品制成菌悬液,滴一点菌液于一盖玻片上，取一凹窝载玻片，将凹窝对准菌悬液盖在盖玻片上，然后将盖玻片和载玻片一起翻转，让菌悬液在凹窝上的盖玻片下。然后在显微镜下观察，观察应找悬液的边缘，因细菌为了更多地接触空气，总向水滴的边缘运动。观察时要注意将细菌的运动与分子的布朗运动区别开。
（2）半固体穿刺法
将待检细菌穿刺接种在半固体试管培养基中, 若细菌仅沿穿刺线生长, 说明细菌不运动。若细菌沿穿刺线向周围扩散生长, 说明细菌有运动性。
5.培养基是人工配制的供不同微生物生长繁殖，或用于积累代谢产物的营养基质。所以配制培养基时应注意以下原则：（1）根据微生物的不同选用不同的培养基，以满足微生物对营养物的需要。如自养型微生物所要求营养较简单，而异养型微生物营养要求较复杂。培养细菌，放线菌，真菌等各有不同的培养基。
（2）注意各种营养物质的浓度与配比。微生物生长所需要的营养物质往往在适当时才生长良好。浓度大往往会抑制微生物的生长。如糖类，各种重金属盐类如果浓度太高，也会影响微生物的生长。同时各种营养物质的浓度比也应注意，特别是 C/N 比。
（3）注意将培养基的 pH 值控制在一定范围内。为了防止因微生物生长繁殖或积累代谢产物后影响培养基 pH 值，常在其中加入磷酸盐，碳酸盐，以维持培养基 pH 值的相对恒定。
（4）同时还应考虑培养基的氧化还原电位及原材料的经济、易购和来源广泛的原则。
6. 制培养基的基本过程是:
（1）按培养基的配方称取各种药品，用量太少的药品应配制成溶液后再取一定量加入。
（2）将各种药品加水溶解，通常是加所需水量的一半。
（3）若配固体培养基，按 2% 的用量称取琼脂，用水将琼脂浸湿一下，用手挤去琼脂中过多的水分，加入 2 的溶液中。
（4）加热至琼脂全部溶解，并补足所需的全部水量。
（5）用 1mol NaOH 和 1mol HCL 调节 pH 至要求值。
（6）用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，灭菌后备用。注意事项:
（1）过程中，在加热熔化琼脂时，要不断搅拌，以防糊底。
（2）分装时不要让培养基沾染试管口或瓶口，以防培养过程中容易污染杂菌。
7.显微计数通常用来测微生物单细胞的数量，大一点的细胞如酵母菌用血球计数板，小一点的细胞如细菌用细菌计数板。该测数方法不能区别死活细胞，测出的是微生物总的细胞数量。
（1）血球计数板和细菌计数板构造相似，计数区的面积都是1mm2，两者的差别在于血球计数板的深度为 0.1mm。细菌计数板的深度为0.02mm。无论是血球计数板还是细菌计数板计数区都划为 25 个大方格，每个大方格又划为 16 个小格。所以每小格的体积为 1/4000 mm3或 1/20000mm3。
（2）计数时, 先在显微镜下找到计数区，然后将菌液稀释到适当浓度，取少量菌液滴在计数区上盖上特制盖玻片，亦可先盖盖玻片。然后用吸管将菌液从计数板上的沟里加入。靠菌液的表面张力充满计数区。
（3）计数时采取五点取样法数数，即四角各取一个大方格，再在中央取一个大方格。计数时大方格四周压线的细胞只数两边，以防增加数量。（4）将 5 个大方格的菌数加起来除以 80 得出每个小格的菌数，再乘以 4000 即为 1mm3的菌数，再乘上 1000 即为 1ml 的菌数，乘上稀释倍数即为样品含菌数。
8.做到这一点，首先取决于显微镜的好坏，若显微镜上的推动器带有纵横标尺，很容易做到这一点。首先记住标本片放到推动器上的方向，然后记下观察某一物体时推动器上的纵横标尺的数字。如纵 3，横 4。
当标本片拿下来后，若要重复观察原来的物象，只要按原方向将标本片荚在推动器上，将推动器推动到第一次观察该物体的纵，横标尺数字纵 3，横 4，即可看到第一次观察过的物体。
9.Anabaena azotica的主要特征是:
（1）菌体为丝状体，营养细胞为绿色，藻丝不扭曲。
（2）该菌有异型胞, 异型胞间生，无色透明，两端有极点。
（3）厚壁孢子无色、大、两端无极点。
10.答：通过革兰氏染色，可把几乎所有的细菌都分成 G＋和 G－菌两大类细菌，在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异。因此，任何细菌只要通过革兰氏染色，即可提供不少重要的生物学特性方面的信息。
革兰氏染色反应的成败关键是:
（1）菌龄:12-24 小时的纯培养物。
（2）革兰氏染色操作时，要严格控制酒精脱色时间，菌液涂布均匀而薄。
（3）养基的组成。
11.首先要根据分离对象选择适宜的培养基。若要分离真菌应选用马丁- 孟加拉红选择培养基；若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。
土样采回来后，用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离，若分离细菌，一般稀至 10-8, 若分离放线菌,一般稀至 10-6；若分离真菌，一般稀至 10-4。取最后三个稀释度倒平板获得单个菌落。将平板上出现的单菌落转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度，若不纯，应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。倒平板获得单菌落，转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度。反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体。
12. （1）该培养基的 C 源物质是蔗糖，N 源物质是硝酸钠。
（2）磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁为该培养基提供矿质营养。蒸馏水提供水分。
（3）该培养基培养的微生物在培养基上能合成自身所需的全部生长因子，故无需添加生长因素,该培养基所培养的微生物为野生型。
第十一章微生物学实验试题 一、选择题 111818.革兰氏染色的关键操作步骤是： A. 结晶紫染色 B. 碘液固定 C. 酒精脱色 D. 复染 答:( ) 111819.放线菌印片染色的关键操作是： A. 印片时不能移动 B. 染色 C. 染色后不能吸干 D. A和C 答:( ) 111820.高氏培养基用来培养： A. 细菌 B. 真菌 C. 放线菌 答:( ) 111821.肉汤培养基用来培养: A. 酵母菌 B. 霉菌 C. 细菌 答:( ) 111822.无氮培养基用来培养: A. 自生固氮菌。 B. 硅酸盐细菌 C. 根瘤菌 D. A、B 均可培养 E. A、B、C 均可培养 答:( ) 111823.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A. 二甲苯 B. 水 C. 香柏油 答:( ) 111824.常用的消毒酒精浓度为: A. 75% B. 50% C. 90% 答:( ) 111825.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A. 20ml/M3 B. 6ml/M3 C. 1ml/M3 答:( ) 111826.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A. 121℃/30min B. 115℃/30min C. 130℃/30min 答:( ) 111827.巴氏消毒的工艺条件是:
