灵芝多糖
灵芝属真菌具有很高的药用价值从而得到广泛的研究与应用,而多糖类化合物是灵芝属真菌的主要化学成分之一。灵芝多糖结构如分子量、单糖组成和糖苷键类型等，对其活性影响很大，本文列举了灵芝多糖结构通用的检测方法。已有实验证实，灵芝多糖的生物保健功能主要体现在降血糖、降血脂、抗肿瘤、提高免疫力和抗氧化方面。
灵芝是担子菌门担子菌纲多孔菌科灵芝属药用真菌，古代就认为其有扶正固本、滋补强壮的功效，对其药性十分推崇。灵芝类所含化学成分复杂,且因所用菌种培养方法、提取方法等不同而异.研究灵芝类的化学成分的目的,在于了解和比较灵芝属不同品种及同一品种的不同发育阶段(如子实体、菌丝体、孢子体)所含的化学成分,通过药理及临床研究确定其有效成分或有效部分.目前研究较多的灵芝化学成分主要有:三萜类化合物、多糖类、核苷类、甾醇类、生物碱类、呋喃衍生物、氨基酸多肽类、无机元素、脂肪酸等现代科学检测表明，灵芝在免疫系统的调节、通过增强宿主免疫调节功能达到抗肿瘤作用、抗病毒作用、通过提高氧化酶活性而清除体内自由基达到抗衰老的作用、降血脂等方面有着极其重要的医学作用。随着近年来对灵芝研究的不断深入，发现灵芝多糖是灵芝的主要活性物质之一，其重要性不言而喻。本文综述了近年来国内外对灵芝多糖的主要研究进展。
灵芝多糖的结构
如同其他的生物活性大分子，灵芝多糖的生物活性依赖于化学结构，因此，要研究灵芝多糖生物活性的机理，不可避免的要研究其化学结构。对灵芝多糖的化学结构的研究，主要集中于其单糖的组成、多糖分子量范围、单糖连接方式等方面。
近年来，随着研究的不断深入，对灵芝多糖的化学结构已经有了一定的了解。虽然灵芝多糖化学结构由于灵芝种类的不同而有所差异，但其化学结构的某些方面是固定不变的。
灵芝多糖的组成
灵芝多糖是由肽多糖、葡萄糖、杂多糖等多糖均一体组成的混合物,是灵芝中的主要有效成分[9].从构成来看,灵芝多糖大多为杂多糖,即除葡萄糖基外,还含有少量D-阿拉伯糖、D-木糖、D-半乳糖、D-甘露糖、L-岩藻糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖等单糖。
目前已分离到的灵芝多糖有200多种,其中大部分为B-型的葡聚糖,多存在于灵芝细胞壁内壁中,液体培养的发酵液和固体培养的培养基中也有灵芝菌丝分泌的胞外多糖.
检测灵芝多糖化学结构的实验方法
灵芝多糖的分子量
对于灵芝多糖的分子量测量，一般采用凝胶过滤层析的方式测定。在实验前，先将已知分子量的物质通过凝胶层析柱，根据分子量大小的不同，通过凝胶的
时间有所不同，可以得到一个关于分子量大小线性方程。通过收集到的灵芝多糖通过层析柱的时间或洗脱体积不同，可以得到准确的分子量大小。
在Ye 等[4]利用 HPLC 的方法，利用Dextrans 标准品T-5、T-12、T-25、T-50、T-80、T-150 和 T-270 做出线性方程，得出分离到的多糖分子量为1.2 × 104 D。Li等[5]利用 HPSEC 的方法，同样用 Dextrans 标准品做出线性方程，最终测得分离到得灵芝多糖分子量。
灵芝多糖结构的单糖组成
目前应用于多糖的单糖组成研究分析方法主要有薄层色谱法、高效液相色谱法及衍生化气相色谱法等方法，其中衍生化气相色谱法是目前多糖分析中最常用的手段。无论哪种方法，都要先将多糖水解，水解的方法主要有稀硫酸水解和三氟乙酸水解。在上述研究方法中，薄层色谱法操作简单，但是对于含量较少的单糖作用不明显，可用于初步检测；HPLC 法的使用受到单糖在紫外光吸收较弱的缺点的影响，需要先经过衍生化或使用蒸发光散色检测器，因此其应用范围有限；多糖的组成分析多采用气相色谱法，由于单糖的挥发性很低，所以在应用气相色谱法对多糖的单糖组成进行分析时，必须首先要进行衍生化处理以增加其挥发性，常用的衍生化处理方法有硅烷化法和乙酰化法。
Ye 等[ 4 ]的研究中，采用乙酰衍生化的方法，先将多糖用三氟乙酸水解后乙酰化，利用高效离子交换层析，测得单糖的种类和数量。王赛贞等[6 ]在研究中，
将多糖经三氟乙酸水解后，用1- 苯基-3- 甲基-5- 吡啶啉酮(PMP)衍生化，在高效液相 245nm 紫外检测，首次发现了多糖活性成分中含有核糖。Guan 等[7 -8 ]在研究中，水解多糖使用的是特异性酶，如阿拉伯糖酶、木糖酶等，然后将水解得到的单糖由 PMP 衍生化，在分别经过HPLC 和 HPSEC，最终完成单糖的识别。糖苷键分析
灵芝多糖中，单糖之间以糖苷键形式连接，其对多糖分子的生物活性有着重要意义。目前常用的糖苷键分析方法主要有高碘酸氧化和Smith 降解、甲基化部分酸水解、红外光谱，核磁共振等分析方法。高碘酸氧化是通过一系列的氧化还原作用，使最终的水解产物通过紫外检测，得出糖苷键的类型是 l → 4、1 → 6、1 → 2 中的哪种。甲基化法先将多糖衍生化，在与气相色谱、质谱结合使用可以准确知道组成多糖的各单糖种类、比例和各单糖的连接位置。部分酸水解是将多糖分解为一个一个容易检测的小片段，并且可以在特殊糖苷键处断裂，从而推断出多糖的大概结构。在赵桂敏等[9 ]的研究中，就综合使用了这几种方法来测定提取的多糖结构，最终确定了多糖 SGL2 Ⅱ22 由葡萄糖和半乳糖组成，为少分支结构，由 1 → 3 连接和 1 → 6 连接的葡萄糖构成主链，部分 1 → 6 连接葡萄糖在 3 位或4 位有分支，侧链为 1 → 4 连接的半乳糖，分支末端残
基为葡萄糖
灵芝多糖的生物学功能
防辐射及升高白细胞作用[15]GLP5具有抗60Co辐射及CPM引起的小鼠白细胞下降,和防止小鼠骨髓DNA含量降低的作用,同时有保护小鼠或CMP引起的胸腺缩小.此外,加不同剂量灵芝多糖后均对细胞增殖有抑制作用,从而使受损细胞不能增殖,实现抗辐射作用.
