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分子生物学试卷1

一、 单项选择题(共10小题,每题1.5分,共计15分)
1、关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了哪一项外都是正确的: ( B )
A. 只有存在DNA时,RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的形成。
B. 在合成过程中,RNA聚合酶需要一个引物。
C. RNA链的延长方向是5’→ 3’。
D. 在多数情况下,只有一条DNA链作为模板。
2、紫外线对DNA的损伤主要是: ( B )
A. 引起碱基置换 B. 形成嘧啶二聚体 C. 导致碱基缺失 D. 发生碱基插入
3、关于逆转录作用的错误叙述是: ( C )
A. 以RNA为模板合成DNA B. 需要一个具有3’-OH末端的引物
C. 以5’→ 3’方向合成,也能3’→ 5’方向合成 D. 以dNTP为底物
4、下列哪几种突变最可能是致命的: ( D )
A. 腺嘌呤取代胞嘧啶 B. 胞嘧啶取代尿嘧啶
C. 缺失三个核苷酸 D. 插入二个核苷酸
5、DNA以半保留方式复制,如果一个双链均有放射性标记的DNA分子,在无放射性标记的环境中经过两轮复制。其产物分子的放射性情况如何: ( A )
A.其中一半没有放射性 B. 都有放射性
C.半数分子的两条链都有放射性 D. 都不含放射性
6、RNA与DNA生物合成相同的是: ( D )
A. 需RNA引物 B. 以3’→ 5’方向DNA为模板
C. 两条模板链同时合成
D. 新链生成方向5’→3’
7、就当前认识,基因表达调控最主要的环节是: ( B )
A、DNA复制 B、RNA的转录
C、RNA转录后加工 D、翻译及翻译后加工
8、tRNA的作用是: ( B )
A. 将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上 B. 把氨基酸带到mRNA位置上
C. 将mRNA接到核糖体上 D. 增加氨基酸的有效浓度
9、与5’-CAGCT-3’互补的DNA序列是: ( A )
A.5’-AGCTG-3’ B.5’-GTCGA-3’
C. 5’-GUCGA-3’ D.5’-AGCUG-3’
10、插入序列(IS)编码: ( A )
A. 转座酶 B. 逆转录酶 C. DNA聚合酶 D. 核糖核酸酶
二、 名词解释(共6小题,每题4分,共计24分)
1、RACE技术
答:RACE(rapid-amplification of cDNA ends)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术。RACE是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段,通过往两端延伸扩增从而获得完整的3'端和5'端的方法。

2. 转座子 (transposon)
答:转座子是存在于染色体DNA上可自

主复制和位移的基本单位。最简单的转座子不含有任何宿主基因而常被称为插入序列(IS),它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。转座(因)子是基因组中一段可移动的DNA序列,可以通过切割、重新整合等一系列过程从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置。

3.基因组DNA文库
答:指将某生物的全部基因组DNA用限制性内切酶或机械力量切割成一定长度的DNA片段,再与适合的载体在体外重组并转化相应的宿主细胞获得的所有阳性菌落。

4.原位杂交
答:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
5.密码的简并性
答:一个氨基酸由一个以上的三联体密码编码的现象叫做密码子的简并性。其中的密码就叫做简并密码子。

6.顺式作用元件
答:顺式作用元件(cis-actingelement)存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等,它们的作用是参与基因表达的调控。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,要与反式作用因子相互作用而起作用。
三、简答题(共6小题,每题8分,共计48分)
1、真核生物DNA中的增强子具有哪些特点?
答:增强子(enhancer)指增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列。增强子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于基因的5’端,也可位于基因的3’端,有的还可位于基因的内含子中。增强子的作用同增强子的取向(5’一3’或3’一5’)无关,甚至远离靶基因达几千kb也仍有增强作用。
增强子可分为细胞专一性增强子和诱导性增强子两类:①组织和细胞专一性增强子。②诱导性增强子。这种增强子的活性通常要有特定的启动子参与。
增强子能大大增强启动子的活性。增强子对于启动子的位置不固定,而能有很大的变动;它能在两个方向产生相作用。一个增强子并不限于促进某一特殊启动子的转录,它能刺激在它附近的任一启动子。
增强子具有组织特异性。

2、简述真核生物基因组的特点。
答:1)真核生物的染色体有组蛋白和非组蛋白结合;
2)真核生物有断裂基因,即有内含子
3)转录产物是单顺反子
4)真核生物基因组存在大量的非编码序列。包括:内含子和外显子、基因家族和假基因、重复DNA序列。
5)真核生物的基因组的重复顺序不但大量,而且存在复杂谱系。

3. 阐述依赖ρ因子的转录终止机制。
答:ρ因子是一种分子量为46kDa的蛋白质,以六聚体为活性形式。依赖

ρ因子的终止位点,未发现有特殊的DNA序列,但ρ因子能与转录中的RNA结合。ρ因子的六聚体被约70~80 nt的RNA包绕,激活ρ因子的ATP酶(ATPase)活性,并向RNA的3’端滑动,滑至RNA聚合酶附近时,RNA聚合酶暂停聚合活性,使RNA∶DNA杂化链解链,转录的RNA释放出来而终止转录。

4、新合成的肽链通常经过哪些加工才能变成有功能的蛋白质?
答:1) 肽链的剪接
(1) N端fMet或Met的切除
(2) 信号序列的切除
(3)切除新生肽链中非功能片段
2)二硫键的形成
3)特定氨基酸的修饰
氨基酸侧链的修饰作用包括泛素化、磷酸化、糖基化、甲基化 、乙基化、羟基化和羧基化等。

5、阐述乳糖操纵子的调控机制
答:乳糖操控子是大肠杆菌中控制β半乳糖苷酶诱导合成的操纵子。包括调控元件P(启动子)和O(操纵基因),以及结构基因lacZ(编码半乳糖苷酶)、lacY(编码通透酶)和lacA(编码硫代半乳糖苷转乙酰基酶)。
1)无乳糖时,调节基因lacI 编码阻遏蛋白,与操纵基因O 结合后抑制结构基因转录,不产生代谢乳糖的酶。
2)只有乳糖存在时,乳糖可与lac阻遏蛋白结合,而使阻遏蛋白不与操纵基因结合,诱导结构基因转录,代谢乳糖的酶产生以代谢乳糖。
3)葡萄糖和乳糖同时存在时,葡萄糖的降解产物能降低cAMP含量,影响CAP与启动基因结合,抑制结构基因转录,抑制代谢乳糖的酶产生。
补充:CAP:降解物基因活性蛋白,又称cAMP受体蛋白,这个蛋白先与cAMP结合,再与启动基因结合。它与启动基因结合时能促进RNA聚合酶与启动基因结合,促进结构基因转录

6、阐述酵母双杂交的原理
答:酵母双杂交系统由 Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立。典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域和转录激活结构域。前者可识别DNA上的特异序列,并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游, 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用, 启动它所调节的基因的转录。
二个结构域不但可在其连接区适当部位打开, 仍具有各自的功能。而且不同两结构域可重建发挥转录激活作用。酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。
四、论述题(共1小题,共计13分)
1、当大肠杆菌培养在含色氨酸丰富的培养基时,细胞内的色氨酸合成酶的浓度会降低,请用所掌握的基因表达调控的知识解释此现象。

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