A. 62-63℃/30min B. 71-72℃/15min C. A.B. 均可 答:( ) 111828.半固体培养基的主要用途是: A. 检查细菌的运动性 B. 检查细菌的好氧性 C. A.B. 两项 答：( ) 111829.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A. 1% B. 0.5% C. 0.1% 答:( )。 111830.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A. 排冷气彻底 B. 保温时间适当 C. 灭菌完后排气不能太快 D. A-C 答:( )。 111831.目镜头上的“K”字母表示: A. 广视野目镜 B. 惠更斯目镜 C. 补偿目镜 答:( ) 111832.目镜头上的“P”字母表示: A. 平场目镜 B. 广视野目镜 C. 平场补偿目镜 答:( ) 111833.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 答: ( ) 111834.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A. 无荧光物镜 B. 照相物镜 C. 相差物镜 答:( ) 111835.镜头上标有“TC”字母的镜头是: A. 相差调整望远镜 B. 摄影目镜 C. 相差目镜 答:( ) 111836.“PA”表示: A. 马铃薯培养基 B. 高氏培养基 C. 肉汤培养基 答: ( ) 111837.无菌室空气灭菌常用方法是: A. 甲醛熏蒸 B. 紫外灯照射 C. 喷石炭酸
2011环境微生物学考研试题及答案一、名词解释 包含体： 细胞膜： 衣原体： 同宗配合： 酵母菌： 生态系统： 碳源： 拮抗： 菌种复壮： DNA的变性： DNA复制： 根际微生物： 物质流： 类菌体： 硝化细菌： 细菌活性污泥法： 生物反应器：
微生物细胞固定化： 堆肥化： 自生固氮作用： 二、是非题 原噬菌体是整合在宿主DNA上的DNA片段,它不能独立进行繁殖。() 细菌的异常形态是细菌的固有特征。（） 真核微生物比原核微生物更能在高温下生长。（） 芽孢是芽孢细菌的繁殖器官。（） 光合细菌和蓝细菌都是产氧的光能营养型微生物。() 用来固化细菌培养基的多糖是琼脂。() 微生物生长的衰亡期，细胞死亡速率超过细胞分裂速率。() 碱基腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶存在于RNA或DNA，但只RNA中有胸腺嘧啶。() 真菌最适的生长条件是有点碱性的。() 凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子。() 三、选择题 1．大部分微生物___。
(a）是原生动物(b）帮助改善生活质量 (c)生活在海洋的底层(d)发现于外层空间 2.噬菌体是一种感染____的病毒。 （a）酵母菌（b）霉菌 （c）放线菌和细菌（d）原生动物 3.G＋菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是___ （a）支原体(b)L型细菌(c)原生质体(d)原生质球 4.下列微生物中，______属于革兰氏阴性菌 （a）大肠杆菌(b)金黄葡萄球菌(c)巨大芽孢杆菌(d).肺炎双球菌5.下列能产游动孢子的霉菌是____。 （a）腐霉(b)毛霉 (c)赤霉(d)青霉 6.硝酸细菌依靠____方式产能。 （a）发酵作用(b)有氧呼吸(c)无氧呼吸(d)光合磷酸化 7.酵母菌适宜的生长pH值为____ (a)5.0-6.0(b)3.0-4.0(c)8.0-9.0(d)7.0-7.5 8.进人三羧酸循环进一步代谢的化学底物是____。 (a)乙醇(b)丙酮酸（c）乙酰CoA(d)三磷酸腺苷 9.称为微好氧菌的那些细菌能___生长。
实验一光学显微镜的使用及微生物形态的观察、 大小的测定和计数 一、实验目的 １、掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养 2、观察细菌、真菌、原生动物的标本装片,学会绘制生物图 3、掌握使用测微尺测量微生物大小的方法 ４、了解血球计数板的结构，掌握使用和计算方法 二、实验器材 １、显微镜 ２、微生物标本装片 ３、目、物镜测微尺 ４、血球计数板 ５、酵母菌液或霉菌孢子液 6、载波片、盖波片、烧杯、滴管、擦镜纸、香柏油、二甲苯等 三、显微镜的构造、原理及使用方法 1、构造 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微镜,由机械装置和光学系统两大部分组成。机械装置包括镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、调节器;光学系统包括目镜、物镜、聚光器、电光源。显微镜的总放大倍数为目镜和物镜的放大倍数的乘积。 ２、操作 在目镜保持不变的情况下,使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。一般情况下,特别是初学者，进行显微观察时应遵循从低倍镜到高倍镜再到油镜的观察程序,因为低倍数物镜视野相对大,易发现目标及确定检查的位置。 四、微生物大小的测量原理和方法 微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和物镜测微尺。 1、目镜测微尺(图1-1）是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍｍ长度刻成5０等分，或把1０mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上（此处正好与物镜放大的中 --