抗肿瘤作用[16-18]
肿瘤的发生与机体的免疫状态有着密切的关系.免疫监视理论认为机体免疫系统通过细胞免疫机能识别肿瘤细胞.灵芝多糖能增强巨噬细胞与NK细胞的活性,使IL-1、TNF多糖的分泌增强,并使IL-2的释放增加.这些都能提高机体的免疫监视功能,从而减少肿瘤的发生.灵芝具有抗肿瘤作用,而灵芝多糖是其抗肿瘤作用的主要有效成分,其抗肿瘤作用机制可能是宿主中介性的,即通过增强机体免疫功能而实现.
调节血糖作用[20,21]
灵芝多糖能直接促进胰岛B细胞分泌胰岛素.灵芝多糖通过促进胰岛素细胞GLUT2蛋白的表达从而有助于葡萄糖转运入B细胞,促进葡萄糖的代谢,引起胰岛细胞外Ca2+内流而起到促胰岛素释放的作用.
降血糖
黄智璇等[10 ]研究发现，灵芝多糖对降低血糖有很好的效果。由四氧嘧啶致高血糖小鼠，在高剂量(400mg/kg)灵芝多糖条件下，小鼠血糖浓度为13.53mmol/L，而对照组小鼠血糖浓度为14.68mmol/L，血糖降低7.83%；由去甲肾上腺素致高血糖小鼠，高剂量(400mg/kg)灵芝多糖条件下，小鼠血糖浓度为6.9mmol/L，而对照组小鼠血糖浓度为 8.71mmol/L，血糖降低20.8%。赵晶等[11]除了研究了灵芝多糖对降血糖的作用外，还研究了不同剂量的灵芝多糖随时间对降血糖的作用，发现在200mg/kg以下，血糖随时间的变化很小，但高于 200mg/kg 后，降低血糖效果随时间变化十分明显
降血脂
高血脂症，指血液中一种或几种脂肪成分的增加，如胆固醇、脂蛋白、甘油三酯等，是造成动脉硬化症和心脏病发生的一个重要危险因子。研究显示，灵芝多糖对降血脂有很好的效果。
吴锋等[12]在研究灵芝多糖对血脂的作用时，发现使用灵芝多糖的小鼠的血脂中的胆固醇(TG)和甘油三酯(TC)都有明显降低，而对于脂蛋白，其中高密度脂蛋白(HDL)没有明显的效果，而低密度脂蛋白(LDL)和脂蛋白(LPa)有非常明显的降低。陈伟强等[13 ]发现，在大鼠血清中TG 和 TC 的含量，随灵芝多糖剂量的增加而降低，在灵芝多糖剂量在 400mg/kg 条件下，TC 降低 47%、TG降低
46.87%。
抗衰老作用
灵芝多糖具有多方面免疫功能,不论是非特异免疫功能,还是特异免疫功能,细胞免疫还是体液免疫,正常小鼠还是老年小鼠,均能有效地维持集体的免疫功能,达到抗衰老的目的.灵芝多糖的抗衰老作用与抗自由基氧化的功能是密切相关的,它能阻止自由基损伤,终止脂质过氧化,保护细胞、延缓衰老.[22]灵芝多糖还能促进DNA合成,延长体外传代细胞的分裂代数的能力,推迟衰老的作用.[23]
灵芝多糖的提取方法
发酵产生灵芝多糖，主要包括两个部分，即胞内多糖和胞外多糖。胞外多糖由于直接在发酵液中，所以易于提取。而胞内多糖在细胞壁或细胞间质中，所以需要先破壁，然后将多糖提取出来。所以根据灵芝多糖的物理性质，利用多糖溶于热水或稀碱溶液，就有了热水浸提法和稀碱提取法。这种方法将多糖从细胞中提取出来后，在利用多糖不溶于乙醇等有机溶剂的原理，将多糖沉淀而得到粗多糖。最近，利用超声波促进多糖的提取得到越来越多的应用
灵芝多糖检测方法 1、蒽酮-硫酸法 该法为《中国人民共和国药典》规定方法，其原理是糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物，可与蒽酮试剂缩合而显色，其显色的深浅与灵芝多糖含量呈线性关系。 【对照品溶液的制备】精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品适量，加水制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。 【标准曲线的制备】分布精密吸取对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、和1.2ml，置于10ml具塞试管中，加水至2.0ml，精密加入硫酸蒽酮溶液（精密称取蒽酮0.1g，加80%的硫酸溶液100ml使溶解、摇匀）6ml，摇匀，置水浴中加热15分钟，取出，放入冰浴中冷却15分钟，以相应的试剂为白色，在紫外-可见分光光度计上，于625nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 【供试品溶液的制备】精确称定灵芝粉末1g，置蒸馏瓶中，加水40ml，沸水回流提取1小时，重复1次，两次提取液均转移至100ml容量瓶中，定容，摇匀。取40ml加200ml无水乙醇沉淀，过夜。4000rpm离心20分钟。沉淀定容至50ml，摇匀。 【样品测定】精确量取供试品溶液2ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入硫酸蒽酮溶液6ml”起，依法测定吸光度。 【换算因子的测定】精密称取GL-pp10.3mg与10.4mg，分别置于100ml 容量瓶中加蒸馏水定容至刻度，作为多糖供试液。精密吸取2ml，按照标准曲线项下的方法测定吸光度，计算出多糖溶液中葡萄糖含量的平均值，并计算出换算因子：f=W/CD，式中W为多糖量（ug），C为多糖溶液中葡萄糖含量，D 为多糖的稀释因素。 测定结果为f=2.0428（n=6） 【计算】S=f×n/N×100% S—灵芝子实体中多糖百分含量； n—从标准曲线上读出供试品溶液中多糖浓度（以标准葡萄糖计）； N—供试品溶液浓度； f—换算因子； 2、苯酚-硫酸法
第一讲多糖概述 多糖（Polysaccharides）是自然界含量最丰富的物质之一，广泛存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中，是与人类生活紧密相关的一类生物大分子，对维持生命活动起着重要的作用。 一、多糖的研究历程 核酸、蛋白质和多糖并称为生命三大物质。 核酸、蛋白质研究进程显著快于多糖。（说明原因） 1．生物体内糖的研究历程： 19世纪：认为多糖是能量物质，主要研究多糖的代谢与转化途径； 20世纪：认为多糖是机体的结构物质，主要研究细胞外的基质成分； 21世纪：认为多糖是机体的信息物质，主要研究细胞的信号转导。 2．国内外的研究现状及研究计划 美国：1986年，“糖库计划”； 2001年，“功能糖组学研究计划”，研究蛋白质/糖链—细胞通讯。 日本：1991年，“糖工程前沿计划”； 2002年，“糖链功能1000”计划，研究糖链功能/糖类药物。 欧盟：1994年“欧洲糖类研究开发网络”； “欧盟第四、五、六框架”，研究糖链结构与功能。 中国：跟踪性研究和探索生研究； 急需国家重大科技计划支持。 作为三种生物大分子之一，糖类的研究工作和蛋白质、核酸的研究工作相比，在我国还是一个薄弱环节。现在国际上多糖研究以日本、美国、德国、加拿大处于领先地位，我国多糖的研究起步较晚，经过一个相对寂静的时期之后，自80年代各地的研究如雨后春笋般掀起。 3．糖链与生理病理的关系 （1）与生理、病理的关系 在正常生命过程中，多糖参与细胞分化、胚胎发育和免疫应答； 在病理过程中，多糖参与癌变、感染过程。 （2）在分子内及分子间的作用 分子内：影响蛋白质的折叠、半衰期，并对蛋白质有监护作用。 分子间：具有细胞识别、抗原性和信号转导作用。 二、多糖分类 1．根据组成单糖的类别，多糖可分为: （1）均聚多糖（homopolysaccharides）：指由同一种单糖组成，如淀粉（starch）、纤维素（cellulose）。
