蜂胶产品中总黄酮含量到底多少正常
中国蜂产品协会时间：2010-04-26新闻来源：北京天恩生物工程高新技术研究所吕泽田
经常有消费者和企业询问,蜂胶产品中的总黄酮含量到底多少才正常有的蜂胶产品的总黄酮含量高达8%、9%,甚至10%以上是不是事实是不是总黄酮的含量越多越好对这些疑问和质疑,笔者根据在制定蜂胶国家标准过程中获得的有关数据和所收集到的相关资料,谈谈看法。
蜂胶产品中总黄酮含量的多少取决于蜂胶原料总黄酮的含量。一般来说，蜂胶原料总黄酮含量比较高，或蜂胶含量比较高的产品,其总黄酮的含量也相应比较高。由于不同产地，不同树种,不同季节的蜂胶原料中总黄酮含量是不平均的;又因蜂胶原料的差异性,又造成蜂胶提取物中总黄酮含量也是不平均的.所以产品中蜂胶含量的多少与总黄酮的多少不是成正比的;而且蜂胶中总黄酮的含量是有一定范围的,超出这个范围显然是不正常的。
先说蜂胶原料(毛胶).中国农业科学院蜜蜂研究所（1987－1989）对不同地区，不同季节采集的120个蜂胶样品的分析结果，蜂胶原料中总黄酮含量为～％, 含量高低相差2倍多。
中国农业科学院蜜蜂研究所骆尚骅研究员等对30份蜂胶样品进行检测，总黄酮含量为6～％, 含量高低相差倍多,其中总黄酮含量小于20％的占样品总数％。
北京天恩生物工程高新技术研究所先后对直接从蜂箱木制采胶栅框刮取的蜂胶原料15样份进行检测，总黄酮平均值为％。
2007年制定蜂胶国标时,采用保健食品中总黄酮的测定方法测得97份样品，总黄酮含量5～％,含量高低相差将近倍。其中,总黄酮含量小于15％的有39个样份，占总样份的％；总黄酮含量8～15％的有个48个样份，占总样份的％；总黄酮含量小于8％的有个10个样份，占总样份的％。
从以上检测结果可以看出蜂胶原料中总黄酮含量的明显差异性。
再说蜂胶乙醇提取物.蜂胶原料不能直接生产产品.那么作为产品原料的蜂胶乙醇提取物中的总黄酮含量又如何呢
北京天恩生物工程高新技术研究所检测不同产地，不同树种的蜂胶乙醇提取物13样份，其总黄酮含量为～％。其中含量13～14％的样品3个，占总样数的％；14～17％的样品9个，占总样数的％；17％以上的样品1个，占总样数的％。
江西汪氏蜜蜂园检测4个蜂胶乙醇提取物样品，总黄酮含量范围为～％，其中，含量～％的样品3个含量％的样品仅1个。
浙江大学动物科学学院和杭州天厨蜜源保健品有限公司测定不同厂家的27
个蜂胶乙醇提取物样品，总黄酮含量范围为～％。
从以上44个样品的检测结果看，蜂胶乙醇提取物总黄酮含量14～20%的占40%,含量21～24%的占%,含量≥25%的仅占%.这就不难看出, 蜂胶乙醇提取物总黄酮含量是有一定范围的,含量大于25%的是少数,绝大多数小于24％。
那么蜂胶产品中总黄酮含量到底多少才正常呢以市场销量最大的蜂胶软胶囊为例,一般蜂胶含量在30％左右,按使用以上总黄酮含量不同的蜂胶乙醇提取物计算,约40%的产品总黄酮含量在～6％左右, 约45%的产品总黄酮含量在～％左右,超过%是极少数.具体产品可根据不同剂型,蜂胶乙醇提取物含量的不同,以此类推其总黄酮含量。
因为厂家不同，产品不同，各有各的企业标准，判断蜂胶产品的总黄酮含量是否合格，所依据的就是其备案的企业标准和检验报告是否一致。但是,值得注意的是,某些厂家在其产品总黄酮含量上大做文章,确有一些蜂胶软胶囊总黄酮含量高达8%、9%,甚至10%以上。
据了解,出现这种总黄酮含量异常高的情况,往往不是因为所选用的都是总黄酮含量很高的蜂胶乙醇提取物.如果蜂胶软胶囊总黄酮含量高达8%、9%,甚至10%以上,那么所使用的蜂胶乙醇提取物的总黄酮含量应该为%到%以上..总黄酮含量这么高的蜂胶乙醇提取物不是没有,而是数量有限. 总黄酮含量大于25%的仅占蜂胶乙醇提取物总量的15%左右,如需要数量较大,很难有足够保证.因此, 要使总黄酮含量稳定的保持在8%、9%,甚至10%以上是难以做到的.为什么有些蜂胶软胶囊的总黄酮含量异常高呢据从知情者处了解,大致有以下情况:
1.虚假宣传.产品的总黄酮的实际含量并不高,没有检测数据支持,人为的虚假拔高。
2.移花接木.利用消费者不了解蜂胶原料与产品的关系,用蜂胶原料总黄酮的检测报告冒充是产品的检测报告。
3.偷梁换柱.有的蜂胶产品在申报保健食品时,所提供的样品因为数量不大,是精选总黄酮含量很高的蜂胶乙醇提取物或其他方法制成使其总黄酮含量非常高,而当批文到手,批量生产时,产品的总黄酮实际含量并没有批文中规定的含量高。
4.李代桃僵.为提高产品的总黄酮含量,有的人为在产品中添加人工提取的黄酮物质,藉此提高总黄酮含量,并不考虑所添加的黄酮类物质的种类、数量、比例是否恰当,以及是否符合量效关系。
可以说,无论是那一种情况,都是不正当的,以炒作总黄酮含量高作为产品卖点是不科学的,也是不可取的。
那么是不是蜂胶产品中总黄酮含量越高越好呢总黄酮含量仅是蜂胶产品的一个标志性成分指标，除总黄酮外，蜂胶还含有萜烯类和有机酸等多种功效成分，总黄酮含量高并不意味其它功效成分也同比例提高。蜂胶的保健作用是多种功效成分共同作用的结果.例如萜烯类化合物的很多作用与黄酮类化合物是重叠的,还有些作用是黄酮类化合物所不具备的,此外还有多种活性酶、多种有机酸、多种维
生素和矿物质等等,而并非只是黄酮类化合物在起作用.有的蜂胶,总黄酮含量虽然偏低,但萜烯类化合物等其他成分含量较高,那么这种蜂胶的综合作用不见得差;反之, 总黄酮含量虽然偏高,但萜烯类化合物等其他成分含量较低,那么这种蜂胶的综合作用也不见得强.因此,不能完全以总黄酮含量多少来评价蜂胶的功效高低。
蜂胶产品中可不可额外添加其它黄酮类化合物呢回答这个问题首先要弄清出于什么目的.如果是利用总黄酮含量高作为卖点,进行商业炒作是不可取的.如果是为了提高蜂胶产品某些方面的功效,弥补蜂胶中某些具有相应功效的黄酮类化合物的缺乏与不足,未必不可适当添加,但必须在医药学理论的指导下,有科学、合理的配方依据,经过安全性和相应功效的动物以及人体临床试验,得到国家食品药品监督管理局批准方可生产上市,而且按相关规定,必须在产品说明中标明所添加的黄酮类物质的具体名称。
如确需添加,应持慎重态度.黄酮类化合物是不可随意添加的. 在黄酮类物质中，目前已查明的就有4 000多种化学结构，其中具有生理功能的只是一部分。目前我国含黄酮类保健食品的标志性成分虽然测定的是总黄酮含量，但并不是有效成分的含量。不同化学结构, 具有生理功能的黄酮类物质中,在功效上也各有不同或存有差异.同时,还应弄清所要添加的黄酮类物质与蜂胶中已有的黄酮类物质的关系.况且，从量效关系上看，单次摄入总黄酮较多，人体并不能完全吸收,或不能完全发挥作用,而且过量摄入某些黄酮类化合物可能会产生毒副作用。