-- 间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用物镜测微尺校正，以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。 2、物镜测微尺(图１-２）是中央部分刻有精确等分线的载 玻片,一般将lmm 等分为100格,每格长ｌ０μm （即0.0ｌmm), 是专门用来校正目镜测微尺的。校正时，将物镜测微尺放在载 物台上,由于物镜测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经 过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即物镜测微尺随着显 微镜总放大倍数的放大而放大，因此从物镜测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用物镜测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去物镜测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。 3、目镜测微尺的校正 把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把物镜测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清物镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与物镜测微尺的刻度平行，移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“０”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度（图1－３)，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。因为物镜测微尺的刻度每格长l0μｍ，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。 例如目镜测微尺５小格正好与物镜测微尺5小格重叠，已知物镜测微尺每小格为ｌ0μm ，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/５=1０μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。 由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。 4、细胞大小的测定 移去物镜测微尺,换上待测菌体的装片，先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量菌体的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位数）。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值,即等于该菌的长和宽。 结果计算： 长μm=平均格数×校正值 宽μｍ＝平均格数×校正值 大小表示: 宽μm ×长μｍ 五、微生物细胞数量的测定原理和方法 1、血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区(图1-4），计数区 图1-1 目镜测微尺 图1-2 物镜测微尺 图1-3 目、物镜测微尺的校正 图1-4 血球计数板
微生物学实验复习题 一、选择题 1、革兰氏染色得关键操作步骤就是: Ａ、结晶紫染色 B、碘液固定 C、酒精脱色 Ｄ、复染 2、放线菌印片染色得关键操作就是： A、印片时不能移动 B、染色 C、染色后不能吸干 D、A与C 3、高氏培养基用来培养： Ａ、细菌 B、真菌 C、放线菌 ４、肉汤培养基用来培养: A、酵母菌 B、霉菌 Ｃ、细菌 ５、无氮培养基用来培养: Ａ、自生固氮菌。 B、硅酸盐细菌 Ｃ、根瘤菌 D、A、Ｂ均可培养 E、Ａ、B、C 均可培养 ６、在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力，通常在镜头与盖玻片之间滴加： A、二甲苯 B、水 C、香柏油 7、常用得消毒酒精浓度为： A、 7５％ Ｂ、 5０% C、 90％ 8、用甲醛进行空气熏蒸消毒得用量就是： A、 20ml/M3 B、 6ｍl/M3 C、１ml/M3 9、实验室培养基高压蒸汽灭菌得工艺条件就是： A、 1２１℃／30miｎ B、 115℃／３0mｉn C、130℃／3０min
1０、巴氏消毒得工艺条件就是： Ａ、６2-6３℃／30ｍiｎ Ｂ、71-72℃／15min C、Ａ、Ｂ、均可 1１、半固体培养基得主要用途就是: A、检查细菌得运动性 B、检查细菌得好氧性 C、 A、Ｂ、两项 １2、半固体培养基得琼脂加入量通常就是: A、 1% B、0、5％ C、0、1% 13、使用手提式灭菌锅灭菌得关键操作就是: A、排冷气彻底 Ｂ、保温时间适当 Ｃ、灭菌完后排气不能太快 D、A-C 1４、目镜头上得“K”字母表示: A、广视野目镜 B、惠更斯目镜 Ｃ、补偿目镜 1５、目镜头上得“P”字母表示: A、平场目镜 B、广视野目镜 C、平场补偿目镜 16、物镜头上得“PL”字母表示: A、正低相差物镜 B、正高相差物镜 C、负高相差物镜 17、物镜头上得“UVＦL”字母表示。 Ａ、无荧光物镜 B、照相物镜 Ｃ、相差物镜 18、镜头上标有“TC”字母得镜头就是: Ａ、相差调整望远镜 B、摄影目镜 C、相差目镜 １９、“ＰA”表示: A、马铃薯培养基 B、高氏培养基 C、肉汤培养基 20、无菌室空气灭菌常用方法就是： A、甲醛熏蒸 B、紫外灯照射
《微生物学教程》考试试卷 （B 卷） （本试卷共 3 页） 要求：开卷考试；答案写在答题纸上，标清楚题号；答案和试题全交。 一、解释名词（每个2分，本题满分20分） 1、菌落 2、病毒 3、生长因子 4、微生物典型生长曲线 5、灭菌 6、质粒 7、营养缺陷型 8、水体自净作用 9、微生物的种 10、培养基 二、填空（每个空0.5分，40个满分20分） 1、微生物与生物环境间的相互关系分为五种： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 2、单细胞微生物典型生长曲线由 （1） 、 （2） 、（3） 、（4）四个时期组成。 3、防止霉腐微生物引发食品腐败的常用措施有： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 4、微生物的五大共性包括： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 5、微生物根据对氧的需求可分为5种类型： （1） 、（2） 、（3） 、 （4） 、 （5） 。 6、葡萄糖经EMP 代途径10步反应产生的3种产物是： （1） 、 （2） 、 （3） 。 7、真菌（霉菌类）无性孢子有多种类型。比如（1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 。 8、列举对微生物学发展做出过巨大贡献的科学家名字： （1） 、 （2） 、 （3） 。 第1页 9、三域学说将整个生物划分为3个域，即 （1） 、 （2） 、 （3） 。