灵芝多糖 灵芝属真菌具有很高的药用价值从而得到广泛的研究与应用,而多糖类化合物是灵芝属真菌的主要化学成分之一。灵芝多糖结构如分子量、单糖组成和糖苷键类型等，对其活性影响很大，本文列举了灵芝多糖结构通用的检测方法。已有实验证实，灵芝多糖的生物保健功能主要体现在降血糖、降血脂、抗肿瘤、提高免疫力和抗氧化方面。 灵芝是担子菌门担子菌纲多孔菌科灵芝属药用真菌，古代就认为其有扶正固本、滋补强壮的功效，对其药性十分推崇。灵芝类所含化学成分复杂,且因所用菌种培养方法、提取方法等不同而异.研究灵芝类的化学成分的目的,在于了解和比较灵芝属不同品种及同一品种的不同发育阶段(如子实体、菌丝体、孢子体)所含的化学成分,通过药理及临床研究确定其有效成分或有效部分.目前研究较多的灵芝化学成分主要有:三萜类化合物、多糖类、核苷类、甾醇类、生物碱类、呋喃衍生物、氨基酸多肽类、无机元素、脂肪酸等现代科学检测表明，灵芝在免疫系统的调节、通过增强宿主免疫调节功能达到抗肿瘤作用、抗病毒作用、通过提高氧化酶活性而清除体内自由基达到抗衰老的作用、降血脂等方面有着极其重要的医学作用。随着近年来对灵芝研究的不断深入，发现灵芝多糖是灵芝的主要活性物质之一，其重要性不言而喻。本文综述了近年来国内外对灵芝多糖的主要研究进展。 灵芝多糖的结构 如同其他的生物活性大分子，灵芝多糖的生物活性依赖于化学结构，因此，要研究灵芝多糖生物活性的机理，不可避免的要研究其化学结构。对灵芝多糖的化学结构的研究，主要集中于其单糖的组成、多糖分子量范围、单糖连接方式等方面。 近年来，随着研究的不断深入，对灵芝多糖的化学结构已经有了一定的了解。虽然灵芝多糖化学结构由于灵芝种类的不同而有所差异，但其化学结构的某些方面是固定不变的。 灵芝多糖的组成
灵芝多糖的功能研究 摘要：灵芝多糖是灵芝的主要有效成分，具有多种生理活性与药理作用。本文就近几年来对灵芝多糖在抗氧化、免疫调节、降血糖、降血脂、抗肿瘤活性等方面的研究进行了综述。 关键词：灵芝多糖;抗氧化;免疫调节;降血糖;降血脂;抗肿瘤活性Functions of Ganoderma lucidum polysaccharide Abstract:Ganoderma polysaccharide is uppermost effective component in Ganoderma lucidum,having many physiological activities and pharmacological actions.This paper summarized survey about Ganoderma polysaccharide’s anti-oxidant、immunoregulation、reducing blood glucose and lipid、anti-tumor。 Key words:Ganoderma polysaccharide;anti-oxidant; immunoregulation;reducing blood glucose and lipid;anti-tumor 灵芝多糖是从多孔菌科植物灵芝中提取的多糖类物质,具有多种药理作用,其重要性不言而喻.本文将近年来灵芝多糖主要功能研究进展作一综述。
抗氧化：张志军等[1]对灵芝多糖的还原能力及其对羟自由基和超氧自由基的清除活性进行了研究,实验中通过采用铁氰化钾还原测定灵芝多糖的还原能力，对灵芝多糖清除羟自由基、超氧阴离子的能力进行研究,试验结果表明灵芝多糖具有抗氧化的作用和清除自由基的能力。另外，谢韶琼等[2]研究发现，灵芝多糖可减少H2O2诱导角质形成细胞丙二醛的沉积,增加抗氧化酶的活性,张璐璐等[3]研究发现，灵芝多糖对·OH具有明显的清除能力，并能较强抑制过氧化脂质反应的能力. 免疫调节：耿卫朴等[4]探讨中药灵芝多糖和当归多糖对人外周血活化T淋巴细胞的免疫调节作用.实验发现灵芝多糖和当归多糖均明显促进外周血T淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ，同时还能下调Caspase-3蛋白表达并抑制T淋巴细胞凋亡.灵芝多糖的免疫调节机制主要有[5-7]:直接或间接激活T细胞、B细胞、巨噬细胞、NK细胞等免疫细胞，促进未分化的脾细胞在体外增殖，显著提高机体的体液免疫功能和网状内皮系统的吞噬功能，增强DHA聚合酶A的活性及促进白细胞介素等细胞因子的分泌、表达,从而实现其免疫调节功能. 降血糖：曹佳等[8]以四氧嘧啶诱发小鼠发生糖尿病，研究了人参、灵芝、何首乌和枸杞四种中草药的乙醇提取物对实验性糖尿病小鼠血糖水平的影响.试验结果表明人参、灵芝、何首乌和枸 杞四种中草药的乙醇提取物均能降低实验性糖尿病小鼠的血糖 浓度,血糖降低率分别为29.61%、35.26%、33.66%和28.49%.其中以何首乌和灵芝的降糖效果最为明显,而人参和枸杞次之.方敏[9]在
0引言 灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体，素有“仙草”之美誉[1]。古今药理与临床研究均证明，灵芝有防病治病延年益寿之功效。而灵芝多糖是灵芝的主要活性成分，具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗辐射、抗衰老以及活血化瘀等广泛的药理活性[2-5],因此灵芝多糖也是目前灵芝研究的一个热点。 灵芝多糖存在于子实体的细胞壁内壁，而子实体结构紧密，在提取过程中传质阻力比较大，且灵芝多糖相对分子量很大，仅靠单纯的扩散原理的传统提取方法的提取效率较低。而酶法是一种通过酶解破坏细胞结构来强化有效成分的传质过程，能最大限度提取中药有效成分的方法[6]，越来越受到重视。故本试验选取灵芝作为酶法提取的对象，试图破坏灵芝的细胞壁结构，来提高灵芝多糖提取效率，对于实际应用有着现实的意义。 1仪器与试药 HY-02型高速粉碎机（北京环亚天元机械技术有限公司），上海菁华754分光光度计，电子天平，HH-S型恒温水浴锅（江苏国盛实验仪器厂），循环式多用真空泵SHZ-IIIB（临海市谭氏真空设备有限公司）。 灵芝子实体（江苏农林职业技术学院食用菌研究所）；纤维素酶活力≥400U/mg；浓硫酸、苯酚、无水葡萄糖、乙醇均为国产分析纯。 2方法与结果 2.1多糖的提取方法 干燥的灵芝切片在高速粉碎机下粉碎至一定粒度，精密称取0.25g的灵芝粉及适量的纤维素酶加入去离子水在一定温度水浴下进行酶解提取，后在沸水浴中灭酶4分钟，抽滤得提取液。 2.2多糖的含量测定方法 2.2.1还原糖的测定-DNS法[7] 2.2.1.1试液的制备 对照溶液的制备：精确称取在105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品25mg，置100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀即得。 