综上,可以看出,炒作总黄酮含量越高越好,并不能正确、客观的反映蜂胶产品的质量与功效.如果确如炒作者所说,不如直接服用黄酮类化合物算了,何必服用蜂胶呢.蜂胶之所以盛行,之所以奇妙,就在于它复杂的组织结构和对人体的综合作用,这不是黄酮类化合物所能独立担当的.单纯地宣传蜂胶产品总黄酮含量越高越好,是对蜂胶本质的割裂与曲解,这种炒作是不科学、不严肃,也是不符合实际的。
蜂胶产品中总黄酮含量到底多少正常? 经常有消费者和企业询问,蜂胶产品中的总黄酮含量到底多少才正常?有的蜂胶产品的总黄酮含量高达8%、9%,甚至10%以上是不是事实?是不是总黄酮的含量越多越好?对这些疑问和质疑,笔者根据在制定蜂胶国家标准过程中获得的有关数据和所收集到的相关资料,谈谈看法。 蜂胶产品中总黄酮含量的多少取决于蜂胶原料总黄酮的含量。一般来说，蜂胶原料总黄酮含量比较高，或蜂胶含量比较高的产品,其总黄酮的含量也相应比较高。由于不同产地，不同树种,不同季节的蜂胶原料中总黄酮含量是不平均的;又因蜂胶原料的差异性,又造成蜂胶提取物中总黄酮含量也是不平均的.所以产品中蜂胶含量的多少与总黄酮的多少不是成正比的;而且蜂胶中总黄酮的含量是有一定范围的,超出这个范围显然是不正常的。 先说蜂胶原料(毛胶).中国农业科学院蜜蜂研究所（1987－1989）对不同地区，不同季节采集的120个蜂胶样品的分析结果，蜂胶原料中总黄酮含量为8.2～17.2％, 含量高低相差2倍多。 2007年制定蜂胶国标时,采用保健食品中总黄酮的测定方法测得97份样品，总黄酮含量5～22.29％,含量高低相差将近4.5倍。其中,总黄酮含量小于15％的有39个样份，占总样份的40.21％；总黄酮含量8～15％的有个48个样份，占总样份的49.48％；总黄酮含量小于8％的有个10个样份，占总样份的10.31％。 从以上检测结果可以看出蜂胶原料中总黄酮含量的明显差异性。 再说蜂胶乙醇提取物.蜂胶原料不能直接生产产品.那么作为产品原料的蜂胶乙醇提取物中的总黄酮含量又如何呢? 那么蜂胶产品中总黄酮含量到底多少才正常呢?以市场销量最大的蜂胶软胶囊为例,一般蜂胶含量在30％左右,按使用以上总黄酮含量不同的蜂胶乙醇提取物计算,约40%的产品总黄酮含量在4.2～6％左右, 约45%的产品总黄酮含量在6.3～7.2％左右,超过7.2%是极少数.具体产品可根据不同剂型,蜂胶乙醇提取物含量的不同,以此类推其总黄酮含量。 因为厂家不同，产品不同，各有各的企业标准，判断蜂胶产品的总黄酮含量是否合格，所依据的就是其备案的企业标准和检验报告是否一致。但是,值得注意的是,某些厂家在其产品总
蜂胶对糖尿病作用的机理 胡福良玄红专等2008-12-03 摘要：蜂胶是一种具有广泛生物学活性的物质。糖尿病是常见的内分泌疾病，是由于体内胰岛素绝对或相对缺乏而引起的血中葡萄糖浓度升高症。本文通过对蜂胶抗菌抗病毒、调节免疫功能、抗氧化、影响体内酶系统等方面的研究，探讨蜂胶对糖尿病的作用机理。 关键词：蜂胶；糖尿病；作用机理 糖尿病是一种常见的内分泌疾病，是由于人体内胰岛素绝对或相对缺乏而引起的血中葡萄糖浓度升高，进而糖大量从尿中排出，并出现多饮、多尿、多食、消瘦、头晕、乏力等症状。进一步发展则引起全身各种严重的急、慢性并发症，威胁身体健康[1] 。糖尿病现已成为继心血管疾病、肿瘤之后危害人类健康的第三大杀手。据估计，目前全世界约有糖尿病患者 1.2 亿，中国糖尿病人约有3000 万。据WHO 最新数据预测，到2010 年中国糖尿病病人将达到目前的4 倍，亚洲及非洲的糖尿病人将是目前的 3 倍，全世界将会有 2.4 亿糖尿病患者，因此防治糖尿病已是一项迫不及待的任务[2] 。 蜂胶是西方蜜蜂采集植物树脂，并混入其唾液腺分泌物及蜂蜡、花粉等经咀嚼加工而成的一种粘稠物质。蜂胶的化学成分非常复杂，主要包括黄酮类化合物、芳香酸与芳香酸酯、醛与酮类化合物、脂肪酸与脂肪酸酯、萜烯类化合物、甾体化合物、氨基酸、糖类、烃类化合物、醇和酚类及其它化合物[3,4] 。蜂胶具有抗菌消炎、增强免疫、软化血管、净化血液、抗氧化、抗肿瘤、局部麻醉、促进组织再生等广泛的生物学作用[5-8] 。近年来有关蜂胶对糖尿病作用的实验研究和临床研究均有报道，蜂胶对糖尿病的作用机理主要表现在以下几个方面： 1 蜂胶抗炎抗病毒 研究发现，临床儿童易患疾病中流行性腮腺炎病毒、风疹病毒和柯萨奇病毒B1 和B6 与人类糖尿病有密切关系。柯萨奇病毒主要通过肠道传播引发胰腺炎，导致淋巴细胞浸润，胰岛β细胞坏死。蜂胶中含有多种抗病毒组分，主要是多酚黄酮类物质。Vrijsen 等研究表明，3-O- 甲基槲皮素具有抑制脊髓灰质炎病毒的作用[9] 。Kaul 等观察到槲皮素可降低脊髓灰质炎病毒、流感病毒和呼吸合胞病毒的感染和复制能力[10] 。Guillot 等研究香叶木苷时证实了其对糖尿病BB 小鼠胰腺炎症有提前防止和改善作用[11] 。水飞蓟素的抗胰腺炎作用也被多次证实[12] 。因此，蜂胶对由于病毒引起的糖尿病具有一定的抵抗作用。
黄酮类化合物习题 1.常见黄酮类化合物的结构类型可分为哪几类。 2. 试述黄酮类化合物的广义概念及分类依据。写出黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、异黄酮、查耳酮、橙酮的基本结构。 3. 试述黄酮（醇）、查耳酮难溶于水的原因。 4. 试述二氢黄酮、异黄酮、花色素水溶性比黄酮大的原因。 5. 如何检识药材中含有黄酮类化合物。 6. 为什么同一类型黄酮苷进行PC，以2%～6%醋酸溶液为展开剂，Rf 值大小依次为三糖苷＞双糖苷＞单糖苷＞苷元。 7. 为什么用碱溶酸沉法提取黄酮类化合物时应注意pH的调节。 8. 简述用碱溶酸沉法从槐米中提取芸香苷加石灰乳及硼砂的目的。 判断题 1.黄酮类化合物广泛分布于植物界，大部分以游离形式存在，一部分以苷的形式存在。 2. 黄酮分子中引入7,4′位羟基，促使电子位移和重排，使颜色加深。 3. 以BAW系统进行PC检识黄酮苷与其苷元，展层后苷元的Rf值大于苷。 4. 用2%～6%醋酸/水溶液为展开剂，对黄酮苷与其苷元进行PC，展层后苷元的Rf值大于苷。
提取与分离 中药黄芩中有下列一组化合物，经下述流程分离后，各出现在何部位？简述理由。 A. 黄芩苷（黄芩素-7-O-葡萄糖醛酸苷） B. 黄芩素（5,6，7-三OH黄酮） C. 汉黄芩苷（汉黄芩苷-7-O-葡萄糖醛酸苷） D. 汉黄芩素（5,7-二OH， 8-OCH3黄酮） E. 5，8，2-三OH，7-OCH3黄酮 F. 5,8，2-三OH，6,7-二-OCH3黄酮 G. 5,7，4′-三OH，6-OCH3二氢黄酮）H. 3,5，7,2′，6′-五OH二氢黄酮
