1、生物技术：指利用生物系统、活生物体或者其衍生物为特定用途而生产或改变产品或过程的任何技术应用。
2、植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官（如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等），细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体，在人工控制的环境里培养成完整植株的一门生物技术
3、外植体：在植物组织培养过程中，从植物体上被分离下来的，接种在培养基上，供培养用的原生质体、细胞、组织、器官等称为为外植体。
4、愈伤组织：指植物受伤后的伤口处或植物组织培养中外植体切口处不断增殖产生的一团不定形的薄壁组织。
5、细胞分化：指细胞分裂过程中发生结构和功能方面的改变，从而在植物个体发育过程中，形成各类组织和器官，完成整个生活周期。
6、脱分化：指将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。
7、再分化：指经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
8、胚状体：又称体细胞胚，指在离体或活体条件下，由除合子外的孢子体细胞形成的胚,其经历的发育阶段与合子胚相似。9、人工种子：又称合成种子或体细胞种子，任何一种在离体培养条件下产生的繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株，均称为人工种子。
10、原球茎：主要是兰科植物在
诱导时分化出的原初植物形态，
具有完整植株的器官雏形，成苗
容易。
11、植物细胞的全能性：植物细
胞具有该植物体全部遗传的可
能性，在一定条件下具有发育成
完整植物体的潜在能力。
12、看护培养：用一块活跃生长
的愈伤组织来看护单个细胞，并
使其生长和增殖的方法，目的是
诱导形成单细胞系。
13、大量元素：C、H、O、N、P、
K、Ca、Mg、S、
14、微量元素：Fe Cu Zn B Mo
Mn Co Cl
15、有益元素：有利于植物生长
的非必需元素
16、完全培养基：在基本培养基
的基础上，根据试验的不同需
要，附加一些物质，如生长调节
物质和其他复杂有机物质等。
17、母液：指在实际工作中，将
配方中的药品按一定倍数配成
浓溶液，用时再稀释，可供一段
时间使用。
18、胚乳培养：指将胚乳从母
体上分离出来，在无菌条件下人
工培养，使其生长发育成为幼苗
的过程。
19、花药培养：是将一定发育期
的花药进行离体培养的技术。
20、花粉培养：是将处于一定发
育阶段的花粉从花药中分离出
来，再加以离体培养。
21、原生质体：指采用机械或酶
解法去掉了细胞壁的裸露的且
具有活力的细胞。
22、亚原生质体:指在质壁分离
时，有时引起细胞内含物的断裂
形成较小的原生质体有时包含
细胞核，有时则无。
23\微小原生质体:指由原生质
膜和薄层细胞质包围细胞核形
成，如果分离原生质体时细胞核
正处于分裂状态，则可能获得带
有一个或几个染色体的微小原
生质体。
24、原生质球:指分离的原生质
体带有残存的细胞壁但仍呈圆
形。
25、原生质体培养：指以植物原
生质体为外植体所进行的离体
培养。即将植物细胞游离成原生
质体，在适宜的条件下，依据细
胞的全能性使其再生细胞壁，进
行细胞的分裂分化，并发育成完
整植株的过程。
26、植板率：即形成愈伤组织的
原生质体数量占所培养原生质
体总数的百分比。
27、原生质体融合：指在离体条
件下将同一物种或不同物种的
原生质体不经过有性阶段，在一
定条件下融合创造杂种的过程。
28、病毒：是有一种核酸、蛋白
或其复合体构成的，具有繁殖、
传染和寄生在其他生物体上的
能力的非细胞形态分子生物。
29、病毒的传播：植物病毒从一
植株转移或扩散到其他植株的
过程
30、病毒的移动：在植株组织器
官之间转移或扩散的过程
31、基因克隆：是一系列技术的
总称，其核心技术是在体外将来
自不同生物的基因与有自主复
制能力的载体DNA分子通过酶
切、连接等操作重新组装成杂合
分子，并使之在适当的宿主细胞
中进行扩增，形成大量的子代
DNA分子的过程。
32、基因芯片：生物芯片的一种，
只固定在固相支持介质上的高
密度基因信息分子的微阵列（不
确定）
33、基因库:指某一生物类型全部基因的集合，这种集合以重组形式出现。
34、转基因植物:通过基因转移技术，将有益基因转移到植物细胞内，从而改变其遗传组成，使之获得有益的生物特征而培育出来的高产、优质、多抗的植物新品种。
35、基因工程：指应用人工方法把生物的遗传物质，通常是脱氧核糖核酸（DNA）分离出来，在体外进行切割、拼接、和重组。然后将重组的DNA导入某种宿主细胞或个体，从而改变它们的遗传品性；有时还使新的遗传信息在新的宿主细胞或个体中大量表达，以获得基因产物（多肽或蛋白质）。这种创造新生物并给予新生物以特殊功能的过程就称为基因工程，也称DNA重组技术。
36、无病毒原种：通过不同脱毒方法所获得的脱毒植株，经鉴定确系无特顶病毒者
37、广义的分子标记是指遗传并可检测的特异DNA序列或蛋白质，狭义的仅指DNA或RNA标记，而这个界定现在被广泛采纳。38、等位酶：有同一个位点的不同等位基因编码的同种酶的不同类型，其功能相同但氨基酸序列不同。
39、PCR:聚合酶链式反应，是一项在短时间内大量扩增特定的DNA片段的分子生物技术。
40、标记基因: 是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用
41、转基因沉默：转基因在受体植物中往往不能稳定表达，有时甚至完全不表达的现象。
42、花粉管通道法：利用花粉管通道导入外源DNA的技术。43、细胞工程：指以细胞为基本
单位，在体外条件下进行培养、
繁殖，或人为地使细胞某些生物
学特性按人们的意愿发生改变，
从而达到改良生物品种和创造
新品种，加速繁殖动、植物个体，
以获得某种有用的物质的过程。
44、酶工程：利用酶、细胞器或
细胞所具有的特意催化功能，或
对酶进行修饰改造，并借助生物
反应器和工艺过程来来生产人
类所需产品的一项技术。
45、发酵工程:利用微生物生长
速度快、生长条件简单以及代谢
过程特殊等特点，在合适的条件
下，通过现代化工程技术手段，
由微生物的某种特定功能生产
出人类所需的产品称为发酵工
程，有时也称微生物工程。
46、蛋白质工程：指在基因工程
的基础上，结合蛋白质结晶学、
计算机辅助设计和蛋白质化学
等多学科的基础知识，通过对基
因的人工定向改造等手段，从而
达到对蛋白质进行修饰、改造、
拼接以产生能满足人类需要的
新型蛋白质。
47、园艺植物生物技术：是以园
艺植物为材料，利用生物技术，
创造或改良种质或生产生物制
品的一门技术。
48、胚抢救：指对由于营养或生
理原因造成的难以播种成苗或
在发育早期阶段就败育、退化的
胚进行早期分离培养
49、可溶性固形物：是指液体或
流体食品中所有溶解于水的化
合物的总称。包括糖、酸、维生
素、矿物质等等。
（一）生物技术对园艺科学发展
的贡献
1、脱毒与快繁技术广泛应用园
艺作物种苗生产
2、花药培养以及小孢子培养获
得单倍体以及纯合二倍体材料
的最佳途径
3、胚抢救技术克服了果树早熟
品种选育的技术难题
4、细胞融合技术创造出200多
例柑橘体细胞杂种
5、分子标记广泛应用于育种资
源研究
6、基因克隆与遗传转化方兴未
艾
（二）、园艺植物组织培养的意
义：
1、快速繁殖：
2、种苗脱毒
3、
远缘杂交4、突变育种5、基因
工程6、生物制品7、种质保存
（三）组织培养室设置的环境条
件：
1、组织培养室空间大小及装备
程度取决于实验室的功用、材料
及人员规模和可周转的资金。