样品溶液的制备：灵芝多糖提取液定容至100ml，移取50ml减压蒸馏浓缩后加蒸馏水至10ml，备用。 2.2.1.2样品还原糖的测定方法 精密吸取样品液1ml，对照品溶液1ml，分别置于25ml容量瓶中，各加1.5mlDNS试剂，摇匀置沸水浴中加热5min，迅速用凉水冷却。分别加水至刻度，摇匀。以水1ml按同样方法操作所得溶液作空白，在520nm分别测定吸光度值。 2.2.1.3样品还原糖量的计算方法 还原糖量=样品液吸光度值×每ml对照品中所含糖的克数×样品稀释倍数 标准品吸光度值 2.2.2总糖含量的测定—苯酚-硫酸法 2.2.2.1试液的制备 5%苯酚溶液的制备：精密称取5g苯酚(重蒸馏)，加水使之溶解，定容至100ml，棕色瓶保存。 对照品溶液的制备：精密称取10mg干燥至恒重的无水葡萄糖,加水使之溶解，定容至100ml，即得0.1mg/ml葡萄糖对照品溶液。 2.2.2.2标准曲线的绘制 分别精密量取0.1mg/ml葡萄糖对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml置于25ml比色管中，一次添加水至1.0ml，加入5%的苯酚1.0ml，摇匀，加入6.0ml的浓硫酸，迅速振摇混匀，于室温放置30min 后490nm处测吸光度。以葡萄糖溶液的浓度mg/ml为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。求得标准曲线回归方程为y=6.9650x+0.0057，r=0.9999，在0.02-0.10mg/ml范围内，葡萄糖曲线C与吸光度A线性关系良好。 2．2.2.3样品溶液总糖浓度的测定 将得到的提取溶液定容到100ml，精密移取2.0ml稀释定容至50ml，取1.0ml稀释液于25ml比色管，后加入5%的苯酚溶液1.0ml，振荡摇匀，加入6.0ml的浓硫酸，迅速振摇混匀，于室温放置30min后490nm处测A。 2.2.2.4灵芝总糖量计算 根据标准曲线计算出样品液中总糖的浓度后按下式计算总糖量。 灵芝总糖量=浓度×体积×稀释倍数 2.2.3多糖提取率的计算方法 灵芝多糖提取率=灵芝总糖量-还原糖量*100% 供试品量 2.3单因素试验 2.3.1酶量 固定其他因素，分别考察加酶量为0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%时灵芝多糖的提取率。 图1酶量对多糖提取率的影响 由图1可知，在加酶量为0.5％～2.0％之间时，随着酶量的增加，整个体系中酶浓度上升，同一时间内酶与底物的接触机会增加，被酶水解的底物分子数增加，致使灵芝多糖能更多更快地提取出来。当酶量超过2.0％时，灵芝多糖的提取率略有增加，但考虑成本等因素，选择2.0％的酶量较为合理。 2.3.2酶解时间 固定其他因素，分别考察酶解时间为30min、60min、90min、120min时灵芝多糖的提取率。 图2酶解时间对多糖提取率的影响 由图2可见，随着酶解时间的增加，灵芝多糖的提取率也增加，到90min以后，多糖得率几乎不增大，故选择90min为最合适的酶解时间。 2.3.3料液比 固定其他因素，分别考察料液比为1:10、1:20、1:30、1:40条件下灵芝多糖的提取率。 图3液料比对多糖提取率的影响（下转第308页） 纤维素酶提取灵芝多糖的单因素研究 吕兴萍杨薇红马春娇 （江苏农林职业技术学院，江苏句容212400） 【摘要】利用纤维素酶从灵芝子实体中提取灵芝多糖，通过单因素实验研究酶量、酶解时间、料液比、酶解温度对灵芝多糖提取率的影响。实验结果表明：纤维素酶能够显著提高灵芝多糖的提取率，提取的最佳工艺条件为酶量2.0％，酶解时间90min，料液比1:30，温度50℃。 【关键词】灵芝多糖；提取；纤维素 酶 295
文献综述 食品科学与工程 多糖生物活性及其发展状况的研究 [摘要]多糖是一类重要的生物活性物质，广泛存在于动物、植物、微生物等有机体中．它是自然界中储量丰富的生物聚合物，具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射、抗菌抗病毒、保护肝脏等功能。本文就国内外目前对多糖的来源、生物活性及提取方法进行了综述。 [关键字] 多糖；来源；生物活性；提取方法 1 概述 多糖（polysaccharide, PS）是由单糖之间脱水形成糖苷键，并由糖苷键线性或者分枝连接组成的链状聚合物，广泛地分布于动物、植物、微生物、海藻等几乎所有的有机体中。多糖除了作为生物体的能量资源和构成材料外，还是一种生物效应调节剂，能控制细胞的分裂与分化，调节细胞的生长与衰老，增强机体的免疫功能。1943年，多糖作为广谱免疫促进剂被首次应用于临床，此后应用越来越广。多糖作为药物始于1943年[1]，随着化学和生物学的快速发展和分离技术的提高，多糖的生物学功能，特别是多糖作为生命物质参与生命的全部时间和空间功能，如受精、着床、分化、发育、免疫、感染、癌变、衰变等等[2]，突破了多糖作为支持组织和能量来源的传统观念。20世纪70年代发现多糖类物质具有抗病毒、抗凝血、诱导干扰素产生、促进蛋白质、核酸生物合成等功能。 2 多糖的来源 糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物、和微生物细胞壁中，是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子。多糖按照来源可分为植物多糖、微生物多糖、藻类多糖和动物多糖等。 植物多糖来源于植物的根、茎、叶、皮、种子和花。我国今年来对植物多糖，特别是具有中国特色的中草药多糖的药物活性已有广泛和深入的研究，例如免疫调节功能是植物多糖最主要和最重要的生物活性，药用植物中存在着广泛的免疫活性多糖。植物多糖研究的比较深入的有黄氏多糖、当归多糖、刺五茄多糖、芦荟多糖等[3]。目前在中草药中的某些品种，特别是生物活性明确的中草药来源的多糖，如何能较快达到符合国际规范的新药是很迫切的
第一部分：野生灵芝菌种的分离、扶壮、保藏和培养 前言 采集吉林长白山野生灵芝，经过菌种分离，鉴定为GANODERMA（英文名称）多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.) Karst．的菌种。经过纯化扶壮培养，成为一支优良的灵芝菌种，为灵芝菌丝体发酵培养和灵芝多糖的提取奠定了基础。 实验室流程：（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（恒温培养箱）菌种培养扶壮（恒温恒湿冷藏柜）优良菌种保藏（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（摇床）发酵菌种摇瓶培养（用于接种菌种罐） 第二部分：灵芝菌丝体液体发酵培养 前言 液体发酵培养不同于灵芝子实体栽培，周期短，产量高，无污染，灵芝多糖含量高，节省木材和耕地。是一种灵芝多糖理想的工厂化现代科技生产方式。经过摇瓶培养的灵芝菌种接种于种子罐，待生长良好，在接种于扩大的发酵罐中，通过通气恒温培养，长成成年灵芝菌丝体，生长完全后，进行离心分离喷雾干燥，就得到相当于灵芝子实体的灵芝菌丝体粉，多糖含量达到15%左右。