结构鉴定题 从某中药中得一黄色结晶Ⅰ，分子式C21H21O11，HCl-Mg粉反应呈淡粉红色，FeCl3反应及α-萘酚-浓H2SO4反应均为阳性，氨性氯化锶反应阴性，二氢氧锆反应呈黄色，加枸橼酸后黄色不退.晶Ⅰ的光谱数据如下： UV λmax nm MeOH 267 348 NaOMe 275 326 398(强度不降) AlCl3274 301 352 AlCl3/HCl 276 303 352 NaOAc 275 305(sh) 372 NaOAc/H3BO3 266 300 353 IR:V KBr max cm-1 3401, 1655, 1606, 1504 1HNMR (DMSD-d6,TMS) δppm 3.2～3.9 (6H, m) 3.9～5.1 (4H, 加D2O后消失) 5.68（1H，d，J＝8.0） 6.12 (1H, d, J＝2.0) 6.42 (1H, d, J＝2.0) 6.86 (2H, d, J＝9.0) 8.08 (2H, d, J＝9.0) 请根据以上提供的信息填空，写出结晶Ⅰ的结构式，并指出 苷键的构型。
燕麦总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、样品处理及总黄酮的提取 1. 将样品籽粒分别称取 2.5 g置于小信封里，80℃烘干24 h。 2. 研成粉末，称取500±2 mg样品于10 mL离心管中，使样品位于试管底部（重复3次）。 3. 每管加4 mL 60％乙醇，放水浴锅60℃浸提2 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于10 mL容量瓶中。 4. 再向离心管中加4 mL的60％乙醇，放水浴锅60℃浸提1 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应的10 mL容量瓶中。60％乙醇定容至10 mL，待测。 （二）、标准曲线绘制 1. 精确量取浓度200 μg/mL芦丁标准溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL 分别置于10 mL容量瓶中。 2. 向容量瓶中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为纵坐标，以吸光度为横坐标，绘制标准曲线。 （三）、样品提取液总黄酮含量的测定 准确吸取总黄酮提取液2.0 mL于10 mL容量瓶中，按二的方法测定吸光度，
黄酮测定的研究进展 简要：黄酮类化合物（Flavonoids），又称生物黄酮（Bioflavon-oids）或植物黄酮，是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物，黄酮类化合物有着广泛的生物活性和多种药理活性，比如抗氧化、抗炎、抗诱变、抗肿瘤形成与生长等，特别是近年来关于黄酮在心血管、脑血管、肿瘤等方面的研究已经比较深入，此外黄酮类物质还有低毒性的特点，因此长期以来一直是天然药物和功能性食品研究开发的热点[1]。 关键词：黄铜，含量，测定方法，研究进展 前言：黄酮类物质是植物光合作用产生的一种天然有机物。植物界中分布广泛，主要分布于芸香料、唇形科、豆科、伞形科、银杏科、菊科等。根据化学方法定义黄酮类物质为含一个共同的苯基苯并二氢吡喃环结构，有一个或多个羟基取代基，包括其衍生物。在食物中，黄酮类物质一般以酯类、醚类或配糖类衍生物及混合物的形式存在，共有5000 多种化合物。对于哺乳动物，只能通过饮食获取黄酮物质，这些食物包括水果、蔬菜、谷物、坚果、茶及红酒。在日常膳食中，黄酮类物质通常表现为具有抗氧化性的羟基衍生物形态，显示出多种生物活性，对于一些疾病，例如癌症和心血管疾病，胃和十二指肠的病理性失调，以及病毒和细菌感染的预防和治疗。此外，类黄酮还被发现有广泛的药物特性，包括抗氧化性、抗过敏、抗病毒及预防糖尿病，对肝和胃的保护，抗病原体及抗瘤活性。除在医药工业上已广泛应用其生理活性外，目前也将黄酮类物质作为功能食品的添加剂[2] 。 （一）测定黄铜的几种方法 1 紫外分光光度法 紫外分光光度法具有重复性好、准确、简便、易掌握、不需要复杂的仪器设备, 加之所需试剂便宜易得, 因此该方法应用于测定植物中黄酮含量最为广泛[ 3]。 1.1 直接测定法 大多数黄酮类化合物分子中存在桂皮酰基和苯甲酰基组成的交叉共轭体系, 其MeOH 谱200 nm～400 nm的区域内存在两个主要的紫外吸收带, 峰带I(300 nm～400nm)和峰带Ⅱ( 220 nm～280 nm)[ 4]。 1.2 比色法 向供试样品中加入显色剂后测定吸光度以测定其含量, 这种方法称为比色法。黄酮类化合物分子中若具有3- 羟基、5- 羟基或邻二酚羟基, 易于与金属盐类如铝盐、锆盐、锶盐、镁盐等反应, 生成有色金属络合物。常用于黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al(NO3)3、A1Cl3等,这些络合物作用在光
蜂胶产品中总黄酮含量到底多少正常? 中国蜂产品协会时间：2010-04-26新闻来源：北京天恩生物工程高新技术研究所吕泽田 经常有消费者和企业询问,蜂胶产品中的总黄酮含量到底多少才正常?有的蜂胶产品的总黄酮含量高达8%、9%,甚至10%以上是不是事实?是不是总黄酮的含量越多越好?对这些疑问和质疑,笔者根据在制定蜂胶国家标准过程中获得的有关数据和所收集到的相关资料,谈谈看法。 蜂胶产品中总黄酮含量的多少取决于蜂胶原料总黄酮的含量。一般来说，蜂胶原料总黄酮含量比较高，或蜂胶含量比较高的产品,其总黄酮的含量也相应比较高。由于不同产地，不同树种,不同季节的蜂胶原料中总黄酮含量是不平均的;又因蜂胶原料的差异性,又造成蜂胶提取物中总黄酮含量也是不平均的.所以产品中蜂胶含量的多少与总黄酮的多少不是成正比的;而且蜂胶中总黄酮的含量是有一定范围的,超出这个范围显然是不正常的。 先说蜂胶原料(毛胶).中国农业科学院蜜蜂研究所（1987－1989）对不同地区，不同季节采集的120个蜂胶样品的分析结果，蜂胶原料中总黄酮含量为8.2～17.2％, 含量高低相差2倍多。 