分析方法验证、确认和转移

类别Ⅳ—鉴别测试
分析方法验证-------常规要求
USP：在验证开始阶段将待验证的目的清晰的 表述出来是十分必要的
ICH：分析方法的目标应能很清晰地被理解， 因为它将主导那些验证参数被评估
分析方法验证-------常规要求
Example： 1.原料药XXX的新生产工艺已被开发，本方法
是针对原料A色谱纯度测定的HPLC方法， 在供应商相关HPLC方法的基础上开发。本 HPLC方法验证按照ICH Q2B指南进行。
检验规程
---检验规程应包含充分的细节及明确的指导，使 得经过培训的分析员能够毫无困难的执行
---应由明确规定重复次数以及进样顺序 ---如果有完整或者部分验证数据，此信息应提供
给接收方，包括任何检测相关的技术细节
设施和仪器
---接收方应确保设施和仪器经过恰当的校验和确 认，并确认实验室系统符合相关的法规和内部 实验室通则的要求
---这种方式更费时，更难发现存在于两个不同实 验室、操作人员及仪器间的差异
---不能保证实验室间测试方法的等效性
转移免除
接收方实验室能在不进行跨实验室比较测试的情 况下使用检测方法 何时使用： ---新产品配方与现有产品类似，且接收方已有这
样的分析经验 ---转移的方法与现在已使用的方法相同或类似 ---负责产品开发、验证或日常分析的转移方人员
性能参数----线性
线性方程：Y=a+kx a---Y轴截距：背景干扰(≤标准溶液响应值的n%) k---斜率 r2---线性相关系数 回归线的离均差平方和
SStotal=SSexplained+SSunexplained
r2=SSexplained/SStotal
性能参数----线性
药物X中有关物质测定 目的：检测含量在0.05%—2%的各种杂质 样品：药物X用流动相配制成1mg/mL 对照溶液：药物X用流动相配制成
Summary
执行一个新方法
验证？ Yes
NO <1225>
验证
是否药典方
NO
法？
Yes
<1224> 转移
<1226> 确认
Thank you for your attention!
0.002mg/mL(0.2%)
接受标准：相关性r2≥0.999 Y轴截距≤标准溶液响应值的20%
性能参数----线性
药物X杂质水平的线性原始数据
杂质水平(%)浓度(ug/mL)
2.0
20.363
1.0
10.182
0.5
5.091
0.2
2.036
0.1
1.018
0.08
0.814
0.05
0.509
峰面积 21797 10340 4890 1863
---培训依据开发的阶段、方法的复杂程度以及对 于相关仪器的经验
---涵盖尽可能多的检验程序相关的技术项目包括 安全事项和方法的注意事项
---对培训和分析员的确认进行记录
方案
---在分析方法转移执行前应讨论、商定并起草精 心设计的方案
---方案至少应包括以下内容： 1.范围 2.转移方和接收方的职责与责任 3.检验规程 4.实验设计和接受标准
比较测试---数据评估
---观察所有产生的数据： 确保数据符合可接受标准 确保在各实验室之间的偏差和平均值相符并和 以往的经验符合 确保没有偏移
比较测试---数据评估
---常用的用于设定可接收标准的统计学参数： T-test F-test ANOVA(单因素方差分析) f2(溶出度) RSD
共同验证
USP分析方法的验证、确认和转移
一. 分析方法验证、确认和转移的定义 二. 分析方法验证 三. 分析方法确认 四. 分析方法转移 五. 总结
验证、确认和转移的定义
验证：
USP<1225>:分析方法验证是一个按照已建立的实验室研究来证 明方法的性能参数符合期望的分析应用要求的过程
ICH Q2(R1):分析方法验证的目标是阐明分析方法适用于它所期 望的应用目的
S,LOD
---
S
Gel Electro ---
S,LOQ