10、常用的消毒剂有： （1） 、 （2） 、 （3） 。 三、判断题（每小题1分，满分10分） 1、冷冻干燥保藏和液氮保藏是长期有效保藏各种微生物的 基本方法。 2、青霉素可以杀死正在旺盛生长繁殖的细菌细胞，但无法杀死正处于休止状态的营养缺陷型细胞。 3、黑曲霉、红曲霉、黄曲霉、根霉、毛霉，其中有些是单细胞微生物。 4、食品的水活度值越低，越不利于腐败（病原）微生物的生长，因此降低含水量有利于食品的保藏。 5、因为细菌是低等原核生物，所以，它没有有性繁殖，只有无性繁殖形式。 6、大肠杆菌F +细胞通过接合作用向受体细胞转移F 质粒，结果导致原供体细胞失去了F 质粒。 7、国家规定：引用水中的微生物数应低于100个细胞/mL, 大肠菌群数不能超过3个细胞/L 。 8、黄曲霉毒素是由黄曲霉菌产生的剧毒、致癌物质，它要在人或动物体经过代活化后才引起致癌作用。 9、地衣实际上是蓝细菌与真菌或藻类与真菌形成的共生体。 10、青霉菌发酵时，产青霉素的最佳温度与菌体生长最适温度完全一致。 四、简答题（4道题，每小题10分，满分40分 ） 1、简述常用化学消毒剂的种类及其杀菌机制。 2、简述艾姆氏试验的原理和实践意义。 3、比较同型乳酸发酵与异型乳酸发酵在产物、产能和菌种上的差异。 4、常用的高温灭菌方法及其适用对象。 第2页
兽医微生物学实验复习题 1、兽医微生物实验室注意事项是什么？ 答：①防止病原微生物的散布；②防火；③节约；④标记；⑤记录；⑥安全；⑦清洁与秩序 2、观察细菌常用什么显微镜？它主要有哪几部分组成？ 答：光学显微镜光学部分:目镜、物镜、反光镜、聚光器；机械部分：镜座、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器。 3、油镜用毕后，为什么必须把油镜擦净？ 答：油镜的原理是通过香柏油的光路折射能更加清晰的观察微生物，油具有粘附性，且不溶于水，所以，在观察完后，香柏油会粘附在镜头上，不擦去的话，风干后镜头就变得模糊不清，甚至报废了，又因为是油所以简单的用擦镜纸擦拭是擦不干净的，二甲苯属于有机溶剂， 4、用过多的二甲苯或酒精乙醚混合液擦拭镜油有什么危害？ 答：过多的二甲苯或酒精乙醚混合液容易脱胶，使油镜脱落。 5、使用油镜时用什么作为物镜与玻片间的介质，有几种？ 答：可用与玻璃的折光系数相近的油类，有7种，如柏木油。 6、观察细菌时显微镜的操作步骤是什么？主意事项是什么？ 答：将显微镜物镜镜头转为油镜对好光线（开高集光器，开大光圈，调好反光镜）使亮度最强在载物台上放上载玻片，并在玻片上放一滴香柏油将标本移至载物台正中转动粗准焦螺旋，使油镜浸入油滴中左眼由目镜注视镜内，慢慢地转动细准焦螺旋，直至物像清晰为止 注意事项：1.调节粗准焦螺旋的时候要慢 2.观察完后要用二甲苯擦拭油镜 7、微生物绘图要求有哪些？ 答：①绘出一个视野，圆形。 ②细菌大小比例合理，必须标明名称。 ③标名显微镜的放大倍数，标明菌名。 ④绘图一律用铅笔。 8、制备细菌染色标本片时应注意哪些事项？ 答：①干燥好的抹片固定时，使抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热，以不烫手为度进行固定。 9、涂片固定的意义何在？固定时应注意什么问题？有哪些固定方法？答：意义：涂片固定可将涂片上的细菌杀死，使之固定而不会到处漂移，并且死菌比活菌更容易着色，为后面染色做准备。 注意：若用火焰固定时，抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热。固定方法：火焰固定和化学固定。 10、细菌染色的原理是什么？ 答：细菌的等电点较低，约在pH 2～5之间，故在中性、碱性或弱碱性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷，易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合，使细菌被染成紫色或红色。 11、试述细菌革兰氏染色法的步骤及结果。革兰氏染色的原理是什么？ 答：原理：G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈蓝紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
一、名词解释 1、菌株(strain)： 2、饰变(modification)： 3、原生型(prototroph)： 4、深层液体培养： 5、类毒素(toxoid)： 6、特异性免疫(specific immuneity)： 7、芽孢(spore)： 8、鞭毛(flagella)： 9、抗生素(antibiotics)： 10、支原体(mycoplasma)： 11、菌核(scleraotium)： 12、噬菌斑(plaque)： 13、温和噬菌体(temperate phage)： 14、局限转导(specialized transduction)： 15、选择性培养基(seclected media)： 16、反硝化作用(denitrification)： 17、石炭酸系数(phenol coefficient)： 18、富营养化(eutrophication)： 19、条件致死突变型(conditional lethal mutant)： 20、细菌素(bacteriocin)： 21、初次应答： 22、再次应答： 二、单项选择题 1、下列细菌中，属于 Archaea一类的为( ) A Klebsiella pneumoniae B Neurospora crassa C Staphylococus aureus D Methanobacterium 2、具有周生鞭毛的细菌如E.coli，在下列哪种情况下呈直线运动一段时间( ) A 朝着营养物质浓度高的地方，顺时针转动。 B 朝着营养物质浓度高的地方，逆时针转动。 C 朝着有毒物质方向，顺时针转动。 D 朝着有毒物质方向，逆时针转动。 3、某细菌悬液经100倍稀释后，在血球计数板上，计得平均每小格含菌数为7.5个，则每毫升原菌悬液的含菌数为( ) A 3.75×107个 B 2.35×107个 C 3.0×109个 D 3.2×109个 4、可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基为( ) A 完全培养基 B 基本培养基 C 补充培养基 D鉴别培养基 5、Saccharomyces cerevisiae最适生长pH值为( ) A 4.0-5.0 B 5.0-6.0 C 6.0-7.0 D 7.0-7.4 6、专性厌氧微生物是由于其细胞内缺少（），从而不能解除分子氧对细胞的毒害。 A BOD B COD C NO D D SOD 7、下列微生物中，哪一种能产生伴孢晶体( ) A Bacillus subitis B Bacillus magaterium C Bacillus thuringiensis D Clostridium botulinum 8、下列微生物中，具有周生鞭毛的是( ) A Vibrio cholerae B Bacillus subitis C Staphylococcus aureus D Spirillum rubrum 9、革兰氏染色的关键操作步骤是( ) A 初染 B 媒染 C 脱色 D 复染 10、Zymomonas mobiles 的同型酒精发酵通过下列哪个途径进行( ) A EMP途径 B ED途径 C HMP途径 D Sticland反应