中国农业科学院蜜蜂研究所骆尚骅研究员等对30份蜂胶样品进行检测，总黄酮含量为6～20.59％, 含量高低相差3.4倍多,其中总黄酮含量小于20％的占样品总数96.7％。 北京天恩生物工程高新技术研究所先后对直接从蜂箱木制采胶栅框刮取的蜂胶原料15样份进行检测，总黄酮平均值为17.84％。 2007年制定蜂胶国标时,采用保健食品中总黄酮的测定方法测得97份样品，总黄酮含量5～22.29％,含量高低相差将近4.5倍。其中,总黄酮含量小于15％的有39个样份，占总样份的40.21％；总黄酮含量8～15％的有个48个样份，占总样份的49.48％；总黄酮含量小于8％的有个10个样份，占总样份的10.31％。 从以上检测结果可以看出蜂胶原料中总黄酮含量的明显差异性。 再说蜂胶乙醇提取物.蜂胶原料不能直接生产产品.那么作为产品原料的蜂胶乙醇提取物中的总黄酮含量又如何呢? 北京天恩生物工程高新技术研究所检测不同产地，不同树种的蜂胶乙醇提取物13样份，其总黄酮含量为13.22～17.43％。其中含量13～14％的样品3个，占总样数的23.07％；14～17％的样品9个，占总样数的69.23％；17％以上的样品1个，占总样数的7.69％。 江西汪氏蜜蜂园检测4个蜂胶乙醇提取物样品，总黄酮含量范围为21.29～31.40％，其中，含量21.29～25.03％的样品3个含量31.04％的样品仅
总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、标准曲线绘制 1. 芦丁标准品40mg置于称量瓶中80℃烘干至恒重，取烘干后的20mg芦丁标准品用水定容至100mL,得200μg/mL芦丁标准贮备液，精确量取上述浓度芦丁标准贮备溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL分别置于10 mL具塞试管中。 2. 向具塞试管中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。研究表明芦丁标准品含量在0～0.5mg 范围内与吸光度具有良好的线性关系。 （二）、样品处理及总黄酮的提取（以60%乙醇提取为例） 1. 将样品在80℃烘干24 h，粉碎后过80目筛置于干燥器中备用。 2. 称取500±2 mg样品于25 mL具塞三角瓶中，使样品位于三角瓶底部（重复3次）。 3. 每瓶加4 mL 60％乙醇，放超声波提取器提取2 h。提取液转至10 mL具塞离心管中。 4. 再向具塞三角瓶中加4 mL的60％乙醇，放超声波提取器提取1 h，提取液转至相应10 mL具塞离心管中，6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应
黄酮类化合物药理作用的分析 黄酮类化合物的基本结构构成为C-C-C方式，广泛存在于包括众多植物中，属于植物次级代谢产物。黄酮类化合物具有来源广、生物活性多、毒副作用小等特点，目前广泛应用于临床，古味伍绛木樨茶对其药理作用进行分析如下。 1 心血管系统作用 1.1 抗心律失常作用 动物实验表明，黄酮对心肌缺血再灌注损伤组织，可以有效地减少其心律失常发作次数，减轻发作频率，能对抗乌头碱、哇巴因和氯仿诱发的心律失常，其可能的机制为总黄酮可降低心室肌动作电位幅值（APA），延长动作电位时程（APD）。 1.2 抗动脉粥样硬化 动脉粥样硬化（AS）疾病进程的一个主要原因为，低密度脂蛋白（LDL）的氧化修饰，黄酮类化合物具有抑制LDL氧化作用，抗平滑肌增殖，清除自由基，从而有效地对抗动脉粥样硬化的损伤。 1.3 扩血管作用总黄酮具有血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）的作用，抑制血管内皮素（ET）的生成，扩张冠脉血管，改善心肌的血氧供应，对心血管系统起到改善作用，从而 起到血管扩张的作用。 1.4 抗凝血作用总黄酮体外给药可抑制花生四烯酸和胶原纤维引起的血小板聚集作用，改善血液流变性，延长凝血酶原时间。动物试验表明，大鼠皮下注射大剂量肾上腺素和冰水浸泡法，造出急性血瘀证大鼠模型，即血流变性呈轴稠状态的实验动物，通过饲喂山楂叶总黄酮（HLF），可显著降低红细胞（RBC）聚集指数、血浆比轴度，从而改善血瘀状态。银杏黄酮单独应用其抗凝作用不如蚓激酶，两者合用后抗凝效果加强，但溶栓作用并没有改善。 1.5 抗血脂作用维生素D3加脂肪乳剂造成大鼠高脂血症模型，在给予了麦胚总黄酮类后，可显著提高大鼠高密度脂蛋白胆固醇含量，降低实验性血清总胆固醇和三酚甘油含量。 2 抗炎调节免疫作用 黄酮类化合物具有显著的抗炎作用。作用机理为作用于细胞正常的有丝分裂过程，调节细胞间相互作用的分泌过程，抑制肥大细胞和嗜碱性细胞释放慢反应致炎物质，如中性粒细胞溶酶体酶、白三烯、组胺、前列腺素等，调节巨嗜细胞的吞噬功能，从而直到抗炎和免疫调节的作用。穿卜草中分离得到黄酮提取物可显著清除炎性因子，鸡蛋清致大鼠足肿胀、醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增加、二甲苯所致的小鼠耳肿胀等急性炎症反应，都有明显的抑制作用。 3 抗菌抗病毒作用 3.1 抗菌作用甘草黄酮提取物在体外，可有效抑制白色念珠菌、黑根霉、灰葡萄抱、意大利青霉等真菌。同时对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、新型隐球菌、枯草杆菌、绿脓杆菌、烟曲霉菌、白色念珠菌等均有抑制作用，亦能明显抑制的生长。 3.2 抗病毒活性黄酮类化合物对多种病毒具有抑制作用，芦丁能抑制流感病毒、脊髓灰质炎病毒。黄芪总黄酮对人疤疹病毒（HSV21）感染的豚鼠皮肤，具有较好的抗病毒治疗效果。异黄芪282甲醚能显著抑制流感病毒。总之黄酮类对于流感病毒、呼吸道合胞病毒、脊髓灰质炎病毒、疤疹病毒、登革热病毒、腺病毒、肝炎病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒等都具有一定的抑制作用。 3.3 抗HIV活性许多黄酮类化合物均有抗匀陨灾活性，其作用的靶点均分别为作用于HIV逆转录酶、HIV 蛋白酶、HIV整合酶，作用于HIV启动子，没有明确作用点的黄酮类化合物等。其中黄芩素可对抗中逆转录酶。 4 抗肿瘤抗癌作用 黄酮类化合物对于肿瘤细胞的增长繁殖具有显著地抑制作用。其作用机理为促进抑癌基因表达、诱导肿瘤细胞凋亡、干预肿瘤细胞信号转导、促进抗肿瘤细胞增殖等。黄酮类化合物抗癌抗肿瘤作用的效果，主要体现为具有显著的抗氧化抗自由基作用，且二者之前具有显著相关性，抗自由基及氧化应激的能力强，则