进一步提取加工得到高含量的灵芝多糖。 灵芝菌丝体发酵工艺流程:（配料罐）培养液的配制（菌种罐）菌种的发酵培养 （发酵罐）灵芝菌丝体发酵培养（离心机）灵芝菌丝体固液分离（浓缩液配制罐)灵芝菌丝体配制成浓缩液（喷雾干燥塔）浓缩液喷雾干燥，得到灵芝菌丝体粉 第三部分：灵芝菌丝体多糖的提取分离 前言 灵芝菌丝体粉，是大部分不溶解于水，食用以后象灵芝子实体一样，只有少部分成分被吸收，通过现代提取手段，将灵芝菌丝体经过提取罐的水提取，经过真空浓缩，在经过醇沉工艺，加工成可以全部被人体吸收，灵芝多糖含量提高到30-40%灵芝菌丝体提取物。极大的提高了功效，减少了服用量。 灵芝多糖提取工艺流程：(提取罐）灵芝菌丝体粉水提取（外循环真空浓缩罐）提取液真空浓缩（醇沉罐）浓缩液乙醇沉淀多糖（离心机）沉淀多糖分离 (浓缩液储罐）沉淀物配制成多糖浓缩液（喷雾干燥塔）灵芝多糖喷雾干燥 （粉碎机）灵芝多糖粉碎到100目（混合机）灵芝多糖粉批量混合（真空包装机）食品塑袋真空包装。灵芝多糖原料成品
真菌多糖的研究概况 郭凯，原雪 （中国药科大学生命科学与技术基地 ，江苏南京， 210038） E-mail：smallrians@https://www.doczj.com/doc/1811834525.html, 摘要：真菌多糖具有重要的药用价值，尤其是其免疫调节功能，在抗肿瘤、保肝、抗氧化等方面发挥重要的药理作用。本文对近年来真菌多糖免疫调节功能及药理作用的研究做一概述，为进一步研究和开发利用真菌多糖提供参考。 关键字：真菌多糖，免疫调节功能，药理作用 多糖（polysacharides，PS）是一种广泛存在于植物、动物和微生物组织中，具有多种生物活性的天然大分子化合物，是生命有机体的重要组成部分。真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离出的，能够控制细胞分裂分化，调节细胞生长衰老的一类活性多糖[1]。与动、植物多糖不同的是真菌多糖分子单体之间，大多以β (1→3)与β(1→6)糖苷键结合，形成链状分子，具有螺旋状的立体构型[2]。 近年来对真菌多糖化学结构和生物活性的深入研究已经取得了丰硕的成果。实验证明真菌多糖具有很广泛的免疫调节作用，在抗肿瘤、抑制癌细胞、保肝、降血压、降血脂、抗血栓、抗辐射等方面起着重要的作用。目前已经广泛应用于临床。本文就近几年的研究成果做一总结。 1．免疫调节功能 目前普遍认为多糖的广泛免疫调节功能是其发挥药理作用的基础，研究已经深入到了分子和受体水平，发现多糖在机体免疫反应中的作用相当于抗原，可以激活多种免疫细胞，还能促进细胞因子生成，激活补体系统，促进抗体产生，对免疫系统发挥多方面的调节作用。 1.1巨噬细胞 巨噬细胞在机体的免疫系统中占有极其重要的地位，它担负着吞噬病原微生物，处理抗原并提呈给淋巴细胞，启动特异性免疫应答并参与免疫调节等作用，是多糖作用的最主要靶点。真菌多糖能明显提高巨噬细胞的吞噬能力。唐庆九[3]等实验表明灵芝多糖可刺激小鼠巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β，产生NO，并可增强巨噬细胞的吞噬能力。这可能是其增强机体免疫力的主要机制之一。马兴铭[4]等实验表明小鼠腹腔注射猪苓多糖、茯苓多糖、灵芝多糖100mg/kg，能显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数，加强小鼠腹腔巨噬细胞的非特异性吞噬能力。 1.2淋巴细胞 近年来大量临床医学试验表明，冬虫夏草能刺激和恢复T淋巴细胞和B淋巴细胞，增强淋巴细胞的转化作用[5]。用香菇多糖给小鼠皮下注射，可促进小鼠溶血空斑及外周血E-玫瑰环形成，增加体内淋巴细胞转换率，显著的增强对刀豆球蛋白（ConA）诱导的淋巴细胞增殖[6]。灵芝多糖具有促进同种异型抗原刺激的淋巴细胞转化作用，其作用机制是通过间接诱导 DNA多聚酶α的产生，促进免疫细胞中 DNA的合成，从而促进细胞的增殖，加速免疫应答的过程[7]。 1.3网状内皮系统 绝大多数的真菌多糖能刺激动物机体网状内皮系统（RES）的吞噬功能，使之释放一些细胞因子如肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素（IL）来杀死肿瘤细胞，有效增强巨噬细胞
灵芝多糖的功能特性 摘要:对灵芝多糖的功能进行了详细阐述及其应用和展望。 关键字：灵芝多糖功能应用 Abstract:This paper summarized about ganoderma lucidum polysaccaride's function appliance and development and so on . Keyword:ganoderma lucidum polysaccaride function appliance 一、灵芝多糖的功能： 1、免疫调节功能 迄今为止,关于灵芝多糖免疫调节功能的机制还不十分清楚,普遍认为其免疫功能可能是灵芝多糖能直接或间接激活 T 细胞、B 细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞 (NK)等免疫细胞、促进未经纯化脾细胞在体外增殖,增强 DNA多聚酶a的活性及促进白细胞介素分泌等实现其免疫功能。据报道,许多适量灵芝多糖可明显增加T细胞增殖、T 细胞表面表型表达及 T细胞诱生 IL-2 能力,增强 T 细胞DNA多聚酶活性、增加 T 细胞亚类数量和功能具有明显免疫增强和恢复作用。 2、抗辐射 辐射对机体造成损害的机制之一是产生大量自由基,引发一系列脂质过氧化反应,引起细胞中核酸、蛋白质分子结构的破坏,最终对各组织和器官造成严重的损害,同时,辐射引发免疫功能降低,基因突变等也是严重危害人体健康的。 3、灵芝多糖的抗肿瘤作用 灵芝多糖能防止肿瘤的发生和抑制肿瘤的生长,并已用于临床治疗肿瘤。实验证明,大多数灵芝多糖的抗肿瘤作用是作为一种生物反应调节剂, 通过增强宿主免疫调节功能即宿主介导抗肿瘤活性来实现的灵芝多糖并无细胞毒作用,即不能直接杀死肿瘤细胞, 而是通过增强Ma的吞噬功能,促进T 淋巴细胞增殖, 增强T 细胞的细胞毒作用, 诱导某些免疫因子产生等途径来抑制肿瘤生长。 4、灵芝多糖的抗衰老作用 近代的科学研究证明,灵芝菌丝体和子实体中含有的高分子多糖类生理活性物质除具有增强机体免疫功能和抑制肿瘤生长的活性外,还有延缓衰老的作用。山西农业大学的陈书明等研究了灵芝菌丝体中含氮多糖对动物机体红细胞内过氧化物歧化酶( SOD)活性的影响。结果表明,灵芝含氮多糖对实验小鼠红细胞内SOD 的活性有明显的增强作用。邢国庆等的研究发现,灵芝多糖口服液可提高 SOD 含量,增强机体自由基的清除能力,减少自由基对机体的损伤,终止脂质过氧化,保护细胞膜, 延缓衰老。雷林生等的研究证明, 每日喂小鼠灵芝多糖 25mg/ kg 和50mg / kg ,连续4d,可明显增强老年小鼠脾细胞内 DNA 多聚酶的活性,与对照组相比分别增加44. 0%和 58. 4%。 5、灵芝多糖的抗血栓、抗血凝作用 灵芝的水溶性部分可抑制血小板聚集。灵芝子实体经水提、乙醇沉淀制得的灵芝多糖( GLPS)精品,能明显延长小鼠的凝血时间和出血时间( P< 0. 01)。GLPS 能明显抑制大鼠的血栓形成( P< 0. 01) ,降低纤维蛋白原的含量( P< 0. 01) , 同时能明显延长部分凝血时间( P<0. 01) 。说明GLPS 具有抗血栓和抗凝血的作用,以每日 200、100、50mg/ kg 灵芝多糖给小鼠喂药7d,可明显地延长小鼠凝血时间;每日以140、70 和35mg/ kg 灵芝多糖喂大鼠7d,能明显延长大鼠体内血栓形成的时间, 抑制血瘀大鼠体外血栓的形成并降低血瘀大鼠的血浆比粘度。 6、抗氧自由基作用