S,LOD
---
S
P-Precision；S-Specificity；L-Linearity；LOD-检测限；LOQ-定量限
精密度
专属性
线性
确认过程
没有通用的确认方案
确认
按所写的进 行测试
全验证
分析方法转移
什么时候需要进行方法转移？
---研发实验室至QC实验室 ---A场地至B场地(同一公司内部或不同公司之间) ---QC实验室至合同实验室 ---A仪器至B仪器 到目前为止还没有官方发布的关于分析方法转移
885 633 261
性能参数----线性
性能参数----线性
线性数据是否达到预设标准？预设标准是否合 适？ 相关系数R² = 0.9994＞0.999 Y-截距：355.49＜（1863×20%=373）
性能参数----线性
杂质水平(%) 浓度(ug/mL) 峰面积 %VS standard F值 F值RSD(%) 2.0 20.363 21797 117 9.34E-04 1.0 10.182 10340 111 9.85E-04 0.5 5.091 4890 105 1.04E-03 0.2 2.036 1863 100 1.09E-03 28.9 0.1 1.018 885 95 1.15E-03 0.08 0.814 633 85 1.29E-03 0.05 0.509 261 56 1.95E-03
<1224>将非法定方法从一个实验室转移至另一个实验室，即为分 析方法转移 通常不适用于法定方法，但可以参考
USP分析方法种类
类别Ⅰ—用于原料药中主要成分或药物制剂中 活性成分(包括防腐剂)定量测试
类别Ⅱ—用于原料药中杂质或制剂中降解成分 定量和限度测试
类别Ⅲ—用于性能参数测试 (如：溶出度、释 放度)
方法种类 类别I
类别Ⅱ
定量
限度
类别Ⅲ
类别Ⅳ
HPLC/GC
P
P,S,LOQ
S,LOD
---
S
Spectro.or colorimet
P
P,LOQ
S,LOD
---
S
Titration
P
P
---
Hale Waihona Puke Baidu---
---
TLC
---
S,LOQ
S,LOD
---
S
Gel Electro ---
S,LOQ
S,LOD
---
S
P-Precision；S-Specificity；L-Linearity；LOD-检测限；LOQ-定量限
---一个经过精心设计的系统适用性测试能帮助发 现仪器的问题
样品和标准品
---尽量使用法定标准品 ---当涉及的实验室处于不同地理区域，标准品尤
其关键
转移报告
当分析方法转移完成后，接收方应起草方法转移 报告，报告要包含获得结果和可接收标准的对比 以及确认接收方是否适合来运行此方法的结论
---两个实验室的数据应一致 ---两组数据应同方案中的可接受标准进行比较 ---包含任何对于方案的修正和偏差，以及这些变化发生的原因和影响 ---应由转移方和接收方共同批准
精密度
专属性
线性
针对制剂产品进行确认的数据要求 (包括但不限于以下项目)
方法种类 类别I
类别Ⅱ
定量
限度
类别Ⅲ
类别Ⅳ
HPLC/GC
P,S,L
P,S,LOQ
S,LOD
P
S
Spectro.or colorimet
P,L
P,LOQ
S,LOD
P
S
Titration
P,L
P
---
---
---
TLC
---
S,LOQ
调职于接收方
总结：转移
方法转移
Yes 已验 证？
NO
有接收方 吗？
Yes 共同验证
能转移免 除吗？
NO
能用比较 测试吗？
NO
重验证
Yes Yes
转移免除 比较测试
方法转移要素
---培训 ---方案 ---检验规程 ---设施和仪器 ---样品和标准品 ---转移报告
培训
---转移方应对接收方提供培训，或者接收方须在 转移方案批准前进行预实验来发现可能需要解 决的问题
FDA 工业指南：方法验证是一个阐述分析方法适合于其使用目的 的过程