环境微生物学试题答题要点(精华版) 一、名词解释（每题1.5分，计30分） 噬菌体：是侵染细菌、放线菌、霉菌等微生物的病毒。 菌落：菌落是指在固体平板培养基上，微生物的单细胞经过生长繁殖，形成肉眼能看到的，具有一定形态特征的微生物群体。PHB：是细菌细胞中含有的叫聚羟基丁酸盐的贮藏物质。 初生菌丝体：担子菌的孢子直接萌发而成的菌丝体，一般不会繁殖成为子实体。 分生孢子：分生孢子是由菌丝分枝顶端细胞或者由菌丝分化成的分生孢子梗的顶端细胞分割缢缩而成的单个或者成簇的孢子。间歇灭菌法：是利用常压蒸气反复灭菌的方法。 生物氧化：物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应逐步分解并释放能量的过程。 化学杀菌剂：能够抑制和杀死微生物的化学物质。 共生：两个微生物在一起时形成特殊的结构和功能，两者高度的协调和彼此得利。 启动子：是一个“开始”的信号，它含有与RNA聚合酶结合并启动转录的保守序列。 操纵子：负责合成特殊蛋白质的基因簇。 生态系统：是生物群落与其生存环境组成的整体系统。 活性污泥：污水处理过程中的具有活性的微生物絮凝体。 联合固氮：是指某些生活在植物根的表面至根皮层细胞间而不进入植物根细胞的微生物进行固氮作用的现象。 反硝化细菌：反硝化作用是指微生物还原硝酸产生气态氮的过程。 活性污泥法：以活性污泥为主体的污水生物处理技术。 生物反应器：是通过酶、微生物、动植物细胞等的固定化，进行物质转化的反应器。 根际微生物：生长在植物根系直接作用土壤范围内的微生物。 纯培养：是指在实验室条件下，从一个微生物细胞繁殖得到的后代。 细胞壁：细胞壁是包在细菌细胞表面、内侧紧贴细胞质膜的较为坚韧并略具弹性的结构。 二、是非题（每题1分，计10分） ?溶源性细菌在一定条件诱发下,可变为烈性噬菌体裂解寄主细胞。( + ) ?细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。自然界中杆状最常见，球状次之，螺旋菌最少。( - ) ?某些藻类如团藻属存在群体形态。( + ) ?光合磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生ATP。( - ) ?在固体培养基中，琼脂的浓度一般为0.5—1.0%。( - ) ?称为嗜碱菌的那些细菌是能在pH 7.0以上的环境中生长的细菌。( + ) ?在真核微生物细胞的染色体中，DNA是与组蛋白结合形成染色体的。( + ) ?EMP、ED等糖酵解途径的共同特点是将葡萄糖降解到丙酮酸。( + ) ?精确定量某些成分而配制的培养基是所有成分的性质和数量已知的培养基，称为天然培养基。( - ) ?在实验室中细菌不能形成菌落。( - ) 三、选择题（每题1分，计20分） 1. 适合所有微生物的特殊特征是__c__。 (a)它们是多细胞的（b)细胞有明显的核 (c)只有用显微镜才能观察到（d）可进行光合作用 2. 病毒缺乏__b___。 (a)增值能力(b)独立代谢的酶体系 (c)核酸 (d)蛋白质 3. G－菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是___d__。 (a) 支原体(b) L型细菌(c) 原生质体(d) 原生质球 4. 酵母菌的细胞壁主要含___d__。 (a) 肽聚糖和甘露聚糖 (b) 葡聚糖和脂多糖 (c) 几丁质和纤维素 (d)葡聚糖和甘露聚糖 5. 下列能产子囊孢子的霉菌是__c__。 (a) 毛霉和根霉 (b) 青霉和曲霉
名词解释： 微生物、微生物学、纯培养、纯培养物无菌技术、灭菌、消毒、过滤富集培养 简答题： 1、微生物的特点有那些？ 2、Mullis的贡献对我们有什么启发？ 3、列文虎克对微生物学有什么贡献？4 、巴士德和柯赫对微生物学的发展有什么贡献？5、柯赫证病律的具体内容是什么？6 、拂来明对微生物学的贡献是什么？7 、我国著名的微生物学家有那些？分别作出了什么贡献？8、干热灭菌和高压蒸汽灭菌有什么差别？9、举出几种常用的消毒药品和方法？10、纯培养有几种方法？11、为什么活菌记数和直接记数有很大的差别？12、按照功能和营养成分培养基有几种类别？13、菌种保藏的基本原理是什么？1 4、保藏微生物的基本方法有那些？1 5、已发现的微生物的形态有几种？1 6、芽孢杆菌和芽孢梭菌有何异同？1 7、举例说明非芽孢杆菌的特点？1 8、古细菌有那三大类？1 9、根霉、曲霉和青霉的形态特征如何？20、吃什么食用菌可以预防感冒？21、吃什么食用菌可以增加智力？22、原核微生物和原核微生物的主要类群有那些？23、球菌的基本形态有几种？24、细菌的基本结构组成有那些？25、细菌的特殊结构有那些？26、细胞壁及其功能是什么？27、肽聚糖的基本组成是什么？28、G+ 和G-细胞壁的结构有和异同？29、Gram染色的基本过程如何？30、细菌为什么可以分为G+ 和G-两种？31、无壁细胞有那几种？32、聚-B-羟丁酸有什么功能？33、气泡有什么功能？34、什么是糖被、根据物理特征不同可以分为几类？35、糖被的化学组成和功能是什么？36、鞭毛有何功能和种类？37、鞭毛的一般结构和基体的组成如何？38、什么是芽孢、有何特点？39、芽孢耐热的分子机制如何？40、为什么放线菌介于真菌和细菌之间而更接近于细菌？41、放线菌的繁殖方式有几种？42、在什么条件下使用火焰灭菌？43、稀释倒平板法和涂平板法有什么差别？