多糖的研究应用与发展 [摘要]本文通过查阅大量文献，对多糖的研究进展作一综述，为临床应用及日常保健提供帮助。多糖能够提高机体免疫力，具有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血糖、降血脂、防辐射、抗菌、抗寄生虫等作用，对治疗肝脏、肾脏、胃肠道以及中枢神经系统疾病疗效显著。多糖在中国有丰富的资源，发展潜力极大。 [关键词]多糖；药理作用；发展 1.前言 糖类是自然界中蕴藏最多，与人类生活最密切相关的一类化合物。多糖又称多聚糖，有的是构成动植物骨架的组成成分，有的具有特殊的生物活性，还有的具有储存和转化食物能量的功效。现代药理学研究表明，多糖具有多方面的功能，包括提高机体免疫力，具有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒、抗氧化、降血糖、降血脂、防辐射、抗菌、抗寄生虫、抗风湿性关节炎等作用。现将对近些年来多糖的功能研究进行综述，为进一步研究多糖的功能做基础，为人类的健康保健提供帮助。 2.多糖的药理作用 2.1免疫调节功能 有的活性多糖能促进T细胞、B细胞增殖，激活LAK细胞，提高巨吞噬细胞的吞噬功能，改善机体的免疫功能；某些活性多糖（如茯苓多糖、酵母多糖、当归多糖等）还能通过不同的途径激活补体系统，这是其发挥免疫调节作用的重要机制之一[1]。张庭廷[2]等研究黄精多糖的生物活性时发现，其可促进小鼠溶血素的生成，增强体液免疫功能；提高巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力，促进非特异性免疫作用。陈冠敏[3]等研究发现龙眼多糖口服液能够提高正常小鼠的机体免疫功能，积极维持机体的正常运行，可作为一种理想的免疫保健品食用。 2.2抗肿瘤作用 多糖主要通过直接抑制肿瘤细胞的生长，改变肿瘤细胞膜的生长特性，抗氧化、清除自由基，影响癌基因的表达，抑制肿瘤细胞增殖、诱导分化以及提高机体免疫力等途径表达抗肿瘤作用。姬松茸多糖（AB01-P）[4]可极显著地提高S180荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数，有一定的诱导MG/63细胞凋亡作用，抗肿瘤作用显著。陈留勇[5]等从黄桃中提取的水溶性多糖HTP1和HTP2，在提高免疫力、清除自由基、抗肿瘤方面有显著作用。在治疗肿瘤疾病方面还用人参多糖、灵芝多糖、蘑菇多糖、补骨脂多糖、怀牛膝多糖、海洋生物多糖等等。 2.3抗病毒作用 人们很早就已经认识到多糖的抗病毒作用，应用于药物中。王学兵[6]等研究发现板蓝根多糖体外对PRRSV具有较好的阻断和抑制作用。盐藻多糖[7]具有良好的抗副流感病毒的作用，其不仅能阻止病毒的吸附与穿入，而且在一定程度上能够灭活病毒。多种海洋贝类中含有大量结构新颖的活性多糖，这些多糖也有望成为新的抗病毒药物[8]。 2.4降血糖作用 目前用于降血糖多糖有黄芪多糖、桑黄菌丝体多糖、茶多糖、人参多糖、茉莉花渣多糖、苦瓜多糖、青钱柳多糖等等，但是各种多糖的降血糖机理有所不同。百合多糖[9]通过降低肾上腺皮质激素分泌，增强分泌胰岛素和促进肝脏血糖转化为糖元来降低血糖，治疗糖尿病效果显著。 2.5降血脂作用
灵芝多糖 【导读】灵芝多糖是灵芝所含有的一种物质，目前已分离到的有200多种，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高浓度酒精，在热水中溶解，大多存在于灵芝细胞内壁。灵芝多糖在国外亦在进行广泛、深入研究，同时人们发现灵芝多糖有很重要的药用价值。那么本文就为大家详细介绍灵芝多糖。 灵芝多糖是灵芝所含有的一种物质，目前已分离到的有200多种，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高浓度酒精，在热水中溶解，大多存在于灵芝细胞内壁。灵芝多糖在国外亦在进行广泛、深入研究，同时人们发现灵芝多糖有很重要的药用价值。 灵芝多糖是灵芝的最有效成分之一，因此，也特别受到医学界重视，对它的研究报道也最多。已分离到的灵芝多糖有200 多种，其中有数十种的结构已得出研究成果，分子量已被测定。 灵芝多糖有多方面的药理活性: 能提高机体免疫力，加速血液微循环，提高血液供氧能力，降低机体静止状态下的无效耗氧量，消除体内自由基，提高机体细胞膜的封闭度，抗放射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA,RNA，蛋白质的能力，延长寿命等。灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。 灵芝多糖的作用 灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关，而灵芝多糖的作用很多，我们具体来看一下。 1、能提高机体免疫力，加速血液微循环，提高血液供氧能力，降低机体静止状态下的无效耗氧量，消除体内自由基，提高机体细胞膜的封闭度，抗放射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA,RNA，蛋白质的能力，延长寿命等。 2、对心血管疾病、气喘、过敏、神经衰弱、胃热等有显著效果。 3、具有降血压、降血脂、解血瘀、改善血液循环、皮肤美容等作用。 灵芝多糖胶囊价格 灵芝多糖胶囊含有人体所需的多种微量元素和氨基酸，具有防癌、解毒、美容养颜、降低胆固醇和防止糖尿病等作用。那么，作为一种珍贵的营养保健品，灵芝多糖胶囊的价格是多少呢？ 下面妈网为大家介绍一下各大品牌的灵芝多糖胶囊价格： 沛元牌复配破壁灵芝孢子粉胶囊参考价格：158元/100g 中信牌灵芝孢子粉胶囊参考价格：138元/300g 麦力若牌破壁灵芝孢子粉维C胶囊参考价格：368元/360g 美国自然之路灵芝多糖胶囊参考价格：91元/100g 却老斋破壁灵芝孢子粉家庭装参考价格：1950 以上价格信息仅供参考。 灵芝多糖和灵芝孢子粉哪个好 灵芝孢子粉是灵芝上面收集来的种子，粉末状，经过机器加工破壁的技术，容易氧化，按破壁的多少来分等级，比较好的的孢子粉是有点泥土味的，开水冲出来的时候上面有一层浮油，那就是灵芝孢子油成分，如果有这层浮油，可以算是质量比较好的灵芝孢子粉。 而灵芝多糖是从灵芝实体里提取出来的，也可以参合到灵芝孢子粉里面一起吃，现在市面上很多灵芝孢子粉已经含有灵芝多糖跟三帖成分。能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消除自由基，抑制肿瘤、抗辐射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力，延长寿命，灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性
