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医院细胞遗传室N显带法作业指导书

医院细胞遗传室N显带法作业指导书

1目的

规范N显带的实验室操作流程,显示中期染色体上的核仁形成区,为细胞染色体核型分析可靠性提供质量保证。2实验方法

手工显带法

3实验原理

人类的近端着丝粒染色体(即13、14、15、21和22号染色体)的次缢痕处与核仁形成有关,故称核仁形成区(nucleolar-organizing region,NOR),它是中期染色体上的明显结构之一。应用DNA-RNA分子杂交技术,证明人类的18S和28S核糖体RNA(rRNA编码结构)的基因(rDNA)位于NOR。目前已有多种技术可以显示中期染色体上的核仁形成区。其中最简单而又准确的方法是银染法,即利用硝酸银将具有转录活性的核仁形成区(rRNA基因)特异性地染成黑色,人们将这种银染阳性的核仁形成区称为Ag-NOR,它们是具有转录活性的18SrRNA基因和28SrRNA基因所在的部位。由于具有转录活性的rRNA基因(rDNA)往往伴有丰富的酸性蛋白质,该类蛋白质含有巯基(-SH)和二硫键(-S-S-),能使AgNO3中的Ag+还原成Ag颗粒,因此有转录活性的核仁形成区常被镀上银颗粒而呈现黑色,没有转录活性的NOR则不着色。故

其着色程度与细胞中rRNA基因的转录活性相一致。在同一物种,Ag-NOR的数目以及它们在染色体上的位置是相对恒定的,如果发生了改变就意味着rRNA基因的活性发生了变化,故此项技术是目前探讨rRNA基因功能的方法之一。

此外,人类近端着丝粒染色体的随体间易发生联合,这种联合可能是造成近端着丝粒染色体不分离、断裂和易位的原因。利用银染技术可在发生联合的染色体间清楚地看到有银染物质相连。因此,银染近端着丝粒染色体联合(Ag-stained acrocentric association ,Ag-AA)可以作为准确地判断人体细胞是否存在近端着丝粒染色体随体联合的客观标准(图7-4)。目前,也将Ag-AA看作反映rRNA基因活性大小的一个指标。所以银染技术已逐渐受到重视,并已开始广泛应用于肿瘤细胞遗传学、体细胞遗传学、进化遗传学、临床细胞遗传学及药物、化学因素等的遗传效应的研究上。

4 性能特征

近端着丝粒染色体(即13,14,15,21和22号染色体)的次缢痕处特异性的染成黑色。

5 仪器及耗材

光学显微镜、恒温水浴箱、移液枪、培养皿(干燥)、吸管、擦镜纸、小镊子、未染色的染色体标本片(片龄一周以内)。

6 试剂

硝酸银、甲酸、Giemsa染液、一次性离心管(15ml)、去离子水、锡箔纸。

7操作流程

7.1 制片

常规外周血法制备的标本

7.2 N显带

7.2.1设一60℃水浴箱;另置Giemsa染液缸于37℃水浴箱。

7.2.2 临时配制新鲜的AgNO3溶液:取一次性离心管(15ml)一支,称取AgNO3 5g溶于10ml去离子水中,加10µl甲酸,混匀。将一干燥培养皿漂于60℃水浴箱水面上。

7.2.3 玻片用4层干净擦镜纸(略小于玻片大小)盖好。7.2.4用吸管将AgNO3溶液慢慢滴于玻片纸上,直至擦镜纸呈

棕黄色(黑色)为止,一般10ml能滴两张玻片。

7.2.5擦镜纸变黑后,用镊子轻轻启开擦镜纸,将玻片用自

来水冲干净。

7.2.66%Giemsa染色液染色5分钟。

7.2.7染色后的玻片标本用自来水洗去多余染料,染色过深

可用磷酸缓冲液脱色。室温下风干后即可镜检,必要时

可用树胶封片。镜检时先在低倍镜下选择分散好、长度

适中的分裂相,然后转换油镜观察其显带的情况,选择

显带好的标本进行核型分。

8 显带观察

13、14、15、21和22号染色体的随体和随体柄为黑色。9注意事项

9.1 AgNO3工作液应现用现配,并注意避光。用锡箔纸包住离

心管,放置时间不能超过20分钟,如放置的时间较长,溶液出现混浊即不宜再使用。

9.2 滴AgNO3液时,不能让玻片干燥。注意防止银染液溅至

衣物和手上,以免留下难以去除的黑色污点。

9.3 滴片时染色体标本片一定要平置,以使染液均匀分布在标本上,使标本着色均匀。

9.4 一定要让玻片擦镜纸变黑后再冲洗。

9.5 染色时间因材料而异,因Giemsa染料批号不同、质量

上有差异,因此其染色液浓度和染色时间需作适当调整。

10 环境和安全控制

10.1 试剂中含有有毒物质,请勿直接接触皮肤、眼睛、黏膜,一旦接触,立即用大量清水冲洗;受检标本均应假定含有传染性病原菌,其废弃过程应遵循实验室《生物安全管理程序》进行处理;

10.2 实验过程中应严格控制环境及实验仪器/设备的温度、湿度等相关条件,以确保实验条件稳定。

11 临床意义

11.1 可以根据其着色程度判断细胞中rRNA基因的转录活

性;

11.2 同一物种,Ag-NOR的数目以及它们在染色体上的位置是相对恒定的,如果发生了改变就意味着 rRNA基因的活性发生了变化,故可以利用N显带技术探讨rRNA基因功能;

11.3 人类近端着丝粒染色体的随体间易发生联合,这种联合可能是造成近端着丝粒染色体不分离、断裂和易位的原因。N显带技术可以作为准确地判断人体细胞是否存在近端着丝粒染色体随体联合的客观标准。

医院细胞遗传室N显带法作业指导书

医院细胞遗传室N显带法作业指导书 1目的 规范N显带的实验室操作流程,显示中期染色体上的核仁形成区,为细胞染色体核型分析可靠性提供质量保证。2实验方法 手工显带法 3实验原理 人类的近端着丝粒染色体(即13、14、15、21和22号染色体)的次缢痕处与核仁形成有关,故称核仁形成区(nucleolar-organizing region,NOR),它是中期染色体上的明显结构之一。应用DNA-RNA分子杂交技术,证明人类的18S和28S核糖体RNA(rRNA编码结构)的基因(rDNA)位于NOR。目前已有多种技术可以显示中期染色体上的核仁形成区。其中最简单而又准确的方法是银染法,即利用硝酸银将具有转录活性的核仁形成区(rRNA基因)特异性地染成黑色,人们将这种银染阳性的核仁形成区称为Ag-NOR,它们是具有转录活性的18SrRNA基因和28SrRNA基因所在的部位。由于具有转录活性的rRNA基因(rDNA)往往伴有丰富的酸性蛋白质,该类蛋白质含有巯基(-SH)和二硫键(-S-S-),能使AgNO3中的Ag+还原成Ag颗粒,因此有转录活性的核仁形成区常被镀上银颗粒而呈现黑色,没有转录活性的NOR则不着色。故