微生物学实验试题 一、选择题 1.革兰氏染色的关键操作步骤是： A.结晶紫染色 B.碘液固定 C.酒精脱色 D.复染 答:(C) 2.放线菌印片染色的关键操作是： A.印片时不能移动 B.染色 C.染色后不能吸干 D.A和C 答:(D) 3.高氏培养基用来培养： A.细菌 B.真菌 C.放线菌 答:(C) 111821.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌 B.霉菌 C.细菌 答:(C) 111822.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌 C.根瘤菌 D.A、B均可培养 E.A、B、C均可培养 答:(D) 111823.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯 B.水 C.香柏油 答:(C) 111824.常用的消毒酒精浓度为: A.75% B.50% C.90% 答:(A) 111825.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A.20ml/M3 B.6ml/M3
111826.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A.121℃/30min B.115℃/30min C.130℃/30min 答:(A) 111827.巴氏消毒的工艺条件是: A.62-63℃/30min B.71-72℃/15min C.A.B.均可 答:(C) 111828.半固体培养基的主要用途是: A.检查细菌的运动性 B.检查细菌的好氧性 C.A.B.两项 答：(C) 111829.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A.1% B.0.5% C.0.1% 答:(B)。 111830.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A.排冷气彻底 B.保温时间适当 C.灭菌完后排气不能太快 D.A-C 答:(A)。 111831.目镜头上的“K”字母表示: A.广视野目镜 B.惠更斯目镜 C.补偿目镜 答:() 111832.目镜头上的“P”字母表示: A.平场目镜 B.广视野目镜 C.平场补偿目镜 答:() 111833.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 答:() 111834.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A.无荧光物镜 B.照相物镜
医学微生物学考试试卷（A） (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（A卷/B卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、Ａ型选择题 （由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共90个选择题） 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构，无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁： A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合，干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合，干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述，错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生（都是阳性） B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900～1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后，菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色
2013-2014（2）《食品微生物学与实验》思考题 期末考试题型： 1、单选题（四选一） 2、多选题（两个以上） 3、填空题 4、简述题 5、绘图说明题 6、试述题或分析题 第0章绪论 1. 概念： 细胞型微生物、非细胞型微生物、单细胞微生物、多细胞微生物、原核微生物、真核微生物、种、菌株、变种、型、模式种、柯赫原则。 细胞型微生物：具有典型的细胞结构，即细胞含有真正的细胞核，有核膜、核仁和染色体。 非细胞型微生物：没有典型的细胞结构、不具备代必须的酶系统、只能在各种活的细胞中生长繁殖，病毒就属此类。 单细胞微生物：仅由一个细胞构成的生物。 多细胞微生物：由许多形态和功能发生了分化的细胞群构成的生物。 原核微生物：具有细胞结构的微生物中，原核微生物是指一类不具有细胞核膜，只有核区的裸露DNA的原始单细胞生物，核区只有一条双螺旋结构的脱氧核糖核酸构成的染色体。 真核微生物：在微生物中，大多数种群具有真核生物(Eukaryotes)的细胞结构，即细胞核具有核膜、能进行有丝分裂、细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞器这些微生物被称为真核微生物。 种：是分类单元的最基本单位，是显示高度相似性、亲缘关系极其相近、与其他种有明显差异的一群菌株的总称。 菌株：它是指来源不同的同一个种的纯培养物。 变种：从自然界中分离得到的某一微生物的纯种，必须与文献上记载的典型种的特征完全一致，才能鉴定为同一个种。实际上有时分离到纯种，除了大多数指标符合典型种的特征外，还有某一个显然不同的特征，而此特征又是稳定的。就把这种微生物称为典型种的“变种”。 型：同一细菌种显示很小生物化学与生物学差异的菌株，常用于细菌中紧密相关菌株的区分。型是细菌亚种的细分。 模式种：微生物学中种带有抽象的种群概念，但在具体分类时常用一个被指定的、能代表这个种群的模式菌株或典型菌株作为该种的模式种来定种。它往往是定为一个新种的第一个种或第一批种之一，也可以是在某一已知数任意指定的种。 柯赫原则：对病原菌的研究证明了炭疽病是由炭疽菌引起的，结核病是由结核菌引起的，创立了确定某一微生物是否为相应疾病病原的基本原则——柯赫法则 2. 什么是微生物，它包括几大类群？其特点是什么？