蜂胶产品中总黄酮含量到底多少正常 中国蜂产品协会时间：2010-04-26新闻来源：北京天恩生物工程高新技术研究所吕泽田 经常有消费者和企业询问,蜂胶产品中的总黄酮含量到底多少才正常有的蜂胶产品的总黄酮含量高达8%、9%,甚至10%以上是不是事实是不是总黄酮的含量越多越好对这些疑问和质疑,笔者根据在制定蜂胶国家标准过程中获得的有关数据和所收集到的相关资料,谈谈看法。 蜂胶产品中总黄酮含量的多少取决于蜂胶原料总黄酮的含量。一般来说，蜂胶原料总黄酮含量比较高，或蜂胶含量比较高的产品,其总黄酮的含量也相应比较高。由于不同产地，不同树种,不同季节的蜂胶原料中总黄酮含量是不平均的;又因蜂胶原料的差异性,又造成蜂胶提取物中总黄酮含量也是不平均的.所以产品中蜂胶含量的多少与总黄酮的多少不是成正比的;而且蜂胶中总黄酮的含量是有一定范围的,超出这个范围显然是不正常的。 先说蜂胶原料(毛胶).中国农业科学院蜜蜂研究所（1987－1989）对不同地区，不同季节采集的120个蜂胶样品的分析结果，蜂胶原料中总黄酮含量为～％, 含量高低相差2倍多。 中国农业科学院蜜蜂研究所骆尚骅研究员等对30份蜂胶样品进行检测，总黄酮含量为6～％, 含量高低相差倍多,其中总黄酮含量小于20％的占样品总数％。 北京天恩生物工程高新技术研究所先后对直接从蜂箱木制采胶栅框刮取的蜂胶原料15样份进行检测，总黄酮平均值为％。 2007年制定蜂胶国标时,采用保健食品中总黄酮的测定方法测得97份样品，总黄酮含量5～％,含量高低相差将近倍。其中,总黄酮含量小于15％的有39个样份，占总样份的％；总黄酮含量8～15％的有个48个样份，占总样份的％；总黄酮含量小于8％的有个10个样份，占总样份的％。 从以上检测结果可以看出蜂胶原料中总黄酮含量的明显差异性。 再说蜂胶乙醇提取物.蜂胶原料不能直接生产产品.那么作为产品原料的蜂胶乙醇提取物中的总黄酮含量又如何呢 北京天恩生物工程高新技术研究所检测不同产地，不同树种的蜂胶乙醇提取物13样份，其总黄酮含量为～％。其中含量13～14％的样品3个，占总样数的％；14～17％的样品9个，占总样数的％；17％以上的样品1个，占总样数的％。 江西汪氏蜜蜂园检测4个蜂胶乙醇提取物样品，总黄酮含量范围为～％，其中，含量～％的样品3个含量％的样品仅1个。 浙江大学动物科学学院和杭州天厨蜜源保健品有限公司测定不同厂家的27
总黄酮含量测定 一样品溶液的制备 70%乙醇溶液，料液比1﹕8 ，80度下回流2h。取10g样品放入圆底烧 瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。 二芦丁标准品的配置 精密称取芦丁2mg，加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦 丁标准品溶液。 三显色方法的确定 1 扫描原液分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml，加无水乙醇定容至25ml，空白对照，全波扫描。 2硝酸铝显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加5%亚硝酸 钠溶液（1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml 容量瓶中) 1ml，摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中）10ml, 再加无水乙醇定容至25ml，摇匀，放置15min，空白对照，全波扫描bb 。 3氯化铝显色法分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化 铝溶液（1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml，摇匀放置10min，空白对照，全波扫描。 4 氢氧化钾显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加3ml10% 氢氧化钾溶液（2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中）， 充分摇匀显色5min后，用无水乙醇定容至25ml, 摇匀，空白对照，全波 扫描。 四显色条件的确定 五标准曲线的绘制 分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液，按所选的显色方法测定吸光度，绘制标准曲线。 六精密度实验 按标准曲线绘制方法，分别准确量取1.0ml芦丁标准液5份，按所选显色剂和所确定的最优显色条件在所选波长下测定吸光度。
黄酮类化合物 黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物黄酮类化 合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外，它还常与糖结合成苷。多数科学家认为黄酮的基本骨架是由三个丙二酰辅酶A和一个桂皮酰辅酶A生物合成而产生的。经同位素标记实验证明了A环来自于三个丙二酰辅酶A，而B环则来自于桂皮酰辅酶A[1]。1、分类：根据中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置（2-或3-位）以及三碳链是否构成环状等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类：黄酮类(flavones)、黄酮醇(flavonol)、二氢黄酮类(flavonones)、二氢黄酮醇类(flavanonol)、花色素类(anthocyanidins)、黄烷-3，4二醇类(flavan-3,4-diols)、双苯吡酮类(xanthones)、查尔酮(chalcones)和双黄酮类(biflavonoids)等十五种。另外，还有一些黄酮类化合物的结构很复杂，其中包括榕碱及异榕碱等生物碱型黄酮。2、理化性质：天然黄酮类化合物多以苷类形式存在，并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。组成黄酮苷的糖类包括单糖、双糖、三糖和酰化糖。黄酮苷固体为无定形粉末，其余黄酮类化合物多为结晶性固体。黄酮类化合物不同的颜色为天然色素家族添加