其着色程度与细胞中rRNA基因的转录活性相一致。在同一物种,Ag-NOR的数目以及它们在染色体上的位置是相对恒定的,如果发生了改变就意味着rRNA基因的活性发生了变化,故此项技术是目前探讨rRNA基因功能的方法之一。 此外,人类近端着丝粒染色体的随体间易发生联合,这种联合可能是造成近端着丝粒染色体不分离、断裂和易位的原因。利用银染技术可在发生联合的染色体间清楚地看到有银染物质相连。因此,银染近端着丝粒染色体联合(Ag-stained acrocentric association ,Ag-AA)可以作为准确地判断人体细胞是否存在近端着丝粒染色体随体联合的客观标准(图7-4)。目前,也将Ag-AA看作反映rRNA基因活性大小的一个指标。所以银染技术已逐渐受到重视,并已开始广泛应用于肿瘤细胞遗传学、体细胞遗传学、进化遗传学、临床细胞遗传学及药物、化学因素等的遗传效应的研究上。 4 性能特征 近端着丝粒染色体(即13,14,15,21和22号染色体)的次缢痕处特异性的染成黑色。 5 仪器及耗材 光学显微镜、恒温水浴箱、移液枪、培养皿(干燥)、吸管、擦镜纸、小镊子、未染色的染色体标本片(片龄一周以内)。 6 试剂

细胞遗传室工作手册SOP

第一章设备与器械 1目的 规范实验室用房,确保实验室工作和业务用房的正常需要,以促进科室的发展,确保各项工作顺利进行。 2实验室用房规范与要求 细胞遗传学实验室一般分为洗涤室、培养室、细胞学处理室、阅片室、暗室、档案室。其要求一般与其他普通实验室的要求基本相同: 1.便于所有器具的清洗。 2.\ 3.便于准备消毒及各种试剂的保藏。 4.便于使用各种方法检测待检标本,进行细胞遗传学方面的临床诊断。 但同时需要具有暗室并具有符合医疗档案存放的档案室。 洗涤室 玻璃器皿的清洗、包装,培养物质的准备与消毒,供应物品的保藏等工作都需在洗涤室里进行,洗涤室的大小一般为4m×6m,洗涤室应设有下列设备: 1.一个清洗玻璃器皿的水槽,便于清洗、晾干; 2.电热干燥消毒箱,用于玻璃器皿的干热灭菌; 3.高压蒸汽灭菌锅,用于不能耐受干热灭菌物品的处理; 、 4.烤箱两个便于烤干玻璃器皿或高压蒸汽灭菌物品; 5.石英玻璃双重蒸馏器或超纯水装置,用于蒸馏水或超纯水的制备; 6.真空泵一个,以备配制培养基过滤时用; 7.物品准备台,以备包裹玻璃器皿等; 8.储柜或储架,便于清洗干燥的器皿或其它物品存放; 9.酸缸,一般最好是耐酸材料,用于盛装清洗液,清洗液多为含重铬酸钾的

硫酸溶液。 培养室 培养室包括操作间和缓冲室,操作室功能是进行无菌操作和细胞培养,如各种组织取材与接种材料的准备、培养物的生长状态观察等,因此应配有超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、小型低速离心机、冰箱、玻璃柜等。缓冲室则是供工作人员进入培养室前换消毒衣服、鞋、帽等之用。培养室一般3m×3m已够用,要求清洁、干燥、不通风、光线适宜。操作间必须墙壁光滑并装有空调器,操作间与外间实验室之间最好有传递窗,以便传递临时需用的实验用品。培养室空气消毒可采取紫外线消毒或空气净化。 ' 细胞学处理室 细胞学处理室需要配备普通离心机、恒温水浴箱及恒温电烤箱(烤片用)等,主要用于染色体的收获与显带。 暗室 暗室用于对荧光原位杂交技术结果的观察和分析,配备荧光显微镜和分析系统。 … …

希森美康血球分析仪XT-2000i作业指导书(医院)sop

XT-2000i 血常规检查 1. 分析参数和方法学名称 Sysmex XT-2000i 提供30项参数的结果,各检测参数和方法见表1。 表1. Sysmex XT-2000i 各检测参数和方法 参数 首字母缩写 检测方法 白细胞 WBC 流式细胞计数 红细胞 RBC 鞘流DC 检测方法 血红蛋白 HGB SLS 血红蛋白检测法 红细胞比积 HCT RBC 累积脉冲高度检测法 平均红细胞体积 MCV 由RBC 和HCT 算出 平均红细胞血红蛋白量 MCH 由RBC 和HGB 算出 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC 由HCT 和HGB 算出 血小板 PLT 鞘流DC 检测方法 中性粒细胞百分比 NEUT% 流式细胞计数 淋巴细胞百分比 LYMPH% 单核细胞百分比 MONO% 嗜酸性粒细胞百分比 EO% 嗜碱性粒细胞百分比 BASO% 中性粒细胞数 NEUT# 淋巴细胞数 LYMPH# 单核细胞数 MONO# 嗜酸性粒细胞数 EO# 嗜碱性粒细胞数 BASO# 红细胞分布宽度-标准差 RDW-SD 根据红细胞直方图算出 红细胞分布宽度-变异系数 RDW-CV 根据红细胞直方图算出 血小板分布宽度 PDW 根据血小板直方图算出 平均血小板体积 MPV 根据血小板直方图和PLT 算出 大血小板比率 P-LCR 根据血小板直方图算出 血小板压积 PCT 根据血小板直方图算出 网织红细胞百分比 RET% 流式细胞计数 网织红细胞数 RET# 幼稚网织红细胞比率 IRF 低荧光强度网织红细胞比率 LFR 中荧光强度网织红细胞比率 MFR 高荧光强度网织红细胞比率 HFR