江南大学微生物实验部分试题库及标准答案 一、名词解释题 1.电子显微镜：电子显微镜是利用电子波波长短,分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。 2.普通光学显微镜：用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。 3.合成培养基：由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。 4.人工培养基：人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。 5.天然培养基：由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯,麸皮等配制而成的培养基。 6.半合成培养基：由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。 7.革兰氏染色法：革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法,细菌首先用结晶紫染色,再用碘液固定,然后用95%的酒精脱色,最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后,又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌；凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色,也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。 8.简单染色：用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。 9.稀释平板计数法：将一定量的样品经十倍稀释后,用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后,计数出某一稀释度的菌落数后再乘以稀释倍数,即为样品中的含菌数。10.显微直接计：利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后,再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。 二、选择题 01.革兰氏染色的关键操作步骤是: A.结晶紫染色。 B.碘液固定。 C.酒精脱色。 D.复染。答:(C) 02.放线菌印片染色的关键操作是: A.印片时不能移动。 B.染色。 C.染色后不能吸干。 D.A-C。答:(A)。 03.高氏培养基用来培养: A.细菌。 B.霉菌。 C.放线菌。D酵母菌答:(C)。 04.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌。 B.霉菌。 C.细菌。D放线菌答:(C)。 05.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌。 C.根瘤菌。 D.A,B均可培养。答:(D)。 06.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯。 B.水。 C.香柏油。D甲苯答:(C)。 07.常用的消毒酒精浓度为: A.75%。 B.50%。 C.90%。D70% 答:(A)。
临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案：E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案：E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案：B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞
答案：D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案：E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案：E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案：D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞，下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案：A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素，其中最主要的是
A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案：A 10、与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案：D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作： A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案：B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中，正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案：C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体
实验一显微镜的使用及微生物大小测定的方法 二、基本原理 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，它们由机械装置和光学系统两大部分组成。物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。其中油镜的放大倍数最大，对微生物学最为重要。 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊的测量工具—测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。其中镜台测微尺并不直接用来测量细胞大小，而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度。目镜测微尺每小格所代表的实际长度因显微镜的不同放大倍数而异，因此用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微格数，即可计算出细胞的实际大小. 两重合线间镜台测微尺格数×10 目镜测微尺每格长度= 两重合线间目镜测微尺格数 思考题 1、用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？ 答（1）应先用摖镜纸将镜头摖干净，以防止实验的污染。使用油镜时，应先用低倍镜再用高倍镜，然后再是油镜，用完之后也要用摖镜纸将油镜摖掉。（2）滴加香柏油 （3）作用是增加折射率，即增加了显微镜的分辨率，油的折射率和分辨率成反比，同时与波长成正比。 2、影响显微镜分辨率的因素有哪些？ 