2、实验室位置应选在清洁、安
静的地方，首先保证水、电的供
应。
3、节省能源，充分利用自然光，
实验室应朝向南，使采光面积和
时数达到最大。
4、商业性实验室，交通是否便
利应考虑。
（四）植物组织培养设计应遵循
的原则：
1、尽量避免或减少污染机会。
2、充分考虑光照和控温。
3、恰当的平面布置。
4、装备消
防活栓、报警装置等，以保证运
行过程的安全。
（五）培养基的污染的可能的来源及灭菌方法：
1、培养及本身
2、外植体
3、接种室的环境
4、培养容器
5、在接种和继代时用以操作植物材料的器械。
6、培养室的环境
灭菌的方法有物理和化学方法两大类。
物理方法：如干热（烘烤和灼烧）、湿热（蒸煮或加压蒸煮）、射线处理、超声波、微波处理、过滤后的流体（空气、溶液）、离心沉淀、清洗和大量无菌水冲洗等技术措施。
化学方法：如使用灭菌剂-升汞、福尔马林、双氧水、高锰酸钾、次氧酸钠及乙醇等。
（六）接种应注意的问题：
1、接种时在近火焰处打开瓶口，使瓶倾斜，以免空气中微生物落入瓶中
2、整个接种操作应在近火焰处进行，且动作要迅速
3、接种过程尽可能达到悬空要求
4、接种时不得用手接触盖内壁或瓶口
5、瓶盖朝上放，接种完毕后立即盖好瓶口
6、接种完一瓶用火烧用具以防止交叉污染产生
7、种子和分生组织：培养时通常将其贴放在培养基表面，而不是插到培养基内部，以免供氧不足。
8、接种茎段：注意形态学下端插入培养基内，而形态学上端露于空气中（七）培养基的配制步骤
1、计量
2、移液
3、称取琼脂蔗糖备用
4、融化
5、混合
6、调PH
7、分装
8、包扎
9、培养基的灭菌
（八）胚培养与胚抢救
胚培养包括的范围的更广，如快
速成苗，打破休眠，检测种子活
力等。胚抢救主要是对由于营养
或生理原因造成的难以播种成
苗或在发育早期阶段就败育、退
化的胚进行早期离体培养。
（九）原生质体是否具有细胞的
全能性？
答：虽然植物原生质体去掉了细
胞壁，但仍包含全部遗传物质
DNA，且其各项生命活动如蛋白
质和核酸合成、光合和呼吸作
用、膜系统功能等都仍在进行，
在一定的离体培养条件下可再
生细胞壁，形成完整的植物细
胞。
（十）原生质体研究的意义
1、种质资源保存主要用于超低
温保存。
2、进行原生质体融合或体细胞
杂交
3、可用于变异体的选择原生质
体培养得到的再生植物群体中，
自发变异频率高。
4、可进行外源DNA导入和遗传
操作
5、进行基础研究
（十一）用原生质体进行诱变的
优点
1、对外界的物理、化学因子较
敏感；
2、可供处理的原生质体数量
大、体积小、培养后分裂频
率较高；
3、用单倍体原生质体作为材
料，由于不存在隐形基因的
问题，产生的突变体当代便
能鉴别等。一旦筛选出具有
优良性状的突变体，很快便
能在生产上应用。
（十二）原生质体成为基因工程
的理想受体的原因？
1、人们可以利用一些物理的
或化学的手段改变原生质
体膜的通透性，以直接摄取
外源遗传物质；
2、原生质体具有单细胞性质，
在控制的条件下，可以对单
个原生质体进行准确的遗
传操作，避免产生嵌合体现
象；
3、从一种植物的组织上可以
产生大量的生理状态相对
均匀一致的原生质体群。
（十三）原生质体分离外植体的
来源：
生长旺盛、生命力强的组织和细
胞是获得高活力原生质体的关
键，幼嫩的叶片、萌发种子的胚
轴、子叶、愈伤组织和悬浮培养
物等均是原生质体的良好来源。
其中叶片使用较多，一次性可以
分离出大量均匀一致的细胞。另
外，愈伤组织和悬浮细胞系生长
快速稳定、不易受环境条件的影
响，容易获得大量高质量的原生
质体。
（十四）原生质体的分离方法及
其优缺点？
分离方法;1、机械法 2、酶解法
机械法是指利刃切割高度液泡
化的细胞。缺点:原生质体的产
量很低；方法繁琐费力；因必须
高度质壁分离，故局限性大。优
点：能够排除外加酶对离体原生
质体的结构和代谢活性的有害
影响。
酶解法优点：收率高、活力强、完整性好；分离原生质体最有效。但需注意：1、酶液渗透压 2、材料预处理（暗处理，预处理和低温培养） 3、酶解处理的条件（光、温度、时间） 4、其他，例加入葡聚糖硫酸钾、CaCl2等盐类，目的是保护细胞膜、提高原生质体稳定性和活力。
（十六）用来分离植物原生质体的酶制剂主要种类：
1、纤维素酶从绿色木霉中
提取的一种复合酶制剂，主
要含有纤维素C；作用于天
然的和结晶的纤维素，具有
分解天然纤维素的作用，还
含有纤维素酶CX，作用于定
形的纤维素，可分解短链纤
维素。
2、半纤维素酶可以降解半
纤维素为单糖或单糖衍生
物。
3、果胶酶降解联结细胞的
中胶层，使细胞从组织中分
开，以及细胞与细胞分开。
4、离析酶离析形成单细胞。(十七)酶解分离原生质体的方法：
1、顺序法先用果胶酶处理
释放单个细胞，然后用纤维
素酶消化细胞壁分离出原
生质体。
2、直接法直接将果胶酶和
纤维素酶等混合处理材料。
可以缩短原生质体的制备
时间，大多数研究者都采
用。但不同基因型、不同原
生质体来源的组织或器官
要试验酶混合液组成中各
种酶的浓度组成、处理时间
和条件等(十八)原生质体纯化方法及其
原理
1、离心沉淀法原理：应用原
生质体的比重大于溶液，离
心后原生质体沉于底部。
2、漂浮法原理：应用渗透剂
含量较高的洗涤液使原生
质体漂浮在液体的表面。
3、接口法原理：选两种不同
渗透浓度的溶度，其中一种
溶液的密度大于原生质体
的密度，另一种溶液的密度
小于原生质体的密度，原生
质体介于两种溶液之间。
（十九）原生质体活力的测定方
法：
1、形态识别形态上完整，呈
圆形，含有饱满的细胞质，
颜色鲜艳的原生质体即为
存活的。
2、染色识别（1）用0.1%酚
番红或Evans蓝进行染色。
有活力的不被染色，死亡的
被染上色。（2）荧光素
双醋酸酯（FDA）染色法（最
常用）。在活细胞中FDA经
酯酶分解为荧光素，后者为
具有荧光的极性物质，不能
自由出入细胞膜，从而在细
胞中积累。在紫外线照射
下，发出绿色荧光。相反如
果是死细胞，则不会发出绿
色荧光。
（二十）影响原生质体培养的因
素：
1、植物材料和基因型
2、原生质体活力
3、原生质体起始
4、渗透压稳定剂
5、培养基和培养条件
（二十一）原生质体培养方法
1、液体浅层培养一般适用
于容易分裂的原生质体，特
点是操作简单，可微量培
养，细胞植板率高，在培养
过程中容易添加新的培养
液不足之处是原生质体容
易发生粘连，细胞团聚集
多，难成单细胞株系，也难
定点观察，由于经常加入新
鲜培养基，容易造成污染。
此外，与细胞培养相似，原
生质体自身释放的有毒物
质会影响到原生质体再生。
2、固体平板培养也称琼脂
糖平板法或包埋培养法。
特点是原生质体分布均匀，
利于分裂，容易获得单细胞
株系，可定位观察。原生质
体受热伤害，易破碎，原生
质体始终处于高渗透压胁
迫下，生长发育缓慢，植板
率低。
3、固液双层培养结合液体
浅层培养和固体培养的优
点，在培养皿底部先铺一层
固体培养基，待凝固后再在
其上进行液体浅层培养。固
体培养基中的营养成分可
以被液体层的原生质体吸
收利用，而原生质体产生的
有毒物质可以被固体培养
基吸收。
4、悬滴法培养将含一定密
度原生质体的悬浮液滴在
6cm培养皿盖内侧上，皿底
加入培养液和渗透剂等液
体保湿，此时培养小滴悬挂
在皿盖内。特点：用材少，
培养液消耗少，利于通风与
观察，可做原生质体不同密
度的培养对比试验，进行单
细胞培养。
（二十二）原生质体融合与基因
工程育种的区别：
目前的基因工程，主要局限于单
基因或少数基因控制的性状的
转移，对微效多基因尚无对策，
而一些农作物和经济作物的主要育种目标为高产、稳产、优质与抗逆性，多为多基因控制的性状；加上有些植物的遗传背景还很不清楚，基因工程育种有一定局限性。因此，原生质体融合显示出相对的优越性，是目前的基因工程所无法替代的。