2. 原理 2.1. 鞘流DC检测方法(RBC、PLT、HCT) 在该检测器内,样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后,由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。 通过小孔以后,经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔,所以也可防止产生异常血细胞脉冲。 2.2. 使用半导体激光器的流式细胞计数方法 使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。 一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比,并进行染色。然后将该样品送入流动池中。 这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时,由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心,故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。 一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。前向散射光由光电二极管接收,侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血液细胞的信息。 2.2.1. 前向散射光和侧向散射光 当一束激光照射到血细胞颗粒上时,就产生光散射。XT-2000i检测前向散射 光和侧向散射光,前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧向散射光的强度反映细胞内部(如细胞核的体积大小)的信息。 2.2.2. 侧向荧光 当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时,就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加,荧光强度也增加。通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色的信息,XT-2000i检测侧向荧光。 2.3. SLS-血红蛋白测定法 在稀释的血液中加入溶血素,红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠的作用下,二价铁转变成三价铁,并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-Hb,

医院细胞遗传室高分辨染色体的制备与识别作业指导书

医院细胞遗传室高分辨染色体的制备与识别作业指导书 1目的 为获得具有550条带及850条带以上的染色体分裂相,从而以此为依据进行人类染色体高分辨分析。 2实验方法 手工显带法 3实验原理 正常情况下,人外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素(PHA)是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂,在PHA作用下,原处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性,淋巴细胞经过含有PHA培养液培养,在体外便可获得丰富的生长活跃、含有丝分裂细胞的细胞群,当细胞增殖到一定数量时,加入5-氟尿嘧啶和尿嘧啶核苷从而阻断DNA的合成,将其同步在S期。17个小时后加入胸腺嘧啶核苷(TDR)释放细胞,使细胞有丝分裂继续,进入分裂期后加入染色体缩短抑制剂溴乙锭(EB),并加入秋水仙胺破坏纺缍丝的形成,最终获得高分辨率染色体。 4性能特征 经G显带处理后可见550-850条显带。 5仪器及耗材

酒精灯,烧杯,天平,离心机,CO2培养箱,冰盒,载玻片,玻片盒,光学显微镜,灭菌注射器(5ml),离心管,无菌吸管,量筒,培养瓶,试剂瓶等。 6试剂 5%的RPMI1640小牛血清培养基5ml;秋水仙素浓度:20μg/ml;低渗液:0.075mol/L的KCl溶液;卡诺固定液(甲醇:乙酸=3:1);0.25% EDTA-trypsin;生理盐水;10-5M 5FU (五氟尿嘧啶) ;10-4M Uridine(尿嘧啶核苷);1/15M KH2PO4;10-3M TDR(胸腺嘧啶);1/15M Na2HPO4;1mg/ml EB (溴化乙锭);2.5%胰酶;0.4%酚红。 7操作流程 7.1细胞培养 将0.25-0.3ml外周血入高分辨培养基;培养72小时后,加Frdu和尿嘧啶核苷各100μl;17小时后加TDR100μl;继续培养4小时加EB 50μl;45分钟后加秋水仙胺35μl10分钟后收获。 7.2细胞收获 7.2.1将细胞液移入15ml离心管,1500rpm×10min离心;去上清,加室温(20-25℃)0.075MKCL低渗液至6-8ml,于室温(20-25℃)低渗40min; 7.2.2加1.5ml固定剂,轻柔混匀; 7.2.21500rpm×10min离心,去上清,加固定液至8ml,轻

遗传SOP0310.02细胞遗传室样本处理作业指导书

《文件已阅声明表》 文件名称:细胞遗传室样本处理作业指导书表号: JNKM-MP03.36.02

《文件修改记录页》

《文件信息表》 表号:JNKM-MP03.36.04

细胞遗传室样本处理作业指导书 1.目的:对细胞遗传项目标本采集前病人的准备、标本采集、运输、接收、领取、保存进行规范,以控制各环节可能出现的误差和差错,及时、准确地为病人提供检验结果。2.范围:适用于细胞遗传室外周血染色体分析项目标本。 3.职责: 3.1技术人员:负责按作业指导书验收、处理及贮存样品; 3.2质量监督员:负责对质量体系运行情况进行持续的监督; 3.3技术主管:负责样本处理全过程中涉及的设施、人员,环境等因素进行全局的控制与监督管理。 4.操作程序: 4.1样本的采集 4.1.1采样前患者准备: 当采集外周血时,患者具备以下条件; A.避免正在服用抗生素的过程中采血; B.如有大量饮酒或有酗酒习惯,采血期间尽量避免; C.在三个月内未有输血史。 4.1.2肝素抗凝外周血的采集:无菌静脉血2ml,注入肝素抗凝剂的试管,使抗凝剂与静脉血充分混匀,防止凝固,等待本中心配送人员收取,标本应在室温4~25℃保存。尽可能使用本中心提供的肝素抗凝管。 4.1.3样本采集量:一般为2ml。 4.2样本的保存: 4.2.1肝素抗凝外周血样本在室温4~25℃保存并应在24小时内送达本中心细胞遗传实验室进行接种。 4.2.2如果客户送检的是制好的玻片,也要及时送检。 4.2.3所有样本应在保质期内及时送检。过了保质期样本的不保证培养出可分析分裂相或通知临床重新抽血送检。 4.3样本的运输: 4.3.1所有临床检测血样本均应在温度(4~25℃)条件下运输,切勿冰冻或高于37℃。由

检验科应知应会手册

主管检验师岗位职责 1.在主任领导和主任检验师指导下,负责本科一定范围的检验、教学和科研工作。 2.参加部分检验工作,解决业务上复杂疑难问题。搞好本专业组质量控制和质量管理,检查组内人员工作质量。审查检验报告单是否准确规范。 3.监督检查本组人员认真执行各项规章制度和技术操作规程,负责本室的仪器设备正确使用和保养维修,做好剧毒物品等的保管登记工作,严防差错事故。 4.开展科研,负担教学工作。指导进修、实习人员的学习,做好科内各类技术人员的培养提高工作。 5.协助科主任制定科研规划,督促实施。学习使用国内外新技术,不断改进各种检验方法。 检验师职责 1、在科主任领导下进行工作。 ) 2、亲自参加检验,并指导检验士进行工作,核对检验结果,负责特殊检验的技术操作和特殊试剂的配制、鉴定、检查,定期校正检验试剂、仪器,严防差错事故。 3、负责毒剧药品,贵重器材的管理和检验试剂、材料的计划和请领、报销等工作。 4、开展科学研究和技术革新,改进检验方法,不断开展新项目,提高检验质量。 5、负责开展对本专业质量控制工作。 检验士职责 1、在检验师的指导下,担负各种检验工作。 2、收集和采集检验标本,发送检验报告单,在检验师的指导下进行特殊检验。 3、认真执行各项规章制度和技术操作规程,随时核对检验结果,严防差错事故。 4、负责检验药品、器材的请领、保管、检验试剂的配制、培养基的制备,做好登记、统计工作。 5、担任一定的检验器材的洗刷,做好消毒隔离工作。 : 检验科技术组组长工作职责