SFDA(验证)：证明任何操作规程(或方法)，生产工艺或系统能够 达到预期结果的一系列活动
验证、确认和转移的定义
确认：
<1225>:USP-NF所收载方法的使用者不需要验证这些方法的准 确性和可靠性，但需要确认这些方法在实际使用条件下的适应性 <1225>:简而言之：是相关数据而不是重复验证过程 <1226>:确认包括所涉及方法的性能参数，如那些在本章节中描 述的 FDA：出现在USP中的方法被认为已验证，如果作为已批准的
性能参数----线性
线性/准确度---在0.5-2%范围，应在± n% 或F值RSD ≤n% 响应因子F对浓度 C作图
性能参数----系统适用性
相对标准偏差(RSD) 标准溶液的重复进样 系统重复性的评价 ---对于要求不超过2.0%的，测试物进样5次 ---对于要求大于2.0%的，测试物进样6次 ---对于主药成分在1.0—2.0% ---有关物质在5.0—15.0%
的指导原则
转移方式
方法转移
比较测试
共同验证
验证/重验 证
转移免除
比较测试
---目的：表明验证过的方法在两个或更多实验室 使用的一致性
---比较测试是最常用的方法转移方式 ---用已验证过的方法进行 ---不需要挑战所有验证参数；是比较性研究 ---两个实验室检测相同的样品(集)：
1.选择有良好批均匀性的样品 2.确保样品在所有实验室都在预定的时间范围内得到检验 3.对于用于降解研究的方法，使用含有在定量限或更高水平杂质的样品
ANDA的一部分，它们也被认为是验证过的 对于法定方法，厂家必须阐明该方法在实际使用情况下的状态
验证、确认和转移的定义
转移：
<1224>:方法转移是一个文件化的过程，用于确定一个实验室(接 收方)有能力使用来源于另一个实验室(转移方)的分析方法，由 此保证接收方有知识和能力来应用该分析方法，以达到预期的 效果
2.为验证原料A中残留溶剂(丙酮,二氯甲烷,甲 醇)检验方法的准确性和可靠性，依据ICH 指导原则，制定本方案。
分析方法验证-------常规要求
验证实施所需的条件应明确提出 Example：液相测定 仪器、设备 试剂 对照品 色谱条件
验证方案
验证方案包括： 使用目的和分析方法描述 涉及的性能参数列表 适当的接受标准 源于法规要求的复核和批准人签名
验证方案
起草一个适合的验证方案，应考虑： 分析方法的目的 性能参数列表的选择 基于以下方面考虑的适当的接受标准 ---使用目的(定性/定量) ---历史要求 ---来自研发部门针对QC/法定方法进行的 预验证数据
验证方案----性能参数
典型的性能参数包括：
●专属性 ●检测限 ●定量限 ●线性 ●范围 ●准确度 ●精密度(重复性、中间精密度、重现性) ●耐用性 ●系统适用性
如果不能符合可接受标准，应启动调查来确定失 败的原因
方法转移的程序
差异分析
Summary
<1225>分析方法验证：分析方法用于非药典物 质或使用替代方法测试药典物质
<1226>分析方法确认：第一次使用USP方法测 定药典物质需进行方法确认
<1224>分析方法转移：将非法定方法从一个实 验室转移至另一个试验室
---接收方作为验证团队的一员，参加转移方的实 验室间共同验证
---当方法未被完全验证时 ---通则<1225>法定方法验证提供了指导，以说
明哪些参数适合用于验证测试 ---接收方实验室的验证数据将包含在方法验证报
告中作为方法转移的证据
重验证
---接收方重复部分或全部验证试验来挑战适用的 验证性能参数
分析方法确认
USP<1226>: 验证：使用确定好的样品对分析方法进行挑战 确认：使用确定的方法对试验环境进行挑战，包
括以下因素： ----分析员 ----设备 ----试剂 ----其他因素 常规测试一般不需要确认(水分、重金属、炽灼残渣等)
针对原料药和辅料进行确认的数据要求 (包括但不限于以下项目)