（二十三）原生质体融合方法：
1、自发融合
2、诱发融合（1）NaNO3法，NaNO3
的作用是中和质膜的负电
荷，使原生质体不再相互排
斥，而紧密结合在一起，不
足：诱导频率低（1%）；毒
害作用。
（2）高pH-高钙法
（3）PEG法特点：融
合频率高；可重
复性强；诱发融
合无特异性（植
物＋植物，植物
＋动物，动物＋
酵母）；毒性较低（4）电融合交流电
场使原生质体表
面电荷偶极化，
沿着电极排列，
形成串珠。施加
直流电场后，形
成串珠的原生质
体在质膜接触处
发生穿孔，开始
遗传物质的交
流。
（5）微融合
（二十四）原生质体融合方式1、对称融合也称标准融合，
指两个完整的细胞原生质
体融合。
2、非对称融合指利用物理
或化学方法使某亲本的核
或细胞质失活后再进行融
合。3、配子-体细胞融合
4、亚原生质体-原生质体融合
（二十五）如何获得细胞质杂
种？
1、一个完整的原生质体和一
个去核的原生质体融合
2、一个正常的原生质体和一
个核失活的原生质体融合
3、异核体形成后其中一个核
消失
4、在较晚的时期染色体选择
性消除
（二十六）杂种细胞的筛选方
法：
1、互补选择法利用2个亲本
对培养基、抗代谢物、或温
度等的敏感性存在着天然
的互补性进行选择。如： a，
激素自养型筛选；b，营养
缺陷型突变互补；c，利用
对抗代谢物质的敏感性互
补进行筛选。
2、机械法此法方便，不用对
培养物的生理性状有许多
的了解，适用范围广。如：
a，根据可见标志选择；b，
利用荧光标记物标记进行
选择
（二十七）体细胞杂种的鉴定方
法：
1、形态学比较再生植株与
融合亲本在形态上的异同。
观察的内容主要有株高、株
型、叶片大小、形状、气孔
的大小与多少，花的形状、
大小及颜色。
2、细胞学主要是观察染色
体的核型、染色体的形态差
异和进行染色体计数。
3、遗传标记（1）生化标记
同工酶（2）分子标记
SSR、 RFLP、 RAPD、 AFLP
（二十八）体细胞杂交技术的应
用
1、克服生殖障碍，创造新种质
2、转移有益性状，改良作物品
质
3、转移部分染色体，创造非对
称杂种
4、转移细胞质基因组，创造胞
质杂种
（二十九）病毒区别于其他生物
的主要特征：
1.病毒是个体微小（观察需电
子显微镜，度量尺度为纳米
nm）的分子寄生物，其结构
简单。
2.专性寄生物，其繁殖需寄主
提供原料和场所
（三十）植物病毒的危害：组织
和细胞病变；新陈代谢等生理机
能受到干扰；外观表现不正常状
态。由于危害课通过营养体传给
后代，病毒对寄生植物可造成毁
灭性危害，导致大幅度减产，甚
至全株死亡。世界作物生产中，
病毒危害程度仅次于真菌。
（三十一）植物病毒防治采取的
措施
目前防治植物病毒病的基本策
略是：防重于治和综合防治。
一般采取的措施：
1、选育抗病品种。选育病毒不
能侵入或即使侵入也无法复制
的抗病品种和对病毒感染有较
强适应性的耐病品种。
2、消灭传毒昆虫。利用化学农
药、生物农药或物理诱捕等方法
治虫。
3、用无性繁殖法培育无病毒苗。
利用植物茎尖生长点并结合热
处理（35-40℃）和组织培养的
方法得到无病毒苗。
4、接种弱毒株来保护植物。
5、采用合理的栽培措施。
（三十二）应用植物脱毒技术意义
1、植物脱毒技术可使植
物恢复原来优良特
性，生长势增强，明
显提高产量、改善品
质，产量的提高幅度
最高可达300%。
2、植物脱毒技术不仅脱
毒了病毒，还可以去
除多种真菌、细菌以
及线虫病害，使种性
得以恢复，植株生长
健壮，减少肥料和农
药施用量，降低生产
成本，保护了环境。（三十三）园艺植物脱病毒的方法
1、组织培养
（1）茎尖培养
（2）茎尖微芽嫁接
（STG）脱毒
（3）其他外植体的组
织培养方法脱毒
除茎尖培养外，
还可从花粉、花
药、胚、胚珠及
珠心等组织培养
获得无病毒的植
株。
（4）愈伤组织培养脱
毒将感染病毒
的组织离体培养
获得愈伤组织，
再诱导愈伤组织
分化成苗，从而
获得无病毒害植
株的方法。
2、物理或化学方法
（1）、高温和低温处理
①热处理脱除病毒（a）
高温短时处理法
（b）低热长时处理法
②低温脱病毒
（2）、化学处理
3、热处理与茎尖培养相结
合脱病毒特点：即可缩
短热处理时间，提高植株
成活率，又可剥离较大的
茎尖，提高茎尖培养的成
活率和脱毒率。适用于大
多数植物，并可除去一般
培养难以去除的纺锤块茎
类病毒。
(三十四)脱毒苗鉴定方法
1.直接鉴定法直接观察待测
植株生长状态是否异常，茎叶上
有无特定病毒引起的可见症状，
从而可判断病毒是否存在。
2.指示植物法将一些对病毒
反映敏感，症状特征显著的植物
作为指示植物（indicator
plant）,用以检验待测植物体内
特定病毒的存在。特点：条件简
单，操作方便，经济而有效，只
能测出病毒的相对感染力。包
括：
(1)、草本植物鉴定①小叶嫁
接法指示植物作砧木，被鉴定
植物小叶作接穗，常用劈接法。
②汁叶涂抹法
（2）、木本植物鉴定①直接
在指示植物上嫁接待检植株的
芽片②汁叶涂抹法
③双芽嫁接法
3.抗血清鉴定方法特异性高，
测定速度快，几小时甚至几分钟
就可以完成。植物病毒鉴定中最
有用方法之一。包括: ①叶绿
体凝集法②块茎沉淀法③环
形接口法④酶联免疫法
4.分子生物学鉴定
双链RNA法,通过提取纯化待测
植物RNA，并对其进行电泳分析，
可确定dsRNA存在，从而判断待
检植物是否带病毒。
互补DNA（cDNA）检测法，也叫
DNA分子杂交法。
5.电镜检测法
（三十五）无病毒苗的保存
1、隔离保存
2、长期保存（1）低
温保存（2）冷冻
保存
（三十六）无病毒苗的繁殖方法
1、嫁接繁殖
2、扦插繁殖
3、压条繁殖
4、匍匐茎繁殖
5、微型薯块繁殖
（三十七）遗传标记的类型及各
自特点
1、形态标记即植物的外部形
态特征，主要包括肉眼可见
的外部特征，也包括色素、
生理特性、生殖特性、抗病
虫性等有关的一些特性。特
点：简单直观、经济方便；
但其数量在多数植物中是
很有限的，且多态性较差，
表现易受环境影响，并且有
一些标记与不良性状连锁。
此外形态标记的获得需要
通过诱变、分离纯合的过
程，周期较长。因此，形态
标记在作物遗传育种中的
作用是有限的。
2、细胞学标记即植物染色
体的变异，包括染色体核型
（染色体数目、结构。随体
有无。着丝粒位置等）和带
型（C带、N带、G带等）的
变化。特点：能进行一些重
要基因的染色体或染色体
区域定位。但细胞学标记材
料需要花费较大的人力和
较长的人力和较长时间来
培育，难度很大；同时某些
物种对染色体变异反应敏
感；还有些变异难以用细胞
学方法检测。
3、生化标记主要包括同工
酶和等位酶标记。优点：
一是表现近中性，对植物经
济性状一般没有大的不良
影响；二是直接反映了基因
产物差异，受环境影响小。
缺点：目前可使用的生化标
记数量还相当有限，且有些
酶的染色方法和电泳技术
有一定难度，因此实际应用
受到一定限制。
4、分子标记只能反映生物
个体或种群间基因组中某
种差异特征的DNA片段，它
直接反映基因组DNA间的差
异。优点;①直接以DNA的
形式表现，在生物体的各个
组织、各个发育阶段均可检
测到，不受季节、环境限制，
不存在表达与否等问题。②
数量极多，遍布整基因组，
可检测座位几乎无限。③多
态性高，自然界存在许多等
位变异，无需人为创造。④
表现为中性，不影响目标性
状的表达。⑤许多标记表现
为共显性的特点，能区别纯
合体和杂合体。
（三十八）分子标记常用技术(详细的请见课本或课件) 1、限制性酶切片段长度多态
性（RFLP）
2、随机扩增多态性DNA（RAPD）
3、扩增片段长度多态性
（AFLP）
4、简单重复序列（SSR）
5、原位杂交（GISH或FISH）
6、MRNA差异显示法（mRNA DD）