1、全面负责本检验科技术工作。 2、组织贯彻执行国家有关检验的法令、法规、技术标准和规范。 3、负责制定科研技术年度发展计划。 4、审核质量手册、程序文件。 5、负责标准、规范的最新有效,组织各专业组负责人不定 1、全面负责本检验科技术工作。 2、组织贯彻执行国家有关检验的法令、法规、技术标准和规范。 } 3、负责制定科研技术年度发展计划。 4、审核质量手册、程序文件 5、负责标准、规范的最新有效,组织各专业组负责人不定期对技术标准规范、检验程序进行有效性跟踪。 6、组织各专业组对合同进行评审。 7、审核本检验科作业指导书、检验方案、技术记录等技术文件。 8、提出委托实验项目,并收集委托实验室资料,组织对委托实验室的质量保证和检验能力进行考核评审。 9、根据工作的需要,提出仪器设备和计量服务的配置需求和采购申请,确认设备的技术指标是否能满足检验工作的要求。 10、负责对涉及技术方面的检验工作不符合项严重性进行评价,原因分析,组织技术复验工作;并跟踪检验工作不符合项的处理结果。 11、提出涉及技术方面的预防措施要求、编制计划和对各部门预防措施的有效性进行验证。 12、对问询者提供检验的选择,检验服务的应用,以及检验数据的解释等方面的建议; % 13、负责组织制定各项环境控制目标,建立监控手段和记录措施; 14、负责组织新的检验方法、非标准方法的验证、确认。 15、负责组织检验科内外的技术交流、技术咨询工作。 16、负责技术人员技术培训、资质考核工作。 17、负责组织检验结果不确定度的评定。 18、组织开展新检验项目的准备、试运行和对试运行情况的评审。 检验室科废物处置管理规定

医院细胞遗传室人羊水细胞培养及染色体制备作业指导书

医院细胞遗传室人羊水细胞培养及染色体制备作业指导书 1目的 规范羊水标本细胞培养及染色体制备过程,为临床羊水细胞染色体核型分析可靠性提供质量保证。 2测定方法 CO2培养/手工收获。 3测定原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E 细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在培养初期就长得很好,染色体分析大多用这类细胞。F细胞在培养中的生长期最长,在较老的羊水培养物中占优势。通常在培养后3-4天(可能更早些)即出现E细胞的集落,它们不适合作染色体分析。大约在第7天出现的AF细胞可用于染色体制备。如果在培养后第10天还未见长出新的细胞,就应考虑第二次羊膜穿刺。 4 性能特征 经G显带处理后可见300-550条显带。 5 样本类型及受检者准备

在无菌条件下抽得妊娠16-22+6周羊水后,注入15ml一次性离心管中,约抽30ml,立即送检。 6试剂 6.1 完全培养基100ml:在超净工作台内,用移液管将培养 基和其他各试剂分装入100毫升无菌瓶中(商业化培养基或F10培养基70ml,胎牛血清30ml,双抗:青霉素和链霉素,终浓度为100U/ml,用3.5%碳酸氢钠调节pH 为7.2-7.4)。 6.2秋水仙素浓度:20μg/ml。 6.3低渗液:0.075mol/L的KCl溶液 6.4卡诺固定液 6.5 0.25% EDTA-trypsin 6.6 生理盐水 7 仪器及耗材 酒精灯,烧杯,天平,离心机,CO2培养箱,冰盒,载玻片,玻片盒,光学显微镜,灭菌注射器(5ml),离心管,无菌吸管,量筒,培养瓶,试剂瓶等。 8 操作程序 8.1 细胞接种与培养 8.1.1 在无菌条件下抽得妊娠16-22+6周羊水后,注入15ml 一次性离心管中,约抽30ml,

异常红细胞检查显微镜检查法作业指导书

异常红细胞检查显微镜检查法作业指导书 1.实验原理 用瑞氏染色法,对制备好的血涂片进行染色,然后在显微镜下进行形态检查。 2. 标本采集: 2.1 标本种类:新抽取的抗凝血或手指末梢血。 2.2 标本要求: 2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝。 2.2.2 用手指末梢血作检验时,如手指有冻疮,则主张采用耳垂血。 3. 标本储存:取材后应立即推制成血涂片,并尽快送检。 4.标本运输:保持干燥,室温运输。 5. 标本拒收标准:污染,凝固标本不能作测定。 6. 实验材料:瑞氏血细胞染色液,生产厂家:(台资)珠海贝索生物技术有限公司。 7. 实验仪器: 7.1 仪器名称:OLYMPUS 显微镜 7.2 仪器厂家:OLYMPUS

7.3 仪器型号:OLYMPUS CH30 8. 操作步骤 8.1采血后推制厚薄适宜的的血膜片,血膜应呈舌状,头、体、尾清晰可分。 8.2瑞氏染色:将制好的干燥血涂片平置于染色架上,滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满血膜,然后加瑞氏染色B液3-5滴,轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀,染色1-2分钟(气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间),用自来水冲去染液,待干。 8.3高倍镜(必要时油镜)观察红细胞形态。 9. 结果判断与分析:在良好的染色血涂片上,正常红细胞的大小形态较为一致,直径为 6.7~7.7μm,染色淡红色,中央着色较边缘淡。各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段引起相应的病理变化,导致某些类型贫血的红细胞产生特殊的形态变化,可从染色血涂片上红细胞的大小、形态、染色等方面反映出来。此种形态学改变与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血原因,对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。红细胞的形态变化主要表现在以下四个方面:

医院细胞遗传室T显带法作业指导书

医院细胞遗传室T显带法作业指导书 1目的 T显带技术是专门显示染色体端粒,可用于分析染色体端粒有无缺失、易位等畸变。T显带是R显带的亚类,因为特别地着色在端粒而称为T显带。 2实验方法 手工显带法 3实验原理 端粒是维持染色体正常复制和上下代传递的三个基本功能单位之一。它的功能包括确保染色体末端的正常复制;防止断裂的DNA与染色体末端的重组。它们亦是哺乳动物生殖细胞减数分裂第一次分裂时同源染色体配对的起始部位。每次细胞分裂,染色体丢失其末端的约100核苷酸,此变短的端粒可为细胞提供一有丝分裂的时钟。丢失的端粒序列可经端粒酶的作用逐个加回。T带是R带的最深染部分,必须用特殊的高热处理染色体,然后用Giemsa或与荧光联合染色。 4性能特征 经T显带处理后可见清晰的端粒。 5仪器及耗材 光学显微镜、恒温水浴箱、培养皿、1ml注射器、擦镜

纸、小镊子、未染色的染色体标本片(片龄一周以内)。 6试剂 磷酸盐缓冲(pH6.7),6.2 Giemsa染液(pH5.1),吖啶橙染料 7操作流程 7.1制片 常规外周血法制备的标本 7.2 T显带 7.2.1把染色体玻片标本放在含Giemsa的pH6.7磷酸盐缓冲液中,加热至87-93℃,水浴15分钟。 7.2.2然后浸入0.005%吖啶橙染料染色5-10分钟。 7.2.3蒸馏水中(或上述缓冲液)中染色2分钟。 7.2.4以磷酸盐缓冲液封片。 7.2.5镜检:用荧光显微镜观察(本方法可在吖啶橙染料染色后,用紫外线照射,Giemsa染色得到T带。 8 显带观察 1、4、11和19号染色体短臂的末端显出绿色T带,以8、9、10和17号染色体长臂的端带最为鲜明,5、1 2、14、16、20、21和22号染色体末端也稍显绿色, 3、6、18、X 和Y染色体不显端带。热处理如持续15-25分钟。11号染色体长臂近侧段和19号染色体短臂近侧段,以及22号染色体长臂近侧段均显示典型的中间绿带。此法特别用于识别22

医院细胞遗传室人淋巴细胞培养及染色体制备作业指导书

医院细胞遗传室人淋巴细胞培养及染色体制备作业指导书 1目的 规范外周血标本细胞培养及染色体制备过程,为临床外周血淋巴细胞染色体核型分析可靠性提供质量保证。 2测试方法 密闭式培养/手工收获 3测试原理 外周血中的淋巴细胞几乎都是处在G0期或G1期,一般情况下是不分裂的。当在培养基中加入植物血凝素(phytohemagglutinin PHA)时,这种小淋巴细胞受到刺激后转化为淋巴母细胞,并开始进行有丝分裂。经过短期培养后,用秋水仙素处理就可获得大量中期分裂相的细胞,制片后可以清楚地对染色体进行观察与分析。 4性能特征 经G显带处理后可见300-550条显带。 5.样本特征及受检者准备 外周血用5ml灭菌注射器吸取注射用肝素(6250U/ml)0.05 ml湿润管壁。消毒皮肤,于肘静脉采血约5ml,立即送检。 6试剂 人体外周血淋巴细胞培养基(必须具备三证),秋水仙

素:浓度20μg/ml低渗液:0.075mol/L的KCl溶液,卡诺固定液 7试剂与耗材 超净工作台、待检标本、酒精灯,烧杯,天平,离心机,恒温培养箱,冰盒,载玻片,玻片盒,光学显微镜,灭菌注射器(5ml),离心管,无菌吸管,量筒,培养瓶,试剂瓶等。8操作程序 8.1淋巴细胞培养与处理 8.1.1取血:外周血用5ml灭菌注射器吸取注射用肝素(6250U/ml)0.05 ml湿润管壁。消毒皮肤,于肘静脉采血约5ml。在酒精灯火焰旁,向培养瓶内人体外周血淋巴细胞培养基中接种,外周血每瓶0.3-0.5ml(用5ml的注射器的7号黑色针头垂直滴加;男:G带:1线28滴,2线30滴;女性多种2滴)。接种后轻轻水平摇动几次混匀。 8.1.2细胞培养:直立于培养箱内密闭式培养箱培养66-72小时。外周血淋巴细胞培养环境的温度为37ºC±0.5ºC,且一定要以温箱内部温度为准,每隔24小时左右轻摇1次,以促进细胞生长增殖; 8.1.3秋水仙素处理:培养终止前在培养基中加入浓度为20μg/ml的秋水仙素0.01-0.02ml(用1ml注射器针头垂直滴加2~3滴),使最终浓度为0.04-0.08μg/ml,37ºC±0.5ºC 培养箱中处理4小时;

医院细胞遗传室实体瘤细胞培养及染色体制备作业指导书

医院细胞遗传室实体瘤细胞培养及染色体制备作业指导书 1目的 规范实体瘤细胞培养与染色体制备过程,为临床实体瘤细胞染色体核型分析可靠性提供质量保证。 2测定方法 CO2培养/手工收获 3测定原理 患者外周血培养细胞主要说明全身染色体状况,而不能说明肿瘤标本的染色体改变,因此通过对实体瘤细胞培养可获得大量的肿瘤细胞,再用秋水仙素处理就可获得大量中期分裂相的细胞,制片后可以清楚地对染色体进行观察。 4性能特征 经G显带处理后可见300-550条显带。 5仪器与耗材 酒精灯,烧杯,天平,离心机,恒温培养箱,冰盒,载玻片,玻片盒,光学显微镜,灭菌注射器(5ml),离心管,无菌吸管,量筒,培养瓶,试剂瓶,眼科镊,眼科剪,牙科探针,一次性平皿等。 6试剂 6.1 100ml DMEM含10%血清培养基

6.2 RPMI-1640含10%血清培养基 6.3秋水仙素浓度:20μg/ml 6.4低渗液:0.075mol/L的KCl溶液 6.5卡诺固定液 6.5 0.25% EDTA-trypsin 6.7生理盐水 6.8胶原酶Ⅳ1mg / 1mlDMEM 7操作步骤 7.1短期培养法 7.1.1取肿瘤组织中肿瘤细胞分布较多的部分。 7.1.2在无菌条件下,将肿瘤组织放入玻璃平皿中,用含400U/ml双抗的生理盐水反复冲洗肿瘤组织2-3次以去除血液,然后吸净生理盐水。 7.1.3在一次性平皿中用眼科手术剪将组织剪成1-2mm3小块,放入装有25 ml组织消化液的50ml一次性离心管中。 7.1.4.消化:空气摇床,200rpm,37℃ 20-40min。 7.1.5将50ml一次性离心管中的组织溶液装入离心管,离心,1000rpm,10min。 7.1.6去上清,加入20ml PBS,打匀。 7.1.7离心,1000rpm,10min。 7.1.8去上清,加入20 ml PBS,打匀。

