详细版实验一--质粒DNA的提取.ppt

质粒的提取

实验一质粒提取

实验一 质粒提取

1.菌液OD值越高，质粒产量越高2.大肠杆菌OD值越高，提取的质粒的浓度就越高吗？？？还要看质粒纯度，纯度一般在1.8-1.9最适合，再高了就是蛋白污染3.一般而言gene导入原核细胞称转化，导入真核细胞称转染。4.用QIANGEN质粒提取试剂盒提取质粒，我没有提不出来的经历，有以下几点要注意，从细胞、试剂盒及操作三个方面考虑：1..确定细菌是阳性转化子，应

实验一、质粒DNA的提取及检测【实验目的】1、掌握碱裂解法提取质粒的原理和步骤2、掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术3、学会PCR操作的基本技术第一部分质粒DNA的提取一、实验原理：碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0～12.5这个狭窄的范围内，线性的DNA双螺旋结构解开而被变性

操作步骤：本实验方法适用于从1-10ml过夜培养的大肠杆菌菌液中提取质粒。提取量受菌株、质粒拷贝数、菌液体积和培养时间、培养基类型等因素的综合影响。1.收菌：将过夜培养（37℃，12-16小时）的菌液于室温≧10,000g离心1-2分钟，彻底弃除上清。注意：高拷贝质粒建议使用≦5ml菌液；菌液用量过大不仅不能增加质粒产量，反而会因裂解不完全或杂质封闭硅胶膜而

1.菌液OD值越高，质粒产量越高2.大肠杆菌OD值越高，提取的质粒的浓度就越高吗还要看质粒纯度，纯度一般在1.8-1.9最适合，再高了就是蛋白污染3.一般而言gene 导入原核细胞称转化，导入真核细胞称转染。4.用QIANGEN质粒提取试剂盒提取质粒，我没有提不出来的经历，有以下几点要注意，从细胞、试剂盒及操作三个方面考虑：1..确定细菌是阳性转化子，应该含

质粒dna的提取实验报告思考题篇一：质粒DNA的提取及其琼脂糖凝胶电泳实验报告及思考题1．实验目的：（1）通过本次实验学习和掌握碱裂解法提取质粒；（2）通过本次实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术；2．实验材料及用品（1）实验仪器（apparatus）：恒温培养箱（Constant temperature incubator）、恒温摇床（Consta

分子生物学实验报告题目：质粒DNA的提取、纯化与鉴定姓名：学号：班级：时间：一、实验目的：1.学习并掌握凝胶电泳进行DNA的分离纯化的实验原理。2.学习并掌握凝胶的制备及电泳方法。3.学习并掌握凝胶中DNA的分离纯化方法。4.掌握碱变性提取发的原理及各种试剂的作用。5.掌握碱变性法提取质粒DNA的方法。二、实验原理：1.质粒DNA的提取——碱变性提取法：提取

质粒提取试剂的原理碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的

碱裂解法抽提质粒原理溶液I，50 mM葡萄糖/25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；（溶菌酶：使细胞壁裂解；RNase：将裂解完的RNA去除，防止RNA污染）溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3M醋酸钾/ 2 M醋酸。溶液I的作用：①任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH

实验六质粒DNA的提取一、实验目的通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒二、实验原理质粒(Plasmid)是独立于染色体外的，能自主复制且稳定遗传的遗传因子。它是一种环状的双链DNA分子，存在于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中，在细菌细胞中最多。本实验利用SDS碱裂解法提取质粒DNA。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，会使细胞壁破裂，染色体D

小提质粒实验方案及详细步骤（详细整理）二、普通省钱提质粒方法：12

质粒提取实验

实验六、大肠杆菌质粒DNA的提取与电泳检测

实验一 质粒的提取和琼脂糖

实验一 质粒DNA的提取

实验三质粒的抽提大肠杆菌的扩繁及质粒DNA的碱裂解法抽提挑取筛选平板上的一个白色菌落，接种到5ml LB液体培养基(含50 μg/ml Kana)中，37℃振荡培养约12小时至对数生长后期（OD600=0.6-0.8）↓向吸附柱CP3中（吸附柱放入收集管中）加入500 μl的平衡液BL，12,000 rpm 离心1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放

质粒的提取与纯化