中国农业大学研究生入学考试复习资料 《生物化学》重点大题 1．简述Chargaff 定律的主要内容。 答案：(1）不同物种生物的DNA 碱基组成不同，而同一生物不同组织、器官的DNA 碱基组成相同。(2）在一个生物个体中，DNA 的碱基组成并不随年龄、营养状况和环境变化而改变。 (3）几乎所有生物的DNA 中，嘌呤碱基的总分子数等于嘧啶碱基的总分子数，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T) 的分子数量相等，鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子数量相等，即A＋G=T＋C。这些重要的结论统称 为Chargaff 定律或碱基当量定律。 2．简述DNA 右手双螺旋结构模型的主要内容。 答案：DNA 右手双螺旋结构模型的主要特点如下： (1）DNA 双螺旋由两条反向平行的多核苷酸链构成，一条链的走向为5′→3′，另一条链的走向为3′→5′;两条链绕同一中心轴一圈一圈上升，呈右手双螺旋。 (2）由脱氧核糖和磷酸构成的骨架位于螺旋外侧，而碱基位于螺旋内侧。 (3）两条链间A 与T 或C 与G 配对形成碱基对平面，碱基对平面与螺旋的虚拟中心轴垂直。 (4）双螺旋每旋转一圈上升的垂直高度为3.4nm(即34?），需要10 个碱基对，螺旋直径是2.0nm。(5）双螺旋表面有两条深浅不同的凹沟，分别称为大沟和小沟。 3．简述DNA 的三级结构。 答案：在原核生物中，共价闭合的环状双螺旋DNA 分子，可再次旋转形成超螺旋，而且天然DNA 中多为负超螺旋。真核生物线粒体、叶绿体DNA 也是环形分子，能形成超螺旋结构。真核细胞核内染色体是DNA 高级结构的主要表现形式，由组蛋白H2A、H2B、H3、H4 各两分子形成组蛋白八聚体，DNA 双螺旋缠绕其上构成核小体，核小体再经多步旋转折叠形成棒状染色体，存在于细胞核中。 4．简述tRNA 的二级结构与功能的关系。 答案：已知的tRNA 都呈现三叶草形的二级结构，基本特征如下：(1）氨基酸臂，由7bp 组成，3′末端有-CCA-OH 结构，与氨基酸在此缩合成氨基酰-tRNA，起到转运氨基酸的作用;(2）二氢尿嘧啶环(DHU、I 环或D 环），由8～12 个核苷酸组成，以含有5，6-二氢尿嘧啶为特征;(3）反密码环，其环中部的三个碱基可与mRNA 的三联体密码子互补配对，在蛋白质合成过程中可把正确的氨基酸引入合成位点;(4)额外环，也叫可变环，通常由3～21 个核苷酸组成;(5)TψC 环，由7 个核苷酸组成环，和tRNA 与核糖体的结合有关。 5．简述真核生物mRNA 3′端polyA 尾巴的作用。 答案：真核生物mRNA 的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴，长约20～300 个腺苷酸。该尾巴与mRNA 由细胞核向细胞质的移动有关，也与mRNA 的半衰期有关;研究发现，polyA 的长短与mRNA 寿命呈正相关，刚合成的mRNA 寿命较长，“老”的mRNA 寿命较短。 6．简述分子杂交的概念及应用。 答案：把不同来源的DNA(RNA）链放在同一溶液中进行热变性处理，退火时，它们之间某些序列互补的区域可以通过氢键重新形成局部的DNA-DNA 或DNA-RNA 双链，这一过程称为分子杂交，生成的双链称杂合双链。DNA 与DNA 的杂交叫做Southern 杂交，DNA 与RNA 杂交叫做Northern 杂交。 核酸杂交已被广泛应用于遗传病的产前诊断、致癌病原体的检测、癌基因的检测和诊断、亲子鉴定和动
《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参
与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是:
蛋白质的高级结构即蛋白质的构象问题。（构型的改变伴随着共价键的短裂和重新形成，构象的改变不需要共价键的短裂和重新形成。） 肽键C-N键介于单键和双键之间，具有部分双键性质，不能自由旋转，其中绝大多数都形成刚性的酰胺平面（由肽键周围的6个原子组成的刚性平面）结构。虽是单键却有双键性质，周边六个原子在同一平面上，前后两个a-carbon在对角(trans) α-螺旋结构的主要特点（P53）： 1）肽链中的酰胺平面绕Cα相继旋转一定角度形成α-螺旋，并盘绕前进。每隔3.6个氨基酸残基，螺旋上升一圈；每圈间距0.54nm，即每个氨基酸残基沿螺旋中心轴上升0.15nm，旋转100°。 2）螺旋体中所有氨基酸残基侧链都伸向外侧；肽链上所有的肽键都参与氢键的形成，链中的全部C=O和N-H几乎都平行于螺旋轴,氢键几乎平行于中心轴; 3）绝大多数天然蛋白质都是右手螺旋。每个氨基酸残基的N-H都与前面第四个残基C=O形成氢键。 侧链在a-螺旋结构中的作用： 4）* α-螺旋遇到Pro就会被中断而拐弯，因为脯氨酸是亚氨基酸。 * R为Gly时，由于Ca上有2个氢，使Ca-C、Ca-N的转动的自由度很大，即刚性很小，所以使螺旋的稳定性大大降低。 * 带相同电荷的氨基酸残基连续出现在肽链上时，螺旋的稳定性降低。 β-折叠是由两条或多条伸展的多肽链靠氢键联结而成的锯齿状片状结构。侧链基团与Cα间的键几乎垂直于折叠平面，R基团交替地分布于片层平面两侧。 ①β-折叠分平行式（N端在同一端。氨基酸之间沿轴相距0.325nm）和反平行式（N端不在同一端。氨基酸之间沿轴相距0.35nm），后者更为稳定。 ②维持β-折叠结构稳定性的力——氢键由一条链上的羰基和另一条链上的氨基之间形成，即氢键是在链与链之间形成的。 β-转角存在于球状蛋白中，β-转角都在蛋白质分子的表面。其特点是肽链回折180°，使得氨基酸残基的C=O和与第四个残基的N-H形成氢键。 无规则卷曲是指没有一定规律的松散肽链结构。酶的功能部位常常处于这种构象区域。无规卷曲常出现在α-螺旋与α-螺旋、α-螺旋与β-折叠、β-折叠与β-折叠之间。它是形成蛋白质三级结构所必需的。 ⑶超二级结构指蛋白质中相邻的二级结构单位(即单个α-螺旋或β-转角、β折叠)组合在一起，形成有规则的在空间上能辩认的二级结构组合体。基本组合形式为αα，βαβ，βββ 结构域指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体，称为结构域（domain）或功能域。结构域之间有一段肽链相连——铰链区；各个结构域可以相似或不相同；结构域一般为酶活性中心 ⑷三级结构指的是多肽链在二级结构、超二级结构和结构域的基础上，主链构象和侧链构象相互作用，进一步盘曲折叠形成球状分子结构。球状蛋白的三级的结构特怔：蛋白质的三级结构具有明显的折叠层次；大多数非极性侧链埋在分子部，形成疏水核；而极性侧链在分子表面，形成亲水面；分子表面往往有一个陷的空隙，它常常是蛋白质的活性中心。 维持三级结构的作用力：二硫键——共价键；（疏水作用，氢键，离子键，德华力）——非共价键（次级键） 肌红蛋白由—条多肽链和一个血红素（heme）辅基构成，分子量为16700，含153个氨基酸残基。血红素能与O2,CO,NO,H2S结合 ⑸四级结构由两条或两条以上具有三级结构的多肽链聚合而成、有特定三维结构的蛋白质构象。每条多肽链又称为亚基。 血红蛋白由四条多肽链形成，是一种寡聚蛋白质。这四条链主要通过非共价键相互作用缔合在一起。血红蛋白分子上有四个氧的结合部位，因为每条链上含有一个血红素辅基。 维持四级结构的作用力：疏水作用，氢键，离子键，德华力 9、蛋白质结构与功能关系 1）一级结构与功能的关系 ①一级结构与细胞进化以细胞色素C为例：细胞色素C广泛存在于真核生物细胞的线粒体中，是一种含有血红素辅基的单链蛋白质。在生物氧化时，细胞色素C在呼吸链的电子传递系统中起传递电子的作用，使血红素上铁原子的价数发生变化。在分子进化过程中，细胞色素C分子中保持氨基酸残基不变的区域称为保守部位。保守部位的氨基酸都是细胞色素C完成其生物学功能所必需的。 ②一级结构变异与分子病所谓分子病是指由于遗传基因突变导致蛋白分子中某些氨基酸残基被更换所造成的一种遗传病。镰刀状细胞贫血病是因病人的红细胞在氧气不足的情况下变形而呈镰刀状。Glu 和Val 分子的侧链在性质上有很大的不同。Glu 侧链带负电荷，而Val侧链是一个非极性基团，所以使得HbS分子表面的负电荷减少，这种变化使患者的血红蛋白容易发生聚集并形成杆状多聚体，这就是导致红细胞变形的原因。