医院细胞遗传室外周血淋巴细胞建株作业指导书

医院细胞遗传室外周血淋巴细胞建株作业指导书 1目的规范外周血淋巴细胞建株操作过程,通过建立永生化大 量增殖的类淋巴母细胞系,为保存家族性疾病家系成员特有的基因组资源及临床研究奠定物质基础。 2方法 EB病毒转化 3原理 3.1环孢霉素(CYA是一种能在G0-G1期之间选择性地抑制T淋巴细胞RNA聚合酶II的免疫抑制剂,与EBV同时加入时可有效地阻止T淋巴细胞对EBV的应答反应,防止已转化的B 淋巴细胞受T 淋巴细胞攻击而退化。 3.2EB病毒一般感染B淋巴细胞,通过受体CD21进入宿主细胞后可自行环化以游离体的形式长期存在于宿主细胞体内,形成潜伏感染。EB病毒潜伏感染人外周血B淋巴细胞后可活化B淋巴细胞,促进静息期的B细胞转化为永生化大量增殖的类淋巴母细胞系(LCL)。 4实验性能 4.1EBV转化结果 转化培养1 周后,倒置显微镜下观察可见聚集的细胞团块,细胞透明发亮,体积明显增大,细胞外壁有不规则毛刺 状突起,即为淋巴母细胞样B细胞;3周后,镜下可见转化

细胞克隆明显增多;1 个月以后,细胞增殖旺盛,形成生长密集的大克隆,标志转化成功。 4.2冻存细胞复苏后生长情况 分别于冻存10 d 、1 个月、3 个月后进行了复苏,所有冻存后的细胞复苏成功率都为100%,复苏后3d 即可传代培养,镜下观察细胞形态正常,所有细胞株依然保持旺盛的增殖特性,表明成功获得永生细胞株。 4.3细胞生物学特性 4.3.1染色体核型分析:采用染色体核型分析技术比较转化 后永生细胞与来自同•个体新鲜外周血淋巴细胞染色体的G 带,未发现有任何变异,表明转化后的B 淋巴细胞保留了正常的染色体核型,未发生畸变,即保留了原有细胞的遗传特性。 4.3.2细胞表型分析:转化后的细胞经荧光抗体CD3/CD19。染色,用流式细胞仪分析,结果100%表达成熟B 淋巴细胞 CD19。 5样本类型及受检者准备 在无菌条件下采集静脉血3ml(肝素抗凝,空腹为宜),立即送至实验室。 6仪器及耗材 离心机,CO2培养箱,离心管(15ml, 50ml), 10ml吸管,电动

新生儿及儿童基因检测--作业指导书

新生儿及儿童基因检测 作业指导书 一、产品简介 新生儿及儿童基因检测,首先利用宝宝的口腔拭子样本提取DNA,再利用目标区域捕获技术,捕获基因组DNA中的目标区域(72种遗传病和20种药物敏感相关基因\20种个体特征相关位点),然后采用高通量测序技术和生物信息学分析技术,获取目标区域的基因变异信息,对宝宝患有这72种常见遗传病风险和20种儿童药物的敏感性进行评估和提示,同时还可对宝宝的成长个体特征等进行检测与预测。本检测采用全球领先的高通量测序技术,准确性高达99.9%。 二、产品系列

三、产品意义 BabyFirst-健康 •虽然每个孕妈妈,在怀孕期间都会接受一系列的产前检查,避免生出具有遗传缺陷的宝宝,但是,在现有的医疗水平下,很多遗传疾病并不能通过产前的检测技术发现。 •每个孩子在出生后,也会接受一系列的检测,来保障孩子的健康。但是,医院传统的检查,只能发现已经具有临床症状的问题,对于看上去很健康,但具有隐匿疾病风险的孩子,传统的技术并不能及时发现。 •我国每年有90万出生缺陷患儿出生,70%以上在出生时并没有临床症状。而其中很多遗传疾病,如果能在症状表现出来之前,早发现、早诊断、早治疗,可以最大程度的保障孩子的生存和生活质量的。如果不能及时发现,对孩子身体、智力造成的损伤,往往是不可逆的。比如,苯丙酮尿症的患儿,如果早期发现,通过饮食控制,孩子智力可以达到正常人水平,而如果未能及时发现、治疗,通常会造成智力低下。 BabyFirst-健康,通过分析宝宝DNA数据,让宝爸宝妈知晓宝宝是否会患遗传疾病,做到未雨绸缪,避免病情延误造成的身体和智力的损害。 BabyFirst-用药 •不同个体对药物的反应差异,与药物代谢酶、转运酶及药物作用靶点蛋白的基因变异密切相关。 •部分患者在药物治疗后效果不佳或者无效,部分患者由于基因突变,对某种药物出现不良反应,甚至危及生命。 BabyFirst-用药,通过对20种药物基因组的检测,提供20种药物的用药指导,保证宝宝用药安全又有效。 BabyFirst-成长

北京市A 卷 PCR 考试 2018年第二期临床基因扩增检验实验室规范化培训班理论考试

北京市A 卷2018年第二期临床基因扩增检验实验室规范化培训班理论考试 一.填空(每空0.5分,共15分) 1. 为加强医疗机构临床基因扩增实验室规范化管理,卫生部于2010年发布《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》,北京市卫生局为做好实验室备案工作,于2012年发布了《北京市医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审核暂行规定》。 2. 申请设置临床PCR检测实验室应当进行备案,提供的材料包括:《医疗机构执业许可证》、拟设置基因扩增检验实验室的医疗机构对临床基因扩增检验的需求情况拟设基因扩增检验实验室的设置平面图;实验室负责人简历表;实验室工作人员一览表;主要仪器设备一览表、拟开展的临床基因扩增检验项目、实验室质量管理程序文件和作业指导书目录、检验报告样单、北京市医疗机构临床基因扩增检验实验室自查/审核表和其他相关材料。医疗机构医学检验科应当设有细胞分子遗传学专业诊疗科目。 3. 室内质量控制(IQC)监测和控制的是实验室测定的精密度,而室间质量评价则通过对不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。 4. 1977年,Sanger等发明的和Gilbert等发明的末端合成终止法(sanger法) 标志着第一代测序技术的诞生。 5. 核酸包括两种类型:脱氧核糖核酸和核糖核酸,二者的主要区别为:前者由ATGC四种碱基组成,而后者由AUGC四种碱基组成。 6. 根据遗传中心法则,遗传信息的流动方向为DNA;RNA;蛋白质。 1,7. 普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区:试剂储存和准备区;标本制备区;扩增区;扩增产物分析区。 2,8. 提纯的核酸样品可根据A260nm波长的光吸收值算出其含量,通过计算A260nm/A280m波长光吸收比值计算出其纯度。 9. 基因扩增实验室负责人应具有相关专业专业技术职称任职资格,技术负责人应具有相关专业(高级)学位,并有5年以上相关专业的工作经历。 10. cfDNA的中文名称是游离脱氧核糖核酸,ctDNA的中文名称是循环脱氧核糖核酸。