正交实验法优化灵芝多糖快速提取工艺 目的: 对灵芝多糖的快速提取工艺方法进行了优化，为工业化生产提供可靠的实验数据和理论依据。 方法: 采用正交试验设计提取方法，氧化酶反应比色法测定多糖含量。结果最佳提取工艺为A3B2C3。影响因素的大小依次为：脉冲数、料液比、电场强度。此法提取的灵芝中多糖含量为0.416% ，得膏率达6.23%。结论: 本提取工艺可行，经济、省时、回收率高。 灵芝提取物含有灵芝多糖、三萜类、蛋白质、微量元素、氨基酸等成分。多糖能强化人体的免疫系统，是灵芝治疗各种疾病的主要成分[1]。灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一。因此，也特别受到医药科技工作者的重视，研究报道也最多。现知灵芝多糖有广泛的药理活性，能提高机体免疫力、提高机体耐缺氧能力、消除自由基、抑制肿瘤、抗辐射、延长寿命等。灵芝多糖的提取方法多为加热浸提或超声提取等，费时、费力，耗能较大。本试验以灵芝多糖和浸膏得率为指标，采用正交试验法优化高频电场提取工艺，具有快速、节能、低温提取等特点。 1 仪器与试药 1.1 仪器 LDT-100/4-25.2型中药高压脉冲电场提取装置（长春华迪生物科技开发有限公司）；OSB-2000旋转蒸发器（日本东京理化株式会社）；电子天平ALC-210.4（Sartorius group）；DZKW-D恒温数显水浴锅（河北黄骅市航天仪器厂）；101-3C型烘箱（上海实验仪器厂）；754型紫外可见分光光度计（山东高密彩虹分析仪器有限公司） 1.2 试药 灵芝购于吉林市，经中国农业科学院特产研究所常维春研究员鉴定为赤芝；所用试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 正交实验 2.1.1 因素水平设计从安全性和灵芝多糖的特性考虑，采用水为提取溶剂；由于是连续流动进样提取，不需考虑提取温度、提取时间和提取次数的影响；又因为流速与脉冲数成相关，所以影110 响提取的因素主要有：电场强度、脉冲数、料液比。采用L9(34)正交表优化提取条件，重点考察上述3个因素，以浸膏得率和灵芝多糖为考察指标，见表1。 2.1.2 样品制备取灵芝干品，粉碎至80目，分别称取100 g，按L9(34)正交表所列实验因素和实验水平进行试验，所得提取液过滤后减压浓缩至100mL，取2 mL测多糖含量，其他真空干燥至恒重，计算浸膏得率，见表2。 2.1.3 含量测定按文献[7]测定灵芝多糖的含量，结果见表2。
植物多糖的研究现状和发展展望 摘要：本文阐述了植物多糖提取分离纯化主要的方法，简要叙述了植物多糖生物活性的研究现状，并对植物多糖未来的研究方向进行了建议。 关键词：植物多糖，研究现状，发展展望 Abstract: This paper describes the plant polysaccharide extraction separation purification method, briefly describes theresearch status of biological activities of plant polysaccharide,and some suggestions for future research direction of plant polysaccharides. Keywords: plant polysaccharide,research situation, development prospect 多糖研究开始于20世纪40年代，经过几十年的努力人们对于多糖这一类重要的生命物质有了较为深刻的认识，也使这一学科成为当今生命科学研究最为活跃的领域之一。多糖根据来源可分为动物多糖、植物多糖、微生物多糖，广泛存在于动植物体内和微生物的细胞壁中。植物多糖因其来源广泛，无细胞毒性，应用生命体后毒副作用小、药物质量可通过化学手段进行控制等优点成为当今新药及功能性保健食品和绿色食品添加剂发展的新方向。目前对于植物多糖的研究大体分可分为以下几个方面：植物多糖的测定、植物多糖生物活性的研究、植物多糖的应用。 1、植物多糖的测定 植物多糖的测定包括提取和分离纯化的研究、植物多糖的纯度鉴定及相对分子量的测定、植物多糖的含量测定、植物多糖的结构分析。 1.1提取及分离纯化 1.1.1提取 由于大多数植物多糖都是极性大分子化合物，对于植物多糖的提取通常是用水、盐或者稀酸液、稀碱液在不同温度下进行提取。采用不同溶剂提取的多糖成分不同，其生物活性也有较大差异。 水提醇沉法提取多糖操作简单且效果较佳，在中药有效成分提取中应用已久，大多是作为澄清液体的一种方法，但由于其提取多糖纯度不高，且随着新的活性多糖的发现，水提醇沉法的单独使用已难以满足提取要求。而有些多糖更适合用酸碱溶液进行提取，但是需对酸碱度进行严格的控制以防酸碱度过高使多糖糖苷键被破坏而失去生理活性，且容易引入杂质，这一操作要求提高了提取操作和后续分离的复杂性，限制了应用范围。总体来说，从成本及操作安全方面来看，溶剂提取多糖中水法提取更为简单宜用。 现在随着科学技术的发展，酶法提取、微波提取法、超声提取法等新兴提取方法也开始广泛应用于多糖提取中。 酶提取法是利用酶对细胞结构的破坏作用，是存在于细胞内部的多糖释放出来，从而提高多糖的提取率。在使用酶提取多糖的过程中，酶可降低提取条件，在温和的条件下分解植物组织，加速多糖的释放或提取。植物中除含有多糖外，还含有一定量的蛋白质、淀粉、胶质、粗纤维及脂肪，使用酶还可分解提取液中的这些物质，从而有利于多糖的分离和纯化。酶提取法多糖具有条件温和、杂质易除、提取率高和生物活性高等特点。常用的酶有蛋白酶、纤维素酶、果胶酶等。在实际使用酶对多糖提取操作时，有时根据提取物质的不同和多糖提取难易度将几种酶结合起来共同使用，可大大提高提取率，这种方法称为复合酶提取法。超声波提取法是利用超声辐射产生的空化作用、机械作用和热学作用对植物细胞进行破碎，之后再用水醇沉法对多糖进行提取，这一方法及有效缩短了提取时间又提高了多糖提取率。微波提取法是一种新型萃取技术，利用高频电磁波穿透萃取介质，细胞液吸收微波能，细胞内温度迅速升高，压力增大，使细胞壁破裂，有效成分被释放出来进入溶剂中，从而被提取。