了更多色彩。这是由于其母核内形成交叉共轭体系，并通过电子转移、重排，使共轭链延长，因而显现出颜色。黄酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等级性强的溶剂中；但难溶于或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。糖链越长则水溶度越大。黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基，故显酸性。酸性强弱因酚羟基数目、位置而异。3、显色：1.盐酸-镁粉（或锌粉） 反应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，反应机理现在认为是因为生成了阳碳离子缘故[1]。2.四氢硼钠（NaBH4）是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，产生红～紫色。而与其它黄酮类化合物均不显色。3. 黄酮类化合分子中常含有下列结构单元，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、锶盐、铁盐等试剂反应，生成有色络合物。与1%三氯化铝 或硝酸铝溶液反应，生成的络合物多为黄色（λmax=415nm），并有荧光，可用于定性及定量分析。4、黄酮对身体的好处黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中,总数大约有4千 多种,其分子结构不尽相同,如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶 多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。不同分子结构的黄酮可作用于身体不同的器官，如山楂--心血管系统，兰梅-- 眼睛，酸果--尿路系统，葡萄--淋巴、肝脏，接骨木果--免疫系统，平时我们可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮，作为身体的一种补充。 黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清
之间的吸收带称为带Ⅰ，出现在240～280nm之间的吸收带称为带Ⅱ。不同类型的黄酮化合物的带Ⅰ或带Ⅱ的峰位、峰形和吸收强度不同，因此从紫外光谱可以推测黄酮类化合物的结构类型。 乙酸钠-硼酸（NaOAc-H3BO3）、三氯化铝或三氯化铝-盐酸（AlCl3/HCl）试剂能使黄酮的酚羟基离解或形成络合物等，导致光谱发生变化。据此变化可以判断各类化合物的结构，这些试剂对结构具有诊断意义，称为诊断试剂。 黄酮和黄酮醇类 黄酮或黄酮醇的带Ⅰ是由B环桂皮酰基系统的电子跃迁所引起的吸收，带Ⅱ是由A环的苯甲酰基系统的电子跃迁所引起的吸收。 黄酮和黄酮醇的UV光谱图形相似，仅带Ⅰ位置不同，黄酮带Ⅰ位于304～350nm，黄酮醇带Ⅰ位于358～385nm。利用带Ⅰ的峰位不同，可以区别这两类化合物。 黄酮、黄酮醇的B环或A环上取代基的性质和位置不同将影响带Ⅰ或带Ⅱ的峰位和形状。例如，7和4＇位引入羟基、甲氧基等含氧取代基，可引起相应吸收带向红位移。又如3-或5-位引入羟基，因能与C4＝O形成氢键缔合，前者使带Ⅰ向红位移，后者使带Ⅰ、带Ⅱ均向红位移。B环上的含氧取代基逐渐增加时，带Ⅰ向红位移值（nm）也逐渐增加，但不能使带Ⅱ产生位移。有时（例如3＇，4＇-位有2个羟基或2个甲氧基或亚甲二氧基）仅可能影响带Ⅱ的形状，使带Ⅱ歧分为双峰或1个主峰（Ⅱb位于短波处）和1个肩峰（sh）或弯曲（Ⅱa位于长波处）。 A环上的含氧取代基增加时，使带Ⅱ向红位移，而对带Ⅰ无影响，或影响甚微（但5-羟基例外）。 黄酮或黄酮醇的3-，5-或4＇-羟基被甲基化或苷化后，可使带Ⅰ向紫位移，3-OH甲基化或 1．甲醇钠（NaOMe），主要是判断是否有4＇-OH，3、4＇－二OH或3、3＇、4＇－三OH。
1 各批次药材含量测定 使用已经确定的总黄酮含量检测方法分别进行5个批次原料含量的测定 总黄酮含量测定：分别精密称取药材粗粉0.5g，置100ml锥形瓶中，加70%乙醇50ml，称定重量，超声60分钟，放冷，称定，加入70%乙醇补足减失重量，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml比色管中，加 5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加30%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录Ⅴ B），在504nm 的波长处测定吸收度。 表1 不同批次药材总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035 20140516紫外扫描色谱图 2 药材总黄酮转移率研究 2.1 单个药材转移率研究
2.1.1 单个药材的转移率测定 同一批次的各药材，分别按照产品生产工艺提取得单个药材的总黄酮浓缩液样品，进行总黄酮含量检测，与“1”项下同批药材的总黄酮含量相比得出单个药材的转移率（如下式），分别进行5批次药材测定。 黄芪、桑叶、黄精、山茱萸：分别取黄芪、桑叶、黄精、山茱萸各100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水12倍量，煎煮2.0h，过滤；第二次加水10倍量，煎煮1.0h，过滤，合并滤液浓缩至100ml，备用。 黄芪不同浓缩程度的考查：取黄芪100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水20倍量，煎煮2.5h，过滤；第二次加水20倍量，煎煮2.0h，过滤，合并滤液，重复试验三次，分别浓缩至50ml、100ml、200ml，备用。 精密量取上述溶液5ml，加乙醇15ml，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml 比色管中，加5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加70%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录ⅤB），在504nm 的波长处测定吸收度。 表2 不同批次药材提取液总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035