养殖水域生态学复习题 (课程代码222216) 一、名词解释 1.限制因子：。 2.临界氧量： 3.拥挤效应： 4.生态位： 5.水呼吸： 6.赤潮生物： 7.内禀增长率： 8.窒息点： 9.营养级： 10.生态学： 11.生态系统： 12.生态因子： 13.生境： 14.阈： 15.生态幅： 16.指示生物： 17.种群： 18.环境容纳量： 19.生物群落： 20.群落演替： 21.库： 22.积温： 23.有效积温： 24.生物群落： 25.生态平衡： 二、选择题 1.“生态学是研究生物与其环境相互关系的科学”这一生态学定义是由首次___ ____提出 的。 A. Odum E.P. B. Haeckel E. C. Forel D. Tansley 2.水体光照特点之一是透入水层光的光照强度随着水深的增加而_________。A．指数式 递减 B. 指数式递增 C. 不变 D.算术级数递减
3.鱼类和贝类的存活曲线接近于__ _____。 A. B型 B. C型 C. A型 D. 其它型 4.以下呈C型存活曲线的生物是______。A. 熊猫 B. 鲸鱼 C.鲤鱼 D.人 5.以下哪种生物更倾向于K-对策者____ ___。A.轮虫 B.枝角类 C. 桡足类 D. 原 生动物 6.海洋硬骨鱼类对水体溶解盐的适应性调节机制是___ ____。A. 等渗调节 B. 低渗调节 C.高深调节 D.随渗调节 7.淡水硬骨鱼类对水体溶解盐的适应性调节机制是____ ___。A. 等渗调节 B. 低渗调节 C.高深调节 D.随渗调节 8.天然淡水温带湖泊中氧气的主要由___ ___消耗。A.鱼类呼吸 B.逸散入空气 C.底栖生 物呼吸 D.水呼吸 9.林德曼定律生态效率一般是_____ ______。 A. 10% B. 10-20% C. 50% D. 15% 10.两物种间相互作用彼此得利但缺少另一方不能继续生活的种间关系为_____ _____。 A. 互利共生 B. 原始合作 C. 竞争 D. 中性作用 11.个体水平的生物能量学方程一般是指_____ ______。 A. C=P+R+F+U B. PG= PN+RA C. P = PNC +R D. PNC = PG – RA-RH= PN-RH 12.有机物质的分解包括破碎(C)、降解(K)和淋溶(L), 则有机质分解（D）的表达式为 _______ _______。 A. D = KCL B. D = K－C＋L C. D = KC/L D. D = K＋L －C 13."Q10=2-3"所表示的生态学意义符合________。 A. 10%规律 B. Vant Hoff' law C. R.Q. D. 发育温度阈 14.有机物质的分解包括破碎(C)、降解(K)和淋溶(L), 则有机质分解（D）的表达式为 ___________。A. D = KCL B. D=K－C＋L C. D= KC/L D. D = K＋L－C 15.生物多样性可用________________指标而数量化。A.生长曲线 B.种群转变速率C. 香 农—威纳多样性指数 D.能量转换效率 16.____________是水生生物最重要的限制因素 A.水温 B.光照 C.溶氧 D.盐度 17.表示化学耗氧量的是____ __。 A . BOD B. COD C.TOD D.TOC 18.下面不属于水体生态因子中的自然因子的是___________。 A．降水量 B.土壤深度 C.微生物 D.溶解盐 19.以下呈C型存活曲线的生物是______。 A. 熊猫 B. 鲸鱼 C.鲤鱼 D.人 20.被水分子强烈散射的是____ __。 A．红光 B.蓝光 C.紫光 D.黄光
一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键就是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物就是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1,3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中,首先合成的就是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式就是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环,下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH与FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶就是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶就是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶
10、DNA二级结构模型就是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的就是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物就是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号就是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质就是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式就是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质就是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制,下列哪项就是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都就是连续进行的
生物化学考试试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是；组氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸
生物技术大实验 一、核酸凝胶电泳的基本原理是什么？ （1）核酸分子糖—磷酸骨架中的磷酸集团，呈负离子化状态；核酸分子在一定电场强度的电场中，他们会向正极移动。 （2）电泳中使用无反应活性的稳定支持介质，电泳迁移率与与分子摩擦系数成反比。物质在电场作用下的迁移速度叫作电泳的速率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的磨擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。 因此，可在同一凝胶中、一定电场强度下分离出不同分子量大小或相同分子量而构型有差异的核酸分子。 二、CTAB法提取植物总DNA中CTAB的中文名称及其作用原理是什么？ CTAB的全称是十六烷基三甲基溴化铵 基因组DNA的提取包括组织粉碎，细胞膜破坏，蛋白质去除和DNA的沉淀.一般取植物的幼嫩组织，其DNA含量丰富，组织易于破碎。组织破碎方法有很多种，可以研磨，捣碎机捣碎，超低温冷冻使组织细胞间结冰，稍加研磨即可以粉碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。DNA提取缓冲液主要是由对DNA有稳定作用的盐如Tris,EDTA和破坏细胞的试剂SDS或者CTAB组成。蛋白质的去除是用苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入异丙醇或无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，之后用RNase处理去除少量的RNA，即得植物总DNA溶液。 三、SDS-PAGE电泳的基本原理是什么？ SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）是蛋白分析中最经常使用的一种方法，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基磺酸钠），它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠（SDS）以及巯基乙醇一起加热，SDS能断裂分子内和分子间氢键，使蛋白变性，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b 均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 用SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白质的分子量和纯度。在4%浓缩胶和12%分离胶上，以标准分子量蛋白（Protein Marker,High 29-205 kDa）为对照，电泳分离。经考马斯亮蓝-R250染色和脱色液脱色后，比较样品与标准分子量蛋白的迁移率，确定蛋白质的分子量及酶制剂纯度。 四、RNA提取过程中的注意事项有哪些？ RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶，所以RNA从细胞中释放出来时不被降解。细胞裂解后，除了RNA，还有DNA、蛋白质和细胞碎片，通过酚、氯仿等有机溶剂处理得到纯化、均一的总RNA。 注意事项 1. 从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml 是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。 2. 匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有 20 种，一般可根据氨基酸侧链（R）的 大小分为非极性侧链氨基酸和极性侧 链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有 疏水性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有亲水 性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两3种，它们分别是赖氨 基酸和精。组氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是天冬 氨基酸和谷氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋 白质分子中含有苯丙氨基酸、酪氨基酸或 色氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是－OH ；半胱氨酸的侧链基团是－SH ；组氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是氨基，除脯氨酸以外反应产物 的颜色是蓝紫色；因为脯氨酸是 —亚氨基酸，它与水合印三酮的反 应则显示黄色。 5．蛋白质结构中主键称为肽键，次级键有、 、
氢键疏水键、范德华力、二硫键；次级键中属于共价键的是二硫键键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 谷氨酸被缬氨酸所替代，前一种氨基酸为极性侧链氨基酸，后者为非极性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是异硫氰酸苯酯；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是从N-端依次对氨基酸进行分析鉴定。 8．蛋白质二级结构的基本类型有α-螺旋、、β-折叠β转角无规卷曲 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为氢 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与氨基酸种类数目排列次序、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的αa-螺旋往往会中断。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是分子表面有水化膜同性电荷斥力 和。
生物化学习题集 生物化学教研室 二〇〇八年三月
生物化学习题 第一章核酸的结构和功能 一、选择题 1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性，条件之一是（） A、骤然冷却 B、缓慢冷却 C、浓缩 D、加入浓的无机盐 2、在适宜条件下，核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋，取决于（） A、DNA的Tm值 B、序列的重复程度 C、核酸链的长短 D、碱基序列的互补 3、核酸中核苷酸之间的连接方式是：（） A、2’，5’—磷酸二酯键 B、氢键 C、3’，5’—磷酸二酯键 D、糖苷键 4、tRNA的分子结构特征是：（） A、有反密码环和 3’—端有—CCA序列 B、有密码环 C、有反密码环和5’—端有—CCA序列 D、5’—端有—CCA序列 5、下列关于DNA分子中的碱基组成的定量关系哪个是不正确的？（） A、C+A=G+T B、C=G C、A=T D、C+G=A+T 6、下面关于Watson-Crick DNA双螺旋结构模型的叙述中哪一项是正确的？（） A、两条单链的走向是反平行的 B、碱基A和G配对 C、碱基之间共价结合 D、磷酸戊糖主链位于双螺旋侧 7、具5’－CpGpGpTpAp-3’顺序的单链DNA能与下列哪种RNA杂交?（） A、5’-GpCpCpAp-3’ B、5’-GpCpCpApUp-3’ C、5’-UpApCpCpGp-3’ D、5’-TpApCpCpGp-3’ 8、RNA和DNA彻底水解后的产物（） A、核糖相同，部分碱基不同 B、碱基相同，核糖不同 C、碱基不同，核糖不同 D、碱基不同，核糖相同 9、下列关于mRNA描述哪项是错误的？（） A、原核细胞的mRNA在翻译开始前需加“PolyA”尾巴。 B、真核细胞mRNA在 3’端有特殊的“尾巴”结构 C、真核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构 10、tRNA的三级结构是（） A、三叶草叶形结构 B、倒L形结构 C、双螺旋结构 D、发夹结构 11、维系DNA双螺旋稳定的最主要的力是（） A、氢键 B、离子键 C、碱基堆积力 D德华力 12、下列关于DNA的双螺旋二级结构稳定的因素中哪一项是不正确的？（） A、3'，5'－磷酸二酯键 C、互补碱基对之间的氢键 B、碱基堆积力 D、磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的离子键 13、Tm是指( )的温度 A、双螺旋DNA达到完全变性时 B、双螺旋DNA开始变性时 C、双螺旋DNA结构失去1/2时 D、双螺旋结构失去1/4时