法医DNA实验室应用范围

法医DNA实验室应用范围 第一篇:法医DNA实验室应用范围 法医DNA实验室应用范围 目前全世界有120多个国家和地区应用DNA技术办案,每年有数以万计的DNA证据被法庭采用,DNA技术已成为与犯罪作斗争和解决亲权争议非常重要的工具。我国自1987年开始进行法医DNA分析研究以来,公安部物证鉴定中心、各省市及部分地区刑科所等单位均成功的运用DNA分析技术,在实际办案中取得了很大的成果,法医DNA分析特别是STR-PCR技术越来越受到重视。 法医DNA分析可用于以下各类案件: 1、强奸及强奸杀人案件 DNA分析技术可以根据女性阴道分泌物与男性精子结构上的差异将二者分离,只提取纯精子。DNA,而不必受阴道分泌物的影响。将现场遗留的混合斑中精子DNA分析结果与嫌疑人DNA检验分析结果比较,即使轮奸案,通过对比,也可以得到正确结论。 2、凶杀案 凶杀现场有价值的物证常常是被害人或犯人留下的血迹,通过与被害人或嫌疑人血DNA检验结果比较看是否一致而论断。 3、碎尸案同一认定 根据不同碎块 DNA检验图谱是否一致,判断是否为同一个体。 4、强奸致孕及亲子鉴定 根据孟德尔遗传规律,子代谱带分别来自双亲,据此可以准确的认定嫌疑父亲是否为生物学(亲生)父亲。 5、侦破拐卖儿童案件(打拐) 应用亲子鉴定和电脑网络技术,可在全国范围内迅速鉴别来历不明的儿童身份及家庭资料。 6、无名尸源鉴定 应用亲权鉴定和电脑网络技术,根据尸体DNA检验图谱与失踪亲属DNA图谱作对比,可在全国范围内迅速鉴别死者身份,为死因判断、

案件侦破提供重要线索。 7、连续犯罪案检验 主要是针对某一地区附近连续发生强奸或奸杀案件,比较阴棉或其他物证上案犯留下的精虫DNA谱带是否一致,判断几个案子是否为一个罪犯所为。 8、性别鉴定 DNA分析技术可对各类生物检材作性别鉴定,有y-染色体斑点杂交、PCR扩增y-染色体特异片段,以及PCR扩增x、y两条染色体特异性片段等方法。 9、重大灾难事故等 如交通事故案件,发生车祸后车上血迹或组织 DNA 检验结果与被害人DNA检验图谱比较,可以分析该车是否为肇事车。也可以为空难、重大火灾、爆炸案等其他事故提供尸源鉴定。 10、移民、继承权等法律争端 应用 DNA亲权鉴定技术,可为解决诸如移民、继承权等法律争端提供科学依据。 11、建立法庭科学 DNA数据库 应用DNA技术进行个体识别和电脑网络技术,可在全国范围内进行串并案处理、迅速鉴别罪犯身份,为快速破案、缉捕罪犯提供有力保障,特别有利于打击流窜作案、重复犯罪等罪犯,也有助于重大、恶性案件的侦破工作。同时,对潜在的犯罪分子起着一定的威慑作用。第二篇:法医物证DNA实验室配置和操作规范 法医物证DNA实验室配置和操作规范 为加强法医物证DNA实验室管理,保证法医物证鉴定质量,确保鉴定结果的科学性和可靠性,特制订本规范,对法医物证实验室配置、鉴定受理、样品检验等方面进行规定。 一、法医物证DNA实验室配置要求 (一)DNA实验室区域配置法医物证实验室总体布局应考虑潜在的样本污染风险,降低对检验结果的影响和对人员的危害。实验室各区域应独立且满足单向流程要求,区域内设备、器物应有明确的标记,

高级卫生专业资格正高副高临床医学检验专业资格(正高副高)模拟题2021年(163)_真题-无答案

高级卫生专业资格(正高副高)临床医学检验专业资格(正高 副高)模拟题2021年(163) (总分97.5,考试时间120分钟) A1/A2题型 1. 以下哪种方法不作为基因诊断的常用技术( ) A. 基因芯片 B. 核酸分子杂交 C. PCR D. 基因测序 E. 基因失活 2. 在基因治疗时,目前下列哪一种细胞不允许作为靶细胞( ) A. 淋巴细胞 B. 肿瘤细胞 C. 生殖细胞 D. 肝细胞 E. 造血细胞 3. 限制性片段长度多态性(RFLP)是由于( ) A. 碱基改变发生在内含子上 B. 碱基改变发生在外显子上 C. 碱基改变发生在增强子上 D. 碱基改变发生在微卫星上 E. 碱基改变发生在酶切位点上 4. 糖类对于人体最主要的生理功能是( ) A. 细胞膜组分 B. 信息传递 C. 提供能量 D. 免疫作用 E. 软骨的基质 5. 与密码子ACG相对应的反密码子是( ) A. UGC B. TCG C. GCA D. CGU E. TGC 6. 能出现在天然蛋白质分子中但是没有遗传密码的氨基酸是( )