黄酮类化合物的生理功能 黄酮类化合物广泛存在于植物中，实际上存在于植物的所有部分，包括根、心材、树皮、叶、果实和花中，光全作用中约有2%的碳源被转化成类黄酮。早在30年代人们就发现了黄酮类化合物具有维生素C样的活性，曾一度被视为是维生素P。至今法国与俄罗斯仍继续称黄酮类化合物为维生素P。Pratt等人研究了黄酮类化合物的抗氧化性质，认为黄酮是作为一级抗氧化剂而起作用的，它们具有显著的抗氧化性能。黄酮抗油脂过氧化的作用早在60年代就已经被证实了。80年代以来，对黄酮类化合物的研究逐渐转向其清除自由基的能力、抗衰老及对老年病的防治功效上。 黄酮类化合物中含有消炎、抑制异常的毛细血管通透性增加及阻力下降、扩张冠状动脉、增加冠脉流量、影响血压、改变体内酶活性、改善微循环、解痉、抑菌、抗肝炎病毒、抗肿瘤具有重要生物活性的化合物，有很高的药用价值。中草药含黄酮类化合物的很多，已经证明类黄酮是许多中草药的有效成份。例如满山红中的杜鹃素、小叶枇杷中的小叶枇杷素、矮地茶中的槲皮苷、铁包金中的芦丁、白毛夏枯草和青兰中的木犀草素、红管药中的槲皮素、葛根中的黄豆苷与葛根素、毛冬青与银杏叶中的黄酮醇苷、黄芩中的抗菌成分黄芩素和解热有效成分黄芩苷等。此外，还有很多中草药富含黄酮类成分，如槐米、陈皮、射干、红花、甘草、蒲黄、枳实、芫花、金银花、菊花、山楂、淫羊藿、桎木和地锦等。除了药用价值外，其中的部分黄酮类化合物（特别是来源自药食两用的中草药）显然可应用在功能性食品。 黄酮和黄酮醇是植物界分布最广的黄酮类化合物，广泛存在于食用蔬菜及水果中，在沙棘、山楂、洋葱等中含量较高，茶叶、蜂蜜、果汁、葡萄酒中含量丰富。椐估计人体每天从食物中摄入这类物质可达1g，产生有益的生理作用。黄酮类化合物无显著毒性，大鼠对槲皮素的经口LD50为10～50g/kg ，小鼠一次口服15g/kg，观察7d无一死亡。临床病人摄取芦丁2.25g持续7d或60mg/d连续5年，均无任何副反应。在其他一系列大剂量、长时间的动物试验中，均未发现有致癌性。显性致死试验、细胞姐妹染色体试验、微核试验证明槲皮素类衍生物无致突变作用。 黄酮类化合物的生理功能可概括为： ⑴调节毛细血管的脆性与渗透性。 ⑵是一种有效的自由基清除剂，其作用仅次于维生素E。 ⑶具有金属螯合的能力，可影响酶与膜的活性。 ⑷对维生素C有增效作用，似乎有稳定人体组织内维生素C的作用。 ⑸具有抑制细菌和抗生素的作用，这种作用使普通食物抵抗传染病的能力相当高。 ⑹在两方面表现有抗癌作用，一方面是对恶性细胞的抑制（即停止或抑制细胞的增长），另一方面是从生化方面保护细胞免受致癌物的损害。 尽管对黄酮类化合物的看法尚有矛盾的方面，但它目前仍被应用来防治下列一些疾病： ⑴毛细血管的脆性和出血。 ⑵牙龈出血。 ⑶眼的视网膜内出血。
黄酮 中文名称：黄酮 定义：一大类以苯色酮环为基础的酚类化合物。植物中由苯丙氨酸产生的肉桂酰辅酶A， 经碳链延长环化生成的查耳酮，再衍生成的各种α苯基衍生物。其中有些可用于心血管 病的治疗。 应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；新陈代谢（二级学科） 黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外，它还常与糖结合成苷。 分类根据中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置（2-或3-位）以及三碳链是否构成环状等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类：黄酮类（flavones）、黄酮醇（flavonol）、二氢黄酮类（flavonones）、二氢黄酮醇类(flavanonol）、花色素类（anthocyanidins）、黄烷-3，4二醇类（flavan-3,4-diols）、双苯吡酮类（xanthones）、查尔酮(chalcones）和双黄酮类（biflavonoids）等十五种。另外，还有一些黄酮类化合物的结构很复杂，其中包括榕碱及异榕碱等生物碱型黄酮。 根据B环连接位置（2为或3为）、C环氧化程度、C环是否成环等将黄酮类化合物分为以下七大类。 1．黄酮和黄酮醇 这里指的是狭义的黄酮，即2－苯基色原酮（2-苯基苯并γ吡喃酮）类，此类化合物数量最多，尤其是黄酮醇。 如芫花中的芹菜素、金银花中的木犀草素属于黄酮类；银杏中的山奈素和槲皮素属于黄酮醇类。 2．二氢黄酮和二氢黄酮醇 与黄酮和黄酮醇相比，其结构中C环C2-C3位双键被饱和，他们在植物体内常与相应的黄酮和黄酮醇共存。 如甘草中的甘草素、橙皮中的橙皮苷均属于二氢黄酮类；满山红中的二氢槲皮素、桑枝中的二氢桑色素均属于二氢黄酮醇类。 3．异黄酮和二氢异黄酮 异黄酮类为具有3－苯基色原酮基本骨架的化合物，与黄酮相比其B环位置连接不同。 如葛根中的葛根素、大豆苷及大豆素均为异黄酮。 二氢异黄酮类可看作是异黄酮类C2和C3双键被还原成单键的一类化合物。 如中药广豆根中的紫檀素就属于二氢异黄酮的衍生物。 4．查耳酮和二氢查耳酮类 查耳酮的主要结构特点是C环未成环，另外定位也与其他黄酮不同。其可以看作是二氢黄酮在碱性条件下C环开环的产物，两者互为同分异构体，常在植物体内共存。同时两者的转变伴随着颜色的变化。 二氢查耳酮在植物界分布极少。中药红花中的红花苷为查耳酮类。红花在开花初期时，花中主要成分为无色的新红花苷（二氢黄酮类）及微量红花苷，故花冠是淡黄色；开花中期花中主要成分为黄色的红花苷，故花冠为深黄色；开花后期则变成红色的醌式红花苷，故花冠为红色。 5．橙酮类