1999年 1、简述5种哈尔滨引种并应用的园林树木新品种，简述其观赏特性。 2、组培在花卉园艺上的应用。 3、百合的形态特征，繁殖方式及其应用。 4、园林树木在保护和改善环境方面的作用。 5、豆科植物的主要形态特征，以本科中你认为最有观赏价值的树种为例，说明其观赏主要分布区。 2000年 1、运用花卉学原理说明“催百花于片刻，具四时于一时”的含义。 2、无土栽培优缺点，常见基质及选用基质的原则。 3、花卉浇水和施肥原则。 4、常见的鲜切花，选一种论述其年生产周期。 5、蔷薇科主要形态特征，四亚科区别。 2001年 1、举例说明研究花芽分化的意义。 2、一年生陆地草花的定植，及注意问题。 3、花卉与光照的关系。 4、简述植物配置原则。孤植树种植地点、孤植树的选择要求。10种适宜孤植树，注明科属。 5、综合论述园林树木在城市绿化和园林应用中的作用。 2002年 1、园林树木在保护和改善环境方面的突出作用。 2、简述植物配置基本原则。 3、孤赏树、庭荫树、行道树选择要求和种植方式。根据你所在地区各选2种，描述其形态特征。 4、堆肥土、腐叶土的制备方法。 5、城市园林绿化中大面积使用草坪的利与弊。 6、铲地与松土的作用。 7、魔纹花坛中常用的花卉，注明科属。 8、以百合为例，论述扦插繁殖中材料的选择、处理、及环境条件的控制对扦插效果的影响。 9、温室盆栽花卉的日常管理与养护。 2003年 1、举例说明花卉与温度的关系。 2、在植物造景中如何体现环境的美化功能。 3、蔷薇科四亚科主要区别。 4、5种花果具佳的树种，分别论述观赏特征，生态习性，适用范围。 5、指出下列植物应用的合理及不合理之处，并说明理由。哈尔滨的某个小区绿化： A园景树：旱柳、雪松、樟子松、银中杨、枫香 B藤本：山葡萄、常春藤、紫藤 C地被：沙地柏、沿阶草、芡实 D绿篱：大叶黄杨、水蜡树、小叶黄杨、家榆 E草坪：早熟禾、三叶草、连钱草 F水生：紫花地丁、香蒲、百日草、燕子花 2004年 1、樟树、榉树、广玉兰、紫薇、白桦、桑树、雪松的生态习性和观赏特性。 2、下列园林树木属间主要形态区别。 A溲疏属、山梅花B槐、刺槐C云杉、冷杉D臭椿、香椿 3、选5种以我国为分布中心的名贵花木，说明科属及分布范围。 4、在哈尔滨一居住区的园林绿化设计中，拟创造季相变化鲜明、三季有花四季有景的植物景观，选择的雪松、红 皮云杉、垂柳、桑树做园景树，锦带花、木槿、华北连翘、榆叶梅作为观花灌木，南蛇藤、紫藤、葛藤做垂直绿化材料，请对该配置做出评价。并提出你的树种选择方案。 5、郁金香露地栽培时的管理要点。
a low figure 小数目workers on low incomes 低收入工人 The simplest way to succeed in business is to buy low and sell high. 生意成功最简单的途径就是贱买贵卖。 The value of the pound has fallen to a new low against the dollar. 英镑兑换美元的比值已跌到新的（最）低点。 ?We sell cheap quality goods. 我们销售物美价廉商品。 ?We have made you an offer at a very competitive price. ?我方已按很低的价格向贵方报盘。 ?You will find our prices for these goods very popular. 贵方将会看出我方此批货物的价格是很便宜的。 1. He gets a 10% commission on everything he sells 他每卖一件商品得百分之十的佣金 2. Party B is commissioned by the manufacturers to buy steel plates. 乙方受制造厂家的委托购买钢板。 1. Those who come early to the sale get first choice. 这次大贱卖，早到的顾客可优先选购。 Our products are manufactured from the choice grades of material and will satisfy you in every respect 我方产品均用上等材料制成，因此，在各方面都会使贵方满意。 The company has raised its joint venture equity to 70% to gain management control, which has tripled its initial investment and is now expanding its product range and manufacturing capacity to meet growing demands equity 通常指“公正，公平”的意思，而在金融市场上指的是企业资产中所占的股份。 initial investment是商贸中常用的术语，通常译为“先期投资”或“预付款”，而不是“一开始的投资”。 公司将其在合资企业的股份增至70%，以获得管理控制权，这使其先期投资增加了两倍，而且现在正在扩大产品范围和生产能力来满足不断增长的需求。 The CFO was accused of falsifying the company accounts. 财务总监被控伪造公司账目。 She works in accounts. The newly established company opened an account in HSBC. 这个新成立的公司在汇丰银行开立了账户。 These days, the U.S. economy isn’t “graduating enough scientists to fill the need of the coming decades,” says Charles C. Leighton, “That’s a real concern.” 近来，美国在经济发展过程中“未培养出足够的科学家来满足今后几十年发展的需要，”查尔斯·C·莱顿说，“这才是真正需要关注的问题。” （graduate 由“毕业”转化为“培养”。） The factors which are likely to influence investment spending do not stop here. 可能影响投资开支的因素并不止这些。 （do not stop here由“不停留在这里”转化为“并不止这些”。 Our products, if maintained properly and regularly, can at least see twenty years’ service. 我们的产品如果适当地定期检修，至少可以使用二十年。 The huge increase in oil prices in the 1970s cast a cloud over the development plans of many developing nations.