Advances in Microbiology 微生物前沿, 2018, 7(1), 26-37 Published Online March 2018 in Hans. https://www.doczj.com/doc/1811834525.html,/journal/amb https://https://www.doczj.com/doc/1811834525.html,/10.12677/amb.2018.71004 Extraction Process of Ganoderma lucidum Polysaccharides Yuantao Yin, Qingzhi Yao* College of Life Science, Inner Mongolia Agriculture University, Huhhot Inner Mongolia Received: Mar. 5th, 2018; accepted: Mar. 16th, 2018; published: Mar. 23rd, 2018 Abstract In this paper, the optimum extraction process of two kinds of Ganoderma lucidum polysaccharide was studied, and the content of two kinds of Ganoderma lucidum polysaccharide was compared. The hot water extraction method is used to study the conditions of extracting polysaccharides from Ganoderma lucidum. With taking the polysaccharide yield as the evaluation index, the single factor test and L18 (35) orthogonal test are used to examine the effect of the extraction ratio, pH value, extraction tem- perature, ethanol concentration and extraction time on the yield of Ganoderma lucidum polysaccha-rides. The optimum processing conditions for Ganoderma lucidum polysaccharides extraction with hot water are determined as that of extraction ratio 1:40, pH 7.5, extraction temperature 90?C, extraction time 1.5 h, and ethanol concentration 90%. The content of Ganoderma lucidum polysaccharide was determined by Sevage method with the removal of free protein and 3,5-Dinitrosalicylic acid (DNS). Keywords Ganoderma, Polysaccharide, Extraction, Hot Water Extraction 灵芝多糖提取工艺研究 殷远滔，姚庆智* 内蒙古农业大学生命科学学院，内蒙古呼和浩特 收稿日期：2018年3月5日；录用日期：2018年3月16日；发布日期：2018年3月23日 摘要 本文主要研究了两种灵芝多糖的最佳提取工艺，比较两种灵芝多糖含量的不同。采用热水浸提法对灵芝*通讯作者。
灵芝属（Ganoderma）的当代分类现状及研究技术 (07级微生物学陈博 Y0721412) 摘要灵芝( Ganoderma ) 有“仙草”之美誉,从灵芝中提取的多种物质如灵芝多糖、三 萜类、蛋白质类等化合物有提高机体免疫力、肝脏解毒及排毒能力以及抑制恶性肿瘤生长等作用 ,因而受到了众多研究者的重视。目前,被人们利用的灵芝近缘种已达18 种,几乎都隶属于灵芝属; 同时灵芝属真菌菌种(76 种) 又占灵芝科菌种(98 种)的绝大多数,作为灵芝科的一个大属。故对 灵芝属真菌进行系统深入的研究,对我们全面了解和开发利用灵芝类物种具有重要的意义。分类 学研究又是进行系统研究的一个重要方面。在生物学技术的迅猛发展和生物分类学研究的不断深 入的情况下,生物分类系统已由过去的五界系统提升为八界系统,在这样的变化中,灵芝属分类情 况也发生了一定的变化。为了全面了解灵芝属真菌的资源状况,合理利用灵芝资源,本文将对灵芝 属资源的分类现状进行分析和研究。 关键词灵芝属( Ganoderma )；分类学研究；近缘种； 灵芝属级特征：灵芝为灵芝科灵芝属植物Ganoderma lucidum(Leyss. exFr. ) Karst . 的子实体。菌盖为半圆形或肾形,边缘薄而平截。直径10～18cm ,厚1～2cm ,柄长3～7cm。表面为环状棱形。颜色为黄褐色或红褐色。有漆样光泽。菌柄侧生,少偏生。菌肉白色 至淡棕色。孢子直径8. 5～11. 5 ×5～6. 5μm ,卵状椭圆形,顶端平截,孢壁双层,外 壁光滑,透明无色,内壁褐色有小刺。气微香,味苦涩。紫芝为灵芝科灵芝属植物 Gano2derma sinense Zhao ,Xu et Zhang 的子实体。菌盖为半圆形或肾形,边缘薄或钝厚,有时断截状,全缘或波状至浅裂,直径5～11cm ,厚1～2cm ,柄长0. 6～11～20cm ,表面为同心环沟。颜色为紫黑色。有漆样光泽。菌柄侧生,少偏生。菌肉锈褐色。孢子直 径10～12. 5 ×7～8. 5um ,卵形至近椭圆形,孢壁双层,外壁无色,平滑,内壁褐色,有显著小刺。气微香,味苦涩。 1 灵芝属真菌分类学方法学研究 1．1 传统分类方法 传统分类各派别的分类见解及分类系统灵芝属传统分类上各分类学家都以灵芝 形态学特征为主,但对灵芝各表型性状在分类上孰优孰重,各有主张。Haddow(1931) 第 一个应用皮壳构造来鉴定灵芝属的若干种。而Steyaert (1980) 依据皮壳构造又把灵芝属分为4 个灵芝亚属。但赵继鼎(2000) 指出灵芝科同一种不同的标本上皮壳构造有可 能变化,甚至在同一号标本中也有变化。过分强调这一特征在分类上的作用是不合适的。Corner (1983) 也认为利用皮壳构造作为种以上单位的分类依据是比较合适的,而不适合种以下单位的分类。 在灵芝科担孢子方面,由于其担孢子具有特殊的构造,使其成为最可靠的分类依据,也是Donk(1948) 建立灵芝科的唯一基础。而对于灵芝孢壁, Heim ( 1962) , Furtado ( 1962) , Pegler 和Young(1973) 及Corner (1983) 都认为灵芝属和假芝属的孢壁有5 层组成,但他们各自说的部分概念并不一致,但都应用两层壁的概念,即外(exosporium) 和内壁(endosporium)。 从Karsten (1881) 以Polyporus l ucidus 为模式种建立灵芝属以来, 各分类学家通过对灵芝外部形态、内部微观结构等方面的深入研究基础上,对灵芝的外观特征 在灵芝分类上的作用都有独自的见解,形成了各自的分类系统。在Potouillard (1889) 分类系统中,灵芝属分成两组, 即灵芝组和假芝组。而Karsten ( 1889) 把Polyporus