黄酮含量的测定方法 1、对照法 1） ①对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙 醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。 ②样品溶液制备 精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。 ③标准曲线的制备 精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L 氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml 置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。 2） ①样品溶液的制备： 分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml 容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml 容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。 ③标准曲线的制定： 精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml 容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。 ④含量测定结果： 分别吸取2．2．1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。 计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。 注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。
黄酮类化合物提取分离纯化及其活性的研究进展姓名常姣专业微生物学 摘要文章综述了黄酮类化合物的结构特征及提取、分离纯化技术介绍了黄酮类化合物的生物活性，并对其开发利用进行了展望。旨在为黄酮类化合物的研究、开发以及应用提供参考。 关键词黄酮；提取；分离纯化；生物活性 民以黄酮类化合物也称黄碱素, 是广泛存在于自然界的一大类化合物, 在植物体内大多与糖结合成甙的形式存在, 也有部分以游离状态的甙元存在。由于最先发现的黄酮类化合物都具有一个酮式羰基 结构, 又呈黄色或淡黄色, 故称黄酮[ 1]。 目前对天然黄酮类化合物的提取方法较多,如溶剂提取法、微波提取法、超声波提取法、酶解法、超临界流体萃取法、双水相萃取分离法及半仿生提取法等, 每种方法都有它各自的优点和点。用上述方法提取的黄酮类化合物仍然是一个混合物, 不仅是含有其它杂质的粗品, 而且是几种黄酮类成分的混合物, 需进一步分离纯化, 常用的方法有柱层析法、重结晶法、铅盐沉淀法和高效液相色谱法等。 黄酮类化合物具有降低血管脆性及异常的通透性、降血脂、降血压、抑制血小板聚集及血栓形成、抗肝脏病毒、抗炎、抗菌、解栓、抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗癌、防癌、降血糖、镇痛和免疫等生理活性[ 2-5]。这些生理活性已被关注，对该类化合物的研究成为医药界的热门课题。人体自身不能合成黄酮类化合物而只能从食物中摄取，因此多年来科学家都在积极研究探讨从植物体中分离 纯度高、活性强的黄酮类化合物[6]。 1黄酮类化合物的理化性质 黄酮类化合物是以2-苯基色原酮为母核而衍生的一类通过三碳链相互连接而成的大多具有基本碳 架的一系列化合物，且母核上常有羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等助色取代基团。黄酮类化合物多为晶体固体，多数具有颜色，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性外，其余则无旋光性) 黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有很大差异) 一般游离态苷元难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂) 其中，黄酮、黄酮醇、查儿酮等平面型分子，因堆砌较紧密，分子间引力较大，故更难溶于水；而二氢黄酮及二氢黄酮醇等，因系非平面型分子，故排列不紧密，分子间引力降低，有利于水分子进入，水中溶解度稍大。 2黄酮类化合物的提取分离及纯化 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中多以苷元的形式存在，而在根部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。因此，不同来源、部位、种类黄酮提取所采取的方法不同[6]。分离黄酮类化合物的方法很多，根据黄酮类化合物与混入其他化合物的极性不同可采用溶剂萃取法，根据黄酮化合物在酸性水中难溶、碱性水中易溶的特点可采用碱提酸沉法等。 2.1溶剂法 2.1.1 热水提取法
蜂胶的主要成分 蜂胶的成分：蜂胶是一种成分极为复杂的化合物，在所有的蜂产品中，几乎可以说，蜂胶的成分是最复杂的。不同产地、不同胶源植物的蜂胶的成分差异很大。 蜂胶的成分虽然很复杂，归纳起来，蜂胶的成分主有黄酮类化合物。萜烯类、有机酸类、醇类、芳香性醛类、脂肪酸及多种氨基酸、糖类、酶类、维生素类和矿质元素等。现将各大类化合物简单介绍如下。 1、黄酮类化合物 黄酮类化合物，是自然界存在的一类具有多方面生理和药理作用的物质。蜂胶的成分中含的黄酮类化合物其品种和数量都非常丰富，有关科研人员从各种不同的蜂胶中，分离和鉴定的黄酮类化合物就有桶皮素等46种，其中，5，7-二羟基-3，4-二甲基黄酮和5-羟基4，7-二甲氧基双氢黄酮，首次从蜂胶的成分中发现，成为蜂胶中独特的有效成分。不同产地、不同的胶源植物种类，其所含的黄酮类化合物品种和数量不同。 罗国安等（1985年）测定了中国产的蜂胶样品，其黄酮平均含量为10.31％土0.29％。 医学工作者发现，许多治疗冠心病的中草药和有活血化瘀作用的中
药，都含有黄酮类成分。因此，黄酮类化合物是一种具有重要药理作用的化合物。 2、挥发性油和萜类 蜂胶经蒸馏，得到一些与水不能混合的油状挥发性物，叫挥发性油。挥发性油具芳香气味，化学成分极为复杂，蜂胶的来源不同，其化学成分有所不同。但其基本组成为脂肪族、芳香族和萜类等三种物质，以及它们的含氧衍生物，如醇、醛、酮、酸、酚、醚、酯和内脂等。 挥发性油是一种活性物质，蜂胶的成分中所含的挥发性油，具有止咳、解表、驱风、止痛、杀菌、抑菌和防腐的作用。 蜂胶的成分中含的该类化合物有单萜类、倍半萜类，此外，还含有抗菌和抑癌活性的双该类等物质。 3、有机酸类 蜂胶的成分中现已分离出的有机酸有苯甲酸、对羟基甲酸、水杨酸、咖啡酸苯乙脂、阿魏酸等13种。 苯甲酸及其衍生物，是一组活性芳香族有机酸，具有很强的防腐力。阿魏酸是中药当归的主要成分，有解血小板凝聚的作用，可用于治疗头痛等症。咖啡酸酯类物质具有抑制癌细胞的作用。