蛋白质 一、填空R （1）氨基酸的结构通式为H2N-C-COOH 。 （2）组成蛋白质分子的碱性氨基酸有赖氨酸、组氨酸、精氨酸，酸性氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸。 （3）氨基酸的等电点pI是指氨基酸所带净电荷为零时溶液的pH值。 （4）蛋白质的常见结构有α-螺旋β-折叠β-转角和无规卷曲。 （5）SDS-PAGE纯化分离蛋白质是根据各种蛋白质分子量大小不同。 （6）氨基酸在等电点时主要以两性离子形式存在，在pH>pI时的溶液中，大部分以__阴_离子形式存在，在pH DNA的熔解温度：双链DNA或RNA分子丧失半数双螺旋结构时的温度。 增色效应：由于DNA变性引起的光吸收增加称增色效应,也就是变性后DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。 减色效应：若变性DNA复性形成双螺旋结构后，其260nm紫外吸收会降低,这种现象叫减色效应。 蛋白质变性：是指蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，这种现象称为蛋白质变性。 氧化磷酸化：是物质在体内氧化时释放的能量供给ADP与无机磷合成ATP的偶联反应。能荷：细胞内的能量状态取决于ATP、ADP及AMP的相对浓度。 基因：是遗传的物质基础，是DNA或RNA分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列。 基因组：单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组，或是单倍体细胞中的全部基因为一个基因组。 比活力：每毫克的蛋白质所具有活力的单位数。 葡萄糖异生作用：由非糖前体物质合成葡萄糖的过程。 诱导契合学说：为说明底物与酶结合的特性，在锁钥学说的基础上提出的一种学说。底物与酶活性部位结合，会引起酶发生构象变化，使两者相互契合，从而发挥催化功能。 填空 核酸的*体核苷酸通过3’,5’-磷酸二脂键连接 蛋白质的单体氨基酸通过肽链连接 核酸最大吸收波长260nm蛋白质最大吸收波长280nm 酶的两大特性专一性即底物选择性和高效性 异生生物ATP产生的两大途径:底物水平磷酸化和氧化磷酸化 tRNA二级结构是三叶草型，三级结构是倒L型 选择 在生理PH条件下，下列哪种氨基酸带正电荷（赖氨酸） **结构的顺序5’-5’ tRNA末端（CCA序列） Rx米氏常数（是酶的特征常数） 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制是（竞争性抑制） 非竞争性抑制使（Vmax降低，Km不变） 下列哪种物质不含高能磷酸键（G-G-P） 螺旋结构常在哪里被破坏？（脯氨酸） 判断 20中氨基酸中只有甘氨酸不是L型，且都有*先性T DNA双链总的G+C占有量与个单链的G+C含量相同T 所有蛋白质中N含量都是16% F DNA中，G+C含量越高，Tm越高，Tm与G+C含量成正比F 电子传递方向是由高电位传向低电位F 糖酵解和*酸戊糖途径都发生在细胞质中 T 中国海洋大学2007-2008学年第2学期期末考试试卷 共 4 页第 2 页三、指令正误判断，对正确指令写出源操作数、目的操作数的寻址方式，对错误指令指出原因（设VAR1, VAR2为字变量, L1为标号）（20分）（1）MOV SI，120 （2）MOV AX, [BX] （3）MOV BP, AL （4）MOV CS, BX （5）MOV [BX][SI], 3 （6）ADD AX, LENGTH VAR1 （7）SUB [DI], 99H （8）PUSH 200H （9）XCHG AX, ES （10）JMP L1+5 四、分析下列程序，回答问题。（共10分） 1．MOV AX，50 MOV CX，5 LOP：SUB AX，CX LOOP LOP MOV BUF，AX HLT 上述程序段执行后，[BUF]＝? 2．MOV CL，3 MOV BX，0B7H ROL BX，1 ROR BX，CL 执行上述程序段后BX的内容是。 3．STRING DB ‘A VBNDGH!234%Y*’ COUNT DW ？ ……… MOV BX，OFFSET STRING MOV CX，0 LOP：MOV AL，[BX] CMP AL，‘*’ JE DONE INC CX INC BX JMP LOP DONE：MOV COUNT，CX HLT 上述程序段的功能是。 共 4 页第 4 页 六、按下图叙述8086最小模式下的读周期时序。要求：以T1、T2、T3、T4状态为叙述顺序，且在此4个状态下某引脚上信号变化的话，必须在叙述中解释该引脚的变化。（15分） 一、绪论 1、何谓藻类,藻类包括哪些类群? 藻类是无胚而具叶绿素的自养叶状体孢子植物。包括哪些类群：细菌、藻类、粘菌、真菌、地衣。 2、藻类的色素组成特点是什么? 1)叶绿素：所有藻类都具有叶绿素a；绿藻、裸藻具叶绿素b； 甲藻、隐藻、黄藻、金藻、硅藻、褐藻具叶绿素C。 2)β-胡萝卜素：是所有藻类都具有。 3)叶黄素：种类相当多,如金藻、黄藻门含叶黄素,呈黄色。 4)藻胆素: 藻蓝素；蓝藻呈蓝绿色；藻红素：蓝藻门有藻红素呈红色。 5)褐藻素：海带因有褐藻素故成褐色。 3、试述藻类与人类生活的关系。 1）为鱼类的直接或间接饵料 2）初级生产者，制造有机物，大气中氧的主要来源 3）固氮作用：1.7亿吨/年 4）人类食品：螺旋藻、紫菜、海带、浒苔 5）地质指标 6）污染的指示生物，判断水体的水质 7）净化水体 8）利用藻类发电 9）工业原料；医学上 10）作为转基因载体 二、硅藻门 1、硅藻门有何特征？试叙述其细胞壁结构 特征：a、硅藻门的细胞壁无色透明，外层为硅质，内层为果胶质，壁上具有排列规则的花纹。b、有些种类细胞壁上具有纵沟。c、有些种类还具有节间带。d、硅藻细胞表面有向外伸展的多种多样的突物，有突起、刺、毛、胶质线等。 细胞壁结构：硅藻细胞壁由于高度硅质化而成为坚硬的壳体，像一个盒子。套在外面的较大的，为上壳，相当于盒盖；套在里面较小的，为下壳，相当于盒底。上下壳并非紧密相连，而是相互套合。上壳和下壳都不是整块的，皆有壳面和相连带两部分组成。壳面平或略呈凹凸状，壳面向相连带转弯部分叫壳套；与壳套相连，和壳面垂直的部分，叫相连带；上壳相连带和下壳相连带相连接的部分叫连接带。 2、说明硅藻个纲各目的特征和常见种类。 3、硅藻有何价值？ 1）、硅藻一年四季都能形成优势种群，是海洋浮游植物的主要组成部分，被称为海洋牧草，是海洋初级生产力的一个重要指标。 2）、在贝类的饵料中，硅藻占首要地位；对虾的幼体也以硅藻为主要摄食对象。毛虾的全年食物中，硅藻占54%，其它沙丁鱼等幼鱼也以硅藻为主要食物。可见，海洋经济动物产量的高低与硅藻的数量有着密切的关系。 3）、硅藻死后硅质外壳，含85.2%的氧化硅。工业上用广泛，可作为建筑、磨光等材料，过滤剂、吸附剂、造纸、橡胶、化妆品和涂料的填充剂，以及保温材料等。 4）、海洋环境受到富营养污染或其它原因，常使某些硅藻如骨条藻、菱形藻、盒形藻、角毛藻、根管藻、海链藻等生殖过盛，形成赤潮。 甲藻门 1、甲藻门的有何特征？ 色素：甲藻素，多甲藻素；色素体：多个盘状、棒状、带状或片状.海南大学生物化学重点
中国海洋大学 2007-2008学年 第2学期 期末考试试卷
海大浮游生物考试大题
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