答：显微镜的分辨率指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力，最小分辨距离越小，分辨率越高，最小可分辨率距离=λ／2NA且NA=n.sin,所以，分辨率由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定，当然还有介质的折射率。 3、为什么要换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正？ 答：不同放大倍数，目镜测微尺每小隔所代表实际长度不一样，必须用镜台测微尺进行重新校正，这样目镜测微尺测量的长度才是目前状态的准备长度。 4、在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数的物镜来测定同一微生物的大小时，其测定的结果是否相同？为什么？ 答：相同的，不同的放大倍数，目镜测微尺每小格所代表实际长度不一样，必须重新校正，才能得到目前状态的准确长度。 实验二显微镜直接计数法 二、基本原理 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上（又称计菌器），其优点是直观、快速、操作简单。目前国内外常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器及Hawksley 计菌器等。利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。此法是将单细胞微生物的悬液或孢子悬液，注入血球计数板载玻片与盖玻片
填空题 1.动植物的研究能以体为单位进行，而对微生物的研究一般用体 2.在微生物学中，在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体称为培养物、其中只有培养物能较好地被研究、利用和重复结果。 3.一般情况下，培养微生物的器具，在使用前必须先行，使容器中不含。 4.用培养平板进行微生物纯培养分离的方法包括、和。 5、微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行、的重要依据。 6、微生物保藏的目标就是要使所保藏菌株在一段时间不、不和不 7、一般说来，采用冷冻法时，保藏温度越，保藏效果越。 8、、和是影响显微镜观察效果的3个重要因索。 9.光学显微镜能达到的最大有效放大倍数是，这时一般使用 x的目镜，和 x的物镜，并应在物镜镜头和玻片之间加。 10、采用明视野显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时，光的和都没 有明显的变化，因此，其形态和内部结构往往难以分辨。 11.在的照射下，发荧光的物体会在黑暗的背景下表现为光亮的有色物体，这就是荧光显微技术的原理。 12.透射电子显微镜用电子作为，因此其分辨率较光学显微镜有很大提高，但镜筒必须是环境，形成的影像也只能通过或进行观察、记录。 13.在显微镜下不同细菌的形态可以说是千差万别，丰富多彩，但就单个有机体而言，其基本形态可分为、与 3种。 14.霉菌菌体均由分支或不分支的菌丝构成。许多菌丝交织在一起，称为。在固体培养基上，部分菌丝伸入培养基内吸收养料，称为；另一部分则向空中生长，称为。有的气生菌丝发育到一定阶段，分化成。 15. 是一类缺少真正细胞壁，细胞通常无色，具有运动能力，并进行吞噬营养的单细胞真核生物。它们个体微小，大多数都需要显微镜才能看见。 选择题（4个答案选1) 1.培养微生物的常用器具中，（）是专为培养微生物设计的。 (1)平皿(2)试管(3)烧瓶(4)烧杯 2.( )可用来分离培养出由科学家设计的特定环境中能生长的微生物，尽管我们并不知道什么微生物能在这种特定的环境中生长。 (1)选择平板(2)富集培养(3)稀释涂布(4)单细胞显微分离 3.下面哪一项不属于稀释倒平板法的缺点?( ) (1)菌落有时分布不够均匀 (2)热敏感菌易被烫死 (3)严格好氧菌因被固定在培养基中生长受到影响 (4)环境温度低时不易操作 4.下面哪一种方法一般不被用作传代保藏?( ） (1)琼脂斜面(2)半固体琼脂柱(3)培养平板(4)摇瓶发酵 5.冷冻真空干燥法可以长期保藏微生物的原因是微生物处于( )的环境，代谢水平大大降低。 (1)干燥、缺氧、寡营养(2)低温、干燥、缺氧 (3)低温、缺氧、寡营养(4)低温、干燥、寡营养 6.对光学显微镜观察效果影响最大的是( )。
2020届微生物学期末考试经典题目 题库整理 判断题 1.内毒素是G-菌的外壁物质。( √ ) 2.抗生素的抗微生物效果一般低于消毒剂和防腐剂。( × ) 3.血球计数板可以检测酵母培养液中所有酵母细胞个数，而平板倾注法只能测定活细胞个 数。( √ ) 4.在细菌生长曲线中，稳定期的细胞数目处于稳定，是因为此期细胞不再增殖。( × ) 5.做固体培养基常加2%琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是1%。( × ) 6.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的 稀释度进行计数。( × ) 7.细菌中紫外线引起的突变是由于相邻鸟嘌呤分子彼此结合而形成二聚体的突变。( × ) 8.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生 物。( × ) 9.自发突变是指那些实验室中由于加入诱变剂所发生的突变。( × ) 10.内生菌根的真菌可进入根的皮层间隙和细胞内部，在根外较少，不形成菌套。( √ ) 11.英国科学家罗伯特?虎克在观察标本中观察到了一段线状的细菌。( × ) 12.所有的微生物都能利用氨态氮作为氮源。( × ) 13.发酵是微生物以无机物作为最终的电子受体的生物氧化过程。( × ) 14.蓝细菌是好氧细菌，通过糖酵解过程，利用光能产生它们的糖类。( × ) 15.固氮酶只有在严格厌氧条件下才有活性，所以固氮菌均为厌氧菌。( × ) 16.Hfr菌株与F-菌株接合后会使F-菌株转性变为F+菌株。( × ) 17.Parastism是指一种微生物生活在另一生物体表面或体内并对后者产生危害作用的现象。 ( × ) 18.大肠杆菌存在与否常作为判断水源是否被粪便污染的一个重要指标。在鉴定该菌时V.P (V oges Proskauer)实验和M.R (Methyl Red)实验结果应该是，前者为阳性，后者为阴性。 ( × ) 19.在培养根瘤菌时常加1/200000的结晶紫抑制G+细菌的生长。( √ ) 20.所有的原核微生物都具有鞭毛。( × ) 21.真菌中除环状质粒外还有线状质粒存在。( √ ) 22.在没有高压蒸汽灭菌设备情况下，不可能进行培养基质的彻底灭菌。( × ) 23.烟草花叶病毒的2130个壳粒反向缠绕成杆状病毒粒子。( × ) 24.促进扩散是微生物吸收营养物质的主要机制，通过特异性载体蛋白可将营养物质进行逆 浓度梯度运行。( × )