B. 甲硫氨酸 C. 羟脯氨酸 D. 谷氨酰胺 E. 色氨酸 7. 检验报告中,可以不包括的基本信息是 A. 原始样品类型 B. 患者的唯一标识 C. 检验申请者的姓名 D. 检验当日的质控结果 E. 检验项目及结果 8. 3位患者检测补体3(C3)结果分别为A0.75g/L,B1.22g/L,C1.85g/L(参考区间为0.90~1.80g/L),已知这3个测得值的标准不确定度均是0.05,取包含因子K=2,则3位患者结果与参考区间相比 A. A患者结果偏低;B患者结果在参考区向内;C患者结果无法确定是否正常 B. A患者结果无法确定是否正常;B患者结果在参考区间内;C患者结果偏高 C. A患者结果偏低;B患者结果在参考区间内;C患者结果在参考区间内 D. A患者结果偏低;B患者结果在参考区间内;C患者结果偏高 E. A患者结果无法确定是否正常;B患者结果偏高;C患者结果在参考区间内 9. 关于常染色体显性遗传的遗传特点,说法正确的是 A. 男性患者比女性患者少 B. 男性患者比女性患者多 C. 患者父母可以表型正常 D. 患者父母必有一名是患者 E. 疾病在家系中的传递是不连续的 10. 能编码具有酪氨酸磷酸化的蛋白激酶活性的癌基因是( ) A. MYB B. RAS C. SRC D. MYC E. SIS 11. 下列技术中作为基因诊断方法最准确的是( ) A. PCR B. RFLP分析 C. 核酸分子杂交 D. 等位基因特异性寡核苷酸杂交法 E. 基因测序 12. 目前下列哪类疾病用基因治疗效果最确切( ) A. 单基因遗传病 B. 多基因遗传病 C. 恶性肿瘤 D. 心血管疾病 E. 感染性疾病 13. 质谱技术常用于以下哪项研究( )

流式细胞仪标准操作规程

流式细胞仪标准操作规程 ××医院检验科临床免疫室作业指导书文件编号:××-JYK-MY-×××版本:生效日期:共页第页 1.目的 建立规范标准的××型流式细胞仪操作程序确保流式细胞检测结果准确可靠 2.仪器名称及型号 ××(品牌)××(型号)流式细胞仪。 3.应用范围 适用于免疫组经授权的检验技术人员。 4.仪器简介和测试原理 流式细胞仪可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号,工作在测量区进行。所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射会向立体角为2x的整个空间散射光线,散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关,因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射,因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变,其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关,还跟散射角及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。因此流式细胞仪综合了激光技术、计算机技术、半导体技术、流体力学、细胞化学等各门学科。 5.开展项目 包括:常规免疫功能检测、细胞周期检测、细胞凋亡检测、免疫细胞分型、造血干细胞检 6.仪器环境要求 无尘、通风良好的环境,无直接日照。温度:18~25℃,温度的改变应该<2℃/h。室内湿度:30%~80%。 7.操作规程 7.1·设备每日开机程序:开启稳压电源、变压器,打开流式细胞仪电源。开启其他周边配备电源,如打印机,开启计算机。确认鞘液筒有八分满,废液桶近似空的,桶盖是旋紧的;所有管线及管路装置连接通畅,无扭曲、折叠。将气压阀方向调在加压位置,用手感觉鞘液桶在慢慢鼓起。排除液流过滤器中的气泡。等待机器预热5~10min后可开始实验。 7.2·设备质控程序 7.2.1试剂准备:取试剂盒中的 Unlabeled试剂,充分混匀,加一滴到装有1ml鞘液的试管中,混匀,标记为“Unlabeled”。取“FITC、PE、PerCP、Unlabeled”试剂,充分混匀,各加一滴到第二支装有3ml鞘液的试管中,混匀,标记为“Mixed”。 7.2.2上机操作 7.2.2.1按电脑桌面的“Facscomp”进入质控程序。在出现的“Sign in”窗口中输入操作者姓名、单位、领导姓名等相关信息,计算机将保存这些信息;单击“Accept”。在实验选项中,选择“Iyse/No-Wash(INW)”:免洗程序。 7.2.2.2在“Calibrite beads lot ids”中,根据每种颜色的 Beads所对应的“Lot Ids”,输入编号,此编号在“Calibrate beads”试剂盒内,打开新买的试剂盒,里面有一张橙色胶纸,取出贴在试剂盒的背面,标题是“Calibrate beads TM 3 Batch NO”,选择“Facs Flow Sheath”下的编号(右侧的编号)。APC Lot ID此栏不能空,即使是

医院检验科门诊常规检查作业指导书

作 业 指 导 书 XXXX医院检验科·门诊·

目录 采集末梢血(MYCH/DL-5-SC-01)------------------------------------------------1 采集静脉血(MYCH/DL-5-SC-02)------------------------------------------------2 尿沉渣检查(MYCH/DL-5-SC-03)------------------------------------------------5 尿液化学成份检查(MYCH/DL-5-SC-04)-----------------------------------------10 粪便常规(MYCH/DL-5-SC-05)-------------------------------------------------14 粪便隐血试验(MYCH/DL-5-SC-06)---------------------------------------------16 尿液蛋白定性(磺柳酸法)(MYCH/DL-5-SC-07)-----------------------------------19 尿液蛋白定性(加热醋酸法)(MYCH/DL-5-SC-08)---------------------------------20 尿本周氏蛋白定性(MYCH/DL-5-SC-09)-----------------------------------------22 尿液HCG定性(MYCH/DL-5-SC-10)---------------------------------------------24 RBC(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-11)----------------------------------------------25 Hb(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-12)-----------------------------------------------29 MCV(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-13)----------------------------------------------33 MCH(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-14)----------------------------------------------34 MCHC(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-15)---------------------------------------------36 RDW(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-16)----------------------------------------------37 WBC(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-17)----------------------------------------------39 WBC分类(三分群)(MYCH/DL-5-SC-18)-----------------------------------------43 ABO血型鉴定(MYCH/DL-5-SC-19)---------------------------------------------46 PLT(仪器法)(MYCH/DL-5-SC-20)----------------------------------------------49 脑脊液常规(MYCH/DL-5-SC-21)-----------------------------------------------51 浆膜腔积液常规(MYCH/DL-5-SC-22)-------------------------------------------55 阴道分泌物常规(MYCH/DL-5-SC-23)-------------------------------------------57 前列腺常规(MYCH/DL-5-SC-24)-----------------------------------------------59 WBC(手工法)(MYCH/DL-5-SC-25)----------------------------------------------60 PLT(手工法)(MYCH/DL-5-SC-26)----------------------------------------------62 幽门螺杆菌抗体检测(MYCH/DL-5-SC-27)---------------------------------------64 精液常规(MYCH/DL-5-SC-28)-------------------------------------------------68

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